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Rosa de Bengala

Equipo 1 Inmunologa

Fundamentos
La prueba se fundamenta en al uso de antgenos coloreados con rosa de bengala para la identificacin de aglutinas de brcela. El pH bajo 3,65 +/- 0,05 permite la inhibicin de aglutinas inespecficas. La sensibilidad de la prueba permite detectar tanto a las IgG en fase temprana de la enfermedad y a las IgM en la fase crnica de la misma.

Ventajas y Desvent ajas

Ventajas
Las

pruebas serolgicas son mtodos rpidos, accesibles y de un costo aceptable. Las ventajas de estas pruebas es que son simples, presentan alta sensibilidad y bajos costos.

Desventajas
La

desventaja es que son subjetivas, no permiten el corrimiento de gran nmero de muestras a la vez y requieren de una prueba confirmativa.

Rosa de Bengala
La prueba del Rosa Bengala o prueba del antgeno tamponado de Brucela, es una tcnica rpida de aglutinacin en porta para la deteccin de anticuerpos antiBrucela en sueros animales y humanos

Brucelosis
La brucelosis, tambin llamada fiebre malta o fiebre ondulante, es una enfermedad bacteriana (infecciosa) que ataca a varias especies de mamferos dentro de los cuales se encuentra el hombre, causando la brucelosis humana. Algunos de los reservorios naturales son los bovinos, caprinos, ovinos, cerdos y mamferos marinos, pero se han encontrado brucellas en una inmensa cantidad de mamferos tan dispares como pequeos roedores, cnidos, camlidos y cetceos.

Las vas de contagio suelen ser: mucosas, heridas en la piel y la va digestiva. La bacteria puede incluso entrar por las vas respiratorias mediante aerosoles. Muchas infecciones provienen de la manipulacin de animales contaminados, por ingesta de leche o de sus productos no pasteurizados y de carnes poco cocidas. En pases desarrollados es una enfermedad tpicamente ocupacional donde las personas ms expuestas son veterinarios, peones de campo y trabajadores de la industria de la carne.

Sntomas
La brucelosis aguda puede comenzar con sntomas seudogripales leves o sntomas como: Dolor abdominal Dolor de espalda Escalofros Sudoracin excesiva Fatiga Fiebre Dolor de cabeza Dolor articular Inapetencia Debilidad Prdida de peso

Ag

brucelar. Valor predictivo positivo muy alto, 99% en los paciente con brucelosis aguda o crnica El Antgeno coloreado Rosa de Bengala permite una deteccin precoz de las aglutininas (anticuerpos) especficos que aparecen en la Brucelosis.

PRUEBA DE LABORATORIO

Rosa de Bengala
Antgeno

Brucelar Amortiguado para el Diagnstico de Brucelosis Prueba de aglutinacin rpida en placa para la deteccin temprana de aglutininas especficas de Brucella (Brucella melitensis, abortus y suis).

PRINCIPIO
Se

utiliza un antgeno de Brucella abortus biotipo 1 (cepa 99S o cepa 1119-3) acidificado regulado y teido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la deteccin de aglutininas especficas de Brucella. Esta prueba puede ser utilizada para un diagnstico temprano.

MATERIAL PROPORCIONADO
Placa de prueba. (Se recomienda que siempre se utilice una placa de vidrio para una mejor observacin de los resultados). Pipetas desechables. El gotero incluido proporciona una gota de 30-40 L. Se sugiere utilizar pipetas automticas preferentemente.

REACTIVOS

Antgeno Rosa de Bengala Control Positivo de Brucella Control Negativo de Brucella

PROCEDIMIENTO
1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestras de suero. 2. Utilizando la pipeta automtica adicione 30 L de la muestra del paciente en un crculo de la placa. 3. Mezcle suavemente el Antgeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogneo, despus coloque 30 L en la placa de prueba, en el mismo circulo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador. (usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este paso para cada muestra de paciente y controles.

4. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos. 5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. Importante: Despus de este tiempo la lectura ya no es vlida. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS El reactivo y los controles son estables de 275281 K (2-8C) hasta sus respectivas fechas de caducidad.

RESULTADOS
La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenz a mezclar. Este es un tiempo lmite ptimo en el que se da un espacio para la observacin de ciertas aglutininas que se revelan lentamente y que de otra manera se pueden omitir, adems de que se pueden presentar reacciones no especficas.

* No Aglutinacin - Suero Negativo * Cualquier cantidad de Aglutinacin - Presencia de anticuerpos especficos. Suero Positivo Esta es slo una prueba cualitativa de screening, la cual si resulta positiva debe ser confirmada mediante otra prueba cuantitativa para brucelosis como: Aglutinacin Lenta Estndar o Aglutinacin Lenta en Presencia de 2-Mercaptoetanol. NOTA: El aislamiento del agente etiolgico mediante hemocultivos es de suma importancia.

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