Departamento de Cincias da Vida. Faculdade de Cincias e Tecnologia.

Universidade Nova de Lisboa Docente: Ilda Sanches

Biologia Molecular C Tpicos de aulas tericas (para avaliao 1 teste)

Data do 1 teste: 13 de Outubro de 2012 Horrio 10h-11h30h Tpico DNA, Gene, Genoma - Organizao do DNA do ncleo de clulas de eucariontes. Niveis da organizao da cromatina. Protenas intervenientes: histonas. Significado de nucleossoma, heterocromatina, eucromatina. - Organizao do DNA circular de mitocndrias, cloroplastos e clulas bacterianas Formas topolgicas relaxada e superenrolada da molcula de DNA circular Protenas intervenientes (modelo Escherichia coli); Topoisomerases I,II- girase, proteinas tipo histonas. Definio de plasmdeos. - Composio qumica dos cidos nucleicos. Estrutura primria e secundria dos cidos nucleicos. Modelo tridimensional do DNA. Caractersticas das diferentes famlias de conformaes do DNA e RNA in vivo e in vitro: condies ambientais e sequncias de bases que induzem a formao das vrias estruturas da hlice (B, A, Z, D). Conceito de tautomeria nas bases purinas e pirimidinas. Ligao entre as bases do tipo Watson-Crick versus do tipo Hoogsteen. - Definio de gene (unidade transcripcional). Definio de promotores de procariontes e de eucariontes e regies controlo. Tpico RNAs e Transcrio - RNA polimerases (RNAP) de procariontes e de eucariontes (RNAP I, II, III). Conceito de unidade monocistrnica e unidade policistrnica (definio de opero exemplo opero lac de E.coli). Conceito de cadeia sense e anti-sense. Bases modificadas nos RNAs. Diferentes tipos de RNAs codificante e no codificantes. Terminadores (sequncias palindrmicas, tipos de ansas). - Fundamento geral do mecanismo de sntese de RNAs (transcrio). pre-RNAs e Modificaes ps-transcrio: rRNAs, tRNA e mRNA em procariontes e eucariontes. Tpicos de aulas terico-prticas (para avaliao 1 teste) - Clculos para preparao de solues e tampes. - Principais etapas para isolamento e purificao de DNA. Exemplo de mtodo (lise-alcalina) de isolamento de DNA plasmidico. - Espectrofotometria de cidos nucleicos e protenas nos UV. Determinao da concentrao do DNA (com base no valor de A260) e de grau de pureza (ausncia de protena: com base no valor de A260/A280). - Nucleases de DNA exonucleases e endonucleases. Enzimas de restrio (endonucleases do tipo II). Electroforese em gel de agarose. Separao de molculas de DNA lineares, formas topolgicas de DNA circular. Conceito de DNA degradado. Marcadores de pesos moleculares e de massa. Exemplos de mapas de restrio.