A oxidao de um resduo de cistina com cido perfrmico produz dois resduos de cido cistico.

A reduo por ditiotreitol para formar resduos de Cys deve ser seguida por modificao posterior dos grupos-SH reativos para prevenir a reformao da ligao dissulfeto. A acetilao pelo iodoacetato serve a esse propsito. A reduo pelo DTT tem por objetivo romper as ligaes dissulfeto que so formadas pelo grupo sulfidrila (-SH) de cada um de dois resduos de cistena. Ao romper esta ligao, o DTT, como agente redutor, acrescenta um hidrognio valncia livre do tomo de enxofre alterando a estrutura terciria da glicoprotena para uma forma mais linear6. A estabilizao desta estrutura linear resultante da glicoprotena, obtida pela insero de um grupamento alquil quando em reao com IAA. Tripsina cliva Lys os ons Y (carga do fragmento localizado no C-terminal) e ons B (carga do fragmento localizado no N-terminal)