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Controle do crescimento microbiano

Resumo I - Microbiologia Tortora A terminologia do controle bacteriano O controle do crescimento microbiano pode prevenir infeces e deteriorao de alimentos. A esterilizao o processo de destruir toda a vida microbiana em um objeto. A esterilizao comercial o tratamento com calor dos alimentos enlatados para destruir os esporos de C. Botulinum. A desinfeco o processo de reduzir ou inibir o crescimento microbiano em um superfcie inanimada. Anti-sepsia o processo de reduzir ou inibir os microrganismos em tecido vivo. O sufixo-cida significa matar; o sufixo -statico significa inibir. Sepse a contaminao bacteriana. A taxa de morte bacteriana As populaes bacterianas sujeitas ao calor ou a produtos qumicos anti-microbianos normalmente morrem em uma taxa constante. Esta curva de mortalidade, quando representada logaritmicamente, mostra a taxa constante de morte como uma linha reta. O tempo que leva para matar uma populao microbiana proporcional ao nmero de micrbios. As espcies microbianas e fases do ciclo de vida (e.g., endosporos) possuem diferentes suscetibilidades aos controles fsico e qumico. A matria orgnica pode interferir com os tratamentos de calor e agentes de controle qumico. A exposio mais longa a menos calor pode produzir o mesmo efeito que o perodo mais curto sob calor intenso

Aes dos agentes de controle microbiano


Alterao da permeabilidade da membrana A sensibilidade da membrana plasmtica se deve a seus componentes lipdicos e proteicos. Certos agentes de controle qumico lesam a membrana plasmtica, alterando sua permeabilidade. Dano s protenas e aos nucleicos Alguns agentes de controle microbiano lesam as protenas celulares ao romper as pontes de hidrognio e as ligaes covalentes. Outros agentes interferem com a replicao do DNA e RNA e com a sntese proteica.

Mtodos fsicos de controle microbiano

Calor O calor frequentemente usado para eliminar os microrganismos. O calor mido mata os microrganismos por desnaturao das enzimas. O ponto de morte trmica (PMT) a menor temperatura em que todos os micrbios de uma cultura lquida sero mortos em dez minutos. O tempo de morte trmica (TMT) a durao de tempo necessria para matar todas as bactrias em uma cultura lquida em uma dada temperatura. O tempo de reduo decimal (TRD) a durao de tempo necessria para que 90% de uma populao bacteriana seja morta em uma dada temperatura. A fervura (100C) mata muitas clulas vegetais e vrus dentro de 10 minutos. A autoclave (vapor sob presso) o mtodo mais efetivo de esterilizao com calor mido. O vapor deve entrar em contato direto com o material a ser esterilizado. Na pasteurizao HTST, uma alta temperatura usada por um curto perodo (72C por 15 segundos) para destruir os patgenos sem alterar o sabor do alimento. O tratamento com temperaturas ultra-elevadas (UHT) (140C por 3 segundos) usado par esterilizar laticnios. Os mtodos de esterilizao com calor seco incluem a chama direta, incinerao e esterilizao com ar quente. O calor seco mata por oxidao. Diferentes mtodos que produzem o mesmo efeito (reduo no crescimento bacteriano) so denominados tratamentos equivalentes. Filtrao A filtrao a passagem de um lquido ou gs atravs de um filtro com poros pequenos o suficiente para reter os micrbios. Os micrbios podem ser removidos do ar por filtros de partculas com alta eficincia. Os filtros de membrana compostos de nitro-celulose ou acetato de celulose so comumente usados para filtrar bactrias, vrus e mesmo protenas de alta massa molecular. Baixas temperaturas A eficcia das baixas temperaturas depende do microrganismo particular e da intensidade da aplicao. A maioria dos microrganismos no se reproduz em temperaturas comuns do refrigerador (07C). Muitos micrbios sobrevivem (mas no crescem) nas temperaturas abaixo de zero, usadas para armazenar alimentos. Alta presso A alta presso desnatura as protenas nas clulas vegetais. Dessecao Na ausncia de gua, os microrganismos no podem crescer, mas podem permanecer viveis. Vrus e endosporos podem resistir dessecao. Presso osmtica

Os microrganismos em altas concentraes de sais e acares sofrem plasmlise. Os bolores e leveduras so mais capazes que as bactrias de crescer em materiais com baixa umidade ou alta presso osmtica. Radiao Os efeitos da radiao dependem de seu comprimento de onda, intensidade e durao. A radiao ionizante (raios gama, raios X e feixes de eltrons de alta energia) tem um alto grau de penetrao e exerce seu efeito principalmente ionizando a gua e formando radicais hidroxila altamente reativos. A radiao ultra-violeta (UV), uma forma de radiao no-ionizante, tem baixo grau de penetrao e causa leso celular provocando dmeros de timina no DNA, que interferem com a replicao do DNA; o comprimento de onda germicida mais efetivo 260nm. As micro-ondas podem matar os micrbios indiretamente medida que os materiais se aquecem. Mtodos qumicos de controle microbiano Os agentes qumicos so usados em tecidos vivos (como anti-spticos) e em objetos inanimados (desinfetantes). Poucos agentes qumicos atingem a esterilidade. Princpios da desinfeco efetiva Muita ateno deve ser dada s propriedades e concentrao do desinfetante a ser usado. A presena de matria orgnica, o grau de contato com os microrganismos e a temperatura tambm devem ser considerados. Avaliando um desinfetante No teste de uso-diluio, a sobrevivncia bacteriana (S. Choleraesuis, S. Aureus e P. Aeruginsa) na diluio de um desinfetante recomendada pelo fabricante determinada. Vrus, bactrias formadoras de endosporos, mico-bactrias e fungos tambm podem ser usados no teste de uso-diluio. No mtodo de disco-difuso, um disco de papel filtro embebido com uma substncia qumica e colocado em uma placa de agar inoculada; uma zona de inibio indica efetividade.

Tipos de desinfetante
Fenol e compostos fenlicos Os compostos fenlicos exercem sua ao lesando as membranas plasmticas. Bi-fenis Bi-fenis, como o triclosano (venda liberada) e hexa-clorofeno (prescrito) so amplamente usados em produtos cosmticos.

Biguanidas A clorexidina lesa as membranas plasmticas das clulas vegetais. Halognios Alguns halognios (iodo e cloro) so usados isoladamente ou como componentes de solues inorgnicas ou orgnicas. O iodo pode ser combinado com certos aminocidos para inativar enzimas e outras protenas celulares. O iodo est disponvel como tintura (em soluo com lcool) ou como iodofor (combinao a uma molcula orgnica). A ao germicida do cloro baseia-se na formao de cido hipo-cloroso quando o cloro adicionado gua. O cloro usado como desinfetante em forma gasosa (Cl2 ou ClO2) ou em um composto, como o hipo-clorito de clcio, o hipo-clorito de sdio, o di-cloro-iso-cianureto de sdio e as cloraminas. lcoois Os lcoois exercem sua ao desnaturando as protenas e dissolvendo os lipdeos. Em tinturas, eles aumentam a efetividade de outros produtos qumicos anti-microbianos. O etanol aquoso (60 a 95%) e o iso-propanol so usados como desinfetantes. Metais pesados e seus compostos Prata, mercrio, cobre e zinco so usados como germicidas. Eles exercem sua ao anti-microbiana pela ao oligodinmica. Quando os ons de metal pesado se combinam com os grupos sulfidrila (-SH), as protenas so desnaturadas. Agentes de superfcie Os agentes de superfcie reduzem a tenso entre as molculas de um lquido; os sabes e os detergentes so exemplos. Os sabes possuem ao germicida limitada, mas auxiliam na remoo dos microrganismos por escovao. Os detergentes cido-aninicos so usados para limpeza de equipamento de laticnios. Compostos quaternrios de amnio Os quats so detergentes catinicos unidos ao NH4+. Ao romper as membranas plasmticas, eles permitem o vazamento dos constituintes citoplasmticos para fora da clula. Os quats so mais efetivos contra as bactrias gram-positivas. Conservantes qumicos de alimentos O SO2, o cido srbico, o cido benzoico e o cido propinico inibem o metabolismo fngico e so usados como conservantes de alimentos. Os sais de nitrato e nitrito impedem a germinao de endosporos de Clostridium butolinun na carne.

Antibiticos A nisina e a natamicina so antibiticos usados para conservar alimentos, especialmente o queijo. Aldedos Os aldedos como o formaldedo e o gluraldedo exercem seu efeito anti-microbiano tornando as protenas inativas. Eles esto entre os mais efetivos desinfetantes qumicos. Qumio-esterelizantes gasosos O xido de etileno o gs mais frequentemente usado para a esterilizao. Ele penetra na maioria dos materiais e mata todos os microrganismos por desnaturao das protenas. Peroxignios (Agentes oxidantes) O oznio, o perxido e o cido peractico so usados como agentes microbianos. Eles exercem seu efeito oxidando as molculas dentro das clulas.

Caractersticas e controle microbiano


As bactrias gram-negativas geralmente so mais resistentes que as bactrias gram-positivas aos desinfetantes e anti-spticos. As mico-bactrias, os endosporos e os cistos e oocistos dos protozorios so muito resistentes aos desinfetantes e anti-spticos. Os vrus no-envelopados geralmente so mais resistentes que os vrus envelopados aos desinfetantes e anti-spticos. Os prons so resistentes desinfeco e auto-clave.