FAMAM Faculdade Maria Milza Curso: Biomedicina Disciplina: Bioqumica clnica Prof.: Aline Clara DOSAGEM DE COLESTEROL 1.

. Objetivo: Determinar colesterol em amostras de soro. 2. Metodologia: Enzimtico colorimtrico (Bioclin) 3. Materiais: Espectrofotmetro Centrfuga Banho-maria a 37C Pipeta Tubo de ensaio Material para colheita de sangue Kit para dosagem de colesterol Bioclin gua destilada Luvas Bquer Pipetador e ponteira Galeria 4. Amostra: Soro livre de hemlise.

5. Procedimentos: Separar o soro do sangue colhido centrifugando-o a 3000 rpm por 5 minutos. Identificar 3 tubos com as letras B (branco), T (teste) e P (padro). Pipetar os volumes e reagentes em cada tubo seguindo a tabela abaixo: B T P

Reagente de trabalho1,0 mL1,0 mL1,0 mL Reagente 1 Amostra 10 uL 10 uL

Homogeneizar bem e incubar a 37C por 5 minutos. Ler a absorbncia da Amostra e do Padro em 500 nm (490-540), acertando o zero com o Branco.

A cor estvel por 60 minutos. 6. Clculo dos resultados: Colesterol (mg/dL) = Absorbncia da amostra x 200 Absorbncia do padro Como a reao segue a Lei de Lambert-Beer, o Fator de calibrao pode ser usado. Fator de calibrao = Concentrao do padro ( 200 mg/dL ) Absorbncia do padro mg/dL = Absorbncia da amostra x Fator de calibrao Os resultados sero expressos em mg/dL. 7. Valores de referncia:

Desejvel ................................< 200 Aceitvel..............................200-239 Elevado...................................> 240