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UNIVERSIDADE FERDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE CENTRO DE CINCIAS DA SADE DEPARTAMENTO DE ANLISES CLNICAS E TOXICOLGICAS

DOSCENTE: DR. ALINE SCHWARZ

MYLENA MYLANA FREIRE DA CUNHA

Cereus jamacaru:

Reino: Plantae Filo: Magnoliophyta Classe: Magnoliopsida Subclasse: Caryophyllidae Ordem: Caryophyllales Famlia: Cactaceae Subfamlia: Cactoideae Tribo: Cereeae Gnero: Cereus Espcie: C. jamacaru

Figura 01: Cereus jamacaru D.C., detalhe tronco e claddios. Fonte: http://bsaudernontemehoje.blogspot.com.br /p/bos-saude-flora-e-fauna.html, acesso em julho/2012.

Figura 02: Cereus jamacaru D.C., detalhe dos frutos. Fonte: http://bsaudernontemehoje.blogspot.com.br /p/bos-saude-flora-e-fauna.html, acesso em julho/2012.

Figura 03: Cereus jamacaru D.C., detalhe da flor. Fonte: http://bsaudernontemehoje.blogspot.com.br /p/bos-saude-flora-e-fauna.html, acesso em julho/2012.

Figura 04: Cereus jamacaru D.C., detalhe dos espinhos. Fonte: http://sitiocarneiro.blogspot.com.br/2011/07/mandacaru.html, acesso em julho/2012.

Avaliar o desenvolvimento fsico, reflexolgico e neurocomportamental de filhotes de ratas expostas ao extrato de C. jamacaru.

Material Vegetal:
Coleta feita em campo no municpio de So Vicente, no Rio Grande do Norte; Preparo - Foram retirados os espinhos e em seguida a planta foi picada e por sete dias foi mantida em estufa de ar circulante para prover a perda de toda a umidade; Em seguida foi triturado e mantido sobre abrigo de luz ; Esta fase durou 3 dias.

Obteno do extrato:
Aps coleta e preparo do material foi adicionado etanol 96 GL e mantido em macerao por sete dias; Proporo de 30 g da planta seca triturada para 100 mL de etanol; Agitao duas vezes ao dia; O macerado foi filtrado em papel de filtro, obtendo-se uma soluo me na concentrao de 30%; A soluo me foi submetida concentrao parcial em evaporador rotativo, sob presso reduzida, 50 C, at eliminao completa do etanol; Obteno do EXTRATO ETANLICO.

Animais:
CUIDADOS E ALOJAMENTO: Gaiolas de polipropileno, com tampa de metal medindo 40 x 50 x 20 cm; Sala com temperatura ambiente aproximadamente constante (23 a 26 C); Ciclo de 12 horas de claro/escuro, sendo a luz acesa s 6:00h; gua e rao sero oferecidas ad libitum durante todo o procedimento experimental.

Experimento: 56 fmeas prenhes foram divididas em quatro grupos: Um controle e trs experimentas; Os experimentais receberam extrato etanlico de Cereus jamacaru, por gavagem, nas doses de 20, 100 ou 200mg/kg/dia do dia 01 ao dia 21 da gestao; O grupo controle receber gua tambm por gavagem e no mesmo perodo; 28 fmeas fizeram gestao completa at nascimento das ninhadas; De cada ninhada retirou-se 1 filhote macho e 1 filhote fmea para o Desenvolvimento fsico e reflexolgico; De cada ninhada retirou-se 1 filhote macho e 1 filhote fmea (70 dias) Avaliao neurocomportamental.

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CONTROLE

EXP 1 20MG/KG

EXP 2 100MG/KG

EXP 3
200MG/KG

28 EUTANSIA E LAPAROTOMIA

28 2 MACHOS E 2 FMEAS DE CADA NINHADA

1 FILHOTE MACHO 1 FILHOTE FMEA DESENV. FSICO E REFLEXOLGICO

1 FILHOTE MACHO 1 FILHOTE FMEA AVALIAO NEUROCOMPORTAMENTAL

DESEMPENHO EXPERIMENTAL:

Atividade locomotora da prole no campo aberto; Desempenho cognitivo da prole no teste de reconhecimento de objetos; Comportamento da prole no labirinto em cruz elevado; Comportamento da prole no teste da natao forada; Coordenao locomotora da prole avaliada no teste do rota-rod.

Todos feitos aos 90 dias de vida.

O animal foi colocado na plataforma central


Durao de 5 minutos

*
Figura 5: Labirinto em cruz elevado com sensores de monitoramento via Software, modelo EP 151MO (Insight). Fonte: http://insightltda.com.br/insightequipamento-cientifico-290-Labirinto-emCruz-com-Sensores-de-monitoramento-viaSoftware, acessado em jul/2012.

Foi feita a avaliao manual do: -Nmero de entradas em cada brao do labirinto -Tempo gasto nos braos abertos; -Tempo gasto nos braos fechados.
*Limpeza entre intervalos com lcool 5%.

10 minutos de explorao

Avaliao

-Distncia percorrida (m) - Tempo de imobilidade (s)

Figura 6: Campo aberto de madeira, modelo EP 155 (Insight). Fonte: http://insightltda.com.br/insightequipamento-cientifico-259-CampoAberto---Open-Field-de-Madeira, acessado em jul/2012.

A avaliao foi automatizada, a imagem de cada animal explorando o campo aberto foi captada com o auxlio de uma cmera conectada a um PC e o software AnyMaze (Stoelting, USA) foi empregado para analisar a trajetria.

Habituao ao ambiente 1 dia antes do teste

SESSO TREINO (24 h depois)

SESSO TESTE (24 h depois)

A1
A2

Insero de dois objetos idnticos (A1 e A2) por 10 minutos

Insero de dois objetos A2 e B (novo) por 5 minutos

B
A2

Cronometragem do comportamento de cheirar ou tocar o objeto com o nariz e/ou patas dianteiras

*
SESSO TREINO SESSO TESTE (24 h depois)

O animal foi colocado no recipiente por 15 minutos


23 2 C

O animal foi colocado no recipiente por 5 minutos Foi verificado: O comportamento de natao e imobilidade (em segundos) do animal

30 cm

Figura 7: Desenho esquemtico do recipiente a ser utilizado na Avaliao da depresso experimental.

*Verificando-se a temperatura.

Campo aberto; Labirinto em cruz elevado; Memria e reconhecimento de objetos; Natao Forada.

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

Parmetro v mdia (bloco 0-300s) v mdia (bloco 300-600s) t mobilidade (bloco 0-300s) t imobilidade (bloco 300600s)

Controle

Mdia Erro Padro 20mg/kg 100mg/kg

200mg/kg

p 0,35 0,09 0,43

0,03 0,008 0,02 0,004 90,24 25,71 250,80 10,55

0,03 0,005 0,02 0,003 123,10 15,33 213,30 11,07*

0,04 0,009 0,03 0,004 112,70 25,32 218,80 8,87

0,02 0,002 0,01 0,004 84,00 9,77 254,70 9,45

0,02

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

ndice de Reconhecimento MACHOS Controle 20mg/kg 100mg/kg 200mg/kg Objeto A 0,27 0,04 0,38 0,03 0,38 0,04 0,33 0,09 Objeto diferente 0,73 0,04 0,62 0,03 0,62 0,04 0,47 0,13 P 0,008** 0,0003*** 0,02* 0,22 FMEAS Controle 20mg/kg 100mg/kg 200mg/kg Objeto A 0,42 0,04 0,42 0,03 0,36 0,06 0,38 0,02 Objeto diferente 0,58 0,04 0,58 0,03 0,64 0,06 0,62 0,02 P 0,06 0,004** 0,02* 0,008**

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

Parmetro ndice de reconhecimento (TREINO) ndice de reconhecimento (TESTE)

Controle

MACHOS Mdia Erro Padro 20mg/kg 100mg/kg

200mg/kg

p 0,14

0,59 0,06 0,73 0,04

0,46 0,03 0,62 0,03

0,56 0,02 0,62 0,04

0,63 0,10 0,47 0,13

0,09

Parmetro ndice de reconhecimento (TREINO) ndice de reconhecimento (TESTE)

Controle

FMEAS Mdia Erro Padro 20mg/kg 100mg/kg

200mg/kg

p 0,29 0,66

0,44 0,04 0,58 0,04

0,52 0,02 0,58 0,03

0,49 0,03 0,64 0,06

0,50 0,05 0,62 0,02

Machos

Fmeas

Machos

Fmeas

De acodo com as anlises realizadas percebeu-se que pode ser desencadeadas consequncias significativas relacionadas ao uso do extrato de Cereus jamacaru, em ratas, antes, durante e aps desenvolvimento dos filhotes, apresentando ao abortiva, teratognica e anomalias funcionais ou estruturais, causando prejuzo no desenvolvimento e comportamento da prole.

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