PRCTICA 4 COLORIMETRA.

LEY DE LAMBERT-BEER OBJETIVOS Adquirir los conocimientos bsicos sobre espectrofotometra de absorcin visible, incluyendo la Ley de Lambert-Beer y sus aplicaciones en Qumica. Para ello se realizar un experimento en el laboratorio que muestre cmo utilizar un espectrofotmetro para llevar a cabo la determinacin cuantitativa de un compuesto.

FUNDAMENTO TERICO Espectrofotometra ultravioleta visible. Ley de Lambert-Beer. Los mtodos espectroscpicos de anlisis estn basados en la medida de la radiacin electromagntica que es absorbida o emitida por una sustancia. En funcin de ello se clasifican fundamentalmente en: Mtodos de absorcin: Se basan en la disminucin de la potencia de un haz de radiacin electromagntica al interaccionar con una sustancia. Mtodos de emisin: Se basan en la radiacin que emite una sustancia cuando es excitada previamente por medio de otro tipo de energa (trmica, elctrica). Mtodos de fluorescencia: Se basan en la radiacin que emite la sustancia cuando es excitada previamente por un haz de radiacin electromagntica. Otras clasificaciones de los mtodos espectroscpicos se establecen en funcin de la regin del espectro electromagntico que interviene en la tcnica. As, pueden utilizarse regiones como rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas, etc. En la Figura 1 pueden verse las regiones del espectro electromagntico, en funcin de los valores de la longitud de onda () de cada radiacin:

Longitud de onda (nm)

10-3

10-1

10

103

105

107

109

1011

1013

Frecuencia (Hz)

1020

1018

1016

1014

1012

1010

108

106

104

Rayos

Ultravioleta Rayos X

Infrarrojo Microondas

Ondas de radio

Tipo de radiacin

Visible

400 nm

700 nm

Figura 1

En esta figura puede tambin observarse como la luz visible para el ojo humano constituye nicamente una pequea parte del espectro electromagntico. Dado que los primeros mtodos espectroscpicos desarrollados corresponden a la regin del visible recibieron la denominacin de mtodos pticos, la cual se utiliza todava con frecuencia. A continuacin, se ofrece una breve informacin sobre la ley de Lambert-Beer y la espectrofotometra de absorcin en la regin visible del espectro. Si se considera que se dispone de una fuente de radiacin que hace llegar a la muestra un haz de radiacin, de longitud de onda previamente seleccionada, cuya potencia es P 0 , la muestra de espesor b absorbe una parte de esa radiacin incidente, de forma que la potencia del haz disminuye despus de atravesar la muestra siendo su nueva potencia P. El cociente entre la potencia de la radiacin que sale de la muestra y la de la que incidi sobre ella, se define como transmitancia: T=P/P 0 . La transmitancia tambin puede expresarse en tanto por ciento, multiplicando el cociente anterior por 100. Es ms frecuente utilizar el concepto de absorbancia, o densidad ptica, que se define como el logaritmo de la transmitancia cambiado de signo: A = log (P 0 /P) = - log T De acuerdo con estas expresiones, si la muestra no absorbe radiacin, P y P 0 coinciden, por lo tanto A=0, y se transmite toda la radiacin T=1 (100% de transmitancia). Si, en otro caso, se transmite solo un 1% de radiacin (T=0.01), P=P 0 /100, la absorcin de radiacin que ha tenido lugar corresponde a A=2. Al incidir radiacin electromagntica visible sobre la materia puede ser totalmente absorbida o totalmente reflejada. En el primer caso el objeto aparecer de color negro y en el segundo de color blanco. Puesto que nosotros percibimos los objetos por medio de la luz reflejada, si hacemos incidir un haz de luz blanca (que contiene todas las longitudes de onda) sobre un objeto, ste absorber ciertas longitudes de onda y reflejar otras, siendo stas ltimas las responsables del color. Se dice que este color (observado) es complementario del que se percibira si la luz absorbida se pudiera detectar. Dado que en la parte experimental de esta prctica las medidas van a realizarse con espectrofotometra visible, es conveniente conocer para qu longitud de onda tiene cada color su mxima absorcin, lo que se muestra en la tabla siguiente:

Colores de la luz visible Longitud de onda de mxima absorcin(nm) 380-420 420-440 440-470 470-500 500-520 520-575 Color absorbido Violeta Azul-violeta Azul Verde-azul Verde Amarillo-verde Color observado Amarillo-verde Amarillo Anaranjado Rojo Prpura Violeta

Para medir los valores de absorbancia y transmitancia de una disolucin se utilizan espectrofotmetros UV-Vis, que, como puede verse en la Figura 2, se componen de cinco elementos principales: Una fuente de radiacin que suele ser una lmpara de filamento de wolframio Un monocromador que permite seleccionar una longitud de onda determinada originando un haz monocromtico. Un recipiente para contener la muestra denominado cubeta fabricado con un material que permite el paso de la radiacin en la regin del espectro de inters. Suelen ser de vidrio, plstico o cuarzo. El espesor de la cubeta ms habitual es 1 cm. Un detector que convierte la energa radiante en una seal elctrica. Una pantalla de visualizacin

Monocromador

Detector

Fuente de radiacin

Muestra

Pantalla

Figura 2

La absorbancia est relacionada con la concentracin de la sustancia, c, por la ley de Lambert-Beer, que se resume con la ecuacin: A = b c , donde c se expresa en mol/L, b es la longitud del camino ptico (anchura de la clula que contiene la disolucin de la sustancia) y se expresa en cm, y es la absortividad molar, propiedad caracterstica de cada sustancia correspondiente a la cantidad de radiacin que absorbe a una longitud de onda determinada por unidad de concentracin, siendo sus unidades L mol-1cm-1 (tngase en cuenta que la absorbancia no tiene unidades). Para poder aplicar la ley de Lambert-Beer es necesario seleccionar previamente una longitud de onda puesto que tanto A como varan con ella. Para ello se obtiene previamente el espectro de absorcin de la sustancia, que consiste en una representacin de los valores de absorbancia frente a la longitud de onda expresada en nanometros (nm). Del espectro de absorcin puede seleccionarse el valor de longitud de onda para el cual la absorbancia es mxima. La Figura 3 muestra dos ejemplos de espectro de absorcin.

Absorbancia

Longitud de onda

Figura 3 Si bien la ley de Lambert-Beer indica que a una representacin grfica de la absorbancia frente a la concentracin le correspondera una lnea recta, esto slo tiene lugar para disoluciones diluidas, por ello, no es conveniente utilizar la expresin matemtica directamente, sino construir en cada caso la recta de calibrado que confirme que la ecuacin de Lambert-Beer se cumple en el intervalo de concentraciones en el que se trabaja. Esta recta se construye midiendo la absorbancia de una serie de disoluciones de concentracin perfectamente conocida. En la prctica que realizaremos a continuacin se determinar la concentracin de cobre presente en una determinada muestra por espectrofotometra. Para ello se formar previamente el complejo con amoniaco, es decir, Cu(NH 3 ) 4 2+. Por otro lado, se medir la absorbancia de una serie de disoluciones cuya concentracin de Cu(NH 3 ) 4 2+ es perfectamente conocida, representndose el valor de absorbancia obtenida frente a la concentracin (recta de calibrado). Por ltimo, a partir del valor de absorbancia medido para la disolucin problema y utilizando la recta de calibrado se determinar la cantidad de cobre presente en la muestra problema. El compuesto formado Cu(NH 3 ) 4 2+ presenta color azul. Como ya se ha mencionado anteriormente para que una sustancia sea coloreada debe absorber luz visible, provocndose como consecuencia trnsitos electrnicos. En el caso del complejo amoniacal de cobre, la presencia de los ligandos (NH 3 ) alrededor del ion Cu2+ provoca que los orbitales 3d del Cu2+ se diferencien energticamente, posibilitando la absorcin de un fotn de energa adecuada que provoca un trnsito electrnico, como puede verse en la figura 4.

4s Cu2+ (Z=29) [Ar]

3d [Ar] 3d9

Figura 4

MATERIAL Y REACTIVOS Material Un vaso de precipitados de 50 mL 4 matraces aforados de 50 mL Una pipeta graduada de 5 mL Una pipeta graduada de 10 mL Reactivos Sulfato de cobre 0.1000 M Amoniaco (Dispensador 10 mL) 10 frascos de polipropileno Un frasco lavador Un espectrofotmetro Cubetas espectrofotomtricas.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL. En el manejo del espectrofotmetro han de observarse una serie de precauciones: No dejar huellas en las paredes de la cubeta espectrofotomtrica. Enjuagar cuidadosamente la cubeta espectrofotomtrica con la disolucin que va a ser medida, antes de llenarla definitivamente. Realizar las medidas empezando por la disolucin ms diluida y acabando por la ms concentrada. Construccin de la recta de calibrado 1. Coger 50 mL de una disolucin patrn 0.1000 M de sulfato de cobre. 2. A partir de la disolucin anterior y de una disolucin de amoniaco preparar varias disoluciones del complejo Cu(NH 3 ) 4 2+ de concentracin conocida. En concreto, estas disoluciones se prepararn mezclando 5.0 mL de amoniaco con 1.0, 2.5, 3.5, 5.0, 6.0, 7.5, 8.5 y 10.0 mL respectivamente de la disolucin patrn de sulfato de cobre y enrasando en un matraz aforado de 50 mL con agua destilada. Las disoluciones se guardarn en frascos de polipropileno y se etiquetarn hasta el momento de medir la absorbancia.

3. Preparar la disolucin que ser utilizada como blanco. Para ello se pondrn 5.0 mL de amoniaco en un matraz aforado de 50 mL y se enrasar con agua destilada. 4. Elegir la longitud de onda a la cual se realizar posteriormente la medida de la absorbancia. Esa longitud de onda es la correspondiente al mximo de absorcin, pues es ah donde la sensibilidad es mxima. Adems, las medidas de absorbancia en esa zona implican un menor error frente a pequeas variaciones en la longitud de onda que las realizadas en cualquier otra zona de la banda de absorcin. Para elegir la longitud de onda de medida se ha obtenido el espectro de absorbancia de una de las disoluciones preparadas anteriormente (la obtenida mezclando 5.0 mL de amoniaco y 8.5 mL de disolucin patrn de cobre) entre 550 y 650 nm. Dicho espectro se muestra a continuacin:

1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 400 500 600 700 800

Absorbancia

/ nm
5. Medir la absorbancia de cada una de las disoluciones preparadas (a la longitud de onda determinada en el apartado anterior). 6. Representar la recta de calibrado. Determinacin de la cantidad de cobre en una muestra problema. 1. Medir la absorbancia (a la longitud de onda de mxima absorcin) de una muestra problema que contiene cobre. Dicha muestra es suministrada por el profesor y ha sido preparada mezclando una cantidad desconocida de disolucin patrn de cobre con 5.0 mL de amoniaco. Esta determinacin se realizar por duplicado. RESULTADOS Y CUESTIONES 1. Comentar el espectro de absorcin del complejo amoniacal y explicar cul ha sido la longitud de onda elegida para medir la absorbancia. 2. Calcular la concentracin exacta de la disolucin patrn de CuSO 4 preparada a partir de la masa pesada. Con qu instrumento se realiz la pesada? Se enras en probeta o en matraz aforado? Por qu?

3. Completar la siguiente tabla: Disolucin V amoniaco (mL) V CuSO 4 (mL) Cu(NH 3 ) 4 2+ (M) Absorbancia medida

PATRN 1 PATRN 2 PATRN 3 PATRN 4 PATRN 5 PATRN 6 PATRN 7 PATRN 8 PATRN 9 PROBLEMA

4. Representar grficamente la absorbancia frente a la concentracin. 5. Hallar la concentracin (mol/L) de la disolucin problema a partir de la recta de calibrado. 6. Hallar la concentracin de la disolucin problema a partir de la expresin algebraica de la ley de Lambert-Beer. Para ello, es necesario obtener previamente el valor del coeficiente de absorcin molar a partir de la pendiente de la recta de calibrado.

BIBLIOGRAFA Harris, D. C. Anlisis Qumico Cuantitativo. 3 ed. Captulo 18. Ed. Revert, 2007. Higson, S. P. J. Qumica Analtica. 1 ed. Captulo 5. Ed. Mc Graw Hill. 2007. Martnez Urreaga, J.; Narros Sierra, A.; De La Fuente Garca-Soto, M.M.; Pozas Requejo, F.; Daz Lorente, V.M. Experimentacin en Qumica General. Captulo 5. Ed. Thomson Paraninfo, 2006. Hernndez-Hernndez, L.; Gonzlez-Prez, C. Introduccin al anlisis instrumental. Captulo 3. Ed. Ariel Ciencia, 2002.