Manual de Controle de Moluscos

MINISTRIO DA SADE Secretaria de Vigilncia em Sade Departamento de Vigilncia Epidemiolgica
2 edio Srie A. Normas e Manuais Tcnicos
Braslia DF 2007
1995 Ministrio da Sade. Todos os direitos reservados. permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte e que no seja para venda ou qualquer fim comercial. A responsabilidade pelos direitos autorais de textos e imagens desta obra da rea tcnica. A coleo institucional do Ministrio da Sade pode ser acessada, na ntegra, na Biblioteca Virtual em Sade do Ministrio da Sade: http://www.saude.gov.br/bvs O contedo desta e de outras obras da Editora do Ministrio da Sade pode ser acessado na pgina: http://www.saude.gov.br/editora Srie A. Normas e Manuais Tcnicos Tiragem: 2. edio 2007 20.000 exemplares Elaborao, distribuio e informaes: MINISTRIO DA SAUDE Secretaria de Vigilncia em Sade Departamento de Vigilncia Epidemiolgica Esplanada dos Ministrios, bloco G Edifcio Sede, 1. andar, sala 134 CEP: 70058-900, Braslia DF E-mail: svs@saude.gov.br Home page: www.saude.gov.br/svs Impresso no Brasil / Printed in Brazil
Ficha Catalogrfica Brasil. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. Vigilncia e controle de moluscos de importncia epidemiolgica : diretrizes tcnicas : Programa de Vigilncia e Controle da Esquistossomose (PCE) / Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia em Sade, Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. 2. ed. Braslia : Editora do Ministrio da Sade, 2007. 178 p. : il. (Srie A. Normas e Manuais Tcnicos) ISBN 978-85-334-1438-9 1. Molusco. 2. Diretrizes tcnicas. 3. Vigilncia epidemiolgica. I. Ttulo. II.Srie. NLM QX 675 Catalogao na fonte Coordenao-Geral de Documentao e Informao Editora MS OS 2007/0260
Ttulos para indexao: Em ingls: Surveillance and Control of Mollusks with Epidemiological Importance: technical directives: Schistosomiasis Control and Surveillance Program Em espanhol: Vigilancia y Control de Moluscos de Importancia Epidemiolgica: directrices tcnicas: Programa de Vigilancia y Control de Esquistosomiasis
Editora MS Documentao e Informao SIA trecho 4, lotes 540/610 CEP: 71200-040, Braslia DF Tels.: (61) 3233-1774 / 2020 Fax: (61) 3233-9558 E-mail: editora.ms@saude.gov.br Home page: www.saude.gov.br/editora
Equipe Editorial: Normalizao: Karla Gentil Reviso: Paulo Henrique de Castro e Faria Capa e projeto grfico: Alisson Albuquerque
Dedicatria
Este livro dedicado a Wladimir Lobato Paraense, decano da malacologia brasileira, por sua inestimvel contribuio ao conhecimento da biologia, da morfologia e da taxonomia dos gastrpodes lmnicos neotropicais, especialmente dos planorbdeos transmissores da esquistossomose.
Sumrio
Prefcio 1 2
9 11 13
Introduo Moluscos
2.1 Consideraes gerais 13 2.2 Gastrpodes 13 2.3 Espcies de importncia epidemiolgica 18 2.4 Espcies exticas de importncia mdica e econmica 33
3 4
Aspectos Ecolgicos
37 43
Tcnicas Malacolgicas
4.1 Coleta de gastrpodes lmnicos 43 4.2 Embalagem e remessa de moluscos 47 4.3 Manuteno de gastrpodes lmnicos em laboratrio 49 4.4 Exame de formas larvais de trematdeos em moluscos 53 4.5 Fixao de gastrpodes lmnicos 54 4.6 Disseco de Biomphalaria para a identificao das espcies transmissoras de Schistosoma mansoni 58 4.7 Tcnica de cruzamento com uso do albinismo como marcador gentico 63 4.8 Manuteno do ciclo de Schistosoma mansoni Sambon, 1907, em laboratrio 65
Formas Larvais de Trematdeos Encontradas em Moluscos Lmnicos 71

5.1 Caracterizao das formas larvais 71 5.2 Procedimentos para colorao de larvas de trematdeos 75 5.3 Tipos cercarianos 76 5.3.1 Cercria de Schistosoma mansoni (Cercaria blanchardi, Piraj da Silva) 76
5.3.2 Outros tipos de larvas de cauda bifurcada emergentes de moluscos lmnicos 77 5.3.3 Exemplo de caracterizao de larva de trematdeo 77 5.3.4 Tipos de larvas de cauda simples emergentes de moluscos lmnicos 79
Tcnicas Moleculares
81
6.1 Diferenciao molecular de moluscos do gnero Biomphalaria 81 6.2 Diferenciao molecular de moluscos do gnero Biomphalaria e deteco da infeco por Schistosoma mansoni a partir de DNA obtido de conchas 82 6.3 Identificao especfica de moluscos do gnero Biomphalaria e deteco da infeco por S. mansoni com utilizao de uma nica reao de PCR 84
7 Vigilncia e Controle dos Moluscos de Importncia Mdica 85

7.1 Estratgias de controle da esquistossomose 85 7.2 Mtodos de controle dos planorbdeos 86 7.2.1 Mtodos biolgicos 86 7.2.2 Mtodos fsicos 88 7.2.3 Mtodos qumicos 90 7.2.3.1 Planos de tratamento 90 7.2.3.2 Moluscicidas 91 7.2.3.3 Algumas desvantagens dos moluscicidas 92 7.2.3.4 Uso 93 7.2.3.5 Testes qumicos sobre a ao residual dos moluscicidas 101 7.2.3.6 Testes para medir a eficcia do moluscicida 102 7.2.4 Mtodos alternativos em investigao: plantas moluscicidas 102 7.3 Procedimentos para o controle do caramujo africano: Achatina fulica Bowdich, 1822 106 7.4 Aes de educao em sade associadas ao controle malacolgico 108
Distribuio dos Moluscos Hospedeiros Intermedirios de Schistosoma mansoni no Brasil, Biomphalaria glabrata, B. straminea, B. tenagophila 111
8.1 Biomphalaria glabrata 111 8.1.1 Ocorrncia de Biomphalaria glabrata por municpio 113 8.2 Biomphalaria tenagophila 116 8.2.1 Ocorrncia de Biomphalaria tenagophila por municpios 117 8.3 Biomphalaria straminea 120 8.3.1 Ocorrncia de Biomphalaria straminea por municpio 121
Legislao Ambiental Comentada
127
9.1 Quanto legislao de proteo fauna 127 9.2 Quanto coleta de moluscos de interesse epidemiolgico 128 9.3 Quanto ao controle e eliminao de moluscos de interesse epidemiolgico 129
Algumas Consideraes sobre o Controle da Esquistossomose Referncias Glossrio Anexos 149 135 145
133
Anexo A Relao de materiais para medio de gua e confeco de croqui 149 Anexo B Formulrio PCE 102 a, com instrues de preenchimento 150 Anexo C Formulrio PCE 102, com instrues de preenchimento 152 Anexo D Formulrio PCE 103, com instrues de preenchimento 157 Anexo E Fluxograma das atividades de malacologia 160 Anexo F Tabela para determinao da vazo e do clculo de moluscicida a ser aplicado pelo mtodo do vertedouro triangular 163 Anexo G Tabela das dimenses sugeridas e dos limites para vertedouros retangulares 164 Anexo H Tabela para a determinao da vazo pelo mtodo do vertedouro retangular 165 Anexo I Relao de materiais para aplicao de moluscicida 167 Anexo J Instruo Normativa n. 109, sobre o controle da fauna sinantrpica nociva e seu manejo ambiental 168 Anexo K Instruo Normativa n. 73, sobre o controle do caramujo africano: Achatina fulica Bowdich, 1822 173
Equipe Tcnica 175
Vigilncia e Controle de Moluscos de Importncia Epidemiolgica: Diretrizes Tcnicas
Prefcio
As diretrizes tcnicas deste manual sobre Vigilncia e Controle de Moluscos de Importncia Epidemiolgica foram escritas por diversos especialistas da Fundao Oswaldo Cruz (Fiocruz) e da Secretaria de Vigilncia em Sade do Ministrio da Sade, Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovveis (Ibama), Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) e Universidade Federal da Paraba (UFPb). Somente isso, pela especializao e pela competncia tcnica dos diversos autores deste manual, seria uma garantia de sua qualidade, mas o fato de esta publicao ter sido dedicada a Wladimir Lobato Paraense, decano da malacologia brasileira, demonstra mais uma qualidade dos seus autores a grandeza do reconhecimento, da gratido, sentimento maior de discpulos, companheiros de trabalho e admiradores. Tenho escrito e falado algumas vezes sobre Lobato Paraense (como o fiz quando lhe foi concedido o prmio Oswaldo Cruz, em 8 de maro de 1985; na comemorao dos seus oitenta anos, em novembro de 1994; na concesso do ttulo de Notrio Saber em Cincia pela Fundao Oswaldo Cruz, em 15 de dezembro de 1995; na concesso da medalha Henrique Arago, em 6 de abril de 2001, durante o Seminrio Laveran-Deane, coordenado por Cludio Ribeiro; e mais recentemente, na comemorao dos seus noventa anos, em 16 de novembro de 2004), e cada vez que falo ou escrevo sobre ele me sinto renovado, na esperana de um dia poder imit-lo na dedicao ao trabalho e na vida. Os seus discpulos, companheiros de trabalho e admiradores, ao dedicarem este manual a Wladimir Lobato Paraense, por sua inestimvel contribuio ao conhecimento de biologia, da morfologia e da taxonomia dos gastrpodes lmnicos neotropicais, especialmente dos planorbdeos transmissores da esquistossomose, nada mais fazem, na grandeza da homenagem, do que expressar o reconhecimento e a gratido pelos ensinamentos e pelo exemplo recebidos, e concretizam o que para mim apenas uma esperana: imit-lo na dedicao ao trabalho e na vida, escrevendo estas diretrizes tcnicas, um presente para a Sade Pblica brasileira. Sinto-me orgulhoso de ter participado desta publicao com este prefcio, que no das diretrizes tcnicas do manual de Vigilncia e Controle dos Moluscos de Importncia Epidemiolgica, porque me falta a competncia para faz-lo, mas uma homenagem a Lobato Paraense e (por que no dizer?) aos autores do trabalho, meus colegas e amigos, pela coragem e pela dedicao de fazer uma obra de tanta importncia e utilidade como esta. Jos Rodrigues Coura Rio de Janeiro, junho de 2006.
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Introduo
A esquistossomose uma doena transmissvel, parasitria, provocada por vermes trematdeos do gnero Schistosoma. Atualmente, existem seis espcies de Schistosoma (S. mansoni, S. hematobium, S. japonicum, S. intercalatum, S. mekongi e S. malayensis) que podem provocar doena no homem, sendo que no continente americano existe apenas o S. mansoni. No Brasil, a esquistossomose mansnica endmica em vasta extenso do territrio e considerada, ainda, um grave problema de sade pblica, porque acomete milhes de pessoas, provocando, anualmente, um nmero expressivo de formas graves e bitos. A doena ocorre em localidades sem saneamento ou com saneamento bsico inadequado, sendo adquirida pela pele e pelas mucosas devido ao contato do homem com guas contaminadas com as formas infectantes de S. mansoni. Entretanto, para que ocorra a transmisso da doena, indispensvel a presena do homem na condio de hospedeiro definitivo, que excreta os ovos do verme pelas fezes, e dos caramujos aquticos do gnero Biomphalaria, que atuam como hospedeiros intermedirios, liberando as larvas infectantes do S. mansoni nas colees hdricas utilizadas pelos seres humanos susceptveis doena. A presena do hospedeiro intermedirio constitui condio necessria e indispensvel para que se desenvolva o ciclo do parasita. Atualmente, existem dez espcies e uma subespcie do gnero Biomphalaria e, destas, trs so hospedeiras intermedirias naturais (B. glabrata, B. tenagophila e B. straminea) e duas (B. amazonica e B. peregrina) so hospedeiras intermedirias potenciais, uma vez que s se infectam experimentalmente. O estudo dos hospedeiros intermedirios da esquistossomose (incluindo sua taxonomia, gentica, distribuio e ecologia) importante para que se possa interpretar corretamente o papel que cumprem na transmisso da doena e se possa orientar as medidas de controle, adequadas a cada localidade, dirigidas aos caramujos. Porm, o mecanismo de transmisso da esquistossomose extremamente complexo e depende, alm dos elementos diretamente envolvidos no ciclo de transmisso, dos fatores condicionantes inerentes a cada localidade. Para o sucesso da vigilncia e do controle da esquistossomose, as medidas preventivas, atualmente disponveis, devem ser aplicadas de maneira integrada, desde o diagnstico precoce e o tratamento dos portadores de S. mansoni, passando pela pesquisa, pelo controle dos hospedeiros intermedirios, at as
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Secretaria de Vigilncia em Sade
aes educativas em sade para as populaes sob risco e, finalmente, as aes de saneamento, para modificao dos fatores ambientais favorveis transmisso e manuteno da doena. Todas essas medidas preventivas, particularmente aquelas voltadas para os hospedeiros intermedirios, que so objeto deste manual, afetam diretamente o meio ambiente e devem, por isso, adequar-se legislao ambiental. Ademais, o controle desses caramujos, como parte do conjunto das medidas de vigilncia e controle da esquistossomose, deve obedecer legislao vigente, s normas e s diretrizes do Sistema nico de Sade (SUS). Nesse sentido, cabe aos municpios a responsabilidade pela execuo das atividades de vigilncia e controle dos hospedeiros intermedirios da esquistossomose; aos estados, a coordenao dessas atividades; e ao Ministrio da Sade, a normatizao e o apoio s aes estaduais e municipais. A rotatividade dos profissionais da esfera municipal que trabalham na rea de vigilncia e controle da esquistossomose torna indispensvel a distribuio, para as Secretarias Municipais de Sade, de manuais tcnicos que as habilitem na execuo das suas atribuies tcnicas e constitucionais.
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Moluscos
2.1 Consideraes gerais

Entre as classes pertencentes ao filo Mollusca, duas delas merecem destaque pela sua importncia mdica, veterinria e econmica: as classes Gastropoda e Bivalvia. A primeira constitui cerca de do nmero total de espcies do filo e inclui os transmissores da esquistossomose e de outras helmintoses, bem como espcies consideradas pragas de diferentes cultivos. A segunda contm a maioria das espcies de moluscos utilizadas na alimentao humana (ostras, mexilhes, sernambis, etc.), assim como algumas que causam prejuzos econmicos, como os teredindeos, por exemplo, que perfuram ancoradouros e cascos de embarcaes de madeira.
2.2 Gastrpodes
As principais caractersticas dos gastrpodes so: a) Toro da massa visceral (giro de 180) durante o desenvolvimento embrionrio. Em alguns gastrpodes marinhos e terrestres ocorre o fenmeno de detoro. b) Presena de rdula (dentes quitinosos mveis dispostos em sries, que variam em nmero e forma, de acordo com o tipo de alimentao) e manto ou plio (tecido que recobre a massa visceral, responsvel pela sntese da concha). c) Cavidade palial ou cavidade do manto: onde ocorrem a circulao, a respirao, a excreo e a reproduo. d) Sistema circulatrio aberto; respirao branquial, pulmonar ou tegumentar. e) Tubo digestivo completo, isto , com boca e nus, alm de glndulas anexas. f) Sistema nervoso ganglionar. g) Tentculos: 1 ou 2 pares. h) Massa cefalopodal: expanso musculosa de superfcie ventral em forma de sola, que est fundida com a cabea e corresponde regio que se expande para fora da concha. i) Msculo columelar: prende o corpo do animal concha.
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j) Concha: geralmente univalva e espiralada, porm pode ser reduzida e at mesmo estar ausente em algumas espcies. Os principais termos utilizados no estudo da concha (conquiliologia) esto representados na figura 1.
Abertura da concha Sutura
A
Lbio externo Lbio interno pice
Espira
B
Giro corporal Giro ou volta
Figura 1. Concha de Physa marmorata Guilding, 1828 , em posio anatmica para o estudo, mostrando os principais termos utilizados em conquiliologia. A) vista ventral; B) vista dorsal. Escala: 5mm.
l) Reproduo: hermafroditas ou diicos; fecundao externa, fecundao interna, fecundao cruzada, autofecundao, partenognese, alternncia de geraes e neotenia. m) Desenvolvimento: direto (viviparidade, ovoviviparidade ou oviparidade); indireto, por meio de larvas fixas ou planctnicas (trocfora e vliger). n) Habitats: marinhos, lmnicos (gua doce) e terrestres. Sistemtica: tradicionalmente, a classe Gastropoda dividida nas subclasses Prosobranchia, Opisthobranchia e Pulmonata. Prosobranchia a) Caractersticas gerais: Brnquias localizadas anteriormente ao corao. Concha sempre presente, apresentando oprculo. Sexos geralmente separados (diicos). Maioria das espcies marinhas, porm com representantes lmnicos e terrestres.
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b) Famlias encontradas em ambientes lmnicos no Brasil: Ampullariidae So os maiores gastrpodes lmnicos, podendo chegar at 17cm de comprimento; esto amplamente distribudos no pas, geralmente em guas lnticas. Concha globosa, com exceo no gnero Marisa (planispiral). Possuem oprculo crneo (espcies americanas). Animais diicos, mas geralmente sem dimorfismo sexual externo muito conspcuo. Respirao dupla: pulmo e brnquia. Muito resistentes dessecao. Gneros encontrados no Brasil: Asolene, Felipponea, Marisa, Pomacea e Pomella. Espcies de Pomacea e Marisa cornuarietis (Linnaeus, 1758) foram utilizadas em tentativas de controle biolgico de Biomphalaria spp., transmissoras da esquistossomose. Thiaridae Concha geralmente turriculada, sendo que os primeiros giros freqentemente encontram-se danificados ou mesmo ausentes, devido ao atrito com o substrato. Possuem oprculo crneo. Vivem preferencialmente em ambientes ricos em oxignio. Reproduo sexuada; porm, na ausncia de machos, ocorre partenognese. Exemplo: Melanoides tuberculatus (Mller, 1774), espcie afro-asitica introduzida em vrios pases americanos, tendo sido utilizada como agente biolgico para o controle das espcies transmissoras do Schistosoma mansoni Sambon, 1907, em algumas reas do Caribe. Hydrobiidae Concha pequena oval-cnica ou mesmo turriculada, oprculo crneo, s vezes calcificado. Vivem em gua doce, podendo habitar gua salobra. Exemplos de gneros que ocorrem no Brasil: Littoridina, Heleobia e Idiopyrgus.
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Figura 2. Exemplos de prosobrnquios: A) Pomacea insularum (Orbigny,1835 ); B) Desova de Pomacea sp.; C) Marisa planogyra Pilsbry, 1933; D) Aylacostoma sp.; E) Idiopyrgus sp. Escala: 5 mm.
Opisthobranchia: limitados ao ambiente marinho. Exemplo: Nudibranchia (lesmas do mar). Pulmonata a) Caractersticas gerais: Apresentam um tecido ricamente vascularizado, o qual reveste o teto da cavidade palial e, fundido com o colo, forma um saco pulmonar. Possuem concha externa ou interna, podendo estar reduzida ou mesmo ausente.
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A maioria hermafrodita. Ordens: Stylommatophora, Systellommatophora e Basommatophora. b) Ordem Stylommatophora: Abrange a maioria dos gastrpodes terrestres. Possuem dois pares de tentculos invaginveis. Olhos situados na extremidade dos tentculos ceflicos (posteriores). Hermafroditas, geralmente com abertura genital nica. c) Ordem Systellommatophora: No possuem concha. Realizaram a detoro da massa visceral. Ocorrem no ambiente terrestre (lesmas Veronicellidae) e marinho (Onchidiidae). Algumas espcies de veroniceldeos so as principais transmissoras do nematdeo Angiostrongylus costaricensis Morera & Cspedes, 1971, agente etiolgico da zoonose angiostrongilose abdominal.
Figura 3. Vista dorsal e ventral de uma lesma Veronicellidae, Sarasinula marginata (Semper, 1885), hospedeira natural de A. costaricensis. Escala: 12mm.
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d) Ordem Basommatophora: Possuem concha lisa e sem oprculo. Aquticos, a maioria de gua doce.
Um par de tentculos, no invaginvel, com os olhos situados na base. Hermafroditas com aberturas sexuais separadas.
2.3 Espcies de importncia epidemiolgica

Os moluscos so hospedeiros de trematdeos digenticos e de alguns nematdeos parasitos do homem e dos animais domsticos. No Brasil, as principais doenas s quais os moluscos encontram-se relacionados so a esquistossomose, a fasciolose e a angiostrongilose abdominal. Existem outros moluscos, por exemplo, gastrpodes marinhos da famlia Conidae, que podem acidentalmente injetar veneno, causando a morte de seres humanos (normalmente, catadores de conchas); e, ainda, outras espcies que podem causar intoxicao alimentar e transmitir a clera. As principais famlias de importncia mdica e veterinria pertencem Ordem Basommatophora, a qual engloba: Chilinidae, Lymnaeidae, Physidae, Ancylidae e Planorbidae, segundo a chave de classificao esquemtica fornecida a seguir:
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Ancylidae
cnica, sem enrolamento
Planorbidae
Concha
planispiral
Chilinidae
com enrolamento
dentes na parede columelar da abertura
em espiral
dextrgira Lymnaeidae
sinistrgira Physidae
ausncia de dentes na parede columelar da abertura

Figura 4. Chave de classificao simplificada para as famlias de Basommatophora presentes no Brasil. Escala: 5mm.
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Famlia Lymnaeidae
Vive preferencialmente em guas estagnadas ou de curso lento e possui hbitos anfbios. Entre as espcies presentes no Brasil, Lymnaea columella Say, 1817, e Lymnaea viatrix Orbigny, 1835, so responsveis pela transmisso da Fasciola hepatica Linnaeus, 1758, trematdeo que parasita o fgado de ruminantes, principalmente. Vrios casos de fasciolose humana j foram registrados no Brasil.
Figura 5. Vista dorsal de L. columella (observe os tentculos triangulares). Escala: 5mm.
Famlia Planorbidae a) Caractersticas gerais: Concha geralmente planispiral. Tentculos longos e filiformes; aberturas genitais esquerda.
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Alguns gneros encontrados no Brasil:
C
Figura 6. Representantes de trs espcies de diferentes gneros da famlia Planorbidae no Brasil: A) Biomphalaria glabrata (Say, 1818); B) Plesiophysa guadeloupensis (Fischer Maz, 1883); C) Drepanotrema lucidum (Pfeiffer, 1839). Escala: A e B: 3mm; C: 1,5mm.
Alm do tamanho, tais espcies diferem em diversas caractersticas morfolgicas e conquiliolgicas. Por exemplo, somente nos exemplares do gnero Drepanotrema a abertura da concha do tipo falciforme, e so observadas faixas pigmentadas nos tentculos, nas faces dorsal e lateral da cabea, nas margens da mufla e do p. Gnero Biomphalaria Concha planispiral, com dimetro variando nos indivduos adultos entre 7mm e 40mm. A cor natural da concha amarelo-palha, mas modifica-se em contato com substncias corantes dissolvidas na gua dos criadouros, como o xido de ferro, que confere s conchas colorao mais escura, passando por vrios tons de marrom at o negro. No Brasil existem dez espcies e uma subespcie descritas no gnero Biomphalaria, sendo que apenas trs so hospedeiras naturais do trematdeo S. mansoni. Duas so hospedeiras potenciais, uma vez que se infectam quando expostas experimentalmente ao parasito. Alm da identificao baseada nos caracteres conquiliolgicos e anatmicos, existem estudos genticos (de cruzamentos entre indivduos, com utilizao do albinismo como marcador) e moleculares capazes de fornecer diagnstico preciso. a) Principais caractersticas: As espcies apresentam dois tentculos longos e filiformes; olhos na base dos tentculos. A boca contornada pela mandbula, que apresenta a forma de um T, quando vista de frente.
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O colo apresenta as aberturas genitais: a masculina localiza-se atrs da base do tentculo esquerdo e a feminina localiza-se um pouco mais atrs, sob a pseudobrnquia. O p oblongo. Na poro ceflica da massa visceral, o manto dobra-se para formar a cavidade pulmonar.
Quadro sinptico das espcies e da subespcie de Biomphalaria descritas para o Brasil, assinalando as hospedeiras naturais, as potenciais e as no hospedeiras de S. mansoni:
Hospedeiras naturais Hospedeiras potenciais
Biomphalaria glabrata (Say, 1818) Biomphalaria tenagophila (Orbigny, 1835) Biomphalaria straminea (Dunker, 1848) Biomphalaria amazonica Paraense, 1966 Biomphalaria peregrina (Orbigny, 1835) Biomphalaria intermedia (Paraense & Deslandes, 1962) Biomphalaria kuhniana (Clessin, 1883) Biomphalaria schrammi (Crosse, 1864) Biomphalaria oligoza Paraense, 1975 Biomphalaria occidentalis Paraense, 1981 Biomphalaria tenagophila guaibensis Paraense, 1984
No hospedeiras
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Figura 7. Conchas das espcies e da subespcie de Biomphalaria que ocorrem no Brasil: A) Biomphalaria glabrata (Say, 1818); B) Biomphalaria tenagophila (Orbigny, 1835); C) Biomphalaria straminea (Dunker, 1848); D) Biomphalaria amazonica Paraense, 1966; E) Biomphalaria peregrina (Orbigny, 1835); F) Biomphalaria intermedia (Paraense & Deslandes, 1962); G) Biomphalaria kuhniana (Clessin, 1883); H) Biomphalaria schrammi (Crosse, 1864); I) Biomphalaria oligoza Paraense, 1975; J) Biomphalaria occidentalis Paraense, 1981; L) Biomphalaria tenagophila guaibensis Paraense, 1984. Escala: 5mm.
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Figura 8. Biomphalaria: animal retirado da concha com o manto levemente rebatido, para visualizao dos rgos internos. Massa cefalopodal (ms), cavidade pulmonar (cp), mufla (mf), tentculo (te), colo (c), abertura genital masculina (om), colar ou borda do manto (cm), pseudobrnquia (ps), pneumstoma (pn), abertura anal (an), msculo columelar (mc), crista lateral (cl), crista retal (ct), veia renal (vr), veia pulmonar (vp), tubo renal (tr), reto (rt), glndula de albmen (ga), intestino anterior (ia), intestino mdio (im), intestino posterior (ip), estmago (et), glndula digestiva (gd), p (p), ovoteste (ot). Extrado de Paraense (1975).
Manto No manto podem ser observados: (1) o corao, contido no pericrdio e constitudo por uma aurcula e um ventrculo; (2) parte da glndula de albmen; (3) as veias pulmonar e renal; (4) o ureter e seu meato; (5) o rim; (6) o pneumstoma; e (7) a crista lateral. O rim formado por uma poro sacular, justaposta esquerda do pericrdio, que se continua por uma poro tubular (tubo renal) situada entre a veia renal e a veia pulmonar. A observao do manto extremamente importante para a identificao especfica, uma vez que o principal carter diagnstico de B. glabrata, a crista renal, encontra-se no manto.
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Figura 9. A) Manto de Biomphalaria sp.; B) Manto de B. glabrata, com crista renal. Estruturas: corao (co), pericrdio (pe), glndula de albmen (ga), veia pulmonar (vp), veia renal (vr), tubo renal (tr), crista lateral (cl), crista renal (cr), colar do manto (cm), ureter (ur), meato do ureter (mu) e pneumstoma (pn). Extrado de Paraense (1975).
Sistema respiratrio Predomina a respirao atmosfrica: a hematose ocorre na rede vascular da parede pulmonar, de onde o sangue flui para o corao atravs da veia pulmonar. A respirao aqutica ocorre atravs da pseudobrnquia (sede principal) e do tegumento em contato com o meio lquido.
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Sistema nervoso
Formado por 11 gnglios, sendo cinco em pares (bucais, cerebrais, pleurais, pedais e parietais) e um isolado (visceral). Esses gnglios formam um anel ao redor do esfago (anel periesofagiano), logo atrs do saco bucal. Sistema digestivo O alimento pode ser de vrios tipos, dependendo do substrato em que o planorbdeo se encontre. A rdula, presente no saco bucal, raspa o substrato extraindo os alimentos, que podem ser algas, bactrias, fragmentos de animais e vegetais, sais minerais, etc.
Figura 10. Biomphalaria sp. Sistema digestivo: mandbula (ma); saco bucal (sb); dentes da rdula: central (c), marginal (m), intermedirio (i) e lateral (l); glndula salivar (gs); esfago (ef); estmago: papo (pa), moela (mo), piloro (pl); glndula digestiva (gd); intestino: anterior (ia), mdio (im) e posterior (ip); reto (re); crista retal (ct); nus (an). Sistema nervoso: anel periesofagiano (sn). Sistema respiratrio: pseudobrnquia (pb). Msculo columelar (mc). Extrado de Paraense (1975).
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Sistema reprodutor Os animais so hermafroditas. Quanto sua reproduo, predomina a fecundao cruzada sobre a autofecundao, a qual ocorre somente quando isolados. Esta ltima garante a formao de uma populao a partir de um nico indivduo (estudos experimentais realizados por W. L. Paraense demonstraram que um nico exemplar de B. glabrata pode produzir cumulativamente 10 milhes de descendentes em 3 meses). Entretanto, a fecundao cruzada propicia maior variabilidade gentica.
Figura 11. Biomphalaria parcialmente dissecada mostrando a interao entre os rgos: rgos hermafroditas (), rgos femininos (), rgos masculinos (). Gnglios nervosos (sn), glndula salivar (gs), glndula de albmen (ga), veia pulmonar (vp), veia renal (vr), tubo renal (tr), crista renal (cr), pericrdio (pc), colar ou borda do manto (cm), ureter (ur), meato do ureter (mu), cavidade pulmonar (cp), saco bucal (sb), esfago (ef), estmago (est), intestino (i) e glndula digestiva (gd). Estruturas hermafroditas: canal coletor do ovoteste (cc), vescula seminal (vs), ovispermiduto (od) e ovoteste (ot); estruturas masculinas: bainha do pnis (bp), canal deferente (cd), prstata (pr), prepcio (pp) e espermiduto (ed); estruturas femininas: bolsa do oviduto (bo), espermateca (es), canal da espermateca (ces), glndula nidamental (gn), oviduto (ov), vagina (va), bolsa vaginal (bv) e tero (ut). Extrado de Paraense & Deslandes (1955).
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Figura 12. Sistema reprodutor dissecado de Biomphalaria glabrata: canal coletor do ovoteste (cc), encruzilhada genital (eg), ovispermiduto proximal (odp), ovispermiduto distal (odd), ovoteste (ot) e vescula seminal (vs); estruturas masculinas: bainha do pnis (bp), canal deferente (cd), espermiduto (ed), msculos do complexo peniano [retrator (mr) e protrator (mp)], prepcio (pp) e prstata (pr); estruturas femininas: bolsa do oviduto (bo), bolsa vaginal (bv), espermateca (es), glndula nidamental (gn), oviduto (ov), vagina (va) e tero (ut). Extrado de Paraense (1975).
A disseco do sistema reprodutor permite a identificao especfica dos planorbdeos mediante a observao morfolgica dos rgos (presena e forma de determinadas estruturas, quantificaes, propores entre rgos, mensuraes, posicionamento, etc.). De um modo geral, as espcies vetoras podem ser identificadas com base nas principais caractersticas descritas a seguir. Biomphalaria glabrata Concha de exemplares adultos: de 20mm a 40mm de dimetro; de 5mm a 8mm de largura e cerca de 6 a 7 giros; as paredes laterais dos giros so arredondadas.
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Figura 13. A) Desenho da concha de B. glabrata: vista do lado direito, vista frontal e vista do lado esquerdo, respectivamente; B) manto de um exemplar adulto, onde se v a crista renal; C) manto de um exemplar jovem com linha renal pigmentada; D) sistema reprodutor: canal coletor do ovoteste (cc), encruzilhada genital (eg), ovispermiduto proximal (odp), ovispermiduto distal (odd), ovoteste (ot) e vescula seminal (vs); estruturas masculinas: bainha do pnis (bp), canal deferente (cd), espermiduto (ed), msculos do complexo peniano [retrator (mr) e protrator (mp)], prepcio (pp) e prstata (pr); estruturas femininas: bolsa do oviduto (bo), bolsa vaginal (bv), espermateca (es), glndula nidamental (gn), oviduto (ov), vagina (va) e tero (ut); corao (co), pericrdio (pe), glndula de albmen (ga), veia pulmonar (vp), veia renal (vr), tubo renal (tr), crista lateral (cl), crista renal (cr), linha renal pigmentada (lr), colar do manto (cm), ureter (ur), meato do ureter (mu) e pneumstoma (pn). Desenhos extrados de Paraense (1975).
Caracteres diagnsticos: no manto, a presena de uma crista pigmentada sobre o tubo renal, sendo que nos indivduos jovens somente se observa uma linha pigmentada, sobre a qual se desenvolver a crista renal; sistema reprodutor com bolsa vaginal bem definida. Biomphalaria tenagophila Concha de exemplares adultos: 15mm a 35mm de dimetro, com cerca de 7 a 8 giros carenados, mais acentuadamente no lado esquerdo.
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Figura 14. A) Desenho da concha de B. tenagophila: vista do lado direito, vista frontal e vista do lado esquerdo, respectivamente; B) manto mostrando o tubo renal liso; C) sistema reprodutor: canal coletor do ovoteste (cc), encruzilhada genital (eg), ovispermiduto proximal (odp), ovispermiduto distal (odd), ovoteste (ot) e vescula seminal (vs); estruturas masculinas: bainha do pnis (bp), canal deferente (cd), espermiduto (ed), msculos do complexo peniano [retrator (mr) e protrator (mp)], prepcio (pp) e prstata (pr); estruturas femininas: bolsa do oviduto (bo), bolsa vaginal (bv), espermateca (es), glndula nidamental (gn), oviduto (ov), vagina (va) e tero (ut); corao (co), pericrdio (pe), glndula de albmen (ga), veia pulmonar (vp), veia renal (vr), tubo renal (tr), crista lateral (cl), colar do manto (cm), ureter (ur), meato do ureter (mu) e pneumstoma (pn). Desenhos extrados de Paraense (1975).
Caracteres diagnsticos: concha carenada; sistema reprodutor com bolsa vaginal bem definida; a anatomia da B. tenagophila quase idntica da B. glabrata, diferindo desta pela ausncia da crista renal ou da linha renal pigmentada, presente nos espcimes jovens.
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Biomphalaria occidentalis B. occidentalis foi durante muito tempo identificada como B. tenagophila devido grande semelhana entre as conchas. O estudo morfolgico, porm, revelou algumas diferenas, entre elas a ausncia de bolsa vaginal e o tamanho do prepcio. interessante ressaltar que, apesar da grande semelhana, B. occidentalis no transmissora da esquistossomose. Sua distribuio geogrfica inclui os seguintes estados: Acre, Amazonas, Roraima, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Gois, Paran, Santa Catarina, Minas Gerais e So Paulo.
Figura 15. A) Desenho da concha de B. occidentalis: vista do lado direito, vista frontal e vista do lado esquerdo, respectivamente; B) manto mostrando o tubo renal liso; C) sistema reprodutor: canal coletor do ovoteste (cc), encruzilhada genital (eg), ovispermiduto proximal (odp), ovispermiduto distal (odd), ovoteste (ot) e vescula seminal (vs); estruturas masculinas: bainha do pnis (bp), canal deferente (cd), espermiduto (ed), msculos do complexo peniano [retrator (mr) e protrator (mp)], prepcio (pp) e prstata (pr); estruturas femininas: bolsa do oviduto (bo), espermateca (es), glndula nidamental (gn), oviduto (ov) e vagina (va). Desenhos extrados de Paraense (1981).
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Biomphalaria straminea
Concha de exemplares adultos: de 10mm a 16mm de dimetro, com 3mm a 4mm de largura e cerca de 5 giros.
Caracteres diagnsticos: parede dorsal da vagina enrugada devido presena de uma srie de ondulaes transversais (enrugamento vaginal).
Figura 16. A) Desenho da concha de B. straminea: vista do lado direito, vista frontal e vista do lado esquerdo, respectivamente; B) manto, onde se v o tubo renal liso; C) sistema reprodutor: canal coletor do ovoteste (cc), encruzilhada genital (eg), ovispermiduto proximal (odp), ovispermiduto distal (odd), ovoteste (ot) e vescula seminal (vs); estruturas masculinas: bainha do pnis (bp), canal deferente (cd), espermiduto (ed), msculos do complexo peniano [retrator (mr) e protrator (mp)], prepcio (pp) e prstata (pr); estruturas femininas: bolsa do oviduto (bo), enrugamento vaginal (ev), espermateca (es), glndula nidamental (gn), oviduto (ov), vagina (va) e tero (ut); corao (co), pericrdio (pe), glndula de albmen (ga), veia pulmonar (vp), veia renal (vr), tubo renal (tr), crista lateral (cl), colar do manto (cm), ureter (ur), meato do ureter (mu) e pneumstoma (pn). Desenhos extrados de Paraense (1975).
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Importante: embora os caracteres diagnsticos mais marcantes das espcies transmissoras presentes no Brasil tenham sido relacionados anteriormente, a identificao precisa requer anlises criteriosas, uma vez que existem outras espcies com caractersticas similares.
2.4 Espcies exticas de importncia mdica e econmica

De acordo com a Unio Internacional para a Conservao da Natureza (IUCN), as espcies invasoras representam a segunda maior ameaa biodiversidade em todo o planeta, perdendo apenas para os desmatamentos. Alm de prejudiciais sob o ponto de vista biolgico, as espcies exticas podem tambm causar perdas econmicas e danos sade humana. A seguir, apresentamos alguns exemplos de moluscos introduzidos no Brasil: a) Classe Gastropoda Helix aspersa Mller, 1774 Molusco comestvel europeu conhecido como escargot, introduzido no Brasil provavelmente por imigrantes no incio do sculo XX. Na Regio Sul do Pas, sua ocorrncia em densas populaes em reas urbanas e periurbanas tem causado destruio de hortas e jardins. Achatina fulica Bowdich, 1822 Molusco africano introduzido no Brasil para ser utilizado na alimentao humana. Comparativamente, a criao de A. fulica comercialmente mais lucrativa, uma vez que os moluscos possuem maior peso e tamanho que H. aspersa. Com a proliferao de cursos de criao e venda de matrizes pelo Brasil, a espcie pde se espalhar mais rapidamente, uma vez que os criadores, ao desistirem do empreendimento, inadvertidamente, soltaram os exemplares de seus plantis no ambiente. Ocorre atualmente em quase todos os estados brasileiros, geralmente em densas populaes, destruindo hortas, jardins e diversos tipos de cultivo, causando prejuzos e transtornos s comunidades afetadas. Alm dos previsveis impactos fauna e flora, essa espcie est envolvida na transmisso do Angiostrongylus cantonensis (Chen, 1935), nematdeo responsvel pela meningoencefalite eosinoflica, zoonose endmica no sudeste asitico. Recentemente, dois casos humanos de meningoencefalite transmitidos com participao de moluscos terrestres, inclusive A. fulica, foram registrados no Esprito Santo. Quanto angiostrongilose abdominal, zoonose que ocorre no Brasil, causada pelo A. costaricensis, A. fulica considerada vetora em potencial, requerendo exposio a altas cargas parasitrias para se infectar. At o presente, nenhum exemplar dessa espcie foi encontrado naturalmente infectado por larvas desse nematdeo no Brasil.
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Melanoides tuberculatus (Mller, 1774)
Molusco afro-asitico introduzido no Brasil provavelmente por meio do comrcio de peixes e plantas aquticas. Atualmente encontrado tanto em tanques de piscicultura quanto em bitopos naturais em vrios estados brasileiros, formando populaes extremamente densas, ocasionando em alguns casos o desaparecimento ou o deslocamento de espcies nativas, inclusive Biomphalaria. Estudos realizados no Brasil e no Caribe tm indicado a utilizao de M. tuberculatus em programas de controle biolgico das espcies transmissoras da esquistossomose. b) Classe Bivalvia Limnoperna fortunei (Dunker, 1857) Molusco bivalve asitico introduzido no sul do pas na dcada de 1990, por meio da gua de lastro de navios. Alm da ameaa malacofauna nativa, o fato de ser encontrado em densas populaes, fixas ao substrato, tem causado prejuzos econmicos, principalmente ao setor de gerao de energia, por interferir no funcionamento das usinas hidreltricas, uma vez que as turbinas necessitam ser paralisadas temporariamente, para a limpeza e a retirada dos moluscos. Outros danos envolvem a navegao de cabotagem e o abastecimento de gua nas cidades, pela obstruo das tubulaes de captao de gua. Corbicula fluminea (Mller, 1774) e Corbicula largillierti (Philippi, 1844) Bivalves, tambm de origem asitica, introduzidos na dcada de 1970 e atualmente encontrados em vrios rios brasileiros, inclusive na rea do Pantanal Mato-Grossense. Podem constituir ameaa principalmente s espcies de bivalves nativas, por competir por espao e alimento.
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Figura 17. A) Exemplares de Achatina fulica com diferentes idades; B) Exemplares adultos: Megalobulimus sp. (direita) e A. fulica (esquerda); C) Corbicula sp.; D) Helix aspersa; E) Limnoperna fortunei; F) Melanoides tuberculatus. Escala: 10mm.
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Aspectos Ecolgicos
As reas endmicas para esquistossomose no Brasil so heterogneas quanto ao clima, topografia e vegetao, impedindo generalizaes sobre a caracterizao ecolgica dos criadouros dos moluscos hospedeiros intermedirios nessas diferentes reas. Por isso, so necessrias informaes sobre a ocorrncia desses moluscos em relao aos aspectos ecolgicos relevantes, como as caractersticas fsico-qumicas da gua, a vegetao macroftica e o tipo de sedimento dos criadouros (PIERI, 1995). Os moluscos hospedeiros podem colonizar uma grande variedade de habitats tanto lticos (desde rios at pequenas valas) quanto lnticos (de lagoas a pequenas poas). J os focos de transmisso propriamente ditos geralmente tm caractersticas ecolgicas semelhantes, sendo localizados no peridomiclio de comunidades urbanas ou rurais desprovidas de gua encanada ou saneamento (figuras 18 e 19). Mesmo nas reas sujeitas a secas sazonais, esses criadouros podem albergar populaes permanentes de moluscos hospedeiros, alimentados por nascedouros (figuras 20 e 21) ou gua domstica servida (figura 19).
Figura 18. Foco de transmisso peridomiciliar em Nova Caiar, municpio de So Loureno da Mata, Regio Metropolitana do Recife (PE). Molusco hospedeiro: Biomphalaria straminea.
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Figura 19. Foco de transmisso peridomiciliar em Sotave, municpio de Jaboato dos Guararapes, Regio Metropolitana do Recife (PE). Molusco hospedeiro: Biomphalaria glabrata.
Os bitopos com moluscos revelam, em sua maioria, pH entre 6,0 e 8,0. Em guas com pH cido (por exemplo, abaixo de 5,6), os planorbdeos so incapazes de promover a deposio de clcio para a constituio da concha, o que impede sua colonizao. Aparentemente, pequenas concentraes de clcio na gua so suficientes para atender as necessidades vitais dos caramujos. Densidades populacionais elevadas muitas vezes podem ser encontradas em guas mais duras, ou seja, ricas em clcio. Experimentalmente foi verificado que B. straminea sobrevive bem em guas com at 3g/l de NaCl. Em condies naturais, j foram assinalados planorbdeos em bitopos com concentrao de at 2,6g/l de cloro. Recentemente, foram encontrados exemplares de B. glabrata sobrevivendo em guas com salinidade 15 vezes superior ao mximo aceito para habitats dulccolas (que de 0,5g/l), bem como com concentraes de sulfatos at 489mg/l e de amnia at 39,2mg/l (SILVA et al., 2006). Em condies anaerbicas, bactrias desnitrificantes reduzem nitratos para nitritos, enquanto outras se encarregam de reduzir nitritos para amnia. O efeito prejudicial da amnia tem sido assunto de grande interesse nos campos da investigao biolgica e mdica. As guas que percorrem terrenos cultivados podem ser particularmente enriquecidas com nitratos e tambm fosfatos, estes essenciais ao desenvolvimento do plncton, que servir de alimento aos caramujos. Conseqentemente, em valas de irrigao e esgotos domsticos, a fauna planorbdica particularmente abundante. As caractersticas fsico-qumicas da maioria das colees de gua encontradas nos peridomiclios esto dentro dos limites de tolerncia dos moluscos hospedeiros. A espcie
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B. glabrata, por exemplo, pode tolerar faixas relativamente amplas de condutividade, ons de clcio, sdio e potssio, cloretos, dixido de carbono, nitrognio (amnia), oxignio dissolvido, turbidez, temperatura e pH (veja a tabela a seguir). Fatores fsico-qumicos Condutividade (mho/cm) Clcio (mg/l) Sdio (mg/l) Potssio Ferro (mg/l) Alcalinidade (mg/l de CaCO3) Cloreto (mg/l de Cl) Dixido de carbono (mg/l) Nitrognio (mg/l) (amnia) Slica (mg/l de SiO4) Saturao de Oxignio (%) Turbidez (FTU) Temperatura (C) pH Mnimos 117 2,4 6,7 0,1 0,0 20 1 2,3 0,1 3,1 0,0 3,7 18 5,6 Valores Mximos 2000+ 129 750 54,5 5,4 415 3500 90 2,6 77 86,4 230 41 9,1
A vegetao macroftica mais comum nos criadouros dos moluscos hospedeiros so as plantas herbceas tpicas das vrzeas midas ou alagadas, como ciperceas e comelinceas. Essas plantas podem proporcionar aos moluscos condies microclimticas favorveis, oferecendo proteo contra a radiao solar, altas temperaturas e correntezas (figuras 18 e 19). As formaes arbreas s margens dos criadouros tambm podem amenizar a luz do sol e a temperatura (figura 20). Os moluscos hospedeiros tendem a ocorrer preferencialmente em substratos ricos em argila fina e detritos orgnicos. Tais substratos so ricos em microorganismos epifticos e epilticos, que constituem a principal fonte de alimento dos moluscos hospedeiros. Esses sedimentos proporcionam ainda um substrato denso e macio sob o qual os moluscos podem se abrigar da luz solar mesmo em criadouros sem cobertura macroftica (figura 21).
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Figura 20. Criadouro de Biomphalaria glabrata
Figura 21. Criadouro de Biomphalaria straminea
Um outro aspecto ecolgico relevante a habilidade que os moluscos vetores possuem de sobreviver fora da gua por perodos relativamente longos. Na ausncia de gua, a primeira resposta dos moluscos a retrao do corpo no interior da concha. Essa resposta diminui os efeitos diretos da dessecao; por outro lado, obriga o molusco a sobreviver de suas prprias reservas alimentares, com um suprimento limitado de oxignio e a acumulao de excretas potencialmente txicas. Assim, a sobrevivncia fora da gua vai depender de sua capacidade de conservar recursos (tais como a gua, o oxignio e a energia) e eliminar ou neutralizar os produtos txicos do metabolismo. As trs espcies de moluscos hospedeiros no Brasil possuem, em maior (B. straminea) ou menor (B. tenagophila) grau, a capacidade de resistir dessecao. Quanto B. glabrata, podem ocorrer modificaes morfolgicas, na sua fase juvenil, que tambm contribuem para sua sobrevivncia durante o perodo de seca, a saber: o espessamento da concha, a diminuio da rea de abertura da concha, a formao de lamelas e epifragmas prximo abertura. Em geral, essas modificaes so associadas com alteraes comportamentais (tendncia persistente a sair da gua) e fisiolgicas (estado de dormncia prolongada) caractersticas. Tais indivduos podem se antecipar dessecao dos criadouros, emigrando espontaneamente da gua, retraindo-se na concha, interrompendo seu crescimento e permanecendo em diapausa at o retorno das condies propcias (figura 22). A capacidade desses caramujos de sobreviver estao seca, repovoar as colees de gua sazonais, inclusive albergando formas larvares de S. mansoni, torna seu controle mais difcil.
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Figura 22. Espcime juvenil de Biomphalaria glabrata que emigrou da gua na ausncia de condies adversas do meio, entrando em um estado de dormncia persistente (diapausa). A) lamelas prximas abertura da concha; B) margem externa do corpo retrado na concha; C) lmina dgua. (Fotografia de Paul Sterry).
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Tcnicas Malacolgicas
4.1 Coleta de gastrpodes lmnicos

Os moluscos lmnicos podem ser encontrados em diferentes colees hdricas, tais como: audes, alagados, brejos, crregos, lagoas, lagos, valas de esgoto ou drenagem, riachos e rios. A correnteza dos rios e dos crregos um fator importante: as colnias geralmente so abundantes em guas estagnadas, enquanto que em guas correntes, com velocidade superior a 30cm por segundo, os moluscos no formam populaes. Os representantes da classe Gastropoda so encontrados aderidos vegetao, s rochas ou s margens do criadouro, podendo tambm estar enterrados no fundo do corpo dgua; este ltimo comportamento mais freqente nos moluscos pertencentes classe Bivalvia. Equipamentos necessrios: a) Concha de captura: consiste de um cabo de madeira ou ao, com aproximadamente 1m de comprimento, acoplado a uma peneira ou uma concha de metal perfurada (furos em torno de 2mm). Para facilitar o transporte da concha, o cabo pode ser confeccionado em duas partes, unidas por uma rosca ou um parafuso. A largura da malha ou dos furos importante, pois deve permitir somente a passagem da gua do criadouro, retendo pequenos espcimes como Ancylidae, Antillorbis, Drepanotrema, jovens de Biomphalaria e pequenos bivalves. Em alguns casos, a concha de captura pode ser substituda por uma pequena draga. b) Pinas longas e pinas com pontas finas. Em alguns ambientes, pinas com pontas finas so necesssrias para retirar o molusco que se encontra preso s frestas das rochas ou dos troncos. c) Recipientes plsticos e sacos de plstico ou de tecido umedecido em gua, para acondicionar os moluscos. d) Luvas e botas de borracha, para proteo individual. e) Caderneta de campo, lpis e fita adesiva para a identificao do bitopo e da coleta. Todas as anotaes devem ser feitas no local: tipo de ambiente, vegetao, topografia, clima, temperatura e pH da gua, umidade do ar, fauna acompanhante e coordenadas geogrficas obtidas com um aparelho de GPS (Global Positioning System ou Sistema de Posicionamento Global). Outras anlises da gua (como: turbidez, oxignio dissolvido, ferro, cloretos, gs carbnico, cloro e mangans)
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podem ser feitas no local, com o uso de uma aparelhagem especfica, ou aps o transporte de uma amostra, no laboratrio. f) Bolsa trmica ou isopor para o transporte: o uso de um pouco de gelo aconselhvel em regies mais quentes, desde que no entre em contato direto com os recipientes contendo os moluscos. g) Coletes com vrios bolsos, para facilitar o transporte do equipamento de trabalho. Os mtodos de coleta variam segundo o tipo de estudo: as anlises qualitativas requerem vrias amostragens em pocas diferentes, e as quantitativas baseiam-se em tcnicas que envolvem a delimitao da rea amostral, o tempo de coleta ou o nmero de conchadas e a quantidade de coletores. Trabalhos de campo Os trabalhos de campo em malacologia devero ser precedidos do reconhecimento geogrfico da rea (RG), de forma a assinalar em desenho simplificado (croqui) todas as moradias, as estradas, os caminhos, as colees hdricas e os criadouros de caramujos (anexos A e B); e, ainda, com cadastro da populao residente. Atualmente, imprescindvel identificar a rea com o uso de GPS, que fornece com preciso a latitude e a longitude, possibilitando a insero dos dados em softwares especficos. A manipulao dos dados no Sistema de Informao Geogrfica (SIG) permite que se visualize a distribuio espacial das ocorrncias das espcies, sobrepondo-as em mapas temticos (hidrografia, vegetao, relevo, clima, densidade populacional, etc.) e permitindo correlaes com as variveis geoambientais.
Figura 23. Conchas de captura de moluscos lmnicos.
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A tcnica de coleta consiste em raspar com a concha de captura a vegetao submersa, as margens e o fundo dos criadouros. Na superfcie, o material recolhido deve ser cuidadosamente analisado procura dos moluscos, observando-se as folhas e os pequenos gravetos, onde os espcimes jovens ou pequenos moluscos, como os ancildeos, encontram-se presos. medida que os moluscos vo sendo encontrados, devem ser postos no recipiente plstico, sem gua, e o material da concha deve ser novamente lavado at a confirmao da ausncia de moluscos, para ento ser desprezado. aconselhvel que se coloque no frasco um pequeno pedao de folha retirado do criadouro, para manter a umidade. Se forem coletados exemplares da famlia Ancylidae, necessrio colocar um pouco da gua. Exemplares grandes, como os ampularideos, devem ser acondicionados em sacos plsticos ou de tecido umedecido em gua. imprescindvel colocar uma etiqueta com o nmero de identificao referente s anotaes da caderneta de campo. A busca dos moluscos deve ser realizada em diferentes pontos de cada criadouro, para se obter uma boa amostragem da malacofauna presente. Os criadouros podem ser temporrios, quando tm gua apenas em alguns perodos, ou permanentes. Podem ser formados pela gua que mina do solo (por vertentes, fontes ou poos); pela gua da chuva ou por drenagem de superfcie; por guas acumuladas em recipientes artificiais, cisternas, sarjetas ou valetas, charcos, inundaes, valas de irrigao, caldeires (grandes colees de gua em cavidades de pedreiras); lagoas, represas ou audes, pntanos, escavaes, cavas formadas pela eroso; crregos e rios. So de grande importncia epidemiolgica as lagoas e as represas, pela presena de pescadores ou banhistas, e ainda os audes, pois so as nicas fontes de gua em certas localidades. Para a confeco do croqui, algumas recomendaes se fazem necessrias: (1) o criadouro dever estar numerado (sugere-se a adoo de cores para representar aqueles de importncia epidemiolgica); (2) no terreno, deve-se dar preferncia a um marco natural prximo ao criadouro para numer-lo, como, por exemplo, rvores, lajeados e cercas; (3) deve-se preencher os dados no formulrio apropriado (Identificao de colees hdricas PCE-102a) conforme indicado no anexo B. As equipes de campo, aps o reconhecimento do local, devero identificar e assinalar os criadouros atuais e potenciais dos planorbdeos, caracterizando os criadouros de importncia epidemiolgica. Considerando-se a freqncia da populao ao local, a ocorrncia de planorbdeos com as formas infectantes de S. mansoni, a densidade populacional dos moluscos e a espcie transmissora, os criadouros ou focos sero classificados conforme seu grau de significncia ou importncia epidemiolgica. Esses dados sero preenchidos em formulrio apropriado (Potencial de transmisso PCE-103), conforme indicado no anexo D. Tendo-se em vista a representatividade sob o ponto de vista ecolgico e a similaridade dos resultados colhidos em estaes de captura, situadas em um mesmo criadouro, uma ou vrias destas devero ser transformadas em estaes de controle,
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interrompendo-se o exame peridico em todos os outros pontos de captura inicialmente analisados. Em localidade ainda no coberta por operaes regulares de malacologia, deve ser feito inicialmente o mapeamento, para identificao e caracterizao dos criadouros, conforme descrito. Nas estaes de controle, o monitoramento da populao de planorbdeos deve ser peridico (mensal), e o nmero de estaes de controle ser o mnimo necessrio para fornecer dados representativos de cada ectopo encontrado na rea. Sempre que possvel, os dados pluviomtricos devem ser includos. Os criadouros em campo, alm de registrados nos documentos destinados para tal fim, sero identificados pela anotao dos seguintes dados:
CH N. ___________CR N. ____________ Foco _____________

Onde: CH = coleo hdrica; CR = criadouro. Em colees hdricas aparentemente secas, cobertas por camadas de barro (crostas), a pesquisa de planorbdeos torna-se mais trabalhosa: o sedimento dever ser removido com enxada (equipamento a ser inserido, conforme o ambiente a ser pesquisado) e cuidadosamente analisado quanto presena dos moluscos, sendo importante o registro da profundidade da busca. Aps o estudo qualitativo da fauna malacolgica presente, que inclui a caracterizao dos planorbdeos (transmissores da esquistossomose ou no) e das demais espcies, dever ser iniciado um estudo quantitativo dos moluscos de importncia mdico-veterinria. Existem diferentes mtodos para se determinar a densidade dos planorbdeos, em decorrncia do tipo de criadouro (tamanho, caractersticas da vegetao, das margens, do substrato, profundidade, etc.) e do interesse da pesquisa. O servidor destacado para o trabalho de campo em malacologia dever ter a relao das estaes de coleta destinadas anlise quantitativa, as quais devem ser previamente fornecidas pelo responsvel pela atividade na rea. fundamental que se determine a dinmica populacional de cada uma das estaes de controle, caracterizando o perodo em que se verifica a queda natural da densidade dos planorbdeos, o que representa menor risco de transmisso. Esse dado ser obtido a partir do exame apurado das anlises quantitativas ao longo de pelo menos 12 meses de observao. Com o propsito de estimar a densidade populacional dos planorbdeos da rea, a primeira funo do servidor proceder contagem dos caramujos encontrados. De incio, deve ser demarcado o ponto exato onde ser realizada a captura, utilizando-se para isso
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estacas, previamente numeradas, que devem ser fixadas margem do criadouro. Em cada estao so procedidas dez conchadas, buscando-se a coleta do maior nmero possvel de caramujos; esse nmero previamente fixado garante a comparabilidade dos resultados e, ento, uma estimativa confivel da densidade de planorbdeos em diferentes colees hdricas. A quantidade de planorbdeos obtida em cada estao dever ser dividida por 10 (nmero de conchadas), e o valor encontrado corresponder ao nmero de caramujos de cada estao de captura. Quanto maior for a similaridade do mtodo, mais confiveis e comparveis sero as informaes. Um outro mtodo (OLIVIER; SCHNEIDERMAN, 1956) estipula que o nmero de planorbdeos coletados em cada estao de captura deve ser dividido pelo nmero de coletores (estes devem ser experientes na realizao de coletas de moluscos) e o valor encontrado deve ser dividido pelo tempo de coleta, independentemente do nmero de conchadas. Os moluscos coletados devero ser acondicionados em potes plsticos (conforme a tcnica descrita anteriormente) e encaminhados ao laboratrio juntamente com as fichas preenchidas. No laboratrio ser determinada a taxa percentual de caramujos infectados por S. mansoni, com base nas tcnicas de exposio luz e de esmagamento, descritas a seguir. Dessa forma, conclui-se a fase preliminar, que compreende o conjunto de atividades de coleta de informaes necessrias vigilncia e ao controle da esquistossomose. A ltima fase corresponde s atividades peridicas de malacologia, s obras de saneamento ambiental e, quando indicada e possvel, aplicao de moluscicida. Tal aplicao dever ser repetida tantas vezes quanto for necessrio para manter, por um perodo mnimo de seis meses, a densidade de planorbdeos nos nveis indicados (da ordem de 1%, tomando-se como referncia a densidade inicial, ou anterior s aes de controle). Recomenda-se a administrao da medicao especfica na populao humana. As implicaes quanto legislao ambiental vigente, que envolvem as operaes com o uso de moluscicidas, encontram-se descritas no captulo 9. Torna-se claro que o monitoramento dos moluscos, uma das primeiras etapas em estudos epidemiolgicos em reas de esquistossomose, deve ser contnuo e sistemtico. Outras aes devem, se possvel, ocorrer concomitantemente, tais como a educao em sade e ambiente e o saneamento hdrico.
4.2 Embalagem e remessa de moluscos

Para a remessa de moluscos vivos destinados identificao e ao exame de infeco por S. mansoni, prope-se que seja adotada a tcnica que se segue, desenvolvida por W. L. Paraense: 1) fundamental que se verifique se todos os moluscos esto vivos antes que sejam embalados; para isso, eles devem ser colocados numa fina lmina de gua e observados quanto sua movimentao.
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2) Molhe com gua um pedao de gaze de algodo (de 30 a 50cm de comprimento x 20cm de largura), espremendo-o muito bem, de modo que fique levemente mido. Esse detalhe muito importante, pois o excesso de gua mata os moluscos por asfixia, uma vez que so pulmonados. 3) Estenda a gaze sobre uma superfcie plana e coloque os moluscos transversalmente e enfileirados, de modo que fiquem distantes uns dos outros. Tal distncia depender do tamanho do exemplar, sendo 1cm para os menores (por exemplo: Drepanotrema) e 2cm para os maiores (Biomphalaria). Nenhum exemplar deve ser colocado nas margens da gaze, as quais devem ter cerca de 3cm livres, para facilitar o fechamento do cilindro.
Figura 24. De A a D: etapas da embalagem de moluscos lmnicos para remessa.
4) Uma vez que a fileira esteja pronta, a gaze deve ser dobrada sobre os moluscos. Outros exemplares devem ser acondicionados sobre a gaze, e novas fileiras devem ser organizadas usando-se a mesma metodologia. Dessa forma, gradativamente, os moluscos vo sendo organizados em fileiras, entre as dobras da gaze. Entre a ltima fileira de moluscos e a margem superior da gaze, deve existir uma distncia capaz de envolver todo o cilindro. Para se formar o cilindro, as margens direita e esquerda devem ser dobradas e, em seguida, a margem superior deve envolver todo o material, evitando-se que os exemplares consigam sair do cilindro.
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5) Caso existam muitos exemplares em uma nica amostra, vrios cilindros devem ser formados, para garantir a sobrevivncia dos moluscos. Cada amostra deve ser colocada em um saco plstico capaz de envolver todo o cilindro, evitando-se que a gaze perca a umidade. A identificao de cada amostra (com o nome da localidade, o tipo de criadouro, o nome do coletor, a data da coleta, etc.) deve ser colocada dentro do saco plstico, distante da gaze, com o uso de dois sacos plsticos ou de dobras no plstico, evitando-se o contato. 6) O material deve ser colocado em uma caixa resistente, envolta em pedaos de isopor, para se evitar qualquer coliso com as laterais da caixa e possveis danos ao molusco. 7) A caixa no deve ser perfurada e nem ser submetida refrigerao durante o transporte. 8) Evite a exposio do material a moscas durante todo o procedimento de embalagem, pois esses insetos depositam seus ovos nos tecidos dos moluscos, levando-os morte. A longevidade dos moluscos sob essas circunstncias depender de vrios fatores, tais como a espcie em questo (exemplares de Pomacea possuem maior resistncia, podendo sobreviver por vrias semanas ou meses, desde que bem embalados) e a presena de formas larvais de trematdeos, pois os exemplares parasitados morrem mais facilmente. Esse mtodo no recomendado para exemplares de ancildeos, os quais devem ser transportados com uma pelcula de gua do criadouro, em frascos hermeticamente fechados.
4.3 Manuteno de gastrpodes lmnicos em laboratrio

A manuteno dos gastrpodes lmnicos sob condies de laboratrio requer dedicao constante do profissional responsvel. Com a experincia adquirida, o tcnico poder adaptar as tcnicas descritas a seguir colnia utilizada, aos objetivos especficos do trabalho e s peculiaridades de cada laboratrio. gua A gua no deve conter traos de chumbo, cloro ou de qualquer outra substncia qumica que a torne imprpria para o uso na criao. Antes de ser utilizada nos aqurios, recomendvel manter a gua fornecida pelas distribuidoras de abastecimento em recipientes durante alguns dias, at que o cloro evapore. Outro procedimento com o mesmo objetivo pode ser feito. No Departamento de Malacologia do Instituto Oswaldo Cruz, da Fiocruz, foi construda uma parede de pedra, externa ao laboratrio, por onde a gua escorre e fica depositada num tanque concretado, antes de ser usada. importante tambm que a gua seja filtrada em papel de filtro, uma vez que a criao pode ser prejudicada pela
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presena de larvas de insetos, oligoquetos, microcrustceos e protozorios. O pH deve estar entre 6 e 8. O volume de gua necessrio depender da quantidade de espcimes em cada aqurio, bem como do tamanho dos moluscos, da espcie em questo e da finalidade da criao. Assim, no existe uma proporo nica entre o volume de gua e o nmero de moluscos. Em criaes somente para a manuteno da populao em laboratrio, aqurios com capacidade para 2 litros podem comportar satisfatoriamente 1,8 litro de gua e 25 espcimes de Biomphalaria adultas. Uma vez que a densidade de caramujos influencia diretamente o crescimento e o amadurecimento sexual dos espcimes, criaes para a realizao de experimentos com moluscos de tamanho aproximado ou para a obteno de moluscos grandes num curto espao de tempo requerem anlises prvias do volume de gua necessrio. A substituio da gua depender das condies de criao, influenciada pelos seguintes fatores: mortalidade dos moluscos, excesso de excrementos na gua, ausncia de substrato, presena excessiva de alimento ou alta turbidez. Normalmente, a troca de gua ocorre entre 7 e 10 dias, podendo ser totalmente ou parcialmente renovada, sendo, neste caso, aproveitada aproximadamente metade da gua, aps nova filtragem em papel de filtro. Para a troca, todo o contedo do aqurio deve ser transferido para uma peneira com orifcios de pequeno dimetro, a fim de se evitar a perda dos animais. Aps a montagem do aqurio, transfira o contedo da peneira, observando cuidadosamente se algum exemplar ficou preso s malhas. Substrato Os gastrpodes lmnicos so raspadores e utilizam o substrato como complemento alimentar. O substrato para os aqurios formado por argila peneirada (10 partes) enriquecida com carbonato de clcio (1,5 parte) e farinha de ostra (2 partes). Em um aqurio com 1,8 litro de gua e 25 moluscos adultos, 3 gramas de substrato aproximadamente so suficientes, devendo ser renovados a cada troca de gua. Nos aqurios maiores, com 40 litros de gua e cerca de 100 exemplares de Biomphalaria adultas, devem ser adicionadas em mdia 75g de substrato. Nos habitats naturais, nota-se a influncia direta do substrato sobre a consistncia e a cor da concha do molusco. A utilizao de uma camada de areia de rio lavada e esterilizada no fundo do aqurio tambm recomendada por alguns autores. Alimentao Diferentes tipos de alimento foram utilizados em tentativas de se obter maior sucesso na criao de moluscos lmnicos, entre eles: hortalias e legumes como alface, couve, agrio e cenoura; formulaes contendo, por exemplo, alfafa, grmen de trigo e leite em p; e raes prprias para peixes, roedores ou aves.
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Atualmente, o alimento mais utilizado nas criaes sob condies de laboratrio a alface, podendo ser fresca ou desidratada. Tal alimento deve ser oferecido diariamente aos moluscos, sendo a quantidade proporcional ao consumo, para se evitar o apodrecimento do vegetal no aqurio. A forma como oferecida varia conforme a idade do molusco e a espcie. Por exemplo, amostras de Biomphalaria recm-eclodidas preferem alface desidratada, enquanto Physa alimenta-se preferencialmente de alface semi-apodrecida. Qualquer criao necessita de observaes constantes, e as adaptaes devem ser feitas diante das diversas situaes encontradas. Montagem do aqurio Os aqurios ideais devem ser de vidro devido facilidade de limpeza e melhor visualizao de seu interior. Um fragmento de folha de isopor (5 x 3,5cm) ou similar (papel celofane ou plstico) deve ser colocado no aqurio para facilitar a coleta das desovas, as quais, caso contrrio, so geralmente depositadas nas paredes.
Figura 25. Aqurios com exemplares de Biomphalaria (A) e Pomacea (B).
O uso de tampa imprescindvel, para se evitar a fuga dos moluscos e a exposio aos insetos. A tampa de tela preferencialmente indicada, por permitir melhor aerao. Em geral, no h necessidade de aerao artificial, porm em algumas criaes conveniente incluir plantas aquticas no aqurio, como, por exemplo, eldea (Anacharis canadensis), samambaia dgua (Ceratopteris thalictroides), Hygrophila polysperma e Pistia stratiotes, que (alm de oxigenarem a gua) facilitam a coleta das desovas. O uso de plantas deve ser cauteloso, para se evitar a disperso indesejada dos moluscos no ambiente natural ou mesmo a mistura de populaes e espcies no laboratrio. Assim, antes de introduzidas no aqurio, as plantas devem ser inspecionadas rigorosamente, sob microscpio estereoscpico, para verificao da presena de animais (moluscos, microcrustceos, larvas de mosquitos, hirudneos, etc.) ou mesmo de desovas. Os aqurios devem ser mantidos sob luz de lmpadas fluorescentes com fotoperodo de 12 horas de luz para 12 horas de escuro e temperatura entre 23 e 26oC.
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Manipulao dos aqurios
A manipulao dos aqurios depender do objetivo de cada criao, pois as colnias experimentais requerem maior controle do que aquelas que objetivam somente a manuteno das populaes. Como o crescimento do molusco depende, alm de suas caractersticas genticas, das presses ambientais tais como as caractersticas dos criadouros (volume de gua, tipo de substrato, etc.) , a densidade de moluscos, a quantidade e a qualidade de alimento so fatores muito importantes na criao. Para se ter uma criao com indivduos de vrias idades ou tamanhos, as desovas devem ser separadas do aqurio onde esto os moluscos adultos e postas em um outro aqurio. As desovas podem ser retiradas semanalmente, visto que no caso da Biomphalaria o tempo necessrio ecloso ocorre em torno de 6 a 9 dias (em mdia 7 dias e aps a postura em B. glabrata e 7 dias em B. straminea, mantidas sob as mesmas condies). Um pedao desidratado de alface deve ser colocado no aqurio e, medida que os moluscos crescem, a alimentao passa a ser gradativamente substituda por alface fresca. Caso haja muitos indivduos em um nico aqurio, estes devem ser redistribudos em novos aqurios. aconselhvel, neste caso, que se aproveite a gua, completando os volumes com gua previamente filtrada. Quanto ao ritmo de crescimento, quando jovens os moluscos crescem mais rapidamente e, medida que amadurecem sexualmente, o ritmo torna-se mais lento. Tal fato se reflete na manipulao da criao, ou seja, na redistribuio dos moluscos para outros aqurios, na periodicidade das trocas de gua e na distribuio de alimento. Caso os moluscos (Biomphalaria) sejam utilizados em provas de cruzamento, estes devem ser isolados em aqurios pequenos (com capacidade de 200ml) antes que atinjam a maturidade sexual, o que ocorre aps o 20 dia. Ao se iniciar uma criao a partir de indivduos coletados no campo, deve-se estar atento para alguns cuidados necessrios. A presena de formas larvais de trematdeos nos moluscos normalmente impede a oviposio, o que interfere na criao. No caso da existncia de aneldeos oligoquetas (Chaetogaster), encontrados no colo e na cavidade palial do molusco, observa-se maior mortalidade. Assim, para se iniciar a criao, aconselhvel que os moluscos trazidos do campo sejam colocados em frascos com um pouco de gua e expostos individualmente ao calor de lmpadas incandescentes (de 60W) durante 2 a 4 horas. Aps esse perodo, sob microscpio estereoscpio, so agrupados somente os indivduos no parasitados, para formar a gerao parental. Existem ainda variaes interespecficas que afetam a criao. Determinadas espcies so mais difceis de ser mantidas sob condies de laboratrio e, nesses casos, necessrio adaptar as metodologias existentes s peculiaridades de cada espcie. Existem moluscos que permanecem por um determinado tempo fora da gua, aderidos parede do aqurio, podendo ou no apresentar lamelas ou epifragmas na abertura das conchas. J outros moluscos preferem depositar suas desovas sobre as conchas de outros espcimes ou mesmo nas paredes do aqurio.
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4.4 Exame de formas larvais de trematdeos em moluscos

Uma vez que os moluscos coletados nos bitopos naturais encontram-se freqentemente parasitados por formas larvais de trematdeos, tornam-se extremamente necessrias a pesquisa e a identificao dessas formas larvais, especialmente as de S. mansoni, assunto abordado no captulo 5. Para a pesquisa de cercrias, os caramujos devem ser isolados em frascos de vidro transparente (com capacidade de 10ml), com 4ml de gua desclorada e filtrada, e expostos luz de lmpadas incandescentes (de 60W) a uma distncia de 30cm, durante 4 horas. Tal procedimento fornece uma temperatura entre 28 e 30oC, capaz de estimular a emisso cercariana. A visualizao das cercrias nos frascos feita com o auxlio do microscpio estereoscpico (com aumento de 8 vezes). Os moluscos parasitados devem ser reunidos em um aqurio para, a partir deles, se obter uma quantidade considervel de cercrias (pool). Os moluscos que no emitiram cercrias devem ser reexpostos luz, de 5 em 5 dias, at o 30 dia, quando devem ser examinados aps o esmagamento de suas conchas, para a confirmao da ausncia de estdios larvais, e devem ser posteriormente desprezados. O pool de cercrias ser utilizado para infectar experimentalmente camundongos, por via subcutnea (inoculao das cercrias) ou por via percutnea (pela exposio dos animais s cercrias), caso seja necessrio confirmar a espcie do trematdeo em questo (S. mansoni) ou se deseje isolar a cepa.
Figura 26. Exemplares de Biomphalaria expostos luz artificial.
A pesquisa de cercrias tambm deve ser realizada mediante a observao da eliminao noturna das formas larvais, uma vez que existem trematdeos com ciclos biolgicos que envolvem roedores ou outros animais de hbitos noturnos. Para isso, os moluscos so postos nos frascos com gua (conforme citado anteriormente) e deixados no escuro, durante a noite, para exame na manh seguinte.
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Para o esmagamento das conchas, os caramujos devem ser colocados entre placas de Petri, de preferncia com o lado esquerdo voltado para cima, e submetidos a uma leve presso, para que a concha se quebre sem destruir o tecido do molusco. Munido com pinas de pontas finas ou estilete, o profissional deve retirar os pedaos da concha e examinar cuidadosamente o molusco com o microscpio estereoscpico (com aumento de 8 vezes), procura de esporocistos ou rdias em todos os rgos.
Figura 27. Tcnica de esmagamento da concha para procura de estdios larvais de trematdeos.
4.5 Fixao de gastrpodes lmnicos

Para o estudo morfolgico e a identificao das amostras, imprescindvel que os moluscos sejam anestesiados e fixados adequadamente. Os anestsicos so utilizados para evitar que o molusco se contraia, o que dificulta a disseco e a mensurao de suas estruturas. O anestsico ideal para gastrpodes lmnicos, o pentobarbital sdico, comercializado sob o registro de Nembutal ou Hypnol. A concentrao do anestsico e o tempo de imerso na gua quente variam segundo o tamanho do animal. Nos espcimes maiores, como representantes da famlia Ampullariidae, a concentrao deve ser de 0,1% e a imerso deve ocorrer por 1 minuto. Nos menores, a concentrao ser de 0,05% e a imerso ser feita durante 30 a 40 segundos (para exemplares de Biomphalaria, Helisoma, Lymnaea e Physa) ou de 15 a 30 segundos (para Drepanotrema e representantes da famlia Ancylidae). Na falta de anestsico, pode-se tambm fixar o espcime sem a prvia anestesia, porm o animal se contrai. Tcnica de fixao de gastrpodes lmnicos Etapas que devem ser seguidas: a) Coloque os espcimes na soluo anestsica at que se observe o total relaxamento do molusco, verificado com um pincel ou estilete. O tempo necessrio ao do anestsico varia conforme a espcie ou o tamanho do animal. Os planorbdeos,
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em mdia, requerem entre 6 e 12 horas. Para exemplares muito pequenos, como os ancildeos, duas horas so suficientes. Para os maiores (famlia Ampullariidae) so necessrias 20 horas. A quantidade de soluo anestsica ser aquela que permita cobrir todos os exemplares que devem ser fixados e que possibilite que estes se movimentem livremente.
Figura 28. Material necessrio tcnica de fixao de moluscos.
b) Transfira os moluscos para um coador de plstico ou metal (com 7cm de dimetro) e os mergulhe em gua previamente aquecida a 70oC, durante um perodo proporcional ao tamanho do animal. A temperatura da gua e o tempo de imerso devem ser rigorosamente seguidos; caso contrrio, ocorrer o cozimento da hemolinfa e dos tecidos, prejudicando a disseco ou, ainda, ocasionando o no-desprendimento do msculo columelar, dificultando a extrao do corpo do molusco da concha.
Figura 29. Exemplares de Biomphalaria anestesiados e submersos em gua a 70C.
c) Mergulhe o coador em gua temperatura ambiente, para que ocorra o resfriamento dos moluscos.
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d) Munido de duas pinas com pontas finas, segure um exemplar pela concha, mergulhando-o em outro recipiente com gua, e, com a outra mo, procure pinar o p do molusco, transversalmente, puxando-o com uma suave trao. Com esse procedimento, o msculo se desprende e a parte mole pode ser extrada da concha, que vai sendo ocupada pela gua, de forma a diluir os resduos de hemolinfa, facilitando a extrao.
Figura 30. De A a E: etapas da retirada do molusco da concha.
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e) Coloque a parte mole no fixador Railliet-Henry, modificado para animais de gua doce, e ponha a concha para secar, aps ter sido lavada e limpa com um pincel de plo macio. A quantidade de fixador no deve ser menor do que 10 vezes o volume do material a ser fixado. Railliet-Henry adaptado para moluscos lmnicos: gua destilada: 930ml. Cloreto de sdio: 6g. cido actico glacial: 20ml. Formol neutralizado (um pedao de giz posto no frasco original): 50ml. f) Aps 24 horas, o lquido fixador deve ser trocado. Uma vez bem fixado o material, a quantidade de fixador pode ser reduzida objetivando-se a conservao ou a remessa do material fixado. O material conserva-se indefinidamente no fixador, motivo pelo qual este necessita periodicamente de reposio, medida que ocorre sua evaporao. g) O material deve ficar por pelo menos 24 horas no fixador antes de ser dissecado. Se houver a necessidade de um diagnstico urgente, o material pode ser colocado em estufa a 4045C, por 12 horas, o que acelera o processo de fixao. A tcnica de fixao sem o anestsico difere da anterior nos tpicos a, b e c. Os moluscos devem ser imersos individualmente e gradualmente na gua a 70C da seguinte forma: (1) cuidadosamente, pince o molusco do aqurio, evitando que o animal se retraia para dentro da concha; (2) o molusco deve ser colocado na superfcie da gua, com a abertura da concha voltada para cima, durante 15 segundos; (3) em seguida, o animal deve ser imerso por mais 25 segundos, o que completa o tempo necessrio imerso; (4) colocado na gua para o resfriamento, o molusco deve ser extrado da concha, seguindo-se a metodologia descrita para os moluscos que foram anestesiados. No caso de espcimes com concha lamelada (por exemplo, B. schrammi) e de exemplares de tamanho muito pequeno ou com muitos giros (Drepanotrema), a parte mole no deve ser extrada da concha, porque pode se arrebentar facilmente. Assim, o lote a ser fixado deve ser separado em duas partes, uma guardada como parte mole e a outra como concha. O material destinado fixao e ao estudo morfolgico deve ser colocado diretamente no fixador, aps a anestesia e o aquecimento em gua a 70C. O fixador Railliet-Henry deve ser trocado no mnimo duas vezes, para que o material fique bem fixado. At a descalcificao da concha, o frasco deve ser observado freqentemente, j que medida que a concha corroda (pela reao entre o cido actico e o carbonato de clcio) ocorre produo de CO2 e a tampa do frasco pode abrir-se pela liberao do gs formado. Nesse caso, o fixador deve ser trocado com mais freqncia. Quanto ao
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material para conquiliologia, o molusco (depois de aquecido) deve ser mantido na gua, que deve ser trocada periodicamente at o apodrecimento da parte mole. Aps esse perodo, a concha deve ser limpa com um pincel de cerdas macias e posta para secar. Para estudos de biologia molecular, os moluscos devem ser fixados em lcool a 70%.
4.6 Disseco de Biomphalaria para a identificao das espcies transmissoras de Schistosoma mansoni
A tcnica de disseco descrita a seguir foi desenvolvida por Paraense e Deslandes e a utilizada no Departamento de Malacologia do Instituto Oswaldo Cruz, da Fiocruz. A tcnica requer uma placa de Petri rasa, duas pinas com pontas finas e retas (ou dois estiletes), um pincel com cerdas finas e macias e um bom microscpio estereoscpico. a) Do frasco que contm os caramujos fixados, retire um exemplar e o coloque numa placa de Petri rasa que contenha um pouco da soluo fixadora. O caramujo deve estar com o seu lado esquerdo (onde se localizam as aberturas genitais masculina e feminina) voltado para cima.
Figura 31. Exemplar de Biomphalaria fixado visto do lado esquerdo. Observar a abertura genital masculina prxima ao tentculo.
Figura 32. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, mostrando as duas aberturas genitais: A) masculina; B) feminina.
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b) Mantenha uma das pinas na regio cefalopodal, para firmar o animal, enquanto a outra vai separando aos poucos a juno entre o manto e o msculo columelar, sempre pelo lado esquerdo, at a altura do estmago, onde esse msculo termina. Faa o mesmo procedimento com o lado direito do animal.
Figura 33. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, onde se v o incio da separao do manto e do msculo columelar.
Figura 34. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, mostrando a separao do manto.
Figura 35. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, mostrando a separao da parte anterior do manto, que se encontrava presa ao colo.
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c) Feito isso, cuidadosamente desprega-se a parte anterior do manto, que se encontra presa ao colo. Obtm-se, dessa forma, todo o manto destacado e os rgos paliais (corao, pulmo e tubo renal) em condies para que sejam examinados.
Figura 36. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, com o manto sendo rebatido, solto em ambos os lados.
Figura 37. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, com o manto rebatido.
d) O gonoporo masculino encontra-se logo abaixo do tentculo esquerdo, enquanto que o feminino localiza-se posteriormente, sob o colar do manto, prximo abertura anal. Geralmente, possvel ver por transparncia o prepcio e o delicado duto deferente prximo ao gonoporo masculino. A disseco do complexo peniano se inicia nessa regio, retirando-se cuidadosamente o tegumento sobre o complexo e os msculos que o prendem, at que o prepcio e parte do ducto deferente fiquem bem expostos. Este bem fino e de colorao esbranquiada. O prepcio facilmente reconhecido por ser bem mais largo e apresentar colorao negra ou cinza escuro.
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Figura 38. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, com o manto retirado, mostrando: A) o prepcio, a abertura genital masculina; B) o duto deferente, visto por transparncia sob o tecido.
Figura 39. Exemplar de Biomphalaria visto do lado esquerdo, mostrando a disseco do complexo peniano.
e) Em seguida, com a pina, puxe delicadamente o prepcio e o duto deferente at que fiquem completamente visveis. f) Depois, para facilitar a disseco do restante do sistema reprodutor, seccione e separe a cabea-p, o esfago, o reto e todo o msculo columelar, de forma que restem na placa apenas o sistema reprodutor e parte do digestivo (estmago, intestino e glndula digestiva).
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Figura 40. Exemplar de Biomphalaria straminea dissecado, evidenciando apenas o sistema reprodutor.
g) Com o auxlio da pina e do pincel, retire cuidadosamente o resto de manto, muco e hemolinfa, que geralmente encontram-se recobrindo o sistema reprodutor. Essa limpeza necessria para a visualizao das estruturas que possuem importncia taxonmica, como, por exemplo, a bolsa vaginal, o enrugamento vaginal e os divertculos prostticos.
Figura 41. Exemplar de Biomphalaria straminea mostrando o complexo peniano dissecado e o enrugamento vaginal (ev).
h) A glndula de albmen, geralmente com colorao amarelada, encontra-se prxima ao carrefour ou encruzilhada genital. i) Aps a encruzilhada genital, segue-se o delicado ovispermiduto, que se dilata mais adiante, formando a vescula seminal e o ovoteste ou glndula hermafrodita, que ocupa os giros mais internos da concha. O ovispermiduto, apesar de muito fino, pode ser facilmente visto em todo seu trajeto at a vescula seminal, passando pela face ventral do estmago e da glndula digestiva. Para dissec-lo, basta que se v retirando aos poucos a glndula digestiva e o estmago. A glndula digestiva e o ovoteste encontram-se recobertos por tegumento escuro (manto), que deve ser
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retirado para facilitar a observao dos cinos. Estes so geralmente menores no ovoteste do que na glndula digestiva e normalmente apresentam colorao brancoamarelada.
Figura 42. Exemplar de Biomphalaria com o sistema reprodutor dissecado.
j) Quando se fizer necessrio distinguir com maior clareza as ramificaes e o nmero certo de cinos do ovoteste ou dos divertculos prostticos, utiliza-se o lugol como corante.
4.7 Tcnica de cruzamento com uso do albinismo como marcador gentico

Para se distinguir os espcimes produzidos por cruzamento ou autofecundao, o carter albinismo funciona como marcador gentico. Um caramujo albino obrigatoriamente homozigoto, condicionado por um par de alelos recessivos, e produz descendentes exclusivamente albinos, por autofecundao. Qualquer caramujo pigmentado presente na descendncia de um albino corresponde a um heterozigoto, cuja pigmentao decorre da dominncia do alelo normal. Este hbrido, quando em autofecundao, produzir descendentes pigmentados e albinos, condicionados pela segregao dos fatores dominantes e recessivos. Quando so reunidos dois indivduos de uma mesma espcie, sendo um espcime albino e um pigmentado homozigoto, rapidamente ocorre o cruzamento, confirmado pela observao da descendncia, tanto do espcime pigmentado quanto do albino. Toda a descendncia do pigmentado ser pigmentada, e a do albino ser pigmentada at o momento em que o indivduo esgote toda a carga de espermatozides exgenos e volte a realizar a autofecundao. Para confirmar se o indivduo albino fecundou o indivduo pigmentado, uma vez que tanto em autofecundao quanto em cruzamento este homozigoto produz somente indivduos pigmentados, seus descendentes (gerao F1) devem ser isolados em
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pequenos aqurios, antes que atinjam a maturidade sexual, e sua descendncia deve ser observada (gerao F2). No caso de ter ocorrido o cruzamento, haver indivduos pigmentados e albinos na proporo de 3:1 (proporo mendeliana). Para observar as descendncias, deve-se ter certeza da no-utilizao de indivduos estreis ou de indivduos que possuam espermatozides exgenos. Para isso, convm isolar o molusco num aqurio pequeno e observar os embries produzidos por autofecundao, antes que seja realizado o cruzamento experimental. Um fragmento de isopor (de 2 x 3cm) deve ser colocado no aqurio e, diariamente, as desovas devem ser retiradas (com o auxlio de uma tentacnula ou pina) e postas em placas de Petri (de 4cm de dimetro) com gua. Sob o microscpio estereoscpico, com aumento de 8 vezes, possvel observar a quantidade de ovos por desova e a viabilidade dos embries. Em torno do 5 ou do 6 dia, sob a temperatura de aproximadamente 25C, um ponto negro visvel na base de cada tentculo, correspondendo s manchas oculares presentes exclusivamente nos espcimes pigmentados. Como a oviposio geralmente noturna, pela manh as desovas devem ser recolhidas, registradas e observadas, assinalando-se o nmero de desovas, de ovos por desova e verificando-se a presena de ovos vazios e embries vivos ou mortos. De posse dessas informaes, os indivduos pigmentado e albino podem ser colocados juntos em um aqurio. aconselhvel que ambos tenham tamanhos aproximados (medidos em seu maior dimetro pelo lado direito da concha, com uma rgua milimetrada). Sendo indivduos da mesma espcie, enquanto estiverem juntos, os animais realizaro cruzamentos. Sendo indivduos de espcies diferentes, os animais permanecero fazendo autofecundao, fatos confirmados pela observao de cada descendncia. O perodo de tempo em que os moluscos ficam pareados fica a critrio do pesquisador (12 horas ou intervalos de 7 a 10 dias ou, ainda, 20 dias). Aps esse perodo, os espcimes so separados em dois outros pequenos aqurios, e as desovas de cada um devem ser diariamente observadas. Uma planilha deve ser feita desde o incio do pareamento, para que sejam relatados o nmero de desovas, o quantitativo de ovos por desova, a quantidade de embries viveis ou inviveis (aqueles que falham durante as divises embrionrias, cessando seu desenvolvimento), bem como a quantidade de albinos e pigmentados. Os embries obtidos durante o pareamento devem ser desprezados, procedimento diferente daquele realizado para os embries obtidos aps a separao, j que, neste caso, possvel saber precisamente se a descendncia corresponde ao indivduo pigmentado ou albino. Devem ser montados dois aqurios, um para os descendentes do pigmentado (F1P) e outro para os descendentes do albino (F1A), onde os embries sero postos e alimentados (com alface desidratada). medida que os embries crescem, a alimentao deve ser substituda por alface fresca. Quando ainda jovens, isto , antes que adquiram a maturidade sexual, os espcimes devem ser isolados em pequenos aqurios com um fragmento de isopor, e sua descendncia (F2) deve ser observada para
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a caracterizao de seu gentipo (homozigoto ou heterozigoto). Estudos complementares com backcrosses, ou seja, cruzamentos entre os hbridos F1 e espcimes da gerao parental, devem ser feitos. Para a avaliao da compatibilidade gentica entre os indivduos, diversos pares devem ser formados, e os resultados, analisados cuidadosamente. Alm da confirmao de cruzamento pela presena de hbridos, a quantidade de ovos, a viabilidade dos embries, sua posterior fertilidade e a de seus descendentes, bem como o perodo de tempo necessrio exausto dos espermatozides exgenos, so dados importantes que devem ser considerados. Diferentes nveis de especiao, muitas vezes devido s distncias geogrficas, podem interferir nos cruzamentos. Essa tcnica foi desenvolvida por Paraense (1955), ao descrever suas observaes sobre a autofecundao e a fecundao cruzada em B. glabrata. Posteriormente, o mesmo autor (PARAENSE, 1956) assinalou a importncia dessa tcnica para a sistemtica dos moluscos planorbdeos. Tal tcnica permanece sendo utilizada, inclusive com outras famlias de gastrpodes lmnicos.
4.8 Manuteno do ciclo de Schistosoma mansoni Sambon, 1907, em laboratrio

A tcnica de manuteno do trematdeo S. mansoni em laboratrio varia conforme os objetivos e as peculiaridades de cada grupo de pesquisa. Consiste basicamente na exposio dos moluscos aos miracdios, na posterior verificao quanto presena de cercrias e na infeco dos camundongos. a) Exposio dos moluscos aos miracdios Os miracdios podem ser obtidos com o sacrifcio ou no dos camundongos infectados, mediante a digesto dos rgos (extrao e triturao) com os ovos de S. mansoni ou por meio da coleta de fezes, respectivamente. Entre as vantagens da coleta de fezes esto a manuteno dos animais vivos e, a padronizao da origem dos miracdios nos experimentos de suscetibilidade do molusco ao parasito. Para a coleta dos ovos presentes nas fezes, usa-se a tcnica de sedimentao espontnea. Os camundongos infectados so colocados em cristalizadores com cerca de 80ml de gua filtrada, e suas fezes so recolhidas e postas em frasco de Borrel com gua, mantido sobre o gelo. Depois de maceradas com basto de vidro, as fezes so filtradas em gaze de algodo e depositadas em clice de sedimentao. Este deve ser mantido em cmara escura, para evitar a ecloso dos miracdios durante as etapas de lavagem do material. A cada 20 minutos, o sobrenadante deve ser desprezado e o clice novamente completado com gua, at obter um sobrenadante relativamente limpo (aproximadamente 80 minutos aps a macerao das fezes). Essa tcnica pode ser adaptada: alguns laboratrios substituem a
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gua por soluo salina (a 0,85%), o que torna desnecessrio o uso do gelo. Porm, para a obteno dos miracdios, necessria a lavagem do material at a total eliminao do NaCl. Outros utilizam gua a 4C durante as lavagens do material, mantendo o clice de sedimentao na geladeira.
Figura 43. A e B: mtodo para obteno de fezes de camundongos.
A exposio dos moluscos pode ser individual, o que permite que se saiba o nmero exato de miracdios em contato com cada molusco, ou em massa, procedimento que no permite que a relao miracdio/molusco seja conhecida. Exposio individual Despreze o sobrenadante do clice, transferindo cerca de 2ml do sedimento para uma placa de Petri (com dimetro de 9cm) e completando-a com gua desclorada e filtrada at 2/3 do volume total da placa. A quantidade de sedimento colocado ir variar conforme o grau de infeco dos camundongos ou a quantidade de material disponvel. A placa de Petri deve ser exposta a lmpadas incandescentes (de 60W) durante 10 a 15 minutos, distncia de 15cm, para estimular a ecloso dos miracdios. Estes devem ser coletados com a ajuda de uma pipeta Pasteur de calibre fino munida de pra de borracha e sob o microscpio estereoscpico, com aumento de 8 vezes. Para a exposio dos moluscos deve ser utilizada uma placa de cultura de clulas (com poos medindo 1,5cm de dimetro e 1,7cm de profundidade) ou recipientes similares. Em cada poo devem ser colocados um molusco e o nmero de miracdios desejado. O volume do poo deve ser completado com gua, para que os miracdios possam ficar em contato permanente com o molusco. A dose miracidiana utilizada pode ser de 5 a 10 miracdios por molusco, uma vez que no compromete demasiadamente a sobrevida do molusco devido superinfeco. Cobre-se a placa, para
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que o molusco no escape, e aps 5 a 8 horas os moluscos podem ser postos em aqurios. Se possvel, os aqurios devem ser mantidos em ambiente onde a temperatura fique em torno de 25C, para propiciar um bom desenvolvimento do parasito intramolusco. Exposio em massa Despreze o sobrenadante do clice, transferindo todo o sedimento para uma placa de Petri. O tamanho da placa depender da quantidade de material, do grau de infeco dos camundongos e do nmero de moluscos que devem ser expostos. A placa deve ser exposta luz (de lmpada de 60W) durante 10 a 15 minutos. Em seguida, os moluscos devem ser postos dentro da placa. Depois de aproximadamente 12 horas, os moluscos podem ser retirados da placa de Petri e postos em aqurios. A vantagem da exposio em massa consiste na praticidade da tcnica, j que evita a coleta e a contagem dos miracdios. Laboratrios que necessitam de um nmero extremamente alto de miracdios utilizam um balo de Kitazato (de 250ml ou de 500ml) com sada superior para um tubo de borracha. O balo, acoplado ao tubo de borracha e pina de Mohr, deve ser recoberto de preto, de modo que a entrada de luz seja somente na base. As fezes maceradas e lavadas devem ser colocadas no balo, completando o volume com gua at a sada lateral. Os miracdios sero recolhidos abrindo-se a pina de Mohr aps a exposio do balo luz incandescente por, aproximadamente, 15 minutos. b) Verificao quanto presena de cercrias No 25 dia aps a exposio aos miracdios, os moluscos devem ser isolados em frascos de vidro transparente (com capacidade de 10ml), com 4ml de gua desclorada e filtrada, e expostos luz de lmpadas incandescentes (de 60W), a uma distncia de 30cm, durante 6 horas. Tal procedimento fornece uma temperatura entre 28 e 30C, capaz de estimular a emisso cercariana. A visualizao das cercrias nos frascos feita com o auxlio do microscpio estereoscpico (com aumento de 8 vezes). Os moluscos parasitados devem ser reunidos em um aqurio para, a partir deles, se obter um pool de cercrias. Os moluscos que no emitiram cercrias devem ser reexpostos luz, de 5 em 5 dias, at o 70 dia, quando devem ser examinados aps o esmagamento de suas conchas, para a confirmao da ausncia de estdios larvais, e posteriormente devem ser desprezados. Dependendo dos objetivos da pesquisa, alguns parmetros devem ser caracterizados, tais como: (1) o ndice de mortalidade (porcentagem de moluscos mortos entre os expostos aos miracdios), (2) o perodo pr-cercariano (tempo decorrido entre a exposio dos moluscos aos miracdios e a primeira emisso cercariana), (3) a taxa de emisso de cercrias (quantidade de cercrias emitida por molusco ao dia), (4) o ndice de emisso cercariana (porcentagem de moluscos que emitiram cercrias entre os infectados), (5) o perodo cercariano (tempo decorrido entre a primeira e a ltima emisso cercariana) e (6) o ndice de infeco (porcentagem de moluscos infectados entre os expostos aos miracdios). O ndice de infeco difere do ndice de emisso cercariana por abranger todos os moluscos parasitados, incluindo aqueles que no emitiram cercrias.
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c) Infeco dos camundongos
A infeco nos camundongos pode ser por inoculao das cercrias (por via subcutnea) ou pela exposio dos animais s cercrias (por via percutnea). A infeco por via percutnea a mais utilizada, podendo ser feita pela imerso da cauda (e dos membros) do animal ou pelo contato das cercrias com o abdmen do camundongo (mtodo do anel). A idade do camundongo um fator importante. A metodologia usada na infeco nos adultos oferece maior risco ao tcnico e, no caso da imerso da cauda do animal no pool cercariano, necessita de um aparelho capaz de prender os animais, deixando somente a cauda livre. O manuseio e a manuteno dos animais neonatos (indivduos com 5 a 7 dias de vida) so mais fceis e econmicos, alm de possibilitar a aquisio da maior carga parasitria. Para calcular o nmero de cercrias que entraro em contato com o camundongo, deve-se retirar uma gota do pool cercariano, com pipeta Pasteur, e coloc-la em uma pequena placa de Petri ou similar, a fim de que as cercrias possam ser contadas. Tal procedimento varia conforme a experincia do tcnico responsvel: enquanto muitos so capazes de estimar o nmero de cercrias sem ao menos cont-las, outros utilizam a cmara de Neubauer. De posse desse dado, calcula-se o nmero de gotas correspondentes ao nmero de cercrias desejado, podendo ser em torno de 40 a 80 cercrias por animal. Para a infeco de camundongos neonatos, as gotas so colocadas em um frasco de vidro (com capacidade de 10ml), onde ser posto o camundongo. Posteriormente, o frasco dever ser fechado com tampa plstica perfurada (veja a figura a seguir). Uma vez que o processo de penetrao cercariana tem durao entre 10 a 15 minutos, aconselhvel que o camundongo fique em contato com as cercrias por um perodo de 20 a 30 minutos. Aps esse perodo, o camundongo deve ser retirado do frasco, ser parcialmente envolvido em um pouco de algodo e posto na gaiola junto com a me. O volume de gua com cercrias colocado no frasco um fator importante, tambm, e deve equivaler a aproximadamente 0,5ml (acima desse volume, o animal pode se afogar; e, abaixo, as cercrias podem no entrar em contato com o camundongo). Durante o tempo de exposio do camundongo s cercrias, o tcnico deve observar a posio do animal no frasco, para evitar que o camundongo se vire e se afogue. O perodo destinado ao desenvolvimento do parasito at o incio da eliminao de ovos junto com as fezes depende de fatores como a espcie do hospedeiro e seu grau de imunidade. Existem, basicamente, hospedeiros resistentes (co, gato, rato e sagi), pouco suscetveis (cobaia e coelho), parcialmente suscetveis (macaco rhesus) e suscetveis infeco (camundongo e hamster). O exame de ovos de S. mansoni em camundongos submetidos infeco experimental pode ser realizado aps 42 dias da exposio s cercrias. Para a obteno de vermes adultos, pode-se sacrificar o camundongo infectado aps 50 a 60 dias da exposio s cercrias, realizando a perfuso do sistema porta.
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Figura 44. A: obteno do pool cercariano.
Figura 45. B e C: infeco de camundongos neonatos.
d) Taxa de emisso de cercrias O nmero de cercrias emitidas num intervalo de tempo serve para indicar o grau de compatibilidade molusco-parasito. Uma tabela foi proposta por Frandsen (1979) com a definio de sete classes de compatibilidade segundo o nmero de cercrias emitidas (ndice TCP/100), sendo: classe 0 = resistente ou incompatvel (TCP/100 = 0), classe I = no muito compatvel (TCP/100 entre 1 e 10.000), classe II = pouco compatvel (TCP/100 entre 10.001 e 50.000), classe III = compatvel (TCP/100 entre 50.001 e 150.000), classe IV = bem compatvel (TCP/100 entre 150.001 e 250.000), classe V = muito compatvel
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(TCP/100 entre 250.001 e 500.000) e classe VI = extremamente compatvel (TCP/100 acima de 500.001). Para se obter tal ndice, extremamente necessria a padronizao do perodo de exposio do molusco. Os moluscos devem ser individualmente expostos luz das lmpadas incandescentes, por 8 horas, trs vezes por semana, em frascos com 2ml de gua desclorada. Aps esse perodo, o molusco deve ser devolvido ao aqurio e, no frasco que contm as cercrias, devem ser adicionados 0,5ml de soluo de ninhydrina a 2%. A mistura, depois de homogeneizada, deve ser despejada sobre uma placa de Petri (com 10cm de dimetro) forrada por um papel de filtro com 11cm de dimetro, de modo que todo o lquido caia sobre o papel. Os papis resultantes desse processo devem ser previamente identificados com os nmeros dos moluscos e as datas de sua exposio luz, utilizando-se um lpis preto. As placas de Petri devem ser postas numa estufa de secagem a 100C por, aproximadamente, 30 minutos. As cercrias adquirem a cor violeta, que contrasta com o fundo branco do papel. Quando secos, os papis podem ser guardados uns sobre os outros, para que sejam analisados posteriormente. A contagem das cercrias feita sob o microscpio estereoscpico, devendo ser retiradas do papel com um estilete medida que forem observadas. Clculo do ndice TCP/100: Inicialmente, necessrio que se obtenha o total de cercrias estimado para cada molusco. Para isso, calcula-se primeiramente o total de cercrias emitidas para cada molusco, mediante a soma do nmero de cercrias encontrado em cada papel de filtro. O total de cercrias deve ser dividido pelo nmero de amostras, ou seja, pelo nmero de dias em que o molusco foi exposto luz, obtendo-se uma mdia diria de cercrias por molusco. A mdia diria deve ser multiplicada pelo nmero de dias em que o molusco esteve parasitado (perodo cercariano), obtendo-se o total estimado por molusco. Em seguida, para encontrar o ndice TCP/100, somam-se os totais estimados obtidos anteriormente e encontra-se o total de cercrias emitidas pela populao amostral. Esse total deve ser multiplicado por 100 e dividido pelo nmero de moluscos expostos aos miracdios. O resultado obtido indicar a classe de compatibilidade da populao, segundo a tabela proposta por Frandsen (1979).
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5 Formas Larvais de Trematdeos Encontradas em Moluscos Lmnicos
5.1 Caracterizao das formas larvais

Diversos tipos de larvas de trematdeos foram descritos no Brasil por diferentes autores desde o incio do sculo passado. Porm, ainda pouco conhecido o impacto ecolgico das infeces por essas larvas em populaes de moluscos. O aprimoramento dos estudos das relaes antagnicas entre diversas larvas poder contribuir com um possvel controle biolgico. Desde Lutz (1934), com a descrio de vrias dicranocercrias (cercrias de cauda bifurcada ou furcocercrias), tem sido ressaltada a importncia mdico-veterinria desses tipos de larvas, uma vez que pertencem a trematdeos das famlias Schistosomatidae e Strigeidae. Uma grande variedade de formas larvais de trematdeos encontrada em moluscos durante o exame laboratorial. Alm das cercrias de S. mansoni, encontradas em algumas espcies de Biomphalaria, vrios tipos de larvas emergentes destas e de outras espcies de moluscos apresentam uma morfologia que, primeira observao, pode ser confundida com a de S. mansoni. Entre as larvas mais comumente encontradas, destacam-se as cercrias de cauda bifurcada (grupo em que est includa a de S. mansoni) e as de cauda simples (como a da Fasciola hepatica). claro que, alm desses tipos bsicos, uma ampla gama de formas diferentes pode ser encontrada em moluscos. Para algumas dessas larvas, os hospedeiros definitivos j so conhecidos, mas para a grande maioria ainda no foi possvel fazer a identificao, pois os adultos so parasitos de peixes, anfbios, rpteis, aves ou mamferos, alguns ainda desconhecidos para a cincia. Cercrias emergentes dos moluscos, quando possvel, devem ser concentradas por meio da tcnica de passar o lquido que as contm atravs de um filtro de porcelana ou mediante o mtodo de coloc-lo em frascos cnicos (tipo tulipa). De posse dos dados de
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positividade, podem ser obtidos os ndices cercricos globais (ICG), que representam a infeco por cercrias ou outras formas larvrias (metacercrias) de trematdeos encontradas em determinada espcie de molusco e os ndices cercricos especficos (ICE), que representam a infeco por determinada larva de trematdeo encontrada em determinada espcie de molusco (RUIZ, 1952a, 1952b). Para a caracterizao das cercrias, so utilizados exemplares vivos, fixados e corados. Em preparaes no permanentes, o exame a fresco das larvas, com o auxlio de um microscpio, pode ser realizado simplesmente pela adio de uma gota do lquido entre a lmina e a lamnula. A utilizao de soluo aquosa a 0,05% de vermelho de alizarina, vermelho neutro ou azul de metileno, que no matam as larvas, facilita a observao do sistema excretor e das glndulas acetabulares. Algumas gotas de sulfato azul de Nilo na mesma concentrao, aps adio de vermelho neutro, permitem a visualizao das glndulas por colorao diferenciada. As cercrias tambm podem ser fixadas e coradas pelo lugol, o que permite facilmente a contagem dos exemplares e a observao de outras estruturas (como ventosas, espinhos, estiletes e pregas), no facilmente visveis quando a larva est em movimento (os detalhes observados devem ser anotados, e um pequeno esboo da larva deve ser realizado, tendo em vista que nem sempre podem ser visualizados quando feita a montagem definitiva). Para a mensurao das cercrias, bons resultados com alguns tipos de larvas so conseguidos aps a manuteno das cercrias durante um tempo varivel (de 2 a 4 horas) na geladeira. Aps esse perodo, adiciona-se gua quente para mat-las e, a seguir, deve ser feita a observao entre a lmina e a lamnula. A partir de larvas fixadas em lcool (a 70GL) e em soluo de Railliet-Henry ou formalina a 10% (algumas larvas so preservadas de forma mais satisfatria quando se usa gua ou mesmo o fixador quente em torno de 70C), pode-se preparar lminas semipermanentes como, por exemplo, adicionando-se um pouco de lactofenol e algumas gotas de verde malaquita a 1%, que evidenciam os espinhos cuticulares e ceflicos. As preparaes permanentes so obtidas aps as cercrias terem sido coradas com carmim actico, carmim clordrico, carmim brax ou acetoalmen de carmim e montadas em blsamo do Canad (veja os procedimentos para colorao a seguir). Uma vez seca a lmina permanente, desenhos das larvas podem ser obtidos usando-se microscpio adaptado com cmara clara. As larvas tambm podem ser fotografadas. Para descrio e possvel identificao de uma larva, pode ser usado um sistema alfanumrico para designar as cercrias. As medidas podem ser dadas em micrmetros ou milmetros e devem representar a mdia de, no mnimo, 10 exemplares. As medidas e os desenhos obtidos devem ser comparados com as descries e as chaves de classificao sugeridas por diversos autores (FRANDSEN; CHRISTENSEN, 1984; LUTZ, 1933; MALEK, 1962; PORTER, 1938; RUIZ, 1943, 1952a, 1952b, 1952c; SCHELL, 1970; VEITENHEIMER-MENDES, 1982).
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A seguir, apresentamos uma pequena chave de identificao simplificada para os vrios tipos de cercrias e ilustraes de algumas larvas encontradas em moluscos dulciaqucolas. Tal chave poder ser de interesse principalmente para a triagem preliminar em trabalhos de campo, evitando-se, assim, a confuso com cercrias de S. mansoni. Chave simplificada para identificao dos principais grupos de larvas de trematdeos emergentes de moluscos dulciaqucolas (baseada em vrios autores) 1a Cauda com bulbo em forma de cisto com apndices. 1b Cauda sem bulbo em forma de cisto. 2a Cauda curta em forma de boto ou xcara. 2b Cauda longa maior ou no que o corpo. 3a Cauda no bifurcada. 3b Cauda bifurcada. 4a Sem ventosa ventral ou vestgios. 4b Com ventosa ventral. 5a Sem ventosa ventral, com ocelos, apresenta vrias glndulas cistognicas no corpo e, na regio posterior, um par de rgos adesivos; cauda sem pregas (asas ou aletas). 5b Sem ventosa ventral ou vestgios, com ocelos, sem rgos adesivos na regio posterior do corpo; cauda com pregas. 6a Com ventosa ventral larga na regio posterior do corpo. 6b Com ventosa ventral na regio mediana do corpo. 7a Com estilete na ventosa oral. 7b Sem estilete na ventosa oral. Cistfora (famlia Hemiuridae) 2 Microcerca (famlia Troglotrematidae) 3 4 11 5 6 Monostoma (famlia Notocotylidae)
Parapleurolofocerca (famlia Heterophyidae) Anfistoma (famlia Paramphistomatidae) 7 (Xiphidiocercria) 8 10
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8a Cauda com prega dorso-ventral e ventosa ventral menor do que a ventosa oral. 8b Cauda sem prega dorso-ventral. 9a Ventosa ventral menor do que a ventosa oral. 9b Ventosas de tamanhos iguais ou ventosa ventral mais larga do que a ventosa oral. 10a Com um colar de espinhos em torno da ventosa oral (colar ceflico). 10b Sem colar ceflico. 11a Cauda brevifurcada; sem faringe. 11b Cauda longifurcada; com faringe. 12a Ventosa ventral bem desenvolvida; os ocelos podem estar presentes. 12b Sem ventosa ventral ou vestgios. 13a Sem ventosa oral, sem ocelos; corpo com pregas. 13b Com ventosa oral; corpo com pregas, podendo apresentar ocelos. 14a Com ventosa ventral; sem prega na cauda, cauda com corpos no seu eixo, com poros excretores localizados na parte mediana da furca. 14b Sem ventosa ventral ou vestigial; com pregas na furca, cauda sem corpos no seu eixo, com poros excretores na parte distal da furca.
Grupo Ornata (famlias Macroderoididae e Haplometridae) 9 Grupo Virgulata (famlia Lecithodendriidae) Grupo Armata (famlia Plagiorchiidae) Echinostoma (famlia Echinostomatidae) Gimnocfala (famlia Fasciolidae) 12 14 Distoma (famlias Spirorchiidae e Schistosomatidae) 13 Lofocerca (famlia Sanguinicolidae) Monostoma (famlia Clinostomatidae) Distoma (Strigeocercria) (famlias Strigeidae e Diplostomatidae) Monostoma (famlia Cyathocotylidae)
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5.2 Procedimentos para colorao de larvas de trematdeos

As larvas devem ficar no fixador de 12 a 24 horas. Para colorao, vrias solues corantes podem ser utilizadas. A mais comum se baseia na utilizao do carmim. Inicialmente, deve-se montar as baterias de colorao, usando pequenas placas de Petri (ou vidro de relgio), que no devero estar em contato direto com a mesa. Use um suporte ou um papel entre a placa e a mesa. As tampas das placas de Petri devero ter indicao quanto ao tipo de lquido que devero conter (lcool a 70GL, 80GL, 90GL, absoluto, clordrico, tipo de corante) e ao tempo habitual de permanncia da larva na placa. Alternativamente, para larvas de trematdeos, podem ser usados tubos para centrfuga (tipo Falcon). As larvas se sedimentam mais facilmente (boa parte das larvas fica aderida parede do tubo ou do vidro de relgio) e o processo de troca de lquidos se torna mais fcil. Para a colorao pelo carmim actico de Semichon, os seguintes passos devem ser seguidos: 1 Lave, em salina ou gua destilada, as larvas, aps retir-las do fixador (por 3 minutos). 2 Transfira-as para a placa com cido actico glacial e deixe-as ficar imersas no fluido por 3 minutos. 3 Transfira-as para a soluo de carmim actico de Semichon (por tempo varivel; em geral, por 2 horas). 4 Aps esse perodo, transfira-as para o lcool a 70GL durante alguns minutos (para retirar o excesso de corante). 5 Passe as larvas para o lcool acidulado, caso necessrio, at que haja a diferenciao (processo pelo qual, descorando-se um pouco, obtm-se melhor contraste). 6 Volte as larvas para o lcool a 70GL e deixe-as no preparo por 15 minutos; em seguida, coloque-as no lcool a 80GL (idem, ibidem), no lcool a 90GL (idem, ibidem) e no lcool absoluto (idem, ibidem) por 3 vezes (cada vez que passar por este item, troque o lcool). 7 Deixe-as no creosoto de faia por 12 a 24 horas. As larvas podem ser conservadas durante longo tempo no creosoto, antes que sejam montadas. 8 Retire as larvas com o auxlio de um fino estilete (ou com pipeta), escorra o excesso de creosoto e monte-as em blsamo (ao qual se pode adicionar previamente algum creosoto, para torn-lo mais fluido). Evite as bolhas de ar. 9 Seque as larvas em temperatura ambiente ou em estufa. Evite a poeira.
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10 Coloque a etiqueta na preparao.
Se a colorao for pelo carmim brax ou pelo carmim clordrico, suprima a passagem pelo cido actico. A colorao pelo acetoalmen de carmim deve seguir os seguintes passos: 1 Se a fixao foi em lcool, hidrate as larvas passando-as pelos lcoois a 50GL, a 35GL e pela gua corrente por 15 minutos em cada etapa. Se foi em AFA ou formol, passe as larvas pela gua corrente durante 15 minutos. 2 Dilua o corante metade em gua no momento do uso e pode corar as larvas durante 3 at 5 minutos. 3 A seguir, lave-as em lcool a 70GL, diferencie as larvas em soluo aquosa de cido clordrico a 0,5% e lave-as novamente em lcool a 70GL. Desidrate-as em lcool a 70GL (por 15 minutos), a 80GL (por 15 minutos), a 90GL (por 15 minutos), lcool absoluto I (por 30 minutos) e absoluto II (por 30 minutos). 4 Clarifique as larvas em creosoto de faia. 5 Monte-as em blsamo.
5.3 Tipos cercarianos

5.3.1 Cercria de Schistosoma mansoni (Cercaria blanchardi, Piraj da Silva) A cercria de S. mansoni, forma infectante para hospedeiros vertebrados, principalmente o homem, apresenta as seguintes caractersticas: tamanho aproximado de 500m composto de corpo ovalado medindo cerca de 150 a 200m de comprimento por 40 a 60 de largura; cauda cilndrica e alongada bifurcando-se na extremidade final. Apresenta duas ventosas (oral e ventral ou acetbulo), glndulas de adeso e penetrao (que se coram bem por vermelho neutro, vermelho de alizarina ou sulfato azul de Nilo) e aparelho excretor com clulas flama facilmente visveis quando submetidas aos mesmos corantes.
A B
0,1mm
Figura 46. A e B: cercrias de Schistosoma mansoni.
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5.3.2 Outros tipos de larvas de cauda bifurcada emergentes de moluscos lmnicos
Figura 47. A) cercria de Schistosomatidae, mas no de S. mansoni; B a F) cercrias de Strigeidae (escalas: 0,1mm).
5.3.3 Exemplo de caracterizao de larva de trematdeo (SILVA, 1992) Cercria ocelfera Medidas: Corpo com 233,115,1 (199,5 252,7) de comprimento por 63,86,2 (53,2 73,2) de largura. Ventosa oral com 39,54,2 (29,3 46,6) por 39,55,2 (29,3 46,6) de dimetro. Ventosa ventral com 26,6 x 26,60,4 (26,6 27,8) de dimetro. Corpo da cauda com 756,113,3 (738,2 784,7) de comprimento por 45,63,9 (39,9 50,4) de largura. Furca com 227,311,1 (212,8 239,4) de comprimento. Manchas ocelares com 13,3 de dimetro. Relao corpo/corpo da cauda de 0,3:1 (0,25 0,34:1).
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Relao corpo/cauda de 0,2:1 (0,2 0,26:1). Relao corpo da cauda/furca de 3,3:1 (3,1 3,6:1). Descrio:
Corpo estreito e curto em relao cauda. A poro anterior levemente afilada, com ventosa oral irregular a ovalada. Na extremidade posterior do corpo nota-se ligeiro estrangulamento, aps o qual se forma uma meia taa invertida, na qual se encaixa a cauda.
Figura 48. Cercria ocelfera (escala: 0,1mm).
Ventosa ventral esfrica, menor que a oral, situada na regio equatorial do corpo. Tanto a faringe como a pr-faringe so de difcil definio quanto estrutura. Esfago curto e largo, que se bifurca acima dos ocelos, formando cecos longos e estreitos. Estes se estendem at a poro posterior do corpo, sem alcanar a extremidade. O par de ocelos pigmentados situados na primeira metade do corpo se destaca em material a fresco, corado ou no com vermelho neutro ou soluo de lugol, ou em lminas permanentes coradas com carmim actico ou carmim clordrico. Na regio posterior do corpo, observam-se dois grupos de clulas relativamente esfricas, que so, provavelmente, primrdios genitais. Vescula excretora pequena situada na poro posterior do corpo. Recebe dois canais principais, que percorrem lateralmente o corpo. A frmula do sistema excretor 2 (1+1+1+1+1) + 1 + 1. Cauda longa e estreita (de 3 a 4 vezes maior que o corpo) bifurca-se na extremidade posterior, formando uma furca tpica das cercrias brevifurcadas. Estendendo-se por toda a cauda, na sua poro mediana, observa-se o canal do sistema excretor, que se bifurca no entroncamento das furcas, terminando na extremidade destas. Estrias diagonais so observadas na cauda e na furca, semelhantes a msculos. Em ambos os lados das furcas observa-se uma delgada membrana externa com nervuras muito transparentes. Na parte terminal da furca, as membranas laterais, quando acoladas uma contra a outra, do a falsa impresso de um espinho terminal.
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5.3.4 Tipos de larvas de cauda simples emergentes de moluscos lmnicos
Figura 49. Xifidiocercria.
Figura 50. Cercria gimnocfala.
Figura 51. Cercria equinstoma.
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Figura 52. Cercria magnocaudata.
Figura 53. Paranfistoma cercria.
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Tcnicas Moleculares
6.1 Diferenciao molecular de moluscos do gnero Biomphalaria

A identificao especfica dos moluscos brasileiros do gnero Biomphalaria, com utilizao de dados morfolgicos, dificultada algumas vezes principalmente pelo tamanho reduzido dos moluscos e pelo processo de fixao inadequado. Deve-se levar em considerao ainda a estreita semelhana existente entre algumas espcies desse gnero, que culminou no agrupamento de algumas espcies em dois complexos: (1) complexo B. straminea (constitudo por B. straminea, B. intermedia e B. kuhniana); e (2) complexo B. tenagophila (formado por B. tenagophila, B. t. guaibensis e B. occidentalis). Essas dificuldades vm incentivando a utilizao de tcnicas moleculares, que podem auxiliar nos casos em que a morfologia comparativa no seja conclusiva. A taxonomia molecular no menospreza os dados morfolgicos e tem sido utilizada como uma ferramenta auxiliar em determinadas situaes. Estudos que incorporam os dois tipos de anlise podem gerar dados que permitem uma melhor interpretao e compreenso da diversidade biolgica dos organismos em estudo. Entretanto, importante reconhecer que cada mtodo tem suas vantagens e desvantagens. De fato, o renomado malacologista brasileiro W. L. Paraense enfatiza que tanto a taxonomia morfolgica quanto a molecular, desde que corretamente aplicadas, atingem satisfatoriamente o mesmo objetivo. Uma tcnica que tem demonstrado resultados confiveis para a separao das espcies do gnero Biomphalaria presentes no Brasil a PCR-RFLP (reao em cadeia da polimerase e anlise do polimorfismo de fragmentos de restrio). Essa tcnica baseia-se na amplificao, pela PCR, das regies espaadoras transcritas internas (ITS1 + 5.8S + ITS2) do gene codificador do RNA ribossomal e na subseqente digesto desse fragmento com enzimas que cortam a fita dupla da molcula de DNA em stios especficos de reconhecimento, denominados stios de restrio. A figura 57 mostra uma representao esquemtica dos perfis espcie-especficos de moluscos brasileiros pertencentes s dez espcies e uma subespcie do gnero Biomphalaria gerados a partir da PCR-RFLP com utilizao da enzima de restrio DdeI. Uma possibilidade adicional dessa tcnica a identificao de moluscos com utilizao de DNA obtido de desova, o que permite preservar os exemplares adultos para futuros experimentos. Essa abordagem interessante, sobretudo quando trabalhamos com nmero reduzido de exemplares.
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Alm de permitir a identificao das espcies existentes no Brasil, a PCR-RFLP tem possibilitado o estudo das relaes de distncia gentica entre espcies similares do gnero Biomphalaria e a identificao molecular de outras espcies desse gnero encontradas em outros pases da Amrica, como Venezuela, Argentina, Uruguai, Cuba e Colmbia.
Bg
603 310 194 118 72 -
Btt
Btg Boc Bk Bs
Bi
Bp Bo
Bsch
Ba
Figura 54. Representao esquemtica dos perfis espcie-especficos de moluscos brasileiros pertencentes s dez espcies e uma subespcie do gnero Biomphalaria. Bg: Biomphalaria glabrata; Btt: B. tenagophila tenagophila; Btg: B. t. guaibensis; Boc: B. occidentalis; Bk: B. kuhniana; Bs: B. straminea; Bi: B. intermedia; Bp: B. peregrina; Bo: B. oligoza; Bsch: B. schrammi; Ba: B. amazonica (VIDIGAL et al., 2000).
Figura 6.1
6.2 Diferenciao molecular de moluscos do gnero Biomphalaria e deteco da infeco por Schistosoma mansoni a partir de DNA obtido de conchas
em trabalhos de campo, comum se encontrar apenas a concha dos moluscos do gnero Biomphalaria sem o corpo, o que impossibilita a identificao e a deteco do S. mansoni. Alm disso, encontram-se depositadas em colees malacolgicas diversas conchas que apresentam classificao duvidosa ou imprecisa. Para solucionar essas questes, foi desenvolvida uma estratgia para extrao de vestgios do corpo do molusco existentes no interior de conchas vazias. As conchas utilizadas estavam depositadas na coleo do Centro de Pesquisas Ren Rachou desde 1992. Utilizou-se como padro de comparao o DNA extrado das respectivas partes moles desses moluscos, armazenados a -20C desde 1992. O DNA obtido da concha e do padro de comparao foi submetido tcnica PCRRFLP direcionada para a regio ITS2 do rDNA com a enzima HpaII. Dessa forma, pode-se observar os perfis especficos de B. glabrata, B. tenagophila e B. straminea (figura 55). A identificao dos moluscos do gnero Biomphalaria importante, uma vez que permite detectar espcies presentes em reas de transmisso da esquistossomose, bem como em reas indenes, mas que, em funo da presena de espcies suscetveis, podem vir a se
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tornar focos da parasitose. Portanto, alm do fato de que a identificao correta imprescindvel para o estudo da esquistossomose, o diagnstico de infeco pelo S. mansoni em Biomphalaria fundamental. Rotineiramente, so realizados exames dos moluscos por exposio luz, com observao da presena de cercrias, ou por meio de seu esmagamento entre lminas de vidro. Neste caso, alm das cercrias, observa-se a presena de esporocistos, principalmente se esses estiverem localizados na glndula digestiva. Entretanto, quando os esporocistos so jovens e esto localizados na regio cefalopodal, ou quando os moluscos capturados no campo vm infectados com formas jovens de diferentes trematdeos, impossvel fazer o diagnstico por meio desses dois mtodos tradicionais. Outra dificuldade de diagnstico ocorre quando moluscos coletados no campo, devido distncia do local de captura, chegam mortos ao laboratrio, tornando impossvel determinar a infeco, seja por S. mansoni ou por qualquer outro tipo de trematdeo. Em virtude dessas dificuldades, foi utilizada outra metodologia molecular, a LS-PCR, por meio da qual se utiliza uma baixa temperatura de anelamento. Tal estratgia permitiu a deteco da presena de S. mansoni de conchas de B. glabrata experimentalmente infectadas que ficaram em decomposio em temperatura ambiente por sete semanas (figura 55).
Figura 55. Foto de gel de poliacrilamida corado pela prata. As canaletas 1 at 21 mostram os perfis de restrio obtidos aps a digesto da regio ITS2 do rDNA com a enzima HpaII. As canaletas mpares (de 1 at 17) correspondem aos perfis da parte mole dos moluscos e, as canaletas pares (de 2 at 18), aos perfis de vestgios do corpo presentes na concha. As canaletas 1 at 6 Figura B. glabrata; as canaletas 7 at 12, B. tenagophila; e as canaletas 13 at 21, B. straminea. As canaletas 22 at referem-se espcie 6.2 28 mostram o perfil de S. mansoni obtido pela metodologia LS-PCR. A canaleta 22 mostra o perfil de verme adulto. As canaletas 23 at 28 apresentam os perfis de S. mansoni recuperado de vestgios do corpo do interior da concha de B. glabrata infectada que ficou em decomposio em temperatura ambiente. Os nmeros do lado esquerdo do gel correspondem ao peso molecular.
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6.3 Identificao especfica de moluscos do gnero Biomphalaria e deteco da infeco por S. mansoni com utilizao de uma nica reao de PCR
Uma outra tcnica de biologia molecular, denominada Multiplex-PCR, que utiliza simultaneamente mais de um par de iniciadores, foi utilizada na identificao de espcies de Biomphalaria e no diagnstico de infeco pelo S. mansoni. Para a identificao das espcies dos moluscos, foram utilizados iniciadores ancorados na regio do ITS2 do rDNA. J para a deteco do S. mansoni, foram utilizados iniciadores ancorados no DNA mitocondrial de S. mansoni (figura 56). O uso simultneo desses iniciadores permitiu: (1) a identificao de B. glabrata, B. tenagophila e B. straminea pela observao dos fragmentos correspondentes a cada espcie (um fragmento de 280pb para B. glabrata, um de 320pb para B. tenagophila e outro de 350pb para B. straminea); (2) a deteco da presena de S. mansoni e o diagnstico de B. glabrata, B. tenagophila e B. straminea com 7, 14 e 28 dias de infeco; e (3) a identificao de B. glabrata, B. tenagophila e B. straminea negativos para o S. mansoni. Na figura 56, so observados os fragmentos correspondentes a cada espcie de molusco e os fragmentos especficos para S. mansoni.
Sm 1 2 Bg 3 4 Bg + Sm 5 6 Bt 7 8 Bt + Sm 9 10 Bs 11 Bs + Sm 12 13 14
350 pb
310-
280 pb
320 pb
19411872Figura 56. Foto de gel de poliacrilamida a 6% corado pela prata dos produtos de amplificao das regies ITS2 do gene do rDNA e do DNA mitocondrial pela tcnica Multiplex-PCR. As canaletas 1 e 2 referem-se a cercrias de S. mansoni; a canaleta 3, espcie B. glabrata negativa; a canaleta 4, espcie B. glabrata com 7 dias de infeco; a canaleta 5, espcie B. glabrata com 14 dias de infeco; a canaleta 6, espcie B. glabrata com 28 dias de infeco; a canaleta 7, espcie B. tenagophila negativa; a canaleta 8, espcie B. tenagophila com 7 dias de infeco; a canaleta 9, espcie B. tenagophila com 14 dias de infeco; a canaleta 10, espcie B. tenagophila com 28 dias de infeco; a canaleta 11, espcie B. straminea negativa; a canaleta 12, espcie B. straminea com 7 dias de infeco; a canaleta 13, espcie B. straminea com 14 dias de infeco; e a canaleta 14, espcie B. straminea com 28 dias de infeco. As setas brancas representam as bandas do S. mansoni; e as amarelas, as bandas das trs espcies de Biomphalaria.
Figura 6.3
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7 Vigilncia e Controle dos Moluscos de Importncia Mdica
7.1 Estratgias de controle da esquistossomose

At a dcada de 70, o combate esquistossomose tinha como objetivo principal o controle da transmisso. A principal medida era a reduo das populaes dos moluscos hospedeiros intermedirios. A partir dos anos 80, depois do advento de drogas quimioterpicas mais eficazes, seguras e baratas, o principal objetivo passou a ser o controle da morbidade, com nfase no tratamento quimioterpico (figura 57). Atualmente, a estratgia conjugar o controle quimioterpico com medidas preventivas, como a educao em sade e o saneamento. Estratgias de controle da esquistossomose 50 Objetivo Transmisso Morbidade Qumico Controle de moluscos Biolgico Fsico Controle quimioterpico Outras medidas de controle Educao Saneamento
Figura 57. Evoluo das estratgias de controle da esquistossomose desde os anos 50. Os sombreados escuros e claros indicam, respectivamente, alta e baixa prioridade.
Dcadas 60 70 80 90 00
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O controle dos moluscos recomendado apenas em casos especiais e em carter complementar, como, por exemplo, quando h um surto localizado de casos agudos ou quando altas prevalncias persistem mesmo com o tratamento peridico da populao.
7.2 Mtodos de controle dos planorbdeos

Os mtodos de controle dos planorbdeos podem ser classificados em biolgico, fsico e qumico. O biolgico envolve a introduo de organismos com ao predadora, competidora, parasitria ou patognica sobre os moluscos hospedeiros. O fsico consiste na manipulao de fatores-chave do meio, capazes de impedir o desenvolvimento e a manuteno das populaes dos moluscos. O qumico consiste na aplicao de produtos txicos (moluscicidas) nos criadouros. Como as trs modalidades implicam aes de maior ou menor impacto ambiental, sua implementao depende de estudos prvios, tendo em vista a legislao ambiental (veja o captulo 9). 7.2.1 Mtodos biolgicos Estudos sobre o controle biolgico dos moluscos hospedeiros tm sido realizados desde a dcada de 50, principalmente em carter experimental. Vrias espcies de animais tm sido utilizadas como competidoras/controladoras das populaes de planorbdeos. Alguns exemplos so vistos a seguir. Outros moluscos A interao competitiva entre caramujos tem sido muito estudada, e h vrias espcies potencialmente concorrentes entre si, tais como: Thiara granifera, Melanoides tuberculatus (Mller, 1774), Marisa cornuarietis (Linnaeus, 1758), Helisoma duryi (Wetherby, 1879), Pomacea lineata (Spix, 1827) e Pomacea haustrum (Reeve, 1856). O molusco ampularideo M. cornuarietis foi a espcie mais estudada at a dcada de 60 no controle de populaes naturais de B. glabrata em Porto Rico, o que demonstra uma alternativa promissora entre as tentativas de concorrncia. Tal caramujo compete por alimento e um predador acidental sobre os jovens planorbdeos e os ovos, a ponto de, em alguns locais, eliminar as populaes de Biomphalaria (FREITAS; SANTOS, 1995). Outro ampularideo, P. haustrum, foi introduzido em diques, lagos e rios de Minas Gerais e So Paulo nos anos 70 como provvel competidor eliminador de planorbdeos. Porm, em alguns locais, as espcies coexistiram por at dez anos sem alteraes das densidades populacionais dos planorbdeos. O molusco tiardeo M. tuberculatus, espcie extica de origem afro-asitica, foi introduzido no final dos anos 80 em regies do Caribe (POINTER, 2001), na Venezuela e no Brasil. Existe relato de sua ocorrncia desde 1967 (GUIMARES et al., 2001; FERNAN-
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DEZ et al., 2003). Em algumas localidades, esse caramujo demonstrou efetiva reduo e/ ou eliminao das populaes de Biomphalaria (ABLIO, 1997, 2002). Algumas desvantagens do uso de espcies de moluscos competidores: Perigo da introduo de espcies exticas, as quais podem reduzir e/ou eliminar a biodiversidade nativa. Alm disso, algumas espcies so hospedeiras intermedirias de trematdeos e nematdeos. H controvrsia sobre a validade do uso de ampularideos no controle biolgico de planorbdeos. A ingesto de ovos e de bionfalrias jovens ocorre em conseqncia do hbito alimentar voraz desses animais e no por um processo seletivo. Existe coabitao prolongada em criadouros naturais, sem ocorrer excluso competitiva. A presena de vegetao aqutica favorece as populaes de moluscos, inclusive os planorbdeos hospedeiros da esquistossomose, e reduz a ao competidora com outros gastrpodes (THOMAS, 1995). Vrias espcies de moluscos podem coexistir com os planorbdeos em habitats heterogneos e instveis. O processo de eutrofizao inibe a competio entre as espcies de moluscos (ABLIO, 2002). Peixes Algumas experincias demonstraram certo grau de efetividade e eficcia com o emprego de peixes na predao de caramujos planorbdeos. Vrios autores tm demonstrado a ao malacfaga dos cicldeos Serranochromis macrocephala e Tilapia melanopleura, do ciprindeo Barbus conchonius e das espcies Cichlasoma biocellatum e C. ocellatum. A ltima espcie citada foi capaz de eliminar planorbdeos com mais de 3cm de dimetro. O cicldeo Astronotus ocellatus mostrou ser capaz de impedir o crescimento de populaes de B. glabrata pela ingesto de massa de ovos depositados em paredes de aqurio ou de caramujos recm-eclodidos. Exemplares menores do que 6mm de dimetro foram destrudos. No caso do controle feito por Tilapia melanopleura, as respostas tm sido mais satisfatrias em massas volumosas de gua. A tilpia Oreochromis niloticus, assim como outras espcies agem como predadores e competidores. So extremamente vorazes: ingerem detritos, plantas, caramujos e suas cpsulas ovparas aderidas s plantas. O apaiari e o tambaqui so peixes que tm armadura bucal suficientemente forte para esmagar as carapaas; porm, pelo seu tamanho, no podem se aproximar das margens mais rasas, onde se encontra a maioria dos caramujos.
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Outros animais competidores
Camares do gnero Macrobrachium sp., insetos do gnero Belostoma sp. (hemiptera), sanguessugas (hirudinea) do gnero Helobdella sp. tm sido utilizados em pesquisas no laboratrio e no campo como provveis competidores de Biomphalaria sp. Ainda no h qualquer espcie com eficcia comprovada contra os moluscos e que tenha sido utilizada em campanhas de controle. No entanto, a busca de elementos naturais que possam promover controle biolgico eficaz deve ser incentivada, desde que este seja um mtodo natural de controle, sem agresses drsticas ao ambiente. Experimentos dessa natureza devem ser conduzidos por pesquisadores especializados, uma vez que a introduo de espcies exticas sem a devida avaliao pode ser extremamente nociva ao equilbrio ambiental e ferir a legislao ambiental. Alis, desde a dcada de 90, a introduo de espcies exticas para controle dos moluscos tem sido enfaticamente desencorajada pela Organizao Mundial da Sade (ORGANIZAO MUNDIAL DA SADE, 1994). 7.2.2 Mtodos fsicos Como mtodos de controle fsico consideram-se o saneamento hdrico e o manejo ambiental para o controle de vetores. Consistem, principalmente, na eliminao de criadouros pelo aterramento de colees hdricas, sempre que a medida for tecnicamente recomendada. A drenagem e a retificao de leitos, o revestimento e a canalizao dos cursos dgua tambm podem ser teis. Algumas vezes, solues de baixo custo, como a limpeza e a remoo da vegetao aqutica, so suficientes. Na dcada de 50, quando no se dispunha de drogas eficazes e seguras no tratamento da populao humana parasitada e quando os planorbicidas qumicos tinham ao limitada e pouco seletiva, os mtodos fsicos representavam a nica alternativa de controle possvel. Hoje, depois do advento de drogas com as propriedades que se julgavam necessrias e com seu largo e continuado uso, bem como de planorbicidas qumicos, o manejo do ambiente volta a representar e a ser reconhecido como o mtodo mais potente e o nico capaz de promover a interrupo da transmisso da esquistossomose em carter permanente. Aterramento Todas as massas dgua, sem qualquer uso pela populao humana, que no representem fonte de vida ou sobrevivncia para outras espcies animais devem ser drenadas ou aterradas quando a medida for tecnicamente recomendada, sob o ponto de vista do controle da esquistossomose. Quando esse tipo de medida no for possvel ou indicada, deve-se restringir, tanto quanto possvel, o acesso a criadouros de importncia epidemiolgica. O contato da po-
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pulao com as colees hdricas pode tambm ser evitado com a construo de pontes, uma vez que o trnsito atravs delas seja necessrio. Drenagem do solo Consiste na aplicao de medidas que promovam o enxugamento do solo, evitando a formao de criadouros potenciais pelo abaixamento do lenol fretico superficial. um mtodo radical de controle. Nem sempre feito apenas com essa finalidade, sendo usado tambm na recuperao de terrenos alagados. A diferena reside na tcnica aplicada. Quando se destina ao controle de caramujos, o sistema de drenagem deve propiciar movimentao rpida das guas, de modo a dificultar o ciclo biolgico dos planorbdeos. Os principais processos de drenagem so: por valas a cu aberto; por drenos subsuperficiais; por bombeamento; e por perfurao na camada impermevel com enchimento de areia. Ordenao e outras modificaes do meio ambiente: substituio de canais de irrigao por sistema de asperso; remoo peridica da vegetao de canais e crregos; alterao peridica no nvel da gua de regos e crregos, para reduzir a quantidade de vegetao aqutica e provocar a morte de caramujos por dessecao; revestimento de canais; modificao do desenho de canais e crregos, para melhorar o fluxo de gua e reduzir a populao planorbdica; dragagem; canalizao; e retificao das margens sinuosas de riachos e crregos, para reduzir a rea de deposio de sedimentos ricos em detritos. A presena de vegetao flutuante muito importante em muitos tipos de criadouros. Os caramujos mostram preferncia pelas razes dessas plantas, utilizando-as como refgio, proteo e/ou alimentao. Quando o criadouro seca parcialmente, os caramujos ficam nas razes expostas, protegidos pela umidade destas. Recomenda-se sua retirada para local seco e distante da gua sempre que as dimenses da coleo hdrica permitam. Esse cuidado deve ser dispensado tambm aos reservatrios artificiais.
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Os mtodos fsicos apresentam algumas desvantagens: promovem alteraes drsticas nos habitats; envolvem projetos caros de infra-estrutura;
a dragagem do sedimento pode produzir e/ou acelerar o processo de eutrofizao. Grandes projetos hidreltricos e de irrigao causam profunda alterao do meio ambiente, podendo favorecer o aparecimento de criadouros. Nessas reas deve haver monitoramento peridico. Atualmente, todos os projetos de grande porte possuem apoio de bilogos e tcnicos especializados na conservao do ambiente. recomendvel o contato freqente com essas equipes tcnicas. 7.2.3 Mtodos qumicos 7.2.3.1 Planos de tratamento Uma vez realizado o inqurito malacolgico e selecionados os criadouros que devem ser tratados, deve-se elaborar o plano para aplicao de moluscicida. O planejamento de fundamental importncia na determinao da ordem segundo a qual cada poro do criadouro ser tratada. O tratamento iniciado de preferncia pelas partes mais altas da bacia hidrogrfica, e as aplicaes devero ser feitas nos afluentes antes que sejam tratados os cursos dgua principais. As margens e as ribanceiras necessitam ser tratadas para a eliminao de caramujos que se encontrem acima da superfcie da gua (veja o captulo 3). Os melhores resultados so obtidos quando o moluscicida aplicado em reas relativamente livres de vegetao densa, viva ou morta. Devido dificuldade em se efetuar uma limpeza completa, recomenda-se o aumento da concentrao. Ao fazer a aplicao nas margens, o operador deve revolver a vegetao. Pode ser dispendioso o tratamento de cursos dgua extensos que passam por diversas localidades e estejam infestados por caramujos. Em vista disso e das exigncias da legislao ambiental (veja o captulo 9), a aplicao deve ser restrita aos trechos de comprovada importncia epidemiolgica. Caso a extenso a ser tratada seja superior a 500m, deve-se instalar duas ou mais estaes de tratamento. Para a classificao dos criadouros e a execuo das atividades malacolgicas (coleta e tratamento dos caramujos com moluscicida), utilizam-se formulrios especficos (Anexos C e D). O fluxo das informaes malacolgicas, geradas de acordo com os nveis institucionais, mostrado no anexo E.
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7.2.3.2 Moluscicidas Os moluscicidas so substncias empregadas para matar os moluscos. Para que um produto seja usado como moluscicida, este precisa reunir algumas propriedades indispensveis, a exemplo do que ocorre com outros defensivos: deve ser eficaz contra os moluscos, mesmo quando empregado em baixas concentraes; deve ter baixo custo, propriedade que nem sempre depende da primeira; no pode ser txico ao homem, aos animais aquticos ou s plantas; no pode ter efeitos acumulativos nos tecidos do homem e dos animais aquticos; deve ser de fcil manipulao. No passado, diversos produtos com propriedades moluscicidas foram testados e utilizados em campo. No entanto, apenas um produto permanece disponvel comercialmente e aprovado pela Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (Anvisa) (CAS n. 50-65-7) para uso em programas de controle: a niclosamida. Suas caractersticas so: Nome comum: niclosamida (BSI, ISO). Sinonmia: clonitralide. Nome qumico: 2'5- dicloro- 4'-nitro-salicilanilida. Frmula bruta: <C13H8Cl2N2O4>. Frmula estrutural (veja a figura 61, a seguir):
Figura 58. Frmula estrutural da niclosamida.
Grupo qumico: salicilanilida. Classe: moluscicida. Classificao toxicolgica: produto tcnico classe III.
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Emprego domissanitrio: uso exclusivamente em campanhas de sade pblica, sob a responsabilidade do Ministrio da Sade. Tipo de formulao: p molhvel. Concentrao mxima permitida: 70% de ingrediente ativo. Precaues para manipulao e uso: conserve a embalagem em lugar frio e seco. Guarde o produto fora do alcance de crianas, animais domsticos e longe de produtos forrageiros e alimentcios. Durante a manipulao, a preparao ou a aplicao do produto, use roupas de mangas compridas, chapu de abas largas e botas. Evite que o produto no diludo entre em contato com a pele ou as mucosas. Durante o preparo das solues, convm a utilizao de mscara protetora contra p. Aps a manipulao do produto, remova as roupas e banhe-se com gua e sabo. Em caso de intoxicao, pare de trabalhar imediatamente. A roupa contaminada deve ser despida. Em caso de contato com a pele, lave a parte atingida com gua e sabo em abundncia. Evite o contato do produto com os olhos. Caso isso acontea, lave os olhos com gua em abundncia durante 15 minutos. Se houver irritao, consulte o mdico. No reutilize a embalagem vazia. Em caso de ingesto, provoque o vmito e procure cuidados mdicos imediatamente. No aplique o produto na presena de ventos fortes. Evite a inalao do produto. Propriedades: o composto puro substncia quase incolor, com ponto de fuso a 23C. A solubilidade do produto na gua de 5 a 8ppm temperatura normal. O sal se apresenta sob a forma de p molhvel a 70% do ingrediente ativo com cor amarela, muito estvel, bem mais solvel na gua do que o produto puro. O produto tcnico cinza-amarelado. Ao: o produto mata uma grande variedade de caramujos, inclusive ovos, alm de cestdeos e cercrias. Ele afeta a respirao e o metabolismo dos carboidratos, interferindo nos processos de oxidao. O produto rapidamente decomposto na gua e no exibe efeitos de longo prazo. altamente txico para peixes e outros vertebrados aquticos; porm, a fauna local rapidamente restabelecida com a interrupo da aplicao. 7.2.3.3 Algumas desvantagens dos moluscicidas No controle da Biomphalaria com produtos qumicos sintticos e/ou extratos vegetais, os resultados podem no ser satisfatrios, j que esses moluscos possuem diversas estratgias de defesa: retrair-se na concha, reduzindo a superfcie de contato com o produto; enterrar-se no substrato; evitar doses letais do moluscicida, afastando-se das zonas de maior concentrao do produto dissolvido na gua;
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formar lamelas na concha, sair da gua e permanecer em diapausa fora do ambiente lmnico. No caso da niclosamida, as principais desvantagens so: o alto preo do produto; o alto custo operacional do produto, devido necessidade de repetidas aplicaes deste at mesmo em pequenas reas; o dano ambiental. 7.2.3.4 Uso (1) Equipamentos e tcnicas de tratamento So vrios os mtodos e os equipamentos empregados na aplicao de moluscicidas. Entre eles: Regadores: so teis para o tratamento de pequenos criadouros de gua parada, desde que a vegetao no seja muito densa. Pulverizadores manuais portteis: tambm conhecidos como bombas de presso varivel, so utilizados para tratamento de pequenos criadouros, com resultados satisfatrios. Atualmente, tm sido usados pulverizadores tipo Jacto ou Hudson, principalmente na complementao do trabalho com gotejadores. Pulverizadores motorizados: podem aplicar tanto solues como ps secos. So especialmente indicados quando a superfcie a ser tratada de grande extenso. Quando a situao local permitir, podem ser usados equipamentos acoplados em veculos, com bons resultados. Deve-se considerar que, para o emprego desse tipo de equipamento, exigido um maior contingente de pessoal para a operao. Gotejadores: existem vrios modelos de gotejadores, alguns com resultados satisfatrios. Geralmente utilizam-se na sua construo tambores de 100 ou 200 litros, munidos de torneira e de tubo para entrada de ar, que funciona tambm como regulador da presso interna. Uma vez regulados, tais gotejadores trabalham trs ou seis horas sem que seja necessrio regul-los novamente. Em alguns modelos, para evitar o inconveniente da diferena de vazo (maior quando o tambor est cheio e menor ao esvaziar), a sada da calda feita por mangueira ligada a um dispositivo flutuante. Aplicao de tabletes ou bolas em gua corrente: formulaes solveis, disponveis em tabletes, comprimidos ou bolas, podem ser usadas para tratamento de gua corrente. Dissolvem-se lentamente, prolongando o tratamento. um processo simples e econmico, que pode ser usado em qualquer tipo de curso dgua e mantm a concentrao constante e uniforme. A forma mais indicada para aplicao, neste
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caso, a colocao do nmero necessrio de bolas ou de tabletes numa tela fina de metal ou de tecido, mantida suspensa logo abaixo da superfcie da gua. O produto se dissolve ao longo de seis horas. No caso da niclosamida, devem ser levadas em considerao as condies das colees dgua, a saber: gua parada (rasa ou profunda), gua corrente e volume dgua. Esses so fatores cruciais eleio da tcnica a ser adotada. Os moluscicidas so usados em quantidades expressas em relao a volumes de lquido, a concentrao. A concentrao expressa em partes por milho, que se representa abreviadamente por suas iniciais ppm. Assim, uma dosagem de moluscicida de 1ppm corresponde quantidade de 1 miligrama em um litro (1mg/l) ou, ento, de 1 grama em um metro cbico de lquido (1 metro cbico de gua igual a 1.000 litros). (2) Variaes nas tcnicas adotadas segundo os tipos de ambientes lmnicos equenas colees hdricas: aquelas em que o tratamento pode ser feito na sua P totalidade. Em alguns casos, a eliminao total dos caramujos pode ser pretendida. So consideradas pequenas colees de gua parada: escavaes, poos, pegadas de animais, ligeiras depresses no terreno e brejos de pequenas dimenses. J as pequenas colees de gua corrente so pequenos cursos de gua, regos e filetes de gua, que podem ser tratados com sucesso quando a vazo e a velocidade no excedem a 30 litros/segundo (l/s) e quando a velocidade mdia igual ou inferior a 30 centmetros/segundo (cm/s). Acima dessa velocidade, o caramujo encontra dificuldade para se fixar s margens. Grandes colees hdricas: estas devem ser cuidadosamente estudadas, pois muitas vezes a nica soluo vivel, no caso de se optar por trat-las, a aplicao de moluscicida nas margens, revolvendo a vegetao marginal com fortes jatos do equipamento aplicador. J foi comprovado que em canais de terra, onde a gua atinge at 60cm/s, esse tipo de vegetao atua como dissipador da energia hidrulica, permitindo a ancoragem de caramujos. Aplicao em gua parada rasa: as pequenas colees rasas, onde a profundidade no ultrapassa 10cm (na prtica, altura dos tornozelos), so tratadas base de 300mg/m2. A medio do criadouro dever ser feita de forma a determinar a profundidade, a largura e o comprimento mdios, multiplicando-se ento os valores encontrados. Aplicao em guas paradas profundas: fazem parte de pequenas colees onde a profundidade mdia superior a 10cm. Nesse caso, o clculo feito em relao ao volume lquido obtido, pelo mesmo processo de determinao de rea do caso anterior, multiplicando-se o valor aqui pela mdia de diversas medidas de profundidade. Mede-se em trs pontos e trs comprimentos, calcula-se o valor mdio para
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ambos (em metros), faz-se a medida de 10 profundidades e calcula-se tambm a mdia. Aps o clculo, multiplicam-se os trs resultados. O resultado final deve ser dado em metros cbicos. Assim, obtm-se o volume estimado, a partir do qual ser determinada a quantidade necessria em gramas ou miligramas, respeitados os limites mximos e mnimos estabelecidos (1,4 a 2,8 ppm). Aplicao em gua corrente: Nesse tipo de criadouro, a tcnica varia sensivelmente da anterior, pois, ao contrrio da gua parada, em condies normais, o volume dgua proporcional ao tempo considerado. Chamamos vazo ao volume de gua que se desloca na unidade de tempo, expresso em litros por segundo (1/s). Em grandes cursos dgua, deve ser expresso em metros cbicos por segundo. A escolha do mtodo para o clculo da vazo depende, alm das caractersticas do criadouro, das condies locais para seu uso (disponibilidade de pessoal capacitado e dos materiais exigidos). Recomenda-se, uma vez adequado ao tipo de criadouro a tratar, o emprego do mtodo mais simples, no indispensavelmente o mais preciso. (3) Exemplos para a aplicao de moluscicidas a) Em gua parada rasa 1 exemplo: Considerando-se uma profundidade mdia de 10cm (0,1 metro), a largura e o comprimento de 100 centmetros (1,0 metro), calcula-se a rea. Assim: 0,1 x 1,0 x 1,0 = 0,1m3 ou 100 litros. Nesse volume dever ser colocado um mnimo de 140mg e um mximo de 280mg do moluscicida ou, arredondando-se esse valor, 300 miligramas ou 0,3 gramas por metro quadrado. Essa quantidade poder ser aplicada utilizando-se regadores ou bombas manuais ou mecanizadas. Quando forem usados regadores, recomenda-se fazer ensaios sem a niclosamida, apenas com gua, para permitir uniformidade na aplicao, pois essa noo tem carter subjetivo. So indispensveis a orientao, o acompanhamento e a superviso ao teste de uniformidade, para que se obtenha procedimento uniforme por parte de todo o pessoal de operao. Deve ser aplicado 0,3g/m2 e por regador. 2 exemplo: Numa rea marginal a uma lagoa, as chuvas fizeram transbordar a gua, mas a altura no ultrapassou os tornozelos da pessoa que a percorreu (10cm). A largura mdia foi de 2 metros, e o comprimento mdio foi de 8 metros. A quantidade a ser usada ser: 2 metros x 8 metros (0,3g/m2) = 1,6 grama ou, aproximadamente, 2 gramas. A rea estimada multiplicando-se a largura pelo comprimento (no caso, 2m x 8m, igual a 16m2 de rea). A seguir, multiplica-se a rea pela quantidade a ser usada por metro quadrado, ou seja, 0,3 grama por metro quadrado. Assim: 16 x 0,3 = 4,8.
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No exemplo, caso dois regadores sejam utilizados, a quantidade calculada deve ser dividida por dois, colocando-se ento 2,5 gramas em cada regador. b) Em guas paradas profundas 3 exemplo: Uma escavao de olaria (cujas profundidades medem 0,8m, 1,20m e 1,00m) apresenta uma largura mdia de 5 metros e um comprimento mdio de 10 metros. A quantidade de niclosamida a ser utilizada ser feita a partir: - da determinao da profundidade mdia: soma das medidas (0,80 + 1,20 + 1,00 = 3,00) dividida pelo nmero de medidas (3), logo: 1m; - e do clculo de volume da coleo lquida a ser tratada: comprimento mdio x largura mdia x profundidade mdia = 10m x 5m x 1m = 50m3. Sabe-se que 2ppm correspondem a 2 miligramas por litro ou 2 gramas por metro cbico. Ento: 50m3 x 2 gramas/m3 = 100 gramas de moluscicida. c) Em gua corrente A princpio, ser necessrio determinar com preciso a vazo, podendo ser usados, para tal fim, mtodos diretos e indiretos. Mtodo direto Consiste em recolher gua num recipiente de capacidade conhecida, medindo-se o tempo (em segundos) que o recipiente levou para ser enchido. Dividindo a capacidade conhecida do recipiente pelo tempo gasto em ench-lo, teremos o volume por segundo e, portanto, a vazo. Deve-se tomar cuidado para que toda a gua seja coletada, procurando faz-la passar por uma bica, uma calha ou uma tubulao. Convm que sejam repetidas duas ou trs observaes para se obter um dado mais confivel. Nos mtodos indiretos, dois processos so mais freqentemente empregados, o do vertedor ou vertedouro e o processo do flutuador. O primeiro mtodo faz uso de anteparo construdo em madeira, de abertura triangular ou retangular. 4 exemplo (mtodo direto): Usou-se um balde de 10 litros, que levou 5 segundos para ser enchido. A vazo ser obtida dividindo-se os 10 litros pelos 5 segundos (o tempo necessrio para ench-lo), logo: 10 litros 5 segundos = 2 litros por segundo. A vazo de dois litros por segundo. importante lembrar que a vazo de um curso d'gua varia de acordo com a poca do ano e tambm com a chuva. Achada a vazo para uma concentrao de 1ppm, multiplica-se o resultado por 21,6, encontrando-se, assim, a quantidade de grama do moluscicida a ser aplicada. A vazo calculada em litros por segundos, 21.600 (que corresponde a 6 horas = 21.600 segundos) dividido por 1.000 = 21,6, que, multiplicado pela vazo, expressa o resultado em m3.
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Mtodo indireto (vertedouro triangular) indicado para vazes de at 30 litros por segundo. Apresenta vantagem sobre o vertedouro retangular pela facilidade de medio da altura da gua (carga), correspondente lmina de lquido que atravessa o vertedouro, diretamente por meio de rgua ou escala graduada, medindo-se a distncia do vrtice da seo triangular at a superfcie livre do lquido. A seguir, recorrendo-se tabela (veja o anexo F), verifica-se a correspondncia entre a altura medida e a leitura direta da vazo. Cuidados devem ser tomados para que se coloque a graduao da rgua para montante do vertedouro (virada para onde vem a gua), pois a lmina lquida sofre uma retrao ou abaixamento para jusante aps ultrapassar o vertedouro, sendo por isso a leitura falseada para menor. A rgua deve ficar o mais prximo possvel da vertical. importante que se espere de 30 a 40 minutos aps a instalao do vertedouro, para que se normalize o curso dgua e a leitura se faa sem distores. Deve-se providenciar, ainda, para que toda a gua passe pelo vertedor. Para isso, deve-se construir uma pequena e rstica barragem, de modo a amparar o vertedouro, permitindo que toda gua passe pela abertura triangular. A barragem pode ser reforada com gravetos, pequenos galhos com folhas, terra bem socada e estacas fincadas ao solo. Em leitos rochosos e leitos arenosos, torna-se difcil a instalao do vertedouro, razo pela qual prefervel o mtodo do flutuador. Vertedouro de fenda triangular (figura 59) Vertedouro com reforo nas bordas laterais, para facilitar a fixao no solo.
Figura 59. Vertedouro de fenda triangular.
A determinao de vazo dos cursos dgua com utilizao dos vertedouros triangulares facilitada pelo uso de tabelas construdas pela tabulao da frmula: Q = 8/15 . C .
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tg a/2. Onde: Q representa o valor da vazo em metros cbicos por segundo, devendo-se multiplic-lo por mil para se achar o valor em litros por segundo; a letra C representa uma constante que depende do ngulo do vrtice da abertura triangular do vertedouro; a abreviao tg a/2 refere-se tangente da metade do ngulo a, ngulo do vrtice da abertura triangular, o qual no deve ser menor do que 25, pois, caso contrrio, ocorrem influncias que vo falsear o resultado, tais como as devidas capilaridade, tenso superficial e viscosidade; a letra g refere-se acelerao da gravidade em metros por segundo quadrado, aproximadamente 9,8m/s2 para as condies do litoral brasileiro; a letra H refere-se altura da carga hidrulica, que corresponde altura da lmina de gua medida do vrtice da abertura triangular do vertedouro at a superfcie livre do lquido. Para facilitar a tabulao e mesmo a construo do vertedouro, iguala-se o ngulo a do vrtice triangular a 90. Dessa forma, Q = 8/15. C . tg 90/2. Para o ngulo de 90, C igual a 0,6, e a frmula pode ser simplificada ficando como varivel apenas a altura H da carga hdrica. A frmula Q = 1,4 h5/2 atribuda a Thompson. J outros autores como Barnes e Gourley Crimp discordam, propondo respectivamente: Q = 1,34 H2,42 e Q = 1,32 H2,47. Para as nossas necessidades (em ltima anlise, para aplicao do planorbicida), as variaes so praticamente desprezveis, alm do fato de que, por razes prticas de organizao de trabalho no campo, nenhum moluscicida ter seu uso recomendado numa dosagem nica, mas dentro de um intervalo, de modo a facilitar os clculos e a prpria aplicao. Assim, tabulando-se a frmula simplificada Q = 1,4 H5/2 ou Q = 1,4 H2,5, obtm-se a tabela apresentada em anexo (veja o anexo F), que s vlida para o ngulo de 90. A so encontrados a altura medida no vertedouro triangular na coluna H (cm) e o valor de vazo correspondente na coluna vertical Q (litros/segundo). 5 exemplo: O valor obtido no campo H = 6,0cm. A tabela d 1,24 litro por segundo, valor da vazo. Analogamente, obtendo a altura de 10cm, entramos na tabela com o valor H (cm) = 10 e, em frente, na coluna de vazo Q (litros/segundo), achamos o nmero 4,44, correspondente vazo de 4,44 litros por segundo. Conhecida a vazo, a quantidade de moluscicida calculada conforme o 4 exemplo. Mtodo indireto (segundo o mtodo do vertedouro retangular) O vertedouro retangular tem mais largo emprego do que o triangular, isto , aplica-se a vazes bem maiores do que as do anterior. So utilizados na medida de vazo o vertedouro retangular com soleira delgada (ou estreita) e o vertedouro retangular com contrao (estreitamento da lmina lquida). Deve-se observar que: 1) seja empregado um vertedor padronizado; 2) seja instalado em nvel e aprumado, de modo que a soleira do vertedor esteja na horizontal e no se falseiem medidas;
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3) toda a gua passe pelo vertedor; 4) a altura da gua (carga hidrulica) seja medida a montante do vertedor (de onde vem a gua) em distncia aproximada de 2 metros. Para isso, com o auxlio de uma rgua colocada na soleira do vertedor, um nvel de pedreiro ou de mangueira e uma estaca, cujo topo deve estar nivelado com a crista da soleira, determina-se a altura da gua do topo da estaca ao nvel superficial. No se pode determinar, como no caso do vertedor triangular, a altura diretamente no vertedor, devido retrao ou ao abaixamento da lmina de gua ao atravessar o vertedor; 5) as dimenses do vertedouro retangular guardem certas relaes, sendo recomendado: C = 2H; D = 3H. As dimenses sugeridas e os limites de aplicao para vertedouros retangulares encontram-se no anexo G.
Figura 60. Vertedouro de fenda retangular.
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Vertedouro de fenda retangular
A tabela constante do anexo H, baseada na frmula de Francis, permite (face o valor H em centmetros, correspondente medida do topo da estaca em nvel com a crista da soleira, at a linha da gua ou o nvel da gua) que se determine a vazo na coluna em frente, correspondente, de acordo com a largura L do vertedouro (veja a figura 60). 6 exemplo: Utilizando-se o processo do vertedor retangular (cuja largura da abertura retangular mede 50 centmetros), encontrou-se a altura (H) da gua igual a 20cm, tomada sobre o topo de uma estaca nivelada com a crista da soleira e colocada a 2 metros a montante. Podem ser determinadas a vazo e a quantidade de niclosamida num tratamento durante 6 horas. Na tabela, para L = 50,0cm = 0,5m e, para altura (H) = 0,20m, encontramos na coluna vertical L 0,5m; descendo at a primeira (1) coluna vertical, referente a H em centmetros, para 20,0cm corresponde a vazo de 75,3 l/s. Pelos clculos, 75,3 1/s em 6 horas vo corresponder a um volume lquido de 75,3 l/s x 60 minutos = 162.648 litros em 6 horas ou 162,648 m3. Usando a dosagem de 2ppm, correspondente a 2 miligramas por litro ou 2 gramas por metro cbico, devemos gastar: 2g x 162,648m3 = 325,296, aproximadamente 325 gramas e 300 miligramas. Mtodo indireto segundo o mtodo do flutuador Como vimos, o processo do vertedor apresenta limitaes, como a necessidade da existncia de trechos estreitos no curso dgua, a necessidade de uma barragem e de margens altas, alm dos cuidados apontados. J o processo do flutuador tem aplicao para trechos retilneos, pouco encachoeirados, um curso tranqilo. O mtodo do flutuador consiste em selecionar um trecho retilneo do curso dgua da seo regular, longe de curvas e sem vegetaes, corredeiras ou redemoinhos. Estendemse duas cordas ou mede-se a distncia a ser percorrida. Solta-se um flutuador no centro do curso dgua e marca-se o tempo que ele leva para percorrer a distncia medida. Dividindo-se a distncia em metros pelo tempo em segundos, obtm-se a velocidade do curso dgua em metros percorridos em cada segundo ou metros por segundo (m/s). A seguir, fazem-se vrias medies de largura e tira-se a mdia. De igual forma, fazem-se vrias medies de profundidade, tirando-se tambm a mdia. Multiplicando-se a largura mdia pela profundidade mdia, obtm-se a seo mdia, que, multiplicada pela velocidade mdia obtida, d como produto a vazo mdia, em metros cbicos. 7 exemplo: Num curso dgua, em um trecho retilneo de curso tranqilo, mediu-se uma distncia de 20 metros, para a qual uma cortia lastreada com chumbo levou 25, 30 e 35 segundos para percorrer. Fizeram-se trs medidas de profundidade (com resultados de 0,60, 0,40 e 0,80 metros) e trs medidas de largura (com resultados de 3, 4 e 5 metros). Qual a quantidade de niclosamida necessria para um tratamento de seis horas?
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Medidas: Tempo mdio = soma dos tempos nmero de verificaes. Assim: tempo mdio = 90 (25 + 30 + 35) segundos 3 = 30 segundos. Velocidade mdia = distncia tempo. Assim: 20 30 = 0,66m/s. Profundidade mdia = soma das profundidades nmero de verificaes. Assim: profundidade = 1,8 (0,6 + 0,40 + 0,8) m 3 = 1,8m. Largura mdia = soma das larguras nmero de verificaes. Assim: 12 (3 + 4 + 5) m 3 = 4m. A vazo mdia (na data da medio) foi: velocidade mdia x profundidade mdia x largura mdia (0,66 x 0,6 x 4 = 1,584 m3/s), ou seja, aproximadamente 1,6 metro cbico por segundo ou 1,6 x 60s x 60min x 6 horas = 34.560 metros cbicos em 6 horas. Colocando 2 gramas por metro cbico, gastaremos 34.560m3 x 2g/m3 = 69.120 gramas ou 69kg e 120g do produto. A escolha do mtodo para clculo da vazo depende, alm das caractersticas do criadouro, das condies locais para seu uso (disponibilidade de pessoal capacitado e dos materiais exigidos, listados no anexo I). Recomenda-se, uma vez adequado ao tipo de criadouro a ser tratado, o emprego do mtodo mais simples, no indispensavelmente o mais preciso. d) Avaliao da eficcia de cada aplicao A eficcia de cada aplicao deve e pode ser verificada realizando-se testes sobre a ao residual do moluscicida, com observao de seus efeitos sobre peixes e camares, bem como sobre caramujos contidos em gaiolas. A pesquisa com caramujos pode tambm ser feita como avaliao do controle. 7.2.3.5 Testes qumicos sobre a ao residual dos moluscicidas Testes quantitativos para comprovar a presena do moluscicida aplicado so possveis caso se conte com suporte laboratorial, pois necessrio o uso de equipamento com alguma sofisticao. importante saber o grau de disperso do moluscicida usado ao tratar especialmente guas correntes. Para esse fim, so colhidas amostras dgua em locais selecionados, durante e aps a aplicao. Esses locais devem estar situados a intervalos regulares. A primeira amostra deve ser colhida logo aps o incio da aplicao. A seguir, colhem-se amostras de uma em uma ou de duas em duas horas, at que se esteja seguro de que os caramujos tenham estado expostos a concentraes suficientes do moluscicida por pelo menos seis horas, para que todos tenham sido eliminados.
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7.2.3.6 Testes para medir a eficcia do moluscicida
Quando no se dispuser de meios para a determinao quantitativa por testes qumicos, a determinao do tempo requerido para a eliminao de caramujos confinados poder dar uma indicao sobre a eficcia dos produtos moluscicidas. a) Uso de caramujos em gaiolas Devem ser expostos em caixas teladas suspensas na gua, a intervalos uniformes de 100 a 200 metros, ao longo dos cursos dgua. A mortalidade, num perodo de um a trs dias aps o tratamento, serve como medida da disperso alcanada com o moluscicida utilizado. b) Observao da mortalidade de peixes Os peixes podero ser expostos em gaiolas e observados periodicamente para a verificao da mortalidade. Os caramujos so mais resistentes a certos moluscicidas do que os peixes, e estes, por sua vez, so menos resistentes do que os camares. c) Pesquisa de caramujos aps o tratamento Outra maneira de se avaliar a eficcia do tratamento pela pesquisa de caramujos aps a aplicao do moluscicida. O nmero e o intervalo dessas capturas podem, a critrio tcnico, ser variveis. Recomenda-se, entretanto, que a primeira pesquisa de controle seja realizada entre trs e sete dias aps o tratamento e, da em diante, mensalmente. Caso haja necessidade, o criadouro dever ser tratado novamente. necessrio esclarecer que a pesquisa de controle dever ser realizada nos mesmos locais e da mesma forma que o levantamento inicial. Para a medida so contados apenas os caramujos vivos e o nmero total de exemplares coletados, cotejado com aquele correspondente pesquisa prvia ao tratamento. 7.2.4 Mtodos alternativos em investigao: plantas moluscicidas Como descrito no presente captulo, os mtodos biolgicos, fsicos e qumicos requerem novos estudos e complementaridade no seu uso, pois nenhum deles totalmente efetivo na diversidade de ambientes em que podem ser encontrados os moluscos transmissores. Embora a niclosamida seja o mais potente moluscicida utilizado no mundo, sua ao biocida, seu alto custo e a dificuldade de seu transporte para distantes reas rurais tornam necessrio o investimento em novas pesquisas, em busca de alternativas mais bem sucedidas de controle malacolgico. A necessidade de moluscicidas eficientes e ecologicamente aceitveis acompanhou a tendncia de se pesquisar plantas na busca de substncias ativas para o desenvolvimento de produtos alternativos, uma vez que a simultaneidade do tratamento humano e do tra-
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tamento de criadouros de importncia epidemiolgica condio que tem sido valorizada para o controle da esquistossomose. Os moluscicidas de origem vegetal foram testados pela primeira vez na dcada de 1930. Desde ento, j foram estudadas, por sua capacidade moluscicida, cerca de 1.100 espcies vegetais no mundo (MOTT, 1987) e, aproximadamente, 360 no Brasil (JURBERG et al., 1989). Entre as primeiras espcies testadas no Brasil esto os extratos aquosos de caules de Serjania spp. (cip-timb) e de frutos de Sapindus saponaria L. (Sapindaceae) (saboneteira, sabo), cuja atividade foi avaliada utilizando-se Biomphalaria glabrata. A ao moluscicida observada em tais plantas foi associada s saponinas presentes nestas. Na extensa reviso de Mott (1987), cerca de 20 espcies foram descritas como tendo alto potencial letal para as espcies vetoras da esquistossomose. Entretanto, nenhuma delas atende a todos os requisitos referidos pelo comit de especialistas da Organizao Mundial da Sade (OMS) (WORLD HEALTH ORGANIZATION, 1983) como essenciais para que uma planta possa vir a ser usada em larga escala como moluscicida. De todas as plantas referidas na literatura, a Euphorbia milli (syn. splendens) var. hislopii, conhecida popularmente no Brasil como Coroa de Cristo, cuja propriedade moluscicida foi identificada por Vasconcellos e Schall em 1986, apresenta a mais baixa concentrao letal j referida e atende ao primeiro requisito colocado pela OMS, que estabelece em at 20ppm o valor das DL90, para que uma planta seja considerada efetiva. A partir de sua descoberta, tal planta vem sendo investigada, e os principais resultados foram descritos por Schall et al. (2001). A espcie Euphorbia splendens var. hislopii ornamental, originria de Madagascar (figura 61), e foi introduzida no Brasil como cerca viva, sendo conhecida como Coroa de Cristo, Coroa de Nossa Senhora, Duas Amigas, Colcho de Noiva e Martrios. Tratase de uma planta que pode ser facilmente cultivada em reas endmicas e produz grande quantidade de ltex durante todo o ano, como demonstraram Baptista et al. (1994, 1997).
Figura 61. Coroa de Cristo (Euphorbia splendens var. hislopii).
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Pelos dados de laboratrio, as doses letais da soluo aquosa do ltex da espcie Euphorbia milli var. hislopii para 90% dos caramujos (DL90) foram menores que 0,5ppm para as espcies B. glabrata e B. tenagophila criadas em laboratrio e 4,00ppm para a espcie B. tenagophila trazida do campo (VASCONCELLOS; SCHALL, 1986). Em estudo posterior, as DL90 obtidas variaram de 0,13ppm para a espcie B. glabrata (com ltex liofilizado) a 4,00ppm para a espcie B. pfeifferi (com ltex in natura) (SCHALL et al., 1998). Neste estudo, foram tambm estabelecidas as DL90 para as espcies B. straminea e Bulinus sp. Com base neste trabalho, a demonstrada ao letal para os moluscos vetores da esquistossomose na frica (B. pfeifferi e Bulinus sp.) abre perspectivas para estudos de campo no referido continente, onde a esquistossomose apresenta altas prevalncias em vrios pases. Investigaes posteriores (VASCONCELLOS; AMORIM, 2003) demonstraram o efeito letal das solues aquosas do ltex da E. milli para o molusco Lymnaea columella, atestando o seu potencial de controle dessa espcie. O molusco L. columella , no Brasil, o principal hospedeiro intermedirio da F. hepatica, um verme trematdeo que causa a fasciolose, uma zoonose que afeta apenas esporadicamente o homem, mas que muito freqente no gado e em outros herbvoros, causando grandes prejuzos em pases dedicados pecuria. Em um teste de campo em rea restrita, os autores demonstraram a ao letal de solues aquosas do ltex na concentrao de 5mg/l, que causou a mortalidade de 97,4% dos moluscos livres nos canais tratados e de 100% dos exemplares mantidos em caixas submersas como caramujos sentinelas. Os autores justificam a pequena proporo de animais livres sobreviventes (2,6%), sugerindo mecanismos de escape dos moluscos na gua na presena do moluscicida. No mesmo trabalho, os cientistas relatam a mortalidade de 100% dos moluscos das espcies B. tenagophila e M. tuberculatus presentes no ambiente, bem como a mortalidade, com uma taxa bem menor (40%), da espcie Pomacea sp. Diversos estudos j publicados apresentam os dados toxicolgicos dos steres de diterpenos isolados de E. milli. Os dados obtidos demonstram que, em sua maioria, os ensaios toxicolgicos no apresentam qualquer propriedade carcinognica das substncias ativas. At mesmo o forbol no induziu hiperplasia, sendo apenas irritante para a pele, como as demais substncias, o que requer cuidados no momento de coleta do ltex e de preparao das solues. Outros testes toxicolgicos com utilizao do ltex integral j foram concludos com resultados encorajadores, tais como: o produto no apresenta atividade mutagnica, genotxica, nenhum efeito citotxico at 200ppm, nem efeito txico agudo at 445ppm. Em testes de irritabilidade cutnea, a reao irritante observada foi acima de 3.500ppm. Tambm no foram demonstrados efeitos embriofetotxicos e de co-carcinogenicidade em concentraes compatveis com as utilizadas em campo (reviso de Schall et al. (2001)). O ltex um moluscicida fotodegradvel menos txico do que a niclosamida para peixes (Brachydanio rerio e Poecilia reticulata), microcrustceos (Daphnia similis, Ceriodaphnia dubia e Artemia sp.), oligoqueta (Tubifex tubifex siolli) e larvas de mosquitos de
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primeiro e terceiro estgios (Aedes aegypti, A. fluviatilis e Anopheles albitarsis). O ltex no inibiu o crescimento de algas clorofceas (Selenastrum capricornutum e Chlorella vulgaris) e no apresentou efeito inibitrio para bactrias (Echerichia coli, Pseudomonas aeruginosa e P. putida). A atividade sobre B. glabrata foi rapidamente perdida quando solues de ltex foram expostas luz visvel (OLIVEIRA FILHO, 1995). Estudo mais recente (em que se compara a ao da niclosamida com o ltex liofilizado) mostra que este ltimo mais seletivo para os caramujos vetores e no afeta outras espcies do meio ambiente, como faz a niclosamida. Atualmente, existe um crescente interesse no desenvolvimento de tecnologias apropriadas que permitam s comunidades afetadas o uso de produtos naturais com propriedades moluscicidas. Sua utilizao deve ser encaminhada na forma de um sistema autosustentvel de cultivo e aplicao dentro de um programa integrado de controle da doena (BAPTISTA et al., 1994). Tais estratgias se ressaltam, tendo-se em vista o alto custo dos moluscicidas sintticos (bem como sua toxicidade generalizada para a flora e a fauna dos ambientes tratados) e algumas dificuldades operacionais de transporte e aplicao, o que os torna proibitivos para essa finalidade. De acordo com a reviso de Mott (1987), so necessrios alguns procedimentos e certas investigaes fundamentais para que possa ser autorizado o uso de um moluscicida vegetal no ambiente. Comea pela sua identificao taxonmica por especialista e pela investigao de sua ao em laboratrio. Se for comprovada sua eficcia em laboratrio, preciso investigar o princpio ativo da planta e suas propriedades toxicolgicas, pois no deve oferecer riscos para os seres humanos e o ambiente. Tais pesquisas podem durar at dez anos ou mais. S aps todos esses estudos a planta ser avaliada no campo. A seguir, apresentamos algumas das etapas para o planejamento de um estudo de campo: 1) Reconhecimento dos criadouros das espcies vetoras para tratamento experimental com as solues do moluscicida vegetal. 2) Identificao de ambientes de controle com caractersticas semelhantes aos experimentais e em sua proximidade. 3) Levantamento malacolgico dos ambientes experimentais e de controle, aps demarcao das estaes de coleta. 4) Coleta da planta ou de um produto da planta em local padronizado e preparao das solues baseadas em clculos, para estimativa da concentrao a ser aplicada. 5) Realizao da aplicao das solues nos ambientes experimentais. 6) Levantamento malacolgico posterior aplicao (seguimento) durante 18 meses. 7) Anlise final dos dados obtidos; comparao destes dados com dados da literatura relativos a outros produtos naturais e niclosamida; publicao dos resultados; e
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recomendaes de pesquisas complementares ou prescries de uso do produto em reas endmicas. Atualmente, no Brasil, a legislao ambiental exige autorizao ou licena para os testes em campo de novas substncias, autorizao que pode ser obtida junto ao rgo governamental responsvel, como o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovveis (Ibama). Como se pode perceber, um estudo de plantas ou de produtos de plantas com ao moluscicida requer anos de investigao e o envolvimento de diversos especialistas com atuao multidisciplinar.
7.3 Procedimentos para o controle do caramujo africano: Achatina fulica Bowdich, 1822
O controle do caramujo africano, descrito a seguir, baseia-se nas Instrues Normativas do Ibama n. 73, de 18 de agosto de 2005 (BRASIL, 2005), e n. 109, de 3 de agosto de 2006 (BRASIL, 2006b), que so reproduzidas nos anexos j e k deste manual. Procedimentos 1) Identificao do caramujo Ao se perceber a presena de caramujos terrestres grandes, muito importante certificar-se de que se trata do caramujo africano, pois existem espcies nativas, ou seja, da nossa fauna, muito semelhantes. No captulo 2 deste manual, podem ser observadas conchas de A. fulica de diferentes tamanhos e de uma espcie nativa (Megalobulimus sp.) freqentemente confundida com o caramujo africano, pelo seu grande tamanho. Em caso de dvida sobre a identificao, envie o material ao Ibama, s universidades, aos centros de pesquisa ou s autoridades municipais (secretarias municipais de sade, secretarias municipais de meio ambiente, defesa civil, etc.) com base nos seguintes procedimentos: Colete os exemplares (pelo menos 5 ou 6) com a utilizao de luvas ou sacos plsticos e os coloque em lcool comercial. A concha vazia ou uma boa foto tambm servem para identificao. Cole uma etiqueta de papel, escrita a lpis (com a data da coleta, o nome do local e o nome do coletor), no recipiente contendo os exemplares fixados no lcool. Uma vez confirmada a identificao, entre em contato com as autoridades municipais citadas para lhes comunicar a ocorrncia do caramujo africano e receber orientaes sobre os procedimentos de controle em sua cidade. Importante: as espcies nativas que se assemelham a esse caramujo raramente ocorrem em grandes populaes. Diferentemente, os caramujos africanos geralmente possuem densas populaes, o que constitui a principal fonte de problemas a que esto relacionados.
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2) Controle do caramujo africano em residncias (jardins, hortas e quintais) ou bairros Colete os caramujos manualmente, utilizando luvas de borracha (ou similar), e os coloque em um recipiente como balde ou saco. Os melhores horrios para o procedimento so pela manh bem cedo ou no final da tarde, pois, como os demais moluscos terrestres, o caramujo africano evita a exposio ao sol forte, que o desidrata. Com um martelo ou um instrumento similar, quebre as conchas dos moluscos coletados e, em seguida, cave um buraco no terreno e coloque em seu interior, sempre que possvel, uma p de cal virgem, para evitar a contaminao do lenol fretico, principalmente no caso de ser coletada uma grande quantidade de exemplares. importante coletar tambm os ovos do caramujo, que so encontrados semi-enterrados no solo. Os ovos so facilmente reconhecidos, pois tm aproximadamente 5mm de dimetro, forma arredondada, casca calcria amarelada e geralmente so encontrados em grande nmero. Em seguida busca e coleta de ovos, esmague-os bem e siga o mesmo procedimento citado para os caramujos. Caso no seja possvel enterrar os caramujos e os ovos coletados, todos depois de destrudos devem ser colocados em sacos hermeticamente fechados, separados do lixo domstico, e em seguida entregues ao sistema de coleta do municpio.
Figura 62. Procedimentos de controle de A. fulica: adultos e ovos.
O controle peridico fundamental e, para tanto, a operao deve ser repetida sempre que novos caramujos forem localizados. Um nico caramujo pode colocar at 400 ovos por desova, o que acarreta uma rpida reinfestao no ambiente.
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Recomenda-se que os procedimentos de controle sejam realizados em toda a rea da infestao, o que requer coletas peridicas e a participao da comunidade (vizinhos, associaes de moradores ou o poder pblico) sempre que possvel. Importante: No use sal para controlar os caramujos, para evitar a salinizao do solo, o que poder destruir gramados e outras plantas por muito tempo. No utilize moluscicidas ou venenos, pois so muito txicos e outros animais e mesmo pessoas podem ser contaminados e at morrer. A incinerao dos exemplares tambm pode ser feita, desde que sejam tomados os devidos cuidados para se evitar acidentes durante o procedimento ou mesmo evitar que o fogo se espalhe. Mesmo quando incineradas, as conchas dos animais devem ser quebradas, para que no se tornem criadouros de larvas de insetos, como os da dengue, da malria, etc. No coma caramujos encontrados livres no ambiente, crus ou que tenham sido mal cozidos. O caramujo africano no um animal perigoso. Ele no morde, no pica e no tem veneno. Como para qualquer outro animal que vive livre em ambiente aberto, existe o risco de o caramujo africano transmitir doenas para o homem, razo pela qual se recomenda o uso de luvas de borracha ao manuse-lo. Em caso de contato com o caramujo ou do contato de seu muco direto com a pele, basta lavar bem a rea com gua e sabo. Embora no haja, no Brasil, relatos de casos de transmisso de zoonoses (angiostrongilose abdominal e meningoencefalite eosinoflica) pelo caramujo africano, os procedimentos recomendados para a higienizao de verduras, frutas e legumes consumidos crus so os que se seguem: lave bem esses alimentos em gua corrente e deixe-os de molho por 30 minutos em soluo de hipoclorito de sdio a 1% (1 colher de sopa de gua sanitria diluda em 1 litro de gua filtrada). Com esses procedimentos possvel evitar, alm de outros parasitos, a infeco por larvas de Angiostrongylus spp. eliminadas no muco deixado pelos moluscos, que podem contaminar os alimentos e causar as zoonoses citadas.
7.4 Aes de educao em sade associadas ao controle malacolgico

A esquistossomose um exemplo tpico de doena endmica relacionada aos modos de viver, s prticas e s atitudes das populaes, motivos pelos quais as medidas para o seu controle exigem, necessariamente, o envolvimento da comunidade. Nesse sentido, imprescindvel o aporte de metodologias prprias de educao em sade capazes de viabilizar a concretizao da participao comunitria.
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Nas reas endmicas urbanas e rurais, particularmente nas regies desfavorecidas, onde as populaes vivem mais isoladas, a educao em sade tem de se basear nos contatos pessoais, na aproximao dos grupos primrios e na elaborao de programas coordenados com outras entidades a escola, a igreja, as organizaes de fomento agrcola e outras. Um fator fundamental no trabalho de assegurar a participao individual e coletiva das populaes nos programas de preveno a capacidade do profissional de sade de se identificar emocionalmente com a tarefa. difcil que algum consiga qualquer resultado pondervel, no campo da educao, com uma aproximao fria, embora competente, do problema humano. Cada profissional de sade deve aproveitar todas as oportunidades do trabalho para ser um educador, de modo que em cada contato seu com os doentes ou com os membros da comunidade se estabelea verdadeiramente uma comunicao de idias e de sentimentos. No h tcnica nem material educativo que possa substituir essa capacidade de compreender e de fazer compreender. No existem mtodos padronizados para essa tarefa de educao em sade, pois a educao fundamentalmente educao social. Como os grupos e as pessoas no so estticos, cada situao deve ser enfrentada com uma atitude experimental. A avaliao deve ser um processo constante e a base da qual devem ser replanejadas e reorientadas as atividades de campo. Um programa de controle da esquistossomose tem de ser planejado de forma integrada com os projetos que objetivam melhorar as condies sociais da populao sob risco. A abordagem que inclui a comunidade por meio de programas integrados para a melhoria das condies gerais de sade e de vida a nica que pode assegurar resultados duradouros e econmicos no controle da esquistossomose. As seguintes medidas so exemplos de procedimentos, coletivos e individuais, teis contra os caramujos na preveno da esquistossomose: no deixar que poas de gua se formem em torno de habitaes, pois os caramujos conseguem viver nelas e as pessoas, sobretudo as crianas, podem facilmente se contaminar; limpar os leitos dos riachos e das valas para aumentar a velocidade e a fora das guas e, assim, dificultar a sobrevivncia dos caramujos nas margens e no fundo desses locais; evitar que restos de comida, inclusive de animais, e outros produtos ricos em matrias orgnicas cheguem at as guas, pois servem de alimento para os caramujos; pessoas que vivem em locais rurais e isolados, que por qualquer motivo no possam usar sanitrios, devem procurar locais distantes das guas para fazer suas necessidades fisiolgicas e cobrir as fezes com terra;
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as pessoas obrigadas a trabalhar dentro de guas suspeitas de contaminao devem usar botas e luvas impermeveis, para diminuir o risco de pegar a esquistossomose; quando as atividades de trabalho, de banho e de recreao precisarem ser realizadas inevitavelmente nos mesmos locais, as pessoas devem faz-las em localidades distantes dos pontos de dejetos e de focos conhecidos de caramujos; evitar entrar em guas suspeitas de contaminao em horrios mais quentes e de maior luminosidade (entre as 9h e as 16h), horrios tidos, reconhecidamente, como de maior atividade de transmisso da esquistossomose. Na implementao desses procedimentos, indispensvel que todos, tanto indivduos quanto grupos sociais, estejam conscientes das razes pelas quais as medidas esto sendo aplicadas e compreendam sua importncia e tambm suas limitaes.
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Distribuio dos Moluscos Hospedeiros Intermedirios de Schistosoma mansoni no Brasil, Biomphalaria glabrata, B. straminea, B. tenagophila
Os dados da distribuio de B. glabrata, B. straminea e B. tenagophila no Brasil foram obtidos dos bancos de dados fornecidos pela Gerncia Tcnica de Esquistossomose da Secretaria de Vigilncia em Sade do Ministrio da Sade do Brasil, pelo Laboratrio de Helmintoses Intestinais do Centro de Pesquisas Ren Rachou/Fiocruz e pelo Departamento de Malacologia do Instituto Oswaldo Cruz/Fiocruz. Alm disso, devem ser mencionados os inmeros registros de moluscos resultados dos trabalhos do PCE ao longo dos anos, contidos em relatrios encaminhados Gerncia Tcnica. Os bancos de dados, alimentados por numerosas fontes e publicaes, continham informaes relacionadas ocorrncia, por estado e municpio, de B. glabrata, B. tenagophila e B. straminea. Utilizou-se uma base geogrfica dos municpios brasileiros fornecida pela Companhia de Processamento de Dados do Estado de Minas Gerais (Prodemge) para o geoprocessamento desses dados. O software utilizado foi o MapInfo, verso 6.5. Em funo das caractersticas da coleta dos dados, optou-se pela espacializao utilizando-se as coordenadas das sedes municipais para representar o municpio. Pelo menos uma das trs espcies vetoras do S. mansoni foi notificada em 24 dos 26 estados brasileiros, alm do Distrito Federal. Em apenas dois estados no foi verificada, at o momento, a presena desses moluscos: Amap e Rondnia.
8.1 Biomphalaria glabrata

A distribuio desta espcie est quase sempre associada distribuio da esquistossomose. Um outro fato a ser considerado quando se discute a importncia epidemiolgica
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desta espcie a sua ampla distribuio. De fato, B. glabrata j foi notificada em 16 estados brasileiros, alm de no Distrito Federal, e em 806 municpios de uma rea delimitada pelos paralelos 0 53S (Quatipuru, PA), 29 51S (Esteio, RS), 53 44S (Toledo, PR) e a linha costeira (figura 63). Distribuio geogrfica: Alagoas, Bahia, Distrito Federal, Esprito Santo, Gois, Maranho, Minas Gerais, Par, Paraba, Paran, Pernambuco, Piau, Rio de Janeiro, Rio Grande do Norte, Rio Grande do Sul, So Paulo e Sergipe.
Figura 63. Distribuio geogrfica de Biomphalaria glabrata no Brasil. Figura extrada de Carvalho e Caldeira (2004)
A rea central de sua distribuio corresponde s mesorregies Nordeste, Centro e Norte da Bahia, Regio Metropolitana de Salvador (Estado da Bahia); Regio Central, Vale do Mucuri, Vale do Rio Doce, Regio Metropolitana de Belo Horizonte e Zona da Mata (Estado de Minas Gerais). Ocorre ainda na metade oeste do Estado do Esprito Santo, correspondendo s mesorregies Noroeste Esprito Santense, Central Esprito Santense e Sul Esprito Santense. A partir da, a espcie pode ser encontrada, de forma quase contnua, para o norte, numa faixa costeira atravs dos estados de Sergipe, Alagoas, Pernambuco,
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Paraba e Rio Grande do Norte. Est ausente no Estado do Cear e apenas uma populao reportada para o Estado do Piau. No Estado do Maranho, so encontradas vrias populaes distribudas pelo interior e pelo litoral. No Estado do Par, a espcie atinge o limite norte de sua distribuio no municpio de Quatipuru (05358S). Nas regies Sudeste e Sul, encontrada nos estados de So Paulo e Paran, observando-se um aglomerado da espcie na divisa desses dois estados. Est ausente no Estado de Santa Catarina, enquanto no Rio Grande do Sul encontra-se uma nica populao, no municpio de Esteio (295107S), extremo sul de sua distribuio. 8.1.1 Ocorrncia de Biomphalaria glabrata por municpio Alagoas Arapiraca, Atalaia, Belm, Boca da Mata, Cajueiro, Capela, Coit do Nia, Coruripe, Girau do Ponciano, Igaci, Jacupe, Jundi, Junqueiro, Lagoa da Canoa, Limoeiro de Anadia, Macei, Maragogi, Marechal Deodoro, Maribondo, Mar Vermelho, Matriz de Camaragibe, Murici, Palmeira dos ndios, Passo de Camaragibe, Paulo Jacinto, Penedo, Piaabuu, Pilar, Pindoba, Quebrangulo, So Jos da Laje, So Lus do Quitunde, So Miguel dos Campos, So Sebastio, Satuba, Tanque DArca, Traipu, Unio dos Palmares, Viosa, Anadia. Bahia Abara, Acajutiba, Adustina, gua Fria, Aiquara, Alagoinhas, Almadina, Amargosa, Amlia Rodrigues, Amrica Dourada, Anag, Andara, Andorinha, Angical, Anguera, Antnio Cardoso, Antnio Gonalves, Apor, Apuarema, Aras, Aramari, Aratuipe, Aurelino Leal, Baianpolis, Baixa Grande, Banza, Barra da Estiva, Barra do Choca, Barra do Rocha, Barreiras, Belo Campo, Biritinga, Boa Nova, Boa Vista do Tupim, Bom Jesus da Serra, Boninal, Bonito, Brejes, Brumado, Buerarema, Caatiba, Cabaceiras do Paraguau, Cachoeira, Cacul, Cam, Caetanos, Caetite, Caldeiro Grande, Camaari, Camamu, Campo Alegre de Lourdes, Campo Formoso, Canavieiras, Candeal, Candeias, Cndido Sales, Capela do Alto Alegre, Capim Grosso, Carabas, Cardeal da Silva, Castro Alves, Catolndia, Catu, Caturama, Cip, Coaraci, Cocos, Conceio da Feira, Conceio do Almeida, Conceio do Coit, Conceio do Jacupe, Conde, Condeba, Contendas do Sincora, Corao de Maria, Cordeiros, Coribe, Carinhanha, Cravolndia, Crispolis, Cristpolis, Cruz das Almas, Drio Meira, Dias Dvila, Dom Macedo Costa, Elsio Medrado, Encruzilhada, Entre Rios, Esplanada, Eunpolis, Feira de Santana, Filadlfia, Firmino Alves, Floresta Azul, Gandu, Gavio, Glria, Gongogi, Governador Mangabeira, Guajeru, Guanambi, Guaratinga, Helipolis, Iau, Ibiassuc, Ibicoara, Ibicu, Ibiquera, Ibirapitanga, Ibirapu, Ibirataia, Ibitiara, Ichu, Igrapina, Igua, Ilhus, Inhambupe, Ipecaeta, Ipia, Ipira, Irajuba, Iramaia, Iraquara, Irar, Irec, Itaberaba, Itabuna, Itacar, Itaete, Itagi, Itagiba, Itaju do Colnia, Itajupe, Itamari, Itamb, Itanagra, Itanhm, Itaparica, Itap, Itapetinga, Itapicuru, Itapitanga, Itaquara, Itarantim, Itatim, Itiruu, Itiba, Itoror, Ituau, Ituber, Jacaraci, Jacobina, Jaguaquara, Jaguarari, Jaguaripe, Jandara, Jequi, Jeremoabo, Jiquiri, Jitana, Jucuruu, Jussari, Jussiape, Lafaiete Coutinho, Lagoa Real, Laje, Lajedinho, Lajedo do Tabocal, Lamaro, Lauro de Freitas, Lenis, Licnio de Almeida, Livramento do Bru-
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mado, Macajuba, Macarani, Madre de Deus, Maetinga, Maiquinique, Mairi, Malhada de Pedras, Manoel Vitorino, Maracs, Maragogipe, Mara, Marcionilio Souza, Mata de So Joo, Miguel Calmon, Milagres, Mirangaba, Mirante, Morro do Chapu, Mortugaba, Mucug, Mundo Novo, Muniz Ferreira, Muritiba, Mutuipe, Nazar, Nilo Peanha, Nova Cana, Nova Ftima, Nova Ibi, Nova Itarana, Nova Redeno, Nova Soure, Novo Horizonte, Olindina, Ouricangas, Ourolndia, Palmeiras, Paripiranga, Pau Brasil, P de Serra, Pedro, Piata, Pindobau, Pintadas, Pira do Norte, Piripa, Piritiba, Planaltino, Planalto, Poes, Pojuca, Ponto Novo, Potiragu, Presidente Jnio Quadros, Presidente Tancredo Neves, Quixabeira, Rafael Jambeiro, Riacho do Jacupe, Ribeira do Amparo, Ribeira do Pombal, Ribeiro do Largo, Rio de Contas, Rio do Pires, Rio Real, Ruy Barbosa, Salvador, Santa Brbara, Santa Cruz da Vitria, Santa Ins, Santa Luzia, Santa Maria da Vitria, Santa Teresinha, Santaluz, Santanpolis, Santo Amaro, Santo Antnio de Jesus, Santo Estevo, So Desidrio, So Domingos, So Felipe, So Flix, So Francisco do Conde, So Gonalo dos Campos, So Jos da Vitria, So Jos do Jacupe, So Miguel das Matas, So Sebastio do Pass, Sapeau, Stiro Dias, Saubara, Sade, Seabra, Senhor do Bonfim, Sento S, Serra Preta, Serrinha, Serrolndia, Simes Filho, Stio do Quinto, Souto Soares, Tabocas do Brejo Velho, Tanhau, Tanquinho, Tapero, Tapiramuta, Teodoro Sampaio, Teolndia, Terra Nova, Tremedal, Tucano, Ubara, Ubaitaba, Ubat, Umburanas, Uruuca, Utinga, Valena, Valente, Vrzea da Roa, Vrzea do Poo, Vrzea Nova, Varzedo, Vera Cruz, Vereda, Vitria da Conquista, Wagner, Wenceslau Guimares, Xique-Xique. Distrito Federal Braslia. Esprito Santo Afonso Cludio, gua Doce do Norte, guia Branca, Alfredo Chaves, Baixo Guandu, Barra de So Francisco, Castelo, Colatina, Conceio da Barra, Conceio do Castelo, Divino de So Loureno, Ecoporanga, Guau, Itaguau, Itarana, Iuna, Mantenpolis, Mimoso do Sul, Montanha, Mucurici, Muniz Freire, Nova Vencia, Pancas, Santa Teresa, So Gabriel da Palha, So Mateus. Gois Formosa, Gouvelndia. Maranho Alcntara, Araioses, Bacuri, Barra do Corda, Cndido Mendes, Cururupu, Godofredo Viana, Paco do Lumiar, Parnarama, Passagem Franca, Pastos Bons, Pinheiro, Santa Luzia do Paru, So Bento, So Bernardo, So Joo dos Patos, So Jos de Ribamar, So Lus, Turiau, Tutia, Anajatuba, Barreirinhas, Bequimo, Mirinzal, Palmeirndia, Peri Mirim, Ribamar Fiquene, So Joo Batista, So Vicente Ferrer, Viana. Minas Gerais Antnio Dias, Araa, Arax, Arcos, Baldim, Bambu, Baro de Cocais, Barbacena, Belo Horizonte, Betim, Bocaiva, Bom Jesus do Galho, Braslia de Minas, Branas, Brumadinho, Buenpolis, Caet, Campanrio, Campanha, Capim Branco, Cara, Caranaba, Caratinga, Catas Altas da Noruega, Claro dos Poes, Coluna, Comercinho, Conceio da Aparecida, Conceio do Mato Dentro, Conselheiro Lafaiete, Conselheiro Pena, Contagem, Corao de Jesus, Cordisburgo, Corinto, Coronel Fabriciano, Curvelo, Diamantina, Dionsio, Divino, Divinolndia de Minas, Divinpolis, Dom Joaquim, Dores do Indai, Dorespolis, Engenheiro Caldas, Engenheiro Navarro, Entre Folhas, Esmeraldas, Espinosa, Ferros, Florestal, Formiga, Fortaleza de Minas, Francisco S, Frei Inocncio, Galilia, Governador Valada-
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res, Guanhes, Iapu, Ibia, Ibiracatu, Ibirite, Igarap, Inhapim, Inhama, Inimutaba, Itabira, Itabirinha de Mantena, Itacarambi, Itajub, Itambacuri, Itanhomi, Itana, Itinga, Itueta, Jaboticatubas, Jacinto, Jaguarau, Jampruca, Janaba, Januria, Japonvar, Jequita, Jequitinhonha, Joama, Joo Monlevade, Juiz de Fora, Lagoa da Prata, Lagoa dos Patos, Lagoa Santa, Lontra, Lajinha, Machacalis, Malacacheta, Mamonas, Manga, Manhuau, Mantena, Mariana, Marliria, Mateus Leme, Matip, Matozinhos, Medina, Mesquita, Mirabela, Montalvnia, Monte Alegre de Minas, Montes Claros, Mutum, Nacip Raydan, Nova Era, Nova Lima, Nova Unio, Novo Cruzeiro, Ouro Branco, Ouro Preto, Pains, Papagaios, Par de Minas, Paracatu, Paraopeba, Passos, Peanha, Pedra Azul, Pedro Leopoldo, Piau, Piedade de Ponte Nova, Pirapetinga Pirapora, Pitangui, Pocrane, Ponte Nova, Porteirinha, Resplendor, Ribeiro das Neves, Rio Acima, Rio Casca, Rio Doce, Rio Novo, Rio Pardo de Minas, Rio Piracicaba, Rio Vermelho, Rubelita, Sabar, Sabinpolis, Sacramento, Salinas, Salto da Divisa, Santa Brbara, Santa Luzia, Santa Maria de Itabira, Santa Maria do Suau, Santana do Riacho, Santo Antnio do Grama, So Gonalo do Abaet, So Joo da Ponte, So Joo del Rei, So Joo do Paraso, So Joo Evangelista, So Pedro do Suau, So Romo, So Sebastio do Rio Preto, Sapuca-Mirim, Sete Lagoas, Tabuleiro, Tapira, Taquarau de Minas, Tarumirim, Tefilo Otoni, Timteo, Tumiritinga, Ub, Uba, Uberlndia, Varzelndia, Vespasiano, Viosa, Virgolndia, Santa Cruz do Escalvado, Santana do Manhuau, Taiobeiras, Ponto dos Volantes. Par Belm, Bragana, Capanema, Irituia, Primavera, Quatipuru, Viseu. Paraba Alhandra, Bananeiras, Bayeux, Belm, Cabedelo, Cajazeiras, Conde, Cruz do Esprito Santo, Joo Pessoa, Lucena, Mataraca, Pirpirituba, Pitimb, Santa Rita, Serraria. Paran Abatia, Alvorada do Sul, Andira, Apucarana, Assa, Bandeirantes, Barra do Jacar, Cambara, Camb, Campina Grande do Sul, Carlpolis, Centenrio do Sul, Cerro Azul, Colorado, Congonhinhas, Conselheiro Mairinck, Cornlio Procpio, Curitiba, Florestpolis, Formosa do Oeste, Goioer, Guapirama, Ibaiti, Ibipor, Imbituva, Itambaraca, Iva, Jaboti, Jacarezinho, Japira, Jardim Alegre, Jataizinho, Joaquim Tvora, Jundia do Sul, Lepolis, Londrina, Marialva, Maring, Moreira Sales, Nova Amrica da Colina, Nova Ftima, Paranagu, Pinhalo, Porecatu, Primeiro de Maio, Quatigu, Rancho Alegre, Ribeiro Claro, Ribeiro do Pinhal, Rolndia, Salto do Itarar, Santa Amlia, Santa Ceclia do Pavo, Santa Mariana, Santana do Itarar, Santo Antnio da Platina, Santo Antnio do Paraso, So Jos da Boa Vista, So Sebastio da Amoreira, Sarandi, Sertaneja, Sertanpolis, Siqueira Campos, Toledo, Tomazina, Ura, Wenceslau Braz. Pernambuco Agrestina, gua Preta, Bom Conselho, Brejo, Canhotinho, Correntes, Garanhuns, Goiana, Itamarac, Jaboato dos Guararapes, Lagoa dos Gatos, Maraial, Olinda, Palmeirina, Paulista, Quipapa, Recife, Salo, So Benedito do Sul, So Joo, Terezinha. Piau Parnaba. Rio Grande do Norte Ares, Baa Formosa, Brejinho, Canguaretama, Cear-Mirim, Esprito Santo, Extremoz, Goianinha, Macaba, Maxaranguape, Monte Alegre, Natal, Nsia, Floresta, Parnamirim, Pedro Velho, Pureza, So Bento do Norte, So Gonalo do Amarante, So Jos de Mipibu, Touros. Rio Grande do Sul Esteio. Rio de
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Janeiro Barra do Pira, Duas Barras, Porcincula, Rio de Janeiro, Sapucaia, Sumidouro, Cantagalo, Tangu. So Paulo Assis, Baro de Antonina, Cndido Mota, Cerquilho, Coronel Macedo, Ipaucu, Itabera, Ita, Itapeva, Ourinhos, Palmital, Porto Feliz, Riversul, Salto Grande, Santa Cruz do Rio Pardo, So Paulo, Taquarituba, Chavantes, Fartura, Ibirarema, Pindamonhangaba, Ribeiro do Sul, Ribeiro Preto, So Pedro do Turvo, Tagua. Sergipe Aracaju, Arau, Areia Branca, Barra dos Coqueiros, Boquim, Brejo Grande, Campo do Brito, Capela, Carmpolis, Cedro de So Joo, Cristinpolis, Divina Pastora, Estncia, General Maynard, Ilha das Flores, Indiaroba, Itabaiana, Itabaianinha, Itaporanga DAjuda, Japaratuba, Japoata, Lagarto, Laranjeiras, Malhada dos Bois, Malhador, Maruim, Muribeca, Nepolis, Nossa Senhora do Socorro, Pacatuba, Pedrinhas, Pirambu, Propri, Riacho do Dantas, Riachuelo, Rosrio do Catete, Salgado, Santa Luzia do Itanhy, Santa Rosa de Lima, Santo Amaro das Brotas, So Cristvo, So Domingos, So Francisco, Simo Dias, Siriri, Telha, Tobias Barreto, Tomar do Geru, Umbaba.
8.2 Biomphalaria tenagophila

Foi notificada em 603 municpios de 10 estados brasileiros, alm de no Distrito Federal, em um quadrante delimitado pelos paralelos 10 12 e 33 41 S, pelo meridiano 57 05 W e a linha litornea (figura 64). Distribuio geogrfica: Bahia, Distrito Federal, Esprito Santo, Gois, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais, Paran, Rio de Janeiro, Rio Grande do Sul, Santa Catarina e So Paulo.
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Figura 64. Distribuio geogrfica de Biomphalaria tenagophila no Brasil. Figura extrada de Carvalho e Caldeira (2004).
A espcie encontrada numa faixa litornea, de forma quase contnua, a partir do sul do Estado da Bahia at o Estado do Rio Grande do Sul. A rea mais densa de sua distribuio abrange os estados do Esprito Santo, do Rio de Janeiro e de Santa Catarina. Nos estados de Minas Gerais, So Paulo, Paran e Rio Grande do Sul, a espcie avana em direo ao oeste. Esta espcie pode ser encontrada nas divisas do Estado do Rio Grande do Sul e em parte do Estado do Paran com a Argentina. Algumas populaes foram registradas longe do corpo central de sua distribuio, no Distrito Federal e nos estados de Gois e Mato Grosso do Sul. 8.2.1 Ocorrncia de Biomphalaria tenagophila por municpios Bahia Canavieiras, Caravelas, Itabela, Itamaraju, Mucuri, Nova Viosa, Prado, Santa Luzia. Distrito Federal Braslia. Esprito Santo gua Doce do Norte, guia Branca, Alegre, Alfredo Chaves, Anchieta, Apiac, Aracruz, Atlio Vivacqua, Boa Esperana,
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Bom Jesus do Norte, Cachoeiro de Itapemirim, Cariacica, Castelo, Colatina, Conceio da Barra, Domingos Martins, Dores do Rio Preto, Ecoporanga, Fundo, Guau, Guarapari, Ibirau, Iconha, Itaguau, Itapemirim, Jernimo Monteiro, Linhares, Mantenpolis, Mimoso do Sul, Montanha, Mucurici, Muniz Freire, Muqui, Nova Vencia, Pancas, Pinheiros, Piuma, Presidente Kennedy, Rio Novo do Sul, So Gabriel da Palha, So Jos do Calado, So Mateus, Serra, Viana, Vila Velha, Vitria. Gois Formosa. Mato Grosso do Sul Campo Grande. Minas Gerais gua Comprida, Aimors, Alagoa, Alfenas, Baro de Monte Alto, Barbacena, Belo Horizonte, Betim, Bocaiva, Bom Despacho, Cabo Verde, Caet, Conselheiro Lafaiete, Contagem, Coronel Fabriciano, Delta, Divinpolis, Dom Joaquim, Dorespolis, Esmeraldas, Governador Valadares, Guaransia, Guaxup, Itajub, Jaboticatubas, Jaguarau, Jequita, Joama, Juiz de Fora, Lagoa da Prata, Lagoa Santa, Machacalis, Marliria, Matias Barbosa, Monte Belo, Mutum, Nova Era, Nova Lima, Ouro Branco, Paraguau, Passos, Patos de Minas, Pitangui, Ponte Nova, Prudente de Morais, Rio Doce, Rio Novo, Sabar, Santa Luzia, So Geraldo da Piedade, Sardo, Sete Lagoas, Taquarau de Minas, Turvolndia, Ub, Uba, Uberaba, Uberlndia, Varzelndia, Vespasiano, Viosa. Paran Abati, Alto Piquiri, Alvorada do Sul, Andira, Antonina, Assa, Bandeirantes, Barra do Jacar, Bela Vista do Paraso, Califrnia, Cambar, Camb, Capanema, Carlpolis, Cascavel, Centenrio do Sul, Colorado, Congonhinhas, Conselheiro Mairinck, Cornlio Procpio, Curitiba, Florestpolis, Formosa do Oeste, Foz do Iguau, Goioer, Guair, Guapirama, Guaraci, Ibaiti, Ibipora, Icarama, Ipor, Itaguaj, Itambarac, Jacarezinho, Jaguapita, Japira, Jataizinho, Jundia do Sul, Lepolis, Londrina, Marechal Cndido Rondon, Maria Helena, Marialva, Mariluz, Matinhos, Medianeira, Moreira Sales, Morretes, Nossa Senhora das Graas, Nova Amrica da Colina, Nova Aurora, Nova Ftima, Palotina, Paranacity, Paranagu, Porecatu, Primeiro de Maio, Querncia do Norte, Rancho Alegre, Ribeiro Claro, Ribeiro do Pinhal, Rolndia, Sabudia, Salto do Itarar, Santa Amlia, Santa Ceclia do Pavo, Santa Cruz de Monte Castelo, Santa Helena, Santa Mariana, Santo Antnio da Platina, So Miguel do Iguau, So Sebastio da Amoreira, Sarandi, Sertaneja, Sertanpolis, Siqueira Campos, Terra Roxa, Tomazina, Umuarama, Ura. Rio Grande do Sul Chu, Esteio, Osrio, Pedro Osrio, Pirap, So Borja, So Pedro do Sul, Torres, Tramanda, Uruguaiana, Viamo. Rio de Janeiro Aperibe, Angra dos Reis, Araruama, Areal, Armao de Bzios, Barra do Pira, Barra Mansa, Belford Roxo, Bom Jardim, Bom Jesus do Itabapoana, Cabo Frio, Cachoeiras de Macacu, Campos dos Goytacazes, Cambuci, Cardoso Moreira, Comendador Levy Gasparian, Conceio de Macabu, Cantagalo, Carapebus, Carmo, Casimiro de Abreu, Cordeiro, Duas Barras, Duque de Caxias, Engenheiro Paulo de Frontin, Guapimirim, Iguaba Grande, Itabora, Itagua, Italva,
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Itaocara, Itaperuna, Itatiaia, Japeri, Laje do Muria, Maca, Macuco, Mag, Mangaratiba, Maric, Mendes, Miguel Pereira, Miracema, Natividade, Nilpolis, Niteri, Nova Friburgo, Nova Iguau, Paracambi, Paraba do Sul, Paty, Petrpolis, Pinheiral, Pira, Porcincula, Porto Real, Quatis, Queimados, Quissam, Resende, Rio Bonito, Rio Claro, Rio das Flores, Rio das Ostras, Rio de Janeiro, Santa Maria Madalena, Santo Antnio de Pdua, So Francisco de Itabapoana, So Fidlis, So Gonalo, So Joo da Barra, So Joo de Meriti, So Jos de Ub, So Jos do Vale do Rio Preto, So Pedro da Aldeia, So Sebastio do Alto, Sapucaia, Saquarema, Silva Jardim, Sumidouro, Tangu, Terespolis, Trajano de Morais, Trs Rios, Valena, Varre-Sai, Vassouras, Volta Redonda. Santa Catarina Agrolndia, guas Mornas, Antnio Carlos, Apina, Araquari, Armazm, Ascurra, Balnerio Barra do Sul, Balnerio Cambori, Barra Velha, Benedito Novo, Biguu, Blumenau, Bombinhas, Brusque, Canelinha, Corup, Doutor Pedrinho, Florianpolis, Garopaba, Garuva, Gaspar, Governador Celso Ramos, Guaramirim, Ibirama, Ilhota, Imaru, Imbituba, Indaial, Itaja, Itapema, Jaragu do Sul, Joinville, Jos Boiteux, Laguna, Lontras, Luiz Alves, Massaranduba, Navegantes, Palhoa, Paulo Lopes, Penha, Piarras, Pomerode, Porto Belo, Rio do Sul, Rio dos Cedros, Rodeio, Santo Amaro da Imperatriz, So Francisco do Sul, So Joo Batista, So Joo do Itaperi, So Jos, So Martinho, Schroeder, Tijucas, Timb, Vtor Meireles. So Paulo Alfredo Marcondes, Alto Alegre, lvares Machado, lvaro de Carvalho, Americana, Amparo, Anhembi, Anhumas, Aparecida, Apia, Araatuba, Araoiaba da Serra, Araraquara, Araras, Aruj, Avanhandava, Bananal, Barbosa, Bariri, Barra Bonita, Barueri, Bauru, Bebedouro, Birigi, Biritiba-Mirim, Boituva, Bom Jesus dos Perdes, Boracia, Botucatu, Brodsqui, Buri, Cabreva, Caapava, Cachoeira Paulista, Cafelndia, Caieiras, Caiu, Cajamar, Campinas, Campo Limpo Paulista, Campos do Jordo, Canania, Capivari, Caraguatatuba, Carapicuba, Casa Branca, Castilho, Cerquilho, Charqueada, Chavantes, Conchas, Cordeirpolis, Cosmpolis, Cotia, Cruzeiro, Cubato, Descalvado, Diadema, Dracena, Eldorado, Elias Fausto, Embu, Embu-Guau, Esprito Santo do Pinhal, Fartura, Ferraz de Vasconcelos, Flornia, Francisco Morato, Franco da Rocha, Glia, Gara, Gasto Vidigal, Getulina, Glicrio, Guaimbe, Guarant, Guararapes, Guararema, Guaratinguet, Guaruj, Guarulhos, Iacanga, Iacri, Ibat, Ibirarema, Ibina, Igarau do Tiet, Iguape, Ilhabela, Indaiatuba, Indiana, Ipaussu, Iper, Iporanga, Iracempolis, Itanham, Itapecerica da Serra, Itapetininga, Itapevi, Itapira, Itaporanga, Itapu, Itaquaquecetuba, Itariri, Itatiba, Itu, Jaboticabal, Jacare, Jacupiranga, Jaguarina, Jambeiro, Jandira, Jarinu, Ja, Julio Mesquita, Jundia, Juqui, Juquitiba, Lagoinha, Laranjal Paulista, Leme, Lenis Paulista, Limeira, Lins, Lorena, Louveira, Lutcia, Macatuba, Mairinque, Mairipor, Marab Paulista, Marlia, Martinpolis, Mau, Mineiros do Tiet, Miracatu,
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Mirante do Paranapanema, Mococa, Mogi das Cruzes, Mogi-Guau, Mogi-Mirim, Mongagu, Monte Alto, Monte Mor, Morungaba, Nova Odessa, Oriente, Osasco, Oscar Bressane, Ourinhos, Palmital, Pariquera-Au, Paulicia, Paulnia, Pederneiras, Pedreira, Pedro de Toledo, Penpolis, Pereiras, Perube, Piacatu, Piedade, Pilar do Sul, Pindamonhangaba, Piquete, Piracicaba, Piraju, Pirangi, Pirapozinho, Pirassununga, Po, Pompia, Porangaba, Porto Feliz, Praia Grande, Presidente Alves, Presidente Bernardes, Presidente Prudente, Presidente Venceslau, Promisso, Queiroz, Rafard, Redeno da Serra, Registro, Ribeira, Ribeiro Pires, Ribeiro Preto, Riversul, Rinco, Rinpolis, Rio Claro, Rio Grande da Serra, Roseira, Rubicea, Salespolis, Salto, Salto de Pirapora, Salto Grande, Santa Brbara dOeste, Santa Clara DOeste, Santa Cruz das Palmeiras, Santa Cruz do Rio Pardo, Santa Gertrudes, Santa Isabel, Santa Lcia, Santana de Parnaba, Santo Andr, Santpolis do Aguapei, Santos, So Bernardo do Campo, So Caetano do Sul, So Carlos, So Jos do Rio Pardo, So Jos dos Campos, So Lus do Paraitinga, So Manuel, So Miguel Arcanjo, So Paulo, So Pedro, So Roque, So Sebastio, So Simo, So Vicente, Sarapu, Serrana, Sertozinho, Sete Barras, Silveiras, Sorocaba, Sumar, Suzano, Taboo da Serra, Taciba, Tagua, Taubat, Tiet, Trememb, Tup, Ubatuba, Valinhos, Valparaso, Vargem Grande do Sul, Vargem Grande Paulista, Vera Cruz, Vinhedo, Votorantim.
8.3 Biomphalaria straminea

A presena de B. straminea foi registrada em 1.327 municpios, distribudos por 24 estados brasileiros, alm de no Distrito Federal (figura 65). Distribuio geogrfica: em todo o territrio brasileiro, exceto nos estados de Amap e Rondnia (figura 65).
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Figura 65. Distribuio geogrfica de Biomphalaria straminea no Brasil. Figura extrada de Carvalho e Caldeira (2004).
At o momento, no foi notificada apenas nos estados de Amap e Rondnia. Apresenta maior domnio na Regio Nordeste, principalmente nos estados do Piau, do Cear, do Rio Grande do Norte, da Paraba, de Pernambuco, de Alagoas, de Sergipe e da Bahia, na regio compreendida pelos paralelos 02 54 e 31 00 S, pelo meridiano 44 43 W e o litoral. Esses moluscos so habitantes de colees hdricas permanentes e temporrias, estando mais ajustados ao clima seco do Nordeste. 8.3.1 Ocorrncia de Biomphalaria straminea por municpio Acre Cruzeiro do Sul, Rio Branco. Alagoas gua Branca, Anadia, Arapiraca, Atalaia, Belm, Boca da Mata, Cacimbinhas, Cajueiro, Capela, Colnia Leopoldina, Coruripe, Delmiro Gouveia, Flexeiras, Girau do Ponciano, Igaci, Igreja Nova, Jacupe, Junqueiro, Lagoa da Canoa, Limoeiro de Anadia, Macei, Major Isidoro, Maribondo, Mar Vermelho, Mata Grande, Murici, Olho Dgua das Flores, Olho Dgua do Casado, Palmeira dos ndios, Po de Acar, Passo de Camaragibe, Penedo, Piaabuu, Pilar, Pindoba, Piranhas, Porto Calvo, Porto de Pedras, Porto Real do Colgio, Quebrangulo, Rio Largo, Santana do Ipanema, So Brs, So Jos da Laje, So Jos da Tapera, So Lus do Quitunde, So Miguel
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dos Campos, Satuba, Tanque DArca, Traipu, Unio dos Palmares, Viosa. Amazonas Careiro, Humait, Manacapuru, Manaus. Bahia Abara, Abar, Acajutiba, Adustina, gua Fria, Aiquara, Alagoinhas, Alcobaa, Almadina, Amargosa, Amlia Rodrigues, Amrica Dourada, Anag, Andara, Andorinha, Angical, Anguera, Antas, Antnio Cardoso, Antnio Gonalves, Apor, Apuarema, Araas, Aracatu, Araci, Aramari, Arataca, Aratupe, Aurelino Leal, Baianpolis, Baixa Grande, Banza, Barra, Barra da Estiva, Barra do Choa, Barra do Mendes, Barra do Rocha, Barreiras, Barro Alto, Belmonte, Belo Campo, Biritinga, Boa Nova, Boa Vista do Tupim, Bom Jesus da Lapa, Bom Jesus da Serra, Boninal, Bonito, Boquira, Botupor, Brejes, Brejolndia, Brotas de Macabas, Brumado, Buerarema, Buritirama, Caatiba, Cabaceiras do Paraguau, Cachoeira, Cacul, Cam, Caetanos, Caetit, Cafarnaum, Cairu, Caldeiro Grande, Camacan, Camaari, Camamu, Campo Alegre de Lourdes, Campo Formoso, Canpolis, Canarana, Canavieiras, Candeal, Candeias, Candiba, Cndido Sales, Cansano, Canudos, Capela do Alto Alegre, Capim Grosso, Carabas, Caravelas, Cardeal da Silva, Carinhanha, Casa Nova, Castro Alves, Catolndia, Catu, Caturama, Central, Chorroch, Ccero Dantas, Cip, Coaraci, Cocos, Conceio da Feira, Conceio do Almeida, Conceio do Coit, Conceio do Jacupe, Conde, Condeba, Contendas do Sincor, Corao de Maria, Cordeiros, Coribe, Coronel Joo S, Correntina, Cotegipe, Cravolndia, Crispolis, Cristpolis, Cruz das Almas, Cura, Drio Meira, Dias Dvila, Dom Baslio, Dom Macedo Costa, Elsio Medrado, Encruzilhada, Entre Rios, rico Cardoso, Esplanada, Euclides da Cunha, Eunpolis, Ftima, Feira da Mata, Feira de Santana, Filadlfia, Firmino Alves, Floresta Azul, Formosa do Rio Preto, Gandu, Gavio, Gentio do Ouro, Glria, Gongogi, Governador Mangabeira, Guajeru, Guanambi, Guaratinga, Helipolis, Iau, Ibiassuc, Ibicara, Ibicoara, Ibicu, Ibipeba, Ibipitanga, Ibiquera, Ibirapitanga, Ibirapu, Ibirataia, Ibitiara, Ibitit, Ibotirama, Ichu, Igapor, Igrapina, Igua, Ilhus, Inhambupe, Ipecaet, Ipia, Ipir, Ipupiara, Irajuba, Iramaia, Iraquara, Irar, Irec, Itabela, Itaberaba, Itabuna, Itacar, Itaet, Itagib, Itagimirim, Itaguau da Bahia, Itaju do Colnia, Itajupe, Itamaraju, Itamari, Itamb, Itanagra, Itanhm, Itaparica, Itap, Itapebi, Itapetinga, Itapicuru, Itapitanga, Itarantim, Itatim, Itiruu, Itiba, Itoror, Ituau, Ituber, Iui, Jaborandi, Jacaraci, Jacobina, Jaguarari, Jaguaripe, Jandara, Jequi, Jeremoabo, Jiquiri, Jitana, Joo Dourado, Juazeiro, Jucuruu, Jussara, Jussari, Jussiape, Lafaiete Coutinho, Lagoa Real, Laje, Lajedo, Lajedinho, Lajedo do Tabocal, Lamaro, Lapo, Lauro de Freitas, Lenis, Licnio de Almeida, Macajuba, Macarani, Macabas, Macurur, Madre de Deus, Maetinga, Maiquinique, Mairi, Malhada, Malhada de Pedras, Manoel Vitorino, Mansido, Maracs, Maragogipe, Mara, Marcionlio Souza, Mascote, Mata de So Joo, Matina, Medeiros Neto, Miguel Calmon, Milagres, Mirangaba, Mirante, Monte Santo, Morpar, Morro do Chapu, Mortugaba, Mucug, Mucuri, Mulungu do Morro, Mundo Novo, Muniz Ferreira, Muqum de So Francisco, Muritiba, Mutupe, Nazar, Nilo Peanha, Nordestina, Nova Cana, Nova Ftima, Nova Ibi, Nova Itarana, Nova Redeno, Nova Soure, Nova Viosa, Novo Horizonte, Novo Triunfo, Olindina, Oli-
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veira dos Brejinhos, Ouriangas, Ourolndia, Palmas de Monte Alto, Palmeiras, Paramirim, Paratinga, Paripiranga, Pau Brasil, Paulo Afonso, P de Serra, Pedro, Pedro Alexandre, Piat, Pilo Arcado, Pinda, Pindobau, Pintadas, Pira do Norte, Pirip, Piritiba, Planaltino, Planalto, Poes, Pojuca, Ponto Novo, Porto Seguro, Potiragu, Prado, Presidente Dutra, Presidente Jnio Quadros, Presidente Tancredo Neves, Queimadas, Quijingue, Quixabeira, Rafael Jambeiro, Remanso, Retirolndia, Riacho das Neves, Riacho do Jacupe, Riacho de Santana, Ribeira do Amparo, Ribeira do Pombal, Ribeiro do Largo, Rio de Contas, Rio do Antnio, Rio do Pires, Rio Real, Rodelas, Ruy Barbosa, Salinas da Margarida, Salvador, Santa Brbara, Santa Brgida, Santa Cruz Cabrlia, Santa Cruz da Vitria, Santa Ins, Santa Luzia, Santa Maria da Vitria, Santa Rita de Cssia, Santa Teresinha, Santaluz, Santana, Santanpolis, Santo Amaro, Santo Antnio de Jesus, Santo Estvo, So Desidrio, So Domingos, So Felipe, So Flix, So Flix do Coribe, So Francisco do Conde, So Gabriel, So Gonalo dos Campos, So Jos da Vitria, So Jos do Jacupe, So Miguel das Matas, So Sebastio do Pass, Sapeau, Stiro Dias, Saubara, Sade, Seabra, Sebastio Laranjeiras, Senhor do Bonfim, Sento S, Serra do Ramalho, Serra Dourada, Serra Preta, Serrinha, Serrolndia, Simes Filho, Stio do Mato, Stio do Quinto, Sobradinho, Souto Soares, Tabocas do Brejo Velho, Tanhau, Tanque Novo, Tanquinho, Tapero, Tapiramut, Teixeira de Freitas, Teodoro Sampaio, Teofilndia, Teolndia, Terra Nova, Tremedal, Tucano, Uau, Ubara, Ubaitaba, Ubat, Uiba, Umburanas, Una, Urandi, Uruuca, Utinga, Valena, Valente, Vrzea da Roa, Vrzea do Poo, Vrzea Nova, Varzedo, Vera Cruz, Vereda, Vitria da Conquista, Wagner, Wanderley, Wenceslau Guimares, Xique-Xique. Distrito Federal Braslia. Cear Abaiara, Acarape, Acara, Acopiara, Aiuaba, Amontada, Antonina do Norte, Apuiars, Aquiraz, Aracati, Aracoiaba, Araripe, Aratuba, Arneiroz, Assar, Aurora, Baixio, Banabui, Barbalha, Barreira, Barro, Baturit, Boa Viagem, Brejo Santo, Camocim, Campos Sales, Canind, Capistrano, Carir, Caririau, Carnaubal, Cascavel, Caucaia, Cedro, Corea, Crates, Crato, Croat, Farias Brito, Forquilha, Fortaleza, Frecheirinha, General Sampaio, Granja, Guaiba, Guaramiranga, Ic, Iguatu, Independncia, Ipaumirim, Ipu, Ipueiras, Itaiaba, Itapipoca, Itapina, Jaguaretama, Jaguaribe, Jaguaruana, Jardim, Jati, Juazeiro do Norte, Jucs, Lavras da Mangabeira, Limoeiro do Norte, Maracana, Maranguape, Massap, Mauriti, Milagres, Milh, Misso Velha, Mombaa, Morada Nova, Morrinhos, Mulungu, Nova Olinda, Nova Russas, Ors, Pacajus, Pacatuba, Pacoti, Palmcia, Paracuru, Paraipaba, Parambu, Pedra Branca, Penaforte, Pentecoste, Pereiro, Piquet Carneiro, Porteiras, Quixad, Quixel, Quixeramobim, Quixer, Redeno, Reriutaba, Russas, Saboeiro, Santa Quitria, Santana do Acara, Santana do Cariri, So Benedito, So Gonalo do Amarante, So Lus do Curu, Senador Pompeu, Sobral, Solonpole, Tabuleiro do Norte, Tamboril, Tau, Umari, Uruburetama, Uruoca, Varjota, Vrzea Alegre, Viosa do Cear. Esprito Santo gua Doce do Norte, guia Branca, Aracruz, Baixo Guandu, Barra de So Francisco, Colatina, Ecoporanga, Linhares, Mantenpolis, Mimoso do Sul, Montanha, Mucurici, Nova Vencia, Pancas, So Mateus. Gois
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Acrena, gua Limpa, Anpolis, Barro Alto, Buriti Alegre, Cabeceiras, Cachoeira Dourada, Caldas Novas, Campinau, Campinorte, Ceres, Colinas do Sul, Corumbaba, Damianpolis, Davinpolis, Flores de Gois, Formosa, Goinia, Guarani de Gois, Iaciara, Inhumas, Itumbiara, Luzinia, Mamba, Marzago, Minau, Mineiros, Niquelndia, Padre Bernardo, Parana, Piracanjuba, Porangatu, Posse, Rio Verde, Santa Rita do Novo Destino, Santa Rosa de Gois, Santo Antnio do Descoberto, So Domingos, Stio DAbadia, Trindade, Uruau. Maranho Aailndia, Alcntara, Araioses, Arari, Bacuri, Barreirinhas, Benedito Leite, Bequimo, Cajapi, Cururupu, Guimares, Humberto de Campos, Joo Lisboa, Matinha, Mirinzal, Nova Iorque, Paco do Lumiar, Palmeirndia, Paraibano, Parnarama, Passagem Franca, Pastos Bons, Peri Mirim, Pindar-Mirim, Pinheiro, Primeira Cruz, Rosrio, Santa Helena, So Bento, So Bernardo, So Domingos do Maranho, So Joo Batista, So Joo dos Patos, So Lus, So Vicente Ferrer, Timon, Turiau, Tutia, Viana. Mato Grosso Diamantino, Vrzea Grande. Mato Grosso do Sul Ponta Por, Trs Lagoas. Minas Gerais Aimors, Arax, Arcos, Baldim, Bambu, Barbacena, Belo Horizonte, Belo Oriente, Belo Vale, Betim, Bocaiva, Bonfinpolis de Minas, Braslia de Minas, Brumadinho, Bueno Brando, Buenpolis, Cachoeira Dourada, Caet, Campos Gerais, Capim Branco, Capito Enas, Cara, Caranaba, Caratinga, Cascalho Rico, Cssia, Central de Minas, Centralina, Chapada do Norte, Claraval, Claro dos Poes, Conceio das Alagoas, Conselheiro Lafaiete, Contagem, Corao de Jesus, Cordisburgo, Corinto, Coronel Fabriciano, Curvelo, Delfinpolis, Delta, Divino das Laranjeiras, Douradoquara, Engenheiro Caldas, Engenheiro Navarro, Esmeraldas, Espinosa, Francisco S, Frei Inocncio, Governador Valadares, Grupiara, Ibia, Ibiracatu, Igarap, Igaratinga, Inhama, Inimutaba, Ipiau, Itabira, Itabirinha de Mantena, Itabirito, Itacarambi, Itana, Itinga, Ituiutaba, Jacinto, Janaba, Januria, Japonvar, Jequita, Jequitib, Joo Pinheiro, Juiz de Fora, Juramento, Lagamar, Lagoa da Prata, Lagoa dos Patos, Lagoa Formosa, Lagoa Grande, Lagoa Santa, Lontra, Mamonas, Mateus Leme, Mato Verde, Matozinhos, Minas Novas, Mirabela, Montalvnia, Monte Alegre de Minas, Montes Claros, Mutum, Nova Lima, Pains, Papagaios, Paracatu, Paraguau, Paraopeba, Passos, Paulistas, Pedro Leopoldo, Pirapora, Pitangui, Ponte Nova, Porteirinha, Prudente de Morais, Rio Acima, Rio Casca, Sabar, Sacramento, Salinas, Salto da Divisa, Santa Cruz do Escalvado, Santa Luzia, Santa Maria do Suau, Santa Rita de Minas, Santa Vitria, Santana de Pirapama, So Geraldo da Piedade, So Gonalo do Abaet, So Joo da Ponte, So Jos da Safira, So Pedro do Suau, So Pedro dos Ferros, So Romo, So Sebastio do Paraso, So Toms de Aquino, Sardo, Sete Lagoas, Sobrlia, Taquarau de Minas, Tefilo Otoni, Timteo, Trs Marias, Ub, Uba, Uberaba, Uberlndia, Una, Varzelndia, Vazante, Vespasiano. Par Alenquer, Altamira, Ananindeua, Belm, Belterra, Bragana, Breves, Capanema, Igarap-Au, Irituia, Itaituba, Monte Alegre, Nova Timboteua, Oriximin, Primavera, Quatipuru, Santa Isabel do Par, Santarm, Viseu. Paraba Alagoa Grande, Alagoa Nova, Alagoinha, Alhandra, Araagi, Arara, Araruna, Areia, Aroeiras, Bananeiras, Barra de Santa Rosa, Be-
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lm, Bonito de Santa F, Boqueiro, Borborema, Brejo do Cruz, Caapor, Cabaceiras, Cabedelo, Cacimba de Dentro, Caiara, Cajazeiras, Caldas Brando, Campina Grande, Catol do Rocha, Conde, Coremas, Cruz do Esprito Santo, Cuitegi, Duas Estradas, Esperana, Guarabira, Ing, Itabaiana, Itaporanga, Itapororoca, Itatuba, Jacara, Joo Pessoa, Juazeirinho, Juripiranga, Lagoa de Dentro, Mamanguape, Mari, Mogeiro, Monteiro, Mulungu, Natuba, Patos, Pedra Lavrada, Pedras de Fogo, Pianc, Picu, Pilar, Piles, Pilezinhos, Pirpirituba, Pombal, Princesa Isabel, Remgio, Rio Tinto, Salgado de So Flix, Santa Luzia, Santa Rita, So Joo do Cariri, So Miguel de Taipu, So Sebastio do Umbuzeiro, Sap, Serra da Raiz, Serraria, Solnea, Soledade, Sousa, Tapero, Teixeira, Umbuzeiro. Paran Bela Vista do Paraso, Foz do Iguau, Guara, Ibipor, Jataizinho, Lepolis, Londrina, Porecatu. Pernambuco Abreu e Lima, Afogados da Ingazeira, Agrestina, gua Preta, guas Belas, Aliana, Altinho, Amaraji, Angelim, Araripina, Arcoverde, Barra de Guabiraba, Barreiros, Belm de Maria, Belm de So Francisco, Belo Jardim, Betnia, Bezerros, Bodoc, Bom Conselho, Bom Jardim, Bonito, Brejo, Brejo da Madre de Deus, Buenos Aires, Buque, Cabrob, Cachoeirinha, Calado, Camutanga, Canhotinho, Carnaba, Carpina, Catende, Ch de Alegria, Ch Grande, Condado, Correntes, Corts, Cupira, Custdia, Escada, Exu, Ferreiros, Flores, Floresta, Frei Miguelinho, Gameleira, Garanhuns, Glria do Goit, Goiana, Gravat, Ibimirim, Igarassu, Inaj, Ipojuca, Ilha de Itamarac, Itamb, Itapetim, Itapissuma, Itaquitinga, Jaboato dos Gurarapes, Joo Alfredo, Jupi, Jurema, Lagoa do Carro, Lagoa do Itaenga, Lagoa do Ouro, Lagoa dos Gatos, Lajedo, Limoeiro, Macaparana, Machados, Maraial, Mirandiba, Moreno, Nazar da Mata, Olinda, Orob, Ouricuri, Palmares, Palmeirina, Panelas, Parnamirim, Passira, Paudalho, Paulista, Pedra, Pesqueira, Petrolndia, Petrolina, Pombos, Primavera, Quipap, Recife, Ribeiro, Rio Formoso, Salgadinho, Salgueiro, Salo, Sanhar, Santa Cruz do Capibaribe, Santa Maria da Boa Vista, So Benedito do Sul, So Bento do Una, So Caetano, So Joo, So Joaquim do Monte, So Jos do Egito, So Loureno da Mata, So Vicente Ferrer, Serra Talhada, Serrita, Sertnia, Sirinham, Surubim, Tabira, Tacaimb, Tacaratu, Terezinha, Timbaba, Toritama, Tracunham, Trindade, Triunfo, Venturosa, Verdejante, Vertentes, Vicncia, Vitria de Santo Anto. Piau Agricolndia, gua Branca, Alagoinha do Piau, Alto Long, Altos, Amarante, Angical do Piau, Ansio de Abreu, Aroazes, Arraial, Barra DAlcntara, Barro Duro, Bocaina, Buriti dos Montes, Campinas do Piau, Campo Maior, Canto do Buriti, Caracol, Castelo do Piau, Coivaras, Conceio do Canind, Cristino Castro, Demerval Lobo, Dom Expedito Lopes, Elesbo Veloso, Floriano, Francinpolis, Francisco Ayres, Francisco Santos, Fronteiras, Guadalupe, Hugo, Napoleo, Inhuma, Jaics, Jardim do Mulato, Jos de Freitas, Juazeiro do Piau, Lagoinha do Piau, Lagoa Alegre, Miguel Alves, Miguel Leo, Monsenhor Gil, Novo Oriente do Piau, Oeiras, Padre Marcos, Paes Landim, Palmeirais, Parnaba, Passagem Franca do Piau, Paulistana, Picos, Pio IX, Piripiri, Prata do Piau, Regenerao, Santa Cruz do Piau, Santo Antnio de Lisboa, Santo Incio do Piau, So Flix do Piau, So Gonalo do Piau, So Joo da Canabrava, So Joo da
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Serra, So Joo do Piau, So Jos do Peixe, So Julio, So Miguel do Tapuio, So Pedro do Piau, So Raimundo Nonato, Sigefredo Pacheco, Simes, Simplcio Mendes, Socorro do Piau, Teresina, Unio, Valena do Piau, Vrzea Grande. Rio Grande do Norte Acari, Au, gua Nova, Alexandria, Alto do Rodrigues, Angicos, Apodi, Ars, Augusto Severo, Baa Formosa, Bento Fernandes, Brejinho, Caiara do Rio do Vento, Caic, Canguaretama, Carabas, Cear-Mirim, Cerro Cor, Cruzeta, Currais Novos, Esprito Santo, Extremoz, Flornia, Goianinha, Ielmo Marinho, Ipanguau, Ita, Jardim de Piranhas, Jardim do Serid, Joo Cmara, Jos da Penha, Jucurutu, Lagoa DAnta, Lus Gomes, Macaba, Macau, Martins, Maxaranguape, Monte Alegre, Mossor, Natal, Nsia Floresta, Nova Cruz, Parazinho, Parelhas, Parnamirim, Pau dos Ferros, Pedra Grande, Pedro Avelino, Pedro Velho, Pendncias, Poo Branco, Portalegre, Pureza, Rafael Fernandes, Santa Cruz, Santana do Matos, Santo Antnio, So Bento do Norte, So Gonalo do Amarante, So Joo do Sabugi, So Jos de Mipibu, So Jos do Campestre, So Jos do Serid, So Miguel, So Paulo do Potengi, So Tom, Senador Georgino Avelino, Serra Negra do Norte, Stio Novo, Taipu, Tangar, Tibau do Sul, Touros, Vrzea, Vera Cruz, Vila Flor. Rio Grande do Sul Porto Alegre. Rio de Janeiro Angra dos Reis, Aperib, Barra do Pira, Barra Mansa, Cambuci, Cantagalo, Casimiro de Abreu, Duque de Caxias, Guapimirim, Iguaba Grande, Itabora, Itaocara, Mag, Mangaratiba, Maric, Miguel Pereira, Niteri, Nova Iguau, Paracambi, Paraba do Sul, Petrpolis, Pinheiral, Pira, Porcincula, Resende, Rio das Flores, Rio de Janeiro, Santo Antnio de Pdua, So Gonalo, Sapucaia, Silva Jardim, Trs Rios, Vassouras, Volta Redonda. Santa Catarina Florianpolis, Governador Celso Ramos. So Paulo Adolfo, Altair, Americana, Andradina, Araatuba, Araraquara, Araras, Bananal, Barbosa, Barra Bonita, Bauru, Botucatu, Caapava, Campinas, Cruzeiro, Gabriel Monteiro, Guaraa, Iep, Ilha Solteira, Iper, Jarinu, Luclia, Nova Granada, Ourinhos, Paulo de Faria, Pereira Barreto, Pitangueiras, Presidente Prudente, Rancharia, Registro, Ribeiro Preto, Rubicea, Salto Grande, So Jos do Rio Preto, Serrana, Sertozinho, Taboo da Serra, Taubat, Trememb, Tupi Paulista. Sergipe Aracaju, Arau, Areia Branca, Barra dos Coqueiros, Capela, Carmpolis, Cedro de So Joo, General Maynard, Ilha das Flores, Japaratuba, Lagarto, Laranjeiras, Malhada dos Bois, Malhador, Maruim, Muribeca, Nepolis, Nossa Senhora do Socorro, Pacatuba, Poo Verde, Propri, Riachuelo, Rosrio do Catete, Santa Luzia do Itanhy, Santa Rosa de Lima, Santo Amaro das Brotas, So Francisco, Simo Dias, Telha, Umbaba. Tocantins Arraias, Paran, Peixe. Roraima Boa Vista.
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Legislao Ambiental Comentada
O presente captulo objetiva orientar profissionais sobre a legislao ambiental concernente vigilncia e ao controle de moluscos de importncia epidemiolgica. Tal orientao tem por fim suprir a demanda urgente de adequao das atividades de controle epidemiolgico, em especial da esquistossomose mansnica.
9.1 Quanto legislao de proteo fauna

Os moluscos de interesse epidemiolgico fazem parte da fauna silvestre no Brasil e, como tal, so protegidos por lei. De acordo com o artigo 1 da Lei 5.197, de 3 de janeiro de 1967 (Lei da Fauna): Os animais de quaisquer espcies, em qualquer fase de seu desenvolvimento e que vivem naturalmente fora do cativeiro, constituindo a fauna silvestre, bem como seus ninhos, abrigos e criadouros naturais so propriedade do Estado, sendo proibida a sua utilizao, perseguio, destruio, caa ou apanha (BRASIL, 1967, grifo nosso). O termo propriedade, citado na Lei, no configura o uso pleno da fauna pelo Estado, mas sua autoridade assegurada para proteg-la, conforme determinado ao poder pblico pelo art. 225 da Constituio Federal: Art. 225. Todos tm direito ao meio ambiente ecologicamente equilibrado, bem de uso comum do povo e essencial sadia qualidade de vida, impondo-se ao Poder Pblico e coletividade o dever de defend-lo e preserv-lo para as presentes e futuras geraes. 1 - Para assegurar a efetividade desse direito, incumbe ao Poder Pblico: VII - proteger a fauna e a flora, vedadas, na forma da lei, as prticas que coloquem em risco sua funo ecolgica, provo-
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quem a extino de espcies ou submetam os animais a crueldade. (BRASIL, 1988a). Da mesma forma, a Lei n. 9.605, de 12 de fevereiro de 1998 (Lei de Crimes Ambientais), que dispe sobre as sanes penais e administrativas derivadas de condutas e atividades lesivas ao meio ambiente, estabelece no artigo 29 que crime ambiental: matar, perseguir, caar, apanhar, utilizar espcimes da fauna silvestre, nativos ou em rota migratria, sem a devida permisso, licena ou autorizao da autoridade competente ou em desacordo com a obtida: Pena - deteno de seis meses a um ano, e multa. (BRASIL, 1998). O Decreto n. 3.179, de 21 de setembro de 1999 (BRASIL, 1999), que regulamenta a Lei n. 9.605 (Lei de Crimes Ambientais), estabelece que crime a coleta, a eliminao de espcimes da fauna silvestre e a explorao de campos naturais de invertebrados aquticos sem a devida autorizao da autoridade competente. Observando-se que a investigao epidemiolgica pode determinar a necessidade de controle ou eliminao de determinada populao de moluscos, o artigo 37 da Lei n. 9.605 (BRASIL, 1998) institui que o abate de espcimes da fauna no pode ser considerado crime quando os espcimes em questo forem considerados nocivos pelo rgo competente. Recomenda-se, no entanto, que a declarao de nocividade seja acordada com o rgo ambiental federal, sobretudo quando a atividade de controle ou eliminao populacional objetivada produza quaisquer efeitos sobre os processos naturais de manuteno do ecossistema, ressalvadas as situaes previstas nas regulamentaes subseqentes.
9.2 Quanto coleta de moluscos de interesse epidemiolgico

De acordo com o art. 14 da Lei n. 5.197 (Lei da Fauna), poder ser concedida a cientistas, pertencentes a instituies cientficas, oficiais ou oficializadas, ou por estas indicadas, licena especial para a coleta de material destinado a fins cientficos, em qualquer poca. (BRASIL, 1967). Qualquer autorizao de manejo de captura ou coleta de espcimes da fauna segue as normatizaes institudas pela Portaria Ibama n. 332, de 13 de maro de 1990 (BRASIL, 1990), que ainda determina a competncia do Ibama para a concesso de autorizao de coleta de material zoolgico para fins cientficos.
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Quando se tratar de cientistas estrangeiros, devidamente credenciados pelo pas de origem, dever o pedido de licena ser aprovado e encaminhado ao rgo pblico federal competente neste caso, o Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq) , por intermdio de instituio cientfica oficial do pas. De acordo com a Resoluo do Conselho de Gesto do Patrimnio Gentico (CGEN) no 21, de 31 de agosto de 2006 (BRASIL, 2006a), a coleta de moluscos de interesse epidemiolgico no se enquadra sob o conceito de acesso ao patrimnio gentico para as finalidades da Medida Provisria no 2.186-16, de 23 de agosto de 2001, e est dispensada da obteno de autorizao de acesso do patrimnio gentico.
9.3 Quanto ao controle e eliminao de moluscos de interesse epidemiolgico

Conforme foi mencionado anteriormente, a destruio de animais silvestres ser permitida, mediante licena da autoridade competente, quando os espcimes em questo forem considerados nocivos. Artigo 3o da Lei n. 5.197, de 3 de janeiro de 1967 (Lei da Fauna): 2 - Ser permitida, mediante licena da autoridade competente, a apanha de ovos, larvas e filhotes que se destinem aos estabelecimentos acima referidos, bem como a destruio de animais silvestres considerados nocivos agricultura ou sade pblica. (BRASIL, 1967, art. 3). Artigo 37 da Lei n. 9.605, de 12 de fevereiro de 1998 (Lei de Crimes Ambientais): Art. 37. No crime o abate de animal, quando realizado: IV - por ser nocivo o animal, desde que assim caracterizado pelo rgo competente. (BRASIL, 1998, art. 37). So entendidos como rgos competentes para caracterizar um animal como nocivo sade pblica os rgos vinculados ao Ministrio da Sade, em concordncia com o rgo ambiental federal. Nos casos especficos do caramujo transmissor da esquistossomose e de demais invertebrados de interesse epidemiolgico previstos em programas oficiais de governo, o controle e a eliminao podem ser efetuados pelos rgos vinculados ao Ministrio da Sade sem a necessidade de autorizao do rgo ambiental competente, conforme regulamentao prevista na Instruo Normativa Ibama no 109, de 3 de agosto de 2006 (anexo J): Art. 4. O estudo, manejo ou controle da fauna sinantrpica nociva, previstos em programas de mbito nacional desenvolvidos pelos rgos federais da Sade e da Agricultura, bem como
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pelos rgos a eles vinculados, sero analisados e autorizados pela Diretoria de Fauna e dos Recursos Pesqueiros do Ibama (Difap/Ibama) ou pelas Superintendncias do Ibama nos estados, de acordo com a regulamentao especfica vigente. 1o - Observada a legislao e as demais regulamentaes vigentes, so espcies passveis de controle por rgos de governo da Sade, da Agricultura e do Meio Ambiente, sem a necessidade de autorizao do rgo ambiental competente: a) Invertebrados de interesse epidemiolgico, previstos em programas e ao de governo, tal como: insetos hematfagos (hempteros e dpteros), caros, helmintos e moluscos de interesse epidemiolgico, artrpodes peonhentos e invertebrados classificados como pragas agrcolas pelo Ministrio da Agricultura. (BRASIL, 2006b) importante ressaltar que a caracterizao de nocividade deve ser aplicada apenas sobre um grupo ou uma populao de animais especficos de uma determinada regio e no espcie como um todo. Controle Biolgico Quanto atividade de controle de moluscos de interesse epidemiolgico, utilizandose mtodos biolgicos com introduo de espcimes competidores ou predadores, deve-se ressaltar que: a) A Lei n. 9.605 (BRASIL, 1998) e o Decreto n. 3.179 (BRASIL, 1999) caracterizam como infrao a introduo de espcime animal no Pas, sem parecer tcnico oficial favorvel e licena expedida por autoridade competente. b) O transporte e a introduo de espcimes da fauna silvestre em ambiente natural fora da rea de distribuio natural de suas populaes devem estar devidamente autorizados pelo rgo federal competente. Controle fsico Quanto aos mtodos fsicos de manejo dos criadouros, que se utilizam da modificao de sua estrutura e composio fsica: a) A Resoluo Conama n. 303, de 20 de maro de 2002 (BRASIL, 2002a), considera como reas de Preservao Permanente (APPs): faixas marginais de cursos dgua, entorno de nascentes, veredas marginais de brejos e encharcados, restingas, mangues, entre outras reas.
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b) Considerando-se a possibilidade de soterramento de um corpo dgua como mtodo para a eliminao de um foco de esquistossomose e que tenha como conseqncia direta ou indireta a supresso da vegetao na rea de preservao permanente, deve-se observar o artigo 4o da Lei n. 4.771, de 15 de setembro de 1965 (Cdigo Florestal), que estabelece o seguinte: Art. 4o. A supresso de vegetao em rea de preservao permanente somente poder ser autorizada em caso de utilidade pblica (grifo nosso) ou de interesse social, devidamente caracterizados e motivados em procedimento administrativo prprio, quando inexistir alternativa tcnica e locacional ao empreendimento proposto (artigo com redao determinada pela MP n. 2.166-67/2001). (BRASIL, 1965). O artigo 1o, pargrafo 2o, item IV da referida Lei define as atividades de proteo sanitria como de utilidade pblica. c) A supresso de que trata o artigo 4o da Lei n. 4.771/65 (BRASIL, 1965) depender de autorizao do rgo ambiental estadual competente, com anuncia prvia, quando couber, do rgo federal ou municipal de meio ambiente. Controle qumico Quanto aos mtodos qumicos com uso de moluscicidas: a) A Lei n. 7.802, de 11 de julho de 1989 (BRASIL, 1989), e o Decreto n. 4.074, de 4 de janeiro de 2002 (BRASIL, 2002b), o qual a regulamenta, dispem sobre a necessidade de autorizaes para o uso de agrotxicos e afins para a pesquisa e a experimentao, regulamentando tambm a produo, a embalagem, a rotulagem, o transporte, o armazenamento, a comercializao, a propaganda comercial, a utilizao, a importao, a exportao, e destino final dos resduos e das embalagens, seus registros e classificaes, alm das competncias para o controle e a inspeo de procedimentos e responsabilidades sobre infraes das normatizaes. b) A referida legislao determina competncias ao Ministrio da Agricultura, ao Ministrio da Sade e ao Ministrio do Meio Ambiente quanto ao registro, regulamentao especfica e fiscalizao de uso de agrotxicos e afins. c) Qualquer um dos trs Ministrios pode conceder o Registro Especial Temporrio (RET) ato destinado a atribuir o direito de utilizar um agrotxico, componente ou afim para finalidades especficas em pesquisa e experimentao, por tempo determinado, podendo conferir o direito de importar ou produzir a quantidade necessria pesquisa e experimentao desde que em concordncia com as normas estabelecidas pelos demais Ministrios.
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d) Para os demais usos dos agrotxicos e afins, h necessidade de se requerer registro especfico, atendendo a diretrizes e exigncias dos rgos federais competentes da agricultura, da sade e do meio ambiente. e) A Anvisa o rgo federal responsvel, junto ao Ministrio da Sade, pela concesso de registro de produtos moluscicidas de uso domissanitrio. f) No Ibama, a Coordenao de Avaliao e Controle de Substncias Qumicas (Coasq), da Diretoria de Licenciamento e Qualidade Ambiental (Diliq), responsvel por avaliar, controlar, orientar e incentivar aes referentes aos processos e aos produtos alternativos ao uso de agrotxicos e afins, bem como por avaliar efeitos do uso de agrotxicos e afins sobre os ecossistemas, quanto concesso de seus registros. Como pde ser observado, apesar das restries legais, o controle de moluscos de interesse epidemiolgico, seja por mtodos biolgicos, qumicos ou fsicos, pode ser efetuado, desde que respeitada a legislao ambiental concernente. A Instruo Normativa Ibama n. 109, de 3 de agosto de 2006 (BRASIL, 2006b), exime os rgos de governo da necessidade de autorizao para o controle e a eliminao dos moluscos de interesse epidemiolgico, desde que a ao esteja prevista em programas de governo. Recomendamos, entretanto, que antes de qualquer interveno no meio ambiente, seja feito um contato prvio com a representao do rgo ambiental competente na regio, para que seja dada cincia das aes que devem ser desenvolvidas.
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Algumas Consideraes sobre o Controle da Esquistossomose
O controle da transmisso da esquistossomose no tem produzido os resultados esperados, apesar do progresso tecnolgico na produo de moluscicidas e medicamentos mais eficazes. Por conseguinte, um novo modelo de controle precisa ser desenvolvido com base no paradigma sociocultural. Esse modelo deve compreender os seguintes aspectos: controle dos hospedeiros intermedirios com uso de moluscicidas ou por meio do controle biolgico; melhoramento dos servios de sade pblica; tratamento da gua para abastecimento de comunidades, saneamento bsico, educao em sade e educao ambiental; tratamento de portadores (individuais ou em larga escala); proteo de indivduos, de tal modo que se previna a penetrao da cercria pela pele; e participao da comunidade no controle da esquistossomose. Esse conjunto de medidas constitui, potencialmente, o mais efetivo mtodo de controle em mdio e longo prazos. Em teoria, um mtodo eficiente; contudo, difcil de ser executado em grandes reas endmicas, como no Brasil, que cobre, aproximadamente, 1.000.000 km. O saneamento bsico e o tratamento da gua destinada ao abastecimento de comunidades podem reduzir o risco de contaminao cercariana. Entretanto, a garantia de um bom efeito e da permanncia dessas medidas s possvel com mudanas no comportamento humano, com melhorias na educao, na sade e no saneamento. A participao da comunidade indispensvel ao bom desenvolvimento do programa. Esse passo prima pela higiene pessoal e pelo papel de cada um no combate doena. Alm disso, importante ressaltar que nenhum desses mtodos capaz, isoladamente, de fazer o controle da doena, exceto em condies especiais, pois:
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o moluscicida atualmente disponvel caro, pode ser altamente txico e possui efeito apenas temporrio; o controle biolgico ainda no um mtodo eficaz (h, por exemplo, o problema da introduo de espcies exticas); o melhoramento dos servios de sade pblica e o tratamento da gua para abastecimento apenas potencializam os resultados do controle feito a partir de outros mtodos, alm de possuir um efeito de mdio e longo prazos; o tratamento em larga escala dos portadores reduz a morbidade, porm no suficiente para o controle da transmisso da doena; as vacinas ainda esto em processo experimental. Portanto, a estratgia mais adequada consiste no controle integrado, de carter multidisciplinar, com bom senso, responsabilidade e participao coletiva.
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Referncias
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THIENGO, S. C. et al. Freshwater snails and schistosomiasis mansoni in the state of Rio de Janeiro, Brazil: VI Noroeste Fluminense Mesoregion. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, [S.l.], v. 101, (Suppl. I), p. 239-245, 2006. THIENGO, S. C.; SANTOS, S. B.; FERNANDEZ, M. A. Malacofauna lmnica da rea de influncia do lago da usina hidreltrica de Serra da Mesa, Gois, Brasil. I. Estudo qualitativo. Rev. Bras. Zool., [S.l.], v. 22, n. 4, p. 867-874, 2005. THOMAS, J. D. The snail hosts of schistosomiasis: some evolutionary and ecological perspectives in relation to control. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, [S.l.], v. 90, n. 2, p. 195-204, 1995. VASCONCELLOS, M. C.; AMORIM, A. Activity of Euphorbia splendens var. hislopii N.E.B. (Euphorbiaceae) Latex against Lymnaea columella (Say, 1817) (Pulmonata: Lymnaeidae), Intermediate Host of Fasciola hepatica Linnaeus, 1758 (Trematoda: Fasciolidae). 2: Limited Field-testing. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, [S.l.], v. 98, n. 7, p. 981-985, 2003. VASCONCELLOS, M. C.; SCHALL, V. T. Latex of Coroa-de-Cristo (Euphorbia splendens): an effective molluscicide. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, [S.l.], v. 81, n. 4, p. 475-476, 1986. VASCONCELOS, E. M. Educao popular como instrumento de reorientao das estratgias de controle das doenas infecciosas e parasitrias. Cad. Sade Pblica, [S.l.], v. 14, p. 39-57, 1998. VEITENHEIMER-MENDES, I. L. Cercrias em moluscos planorbdeos de Camaqu Rio Grande do Sul, Brasil. Rev. Bras. Biol., [S.l.], v. 42, p. 545-551, 1982. VIDIGAL, T. H. D. A. et al. Further Studies on the Molecular Systematics of Biomphalaria Smails from Brazil. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, [S.l.], v. 95, p. 57-66, 2000. WORLD HEALTH ORGANIZATION (WHO). Report of Scientific Working Group of Plant Molluscicide and Guidelines for Evaluation of Plant Molluscicides. Geneva, 1983. (TDRS/ SCH-SWESWE (4)/83.3). ______. Specifications and evaluations for public health pesticides: niclosamide. Geneva, 2002. 24 p.
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Glossrio
gua: elemento indispensvel vida; possui duas propriedades especialmente importantes: grande poder de dissoluo e suspenso. Quase pura quando provinda das chuvas, ao atingir a superfcie do solo, parte absorvida e a outra parte escorre carregando nutrientes e outras substncias nocivas sade. A gua encanada domiciliar, sempre que possvel, dever ser oferecida ou facilitada s populaes. Bitopo: rea ocupada por uma biocenose conjunto inter-relacionado de seres vivos. Capilaridade: a propriedade dos fludos de subir e descer em tubos muito finos. A tendncia do lquido de subir pelo capilar resulta da diferena de presso gerada pela interface curva entre a fase lquida e a fase gasosa. Carenado: termo utilizado em conquiliologia para designar conchas que apresentam carena, ou seja, uma quilha proeminente. Coleo hdrica: todo local onde exista gua parada ou em movimento. Toda coleo hdrica deve a princpio ser considerada como um criadouro, ao menos em potencial. Criadouro: toda coleo hdrica que oferea condies de abrigar qualquer espcie de caramujo. A qualidade do criadouro pode sofrer a influncia da topografia (declividade do solo), da geologia (permeabilidade ou impermeabilidade do solo), da climatologia (chuvas, temperatura e umidade) e das condies fsicas e qumicas da gua (potencial de hidrogenao = pH, teor de ferro, salinidade, teor de matria orgnica, entre outras). Criadouro de importncia epidemiolgica: aquele que rene condies ecolgicas que favorecem a existncia de moluscos transmissores e ainda serve comunidade sob diversas formas: fonte de gua para consumo, local para banho, lavagem de roupa e fonte de renda (derivada da pesca e da agricultura). A utilizao da gua pode determinar a potencialidade da transmisso da esquistossomose. Ectono: determinado tipo de habitat dentro de uma rea geogrfica; microambiente. Espcie extica: espcie presente numa determinada rea geogrfica da qual no originria. Estao de captura: o ponto demarcado s margens de um criadouro para a pesquisa da presena de caramujos. A estao de captura deve ser caracterizada pelas coorde-
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nadas geogrficas, obtidas por meio de um aparelho de GPS (Sistema de Posicionamento Global). Nas grandes colees, a distncia entre os pontos ser de 50m e, quando o criadouro for pequeno, a pesquisa deve ser feita em toda a sua extenso. Eutrofizao: processo que favorece o crescimento de determinadas espcies (incluindo algas e infestantes) pelo aquecimento da gua em nutrientes, especialmente azoto e fsforo, resultante da contaminao de origem industrial e agrcola com efeitos negativos sobre o equilbrio dos ecossistemas (diminuio do nvel de oxignio nas guas). Em situaes extremas, pode haver perda da fauna, da flora e da qualidade da gua para consumo humano. Fotodegradvel: decomposio ou degradao de uma sustncia pela ao da luz. Foco: criadouro onde se encontra o caramujo infectado por S. mansoni, isto , local onde espcies de Biomphalaria eliminam cercrias. O exame do caramujo deve ser feito em laboratrio ou por tcnico especializado. Em reas focais, indispensvel a determinao e o mapeamento da coleo hdrica. Habitats heterogneos e instveis: ambientes poludos e habitats temporrios. Hidrxido de clcio: subproduto da utilizao do carbureto para produo de acetileno. Lntico: ambiente que se refere gua parada ou a organismo que vive em gua parada, com movimento lento ou estagnado, incluindo lagos e charcos. Ltico: ambiente relativo gua movente ou a organismo que nela habita, como um rio ou uma corrente. Malacologia: cincia que estuda os moluscos. Manejo ambiental para o controle de vetores: planejamento, organizao, implementao e monitoramento de atividades para a modificao e a manipulao de fatores ambientais ou sua interao como homem no sentido de prevenir ou minimizar a propagao de vetores e reduzir o contato entre parasitos, vetores e o ser humano. Mufla: regio compreendida entre os tentculos e a boca, na parte anterior da cabea de um planorbdeo. Oprculo: estrutura crnea ou calcria que serve para fechar total ou parcialmente a abertura da concha de um gastrpode prosobrnquio quando o animal se retrai para dentro da concha. Planorbdeo: caramujo de gua doce; molusco pulmonado da classe Gastropoda. Saneamento hdrico: visa basicamente a evitar que a gua contaminada afete a sade do homem e de animais, mediante o destino adequado das guas servidas, seja por meio de solues coletivas (esgoto condominial, rede de esgoto) ou por solues isoladas (privada com fossa seca, fossa estanque, fossa de fermentao ou privada qumica, tanque sp-
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tico e tanque Imnhoff ). De fundamental importncia no controle da esquistossomose. Quando realizado adequadamente em locais de transmisso esquistossomtica, dificulta grandemente o desenvolvimento dos planorbdeos. Vazo: volume de gua que se desloca na unidade de tempo, expresso em litros por segundo (l/s). Vegetao flutuante: o mesmo que macrfitas aquticas, ou seja, plantas aquticas de tamanho macroscpico.
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Anexos
Anexo A Relao de materiais para medio de gua e confeco de croqui

1. trena ou corda marcada de metro em metro; 2. vara de medio dividida em cm; 3. vertedouro triangular (com suporte, inclusive); 4. vertedouro retangular; 5. rgua de plstico de 40cm milimetrada; 6. faco de campo com lmina de ao de 16 com bainha; 7. enxada de ao de 3 libras com cabo; 8. marreta de 1 a 2 quilos; 9. pares de botas de borracha em numerao adequada; 10. boletim; 11. lpis; 12. caderno de 100 folhas quadriculadas; 13. aparelho de GPS.
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Anexo B Formulrio PCE 102 a, com instrues de preenchimento
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INSTRUES DE PREENCHIMENTO IDENTIFICAO DE COLEES HDRICAS PCE-102a I FINALIDADE: Cadastrar as colees hdricas existentes no municpio, o tipo e os locais onde foram realizadas capturas de moluscos. II ROTINA: O preenchimento ser efetuado em uma nica via, entregue ao responsvel pelo sistema de informao para registro e, em seguida, ao coordenador do PCE para arquivamento. III INSTRUES DE PREENCHIMENTO: CAMPO DESCRIO 1. Identifique a sigla do estado em que a atividade est sendo executada. 2. Escreva o cdigo e o nome do municpio em que a atividade est sendo executada. 3. Escreva o nmero da coleo hdrica de acordo com o reconhecimento geogrfico (RG). 4. Anote no quadro 1 se a coleo hdrica for perene ou 2 se a coleo hdrica for temporria. 5. Indique no quadro o tipo da coleo hdrica: B = brejo; L = lagos e audes; E = escavaes e poos; V = valas e valetas; R = rios, riachos e crregos; O = outros. 6. Nos campos 6 a 11, escreva o nmero, o nome e a categoria das 3 principais localidades onde a coleo hdrica se localiza, de acordo com o reconhecimento geogrfico (RG). 7. Anote o nmero da estao, de acordo com o reconhecimento geogrfico (RG), onde foi feita a captura do caramujo. 8. Anote a coordenada geogrfica (latitude e longitude). Utilize o padro WGS 84 (datun) em dcimo de graus.
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Anexo C Formulrio PCE 102, com instrues de preenchimento
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2
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INSTRUES DE PREENCHIMENTO DIRIO DE MALACOLOGIA PCE-102 I FINALIDADE
O formulrio objetiva registrar por localidade os trabalhos malacolgicos executados pelo agente de combate s endemias (ACE) e pelo laboratorista. II ROTINA: O preenchimento ser efetuado em uma nica via, entregue diariamente ao laboratrio e devolvida ao ACE, se for o caso, para as devidas providncias. Quando estiver concludo todo o trabalho da localidade, o laboratorista far a entrega dos formulrios ao supervisor, que, aps conferi-los e vis-los, os encaminhar ao responsvel pela digitao no sistema PCE. III INSTRUES DE PREENCHIMENTO: CAMPO DESCRIO 01 Este campo ser preenchido apenas pelo responsvel pelo lanamento dos dados no sistema PCE. O valor ser fornecido pelo sistema. 02 Anote a sigla do estado em que a atividade est sendo executada. 03 Escreva o nome da diretoria regional de sade. 04 Preencha inicialmente a primeira parte do campo, que se refere numerao seqencial das folhas. Quando concluir o preenchimento, conte as folhas e escreva o total encontrado na segunda parte do campo em todas as folhas, para amarrao (controle). 05 Escreva o nome do municpio. 06 Escreva o nmero e o nome da localidade conforme o reconhecimento geogrfico. 07 Escreva a categoria correspondente ao reconhecimento geogrfico. Por exemplo: cidade; bairro; vila. 08 Assinale com um X a fase a ser desenvolvida pelo Programa de Vigilncia e Controle da Esquistossomose; quando se tratar de avaliao, informe o nmero desta. 09 Assinale com um S se a localidade foi concluda ou com N caso no tenha sido concluda.
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10 Anote a data em que o formulrio foi preenchido. 11 Anote a data em que o laboratorista realizou os exames. 12 Escreva o nmero da coleo hdrica, conforme o reconhecimento geogrfico. 13 Assinale com S se a coleo hdrica estiver na condio de importncia epidemiolgica ou N se no tiver importncia epidemiolgica. 14 Assinale com um X o tipo da coleo hdrica: B = brejo; L = lagos e audes; E = escavaes e poos; V = valas e valetas; R = rios, riachos e crregos; O = outros. 15 Anote a quantidade de estaes existentes. 16 Anote a quantidade de estaes pesquisadas. 17 Anote a quantidade de estaes com caramujo. 18 Anote a quantidade de caramujos capturados. 19 Anote a quantidade de caramujos da espcie Biomphalaria glabrata. 20 Anote a quantidade de caramujos da espcie Biomphalaria tenagophila. 21 Anote a quantidade de caramujos da espcie Biomphalaria straminea. 22 Anote a quantidade de caramujos de outras espcies. 23 Anote o somatrio dos campos 19 a 22. 24 Anote a quantidade de caramujos da espcie Biomphalaria glabrata que foram positivos. 25 Anote a quantidade de caramujos da espcie Biomphalaria tenagophila que foram positivos. 26 Anote a quantidade de caramujos da espcie Biomphalaria straminea que foram positivos. 27 Anote a quantidade de caramujos de outra espcie que foram positivos. 28 Anote o somatrio dos campos 24 a 27. 29 Informe o mtodo utilizado na aplicao do moluscicida, da seguinte forma:
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1 = regador; 3 = gotejador; 5 = misto; 7 = bomba. 30 Informe a data da aplicao do moluscicida.
31 Informe a quantidade, em gramas, do moluscicida utilizado no tratamento da coleo hdrica. 32 Anote a matrcula e/ou o nome do agente de sade que realizou o trabalho de captura. 33 Anote a matrcula e/ou o nome do laboratorista que realizou os exames. 34 Visto do supervisor. 35 Convenes adotadas. 36 Convenes adotadas. 37 Anote a data em que foi realizada a pesquisa na estao. 38 Anote o nmero da coleo hdrica. 39 Anote o nmero da estao. 40 Anote o nmero de caramujos capturados na estao.
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Anexo D Formulrio PCE 103, com instrues de preenchimento
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INSTRUES DE PREENCHIMENTO POTENCIAL DE TRANSMISSO PCE-103 I FINALIDADE:
Objetiva coletar informaes a fim de determinar a classificao das colees hdricas de acordo com sua maior ou menor importncia epidemiolgica. II ROTINA: O preenchimento ser efetuado em uma nica via, que, aps a concluso do trabalho, dever ser entregue ao supervisor, que, por sua vez, aps conferi-la e vis-la, a encaminhar sede do distrito, onde as informaes sero processadas pelo Sistema de Informao do PCE. III INSTRUES DE PREENCHIMENTO: CAMPO DESCRIO 01 Escreva o nome da coordenao regional. 02 Escreva o nome do distrito. 03 Escreva o nome do municpio. 04 Escreva o nmero da localidade conforme o reconhecimento geogrfico. 05 Escreva o nome da localidade principal do ncleo. 06 Escreva a categoria correspondente ao reconhecimento geogrfico. Por exemplo: cidade; bairro; vila; povoado; fazenda; stio. 07 Escreva o nmero da coleo hdrica conforme o reconhecimento geogrfico do municpio. 08 Escreva o nmero da estao conforme o reconhecimento geogrfico do municpio. 09 Anote o nmero correspondente da atividade principal a ser levada a cabo no local.
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10 Anote o nmero correspondente, informando se existe ou no acesso ao local. 11 Anote o nmero correspondente situao do fluxo da gua. 12 Anote o nmero correspondente, informando se o caramujo est presente ou ausente. 13 Anote o nmero correspondente, informando se h presena ou ausncia de dejetos humanos. 14 Anote o nmero correspondente, informando se as pessoas que usam o local tm ou tiveram sintomas relacionados esquistossomose. 15 Anote o nmero correspondente, informando se h ou no interesse da comunidade em ajudar no trabalho de controle da esquistossomose. 16 Escreva neste campo o total que se refere ao somatrio dos campos de nmero 9 a 15: Resultado: menor ou igual a 14 = contra-indica tratamento; entre 15 a 17 = indica tratamento na presena de caramujo e contaminao; maior ou igual a 18 = indica tratamento. 17 Escreva a data em que o formulrio foi preenchido. 18 Anote o nome do ACE que realizou o trabalho. 19 Aponha ou acrescente a assinatura do ACE que realizou o trabalho.
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FLUXOGRAMA DAS ATIVIDADES DE MALACOLOGIA

MUNICPIO/AGENTE DE SADE
1. REALIZA A CAPTURA 3. ENCAMINHA O MATERIAL DEVIDAMENTE IDENTIFICADO, COM O PCE-102, AO LABORATRIO
2. REALIZA O PREENCHIMENTO DO FORMULRIO PCE-102
LABORATRIO DE MALACOLOGIA DO MUNICPIO
1. REALIZA A DISSECAO E A IDENTIFICAO
2. PREENCHE O RESULTADO NO PCE-102 3. ENCAMINHA O FORMULRIO P/ DIGITAO AO SETOR DE INFORMAO OU AO SETOR RESP. SETOR DE INFORMAO OU SETOR RESPONSVEL
Anexo E Fluxograma das atividades de malacologia
1. DIGITA O PCE-102
2. ENCAMINHA O ARQUIVO P/ O NVEL REGIONAL REGIONAL DE SADE
REGIONAL DE SADE
1. REALIZA A RECEPO DAS INFORMAES
2. ENCAMINHA RELATRIO PARA ANLISE TCNICA
3. ENCAMINHA ARQUIVO AO NVEL CENTRAL ESTADUAL NVEL CENTRAL
1. REALIZA A RECEPO DAS INFORMAES 2. REALIZA A ANLISE TCNICA 3. ENCAMINHA O ARQUIVO ESTADUAL GERNCIA NACIONAL GERNCIA NACIONAL
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GERNCIA NACIONAL
1. ANALISA AS INFORMAES DOS ESTADOS 2. CONSOLIDA AS INFORMAES
3. REALIZA A RETROALIMENTAO DAS INFORMAES PARA OS ESTADOS
ESTADOS
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Anexo F Tabela para determinao da vazo e do clculo de moluscicida a ser aplicado pelo mtodo do vertedouro triangular
Altura dgua: H (cm) 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5 7,0 7,5 8,0 8,5 9,0 9,5 10,0 10,5 11,0 11,5 12,0 12,5 13,0 13,5 14,0 14,5 15,0 15,5 16,0 16,5 Quant. de niclosamida a ser Altura usado (g): base dgua: H de 1ppm durante (cm) 6 horas 3 5 7 10 13 17 22 27 32 39 47 55 64 74 84 96 108 122 136 151 167 185 203 222 242 264 287 311 335 17,0 17,5 18,0 18,5 19,0 19,5 20,0 20,5 21,0 21,5 22,0 22,5 23,0 23,5 24,0 24,5 25,0 25,5 26,0 26,5 27,0 27,5 28,0 28,5 29,0 29,5 30,0 30,5 31,0 Quant. de niclosamida a ser usado (g): base de 1ppm durante 6 horas 361 389 417 447 447 510 542 577 614 650 689 728 769 812 855 901 946 996 1.045 1.095 1.147 1.200 1.257 1.313 1.371 1.432 1.495 1.557 1.622
Vazo: Q (l/s)
Vazo: Q (l/s)
0,14 0,22 0,32 0,45 0,60 0,78 1,00 1,24 1,51 1,82 2,16 2,54 2,96 3,41 3,90 4,44 5,01 5,63 6,29 7,00 7,75 8,55 9,39 10,30 11,20 12,20 13,30 14,40 15,50
16,7 18,0 19,3 20,7 22,1 23,6 25,1 26,7 28,4 30,1 31,9 33,7 35,6 37,6 39,6 41,7 43,8 46,1 48,4 50,7 53,1 55,6 58,2 60,8 63,5 66,3 69,2 72,1 75,1
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Anexo G Tabela das dimenses sugeridas e dos limites para vertedouros retangulares
Largura da margem do fundo do curso dgua: E (cm) Distncia da soleira do fundo do curso: D (cm) 45,5 45,5 53,0 63,0 61,0 76,0 Distncia lateral da crista do vertedor margem: C (cm) 45,5 53,0 61,0 61,0 76,0 84,0 Carga hidrulica mxima: H (cm) Limites recomendveis de vazo (litros/seg) Largura do curso dgua: B (cm) 122,0 152,0 183,0 213,5 274,5 350,0
2,0 a 85,0 5,7 a 160,0 7,0 a 225,0 9,4 a 480,0 14,2 a 650,0 21,1 a 990,0
30,5 38,0 38,0 45,5 45,5 45,5
Largura da soleira: L (cm) 30,5 45,5 61,0 91,5 122,0 183,0
91,5 99,0 106,5 122,0 122,0 137,0
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Anexo H Tabela para a determinao da vazo pelo mtodo do vertedouro retangular

H (cm) 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Litros por minuto L = 0,5m 2,5 4,7 7,2 10,0 13,1 16,5 20,0 23,8 27,7 31,9 36,2 40,7 45,3 50,0 54,8 59,8 64,9 70,0 75,3 80,6 86,1 91,6 97,3 102,9 108,7 114,5 120,4 126,3 132,3 138,3 L = 1,0m 5,1 9,4 14,5 20,3 26,6 33,4 40,7 48,5 56,6 65,3 74,3 83,6 93,2 103,1 113,4 123,9 134,8 145,8 157,1 168,7 180,6 192,6 204,9 217,3 230,0 242,9 256,0 269,3 282,6 296,3 L = 1,5m 7,6 14,2 21,8 30,5 40,0 50,4 61,4 73,2 85,5 98,7 112,3 126,5 141,2 156,3 171,9 188,1 204,7 221,5 238,9 256,7 275,0 293,5 312,5 331,7 351,4 371,3 391,6 412,2 433,0 454,2 Vazo adicional para cada 0,5m a mais de largura 2,5 4,8 7,3 10,2 14,4 17,0 20,7 24,7 28,9 33,4 38,0 42,9 53,2 58,5 64,2 69,9 75,8 81,8 88,0 94,4 100,9 100,9 107,6 114,4 121,3 128,4 135,6 144,9 150,0 158,0
continua...
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...continuao
H (cm) 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46
Litros por minuto L = 0,5m 144,4 150,6 156,8 163,0 169,2 175,5 181,7 188,1 194,5 200,3 207,2 213,6 220,1 226,5 233,0 L = 1,0m 310,0 324,1 338,2 352,5 366,2 381,4 396,0 411,0 426,6 441,0 456,3 471,7 487,2 502,8 518,4 L = 1,5m 475,6 497,6 519,7 452,0 564,5 587,4 610,3 633,9 657,4 681,2 705,4 729,7 754,3 779,0 803,9
Vazo adicional para cada 0,5m a mais de largura 165,6 173,5 181,5 189,5 197,7 206,0 214,3 222,9 231,5 240,2 249,0 258,1 267,1 276,2 285,5
A frmula de Francis permitiu a tabulao mostrada: Q = 1,83 (1- 0,2h) hA 2/3. Onde: Q + vazo em metros cbicos por segundo. L = largura do vertedouro em metros. H = carga sobre a soleira do vertedor em metros. O resultado foi multiplicado por 1.000 para ser expresso em litros/seg.
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Anexo I Relao de materiais para aplicao de moluscicida

1. medidor (tipo caneca) calibrado com capacidade de 140g; 2. frasco calibrado com capacidade para 2 litros; 3. medidor de nvel ligado escala graduada; 4. regadores de metal com capacidade para 10 litros; 5. tambor de 200 litros provido de torneira, filtro, bico e tubo de ventilao; 6. chave de grifo de 1 e polegada; 7. funil com filtro de tela metlica; 8. balde com capacidade para 10 litros.
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Anexo J Instruo Normativa n. 109, sobre o controle da fauna sinantrpica nociva e seu manejo ambiental
SERVIO PBLICO FEDERAL MINISTRIO DO MEIO AMBIENTE INSTITUTO BRASILEIRO DO MEIO AMBIENTE E DOS RECURSOS NATURAIS RENOVVEIS INSTRUO NORMATIVA N 109, DE 3 DE AGOSTO DE 2006. O PRESIDENTE DO INSTITUTO BRASILEIRO DO MEIO AMBIENTE E DOS RECURSOS NATURAIS RENOVVEIS - IBAMA, no uso das atribuies legais previstas no art. 26, inciso V, do Anexo I, da Estrutura Regimental, aprovada pelo Decreto no 5.718, de 13 de maro de 2006, e o art. 95, item VI, do Regimento Interno, aprovado pela Portaria GM/MMA n 230, de 14 de maio de 2002; Considerando o art. 3o, 2o e art. 8o, pargrafo nico da Lei no 5.197, de 03 de janeiro de 1967, e o art. 37, Inciso IV, da Lei n 9.605, de 12 de fevereiro de 1998; Considerando a necessidade de ordenar os critrios de manejo e controle da fauna sinantrpica nociva, e; Considerando as disposies contidas no Processo Ibama n. 020012.005076/2005-90, R E S O L V E: Art. 1 O controle da fauna sinantrpica nociva e de seu manejo ambiental sero regulamentados por esta Instruo Normativa. 1o Declaraes locais e temporais de nocividade de populaes de espcies da fauna devero, sempre que possvel, ser baseadas em protocolos definidos pelos Ministrios da Sade, da Agricultura ou do Meio Ambiente. 2o Com base no protocolo referido no pargrafo anterior, populaes de espcies sinantrpicas podem ser declaradas nocivas pelos rgos federal ou estaduais do meio ambiente ou, ainda, pelos rgos da Sade e Agricultura, quando assim acordado com o rgo do meio ambiente. Art. 2 Para os efeitos desta Instruo Normativa, entende-se por:
169
I-
controle da fauna: captura de espcimes animais seguida de soltura, com intervenes de marcao, esterilizao ou administrao farmacolgica; captura seguida de remoo e translocao; captura seguida de eliminao; ou eliminao direta de espcimes animais. espcies domsticas: espcies que, por meio de processos tradicionais e sistematizados de manejo ou melhoramento zootcnico, tornaram-se dependentes do homem e do ambiente domstico, apresentando caractersticas biolgicas e comportamentais em estreita relao com ele, podendo apresentar fentipo varivel, diferente da espcie silvestre que as originaram;
II -
III - fauna extica invasora: animais introduzidos a um ecossistema do qual no fazem parte originalmente, mas onde se adaptam e passam a exercer dominncia, prejudicando processos naturais e espcies nativas, alm de causar prejuzos de ordem econmica e social; IV - fauna sinantrpica: populaes animais de espcies silvestres nativas ou exticas, que utilizam recursos de reas antrpicas, de forma transitria em seu deslocamento, como via de passagem ou local de descanso; ou permanente, utilizando-as como rea de vida; Vfauna sinantrpica nociva: fauna sinantrpica que interage de forma negativa com a populao humana, causando-lhe transtornos significativos de ordem econmica ou ambiental, ou que represente riscos sade pblica;
VI - introduo: soltura intencional ou acidental de um organismo vivo, em rea distinta da distribuio geogrfica da espcie; VII - manejo ambiental para controle da fauna sinantrpica nociva: eliminao ou alterao de recursos utilizados pela fauna sinantrpica, com inteno de alterar sua estrutura e composio, e que no inclua manuseio, remoo ou eliminao direta dos espcimes; VIII -reintroduo: soltura intencional ou acidental de um organismo vivo, em rea distribuio geogrfica natural, da qual foi extirpada ou se extinguiu; IV - translocao: transferncia de indivduos de uma espcie, por movimento deliberado ou mediado, de uma rea para outra. Art. 3 Excluem-se desta Instruo Normativa atividades de controle de espcies que constem nas listas oficiais municipais, estaduais ou federal de fauna brasileira ameaada de extino ou nos Anexos I e II da Conveno sobre o Comrcio Internacional de Espcies da Fauna e da Flora Ameaadas de Extino (CITES). Art. 4 O estudo, manejo ou controle da fauna sinantrpica nociva, previstos em programas de mbito nacional desenvolvidos pelos rgos federais da Sade e da Agricultura,
170
bem como pelos rgos a eles vinculados, sero analisados e autorizados pela Diretoria de Fauna e Recursos Pesqueiros do Ibama (DIFAP/Ibama) ou pelas Superintendncias do Ibama nos estados, de acordo com a regulamentao especfica vigente. 1o Observada a legislao e as demais regulamentaes vigentes, so espcies passveis de controle por rgos de governo da Sade, da Agricultura e do Meio Ambiente, sem a necessidade de autorizao do rgo ambiental competente: a) invertebrados de interesse epidemiolgico, previstos em programas e aes de governo, tal como: insetos hematfagos, (hempteros e dpteros), caros, helmintos e moluscos de interesse epidemiolgico, artrpodes peonhentos e invertebrados classificados como pragas agrcolas pelo Ministrio da Agricultura; b) artrpodes nocivos: abelhas, cupins, formigas, pulgas, piolhos, mosquitos, moscas e demais espcies nocivas comuns ao ambiente antrpico, que impliquem transtornos sociais ambientais e econmicos significativos; c) animais domsticos em situao de abandono ou alados (e.g. Columba livia, Canis familiaris, Felis catus), roedores vetores de doenas (e.g. Rattus rattus, Rattus norvegicus e Mus musculus); d) quirpteros em reas urbanas e quirpteros hematfagos da espcie Desmodus rotundus em regies endmicas para a raiva, apenas onde e quando houver comprovao da ocorrncia do vrus da raiva na espcie e do esgotamento das alternativas de manejo ambiental para controle da fauna sinantrpica nociva; e) espcies exticas invasoras comprovadamente nocivas, mediante comunicao prvia protocolada junto ao rgo ambiental competente. 2o Para as demais espcies que no se enquadram nos critrios estabelecidos nos itens anteriores, o manejo e controle somente sero permitidos mediante aprovao e autorizao expressa do Ibama. 3o A eliminao direta de indivduos das espcies em questo deve ser efetuada somente quando tiverem sido esgotadas as medidas de manejo ambiental definidas no art. 2o. Art. 5 Pessoas fsicas ou jurdicas interessadas no manejo ambiental ou controle da fauna sinantrpica nociva, devem solicitar autorizao junto ao rgo ambiental competente nos respectivos Estados. 1o Observada a legislao e as demais regulamentaes vigentes, so espcies sinantrpicas nocivas passveis de controle por pessoas fsicas e jurdicas devidamente habilitadas para tal atividade, sem a necessidade de autorizao do rgo ambiental competente: a) artrpodes nocivos: abelhas, cupins, formigas, pulgas, piolhos, mosquitos, moscas e demais espcies nocivas comuns ao ambiente antrpico, que impliquem em transtornos sociais ambientais e econmicos significativos.
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b) Roedores urbanos vetores de doenas (Rattus rattus, Rattus norvegicus e Mus musculus). 2o Para as demais espcies que no se enquadram nos critrios estabelecidos nos itens anteriores, o manejo e controle somente sero permitidos mediante aprovao e autorizao expressa do Ibama. 3o O controle de pombos e o manejo de morcegos em reas urbanas, com base em metodologias que no impliquem na mortandade de animais, tal como os procedimentos para desalojar colnias em edificaes, podem ser autorizados pelo rgo ambiental competente, desde que comprovada habilidade para tal atividade. Art. 6 A translocao, introduo ou reintroduo de qualquer espcime animal somente ser permitida mediante aprovao e autorizao do Ibama. 1o Quando for necessrio o controle da fauna silvestre potencialmente transmissora de doenas ou zoonoses em reas de foco, uma amostra dos animais capturados deve ser coletada e enviada para anlise laboratorial, cujo diagnstico deve constar em Relatrio Anual a ser encaminhado ao Ibama. 2o Constatada incidncia de doenas transmissveis como resultado da anlise prevista no pargrafo anterior, notificaes contendo os diagnsticos das doenas devem ser enviadas aos servios de vigilncia epidemiolgica dos Ministrios da Sade, Ministrio da Agricultura, e ao Ibama, via postal ou eletrnica. Art. 7 Os venenos e outros compostos qumicos utilizados no manejo ambiental e controle de fauna devem ter registro especfico junto aos rgos competentes, em observncia regulamentao especfica vigente: Lei no 7.802, de 11 de julho de 1989; Decreto no 4.074, de 4 de janeiro de 2002. Art. 8 Fica facultada ao emergencial aos Ministrios da Sade e ao da Agricultura, no que diz respeito ao manejo ambiental e controle da fauna sinantrpica nociva, observadas a legislao e as demais regulamentaes especficas vigentes. 1o Ao Emergencial caracteriza-se pela necessidade premente de adoo de medidas de manejo ou controle de fauna, motivadas por risco de vida iminente ou situao de calamidade. 2o Cada ao emergencial deve ser comunicada previamente por meio de ofcio ao Ibama, via postal ou eletrnica, de forma que lhe seja facultado indicar um tcnico para acompanhar as atividades em campo. 3o As atividades e resultados das aes emergenciais devem ser detalhados em relatrio especfico encaminhado ao Ibama 30 dias aps sua execuo. Art. 9 Fica facultado aos rgos de segurana pblica Polcia Militar, Corpo de Bombeiros e Defesa Civil, em articulao com os anteriores, o manejo e o controle da fauna
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sinantrpica e domstica nocivas, sempre que estas representarem risco iminente para a populao. Art. 10. As pessoas fsicas e jurdicas atuando sem a devida autorizao ou utilizando mtodos em desacordo com a presente Instruo Normativa sero inclusas nas penalidades previstas na Lei n 9.605, de 12 de fevereiro de 1998 e no Decreto n 3.179, de 21 de setembro de 1999, sem prejuzos de outras penalidades civis e criminais. Art. 11. Os casos omissos sero resolvidos pela Presidncia do Ibama. Art. 12. Esta Instruo Normativa entra em vigor na data de sua publicao, revogando-se as disposies em contrrio. MARCUS LUIZ BARROSO BARROS Presidente
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Anexo K Instruo Normativa n. 73, sobre o controle do caramujo africano: Achatina fulica Bowdich, 1822
Publicado no Dirio Oficial da Unio em 22 de agosto de 2005, no 161 Seo 1
SERVIO PBLICO FEDERAL MINISTRIO DO MEIO AMBIENTE INSTITUTO BRASILEIRO DO MEIO AMBIENTE E DOS RECURSOS NATURAIS RENOVVEIS
INSTRUO NORMATIVA N 73, DE 18 DE AGOSTO DE 2005. O Presidente do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovveis Ibama, no uso das atribuies previstas no Art. 24, Anexo I, da Estrutura Regimental aprovado pelo Decreto n 4.756, de 20 de junho de 2003, e Art. 95, item VI do Regimento Interno aprovado pela Portaria GM/MMA n 230, de 14 de maio de 2002; Considerando o disposto no 2, do Art. 3 da Lei n 5.197, de 03 de janeiro de 1967 e nos incisos II e IV do Art. 37 da Lei n 9.605, de 12 de fevereiro de 1998; Considerando os compromissos estabelecidos no item h do Art. 8 da Conveno sobre Diversidade Biolgica, aprovada pelo Decreto Legislativo no 02 de 03 de fevereiro de 1994 e promulgada pelo Decreto no 2.519 de 16 de maro de 1998; Considerando que o caramujo-gigante-africano Achatina fulica no pertence fauna silvestre nativa, sendo, portanto, uma espcie extica invasora, nociva s espcies silvestres nativas, ao ambiente, agricultura e sade pblica; e Considerando os estudos tcnicos e informaes constantes do Processo Ibama n 02001.00447/2004-88, R E S O L V E: Art.1o Fica proibida, em todo o territrio brasileiro, a criao e comercializao de moluscos terrestres da espcie Achatina fulica, tambm conhecida como acatina, caracolafricano, caracol-gigante, caracol-gigante-africano, caramujo-gigante, caramujo-giganteafricano, falso-escargot ou rainha-da-frica, bem como de seus ovos.
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1o. A proibio prevista nesta Instruo Normativa tambm se aplica aos demais moluscos exticos introduzidos ou criados sem a autorizao do rgo ambiental federal competente. 2o Entenda-se por molusco extico, toda a espcie de molusco que se encontra fora de sua rea natural de ocorrncia. Art.2o Todos os exemplares de Achatina fulica atualmente em criadores, devem ser entregues ao Ibama ou rgo competente, no prazo de 60 dias a contar da data da publicao desta Instruo Normativa. Pargrafo nico. Findo o prazo estipulado, os criadores estaro sujeitos s penalidades previstas na legislao vigente. Art.3o Quem promover, acidentalmente ou deliberadamente a soltura de moluscos exticos, estar sujeito s sanes previstas no Art. 45 do Decreto n 3179/99 de 21 de setembro de 1999 sem prejuzo das demais sanes penais e civis cabveis. Art.4o Os rgos competentes federais, estaduais e municipais, bem como as organizaes no governamentais com experincia comprovada na rea, ficam autorizados a implementar medidas de controle, coleta e eliminao dos exemplares do caramujo Achatina fulica, como uma maneira de conter a atual invaso deste molusco nos ambientes urbanos, rurais e naturais. Pargrafo nico. A metodologia estabelecida para o controle e eliminao do caramujo Achatina fulica deve estar em acordo com a legislao vigente. Art. 5o Esta Instruo Normativa entra em vigor na data de sua publicao. ASSINADO NO ORIGINAL MARCUS LUIZ BARROSO BARROS Presidente
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Equipe Tcnica
Organizadores: Ronaldo Santos do Amaral (SVS/MS/Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Silvana Carvalho Thiengo (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Malacologia). Otvio Sarmento Pieri (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Biologia). Colaboradores: Captulo 1 Introduo Ronaldo Santos do Amaral (SVS/MS/Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Captulo 2 Moluscos Silvana Carvalho Thiengo (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Malacologia). Monica Ammon Fernandez (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Malacologia). Captulo 3 Aspectos ecolgicos Otvio Sarmento Pieri (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Biologia). Captulo 4 Tcnicas malacolgicas Monica Ammon Fernandez (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Malacologia). Silvana Carvalho Thiengo (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Malacologia). Ronaldo Santos do Amaral (SVS/MS/Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Captulo 5 Formas larvais de trematdeos encontradas em moluscos lmnicos Alan Lane de Melo (ICB/UFMG Departamento de Parasitologia). Captulo 6 Tcnicas moleculares Omar dos Santos Carvalho (CPqRR/Fiocruz/MS Laboratrio de Helmintoses Intestinais).
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Liana K. Jannotti Passos (CPqRR/Fiocruz/MS Laboratrio de Helmintoses Intestinais e Moluscrio Lobato Paraense). Roberta Lima Caldeira (CPqRR/Fiocruz/MS Laboratrio de Helmintoses Intestinais). Captulo 7 Vigilncia e controle dos moluscos de importncia mdica Ronaldo Santos do Amaral (SVS/MS/ Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Otvio Sarmento Pieri (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Biologia). Silvana Carvalho Thiengo (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Malacologia). Monica Ammon Fernandez (IOC/Fiocruz/MS/Departamento de Malacologia). Francisco Jos Pegado Ablio (CE/UFPa/Departamento de Metodologia da Educao). Virgnia Torres Schall (CPqRR/Fiocruz/MS/Laboratrio de Educao em Sade). Andr Jean Deberdt (Ibama/MMA/ Diretoria de Fauna e Recursos Pesqueiros). Hlio Tadashi Yamada (Funasa/MG). Jeann Marie Rocha Marcelino (SVS/MS/Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Maria Jos Rodrigues de Menezes (SVS/MS/Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Tibrio Csar de Morais Dantas (SVS/MS/Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Captulo 8 Distribuio dos moluscos hospedeiros intermedirios de Schistosoma mansoni no Brasil, Biomphalaria glabrata, B. straminea e B. tenagophila Omar dos Santos Carvalho (CPqRR/Fiocruz/MS Laboratrio de Helmintoses Intestinais). Ronaldo Guilherme Carvalho Scholte (CPqRR/Fiocruz/MS Laboratrio de Helmintoses Intestinais e Programa de Ps Graduao em Clnica Mdica/Biomedicina. Santa Casa de Misericrdia. Belo Horizonte). Ronaldo Santos do Amaral (SVS/MS/Gerncia Tcnica de Esquistossomose). Captulo 9 Legislao ambiental comentada Andr Jean Deberdt (Ibama/MMA/Diretoria de Fauna e Recursos Pesqueiros). Fbio A. Faraco (Ibama/MMA/Diretoria de Fauna e Recursos Pesqueiros). Luiz Nlio Saldanha Palheta (Ibama/MMA/Diretoria de Fauna e Recursos Pesqueiros).
177
Elaborao das imagens: Jos Eduardo Prado, Andr Favaretto Barbosa e Pablo Menezes Coelho (IOC/Fiocruz/ Departamento de Malacologia). Genilton Jos Vieira e Rodrigo da Cunha Mexas (IOC/Fiocruz/Laboratrio de Produo e Tratamento de Imagem). Equipe de elaborao da 1 edio (1995): Antonio Carlos Silveira, Euclides Neiva Filho, Jader A. Republicano, Jos Teixeira da Fraca Silva, Maria Aparecida Honrio Tolentino, Maristela dos Reis Luz Alves, Paulo Csar da Silva e Ronaldo Santos do Amaral.

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MINISTRIO DA SADE Secretaria de Vigilncia em Sade Departamento de Vigilncia Epidemiolgica

2 edio Srie A. Normas e Manuais Tcnicos

Formas Larvais de Trematdeos Encontradas em Moluscos Lmnicos 71

7 Vigilncia e Controle dos Moluscos de Importncia Mdica 85

Legislao Ambiental Comentada

Equipe Tcnica 175

Vigilncia e Controle de Moluscos de Importncia Epidemiolgica: Diretrizes Tcnicas

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2.1 Consideraes gerais

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2.3 Espcies de importncia epidemiolgica

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cnica, sem enrolamento

dentes na parede columelar da abertura

ausncia de dentes na parede columelar da abertura

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Figura 5. Vista dorsal de L. columella (observe os tentculos triangulares). Escala: 5mm.

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Alguns gneros encontrados no Brasil:

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Hospedeiras naturais Hospedeiras potenciais

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2.4 Espcies exticas de importncia mdica e econmica

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Figura 20. Criadouro de Biomphalaria glabrata

Figura 21. Criadouro de Biomphalaria straminea

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4.1 Coleta de gastrpodes lmnicos

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Figura 23. Conchas de captura de moluscos lmnicos.

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CH N. ___________CR N. ____________ Foco _____________

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4.2 Embalagem e remessa de moluscos

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Figura 24. De A a D: etapas da embalagem de moluscos lmnicos para remessa.

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4.3 Manuteno de gastrpodes lmnicos em laboratrio

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Figura 25. Aqurios com exemplares de Biomphalaria (A) e Pomacea (B).

CH N. _CR N. Foco ___