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PIASTRINE GELIFICANTI CHROMOGENIC COMPACT-DRY cod.

32024 - 32025 - 32026 - 32027 - 25830 - 34381 - 34380 - 88583


Piastrine gelificanti con terreno disidratato per analisi microbiologiche di alimenti PRINCIPIO DI FUNZIONAMENTO ED IMPIEGO Sul fondo delle piastrine Chromogenic Compact-Dry sono presenti il terreno di coltura disidratato ed un gel solubile in acqua. L'aggiunta di 1 mL di liquido del campione da analizzare sufficiente per re-idratare in terreno. Quindi con una singola operazione si inocula il campione e si re-idrata il terreno, riducendo notevolmente i tempi di preparazione delle colture per le analisi microbiologiche degli alimenti. In pochi secondi il campione si diffonde uniformemente e spontaneamente su tutta la superficie della piastrina. I substrati cromogenici consentono una facile identificazione delle colonie e, nel caso delle Compact-Dry EC, la distinzione tra diversi microrganismi. I terreni disponibili consentono di eseguire facilmente le classiche analisi dei campioni di alimenti solidi e liquidi. CHROMOGENIC COMPACT-DRY DISPONIBILI Le piastrine Chromogenic Compact-Dry sono disponibili in sette diverse versioni: Compact-Dry TC per conta microbica totale (codice 32024) cf. 80 pezzi - approvate AOAC Compact-Dry EC per coliformi e distinzione di Escherichia coli (codice 32025) cf. 80 pezzi - approvate AOAC Compact-Dry CF per coliformi (codice 32026) cf. 80 pezzi - approvate AOAC Compact-Dry YM per lieviti e muffe (codice 32027) cf. 80 pezzi - approvate AOAC Compact-Dry SA per Staphylococcus aureus (codice 25830) cf. 80 pezzi. Supplemento per Compact-Dry SA per Staphylococcus aureus (codice 25831) cf. 40 test Compact-Dry SL per Salmonella (codice 34381 ) cf. 80 pezzi Compact-Dry VP per Vibrio parahaemolyticus (codice 34380) cf. 80 pezzi Compact-Dry ETB per enterobatteri (codice 88583) cf. 80 pezzi SCHEMA DI UTILIZZO

International pbi - Via Novara, 89 - 20153 Milano - Italy Tel. (02) 48779-1 - Fax (02) 40090010 E-mail: info@internationalpbi.it - www.internationalpbi.it

piastrine gelificanti Chromogenic Compact-Dry


SPECIFICHE TECNICHE DEI PRODOTTI CHROMOGENIC COMPACT-DRY EC PER ESCHERICHIA COLI E COLIFORMI cod. 32025 Composizione del terreno Peptone L- Triptofano Cloruro di Sodio Fosfato di Potassio Sodio Lauril Solfato 5-bromo-4-cloro-3-indolo- -D- glucuronide (X-GLUC) 5-bromo-6-cloro-3-indolo- -D- galactopiranoside (MAGENTA-GAL) Piruvato di Sodio D-Sorbitolo Potassiofosfatomonoacido Nitrato di Potassio Agar PH finale 10.0 gr 1.0 gr 5.0 gr 2.7 gr 0.2 gr 0.1 gr 0.1 gr 1.0 gr 1.0 gr 2.2 gr 1.0 gr 15.0 gr 7.0 0.2

APPLICAZIONI Le Chromogenic Compact-Dry EC per Escherichia coli e coliformi vengono utilizzate per il conteggio in piastra di Escherichia coli e per i coliformi. E. Coli possiede l'enzima -glucuronidasi che scinde il substrato X - GLUC producendo una colorazione blu. I coliformi possiedono l'enzima -galattosidasi che scinde il substrato MAGENTA -GAL producendo una colorazione rossa. Escherichia coli possiede entrambi gli enzimi (-glucuronidasi e -galattosidasi) e pu quindi pu produrre sia una colorazione blu o blu/rossa, comunque nettamente distinguibile dalle colonie degli altri coliformi. Dato che Escherichia coli O157 non ha l'enzima -glucuronidase viene identificato come appartenente del gruppo dei coliformi. INCUBAZIONE E INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI Incubare a 35 C per 20 2 ore. Non superare questo tempo di incubazione per evitare la crescita di microrganismi diversi dai Coliformi ed Escherichia coli. La colorazione rossa pu comparire se il campione contiene lattobacilli contenenti l'enzima -galattosidasi.

CHROMOGENIC COMPACT-DRY CF PER COLIFORMI cod. 32026 Composizione del terreno Peptone Fosfato di Sodio Sodio Lauril Solfato 5-bromo-4-cloro-3-indolo- -D- galactopiranoside (X-GAL) Piruvato di Sodio D-Sorbitolo Potassiofosfatomonoacido Nitrato di Potassio Estratto di lievito Cloruro di Sodio Agar pH finale

15.0 gr 2.0 gr 0.15 gr 0.1 gr 1.0 gr 1.0 gr 2.2 gr 1.0 gr 5.0 gr 5.0 gr 15.0 gr 7.1 0.2 APPLICAZIONI

Le Chromogenic Compact-Dry CF per coliformi vengono utilizzate per il conteggio di Coliformi in alimenti e bevande. INCUBAZIONE E INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI Dopo incubazione a 35-37 C per 18-22 ore, i Coliformi sviluppano colonie blu/verde. Il substrato X-GAL viene scisso dall'enzima -galattosidasi prodotto dai coliformi producendo una colorazione blu/verde.

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piastrine gelificanti Chromogenic Compact-Dry


CHROMOGENIC COMPACT-DRY YM PER MUFFE E LIEVITI cod. 32027 Composizione del terreno (Sabouraud Dextrose Agar - SDA) Peptone 10.0 gr/L Destrosio 40.0 gr/L Agar 15.0 gr/L pH finale 5.9 0.2

APPLICAZIONI Le Chromogenic Compact-Dry YM per muffe e lieviti vengono utilizzate per il conteggio di questi microrganismi in alimenti e bevande. Dopo l'inoculo di 1 ml le piastrine vengono Incubate a a 25 C. Per l'isolamento del genere Candida, incubare per 72 ore; in caso di altri microrganismi pu essere necessario incubare per 5 giorni. Candida forma colonie bianco opaco che gradatamente diventa pi scuro. La crescita della Candida sul terreno molto stabile quindi le colonie restano inalterate per parecchio tempo.

DRY TC PER CONTA TOTALE cod. 32024 Composizione del terreno (Plate Count Agar - PCA) Estratto di lievito 2.5 gr Peptone 5.0 gr Destrosio 1.0 gr Agar 15.0 gr pH finale 7.0 0.2

APPLICAZIONI Le Chromogenic Compact-Dry TC per conta totale vengono utilizzate per la conta totale dei microrganismi in alimenti e bevande. In particolare per il conteggio in piastra di microrganismi nel latte ed altri prodotti lattiero-caseari, gelati, pesce, bevande, per il conteggio dei batteri termo-resistenti (spore) nello zucchero, nell'amido e nelle spezie usati per la produzione di pesce e carni. Temperatura d'incubazione: 35 C 1 C per 48 h 3 h.

CHROMOGENIC COMPACT-DRY SA PER S.AUREUS cod. 25830 Composizione del terreno (Mannitol Salt Agar) Peptone 10.0 g/L Lab-Lemco (estratto di carne) 1.0 g/L Mannitolo 10.0 g/L Sodio cloruro 75.0 g/L Rosso fenolo 0.025 g/L Agar 15.0 g/L pH finale 7.5 0.2

Supplemento: EGG YOLK EMULSION emulsione sterile stabilizzata di tuorlo d'uovo cod. 25831 APPLICAZIONI Le Chromogenic Compact-Dry SA vengono utilizzate per la ricerca dello Staphylococcus aureus negli alimenti, nei prodotti lattiero - caseari e nei campioni per analisi cliniche. Questo metodo si basa sull'impiego del terreno Mannitol Salt Agar in combinazione con la sospensione di Egg Yolk. Il metodo permette di semplificare la determinazione e rende possibile l'esecuzione anche a personale non specializzato. Per la preparazione si consiglia di lasciare cadere 1ml del campione al centro della piastrina,svitare quindi il tappo della sospensione di Egg Yolk e portare asetticamente il liquido sino al segno di 0,3 mL. Lasciare cadere tutta la sospensione di Egg Yolk sulla superficie delle piastrine in 7/8 punti diversi in modo da avere una distribuzione uniforme. Richiudere la piastrina con il coperchio e trasferirla capovolta in incubatore per 48 ore a 35 C. Per i prelievi che prevedono l'uso di una tampone, si consiglia l'uso del tampone Tampo-Express codice 24199. INCUBAZIONE E INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI Le colonie di Staphylococcus aureus generano un pigmento giallo che conferisce una colorazione giallo pallida. Inoltra la decomposizione della lecitina dello Egg Yolk determina un alone periferico bianco torbido. Solo le colonie di Staphyloccus aureus hanno una reazione positiva allo Egg Yolk. Questa tipo di reazione si osserva anche per altri batteri (in particolare il genere Bacillus). E' in ogni caso facile fare una differenziazione dallo S.aureus in quanto questi altri batteri sviluppano solo colonie con conformazione piatta. Quando le colonie di S.aureus si sviluppano in profondit, la reazione allo Egg Yolk pu non apparire molto chiara.
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piastrine gelificanti Chromogenic Compact-Dry


CHROMOGENIC COMPACT-DRY SL PER SALMONELLA cod. 34381 Composizione del terreno Base medium: DHL agar Additivi: Pigmenti - Cloruro di magnesio - Novobiocina - Altri additivi

APPLICAZIONI Le Compact-Dry SL vengono utilizzate per rilevare la presenza di Salmonella in campioni alimentari solidi, liquidi, acqua e swab tests. Utilizzando una coltura di pre-arricchimento ed un successivo inoculo del campione nella piastrina, possibile una analisi rapida di Salmonella il giorno seguente il campionamento. Il terreno di Compact-Dry SL contiene un substrato cromogenico e Novobiocina; la presenza di Salmonella rilevata dalla combinazione di tre differenti tests: 1. alcalinizzazione del medium determinata dalla lisina decarbossilasi posseduta da Salmonella: il colore del terreno virer dal blu porpora al giallo. 2. decomposizione del substrato cromogenico con un enzima specifico di Salmonella: le colonie si colorano di un verde/nero. 3. motilit della Salmonella che permette la diffusione dei microrganismi su tutta la superficie del terreno. Le colonie cresciute su Compact-Dry possono essere successivamente prelevate per tests di conferma. I Coliformi generano una colorazione del terreno dal blu porpora al rosso-porpora a causa della fermentazione del lattosio e/o saccarosio presenti nel terreno. Incubazione, metodica ed interpretazione dei risultati

PREPARAZIONE DEL CAMPIONE 1. CAMPIONI ALIMENTARI SOLIDI Mettere 25 gr del campione nel sacchetto sterile per l'omogeneizzazione. Aggiungere 225 ml di Buffered Peptone Water o EEM Broth , omogeneizzare in stomacher per 1 minuto. 2. CAMPIONI ALIMENTARI LIQUIDI O ACQUA Diluire il campione 1:10 con Buffered Peptone Water o con EEM Broth; filtrare il liquido attraverso un filtro e mettere il filtro in BPW o EEM Broth. 3. LIQUIDI DA RISCIACQUO TAMPONI Diluire il campione 1:10 con BPW o EEM Broth. METODICA 1. Il campione va tenuto nel sacchetto di omogeneizzazione ed incubato per 20-24 ore a 35-37 C. 2. Dopo l'incubazione pipettare 0.1 mL del brodo di arricchimento nella piastrina ad una distanza di circa 1cm dalla estremit in modo che il liquido non venga in contatto con il bordo.
Pipettare delicatamente 0.1 mL di brodo di arricchimento alla distanza di 1 cm dal bordo Pipettare 1ml di acqua sterile al bordo opposto del campione. L'acqua si diffonder automaticamente

3. Dopo l'inoculazione del campione pipettare 1 ml di acqua sterile vicino al bordo opposto a quello dell'inoculo del campione. L'acqua si diffonder immediatamente reidratando uniformemente il terreno. 4. Richiudere la piastrina con l'apposito coperchio ed incubarla,capovolta, per 20-24 ore a 41-43 C. INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI CAMPIONE POSITIVO Si osservano colonie isolate o unite di colore verde/nero, il terreno attorno alle colonie appare giallo. CAMPIONE NEGATIVO Il terreno non cambia colore; se accade possibile che diventi rosso o rosso-porpora. Non si osservano colonie nere o verdi. Attenzione: il terreno pu colorarsi di giallo per la presenza di Pseudomonas o Proteus; tuttavia la superficie di terreno colorata poca e limitata, data la modesta motilit di questi microrganismi. ISOLAMENTO DI SALMONELLA DA COMPACT-DRY E' possibile prelevare da Compact-Dry colonie per tests di isolamento ed identificazione. Per l'isolamento di Salmonella prelevare con ansa le colonie verdi/nere, strisciare su terreno MLCB agar ed incubare. Dopo l'isolamento di una singola colonia sull'agar, seguire le procedure convenzionali di identificazione e conferma.

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piastrine gelificanti Chromogenic Compact-Dry

PRECAUZIONI E SUGGERIMENTI 1. E' possibile isolare Salmonella anche dal substrato giallo. 2. E' possibile isolare Salmonella da colonie distanti dal punto di inoculo del campione, a causa della motilit di Salmonella. 3. I campioni sia positivi che negativi devono essere sottoposti a tests di identificazione e conferma. 4. Dopo aver aperto la busta di alluminio, ogni piastra non utilizzata va rimessa nella busta che va sigillata al fine di evitare la luce e l'umidit; utilizzare tuttavia le piastre rimanenti al pi presto. 5. Chiudere la piastra con il coperchio subito dopo l'inoculo al fine di evitare la disidratazione del terreno. CONSERVAZIONE E SCADENZA Conservare le Compact-Dry SL a temperatura ambiente (1-30 C). La scadenza di 1 anno dalla data di produzione. PARAGONE TRA IL METODO TRADIZIONALE PER LA RICERCA DI SALMONELLA E COMPACT-DRY SL
METODO TRADIZIONALE giorno 1 Campione 25g Pre-arricchimento (BPW/EEM) Arricchimento selettivo (TT/RV/SBG/SC) Isolamento (MLCB/DHL/XLD/Rambach) In presenza di Salmonella Conferma / Identificazione Tests biochimici/sierologici COMPACT-DRY SL Campione 25g Pre-arricchimento (BPW/EEM) Compact-Dry SL senza arricchimento-a fine giornata si determina se il campione positivo o negativo In presenza di Salmonella Isolamento Conferma / Identificazione Tests biochimici/sierologici

giorno 2

giorno 3

giorno 4

CHROMOGENIC COMPACT-DRY VP PER VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS COD. 34380 Applicazioni Le Chromogenic Compact-Dry VP vengono utilizzate per la ricerca di Vibrio parahaemolyticus negli alimenti (in particolar modo pesce e crostacei), acqua e bevande. Le colonie di Vibrio parahaemolyticus vengono identificate grazie alla presenza di un substrato cromogenico. Incubazione e interpretazione dei risultati Inoculare 1 mL del campione liquido al centro della piastrina, chiuderla con l'apposito coperchio ed aspettare che il terreno si reidrati convertendosi a gel. Incubare a 35 C per 18-20 ore. Vibrio parahaemolyticus sviluppa colonie blu/verde-blu.

CHROMOGENIC COMPACT-DRY ETB PER ENTEROBATTERI COD. 88583 Composizione del terreno Estratto di lievito Glucosio Peptone Sali di bile Cloruro di sodio Rosso neutrale Cristal violet 3.0 mg 10.0 mg 7.0 mg 1.5 mg 5.0 mg 0.03 mg 0.002 mg

Applicazioni Le Compact-Dry ETB sono piastre selettive pronta alluso per la ricerca e il conteggio degli Enterobatteri negli alimenti. Dopo aver inoculato il campione nella piastra (1 ml di soluzione) porre ad incubare ad una temperatura di 35 2 C per un tempo compreso tra 20-24 ore. Interpretazione dei risultati Le colonie di Enterobatteri sono facilmente riconoscibili grazie alla colorazione blu/ blu-verde. I batteri non Enterococchi sono inibiti e non formano colonie.

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piastrine gelificanti Chromogenic Compact-Dry


CONSERVAZIONE DELLE CHROMOGENIC COMPACT-DRY

Le piastre Chromogenic Compact-Dry si conservano a temperatura ambiente per 1 anno dalla data di produzione. Il supplemento Egg Yolk Emulsion si conserva a +4/+8 C per 5 mesi dalla data di produzione, per sapere la data di scadenza dei prodotti dal giorno di consegna della merce contattate il nostro ufficio vendite al momento dell'ordine. CONTROLLO DELLE SUPERFICI CON IL METODO COMPACT-DRY Associando l'uso delle piastre Compact-Dry con l'impiego dello speciale tampone per analisi delle superfici Tampo-Express (codice 24199) possibile ridurre drasticamente i tempi di campionamento e di inoculo rispetto alla metodica tradizionale che prevede l'uso di piastre Petri.

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