Staphylococcus aureus Caractersticas Principais

O Staphylococcus aureus o agente mais comum em infeces piognicas. Estas infeces podem se localizar na pele ou em regies mais profundas. Quando na pele recebem diferentes designaes, tais como foliculite, furunculose, carbnculo e impetigo, de acordo com a localizao e outras caractersticas. A foliculite a inflamao de um folculo piloso, que surge em decorrncia de sua obstruo. O furnculo, ou abscesso, a infeco dos folculos pilosos e das glndulas sebceas obstrudas, com envolvimento do tecido celular subcutneo. Quando o furnculo apresenta vrios tipos de drenagem, recebem a designao de carbnculo estafiloccico,

particularmente quando localizado na nuca e parte superior das costas. O hordolo, ou terol, a infeco de uma glndula sebcea marginal das plpebras. Em indivduos debilitados por doenas crnicas, traumas fsicos, queimaduras ou imunossupresso, esse microrganismo pode causar infeces de carter mais grave. Entre as infeces profundas destacam-se a osteomielite, a bacteremia (freqentemente associada a abcessos

metastticos), a endocardite, a pneumonia e, ocasionalmente, a meningite e a artrite bacteriana. A osteomielite pode ser primria, ou hematognica, e secundria. No primeiro caso, a doena surge em conseqncia da disseminao do Staphylococcus aureus a partir do foco de infeco, geralmente localizada na pele. A osteomielite secundria decorrncia de traumas penetrantes, processos cirrgicos ou da presena de um foco de infeco contguo. A bacteremia pode ter origem de qualquer infeco estafiloccica localizada, tais como abscesso, pneumonia e outros. De modo geral, a doena progride lentamente com febre alta e a formao de abscessos metastticos ao nvel de vrios rgos. Bacteremias protradas podem determinar o aparecimento de endocardites, com o envolvimento das vlvulas cardacas, particularmente a artica. As endocardites tambm podem surgir em conseqncia de prteses e processos cirrgicos. A pneumonia mais freqente no primeiro ano de vida, sendo as viroses fatores predisponentes pneumonia por esse microrganismo. Muitos pacientes com pneumonia estafiloccica referem histria de infeces cutneas pelo Staphylococcus aureus. Alm dessas infeces, o Staphylococcus aureus pode

causar vrios tipos de intoxicaes, seja na vigncia de um processo infeccioso ou no. A primeira possibilidade pode ser exemplificada pela sndrome da pele escaldada ou doena de Ritter e caracterizada pelo deslocamento de extensas reas de epiderme, sendo determinado por uma toxina, denominada esfoliatina, produzida na rea da infeco e levada para reas distantes pela corrente sangnea. As intoxicaes que ocorrem na ausncia de processos infecciosos so de dois tipos: intoxicao alimentar e sndrome do choque txico. A primeira provocada pela ingesto de toxinas previamente formadas no alimento contaminado pelos Staphylococcus aureus. Essas toxinas so chamadas enterotoxinas, conhecendo-se, atualmente, cinco, imunologicamente distintas (A, B, C, D, E). Algumas evidncias sugerem que essas enterotoxinas so superantgenos, elas so termoestveis e , assim, a intoxicao alimentar pode ser veiculada por alimentos cozidos. Na sndrome do choque txico o paciente, geralmente mulher no perodo menstrual, apresenta febre alta, diminuio da presso sistlica, eritema com descamao da pele, insuficincia renal, diarria e outras manifestaes. As manifestaes so atribudas a toxina TSST-1 produzida ao nvel da vagina. Embora a grande maioria dos doentes seja constituda por mulheres em perodo menstrual, sem sinais de infeco estafiloccica, a doena tem sido registrada em pacientes com infeces de pele, ossos e pulmes.

Fatores de Virulncia As clulas de Staphylococcus aureus apresentam alguns componentes de superfcies assim como produzem vrias substncias extracelulares, que contribuem para a sua virulncia. Cpsula algumas amostras de Staphylococcus aureus possuem cpsula, de natureza polisscardica, proporcionando maior resistncia a fagocitose. Peptideoglicano ativa a via alternativa do complemento provocando uma reao inflamatria do hospedeiro. cidos teicicos (ribitol e glicerolfosfato) so componentes da parede celular e parecem estar envolvidos na ativao do complemento e na aderncia.

Protena A uma protena de superfcie, sendo encontrada na maioria das amostras de S. aureus. composta por uma cadeia polipeptdica com um peso molecular em torno de 58 mil Daltons, sendo responsveis pela interao com a poro Fc da molcula de IgG. Tem sido demostrado que esta reao, direta e indiretamente, provoca efeitos quimiotticos, anticomplementar,

antifagocitrio, liberao de histamina, reaes de hipersensibilidade e leso plaquetria. Adesinas torna os microrganismos capazes de se ligar s fibronectinas (glicoprotenas da membrana celular, plasma, saliva) e laminina (glicoprotena da membrana celular). Enzimas e toxinas extracelulares a mais conhecida a coagulase, caracterstica da espcie, e provoca a coagulao do plasma. Outras enzimas incluem a catalase, desoxirribosenucleases, hialuronidase, lipase, proteases, betalactamase e a estafiloquinase. Hemolisinas hemolisina alfa e beta, sendo txica para animais e plaquetas humanas. Leucocidina uma toxina que possui a capacidade de desgranular os neutrfilos e macrfagos humanos e de coelhos

Resposta Imunolgica As infeces causadas por esses microrganismos podem determinar o aparecimento de anticorpos sricos e a imunidade celular contra as enzimas, toxinas e outros antgenos da bactria. O papel das reaes imunolgicas ainda no est bem esclarecido, mas a opsonizao desse microrganismo mediada pelo complemento e no por anticorpos. Acredita-se que a deteco de anticorpos circulantes, dirigidos para os cidos teicicos da parede celular, possa ser til para a monitorao do curso de infeces estafiloccicas e para diferenciar as infeces profundas e de curso prolongado.

Diagnstico Laboratorial O diagnstico das infeces estafiloccicas feito pelo isolamento e caracterizao. O isolamento realizado nos meios de culturas comuns, como

por exemplo, o gar sangue e por meios seletivos, como o gar manitol salgado. A caracterizao pode ser feita atravs de testes bioqumicos como o da catalase e coagulase entre outros. O diagnstico da intoxicao alimentar realizado pela pesquisa das enterotoxinas nos alimentos ingeridos e no vmito do paciente, sendo encontrado em grande quantidade (105 bacterias/g) no alimento que contm as enterotoxinas responsveis pelas manifestaes clnicas.

Epidemiologia A transmisso do S. aureus ocorre por contato direto e por contato indireto. As infeces estafiloccicas superficiais, podem ser consideradas graves se acometerem recm-nascidos, pacientes cirrgicos e portadores de doenas debilitantes como o cncer e a diabete. Esta uma das razes pelas quais as infeces estafiloccicas severas so mais freqentemente adquiridas em hospitais. Em vrias situaes e, particularmente, no caso de surtos epidmicos de infeco hospitalar, ou de intoxicao alimentar, pode ser necessrio subdividir a espcie a fim de se identificar o foco da infeco, ou outro elo da cadeia epidemiolgica. Com o propsito de evidenciar diferenas ou similaridade entre as linhagens, vrios mtodos de tipagem foram desenvolvidos. Entre estes esto a biotipagem, a sorotipagem (baseada no antgeno polissacardico capsular e a resistotipagem (baseada no perfil de suscetibilidade a antimicrobianos).

Tratamento Embora o Staphylococcus aureus possa ser suscetvel ao de vrias drogas ativas contra bactrias Gram-positivas (tais como penicilinas, cesfalosporinas, eritromicina, aminoglicosdios, tetraciclina e clorafenicol), tambm conhecido pela sua elevada capacidade de desenvolver resistncia a diversas delas. Portanto, a antibioticoterapia adequada das infeces estafiloccicas deve ser precedida da escolha da droga com base nos resultados de testes de suscetibilidade. A penicilina a droga de escolha se a linhagem for sensvel. As linhagens resistentes so produtoras de beta-lactamase (peniciliniase), uma enzima que inibe a ao da droga, e so codificadas por genes plasmidiais. O emprego de meticilina e outras penicilinas semi-sintticas (tais como a

oxacilina, nafcilina e cloxacilina), resistentes ao das peniciliniases, iniciada em 1959, representou uma etapa significativa na terapia antiestafiloccica. Porm a resistncia a esses antibiticos foi detectada dois anos aps o incio da sua utilizao.

A resistncia meticilina relacionada a alteraes das protenas ligadoras de penicilinase (penicillin-binding proteins). Essas linhagens resistentes a meticilina (MRSA - Staphylococcus aureus meticilina-resistentes) , muitas vezes so resistentes a outros tipos de antibiticos. Para essas linhagens a droga de escolha a gentamicina e em caso de tratamento de infeces estafiloccicas de carter grave recomendado o uso da vancomicina. Staphylococcus epidermidis Caractersticas gerais

O Staphylococcus epidermidis o habitante normal da pele e mucosas, sendo considerado a espcie de estafilococos coagulase negativos de maior prevalncia e persistncia na pele humana. Sendo assim, o seu isolamento a partir do processo infeccioso, deve ser interpretado com cautela, pois o espcime clnico pode ter sido contaminado no momento da coleta. Por outro lado, essa parece ser a espcie de estafilococos coagulase negativos com potencial de patogenicidade mais elevados, sendo, hoje, apontado como importante agente de bacteremia, de origem hospitalar, em servios de oncologia e neonatologia. tambm reconhecida a sua crescente freqncia em infeces associadas implantao de prteses cardacas, articulares e vasculares e de cateteres intravenosos e peritoniais. Alm disso, tem sido relatados casos de endocardite, associados com o isolamento dessa espcie de estafilococo. Staphylococcus saprophyticus Caractersticas gerais

Vrios estudos mostram que esse estafilococo pode ser um patgeno oportunista em infeces do trato urinrio, especialmente em mulheres jovens, sexualmente ativas. considerado, depois da Escherichia coli, o agente mais freqentes de infeces urinrias, tais como a cistite e pielonefrite agudas,

nessas pacientes. Esse microrganismo pode tambm causar infeco urinria no homem, particularmente em idosos com afeces predisponentes do trata urinrio. Sua patogenicidade deve estar relacionada a capacidade de aderir s clulas do epitlio do trato urinrio. Ocasionalmente, o Staphylococcus saprophyticus pode ser isolado de infeces de feridas e de casos de septicemia.

Impetigo So infeces piognicas primrias da pele, produzidas pelos estafilococos e estreptococos. Os mecanismos de transmisso no esto totalmente elucidados, mas admite-se que o estreptococo coloniza, a princpio, a pele normal e que, a partir de solues de continuidade, como pequenos traumas, picadas de insetos, escabiose; a bactria possa penetrar e produzir leso. Somente aps o aparecimento desta que ocorreria colonizao da orofaringe, e no o inverso, como se acreditava anteriormente. A leso caracteriza-se pela presena de uma ppula que evolui rapidamente para a vescula, circundada por rea de eritema. Formam-se leses exulcerocrostosas que lembram queimaduras de cigarro. Atinge prefencialmente face e membros superiores. Particularidades clnico evolutivas so observadas segundo a etiologia do impetigo: assim temos que nos impetigos estafiloccicos (impetigo bolhoso) a bolha persistente e crosta resultante da toxina esfoliatina . No impetigo estreptoccico a bolha quase nunca detectada porque involui rapidamente. Nesta forma verifica-se a alta freqncia de nefrite aguda (foco primrio o impetigo). O que ocorre na prtica , no entanto com bastante freqncia a superposio das duas formas (forma mista). No que se refere aos diagnsticos diferenciais esto o herpes simples, candidase, dermatofitose e miliria. O tratamento se faz com antibitico tpico, assepsia com remoo de crostas e compressas com antisspticos. Nos casos mais extensos, antibioticoterapia sistmica est indicada. Sndrome da pele escaldada estafiloccica (Doena de Ritter) 1. Definio:

A sndrome da pele escaldada estafiloccica uma doena pouco comum que ocorre, predominantemente em recm-nascidos e crianas pequenas, mas algumas vezes em adultos anfricos ou imunossuprimidos. A doena tem o aspecto de pele escaldada, com eritema difuso e exfoliao de grandes fitas de epiderme superificial. A apresentao da sndrome da pele escaldada estafiloccica pode ser clinicamente indistinguvel da necrlise epidrmica txica. 2. Fisiopatologia: Assim como o impetigo bolhosos, a sndrome da pele escaldada estafiloccica causada por um estafiloccico fagotipo 2. Na sndrome da pele escaldada estafiloccica, este organismo infecta um foco extracutneo, tal como a faringe e as conjuntivas. A infeco focal leva produo de uma toxina estafiloccica, chamada de exfoliatina. Esta toxina se liga zona granulosa epidrmica, causando uma clivagem superficial intra-epidrmica. Em conseqncia , diferentemente do caso do impetigo bolhoso, nesta sndrome o organismo no recupervel das leses de pele. 3. Caractersticas clnicas A pele sai em fitas, deixando grandes reas desnudas. Antes de comear a descamao, a pele vermelha e dolorosa palpao. As leses podem surgir em qualquer ponto, mas as grandes reas de descamao so encontradas no tronco e extremidades. A sndrome da pele escaldada geralmente cura espontaneamente, em um espao de tempo de 2 ou 3 semanas, uma vez que depende da concentrao e atuao da toxina no sangue. Em crianas a mortalidade baixa , o que no se verifica em adultos, cuja taxa de mortalidade de acima de 50%. Os sinais e sintomas mais evidentes so febre, sendo a pele afetada extremamente dolorosa palpao. Para o diagnstico absolutamente necessria distinguir a sndrome da pele escaldada estafiloccica da necrlise epidrmica txica, que ocorre geralmente em adultos, mas que pode apresentar um quadro clnico idntico. Esta diferenciao poder ser feita pela bipsia de pele.

O tratamento desta doena devr ser feio por pelo menos 2 semanas com derivados semi-sintticos de penicilina ou com cefalosporinas. No caso de sepsis estafiloccia deve ser iniciada terapia com oxacilina endovenosa. O prognstico em criana excelente, mesmo sem terapia. No adulto a sndrome est associada com mais freqncia sepsis estafiloccica e , a no ser que seja institudo imediatamente um tratamento agressivo com antibiticos, a doena pode ser fatal. Celulite e Erisipela 1. Definio e fisiopatologia: A celulite uma infeco primria da pele que causa um a placa discretamente endurada, eritematosa e quente, com uma borda avanada. A celulite geralmente causada por estreptococo beta-hemoltico do grupo A, por estafilococos areos, ou por ambos. Geralmente o organismo entra pela pele atravs de uma picada ou fissura e depois, prolifera e se dissemina localmente. Ento estabelecida toda uma gama de imuno- respostas. A erisipela uma forma de celulite produzida por estreptococos do grupo A. Algumas vezes, a erisipela apresenta uma tendncia a recorrer periodicamente, no mesmo local. Com freqncia, so encontradas placas edematosas vermelhas, quentes e intumecidas nas extremidades, mas elas podem ocorrer em qualquer lugar do corpo. Pode existir uma picada ou fissura. Com mais freqncia, a erisipela se localiza na face, com distribuio de borboleta, sobre a ponte de nariz e bochechas. So comuns as recorrncias, resultando em linfedema localizado. Podem ser observados, ainda, febre, calafrios e lassido. A pele afetada pode doer ou arder, mas geralmente dolorosa palpao. A celulite no tratada continua a se espalhar, resultando, eventualmente, em linfadenopatia e septicemia. Se a celulite for devida a uma cepa nefritognica de estreptococo, pode evoluir para uma nefrite. Para diagnstico diferencial importante fazer a diferenciao com urticria e dermatite de contato alrgica, que podem apresentar quadros semlhantes. Nos episdios bactermicos, deve-se fazer uma cultura de sangue.

O tratamento da celulite as faz com antibioticoterapia, durante 7 a 10 dias. Deve-se empregar um derivado semi-sinttico da penicilina associado ou no com cido clavulnico. No caso da erisipela, penicilina V ou eritromicina. O prognstico bom quando antibiticoterapia instituda adequadamente. Foliculites, Furnculos e Antrazes Estafilocccicas Essas doenas so reaes inflamatrias que se desenvolvem ao redor dos folculos pilosos. Estas entidades representam graus de severidade de um mesmo processo inflamatrio. Na foliculite, a inflamao superficial, envolvendo cada folculo. As leses inflamatrias que disso resultam vo desde ppulas e pstulas at cistos sensveis ou abscessos muito inflamatrios. A foliculite pode resultar de vrios fatores diferentes, inclusive frico, agentes qumicos, medicamentos ou infeces. A causa mais comum a infeco local pelo Staphilococos aureus, que provoca a reao inflamatria. Com o avano do processo inflamatrio e a disseminao para fora do folculo a resposta natural do hospedeiro "cercar " o processo, produzindo ndulos ou cistos inflamatrios profundos, conhecidos como furnculos. As leses inflamatrias mais extensas com uma base mais profunda (abscessos), geralmente do tecido subcutneo, so chamados de antrazes. Com relao ao aspecto macroscpico a foliculite caracterizada por ppulas e pstulas foliculares, cercadas de eritema. J os furnculos so ndulos ou cistos sensveis profundos de 1-5cm, que inicialmente so firmes, mas que se tornam flutuantes em poucos dias. Os antrazes so caracterizados por abscessos drenantes sensveis, profundos e eritematosos. Para o diagnstico se faz o esfregao corado com o Gram e a cultura do material pustuloso, obtido por inciso de uma leso, ajuda na escolha correta do antibioticoterapia. O tratamento se baseia desde a boa higeiene e uso de antibiticos tpicos at drenagem de abscessos. Sndrome do Choque Txico

A sndrome do choque txico uma infeco normalmente causada por estafilococos, a qual pode evoluir rapidamente para o choque grave e no tratvel. Em 1978, a sndrome do choque txico foi identificada pela primeira vez como uma sndrome distinta em vrias crianas e adolescentes com idade entre 8 e 17 anos. Em 1980, ocorreu um grande nmero de casos, principalmente em mulheres jovens que quase sempre vinham fazendo uso de tampes. Em 1980, aproximadamente 700 casos foram relatados nos Estados Unidos. Em 1981, aps uma ampla campanha e a retirada no mercado das variedades superabsorventes de tampes, a incidncia da sndrome do choque txico reduziu drasticamente.

Ainda ocorrem casos em mulheres que no usam tampes e em mulheres que acabaram de ser submetidas a cirurgia ou de dar luz. Aproximadamente 15% dos casos ocorrem em homens que foram submetidos a cirurgia. Os casos leves so bastante freqentes. Embora a cepa de Staphylococcus responsvel pela maioria dos casos de sndrome do choque txico seja conhecida, o evento que a desencadeia permanece desconhecido. A presena de um tampo pode estimular as bactrias a produzirem uma toxina que invade o sangue atravs de pequenos cortes no revestimento vaginal ou atravs do tero at o interior da cavidade abdominal. Essa toxina parece ser a responsvel pelos sintomas. Sintomas e Diagnstico Os sintomas comeam subitamente com uma febre de 39 a 40,5 C. Rapidamente, o indivduo passa a apresentar cefalia, dor de garganta, hiperemia dos olhos, cansao extremo, confuso mental, vmito, diarria aquosa e profusa e uma erupo cutnea generalizada semelhante queimadura solar. Em 48 horas, ele tambm pode apresentar desmaios e pode evoluir para o choque. Entre o terceiro e o stimo dia, ocorre descamao da pele, sobretudo da palma das mos e da planta dos ps.

A sndrome causa anemia. comum a ocorrncia de leso renal, heptica e muscular, especialmente durante a primeira semana. Tambm podem ocorrer problemas cardacos e pulmonares. A maioria dos rgos recupera-se completamente aps o desaparecimento dos sintomas. Normalmente, o

diagnstico baseado nos sintomas apresentados pelo indivduo. Embora no exista um exame laboratorial que identifique especificamente a sndrome do choque txico, comumente so realizados exames de sangue para excluir as outras causas possveis dos sintomas. Preveno, Tratamento e Prognstico difcil estabelecer recomendaes precisas para a preveno da sndrome do choque txico. Em geral, as mulheres devem evitar o uso constante de tampes durante a menstruao. Os tampes superabsorventes, os quais apresentam maior probabilidade de causar a sndrome do choque txico, no devem ser utilizados. Uma pessoa com suspeita da sndrome do choque txico deve ser hospitalizada imediatamente. O tratamento iniciado com a remoo do tampo, do diafragma ou de outros objetos estranhos e a antibioticoterapia iniciada o mais rapidamente possvel. Aproximadamente 8 a 15% dos indivduos com sndrome do choque txico completo morrem. Os episdios recorrentes so freqentes em mulheres que continuam a utilizar tampes nos 4 meses posteriores a um episdio, exceto quando a antibioticoterapia conseguiu eliminar os estafilococos.

STREPTOCOCCUS

Introduo Os estreptococos so bactrias Gram-positivas em forma de cocos que se dividem em apenas um plano. Como as bactrias no se separam facilmente aps o plano de diviso, elas tendem a formar cadeias e, assim, podem diferenciar-se dos estafilococos que comumente se dividem em diferentes planos formando grupamentos semelhantes a cachos de uva. So catalasenegativos, o que tambm os diferencia dos estafilococos que so catalase positivos. Constituem a principal populao de microrganismos da cavidade oral (Streptococcus sanguis, Streptococcus mutans), alm de estarem envolvidos em diversas doenas. Entre os sistemas de nomeclatura desenvolvidos para os estreptococos destacam-se aqueles baseados caractersticas hemolticas (de acordo com o

tipo de hemlise observado quando estreptococos so colocados em meios de cultura contendo gar sangue) e antignicas (de acordo com a composio antignica, que a base da classificao em grupos sorolgicos de Lancefield).

Hemlise e estreptococos Estudos mostraram que estreptococos isolados de doenas infecciosas de garganta e de pele freqentemente provocam lise completa das clulas vermelhas do sangue (hemlise). Este fenmeno era identificado em meio gar sangue como uma zona clara ao redor das colnias. Outros estreptococos provocavam um tipo de lise incompleta, na qual as clulas vermelhas se retraem e se tornam esverdeadas (ocorre somente na presena de oxignio devido reduo da hemoglobina). A hemlise incompleta denominada alfa hemlise (-hemlise) e os estreptococos que a produzem foram denominados Streptococcus viridans, enquanto que a lise completa das clulas vermelhas foi denominada beta hemlise (-hemlise) e os organismos que a provocam foram denominados Streptococcus hemolyticus. Atualmente sabemos que esses nomes so inadequados e que existem muitas espcies que causam hemlise alfa, outras causam hemlise beta e algumas espcies produzem os dois tipos de hemlise dependendo da cepa e das condies de crescimento. Existem tambm muitos estreptococos que no so hemolticos, os chamados de estreptococos gama (). Esquema Sorolgico de Grupagem de Lancefield Como a hemlise no era suficiente para distinguir estreptococos causadores de doena, a Dra. Rebecca Lancefield desenvolveu um mtodo sorolgico para a distino dos estreptococos beta hemolticos. A classificao dos

estreptococos em grupos sorolgicos baseia-se nas caractersticas antignicas de um polissacardeo de composio varivel chamado carboidrato C, localizado na parede da clula, que pode ser detectado por diferentes tcnicas imunolgicas como a precipitao em tubo capilar. Tomando por base esse polissacardeo, os estreptococos foram divididos em 20 grupos sorolgicos (grupos de Lancefield) designados por letras maisculas do alfabeto ( A, B, C, D, E, F, G, H, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U e V). Esse mtodo de identificao amplamente aceito para a identificao dos estreptococos beta hemolticos. Entretanto, salvo raras excees, no se mostrou de utilidade prtica para a

identificao de estreptococos no beta hemolticos. Os estreptococos de importncia mdica so divididos em : estreptococos beta-hemolticos ( ou estreptococos piognicos), pneumococos, estreptococos do grupo D e estreptococs viridans.

STREPTOCOCCUS PYOGENES O Streptococcus pyogenes caracterizado pela presena do polissacardeo do grupo A de Lancefield que um polmero de Nacetilglicosamina e ramnose. Ele pode ser dividido em grupos sorolgicos graas presena de duas protenas na sua parede celular, a protena M e a protena T.

Fatores de virulncia Entre os fatores de virulncia relacionados aos Streptococcus pyogenes temos:

- fmbria: possibilita a fixao da bactria mucosa faringoamigdalina; - toxina eritrognica: responsvel pelo eritema da escarlatina; - cpsula: confere resistncia a fagocitose; - protena M: interfere com a fagocitose de modo que amostras ricas nesta protena so resistentes, tornando-se sensveis na presena de anticorpos antiM; cidos lipoteicicos: importantes componentes da superfcie dos

estreptococos do grupo A, formando fmbrias juntamente com a protena M; - peptideoglicano: txico para clulas animais in vitro e in situ; - estreptolisina S: a responsvel pelo halo de hemlise. Estudos recentes sugerem que ela responsvel pela morte de uma parte dos leuccitos que fagocitam o S. pyogenes;

- estreptolisina O: tambm uma hemolisina, mas s ativa na ausncia de oxignio. Parece contribuir com a virulncia do S. pyegenes porque pode lesar outras clulas alm das hemcias. - estreptoquinase, desoxirribonuclease e hialuronidase: so enzimas produzidas pela maioria dos S. pyogenes estando provavelmente envolvidas na patognese das infeces estreptoccicas.

Tipos de infeces

a) Faringite Estreptoccica: O Streptococcus pyogenes responsvel por mais de 90% das

faringoamigdalites bacterianas. A doena caracterizada por um curto perodo de incubao (2 a 3 dias), febre alta (39 a 40C), calafrio, dor de cabea e, frequentemente, vmitos. As tonsilas ficam avermelhadas podendo apresentar exudado supurativo e os ndulos linfticos cervicais aumentam de tamanho tornando-se doloridos. Sugere-se que cerca de 20% dos casos so assintomticos estabelecimento (infeco da subclnica). Na Duas fases ocorre a caracterizam aderncia o dos

infeco.

primeira

microrganismos mediada pelo cido lipoteicico, o qual se liga superfcie das clulas epiteliais via seus lipdios terminais. Existem evidncias de que a protena M e talvez o polissacardeo C estejam envolvidos na aderncia. A seguir, a bactria tem acesso aos tecidos conjuntivos adjacentes, provavelmente via rompimento microscpico do epitlio, promovendo uma resposta inflamatria imediata e vigorosa

desencadeada pelo hospedeiro para eliminar a bactria. Essa resposta caracterizada por um exudato fluido (edema) e principalmente, por um infiltrado celular de leuccitos polimorfonucleares (PMN). Na segunda fase da infeco ocorre o espalhamento, onde os estreptococos se multiplicam rapidamente no tecido conjuntivo. A viscosidade do exudado supurativo mantm a infeco localizada, porm, o S. pyogenes esses produz DNAses, e proteases permitem e o

estreptoquinases

que

hidrolizam

componentes

espalhamento dos microrganismos. Se a infeco no for controlada pela administrao de antibiticos apropriados ou atravs da produo de quantidades suficientes de anticorpos para a protena M, os microrganismos podem penetrar os ndulos linfticos cervicais ou nos seios paranasais, chegando a causar septicemia, ou seja, circulao de bactrias virulentas no sangue. b) Piodermites Fazem parte do grupo das piodermites estreptoccicas a erisipela, o impetigo e a ectima.

 impetigo: a mais caracterstica o impetigo, que se inicia como uma vescula que progride rapidamente para uma leso recoberta por crosta espessa. Aparentemente o S. pyogenes penetra pela pele atravs de leses determinadas por trauma, mordedura de insetos ou por dermatoses. O impetigo no costuma deixar cicatrizes por ser uma infeco superficial e no atingir o tecido subepitelial. O impetigo ocorre com muita freqncia em crianas no vero, sendo de localizao preferencialmente facial, embora muitas vezes predomine nas extremidades, espalhando-se para outras reas do corpo por auto contaminao. Mesmo nas formas extensas raramente o impetigo acompanhado de manifestaes gerais. erisipela: uma infeco estreptoccica aguda de pele envolvendo a mucosas adjacentes algumas vezes. Os locais mais freqentemente

comprometidos so a perna e a face. A leso dolorosa, de colorao vermelha intensa, aparncia lisa e brilhante e forma e extenso variveis. Muitas vezes a epiderme se descola, formando bolhas volumosas e tensas com contedo amarelo-citrino no-purulento podendo evoluir para ulcerao superficial. O mecanismo de transmisso no conhecido mas a bactria parece originar-se das vias areas superiores do prprio paciente. A durao natural do processo de alguns dias, raramente atingindo uma semana, quando ento comea o perodo de regresso da doena at o retorno da pele ao aspecto normal. Em indivduos idosos, a erisipela pode ser acompanhada de bacteremia.

Seqelas - Febre Reumtica: caracteriza-se por leses inflamatrias no supurativas envolvendo corao, articulaes, tecido celular subcutneo e sistema nervoso central. Os indivduos que sofrem um episdio de febre reumtica so particularmente predispostos a outros episdios, em conseqncia deinfeces estreptoccicas subsequentes das vias areas superiores. Evidncias sugerem que a febre reumtica uma doena imunolgica sendo que infeces estreptoccicas no tratadas so seguidas de febre reumtica em at 3% dos casos.

- Glomerulonefrite: pode aparecer depois da faringoamigdalite e das piodermites. Trata-se tambm de uma doena de natureza imunolgica. A freqncia de aparecimento bastante varivel, dependendo muito do sorotipo M do estreptococo causador da infeo prvia. Quando a infeo cutnea causada por um tipo altamente nefritognico, a freqncia pode ser superior a 20%.

Tratamento Vrios antibiticos apresentam boa atividade contra o Streptococcus pyogenes, mas o de escolha a penicilina G. Um aspecto importante da teraputica pela penicilina o fato de que, at agora, no ocorreu seleo de amostras resistentes a esse antibitico, pelo menos em escala significante. Dessa maneira, infeces causadas pelo microrganismo podem ser tratadas sem a necessidade de antibiograma para verificar se a amostra resistente. Recomenda-se o uso de eritromicina para pacientes alrgicos penicilina.

STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE

Essa espcie composta por cocos Gram-positivos com forma de chama de vela, agrupados aos pares. Os pneumococos, em geral, possuem cpsula composta de polissacardeos, cujas diferenas antignicas permitem

caracterizar 84 tipos sorolgicos distintos. A tipagem sorolgica contribui para o rastreamento epidemiolgico das infeces pneumoccicas, evidenciando variaes geogrficas e/ou temporais na prevalncia de diferentes sorotipos. O conhecimento da prevalncia dos vrios sorotipos em uma determinada regio serve de base para o desenvolvimento de vacinas.

Fatores de Virulncia - cpsula: representa o principal fator de virulncia conhecido dos pneumococos em virtude de sua capacidade antifagocitria; - substncia C: no um fator de virulncia mas tem interesse mdico; - adesina: os pneumococos produzem uma adesina que fixa a bactria a receptores glicoproticos existentes nas clulas epiteliais dos aparelhos respiratrio e auditivo;

- pneumolisina: trata-se de uma hemolisina semelhante estreptolisina O do S. pyogenes cujo papel ainda no foi esclarecido; - IgA1 Protease: enzima produzida pelos pneumococos capaz de degradar imunoglobulinas que fazem parte de um importante mecanismo de defesa do hospedeiro; - neuraminidase: so substncias com papel no definido na patognese das pneumococcias.

Tipos de infeces O Streptococcus pneumoniae um dos agentes bacterianos mais

frequentemente associados a infeces graves como pneumonia, meningite, septicemia e otite mdia. Os pneumococos tambm tm sido relacionados a infeces oculares e, ocasionalmente, isolados de fluido peritoneal, urina, secreo vaginal, exsudatos de feridas entre outros espcimes clnicos.

a) Pneumonia: Os pneumococos podem ser normalmente encontrados no trato respiratrio superior de seres humanos. A partir da, eles podem ser aspirados para os alvolos onde a bactria prolifera e determina a reao inflamatria caracterstica da pneumonia. Isso s ocorre se a bactria for capaz de escapar da fagocitose. Nos paciente no-tratados e que sobrevivem infeco, a pneumonia segue curso tpico que termina em cura uma semana aps o seu incio. A cura coincide com o aparecimento de opsoninas sricas especficas que promovem fagocitose do microrganismo envolvido no processo. Cerca de 30% dos pacientes com pneumonia apresentam bacteremia e, em alguns casos, a pneumonia pode causar complicaes como artrite, endocardite e meningite. O indivduo normal geralmente bastante resistente infeo pulmonar pelo pneumococo devido a mecanismos de defesa que incluem o reflexo epiglotal, movimento ciliar, reflexo da tosse, drenagem linftica e os macrfagos que patrulham os alvolos. Assim, os indivduos que adquirem pneumonia esto com os mecanismos de defesa comprometidos. A meningite, alm de surgir a partir de uma pneumonia bacteriana pode ser complicao de otites, sinusites e endocardites.

b) Otites e sinusites pneumoccicas So geralmente infees secundrias a alteraes funcionais no ouvido mdio e seios, sendo causados por pneumococos normalmente presentes nas vias areas superiores.

Tratamento A penicilina ainda o antibitico de escolha, em pacientes alrgicos penicilina usa-se a eritromicina. Nos ltimos anos houve relatos de que muitas cepa tornaram-se resistentes a mltiplos antibiticos, sugerindo transferncia mediada por plasmdeos. Devido ao surgimento de tais cepas e incapacidade de controle da doena em alguns pacientes, uma vacina foi desenvolvida.

ESTREPTOCOCOS DO GRUPO D

Os estreptococos possuidores de antgeno do grupo D eram, antigamente, divididos em duas categorias: os enterococos e os no-enterococos. Com a alocao dos enterococos em uma novo gnero, os estreptococos do grupo D so, atualmente, em termos de importncia mdica, representados pelo Streptococcus bovis. Esses microrganismos so positivos para o teste de bileesculina, para os testes de crescimento na presena de 6,5% de NaCl e produo de PYRase. Apresentam suceptibilidade antimicrobianos , sendo encontrados normalmente no trato gastro intestinal. Existe uma tendncia de se encontrar o S. bovis associado ao cncer de intestino grosso embora no haja evidncia de qualquer relao etiopatognica.

STREPTOCOCCUS VIRIDANS

Os Streptococcus viridans constituem um conjunto de microrganismos de caracterizao menos definida e padronizada que os demais estreptococos. Entre suas principais caractersticas destaca-se: em geral so alfa-hemolticos, no possuem antgenos dos grupos B ou D, no so solveis em bile e a maioria no cresce em caldo contendo altas concentraes de sal. Entre as principais espcies temos: Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus sanguis, Streptococcus mitis e Streptococcus anginosus. A

maioria dessas espcies faz parte da microbiota normal das vias areas superiores, em particular, dos diferentes nichos ecolgicos da cavidade oral. Como agentes etiolgicos so associados bacteremia, endocardite subaguda , abscessos, infees do trato genitourinrio e infees de feridas. As espcies Streptococcus sanguis e especialmente Streptococcus mutans tem papel importante na formao de placa dental devido a sua capacidade de sintetizar glicanas a partir de carboidratos.

COCOS GRAM NEGATIVOS NEISSERIA

O gnero Neisseria compreende vrias espcies de cocos Gram-negativos aerbios, que geralmente se presentam aos pares com os bordos internos achatados ou cncavos, lembrando gros de feijo. Algumas espcies deste grupo so colonizadores normais da mucosa da nasofaringe, so de ocorrncia extracelular e raramente podem causar infeco em determinados rgos, como a Neisseria (agora Branhamella) catarrhalis e a N. sicca, presentes na microbiota da nasofaringe e que no produzem doena e as neissrias pigmentadas (N. subflava, N. flavescens, N. lactamica) que embora no patognicas podem, em raras ocasies, provocar meningite ou endocartite. Duas espcies de neissrias so patognicas para o homem de maneira significante: a Neisseria gonorrhoeae (ou gonococo) e a Neisseria meningitidis (ou meningococo), que so de ocorrncia intracelular e so os agentes etiolgicos da gonorria e da meningite, respectivamente.

MENINGITE Agente Etiolgico Reconhecida desde o incio do sculo XIX como uma doena contagiosa descrita por Vieusseux em 1805, foi somente em 1887 que Weichselbaum isolou a Neisseria meningitidis de um caso de meningite purulenta, sendo esta reconhecida como causa da meningite meningoccica. Este diplococo pode comprometer diversos rgos do corpo humano como o trato respiratrio superior, as articulaes, o sangue (na forma de meningococcemia aguda,

subaguda ou crnica), o pericrdio, a pele, os olhos, a uretra, o reto e, particularmente, o sistema nervoso central.

Caractersticas Morfolgicas do Microrganismo A Neisseria meningitidis (ou meningococo) assemelha-se muito ao gonococo. Os meningococos so cocos ou diplococos, Gram-negativos, com um dimetro de aproximadamente 0,8 m, aerbios estritos, imveis, no esporulados. Ao microscpio ptico, como os gonococos, diferencia-se de outras neissrias saprfitas localizando-se tanto intra como extracelularmente, de biscoito(ou rins). com as

superfcies adjacentes de suas clulas achatadas originando uma forma tpica

Caractersticas Culturais do Microrganismo A N. meningitidis no cresce com facilidade, necessitando de meios de cultura e condies apropriadas. As condies de crescimento timas so obtidas em ambiente mido, a temperatura entre 35 e 37oC e sob atmosfera de 5 a 10% de dixido de carbono. Apresenta bom crescimento em meios especficos como o meio de Mueller-Hinton e o de Thayer-Martin, sendo este ltimo especialmente usado em estudos epidemiolgicos. Nos meios slidos, os meningococos originam colnias transparentes, no pigmentadas, nohemolticas e medindo em torno de 1 a 5 mm de dimetro. Em culturas mais velhas podem ser observadas variaes considerveis na sua forma e tamanho.

Caractersticas Patolgicas A nasofaringe a porta de entrada dos meningococos, onde na maioria das vezes a infeco assintomtica, mas ocasionalmente apresenta

manifestaes clnicas discretas ou podem provocar uma faringite exsudativa. Da nasofaringe (nasofaringite) os microrganismos podem ganhar a corrente sangnea, produzindo uma bacteremia (meningococcemia) com febre alta e leses vasculares, provavelmente determinadas pelas endotoxinas

bacterianas. Nas formas fulminantes, h hemorragia bilateral nas supra-renais, constituindo a sndrome de Waterhouse- Friderichsen. A meningite a complicao mais comum da meningococcemia. Inicia de forma sbita, com

cefalia intensa devido ao aumento da presso intracraniana, vmito em jatos, rigidez da nuca e progride para o coma em pouco tempo. O meningococo a nica bactria cuja infeco pode matar o paciente em algumas horas, pois cerca de 20 a 40% dos pacientes no apresentam sintomas de

meningococcemia.

Diagnstico O meningococo pode ser facilmente isolado do sangue e do lquor em meios de cultura especficos para este microrganismo. - Exame Bacterioscpico Esfregaos preparados com o sedimento do lquor ou de material aspirado de petquias de grande utilidade para o diagnstico. A presena de neissrias tpicas, diplococos Gram-negativos em forma de rins, no interior de leuccitos polimorfonucleares ou no espao extracelular, praticamente garante o diagnstico de meningite meningoccica.

- Cultura O material coletado deve ser semeado imediatamente em meio de gar-sangue aquecido ou meio de Thayer-Martin modificado com antibiticos (VCN: vancomicina, colistina e nistatina), que favorece o crescimento de neissrias e inibe o de muitas outras bactrias. - Sorologia Os anticorpos contra os polissacardeos meningoccicos podem ser dosados pelas reaes de aglutinao do latx, de hemaglutinao ou por sua atividade bacteriana.

Tratamento As penicilinas so as drogas de escolha para o tratamento da meningite meningoccica. Quando as meninges esto inflamadas, estes antibiticos atravessam facilmente a barreira hematoliqurica. No foram encontrados meningococos portadores de plasmdios de resistncia. O cloranfenicol um substituto efetivo para o uso em pacientes alrgicos. A terapia antimicrobiana ir variar de acordo com a apresentao e apresentao da doena e da

resposta do paciente, sendo o tratamento de 10 a 14 dias normalmente eficiente.

GONORRIA Agente Etiolgico A gonorria (do grego gonos, que significa esperma e rhoia, corrimento = espermatorria) definida como uma inflamao do trato urogenital causada pela Neisseria gonorrhoeae, de transmisso predominante sexual, exceto conjuntivites e vaginites infantis. So destrudos rapidamente pelo

ressecamento, luz solar, calor mido e muitos desinfetantes, mas resistem ao congelamento. parasita estrito e, por este motivo, no tem possibilidade de sobrevivncia fora do corpo, por perodo prolongado. O perodo de incubao varivel, sendo comum de 3 a 5 dias podendo chegar a 30 dias.

Caractersticas Morfolgicas do Microrganismos O gonococo um diplococo Gram-negativo de aproximadamente 0,6 m a 1,0 m, imvel, no flagelado nem hemoltico, no esporulados e ao exame de secrees apresenta-se, no interior de fagcitos aos pares com formato oval aproximados nas extremidades, com aspecto de feijo ou gro de caf. Possue cpsula que pode ser evidenciada pela colorao negativa.

Caractersticas Culturais do Microrganismo Aerbio ou anaerbio facultativo, cresce melhor a 35-360C, e exigente nas culturas, necessitando de enriquecimento apropriado e atmosfera com 2 a 10% de dixido de carbono. O uso do meio de cultura de ThayerMartin (garchocolate acrescido de antimicrobianos vancomicina, colistina e nistatina), devido a sua seletividade, melhora a capacidade de isolamento de meningococos e gonococos de stios diversos. Aps 48 horas de incubao, as colnias de gonococos so pequenas e brilhantes, mas aps alguns dias tornam-se brancoacinzentadas e apresentam margens lobuladas. Amostras submetidas a subculturas repetidas formam colnias grandes e avirulentas.

Caractersticas Patolgicas

A infeco gonoccica encontrada apenas em seres humanos e disseminase atravs do ato sexual. Infees de mucosa, particularmente do trato genital, pelo gonococo seguem as seguintes etapas:

- Aderncia e colonizao: A aderncia mediada por fmbrias, sendo somente os gonococos fimbriados capazes de provocar infeces. A colonizao da mucosa facilitada por proteases que clivam a IgA secretora, que poderia bloquear a aderncia do gonococo mucosa;

- Invaso da mucosa: Aps a adeso do microrganismo mucosa, ocorre a penetrao na clula epitelial. No interior da clula o microrganismo transportado para o interior de vacolos passando para o tecido subepitelial;

- Proliferao da bactria no tecido subepitelial: Uma vez que atingiu o tecido subepitelial, com contnua proliferao, ocorre reao inflamatria intensa com abundncia de leuccitos polimorfonucleares.

No homem, a uretrite a principal forma clnica da infeco gonoccica com disria e exudato purulento. A partir da uretra, a infeco pode se estender para a prstata, epiddimo e vescula seminal. Em mulheres, as mudanas no odor e na cor da secreo vaginal e dor abdominal so os principais sintomas da infeco cervical (cervicite). Em at 75% da mulheres infectadas, a doena pode permanecer assintomtica por longos perodos de tempo. A infeco ascende para as trompas de Falpio (salpingite), podendo atingir o peritnio. Essa uma conseqncia sria da infeco gonoccica em mulheres (doena inflamatria plvica).

A infeco gonoccica disseminada caracterizada por febre, artralgia, artrite, tenossinovite, erupes na pele, endocardite e meningite e ocorre entre 1:300 a 1:600 casos de gonorria genital, sendo que esta forma de doena seis vezes mais prevalente na mulher. Casos de esterilidade decorrentes da doena e tambm infeco farngea gonoccica so relatados. Em crianas, a infeco mais comum a conjuntivite neonatal adquirida durante a passagem pelo canal de parto infectado, que acomete rapidamente as estruturas do olho e leva

perda da viso, que pode ser prevenida com a instilao de nitrato de prata no saco conjuntival do neonato.

Diagnstico Atravs das secrees colhidas da uretra, colo uterino, prstata, mucosa retal ou farngea, realiza-se exame bacteriolgico, isolamento e identificao de N. gonorrhoeae para diagnstico da doena. - Exame Bacterioscpico A colorao de Gram dos esfregaos podem revelar um quadro microscpico bastante caracterstico nos casos agudos masculinos, com presena de diplococos Gram-negativos de morfologia tpica intra e extra-celulares. Nos casos masculinos duvidosos e em infeco gonoccica na mulher, a bacterioscopia apresenta valor bastante limitado, sendo necessrio isolamento e identificao do gonococo para estabelecer o diagnstico de gonorria. - Cultura A cultura deve ser feita imediatamente aps a coleta, semeando-se a amostra em meio enriquecido (como o meio de Thayer-Martin com vancomicina, colistina e nistatina) seletivo para gonococos e meningococos, nas condies exigidas pelo microrganismo. A identificao do gonococo feita atravs de provas bioqumicas, como as reaes de oxidao e fermentao. A demostrao dos resultados em cultura demorada e as vezes difcil, sendo justificado o uso dos resultados bacterioscpicos, sintomas clnicos, inqurito epidemiolgico para o rpido incio do tratamento de casos suspeitos.

- A presena de DNA gonoccico em secrees uretrais de pacientes com gonorria, pode ser detectada por meio de sonda gentica, preparada com plasmdeo crptico que transportado pela maioria das amostras de bactrias.

Tratamento As drogas de escolha para o tratamento das infeces gonoccicas continuam sendo as penicilinas, quando o microrganismo sensvel a estes antibiticos. Devido ao aumento da freqncia de cepas de N. gonorrhoeae produtoras de penicilinases, o cotrimoxazol, a espectinomicina e algumas cefalosporinas de terceira gerao (ceftriaxone) so utilizados para o tratamento destas

infeces. Para o tratamento das gonorrias extravaginais necessrio perodos longos de terapia e, algumas vezes, a hospitalizao do paciente. ENTEROBACTERIACEAE

Apesar do nome enterobactria significar bactria do intestino, fundamental que se considere a famlia Enterobacteriaceae participando de apenas uma parte dos germes que vivem no intestino.

As enterobactrias so bacilos Gram negativos (BGN) amplamente distribudos no solo, gua plantas e no intestino do homem e animais. Podem causar infeces intestinal e extra-intestinal.

O choque endotxico uma manifestao letal da infeco por bactrias gram negativas. As endotoxinas so lipopolisacrides farmacologicamente ativos, contidos no interior das paredes celulares das Gram negativas.

possvel evitar perda de tempo em identificaes errneas realizando-se observaes preliminares. Com poucas excees, as enterobactrias tm as seguintes caractersticas:

No possuem esporos. (esporos so formas de resistncia) Geralmente so mveis Fermentao da glicose Oxidase negativa Reduo de nitrato a nitrito So fermentadoras de glicose

O que vem a ser bactrias fermentadoras de glicose? Por definio, fermentao um processo metablico de xido-reduo. Nas provas bioqumicas, esse processo detectado pela observao da mudana de cor por indicadores de pH como conseqncia da formao de produtos cidos. A acidificao do meio de prova pode ocorrer atravs da degradao

de carboidratos por vias diferentes que no a fermentao. Todas as enterobactrias fermentam a glicose formando cido pirvico.

O teste de oxidase pode ser observado utilizando-se fitas de oxidase. A presena de pigmentao prpura significa que a bactria possui a enzima citrocromo oxidase (oxidase +). Bactrias que no possuem a enzima so oxidase , no apresentando pigmentao nas fitas de oxidase.

Outras provas bioqumicas utilizadas para a identificao de enterobactrias so: citrato de Simmons, teste da urease, indol, surraco, malonato, o meio de SIM e a pesquisa da triptofano desaminase.

As enterobactrias podem causar epidemias de doenas diarricas, (gnero Shigella e Salmonella, E. coli enteropatognica e Escherichia coli toxignica, e a Yersnia enterocoltica).

Outros grupos que so considerados ocasionalmente patognicos, por exemplo: Edwarsiella, Proteus, Providencia, Morganella, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Citrobacter Estrutura Antignica Antgenos O Constituem a parte mais externa do lipopolissacardeo da parede celular. So resistentes ao calor e ao lcool. So detectados por aglutinao bacteriana. Os anticorpos predominantes contra Ag O so da classe IgM.

Estrutura Antignica Antgenos K So externos aos Ag O em algumas bactrias entricas. Podem ser polissacardeos ( E.coli )ou protenas. Esto associados virulncia da bactria. As cepas de E.coli produtoras de K1esto associadas a meningite neonatal.

 Os Ag K da E.coli promovem a fixao da bactria a clulas do trato gastrointestinal e do trato urinrio.

Estrutura Antignica Antgenos H Localizam-se nos flagelos. So desnaturados ou removidos pelo calor ou lcool. Os anticorpos predominantes contra o Ag H so da classe IgG.

Colicinas Substncias produzidas por certas cepas de bactrias e ativa contra outras cepas da mesma espcie ou de espcie relacionada. Produo controlada por plasmdios.

ESCHERICHIA COLI I INTRODUO Escherichia coli um dos microrganismo tido como habitante natural da flora microbiana do trato intestinal de humanos e da maioria dos animais de sangue quente, sendo portanto, normalmente encontrado nas fezes destes animais. Muitas cepas de Escherichia coli no so patognicas. So classificados como bastonetes retos, Gram negativos, no formadores de esporos, 2.0 6.0 m, x 1.1 1.5 m, possuem motilidade atravs de flagelos ou so imveis. So anaerbios facultativos e utilizam D-glicose e outros carboidratos com a formao de cido e gs. So oxidase negativa, catalase positiva, vermelho de metil positivo, Voges-Proskauer negativo e geralmente citrato negativo. So negativos para HS, hidrlise de uria e lipase

Existem basicamente quatro diferentes grupos de Escherichia coli que tem sido relacionados com surtos de infeco alimentar, sendo classificados de acordo com:
o o o o o

Propriedades de virulncia; Sorotipos O:H; Interaes com a mucosa intestinal; Sndrome clnica; Epidemiologia;

As espcies so classificadas por sorotipagem, usando anticorpos, especialmente contra antgenos "O" somtico e "H" flagelar, de vrias cepas ( Reed, l994 ). Os principais grupos de Escherichia coli so:
o

Escherichia coli enteropatognica ( EPEC ):

A primeira delas conhecida como Escherichia coli enteropatognica (EPEC), e conhecida como causadora de surtos de diarria neonatal que ocorre freqentemente em berrios hospitalares. Muitos adultos possuem EPEC no trato intestinal, porm no expressam os sintomas da doena. Acredita-se que adultos adquirem imunidade a este microrganismo. O mecanismo de patogenicidade da EPEC no esta completamente definido, mas acredita-se que a aderncia mucosa intestinal seja um importante fator para a colonizao do trato intestinal. Estudos "in-vivo" tem mostrado que cepas de EPEC possuem um tipo especfico de ligao e facilidade de aderncia mucosa das clulas epiteliais intestinais. A bactria destri as microvilosidades sem invaso posterior e adere intimamente membrana das clulas intestinais, com a membrana envolvendo parcialmente cada bactria (Doyle, l991 ).
o

Escherichia coli enteroinvasiva ( EIEC ):

Outro grupo de Escherichia coli patognicas so as enteroinvasivas

( EIEC ). A EIEC tem um comportamento patolgico muito semelhante a Shigella. Os sintomas so calafrio, febre, dores abdominais e disenteria. A dose infectante alta, geralmente 10 6 10 8 microrganismos/g ou ml. O perodo de incubao varia de 8 a 24 horas com mdia de 11 horas e a durao da doena usualmente de vrios dias. O curso da infeco muito semelhante ao da Shigelose. O microrganismo invade clulas do epitlio intestinal, multiplica-se dentro destas clulas e invadem clulas epiteliais adjacentes provocando ulceraes do clon, resultando finalmente em diarria de sangue. Aproximadamente 11 sorotipos so responsveis por infeces de EIEC e o principal deles O: 124.

Escherichia coli enterotoxignica ( ETEC ):

A Escherichia coli enterotoxignica ( ETEC ) geralmente mais associada " diarria do viajante" do que a doenas alimentares nos Estados Unidos. Os sintomas de ETEC so similares aos da clera: diarria aquosa, desidratao, possivelmente choque, e algumas vezes vmito. A dose infectante muito alta estando entre 10 8 e 10 10 microrganismos. O perodo de incubao varia de 8 a 44 horas, com mdia de 26 horas e a durao da doena curta, aproximadamente 24 a 30 horas. Produz uma ou mais toxinas, que vo agir no intestino delgado induzindo a libertao de fluido. No ocorre invaso nem dano camada epitelial do intestino delgado, apenas ocorre colonizao e produo O microrganismo coloniza a superfcie epitelial do intestino delgado. Trs fatores so necessrios para que ETEC cause diarria em um hospedeiro. Primeiro, o microrganismo deve ser toxignico, ou seja, deve ou duas toxinas. Segundo, o hospedeiro deve ingerir um nmero suficiente de clulas ( 106 ou mais ) para que ocorra a doena. E finalmente, o microrganismo deve estar em contato com a mucosa do intestino delgado. Isto alcanado atravs de fatores de colonizao. Estes fatores de colonizao so fimbriais bastante especficas,

proteinceas, de estrutura semelhante ao cabelo, no flagelar, mas simplesmente prolongamentos filamentosos na superfcie da clula, que permite a adeso da ETEC mucosa do epitlio intestinal. Diversos tipos de fatores de colonizao tem sido identificados, e demonstrando ser bastante espcie especficos ( Doyle e Cliver, 1990 ). Pode haver produo de um ou dois tipos de toxinas, dependendo do plasmdio contido. Uma toxina termo-lbil, e inativada por aquecimento 60C por 30 minutos. Esta toxina muito semelhante toxina da clera e pode ser neutralizada com antitoxina para toxina da clera por serem imunologicamente relacionadas. O segundo tipo de toxina produzido por alguns tipos de ETEC termo-estvel e pode resistir temperatura de 100C por 30 minutos. Vrios surtos de toxinfeco alimentar devido ETEC tem sido relatados. No Estado de Wisconsin em 1980, mais de 400 pessoas se tornaram doentes aps a ingesto de alimentos de um restaurante mexicano. Foi determinado que a contaminao ocorreu atravs de um dos cozinheiros, que apresentava quadro diarrico durante um perodo de duas semanas antes do surgimento do surto ( Doyle e Cliver, 1990).

Escherichia coli enterohemorrgica ( EHEC ):

O quarto grupo de Escherichia coli o das enterohemorrgicas. Entre os grupos patognicos de Escherichia coli, este provavelmente o mais importante em termos de infeces alimentares, e o principal sorotipo envolvido o O157:H7. nte O microorganismo mais sensvel ao calor que isolados tpicos de Salmonella. ( Tabela 2 ) ( Doyle e Schoeni, 1984 apud Padhye e Doyle, 1992 ).

SALMONELLA

A nomenclatura das salmonelas complexa e controversa. Diferentes sistemas de classificao so utilizados que, incosistentemente dividem o gnero Salmonella em sub-gneros, espcies, sub-espcies, grupos, sub-grupos e sorotipos (sorovares), causando confuso. As salmonelas so bacilos Gram-negativos, anaerbios facultativos

caracterizados pelos antgenos O, H e Vi. H mais de 2.463 sorotipos conhecidos de Salmonella. Em um dos dos sistemas de classificao adotado, os diferentes sorotipos so considerados variedades de uma mesma espcie, a Salmonella enteritides. Em outro, cada sorotipo considerado uma espcie separada - o que legaria ao gnero Salmonella mais de duas mil espcies diferentes. Espcies de Salmonella causam gastrenterites e febre tifide, doenas que resultam em grande morbidade e mortalidade em todo o mundo. Uma caracterstica importante da patogenicidade das salmonelas a capacidade de invadir clulas do hospedeiro e manterem-se como parasitas intracelulares no interior de um vacolo membranosa. Este vacolo se desvia do caminho endoctico normal antes da fuso com um lisossomo. Salmonelas patognicas ingeridas com gua ou alimentos contaminados sobrevivem passagem pela barreira cida do estmago e invadem as clulas da mucosa dos intestinos delgado e grosso e liberam toxinas. A invaso das clulas epiteliais intestinais estimula a liberao de citocinas que

induzem uma resposta inflamatria aguda. A reao inflamatria na mucosa intestinal induz diarria e pode levar ulcerao e destruio da mucosa intestinal. Da mucosa, a bactria pode disseminar-se para rgos internos causando doena sistmica. Existem trs formas bsicas de salmoneloses: gastrenterites, septicemia e febres entricas. As gastrenterites so formas benignas, descomplicadas e auto-limitadas de salmonelose e so caracterizadas por diarria, clicas abdominais e febre. Essa doena geralmente causadas por Salmonella typhimurium. As gastrenterites causadas por Salmonella afetam humanos e animais em todo o mundo. Os animais so os principais reservatrios e a doena est geralmente associada a alimentos manipulados sem condies adequadas de

higiene e ingeridos mal-cozidos (intoxicao alimentar). As salmoneloses podem ser transmitidas de pessoa a pessoa, que por ingesto acidental de com matria fecal contaminada (contgio direto) que por ingesto de gua notratada (contgio indireto). O perodo de incubao para a gastrenterite depende da quantidade de bactrias ingeridas. Os sintomas comeam de 6 a 48 horas aps a ingesto de alimento ou gua contaminada e duram de 2 a 7 dias. Portadores humanos assintomticos podem disseminar a doena.

Salmoneloses so causa comum de prejuzos econmicos na pecuria, em todo mundo. A septicemia pode ser um estgio intermedirio de infeco no qual o paciente no experimenta sintomas intestinais e a bactria no isolada das fezes. As febres entricas so formas sistmicas graves e o tipo mais bem estudado a febre tifide causada por Salmonella tiphy, mas qualquer outra espcie, ou sorotipo, pode potencialmente causar essa doena. Os sintomas iniciam aps uma perodo de incubao de 10 a 14 dias e podem ser precedidos por gastrenterites que usualmente terminam antes do incio da doena sistmica. Os sintomas no so especficos e incluem febre, anorexia, dor de cabea, does musculares e constipao. Essa forma da doena pode ser fatal se um tratamento com antibiticos no for prontamente iniciado para prevenir o choque endotxico. Uma grande preocupao o crescente aumento do isolamento de linhagens de S. typhi, associadas a surtos de febre tifide, apresentando resistncia mltipla a drogas, comprometendo a terapia com antibiticos Pesquisas para o desenvolvimento de uma vacina contra segura e eficaz contra a febre tifide esto sendo desenvolvidas h vrios anos.

Salmoneloses devem ser consideradas em qualquer diarria aguda ou doena febril sem causa obvia. O diagnstico confirmado pelo isolamento de salmonelas de espcimes clnicos tais como fezes ou sangue.

A severidade da infeco e se esta permanecer localizada no intestino ou se se tornar sistmica pode depender da resistncia do paciente e da virulncia da bactria causadora. Salmonella typhimurium A bactria Salmonella typhimurium um dos 2.463 sorotipos (sorovares) de Salmonella enteritidis. A designao tcnica correta para esta bactria seria Salmonella enteritidis var. typhimurium, mas a denominao Salmonella typhimurium mundialmente consagrada pelo uso, tanto na microbiologia como na medicina. Em humanos, a S. typhimurium causa comum de gastrenterites usualmente benignas e auto-limitadas. A doena causada por S. typhimurium no perigosa mas, em qualquer grande surto alguns bitos ocorrem entre aqueles que desenvolvem a grave forma sistmica. A salmonelose ocorre pela ingesto de alimento (insuficientemente cozido) ou gua contaminados com a bactria. A contaminao de alimentos

(notadamente aves, ovos, leite e seus derivados) d-se principalmente pelo seu manuseio sem condies adequadas de higiene. A contaminao da gua dse pela despejo de dejetos humanos contendo a bactria em fontes de gua que servem a uma comunidade. A maioria das infeces ocorre em crianas com menos de 10 anos de idade. Neste grupo e em adultos imunodeprimidos (em tratamento quimioterpico contra o cncer ou com AIDS) os sintomas so mais severos e a doena tem maior probabilidade de tornar-se sistmica.

Salmonella typhi Salmonella typhi estreitamente relacionada a Salmonella typhimurium. Estudos de hibridizao e comparaes de seqncias de DNA conhecidas dos dois microrganismos, revelaram que a similaridade mdia de seqncia de DNA entre estas bactrias de cerca de 98 a 99%, o suficiente para que sejam consideradas da mesma espcie.

S. typhi uma bactria invasiva que causa a febre tifide. A doena caracteriza-se por febre alta, rubor, diarria, vmito, desidratao, anorexia, convulses e delrios. Os sintomas da febre tifide so provavelmente devidos liberao de citocinas mediada pelo LPS, que, provavelmente, um importante fator de virulncia em S. typhi por contribuir para a resistncia ao do complemento e desempenhar uma funo importante na colonizao do epitlio intestinal, e a causa de bito em pessoas com infeco sistmica, devido ao choque endotxico que provoca. A doena acontece pela ingesto de alimento (insuficientemente cozido) ou gua contaminados com a bactria. A contaminao de alimentos

(notadamente aves, ovos, leite e seus derivados) d-se principalmente pelo seu manuseio sem condies adequadas de higiene. A contaminao da gua dse pela despejo de dejetos humanos contendo a bactria em fontes de gua que servem a uma comunidade. A bactria inicia a infeco aderindo-se e invadindo clulas mucosa intestinal da alcanando rgos internos do hospedeiro, tais como fgado, bao e corrente sangunea. A bactria pode persistir na vescula biliar tornando o paciente um portador crnico. Os portadores crnicos disseminam a bactria no ambiente, atravs das fezes, por meses ou anos aps a colonizao inicial. Estes indivduos so um srio problema de sade pblica, principalmente quando manipulam alimentos profissionalmente.

SHIGELLA

Bastonetes gram negativos. Em culturas, apresentam-se em formas cocobacilares. Anaerbios facultativos. Formam colnias convexas, circulares e transparentes, com bordas regulares. Fermentam glicose. Formam cidos a partir de carboidratos, sem gs.

Espcies Patognicas S. sonnei. S. dysenteriae. S. flexneri. S. boydii.

Patogenia e Patologia

As infeces limitam-se ao trato gastrointestinal. So altamente contagiosas. Ocorre invaso da mucosa atravs de fagocitose induzida, escape do vacolo fagoctico, multiplicao e disseminao no citoplasma e passagem para clulas adjacentes. Formao de microabscessos no intestino grosso e ileoterminal com necrose da mucosa , ulcerao superficial, sangramento e formao de pseudomembrana na rea ulcerada.

Toxinas Endotoxina: Autlise com liberao de lipopolissacardeo txico que provoca irritao da parede intestinal. Exotoxina de Shigella dysenteriae Afeta sistema nervoso central e intestino. Protena antignica que estimula a produo de antitoxina. Inibe a absoro de acar e de aminocidos no intestino delgado.

VIBRIO CHOLERAE

O Vibrio cholerae, tambm conhecido como vibrio colrico, o agente causador da clera. Esta bactria membro do gnero Vibrio, da famlia Vibrionaceae. foi descoberto em 1883 por Robert Koch, e deve su nome sua

aparncia quando observado ao microscpio ptico. membro do gnero Vibrio, da famlia Vibrionaceae. As cerca de 30 espcies includas nesse gnero so bastonetes gram-negativos, anaerbios facultativos, mveis, curvados em forma de vrgula, possuindo de 1,4 a 2,6 micrmetros de comprimento. O V. cholerae pode ser encontrado naturalmente em diversos ecossistemas, na forma de vida livre ou aderido a superfcies de plantas, algas verdes filamentosas, zooplncton, crustceos e insetos. A espcie tambm pode ser encontrada dentro de comunidades multicelulares conhecidas como biofilmes, estruturas embebidas por uma matriz extracelular polissacardica que as defendem das agresses ambientais. A espcie V. cholerae bem definida com base em testes bioqumicos e estudos de homologia de DNA, porm, apenas um grupo restrito de linhagens patognico ao homem. Cepas de Vibrio cholerae de vida ambiental so, em geral, no patognicas, podendo desenvolver a habilidade de adaptao ao intestino humano atravs da aquisio de genes de virulncia. O V. cholerae tem baixa tolerncia a cidos, e cresce a um pH de 8.0 a 9.5 (o qual inibe muitas outras bactrias Gram-negativas). diferenciado de outros vibries pelas suas caractersticas metablicas, pela estrutura do antgeno O, e pela produo de uma potente endotoxina. As espcies patognicas se limitam aos sorogrupos O1 e 0139 (encontrado nasia) e variante eltor (encontrada na Amrica Latina). Esta ltima variante apresenta uma sobrevida maior na natureza, e por suas caractersticas de patogenia, capaz de produzir com maior freqencia infeces subclnicas --- caractersticas que dificultam seu controle epidemiolgico. outras cepas, designadas como no O1, no O139, se associam a quadros menos freqentes, mais brandos e no epidmicos de diarria. A principal caracterstica do V. cholerae sua capacidade de produzir uma potente enterotoxina, cujo exato mecanismo de ao ainda desconhecido. Estudos indicaram que uma cepa defectiva na produo desta toxina poderia ser utilizada na produo de vacinas; entretanto, em estudos com voluntrios estas cepas foram capazes de produzir diarria, levando a crer que o V.

cholerae produz outras toxinas. Estas incluem a toxina zot e a toxina ace, ligadas aos genes ctxA e ctxB no cromossomo bacteriano.

PROTEUS

O gnero Proteus classificado como membro da famlia Enterobacteriaceae, um bacilo gram-negativo mvel e fermentador de acares. Sua principal caracterstica a formao de swarming. Podem ser encontrados em solos, guas e intestino de animais e homens. Quando em condies favorveis a sua proliferao, pode se tornar um agente patognico importante, sendo a terceira causa de infeco urinria. Proteus um freqente agente de infeces nosocomiais, principalmente em pacientes de unidades de terapia intensiva (UTIs).

A bactria P. mirabilis freqentemente encontrada em infeces humanas, sendo responsvel por 70% a 90% de todas as infeces por Proteus no homem. As espcies vulgaris e penneri causam tipos similares de infeces ao P. mirabilis, e esta caracterstica se deve ao fato de o habitat e fatores de virulncia serem semelhantes, entretanto, so isolados menos freqentemente e podem ser menos virulentos. Foram encontrados em carne em putrefao, esgotos, muito constantemente nas fezes de humanos e animais; no solo de jardins e em vegetais.

Vrios fatores contribuem para a virulncia do Proteus mirabilis. Entre eles podemos citar: rpida multiplicao na urina, produo da enzima urease, habilidade de invadir clulas de mamferos, produo de hemolisinas, presena de fmbrias e produo de proticinas.

O local mais comum de infeces o trato urinrio e P. mirabilis o mais encontrado como agente etiolgico. A virulncia do P. mirabilis para o trato urinrio se deve conjuno de diversos fatores de virulncia dentre os quais o mais importante a urease, uma enzima citoplasmtica que contm nquel e induzida somente pela uria. Esta enzima hidrolisa a uria em amnia e dixido

de carbono. Esta reao pode ser importante para a bactria por prov-las de uma boa fonte de nitrognio para o crescimento na urina. Entretanto, a formao de amnia tambm leva alcalinizao da urina, e com pH acima de oito, ons de clcio e magnsio so precipitados na forma de cristais de estruvita e diapatita carbonato. Estes so ligados por polissacardeos ou glicoclix e formam pedras de rim e bexiga.

IDENTIFICAO DE ENTEROBACTERIACEAE As enterobactrias aparecem ao Gram como bastonetes Gram negativos. Devido ao pleomorfismo destas bactrias elas aparecem como bacilos curtos ou alongados, espessura mais fina ou mais grossa, ou seja das mais variadas formas.

CULTURA As Enterobacteiaceae crescem nos meios de cultura habituais como por exemplo: gar sangue, gar chocolate e pois um meio especfico para BGN que o Mac Conkey.

SEQUENCIA DE IDENTIFICAO DE ENTEROBACTRIAS As amostras so encaminhadas ao laboratrio para cultura. Em seguida so semeadas em meio de cultura. Dependendo da amostra ser escolhido os meios de cultura mais adequados.

Aps o crescimento bacteriano, se a enterobactrias tiver crescido em meio de agar sangue ou agar chocolate deve-se fazer o Gram para confirmarmos se realmente se trata de um Bastonete Gram Negativo. Se o meio for Mac Conkey no h necessidade de se fazer Gram, pois no Mac Conkey s cresce BGN. Neste caso devemos observar a morfologia da colnia para certificarmos que se trata de uma mesma bactria. Aps a confirmao de BGN, faz-se ento as provas bioqumicas para BGN, que podem ser:

CAMPYLOBACTER

Campylobacter um microrganismo Gram-negativo, geralmente de forma espiralada, no formador de esporos que causa doena no homem e em animais. A maioria das infeces humanas causada pelo Campylobacter jejuni. Esse microrganismo comum em aves, que albergam esse microrganismo sem ficarem doentes. Campylobacter um microrganismo muito frgil, no suportando a desidratao e a presena de oxignio. O congelamento reduz o nmero de Campylobacter presente nas carnes cruas. O Campylobacter jejuni um microrganismo que pode ser facilmente encontrado na gua, alimentos e intestinos do homem e da maioria dos animais domsticos e de vida livre. A maioria das doenas causadas por Campylobacter ocorre devido ao manuseio de carne de frango crua ou ingesto de carne de frango crua ou mal cozida. Um nmero relativamente pequeno de clulas vivas (menos de 500) de Campylobacter pode causar infeco em humanos. Uma das formas de se infectar cortar carne de frango em uma tbua e, em seguida, usar a mesma tbua para cortar alimentos que sero consumidos crus ou pouco cozidos, como hortalias e legumes, pois o Campylobacter presente na carne crua pode contaminar os outros alimentos. Esse microrganismo geralmente no transmitido de pessoa para pessoa, mas isso pode ocorrer quando a pessoa doente uma criana ou quando a diarria muito intensa. Grandes surtos de infeco por Campylobacter conhecidos foram causados por leite no pasteurizado e gua contaminada. Os animais tambm podem ser infectados, e as pessoas podem adquirir a infeco atravs do contato com as fezes de cachorros e gatos doentes.

O Campylobacter a causa mais freqente de gastroenterites agudas veiculadas por alimentos causando febre, dores abdominais e diarrias aquosas ou muco sanguinolentas com presena de leuccitos. A

Campilobacteriose tem durao mdia de uma semana e atinge a estimativa alarmante de 2,4 milhes de indivduos a cada ano de acordo com CDC

(Center for Disease Control and Prevention). Bactrias definidas como bastonetes gram negativos, no esporognicos, oxidase positivo, urease negativo, catalase positivos e microaerfilos, exigindo concentraes baixas de oxignio e altas de dixido de carbono, a espcie jejuni responsvel por 99% das doenas humanas causadas por Campylobacter, sendo o 1% restante distribudo entre outras espcies como C. coli, C. lari, C. fetus, C. hyointestinalis, C. cinaedie e C. fenneliae.

CLOSTRIDIUM

Generalidades

A palavra Clostrdio origina-se do latim clostridium = fuso. Os clostrdios so bastonetes, a maioria anaerbios obrigatrios, mas algumas crescem em condies microaerfilas. So Gram positivos, mveis e grandes. Muitos decompem protenas e/ou formam toxinas.

Habitat Distribuio ubqua. Tm como habitats preferenciais o trato gastrointestinal de animais e seres humanos e em pele e tecidos moles.

Caracterstica do crescimento Por ser anaerbio, incapaz de utilizar o O2 como aceptor final de hidrognio. Estes organismos carecem de citocromo e de citocromo-oxidase sendo incapazes de degradar o perxido de hidrognio, uma vez que no possuem catalase. Dessa forma, o perxido tende a acumular-se em concentraes txicas quando na presena de O2. Os clostrdios tambm carecem de superxido desmutase permitindo o acmulo do nion txico superxido.

Esses microorganismos s conseguem realizar seu metabolismo normal quando sujeitos a um potencial de reduo negativo, isto , fortemente redutor (ex: ausncia de O2). Podem fermentar acares, digerir protenas e ainda formar toxinas.

Cultura Crescem apenas em condies anaerbias de cultura: 1. Placas de gar ou tubo de cultura so colocados em ambientes hermeticamente fechados nos quais o ar substitudo por nitrognio com CO2 a 10% (o O2 tambm pode ser eliminado por outros mtodos como Gaspack). 2. Meios lquidos colocados em tubos profundos contendo tecido animal ou gar de um agente redutor como o tioglicolato. Dessa forma o crescimento bacteriano se dar de baixo para cima, j que a superfcie est exposta ao ar.

Formas de colnias Colnias elevadas com margens bem delimitadas (Clostridium

perfringens) Colnias menores que se estendem em redes de filamentos finos (Clostridium tetani) Muitos clostrdios deixam no meio de cultura, zona de hemlise (Clostridium perfringens no gar sangue)

Motilidade A maioria dos Clostrdios mvel possuindo flagelos peritrquios. Exceo: Clostridium perfringens.

Formao de endoesporos Normalmente o esporo tem um dimetro maior que o bastonete dos quais se formaram. Pode ter localizao central, subterminal ou terminal.

Esporulao

1. Material nuclear espalhado 2. Formao do filamento de DNA 3. Invaginao da membrana citoplasmtica para formar o pr-esporo 4. Septo do pr-esporo completo 5. Desenvolvimento completo do pr-esporo 6. Capa do esporo sintetizada e crtex completo 7. Lise da clula me (esporngio) 8. Os esporos livres germinam e crescem para formar a clula vegetativa. Quando os esporos so liberados da clula me, podem sobreviver ao calor, ao dessecamento intenso e a exposio a diversos compostos qumicos txicos. O que leva a essa resistncia tem sido alvo de diversas pesquisas.

No entanto, acredita-se que os fatores que conferem a resistncia so: Presena de enzimas termoestveis Ausncia de gua livre Alto contedo de minerais como o clcio Presena de cido dipicolnico (DPA).

O processo de esporulao pode ser induzido por: Ligeira variao de temperatura e pH em relao aos valores timos para o crescimento da clula vegetativa Aumento da disponibilidade de O2. Composio do esporo (de fora pra dentro) - Exsporo Uma camada fina e delicada, a mais externa. - Capa do esporo Camada formada por varias protenas - Crtex Formado por peptideoglicano fracamente cruzado - Core

Transformao do esporo em clula vegetativa germinao

1. Ativao: quando ativado pelo calor ou substncias qumicas ocorre a quebra da permeabilidade do esporo, ruptura qumica da capa e do crtex e a ativao do metabolismo de carboidratos. 2. Germinao: um sulco criado na capa do esporo servindo para a entrada de gua. Esta causa a oxidao da glicose, o consumo de O 2 e a eliminao de parte da massa seca do esporo. Ocorre a perda de resistncia do esporo. 3. Crescimento: significativo intumescimento do esporo, com formao de membrana e parede celular. A clula recm formada emerge da capa e alonga-se.

TTANO

Agente Etiolgico: Clostridium tetani.

um bacilo mvel, Gram positivo encontrado no solo de todas as partes do mundo e no trato gastro-intestinal de muitos animais, incluindo os seres humanos.

Produz endsporo oval terminal, o que lhe confere uma forma inquestionvel de raquete. Sua temperatura tima de crescimento de 37C. So metabolicamente inativos e tm uma extrema sensibilidade toxicidade do oxignio, o que torna o crescimento e identificao do microorganismo difcil.

Patogenia O Clostridium tetani produz duas toxinas: uma hemolisina oxignio-lbil (tetanolisina) e uma neurotoxina termolbil (tetanospasmina). A tetanospasmina sintetizada durante a fase estacionria de crescimento, liberada quando a clula lisada e a responsvel pelas manifestaes clnicas do ttano. Essa neurotoxina codificada por

plasmdeos e sintetizada como um polipeptdio de cadeia simples, com 150KDa. Esse polipeptdio clivado por proteases bacterianas e do hospedeiro em duas cadeias, uma de 100KDa que dita pesada, e outra de 50KDa e dita leve. A cadeia pesada liga-se a um receptor de superfcie sobre a membrana neuronal e atua bloqueando a liberao de neurotrasmissores e sinapses inibitrias, causando assim uma desregulao da atividade sinptica excitatria (paralisia espstica). A ligao da toxina irreversvel, de modo que a recuperao depende da formao de novas terminaes axoniais. Porm, ao contrrio do Clostridium botulinum, no h interferncia na transmisso da acetilcolina. A cadeia leve da toxina internalizada em compartimentos semelhantes ao endossoma e transportada das terminaes nervosas perifricas para o sistema nervoso central por transporte axonal retrgrado. A doena ocorre aps a introduo dos esporos na leso, que em baixo potencial redox so capazes de germinar e multiplicar-se.

A toxina liberada no organismo aps a lise celular e ento se liga a junes neuromusculares dos neurnios motores para ento serem

endocitadas. Por transporte retrgrado, atravs dos axnios, a tetanospasmina chega ao sistema nervoso central e ento impede a liberao de neurotrasmissores bloqueando os impulsos inibitrios aos neurnios motores, e conseqentemente levando a uma paralisia espstica.

Sintomatologia / Manifestaes Clnicas O perodo de incubao do ttano varia de poucos dias a algumas semanas, e a durao desse perodo est diretamente relacionada distncia entre a infeco primria da ferida e o sistema nervoso central. Existem vrias formas de ttano: Generalizado, que a forma mais comum. Na maioria dos casos o primeiro sinal e o comprometimento do msculo masseter que recebe o nome de trismo. O riso sardnico, devido contrao contnua dos msculos faciais tambm outra caracterstica marcante. Outros sinais

como sudorese, salivao irritabilidade e espasmos dorsais persistentes (oposttono), so caractersticas marcantes do ttano generalizado. No caso de doena mais grave, o sistema nervoso tambm afetado, e os sinais e sintomas incluem arritmias cardacas, flutuao da presso arterial, sudorese acentuada e desidratao. Localizado, em que a doena permanece restrita musculatura no local da infeco primria. Ceflico, em que a cabea o local primrio da infeco. Neonatal, a infeco inicial ocorre no coto-umbilical e progride a uma infeco generalizada.

Diagnstico O diagnstico do ttano estabelecido com base nas manifestaes clnicas. A deteco microscpica ou o isolamento do Clostridium tetani so teis, mas freqentemente no tem xito, pois uma porcentagem muito pequena dos infectados, apenas 30%, apresenta cultura positiva, visto que a doena pode ser causada por um nmero relativamente pequeno de microorganismos e as bactrias de crescimento lento so rapidamente destrudas quando expostas ao ar. O ttano tambm pode ser confundido com afeces da boca que se fazem acompanhar de trismo como abscesso dentrio, periostite alvolodentria, erupo viciosa do dente do terceiro molar, fratura e/ou osteomielite da mandbula, abscesso amidaliano e/ou retrofarngeo.

Preveno e Tratamento O tratamento do ttano requer desbridamento da ferida primria, administrao de metronidazol, inumizao passiva com imunoglobulina antitetnica humana e vacinao com toxide tetnico. Os cuidados com a ferida e o tratamento com metronidazol eliminam as bactrias vegetativas que produzem toxinas, enquanto os anticorpos antitoxina ligam-se s molculas de tetanospasmina livre. A toxina ligada s terminaes nervosas protegida dos anticorpos.

Por

conseguinte,

os

efeitos

txicos

devem

ser

controlados

sintomaticamente at o restabelecimento da regulao normal da transmisso sinptica. A vacinao com uma srie de trs doses de toxide tetnico e doses de reforo a cada dez anos altamente eficaz na preveno do ttano. O ttano uma doena que no pode ser transmitida de um doente para outro, to pouco confere imunidade. Para evitar essa doena, a populao deve ser adequadamente vacinada.

BOTULISMO Agente Etiolgico: Clostridium botulinum

uma doena causada por exotoxinas produzidas pelo Clostridium botulinum, um bacilo Gram-positivo anaerbio, formador de esporos ovais e subterminais e que apresenta flagelos peritrquios. Tem como hbitat natural o solo, a poeira e sedimentos marinhos, podendo ser encontrados em agroprodutos frescos ou industrializados. Essa espcie produz oito tipos de toxina, de natureza protica, denominadas A, B, C1, C2, D, E, F e G, sendo apenas os tipos A, B, E e F causadores da doena no homem.

Atualmente, so conhecidas trs formas de botulismo: Botulismo clssico, causado pela ingesto de alimentos contendo as neurotoxinas; Botulismo de leses, doena infecciosa causada pela proliferao e conseqente liberao de toxinas em leses infectadas com o C. botulinum; Botulismo infantil, tambm uma doena infecciosa causada pela ingesto de esporos do C. botulinum e subseqente germinao, multiplicao e produo da toxina no intestino de crianas com menos de um ano de idade.

De modo geral, uma cepa de C. botulinum produz somente um tipo de toxina. A produo desta ocorre durante a multiplicao bacteriana, mas

apenas uma pequena quantidade liberada para o ambiente nesta fase. A liberao maior e significativa quando se inicia o processo de lise da clula bacteriana.

Toxina / Patogenia As toxinas do C. botulinum esto entre as substncias mais txicas conhecidas. So destrudas pelo calor a 100C durante vinte minutos e, sua a dose letal para o ser humano prxima a 1-2 g. So protenas neurotxicas de estrutura e ao semelhantes, constitudas de cadeias pesadas e leves, unidas por uma ligao de dissulfeto. Com exceo da toxina C2, as demais apresentam ao neurotxica. A toxina age atravs do bloqueio da liberao do neurotransmissor nas junes neuromusculares, sem interferir na funo sensorial do hospedeiro. Tanto os sistemas colinrgicos quanto os adrenrgicos so afetados, sendo necessria uma concentrao maior de toxina para inibir a liberao de noradrenalina comparada de acetilcolina. O mecanismo neurotxico tem incio com a ligao da toxina aos stios receptores na membrana pr-sinptica, seguida pela internalizao da toxina e bloqueio da liberao do neurotransmissor. Depois que a toxina sofre a internalizao, no mais possvel bloquear seu efeito neurotxico. A toxina botulnica tem sido usada para tratamento de doenas relacionadas a contraes musculares indesejveis e para o tratamento esttico, Botox, em concentraes muito menores quelas que causam a doena.

Sintomatologia O botulismo apresenta quatro quadros clnicos denominados: perodo de incubao (assintomtico), perodo de invaso (nervoso, respiratrio, digestivo ou misto), perodo de estado e perodo de declnio. O de origem alimentar e o de leses produzem sintomas que afetam o sistema nervoso, mas as pessoas mantm um estado mental claro at pouco antes da morte. Os sintomas podem incluir viso embaada ou viso dupla, sensao de boca seca, dificuldades para engolir, diminuio da presso

arterial e reteno de lquidos. Fraqueza e paralisa muscular so sintomas que indicam o incio da ao da neurotoxina. Em algumas pessoas, a doena causa paralisia respiratria e pode provocar a morte. Bebs com botulismo freqentemente apresentam priso de ventre, param de comer e ficam apticos, podendo apresentar sintomas mais graves do sistema nervoso posteriormente.

Diagnstico Histria alimentar e exame fsico do paciente nem sempre so suficientes para estabelecer o diagnstico, pois existem outras doenas parecidas com o botulismo. A forma mais direta para se confirmar a doena demonstrar a presena da toxina botulnica atravs da injeo das fezes no caso do botulismo alimentar e infantil e do soro, no caso do botulismo por leses em camundongos. Depois, observa-se o desenvolvimento de sintomas nesses animais. A coleta do sangue do paciente para investigao da toxina deve ser feita precocemente, pois, se tardia, pode impedir a deteco da toxina, que rapidamente absorvida pelos tecidos (aps oito dias do incio da doena a toxina no mais encontrada). Tratamento O tratamento dever ser realizado em unidade de terapia intensiva e divide-se em duas fases igualmente importantes: o tratamento especfico e o geral. O especfico realizado com o uso de soro antibotulnico - caso a doena seja diagnosticada precocemente - com antitoxina tri, penta ou heptavalente, que atua contra a toxina circulante e no contra aquela que j se fixou no sistema nervoso. O tratamento geral inclui medidas para eliminar a toxina do aparelho digestivo, antibiticos (essa terapia com agentes antimicrobianos questionada uma vez que a lise da bactria no intestino poderia aumentar a disponibilidade de toxina), hidratao e alimentao balanceadas e assistncia respiratria entre outras.

A recuperao da doena lenta e no existem remdios ou soro que eliminem a toxina do organismo.

Preveno A preveno do botulismo consiste na realizao de educao sanitria: os alimentos que sero conservados devero estar absolutamente limpos; as carnes devem provir de animais sacrificados e preparados com as mais rigorosas medidas higinicas; quando conservados em salmoura, a

concentrao de NaCl deve ser superior a 15% e quando em cido actico, a concentrao deste no deve ser inferior a 2%; a esterilizao industrial deve ser feita em autoclave a 120C, durante prazo varivel. No indivduo exposto deve-se provocar o vmito e a evacuao intestinal imediata, seguidos por soroterapia por via intramuscular.

BOTOX As marcas da expresso aparecem na face, na forma de sulcos ou rugas e so provocadas pela ao dos msculos. Estes, sendo contrados repetidas vezes, ficam atrofiados e com a tonicidade aumentada, formando os sulcos e as rugas. A toxina Botox usada ento, em pequenas doses, para corrigir essas marcas. A tcnica consiste em injetar a substncia no msculo, obtendo-se assim uma paralisia temporria, de msculos desnecessrios, com o

desaparecimento das rugas mais leves e atenuao das mais profundas. A durao deste efeito de seis meses e a aplicao pode ento ser repetida. INTOXICAO ALIMENTAR E INFECO INVASIVA Agente etiolgico: Clostridium perfringens um grande bacilo, Gram positivo, cujos esporos so raramente observados; um dos poucos clostrdios imveis, cresce rapidamente em tecidos e culturas (sendo favorecido por um ambiente anaerbio), hemoltico e metabolicamente ativo. A produo de quatro toxinas letais principais de C.

perfringens (toxinas alfa, beta, psilon e iota) utilizada para subdividir os microrganismos isolados em cinco tipos (A a E). O do tipo A o responsvel pela maioria das infeces humanas, como gangrena gasosa, infeces dos tecidos moles e intoxicao alimentar. Habita comumente o trato intestinal dos seres humanos e animais, sendo amplamente distribudo na natureza, sobretudo no solo e gua contaminada com fezes. Este microrganismo forma esporos sobrevivendo por longos perodos em condies ambientais adversas. As cepas do tipo B a E no sobrevivem no solo, mas colonizam o trato intestinal de animais e, em certas ocasies, do homem.

Toxinas e Patogenia O potencial patognico de C. perfringens atribudo principalmente s doze toxinas e enzimas produzidas por esse microrganismo. A toxina alfa a mais importante, produzida por todos os tipos de C. perfringens. uma lecitinase (fosfolipase C) que provoca a lise dos eritrcitos, plaquetas, leuccitos e clulas endoteliais. Esta toxina est associada ao aumento da permeabilidade vascular, com hemlise macia e sangramento, destruio tecidual, hepatotoxicidade e disfuno do miocrdio. As maiores quantidades da toxina alfa so produzidas por C. perfringens do tipo A.

A toxina beta responsvel pela produo das leses necrticas na enterite necrotizante. A toxina psilon uma pr-toxina, que ativada, aumenta a permeabilidade vascular da parede gastrintestinal. A toxina iota possui atividade necrtica e aumenta a permeabilidade vascular. A enterotoxina uma protena produzida no clon e liberada durante a formao de esporos. produzida basicamente por cepas do tipo A, mas tambm por algumas cepas do tipo C e D. Interrompe o transporte de ons no leo e jejuno atravs da sua insero na membrana celular, alterando sua permeabilidade. Muitas clulas vegetativas devem ser ingeridas com o alimento contaminado para produzir os efeitos enterotxicos.

Gangrena Gasosa uma doena potencialmente fatal, caracterizada por dor intensa, observada dentro de uma semana aps a introduo dos clostrdios nos tecidos em conseqncia de traumatismos ou cirurgia. Este evento rapidamente seguido de extensa necrose muscular, choque, insuficincia renal e morte freqentemente dentro de dois dias aps o incio. A presena de gs no tecido ocorre em decorrncia da atividade metablica da bactria em rpida diviso. As toxinas do microrganismo causam hemlise e sangramento. mais comumente causada por C. perfringens, porm outras espcies de clostrdios podem causar a doena. Quando no ocorre comprometimento muscular, o processo destrutivo e rapidamente progressivo em que os microrganismos se disseminam atravs dos planos fasciais chamado fasciite. Estes microrganismos tambm podem iniciar a celulite, embora algumas espcies de clostrdios possam colonizar feridas e a pele sem nenhuma conseqncia clnica.

Intoxicao Alimentar uma doena bacteriana relativamente comum, caracterizada por um curto perodo de incubao (8 24 horas), as manifestaes clnicas consistem em clicas abdominais e diarria aquosa na ausncia de febre, nusea ou vmitos e evoluo clnica de menos de 24 horas. A doena produzida pela ingesto de carne contaminada com grandes nmeros de C. perfringens do tipo A (108 a 109 microrganismos). So freqentes os surtos em instituies como em escolas, hospitais, prises etc, onde h larga produo de alimentos preparados com muita antecedncia antes de serem servidos, favorecendo a multiplicao de C. perfringens.

A enterotoxina produzida aps a germinao dos esporos atua como superantgeno, estimulando a liberao de citocinas dos linfcitos. A refrigerao do alimento aps sua preparao evita a produo de enterotoxina. Por outro lado, o reaquecimento pode destruir a toxina.

Enterite Necrosante

 um processo necrosante agudo, raro, do jejuno caracterizado por dor abdominal, diarria sanguinolenta, choque e peritonite. causada por C. perfringens do tipo C, que produz toxina beta, e, a taxa de mortalidade em pacientes com esta infeco atinge quase 50%. A beta toxina pode ser inibida por proteases pancreticas.

Tratamento A gangrena gasosa e a fasciite podem ser tratadas agressivamente com desbridamento cirrgico e altas doses de penicilina. Apesar de todos os esforos teraputicos, a taxa de mortalidade varia de 40 a quase 100%. As doenas por clostrdios localizadas e menos graves podem ser tratadas, com xito, com penicilina, sendo o desenvolvimento de resistncia raramente registrado, porm quando ocorrido utiliza-se metronidazol ou imipenem. No h necessidade de antibioticoterapia para a intoxicao alimentar causada por clostrdios.

B. anthracis

Bacillus anthracis uma bactria do gnero Bacillus que causa a doena denominada carbnculo. Esta foi a primeira bactria a que foi associada uma doena, em 1877 por Robert Koch. O nome especfico anthracis advm da palavra grega anthrax, que significa carvo, fazendo referncia s leses da pele que provoca (a pele fica escura). Como outras espcies de bacilos, B. anthracis tem forma de bastonete e Gram positiva. Cada clula tem entre 1-6 micrmetro de comprimento. A bactria produz endsporos que repousam no solo e podem permanecer dcadas no estado dormente. Quando ingerida por um herbvoro, comea a sua multiplicao dentro deste, acabando eventualmente por lhe provocar a morte. De seguida alimenta-se da carcaa do animal. Quando esta se acaba, produzem novos endsporos.

B. anthracis tem cerca de 89 estirpes conhecidas. Algumas so virulentas e podero ser utilizadas como armas biolgicas. Outras estirpes so

completamente incuas. As estirpes diferem na presena e actividade de vrios genes, determinando a sua virulncia e a produo de antignios e toxinas.

Resistncia Solo Solo seco com outros esporos viveis por 3 a 20 4 anos. anos.

microorganismos

Fervura esporos morrem em 10 minutos.

Patologia Carbnculo hemtico bovinos, ovinos e equinos. Esplenomegalia + infiltrao gelatino-hemorrgica no tecido subcutneo e subserosa. A gelatina subcutnea impede que a bactria seja atacada por antibiticos.

CORINEBACTRIAS

As corinebactrias (gnero Corynebcterium) so bastonetes Gram-positivos, anaerbios facultativos, imveis, no esporulados, patognicos ou saprfitas. Algumas espcies fazem parte da microbiota normal da pele, nariz, nasofaringe, orofaringe, mucosa conjuntiva e trato geniturinrio.

O nome Corynebacterium deriva do grego koryne, que significa clava.

DIFTERIA

Agente Etilgico O Corynebacterium diphtheriae a espcie mais importante do gnero Corynebacterium e o agente etiolgico da difteria (do grego diphthera, que significa pele ou membrana). Essa uma doena infecto-contagiosa aguda que atinge de preferncia crianas at 10 anos de idade e caracterizada por

febre, inflamao de garganta (angina) e manifestaes toxmicas, com produo de uma pseudomembrana acinzentada composta de fibrina, bactrias, hemcias e leuccitos agrupados comumente sobre as amgdalas, faringe e laringe.

Caractersticas Morfolgicas do Microrganismo O C. diphtheriae apresenta-se sob a forma de bastonetes imveis, de 1 a 6 m de comprimento por 0,3 a 0,8 m de largura, no possui cpsula ou esporo, e Gram-positivo. Caracteriza-se por possuir um corpo bacteriano reto ou ligeiramente curvo, com dilataes irregulares em uma das extremidades, com acentuada tendncia pleomrfica (forma em clava, em pra, em fuso ou em halter) e, usando mtodos especiais de colorao (corantes derivados da anilina), evidenciam-se grnulos denominados granulaes metacromticas ou corpsculos de BabesErnst. Outra caracterstica dos bacilos diftricos a sua forma de agrupamento, paralelamente (em paliada), ou formando ngulos retos uns aos outros (formas em V, em H, em Y, etc.), o que lhes d, em conjunto, a aparncia de letras chinesas decorrente da separao incompleta da clula durante a diviso celular.

Caractersticas Culturais do Microrganismo Meio completo como o meio de Leffler (com soro coagulado) o mais comumente usado para a cultura do bacilo diftrico. Neste meio, aps 8 a 10 horas comeam a surgir colnias pequenas, granulosas, com bordas irregulares, na cor creme ou cinza-claro, enquanto que outras bactrias (estreptococos, estafilococos, neissrias, etc.) no se desenvolvem com a mesma rapidez. Outros meios de cultura como gar-sangue ou gar-chocolate acrescido de telurito de potssio so tambm indicados para isolamento de C. diphtheriae que apresenta colnias cinza-escuro ou pretas, resultado da reduo intracelular do telurito pelo microrganismo, e o telurito nas concentraes empregadas inibe outras bactrias sem afetar o crescimento do bacilo diftrico. Trs tipos morfologicamente distintos de colnias so descritos nestes meios:

- gravis com clulas bacterianas em formato de basto, pequenas e irregulares formando colnias no-hemolticas, grandes, acinzentadas, irregulares e estriadas associado a formas graves da doena; - mitis com clulas compridas, encurvadas, em forma de basto, formando colnias hemolticas, pequenas, pretas, brilhantes e convexas com umas superfcie espessa associado a formas leves da doena; - intermedius com clulas longas, em forma de basto, que formam pequenas colnias no-hemolticas apresentando caractersticas situadas entre os dois extremos, colnias cremosas e transparentes associado a formas intermedirias da doena.

Caractersticas Patolgicas A difteria causada por uma exotoxina produzida por cepas de C. diphtheriae que foram infectadas com um prfago beta. A toxina codificada por genes (tox) que fazem parte do genoma de certos bacterifagos e que so capazes de lisogenizar os bacilos diftricos. A perda do bacterifago, que contm o gene tox, torna-o incapaz de produzir a exotoxina, enquanto outros podem variar na sua capacidade de produo de exotoxinas e outros fagos. A toxina uma protena termolbil, letal em concentraes de 0,1 g/Kg de peso e sua produo inibida na presena de fatores ambientais como o ferro, o que explica a maior produo do txico bacteriano, na fase de declnio, quando a concentrao de ferro intracelular cai em nveis baixos. O bacilo diftrico pode causar infeces na faringe, laringe, nas fossas nasais, no ouvido, na pele e nos rgos genitais. A forma clnica mais freqente e grave a farngea, quando recebe a denominao angina diftrica.

A difteria dissemina-se por contato direto, por meio de perdigotos e de veiculadores (injeo, utenslios de mesa, etc.). A doena em seres humanos comea com uma infeco do trato respiratrio superior na qual o C. diphtheriae se multiplica e produz a exotoxina com tropismo para o miocrdio, sistema nervoso, rins e supra-renais. Quando a faringe atacada, o processo evolui pelas amgdalas (tonsilas) e pelos pilares do vu palatino, que cria pequenas placas amarelo-cinzentas que, rapidamente, se unem para formar

uma membrana difcil de ser destacada, e ao ser destacada, deixa uma superfcie sangrante. Os gnglios cervicais e submaxilares geralmente so palpveis. Da faringe pode estender-se laringe e traquia causando difteria larngea, associada com insuficincia respiratria aguda por obstruo alta (crupe), ou espalhar-se para os seios nasais causando difteria nasofarngea, associada a complicaes cardacas e neurolgicas devido circulao da toxina. A miocardite demonstra edema intersticial, infiltrado linfocitrio intersticial e perivascular, degenerao hialina e necrose celular. A neurite devida a desmielinizao, manifestando-se primariamente por alteraes motoras. O comprometimento renal decorrente de uma nefrite intersticial causada provavelmente pela ao direta da toxina e necrose tubular aguda, geralmente associada com miocardite, devido ao baixo dbito sangneo renal.

Diagnstico O diagnstico bacteriolgico realizado atravs da identificao do C. diphtheriae toxignico a partir do material retirado das leses (ulceraes), exsudatos de orofaringe e de nasofaringe, ou de outros stios, dependendo do caso, por meio de swab, antes da administrao de qualquer teraputica antimicrobiana. Estes testes servem para confirmar a impresso clnica e tm importncia epidemiolgica.

- Exame Bacterioscpico - Esfregaos corados pelo mtodo de Gram, ou por azul de metileno so observados microscopicamente para deteco de granulaes metacromticas em grupamentos caractersticos. Esse teste apresenta resultado rpido porm as manifestaes clnicas so mais teis para o diagnstico etiolgico do que a bacterioscopia direta, que pode fornecer resultados falso-positivos ou falso-negativos.

- Cultura - o meio usado na prtica e que fornece uma orientao segura. A cultura deve ser feita por semeadura da secreo nos meios de Loeffler inclinado, placas de gar sangue e de gar telurito. O meio de Loeffler preserva as caractersticas morfotintoriais do bacilo diftrico teis para sua identificao.

A presena de colnias no meio de gar sangue e ausncia de crescimento no meio com telurito usada para excluir infeces por Corynebacterium. Colnias suspeitas crescidas em gar telurito fornecem inculo para o teste de produo de toxinas. Amostras atoxignicas fluorescentes necessitam de provas bioqumicas adicionais porque produzem respostas clnicas discretas e localizadas.

- Teste de produo de toxinas - Todo microrganismo que apresente caractersticas morfolgicas semelhantes aos difterides deve ser submetido ao teste de virulncia, que verifica a toxicidade deste. A produo da toxina diftrica pode de pesquisada in vivo e in vitro. O teste in vivo consiste na inoculao de uma suspenso bacteriana em animal experimental. Aps quatro horas, injeta-se a antitoxina diftrica e, aps 30 minutos, reinjeta-se uma amostra adicional da suspenso em novo local. Se a cepa for toxignica o local injetado antes da antitoxina tornar-se- necrosado em 48 - 72 horas, enquanto o local injetado aps administrao de antitoxina revelar apenas uma inflamao no especfica.

Tratamento A toxina diftrica pode entrar em clulas sensveis dentro de um curto perodo de tempo, portanto o tratamento de casos suspeitos de difteria com antitoxina deve ser iniciado mesmo antes da comprovao bacteriolgica. Uma vez que a toxina penetra na clula alvo, a antitoxina no mais efetiva para neutraliz-la. MICOBACTRIAS

O gnero Mycobacterium contm grande nmero de espcies, microrganismos saprfitas que no causam tuberculose micobacteriana e microrganismos parasitas, incluindo os dois principais patgenos humanos, Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae. As micobactrias so bacilos finos, diferentes das demais bactrias em uma srie de propriedades, muitas das quais esto relacionadas com a quantidade e tipos de lipdeos complexos que estes germes contm na parede celular. So germes aerbios estritos. Vrias evidncias sugerem que a predileo do Mycobacterium tuberculosis pelos

pulmes est relacionada com a tenso de CO2 neste rgo. As clulas bacterianas so de crescimento lento, imveis, no esporuladas. A lentido do crescimento parece tambm estar relacionada absoro mais demorada de nutrientes, provavelmente devido a grande quantidade de lipdeos da parede. Alm do interesse diagnstico, o crescimento lento est relacionado com o quadro clnico da tuberculose. A temperatura tima de crescimento das micobactrias varivel. As que crescem melhor em temperatura inferior a 37oC, como Mycobacterium marium e M. ulcerans, geralmente causam somente uma infeco cutnea, uma vez que a temperatura da pele mais baixa que a das regies mais profundas do organismo. Presume-se tambm que a localizao preferencial da lepra nas extremidades do corpo (dedos, nariz, lbulos da orelha) esteja relacionada por sua preferncia a temperaturas baixas.

As micobactrias so cido-lcool resistentes (BAAR), o que significa que durante os procedimentos de colorao pela fucsina, no se deixam descorar por uma mistura de lcool e cido clordrico. Esta propriedade parece descorrer da firme fixao da fucsina a certos lipdeos da parede. O mtodo para se verificar se uma bactria BAAR, o de Ziehl-Neelsen. Este mtodo consiste em se tratar o esfregao por fucsina e, em seguida por uma mistura de lcool (97%) e cido clordrico (3%). Depois de lavado com gua, o esfregao corado com azul de metileno. As bactrias que retm a fucsina (BAAR) adquirem a cor deste corante (vermelho), e as que no retm, se coram pelo azul de metileno. Provavelmente devido riqueza em lipdeos, as micobactrias tambm so mais resistentes do que as outras bactrias ao hidrxido de sdio, cido sulfrico e a certos antispticos. Esta propriedade explorada no diagnstico laboratorial, pois permite destruir a microbiota normal, presentes nos espcimes clnicos, sem afetar a viabilidade das micobactrias. Os lipdeos podem explicar a maior resistncia das micobactrias a muitos antibiticos, bem como o mecanismo de ao da isoniazida (usada no tratamento), que interfere na sntese de cidos graxos.

So germes intracelulares facultativos, que proliferam no interior de macrfagos. As clulas so adjuvantes, uma vez que, quando injetadas com um antgeno, estimulam a produo de anticorpos contra estes antgenos. As micobactrias no produzem fatores de virulncia que possam explicar as manifestaes clnicas de suas infeces. Estas so predominantemente decorrentes da resposta do hospedeiro infeco e aos antgenos das micobactrias.

De modo geral, as infeces causadas por micobactrias acompanham um quadro de hipersensibilidade tardia e de imunidade celular. Os dois fenmenos tm sido mais estudados na tuberculose, onde aparecem ao mesmo tempo e esto sempre associados. A pesquisa de hipersensibilidade tardia e de imunidade celular pode ser feita com injeo intradrmica de tuberculina. Esta substncia na realidade, uma mistura de protenas de baixo peso molecular, produzidas pelo Mycobacterium tuberculosis. Quando parcialmente purificada, recebe a designao PPD (purified protein derivate).

Mycobacterium tuberculosis

Patogenicidade: O microrganismo geralmente transmitido por gotculas de secrees (como e tosse) provenientes de uma pessoa com tuberculose ativa. muito estvel em tais gotculas e no escarro, podendo permanecer vivel mesmo no escarro seco por at seis semanas. O M. tuberculosis das gotculas ento, inalado e atinge uma ambiente altamente aerbio do pulmo, onde produz uma pneumonite no-especfica. Histologicamente, a resposta inicial exsudativa, seguida por uma resposta granulomatosa, durante o qual o paciente desenvolve a hipersensibilidade tardia que caracterstica da doena.

A infeco pelo Mycobacterium tuberculosi geralmente se inicia no parnquima dos lobos pulmonares inferiores, passando em seguida para os ndulos linfticos da regio hilar, de onde levada para vrios rgos e tecidos, pela corrente sangnea. A infeo do parnquima pulmonar e dos ndulos linfticos

da regio hilar chamada complexo primrio e este, juntamente com os focos infecciosos que se formam nos diferentes rgos e tecidos, infeco primria.

Estes focos so encontrados principalmente nos rgos e tecidos onde uma tenso apropriada de O2 favorece a proliferao do Mycobacterium tuberculosi, isto , pices pulmonares, rins, extremidades dos ossos longos, ndulos linfticos e etc. Embora a bactria esteja viva nestes focos, ela se encontra em estado de latncia, uma vez que no se multiplica ou o faz de maneira insignificante e irregular. Este estado infeccioso denominado de tuberculoseinfeco, para contrastar com o estado oposto, que denominado de tuberculose doena.

Na grande maioria das vezes, o nico sinal de existncia de tuberculoseinfeco a presena de hipersensibilidade tardia, que pode ser demostrada pela injeo intradrmica de tuberculina ou PPD. Alguns indivduos, entretanto, podem tambm apresentar o complexo primrio calcificado, chamado complexo de Gonh, que s pode ser demonstrado pelo exame radiolgico dos pulmes. O tempo necessrio para a reativao de um foco de infeco latente bastante varivel, podendo ser meses ou anos. Em muitos indivduos ele permanece latente por toda vida. Existem na literatura diversos estudos sobre a provvel influncia da idade, sexo, fatores tnicos e constituio gentica. De qualquer modo, os fatores que realmente predominam no processo de reativao no so bem conhecidos, mas esto intimamente ligados a uma diminuio das defesas orgnicas. A doena geralmente associada com falta de higiene e condies de moradia em locais aglomerados.

Diagnstico:

O diagnstico pode ser feito pelo exame microscpio de esfregaos corados pelo mtodo de Ziehl-Neelsen e pela cultura. O material clnico selecionado para exame depende da localizao da doena. Nas infeces pulmonares, colhe-se o escarro; nas urinrias, a urina. A cultura o mtodo de escolha para o diagnstico das infeces por micobactrias, porque alm de permitir o

diagnstico especfico, possibilita o isolamento da bactria para a realizao de testes de sensibilidade aos antibiticos.

Tambm tida como bastante til no diagnstico laboratorial da tuberculose, a inoculao de cobaias com espcimes clnicos, apresenta hoje algumas desvantagens:

contaminao de pessoas que manipulam estes animais, a doena experimental demora de 4 a 6 semanas para se desenvolver, geralmente a inoculao por via intramuscular, e no dispensa o cultivo e identificao da bactria a partir das leses encontradas nestes animais. Recentemente foram preparadas sondas genticas que permitem a rpida identificao das espcies M. tuberculosis, M. avium, entre outras. A pesquisa de hipersensibilidade tardia tambm um recurso de diagnstico bastante til. Esta pesquisa geralmente feita pelo teste de Mantoux, que consiste na injeo intradrmica, na face anterior do antebrao, de 0,1 mL de tuberculina ou PPD. Considera-se o teste positivo, quando aparece, em 48 horas, no local da injeo, uma rea endurecida de pelo menos 5mm de dimetro. O teste de Mantoux positivo no indica doena, mas apenas hipersensibilidade tardia, que pode ter se originado de uma infeco primria (assintomtica) ou de uma tuberculose curada. O teste negativo indica que o indivduo no deve ter tido contato com o bacilo da tuberculose, ou teve contato e nunca desenvolveu a doena.

Tratamento:

As drogas mais usadas no tratamento das infeces causadas pelo M. uberculosis costumam ser divididas em drogas de primeira e segunda linha. As de primeira linha so as preferidas, por serem mais ativas e menos txicas, e as de segunda linha so menos ativas e mais txicas. As drogas de primeira linha so: isoniazida, pirazinamida, estreptomicina e etambutol. So

consideradas de segunda linha o cido para-amino-saliclico (PAS), etionamida (derivado do cido miclico), tiocetozona, e os seguintes antibiticos: canamicina, viomicina, capreomicina e amicacina.

Imunidade:

No Brasil, a vacina usada a BCG (bacilo de Calmette-Gurin), que uma mutante atenuada do Mycobacterium bovis. Embora cause infeco no homem, esta mutante no provoca doena. A proteo conferida pela vacinao no total, mas bastante satisfatria. Os indivduos vacinados adquirem hipersensibilidade tardia, passando a reagir positivamente ao teste de Mantoux.

Mycobacterium leprae

Este microrganismo tambm conhecido como bacilo de Hansen, o agente etiolgico da lepra, uma doena degenerativa capaz de causar deformaes nos pacientes. A lepra continua sendo uma doena bastante freqente. Calcula-se que existam 12 milhes de leprosos no mundo.

Como as demais micobactrias, o bacilo da lepra BAAR. At o presente momento esta bactria no foi cultivada in vitro, mas prolifera formando granulomas, quando inoculadas nas patas de camundongos. O tatu (Dasypus novecintus) tambm susceptvel ao Mycobacterium leprae, desenvolvendo manifestaes semelhantes s da lepra lepromatosa humana.

Patogenicidade: O M. leprae aparentemente transmitido de leses cutneas infectadas atravs de ferimentos de pele onde ele pode permanecer latente por vrios meses ou dcadas. Forma-se uma leso granulomatosa crnica semelhante quela da tuberculose, com clulas epiteliides gigantes, porm sem necrose caseosa. O M. leprae afeta principalmente a pele e o tecido nervoso. As formas cutneas de lepra resultam na produo de numerosos ndulos endurecidos. As formas neurais resultam em paralisia e anestesia do nervos perifricos. Pacientes com esta forma de lepra so passveis de ferimentos nas extremidades com o desenvolvimento de infeco secundria e danos estticos graves. So reconhecidas duas formas polares de lepra e vrias intermedirias. As formas polares so a lepra lepromatosa (LL) e a lepra tuberculide (LT). Uma diferena entre LL e LT, refere-se a reao do paciente ao teste de

Mitsuda. Os primeiros so Mitsuda negativo, e os segundos, positivos. O teste de Mitsuda realizado inoculado-se na pele do brao do paciente 0,1 mL de lepromina e verificando-se aps 30 dias, a reao desenvolvida. A lepromina uma suspenso de bacilos da lepra, obtidos de leproma (granuloma da lepra), mortos pelo calor. Quando o teste positivo, h a formao de um ndulo no local da injeo, com dimetro superior a 5mm, apresentam tambm uma rea de endurecimento, aps 24 e 48 horas da injeo. Os indivduos Mitsuda positivo so mais difceis de adquirir infeco, e caso desenvolvam ser a forma mais benigna (tuberculide). Os indivduos Mitsuda negativos

apresentam risco de desenvolver a forma mais grave (lepromatosa).

Diagnstico: O diagnstico bacteriolgico da lepra feito pelo exame de esfregaos corados pelo mtodo de Ziehl-Neesen.

Tratamento: Atualmente as drogas mais usadas no tratamento da lepra so a dapsona, rifampicina e clofazimina. Imunoterapia da lepra com injeo intradrmica de M. vaccae, uma micobactria ambiental no-patognica, e antgenos proticos de M. tuberculosis juntamente com quimioterapia tem levado a resposta em testes de pele em pacientes com lepra lepromatosa e retirada do bacilo do tecido. Ainda no h concluso definitiva sobre o valor da BCG na profilaxia da lepra. Os resultados obtidos em estudos so conflitantes.

Mycobacterium bovis

O Mycobacterium bovis causa tuberculose no gado bovino, sendo tambm bastante virulento para o homem. A grande maioria dos casos de tuberculose humana por esta bactria transmitida pelo leite no-pasteurizado, proveniente de vacas tuberculosas. Os bacilos ingeridos penetram pela mucosa da orofaringe e do trato digestivo, invadindo respectivamente, os ndulos mesentricos. A partir destes focos, a doena pode se disseminar para outros

tecidos ou rgos. Quando o Mycobacterium bovis inalado, pode provocar tuberculose idntica causada pelo M. tuberculosis.

Mycobacterium avium

Os organismos do complexo M. avium so biquos no ambiente e so adquiridos por pacientes, em geral, aidticos atravs da alimentao, gua, solo e poeira, levando colonizao do trato gastro-intestinal (GI), ou pulmes aps disseminao hematognica. A relao entre GI e colonizao pulmonar e subsequente disseminao, ainda no clara. O M. avium fagocitado por macrfagos e carreado aos rgos do sistema moncito-fagocitrio.