Exposiciones Orales

Martes 17 de mayo Oceanografa biolgica: algas nocivas 1

Reporte de floraciones algales en la Zona Sur del Litoral Peruano Zevallos, S. y Crdenas, F. zhamda@hotmail.com; fcardenas@imarpe.gob.pe Palabras clave: Floraciones algales, mareas rojas, aguajes, dinoflagelados, G sanguineum, bivalvos. El rea de estudio estuvo comprendida entre Punta Coles (1741.121 LS y 71 23.092 LW) hasta la Baha de Ilo (1739.299 LS y 7121.791 LW). Se colectaron muestras de agua en cuatro estaciones superficiales (Tabla 1) y se preservaron con formol al 10%; las que fueron centrifugadas a 240 RPM durante 5 minutos para determinar el volumen (ml/L). Se consider adems la abundancia relativa de las especies de acuerdo a una escala arbitraria (ausente: 0, presente: 1, escaso: 2, abundante: 3, muy abundante: 4). Para la identificacin de los diferentes organismos se consultaron trabajos de CUPP (1943), Schiller, J. (1971), Jimnez, R. (1976), Ochoa, N. (1997), Balech, E. (1988), Brezt, B. (1996) y Carmelo, R. (1996) (Tabla 2)
M el E A U u le N P P toS C ai P C Te H r a a r s em n s Pa aP o I ge l y t .n l s C r ai o o r lt s C t C t s aa aa

-17.66

Bahia Ilo - Pta. Coles Estaciones de muestreo

-17.68

F a .P s u r s c s e q ea

C at l u re

P z Ls s o o i a B l n ee

-17.7

Pa t . C l s oe V l i i oC l h n adva oc o

M s s ea

-17.72

C q i a o un

B lvaM r oi i a

-17.74

-71.4

-71.38

-71.36

-71.34

-71.32

-71.3

-71.28

-71.26

-71.24

Fig. 1: rea de Muestreo (Punta Coles Baha de Ilo) Se reporta una floracin algal monitoreada entre Punta Coles y la Baha de Ilo cuya permanencia estuvo restringida a la segunda quincena de febrero y principios de marzo. Las tonalidades fluctuaron entre rojo a marrn oscuro, compuesta principalmente por el dinoflagelado Gymnodinium sanguineum que predomina en las estaciones analizadas y que estaran originando la dscoloracin mencionada; las concentraciones alcanzaron volmenes de 0.827 ml/L (E - 4)

Fig. 2: Gymnodinium sanguineum Referente a la TSM, los rangos variaron entre 16.4C y 16.6C, encontrndose que la menor temperatura est asociada a la estacin donde se present la mayor concentracin del dinoflagelado G. sanguineum. Los valores de OSM fluctuaron entre 5.05 a 8.86 ml/L; resaltando que el valor ms elevado est asociado a la estacin de muestreo de mayor concentracin del aguaje.

La salinidad superficial del mar present una fluctuacin entre 34.881 UPS (E 1) a 34.900 UPS (E 2). Se han determinado adems especies acompaantes tales como Ceratium furca, Ceratium dens, Prorocentrum micans, Prorocentrum arcuatun, Alexandrium peruvianum, Coscinodiscus perforatus. El aguaje presentado entre Punta Coles y la Baha de Ilo estuvo restringida a la segunda quincena de febrero y principios de marzo; comparada con el verano del 2004 se observaron floraciones algales entre Pocoma y ENERSUR durante enero, febrero y parte de marzo; coincidentemente fueron influenciadas por el ingreso del ro en ambos casos, estas floraciones mostraron elevadas concentraciones para el rea de Boca del Ro; indicando que el impacto producido este ao fue de menor intensidad. La marea roja fue ocasionada por el dinoflagelado Gymnodinium sanguineum, produciendo tonalidades que variaron entre rojo a marrn oscuro que predominaron en las estaciones analizadas y que estaran originando la dscoloracin mencionada. Las concentraciones alcanzaron volmenes de 0.827 ml/L; para obtener una mayor precisin en los resultados debe cuantificarse el nmero de clulas por litro; lo cual no fue posible debido a que se encontraron en su mayora clulas desintegradas, probablemente afectadas por la concentracin y tiempo de exposicin al formol antes de su anlisis, por lo que se sugiere analizarlas inmediatamente despus de haber sido colectadas y sin preservacin. Comparado con el reporte del verano 2004, las concentraciones fueron mayores y en promedio alcanzaron valores de 9.5 x 106 cel/L para G. Sanguineum (Snchez, S. 2004) Las condiciones ambientales en el rea evaluada nos indicaron la presencia de las aguas costeras fras en un rango trmico de 16.4 a 16.6 C, encontrndose que la menor temperatura est asociada a la estacin donde se present la mayor concentracin del dinoflagelado G. sanguineum ; se observ adems, que las temperaturas fueron menores respecto al verano 2004, las que oscilaron entre 18.1 y 19.5C. Los valores de OSM fluctuaron entre 5.05 a 8.86 ml/L; resaltando que el valor ms elevado est asociado a la estacin de muestreo de mayor concentracin del aguaje, como consecuencia de la alta productividad desarrollada en dicha rea, resultado de la ocurrencia de un elevado proceso productivo como parte de un intenso ndice de la fotosntesis durante el da, que da como resultado una sobresaturacin de oxgeno disuelto en el agua de mar. La salinidad superficial del mar present una fluctuacin entre 34.881 UPS a 34.900 UPS, que caracteriza a las aguas Costeras Fras que se ubican en el rea evaluada. Referencias Balech, E. 1988. Los dinoflagelados del Atlntico Sudoccidental. Instituto Nacional de investigacin de las Ciencias Naturales de Buenos Aires. Brezt, B. 1996. The plancton of the sea. R. S. Wimpenny Carmelo, R. 1996. Identifyng Marine Diatoms and Dinoflagellates. Ed. Academic Press. Inc. san Diego New York Cupp, E. 1943. Marine Plankton Diatoms of the West Coast of North America. University of California Press Berkeley and the Angeles Jimenez, R. 1976. Diatomeas y silicoflagelados del fitoplancton del Golfo de Guayaquil. Ecuador Ochoa, N. 1997. Dinoflagelados del mar peruano como indicadores de masas de agua durante los aos 1982 a 1985. Bol. Inst. Mar Per. 16 (2): 1 60 Snchez, S. 1994. Reporte de floraciones algales en la zona Sur del Litoral. rea de fitoplancton y produccin primaria

Tabla 1. Parmetros Fsico - Qumicos Punta Coles - Baha Ilo ESTACIONE LONGITU TSM S LATITUD D (C) E-1 E-2 E-3 E-4 17 41.121 7123.092 16.5 17 40.786 7122.832 16.6 17 40.291 7122.445 16.6 17 39.299 7121.791 16.4 OSM (ml/L) 5.05 5.10 5.68 8.86 SSM (UPS) 34.881 34.900 34.882 34.891 VOLUMEN (ml/L) 0.194 0.387 0.229 0.827

REFERENCIA Pta. Coles Cia. Anfibia Frente Planta Rub Promasa - Pto. Ingles Frente Tres Hermanas

Tabla 2. Anlisis semicuantitativo de Fitoplancton. Punta Coles - Baha Ilo Estacin Temperatura (C) ml/L Alexandrium peruvianum Gymnodinium sanguineum Ceratium furca Ceratium dens Prorocentrum micans Prorocentrum arcuatum Protoperidinium granii Dictyocha fibula E-1 16.5 0.194 0 2 0 0 0 0 0 0 E-2 16.6 0.387 1 3 1 0 0 0 1 1 E-3 16.6 0.229 1 3 2 1 1 1 1 0 E4 16.4 0.827 2 4 0 0 0 0 0 0

Descrio de uma mar vermelha, causada por Mesodinium rubrum (Lohmann,1908), na plataforma interna de Santos (SP, Brasil) Moser, G.A.O.; Belm, A.L.; Soares, J.A.; Carneiro, M.A.F. UNIMONTE- Faculdade de Cincias Ambientais e Instituto Oceanogrfico de Santos. Av Alm. Saldanha da Gama, 89. Santos, SP- Brasil. gleyci_moser @terra.com.br Palabras clave: Marea roja, Mesodinium rubrum , diatomeas, dinoflagelados, HABs, Brasil. Este estudo a primeira descrio de uma mar vermelha causada por Mesodinium rubrum na plataforma interna de Santos. Mars vermelhas causadas por este ciliado autotrfico ocorrem desde sistemas costeiros, como esturios, at zonas de ressurgncia. Geralmente, estas floraes 5 6 apresentam alta densidade e biomassa de organimsos (10 a 10 cel/L; 60 a 100 ug/L) (Proena, 2004). M. rubrum obrigatriamente auttrofo, pois possui uma espcie de Cryptophyta como endosimbionte. Apesar das floraes serem associadas a impactos nocivos biota, as floraes causadas por este ciliado no so txicas. Entretanto, embora M. rubrum no produza toxinas, alguns efeitos nocivos so associados a este organismo, como a depleo de oxignio com o trmino da florao. Alguns estudos sugerem que as floraes deste ciliado estimulam o desenvolvimento de bactrias e vrus, afetando moluscos e peixes (Romalde et al., 1990). Este organismo comum na costa sul do Brasil (Odebrecht & Garcia, 1998). No sudeste uma florao foi reportada por Owen et al. (1992), no litoral norte de So Paulo, nesta ocasio a florao de M. rubrum foi sub superficial e ocorreu durante um dia de calmaria e sol. A regio estudada compreende a Baa de Santos, e a plataforma interna at a isbata de 30 m, nas proximidades da Laje de Santos (Figura 1). Trs massas de gua so encontradas nesta regio: gua Costeira (AC), com temperaturas altas e baixas salinidades; gua Tropical (AT), com altas temperaturas e salinidade, ocorre longe da costa; e a gua Central do Atlntico Sul (ACAS), com baixas temperaturas e alta salinidade. O presente estudo faz parte de um projeto integrado do curso de Oceanografia da UNIMONTE e Instituto Oceanogrfico de Santos (IOS), que tem por objetivo especfico analisar a dinmica do desenvolvimento fitoplanctnico frente variaes qumicas e fsicas na Baa de Santos e em uma radial at a Laje de Santos. Neste trabalho apresentamos os resultados parciais de uma campanha realizada no dia 09 de dezembro de 2004 (primavera austral). A radial de amostragem est representada na figura 1, e abrange desde o emissrio at a Laje de Santos.

-60 W 0

-40 W

BRASIL

Santos Praia Grande

E1 E6 E2

Guaruj

-30 S

L3

L2

L1 Laje de Santos

Figura 1- rea de estudo e estaes oceanogrficas. As estaes costeiras so: E1, E6 (emissrio) e E2, e as estaes da plataforma so L3, L2 (onde ocorreu a flora o) e L3 (Laje de Perfis verticais de temperatura, salinidade e porcentagem de saturao do oxignio foram registrados com o auxlio de um sensor multiparmetros (marca YSI), a cada 2 m de profundidade. A zona euftica foi determinada com o auxlio de um disco de Secchi. As amostras de gua para anlises de clorofila-a e variveis qumicas, incluindo salinidade para calibrao do sensor, em processamento e no apresentadas neste estudo, foram coletadas na superfcie e junto ao fundo com garrafas de Nansen. As amostras para anlise de clorofila-a foram filtradas atravs de filtros de fibra de vidro com porosidade nominal de 0,7 m (AP40, Millipore) e imediatamente congeladas em nitrognio lquido, as amostras para as anlises qumicas foram acondicionadas conforme descrito em Grasshoff et al. (1983). O fitoplncton foi coletado com auxlio de garrafas de Nansen junto superfcie e com rede de plncton (malha de 20 m) em arrastos verticais, as amostras foram fixadas com formol 0,4 e 4%, respectivamente. As contagens foram realizadas em microscpio invertido (marca Zeiss), em aumentos de 100 x (microfitoplncton) e 400 x (nanofitoplncton). O zooplncton foi coletado com rede de plncton com malha de 200 m e fixado com formol 4%. A anlise qualitativa dos principais grupos foi realizada sob microscpio estereoscpico (marca Nikon). Na regio costeira (estaes E1, E2 e E6- emissrio), at a isbata de 20 m, houve predomnio de AC, a zona euftica esteve entre 4,5 e 15 m (Figura 2). Na plataforma interna, desde a isbata de 20 m at a isbata de 30 m, ocorreram AC, AT e ACAS, esta ltima abaixo de 15 m nas estaes L2, onde ocorreu a florao de M. rubrum e L1, Laje de Santos (Figura 2). As condi es meteorolgicas foram diferentes daquelas descritas para a florao de M. rubrum no litoral norte de So Paulo (Owen et al.,1992), ocorrendo a passagem de uma frente fria no dia anterior amostragem.

A
0 -2

Temperatura (oC)
22 24 26 0 -2 Profundidade (m) -4 -6 -8 -10 -12 -14 -16 E1 34

Salinidade
35 36 37 38 0 70

% sat. de O2
80 90 100 110

Profundidade (m)

-4 -6 -8 -10 -12 -14 -16

Profundidade (m)
E6 E2

-2 -4 -6 -8 -10 -12 -14 -16

B
Temperatura (oC)
15 0 17,5 20 22,5 25 36,4 0

Salinidade
36,6 36,8 37

% sat. De O2
50 60 70 80 90 100 110 0

Profundidade (m)

Profundidade (m)

Profundidade (m)
L3 L2 L1

-5 -10 -15 -20 -25 -30

-5 -10 -15 -20 -25 -30

-5 -10 -15 -20 -25 -30

Figura 2- Perfis verticais de temperatura, salinidade e porcentagem de saturao de oxignio para as estaes prximas (A) e distantes da costa (B). Excetuando a estao L2, nas demais a zona euftica compreendeu toda a coluna de gua. Supersaturaes de oxignio foram registradas no emissrio e na estao L2, indicando o predomnio de fotossntese sobre processos de decomposio e respirao. No emissrio (E6) houve predomnio 5 de Skeletonema costatum (7 x 10 cel/L), uma diatomcea cntrica nanoplanctnica e dentre o 4 microfitoplncton predominou Coscinodiscus weilesii (1,2 x 10 cel/L). Floraes de Skeletonema costatum e outras diatomceas nanoplanctnicas em cadeia so comuns na Baa de Santos e 3 esturios, as concentra es de clorofila nestas ocasies chegam a 90 mg/m ( Moser et al., 2004). Na 6 estao L2 a densidade de M. rubrum foi de 1,3 x 10 cel/L, entretanto houve co-ocorrncia de outros 4 organismos microfitoplanctnicos como: Pseudonitzchia (tipo seriata) (7,0 x 10 cel/L), e os gneros 4 4 de dinoflagelados Scrippsiella sp (1,0 x 10 cel/L) e Alexandrium sp (1,7 x 10 cel/L) (Figura 3). Dentre o zooplncton houve predomnio de coppodos (64% de Calanoidea e Cyclopoidea), a maioria apresentava o trato digestivo avermelhado, indicando a herbivoria sobre M. rubrum. Os cladoceros foram o segundo grupo dominante (22%). O desenvolvimento de M. rubrum foi favorecido pela presena da ACAS na zona euftica, esta massa de gua rica em nutrientes, especialmente nitrato. Embora as mars vermelhas causadas por Mesodinium rubrum no sejam descritas como txicas, podem causar efeitos negativos atravs da depleo de oxignio e favorecer o desenvolvimento de bactrias e vrus. Alm disso, microalgas potencialmente txicas foram observadas nesta mar vermelha.

1,40E+06 1,20E+06 Clulas/L 1,00E+06 8,00E+05 6,00E+05 4,00E+05 2,00E+05 0,00E+00

Navicula Dynophysis tripos Dynophysis Pseudonitzchia closterium Pseudonitzchia Rhisozolenia Alexandrium Mesodinium rubrum Coscinodiscus weilesii Protoperidinium Leptocillindrus (tipo seriata) Prorocentrum micans Scripsiella Oxytoxum nd caudata

Espcies

Figura 3- Composio florstica e nmero de clulas/L, da comunidade microfitoplanctnica da estao L2. Portanto, preemente que os organismos fitoplanctnicos sejam identificados at espcie, pois ocorreram em concentraes relativamente altas e espcies de Pseudonitzchia e Alexandrium produzem toxinas responsveis por ASP (Amnesiac Shellfish Poisoning) e PSP (Paralytic Shellfish Poisoning), respectivamente. Agradecimentos: Os autores agradecem a Bruno Avelino Galati, Camila Camargo, Carlos Belruss, Heloisa Medeiros, Juliana Barros, Patrcia Arantes Branco e Samantha Okubo da Silva, alunos do curso de oceanografia da UNIMONTE, pelo auxlio na amostragem. Referncias Grasshoff, K.; M. Ehrhardt, & K. Kremling, 1983. Methods of seawater analysis. 2 . Revised and extended ed. Wienhien Verlag Chemie, 419 pp. Moser, G. A. O, T. C. S. Sigaud-Kutner, C. O. Cattena, S. M. F. Gianesella, E. S.Braga, K. P. Schinke & E.Aidar. 2004. Algal growth potential as an index of eutrophication in coastal areas under sewage disposal influence. Aquatic Ecossystem Health & Manegement. 7(1):115-126. Odebrecht, C. & V. M. T. Garcia, 1998. Ambientes costeirose marinhos e sua biota: fitoplncton. In Seeliger, U.;Odebrecht, C. & Castello, J. P. eds. Os ecossistemascosteiro e marinho do extremo sul do Brasil. Rio Grande,Editora Ecoscientia. p. 117-121. Owen, R. W.; S.F. Gianesella-Galvo, & M. B. B. Kutner, 1992. Discrete, subsurface layers of the autotrophicciliate Mesodinium rubrum off Brazil. Journal of Plankton Research. 14(1):97-105. Proena, L. A. De O. 2004. A red water caused by Mesodinium rubrum on the coast of Santa Catarina, Southern Brazil. Brazilian Journal of Oceanography, 52(2):153-161. Romalde, J L, J L Barja, & A E Toranzo. 1990. Appl Environ Microbiol. 1990 Vibrios associated with red tides caused by Mesodinium rubrum.November; 56(11): 36153619.

Primera reconstruccin histrica reciente de floraciones algales nocivas (FANs) mediante quistes de dinoflagelados en sedimentos marinos del sur de Chile (X Regin) Salgado P. y M. Salamanca Laboratorio de Oceanografa Qumica, Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas. Departamento de Oceanografa, Universidad de Concepcin. Casilla 160-C. Concepcin pabsalga@udec.cl; msalaman@udec.cl Financiamiento: Proyecto FDI CT03-MR-03 Durante las tres ltimas dcadas (a escala mundial) se aprecia un notorio incremento en la frecuencia, duracin e intensidad de floraciones algales nocivas (FANs). La aparicin de las FANs est estrechamente relacionada con condiciones ptimas para el crecimiento poblacional y/o germinacin de quistes de las especies involucradas, tales como temperatura, salinidad, nutrientes, estratificacin trmica, influencia de vientos y corrientes. Los dinoflagelados principales formadores de estos episodios presentan durante su ciclo de vida estados de resistencia (quistes), los cuales se encuentran principalmente en los sedimentos marinos y son los componentes principales del registro fsil de los dinoflagelados. En la costa Chilena, los nicos estudios previos sobre quistes de dinoflagelados son los mencionados por Uribe (1995 y 1996), y Lembeye & Sfeir (1996 y 1997) los cuales se realizaron en sedimentos superficiales (2-3 cm) en la zona de XI y XII regin. Para poder realizar un registro histrico reciente de dinoflagelados productores de FANs en sedimentos, se eligi la localidad de Yenecura (43 09 S y 73 41 W) la cual se ubica al suroeste de la ciudad de Quelln donde ocurri un evento FAN en el ao 2002. Es un rea semi-protegida somera (30 m mximo) de baja energa, y con presencia de sedimentos finos, que permiten la acumulacin y preservacin de los quistes. Para la determinacin de abundancia, identificacin de especies de quistes de dinoflagelados y geocronologa se colectaron testigos de aproximadamente 40 cm de largo mediante buceo autnomo en Enero 2004. La taxonoma se bas en Taylor et al. (1995), Montresor et al. (1998), Matsuoka & Fukuyo (2000), y Sar et al. (2002), quienes describen la forma, color y estructura de los quistes de 210 dinoflagelados. La determinacin de la geocronologa se estableci mediante la tcnica del Pb (Flynn, 1968) obteniendo como resultado un testigo de aproximadamente 94 aos edad. Entre los 2028 cm de profundidad encontraron gusanos poliquetos. Adems, a este nivel el sedimento era de color ms oscuro y con un fuerte olor a Sulfuro de Hidrgeno (H2 S). Los resultados demuestran que desde principios de la dcada del ao 1990 se han producido FANs de distintos tipos de dinoflagelados (Protoperidinium claudicans, P. conicum, P. conicoides, P. minutum, Protoceratium reticulatum, Polykrikos schwartzii, Alexandrium catenella) en la zona, siendo el ms importante por su toxicidad el de Alexandrium catenella que ocurri aproximadamente en el ao 1973 (24-26 cm de profundidad). En este nivel se produjo el evento mayor encontrndose 2 9976000 Quistes x m (Testigo 1), mientras que en el Testigo 2 se encontr una cantidad superior de -2 quistes m llegando a 95408000 en los centmetros 34-36, empezando un aumento notable con respecto a profundidades anteriores en los centmetros 32 y terminando en los 38 (Fig. 1).

-2 Abundancia (Quistes m ) 0
0 2 4 6 8 10 12 14

-2 Abundancia (Quistes m ) 0 0 2 4 6 8 10 12 Profundidad (cm) 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 20x106 100x10 6

3x106

6x106

9x106

12x106 15x106
2004 2003 2002 2001 2000 1999 1998 1996 1995 1993 1992 1989 1987

Profindidad (cm)

16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40

1982 1979 1976 1973 1969 1964 1958 1949 1937 1910

Figura. 1. Registro A. Catenella en sedimentos de Yenecura. La mayor abundancia de quistes viables se encontr entre los 9 y 28 cm de profundidad correspondiendo a los aos 1998 1973 aproximadamente (Fig. 2).
-2 Abundancia (Quistes m )
0 0 2 4 6 8 10 12 4x106
6 8x10

Aos

1984

-2 Abundancia (Quistes m ) 0 0 2 4 6 8 10 12 14 Profundidad (cm) 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 20x106 40x106 100x10 6 150x10 6

12x10 6 16x10 6 20x10 6

2004 2003 2002 2001 2000 1999 1998 1996 1995 1993 1992 1989 1987

Profundidad (cm)

20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40

1982 1979 1976 1973 1969 1964 1958 1949 1937 1910

Figura. 2. Registro de quistes viables en sedimentos de Yenecura. En de dinoflagelados, preferentemente < 90 m. La acumulacin de quistes encontrada en los sedimentos estudiados tambin se puede explicar por la presencia de HS a los 20-28 cm de 2 profundidad en el Testigo 1, los cuales corresponden segn la datacin realizada a los aos 1979 y 1964, de acuerdo a lo sealado por Lembeye (1997). La dinmica poblacional de las especies del genero Alexandrium y otras especies de dinoflagelados txicos ha sido relacionada con la presencia de bancos de quistes, los que seran responsables del aumento de las poblaciones (Anderson & Wall 1978, Anderson et al. 1983, Cembella et al.1988, Frank & Anderson 1992, Hallegraeff et al. 1988, Itakura & Yamahuchi 2001, Tsujino et al. 2002 fide Molinet 2003), por lo tanto, podramos hipotetizar que para la zona de Quelln podra existir un banco debido a que en la datacin realizada se encontraron quistes de A. catenella en sedimentos a lo largo de los dos testigos analizados (2004-

Aos

14 16 18

1984

1910), poca para la cual no existen registros documentados de eventos de A. catenella en al zona estudiada. Con el presente estudio se aumenta el conocimiento sobre los quistes de dinoflagelados que producen las FANs en sedimentos superficiales y profundos al sur de la Isla de Chilo y permite establecer un registro histrico a una escala temporal larga de FANs en sedimentos marinos. Los sedimentos ms antiguos del testigo utilizado para la datacin en el rango de la aplicacin de 210 Pb tienen una edad de 94 aos y corresponden a la profundidad 36-38 cm, La dinmica poblacional de las especies del genero Alexandrium y otras especies de dinoflagelados txicos tendra relacin directa con la presencia de bancos de quistes. Los que seran responsables del aumento de las poblaciones. Referencias Kazumi Matsuoka & Yasuwo Fukuyo, (2000). Technical guide for modern dinoflagellate cyst study. WESTPAC-HAB/WESTPAC/IOC. pp. 77 Lembeye, G. & A. Sfeir. (1996). Distribucin de quistes de Alexandrium catenella y otros dinoflagelados en sedimentos de canales y fiordos someros entre los 47 y 52 S. Resultado del Crucero Cimar-Fiordo 2: 64-69 Lembeye, G. & A. Sfeir. (1997). Distribucin de quistes de Alexandrium catenella y otros dinoflagelados en sedimentos recolectados entre el Estrecho de Magallanes y el Cabo de Hornos. Resultado del Crucero Cimar-Fiordo 3: 73-78. Molinet, C., A. Lafon, G. Lembeye & C. Moreno. (2003). Patrones de distrubucin espacial y temporal de floraciones de Alexandrium catenella (Whedon y Kofoid) Balech 1985, en aguas interiores de la Patagonia noroccidental de Chile. Rev. Chil. Hist. Nat. Vol. 76 n4. 23 pp Montresor, M., A. Zignone, D. Sarno. (1998). Dinoflagellate cyst production at a costal Mediterranean site. Journal of Plankton Research, Vol.20 no.12 pp 2291-2312. 210 239,240 Salamanca, M.,(1989). El efecto de la bioperturbacin en la distribucin del exceso de Pb y Pu en los sedimentos de Baha Concepcin, Chile. Cienc. y Tec. Del Mar, CONA 13: 43-56 Sar, E.A., M.E. Ferrario, B. Reguera. (2002). Floraciones Algales Nocivas en el Cono Sur Americano. Instituto Espaol de Oceanografa 311 pp. Taylor, F.J.R., Y. Fukuyo, J. Larsen. (1995) Taxonomy of Harmful Dinoflagellates. EN: Manual on Harmful Marine Microalgae., Manuals and Guides IOC- UNESCO N33, pp. 283-317. Uribe, J.C. (1995). Monitoreo de la Marea Roja en la XI y XII Regiones. Proyecto FIP94 Informe Final. 93pp. Uribe, J.C. (1996). Quistes de Dinoflagelados en los Fiordos de Magallanes. Resmenes XVI Jornadas de Ciencias del Mar, Concepcin 28-31 Mayo 1996, p.176

Caracterizacin molecular, morfologa y crecimiento celular de cepas chilenas de Alexandrium catenella (Whedon & Kofoid) Balech)
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Daniel Varela , Jorge Vidal , Florencia Navarrete , Catharina Alves de Souza , Daniela Farias 2 Centro i~mar, Universidad de Los Lagos, Casilla 557, Puerto Montt. Escuela de Biologa Marina, Facultad de Ciencias, Universidad Austral de Chile, Casilla 567, Valdivia. dvarela@ulagos.cl

Las floraciones algales nocivas protagonizadas por A. catenella han seguido una progresiva expansin de sur-norte en la macro regin Sur-Austral de Chile (Guzmn et al., 2002). Las diferencias geogrficas en la dinmica y toxicidad descrita para estos eventos (Molinet et al. 2003) pueden responder a la gran heterogeneidad ambiental de fiordos y canales, pero tambin a la presencia de variante intra-especficos presentes en la regin. En este contexto, el presente trabajo procura caracterizar eventuales variantes de esta especie, a travs del anlisis molecular, morfolgico y la evaluacin de sus tasas de crecimiento celular. Para ello se aislaron cepas de A. catenella a partir de la germinacin de quistes, obtenidos desde sedimentos de aguas interiores de diferentes localidades. De esta manera se han obtenido 7 cepas provenientes de la X y XI regin, a las que se sumaron 3 cepas aisladas y mantenidas hace varios aos. Para el anlisis molecular se amplific y secuenci parcialmente la regin de la subunidad mayor del gen ribosomal (que incluye la regin D1-D2) en cepas representantes de cada regin y tiempo de cultivo. Las secuencias obtenidas fueron editadas, alineadas y comparadas a nivel local y con secuencias semejantes obtenidos del GenBank (www.ncbi.nlm.nih.gov/). La morfologa general de las clulas vegetativas de distintas cepas, junto con la forma y tamao de placas aplicales y sulcales fueron observadas y comparadas entre s y con patrones morfolgicos crticos que definen la especie. La curva de crecimiento celular de cepas de diferente origen geogrfico fue construida cultivndolas bajo las mismas condiciones, evaluando el nmero de clulas a lo largo del tiempo. Las secuencias obtenidas (de ms de 600 pares de bases) de las cepas chilenas son un importante aporte a la escasa informacin gentica que existe para esta especie en el hemisferio sur (Sebastin et al., 2005). La comparacin entre secuencias de cepas locales mostr una identidad casi completa entre las cepas chilenas. Las diferencias observadas entre ellas (2 inserciones, 5 delesiones y 11 sustituciones) se registraron principalmente entre cepas recientes y antiguas. Al comparar con secuencias obtenidas del GenBank se observ una gran similitud (Tabla 1) con cepas de un grupo o clado particular del complejo de A. tamarense (A.tamarense, A.catenella, A.fundyense), aisladas de diferentes en del mundo. Estos antecedentes, sumados a la distribucin observada de los diferentes grupos o clados del complejo (Scholin et al., 1994; Sebastin et al., 2005), entregan algunas evidencias del potencial mecanismo de dispersin de esta especie a nivel global (Sebastin et al., 2005). En cuanto a la morfologa, de manera general las clulas en cultivo presentaron formas menos aplanadas anteroposteriormente que lo registrado para los patrones descritos para la especie. Entre las cepas se observaron diferencias morfolgicas entre aquellas de la mismas localidad, pero de distintas edades de cultivo. La mayor variabilidad morfolgica fue registrada en cepas ms antiguas que presentaron clulas redondeadas, individuos aislados o en cadenas de no ms de dos clulas y deformaciones en el complejo del poro apical y placa sulcal posterior (Fig. 1). En relacin con crecimiento celular, tambin se observaron diferencias entre las cepas antiguas y recientes, particularmente en la tasa de crecimiento, que podran ser atribuidas esencialmente a la edad del cultivo. No obstante, se observaron, adems, diferencias entre las cepas recientes (Fig. 2), especialmente en el nmero de clulas alcanzadas en la fase estacionaria. Sin embargo, estas diferencias no parecieran mostrar alguna relacin con el origen geogrfico de las cepas. A pesar de la gran similitud molecular evidenciada entre las cepas chilenas de A. catenella, entre ellas se observan diferencias morfolgicas y de crecimiento en cultivo que podran ser atribuidas a la plasticidad fenotpica de los rasgos observados. Estas observaciones pueden ser consideradas como punto de partida para la comprensin de la dinmica de estos florecimientos y su relacin con las condiciones ambientales locales. Trabajos futuros debieran explorar el comportamiento de las diferentes cepas bajo diferentes variables ambientales.

Referencias Guzmn, L., H. Pacheco, G. Pizarro, & C. Alarcn. 2002. Alexandrium catenella y veneno paralizante de mariscos en Chile. En: Sar. EA.ME. Ferrario & B Reguera (eds)Floraciones Algales Nocivas en el Cono sur de americano: 235 255. Instituto Espaol de Oceanografa, Vigo, Espaa. Molinet, C., A. Lafon, G. Lembeye & C. Moreno. 2003. Patrones de distribucin espacial y temporal de Alexandrium catenella (Whedom & Kofoid) Balech 1985, en aguas interiores de la Patagonia noroccidental de Chile. Rev. Ch. Hist. Nat. 76: 681-698. Sebastin C.R., S. Etheridge, P. Cook, C. ORyan & G. Pitcher. 2005. Phylogenetic analysis of toxic Alexandrium ( Dinophyceae) isolated from South Africa: implication for the global phylogeography of the Alexandrium tamarense species complex. Phycologia 44: 000-000. Scholin C., M. Herzog, M. Sogin & D. Anderson. 1994. Identification of group and strain-specific genetic markers for globally distributed Alexabdrium ( Dinophyceae). II. Sequence analysis of fragment of the large subunit ribosomal RNA gene. J. Phycol. 30: 999 1011.

Tabla 1: Comparacin de la secuencia de una de las cepas chilenas con las 20 cepas ms estrechamente emparentadas (% de identidad), usando el BLASTn-search (www.ncbi.nlm.nih.gov/). Especie designada A. tamarense A. catenella A. catenella A. catenella A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense A. tamarense Nombre de la Origen cepa SJW9704-6 Korea CTCC24 S. Africa CTCC5 S. Africa A3 N. Amrica ULW9903 Korea SJW9704-3 Korea SJC00a Korea KJC97 Korea HAT4 Japn ULW9903 Korea ULW9903 Korea UL7 Korea SJW97046 Korea SJW97043 Korea SJC9522 Korea SJC9516 Korea SJC9516 Korea KCJ97111 Korea KCJ97111 Korea HI28 Korea % de Identidad 99 99 99 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 98 N Acceso a GenBank AY082036 AY311595 AY311594 AF200667 AY082042 AY082035 AY082034 AY082031 AB088279 AB088272 AB088270 AB088268 AB088260 AB088258 AB088257 AB088256 AB088255 AB088252 AB088250 AB0882247

ACC01

ACC02

ACC07

CNMT001

Figura 1: Comparacin de la morfologa de la placa apical (a), y la sulcal (b) de diferentes cepas chilenas de A. catenella. ACC01, ACC02, ACC07: cepas aisladas desde la XI regin y mantenidas en cultivo por varios aos; CNMT001: cepa recientemente aislada desde quistes colectados en la XI Regin. Los recuadros en rojo destacan las mayores diferencias morfolgicas entre las placas.

25000 20000 N de Clulas / ml 15000 10000 5000 0 0 5 10 15 20 25 Tiempo (das) 30 35 40 Q6 Q3 SD 01

Figura 2: Crecimiento celular de diferentes cepas chilenas de A. catenela, cultivadas bajo las mismas condiciones. Q6, Q3: cepas cultivadas desde quistes obtenidos de la X Regin (Quelln); SD01: cepas cultivadas desde quistes obtenidos de la XI Regin (Santo Domingo). (Promedio DE).

Ultraestructura de Ostreopsis siamensis ( Dinophyceae) productor de ciguatera en el Pacfco Mexicano Roberto Corts-Altamirano*, M. Del C. Corts-Lara** y A. Sierra-Beltrn*** *Lab. de Plancton (UA Maz.-ICMyL-UNAM), apdo. postal 811, Mazatln 82040,Mxico. **Depto. de Ciencias, Centro Universitario de la Costa (U de G), Puerto Vallarta, 48280, Mxico. ***Lab. de Gentica Molcular (CIBNOR), apdo.postal 128, La Paz, 23000, BCS. Mxico. robtiko@ola.icmyl.unam.mx Palabras clave: Ostreopsis siamensis, ultrastructura, dinoflagelado toxico, isla Isabel, Pacifco mexicano. La isla Isabel se encuentra localizada hacia el noroeste de San Blas, Nayarit (Fig.1), aproximadamente presenta un rea de 3km. Es una zona protegida y reservada por ser rea de anidamiento de varias aves marinas. Las muestras fueron recolectadas mediante una red de 64 m de abertura, en arrastre superficial durante 2-5min. en 5 estaciones de recolecta. Almacenadas en frascos de plstico de 250ml y fijadas en acetato-lugol en relacin 1:100m. la temperatura del agua en el momento de la recolecta fue de 25.9C, la salinidad 35.3 o/oo y el oxigeno disuelto fue 6.18 mg/l. Las muestras fueron lavadas tres veces en agua destilada y deshidratadas en alcoholes graduales desde 30 hasta acetona pura. Posteriormente fueron sometidas a una secadora al punto crtico del CO2, y se les aadi una cubierta en oro. Finalmente las muestras fueron analizadas en un microscopio electrnico de barrido JEOL/EO JSM-6360. Los resultados indicaron que las tallas tambin estuvieron dentro de los rangos, pero se sobrelapan con el de otras especies, sin embargo, Fukuyo (1981) encuentra especimenes de 18 micras mas chicos y Faust et al., (1996) tres micras mas grandes. A travs de 48 fotografas, 32 de microscopio de luz (=ML) y una microreglilla de escala 1/10m de mm y 16 del electrnico de barrido (= MEB) con escalas includas automticamente, se obtuvieron los siguientes resultados de tallas, longitud dorsoventral 86 a 120 m (prom: 102 m) y de transdiametro 60 a 98 m (prom: 78 m). Los especimenes correspondan a Ostreopsis siamensis segn la descripcin de Faust et al. (1996), sin embargo, la forma del espcimen variaba de la forma de lagrima (Figs.2y3) hasta ser casi oblonga, cuando generalmente se observaba por su cara antapical (Fig.4). El anlisis de las placas dieron la formula ya ampliamente conocida; Po, 3, 7, Vp, Rp, 5,1p, 2,mostradas claramente en las Figs. 2 y 3, las lineas que delinean las placas no fueron retocadas, representan la sutura de cada placa, las placas singulares y sulcales no se determinaron. Sobre la epiteca se pudo apreciar la placa angosta y alargada que soporta el Po, su longitud es de 25.8 m y ancho mximo de 3.2 m, la abertura o Po es de 17 micras. A la placa del Po la rodean 4 placas: 1-3-3-2 (Fig.5), dando lugar a un lado del hexagono que forma la placa 1. La placa ms pequea de la epiteca es la placa del Po, y de la hipoteca es la 2que presenta forma rectangular y esta tocando cuatro placas: 1-1p-5-Rp (Figs. 6-7), aprecindose claramente debajo de la Rp la Vo (Fig.7). Los poros que cubren las tecas son una de las caractersticas ms notables y posiblemente diferenciables en estas especies, O. siamensis junto con O. lenticularis son las que presentan dos tipos de poros, ya documentados por Faust y Gulledge (2002: ver plate 35) y Fukuyo (1981 ver Fig.33). En la primera especie los poros grandes de la regin externa de las placas, presentan variacin en su abertura que va de 0.31 a 0.43 m, diferente a 0.5 m de lo reportado por Faust (1996), y poros chicos de 0.125 m coincidiendo con la anterior investigadora (Figs.8-9). Al analizar la cara interna de las placas (Fig.10) se encontr una membrana que los cubre internamente (=Hymen), estas membranas varan en tamao que va de 0.75 a 1.25 m (Fig.11) y presentan un anillo de microporos (ver recuadro la ampliacin) a veces incompleto, nicamente en los poros grandes. Los poros pequeos no presentan esta membrana y son casi del mismo tamao que los microporos. (Fig. 10). Estas estructuras pueden servir como carcter diferenciador de las nueve especies descritas hasta la actualidad, algo semejante ya ha sido observado en O. mascarenensis, en el cual los grandes

poros que presentan, permiten observar dos pequeas aberturas desde la teca externa (Faust el al., 1996). En las dems especies se desconoce. Aunque en los poroides de las diatomeas del genero Pseudonitzschia se conocen este tipo de estructuras que han servido para esclarecer el tipo de especies (Lundholm et al., 2003: ver Fig. 4), an no se conoce cual es su funcin especifica, aunque se seala de posibles filtros biolgicos. La importancia de este tipo de especies radica en que son toxicas ( Rhodes et al., 2002), y su rpida identificacin coadyuva a precisar el tipo de envenenamiento tanto qumico como mdico. Agradecimientos: A Yolanda Hornelas-Orozco por la toma de fotografas en el microscopio electrnico de barrido. Referencias Faust M. A. & S. Morton .1996. Further SEM Study of Marine Dinoflagellates: The Genus Ostropsis (Dinophyceae). J. Phycol. 32: 1053-1065. Faust M.A. & Rose A. Gulledge 2002. Identifying Harmful Marine Dinoflagellates. Smithsonian Institution. United States National Herbarium, Washington DC. 42: 1-144. http://www.nmnh.si.edu/botany/projects/dinoflag/Taxa/Osiamensis.htm Fukuyo, Y. 1981. Taxonomical study on benthic dinoflagellates colleted in Coral Reefs. Bull. Jan. Soc. Sci. Fish. 47(8): 967-978. Lundholm, N; jvind Moestrup, G.Rytter Hasle & K. Hoef-Emden.2003. A study of the Pseudonitzschia pseudodelicatissima/cuspidate complex (Bacillariophyceae): What is P. pseudodelicatissima?. J. Phycol 39: 797-813. Rhodes Lesley, Towers N., Briggs L., Munday R. & Adamson J. 2002. Uptake of palytoxin-like compounds by shellfish fed Ostreopsis siamensis (Dinophyceae). New Zeland Journal of Marine and Freshwather Research, Vol. 36: 631-636. Figuras: Fig.1. Area de estudio con localizacin de estaciones de muestreo.

Figs.2-7: 2.-Morfologa de Ostreopsis siamensis placas de la epiteca. 3.- Placas de la hipoteca.4.Forma ovoide de la hipoteca. 5.-Detalle de la placa del poro apical (=Po) 6.- Detalle de la regin hipoventral mostrando la placa 4y abajo la placa rgida (=Rp). 7.- Detalle de la regin ventral mostrando la localizacin de la abertura ventral (=Vo) debajo de la placa Rp.

Figs. 8-11. Ultraestructura de la superficie externa e interna de las placas: 8.- Hipoteca del lado externo mostrando la superficie tapizada de poros grandes a 1200x, los poros chicos no se ven ML.9.Poros grandes y chicos, notando mayor abundancia de posos chicos a 14000x en MEB. 10.- Epiteca del lado interno en los que no se aprecia porosidad a 1000x. 11.- Membranas y gran cantidad de poros chicos, recuadro con detalle de una membrana mostrando los microporos.

Biotoxinas marinas en moluscos bivalvos del Estado Sucre, Venezuela La Barbera - Snchez, A., Gamboa, J., Rojas, L., Silva, S., Gallardo, O y Grau, C. Instituto Nacional de Investigaciones Agrcolas ( INIA ) - Sucre / Nueva Esparta. abarbera@inia.gov.ve Palabras claves: Toxicidad, bivalvos, dinoflagelados, estado Sucre, Venezuela. El crecimiento masivo de microalgas nocivas en las costas del estado Sucre, Venezuela afecta la calidad de los moluscos bivalvos de esta zona por la presencia de biotoxinas, constituyendo un riesgo a la salud de los consumidores y ocasionando problemas de tipo sanitario, econmico y social en las comunidades pesqueras ( Ferraz - Reyes 1992, La Barbera - Snchez & Gamboa - Mrquez 2001). La ejecucin del programa de monitoreo en moluscos, permiti detectar tempranamente los eventos txicos, ocurridos de marzo a abril y de junio a septiembre del 2004, en moluscos bivalvos de ocho localidades del estado Sucre y una del estado Nueva Esparta, prohibindose la explotacin y consumo de estos moluscos durante la ocurrencia del fenmeno. En las localidades afectadas: Caimancito, Chacopata, El Guamache, Guayacn, Canguas, Cipara, Baha Patilla, San Juan de Las Galdonas y Cubagua (Fig. 1) se tomaron muestras de moluscos, por buceo, y de agua de mar con botella Niskin y con red de plancton de 20 m diametro de poro. Los moluscos se procesaron aplicando el Bioensayo de Ratn (AOAC 1980) para cuantificar biotoxinas y las de agua por el mtodo de Utermhl (1958) para el anlisis de fitoplancton. Los resultados revelaron variados niveles de concentracin de toxina del tipo paralizante en mejilln (Perna perna, P. viridis), ostra perla (Pinctada imbricata) y pepitona (Arca zebra), de las localidades de Caimancito, Chacopata, El Guamache, Guayacn, Canguas, Cipara, Patilla, San Juan de Las Galdonas en el estado Sucre e Isla de Cubagua en el estado Nueva Esparta. El evento, d urante el perodo marzo - abril, afect a mejillones, ostra perla y pepitona. Las concentraciones mximas de toxina se cuantificaron en Cubagua (240 g STX/100 g tejido), El Guamache (243,6 g STX/100 g tejido) y Chacopata (275,4 g STX/100 g tejido), las que triplicaron el mximo nivel permitido (80,0 g STX/100 g tejido) (Fig. 2). De junio a septiembre, se afect el recurso mejilln, con mayor frecuencia en los bancos de Caimancito y Cangua, en este ltimo mostr mayor intensidad, obtenindose la mayora de las concentraciones sobre los 1.000,0 g STX/100 g tejido. En Caimancito la concentracin de toxinas estuvo por debajo de 380 g STX/100 g tejido. Los mximos valores se obtuvieron en Cipara (2.229,1 g STX/100 g tejido), San Juan de Las Galdonas (5.820,0 g STX/100 g tejido) y Canguas (6.180,0 g STX/100 g tejido), todas estas localidades ubicadas en el Municipio Arismendi. El resto de las concentraciones de toxinas estuvieron entre 85,8 y 960,3 g STX/100 g tejido, con mnimos valores en Baha Patilla (64,0 g STX/100 g tejido, 14 junio) y Caimancito (63,6 g STX/100 g tejido, 21 junio) (Fig. 3). Los elevados niveles de biotoxinas encontrados en las especies de moluscos bivalvos sealadas oblig a las autoridades de salud prohibir temporalmente la comercializacin del recurso. A pesar de haberse alertado a tiempo sobre la situacin, los pobladores de Canguas, consumieron el recurso, ocasionando la intoxicacin de diecisiete nios y once adultos, con el deceso de una nia por consumo de mejillones, estos casos fueron registrados epidemiolgicamente. Se observaron episodios de mareas rojas en las zonas afectadas , sin embargo los anlisis de las muestras de agua mostraron muy bajas abundancias (< 4 org/ml) de dinoflagelados de las especies Alexandrium tamarense, Cochlodinium polykrikoides , Gymnodinium catenatum y Gymnodinium sp., de los cuales A. tamarense y G. catenatum produc en toxinas paralizantes (La Barbera - Snchez et al. 1993, La Barbera Snchez & Gamboa - Mrquez 2001), aunque por su baja abundancia no se puede asegurar que sean los responsables del evento. Ferraz - Reyes (1992) tambin observ baja abundancia de dinoflagelados nocivos en Canguas, estudio que realiz tiempo despus de producirse un brote con numerosos intoxicados y varios fallecidos al consumir mejillones de esta zona. La situacin de peligrosidad de eventos de toxicidad en moluscos bivalvos por el riesgo de salud pblica, amerita dedicar esfuerzos en conducir programas de monitoreos que permitan garantizar la calidad de un producto antes de su comercializacin.

Referencias AOAC. 1990. Paralitic shellfish poison. Biological method. Final action (sec: 959.08). En: K. Hellrich (Ed.). Oficial methods of analysis, 15 TH edition.. Association of Official Analytical Chemists, Arlington. Virginia, USA. pp: 881 882.Ferraz - Reyes, E. 1992. Fitoplancton de la Ensenada de Canguas, Pennsula de Paria, Estado Sucre, Venezuela. Bol. Inst. Oceanogr. Venezuela, Univ. Oriente, 31(1 & 2): 17 - 26. La Barbera - Snchez, A. & J. F. Gamboa - Mrquez. 2001. Distribution of Gymnodinium catenatum and shellfish toxicity in the coast of Sucre state, Venezuela, from 1989 to 1998. J. Shellfish Res., 20(3): 1257 - 1261. Barbera - Snchez, A., S. Hall & E. Ferraz - Reyes. 1993. Alexandrium sp. Gymnodinium cateantum and PSP in Venezuela. En: T. J. Smaida & Y. Shimisu (Eds.). Toxic Dinoflagellates blooms in the sea.. Elsevier, Amsterdam. pp: 281 - 282. Utermhl, H. 1958. Zur vervollkommung der quantitativen phytoplankton methodic. Min. Verein. Theor. Angiew. Limnol ., 9: 1 38