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BIOSSEGURANA APLICADA A ANLISES CLNICAS

Prof. Carlos Junior

carlosjrplay@hotmail.com http://carlosjunior-bio.blogspot.com/

I - INTRODUO
As atividades a serem desenvolvidas no PROGRAMA DE BIOSSEGURANA devem permitir o aprendizado e o crescimento do estudante na sua rea profissional. Os lquidos biolgicos e os slidos, aos quais manuseamos nos laboratrios, so, quase sempre, fontes de contaminao. Os cuidados que devemos ter para no haver contaminao cruzada dos materiais, no contaminar o pessoal do laboratrio, da limpeza, os equipamentos, o meio ambiente atravs de aerossis e os cuidados com o descarte destes materiais fazem parte das Boas Prticas em Laboratrio Clnico (BPLC), seguindo as regras da Biossegurana. Para cada procedimento h uma regra j definida em Manuais, Resolues, Normas ou Instrues Normativas. Veja algumas normas bsicas para o desempenho das atividades de Analises Clinicas: 1. O local de trabalho deve ser mantido sempre em ordem; 2. Aos chefes de grupo cabe a responsabilidade de orientar seu pessoal e exigir o cumprimento das regras, sendo os mesmos, responsveis diretos por abusos e falta de capacitao profissional para utilizar os equipamentos, reagentes e infraestrutura; 3. Antes de utilizar qualquer dependncia que no seja a do laboratrio em que se encontra trabalhando, o estagirio dever pedir permisso ao responsvel direto pelo mesmo; 4. Para sua segurana, procure conhecer os perigos oferecidos pelos produtos qumicos utilizados no seu trabalho; 5. Procure inteirar-se das tcnicas que voc utiliza. Cincia no mgica. O conhecimento dos porqus pode ser muito til na soluo de problemas tcnicos; 6. Na dvida, pergunte; 7. Ao perceber que um aparelho est quebrado, comunique imediatamente ao chefe do setor para que o reparo possa ser providenciado; 8. Ao perceber algo fora do lugar, coloque-o no devido lugar. A iniciativa prpria para manter a ordem muito bem-vinda e antecipadamente agradecida; 9. Planeje bem os seus protocolos e realize os procedimentos operacionais dos mesmos. Idealmente, antes de comear um experimento, voc deve saber exatamente o que ser consumido, sobretudo no tocante ao uso de material importado; 10. Trabalho com patgenos no deve ser realizado em local movimentado. O acesso ao laboratrio deve ser restrito a pessoas que, realmente, manuseiem o material biolgico; 11. O trnsito pelos corredores com material patognico deve ser evitado ao mximo. Quando necessrio, utilize bandejas; 12. Aquele que nunca trabalhou com patgenos, antes de comear a manuselos, deve: Estar familiarizado com estas normas; Ter recebido informaes e um treinamento adequado em tcnicas e conduta geral de trabalho em laboratrio (pipetagem, necessidade de manter-se a rea de trabalho sempre limpa, etc.).

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13. Ao iniciar o trabalho com patgenos, o estagirio dever ficar sob a superviso de um pesquisador experimentado, antes de estar completamente capacitado para o trabalho em questo; 14. Sada da rea de trabalho, mesmo que temporariamente, usando luvas (mesmo que o pesquisador tenha certeza de que no esto contaminadas), mscara ou avental, estritamente proibida. No se deve tocar com as luvas em maanetas, interruptores, telefone, etc. (S se deve tocar com as luvas o material estritamente necessrio ao trabalho); 15. Seja particularmente cuidadoso para no contaminar aparelhos dentro ou fora da sala (use aparelhos extras, apenas em caso de extrema necessidade); 16. Em caso de acidente: A rea afetada deve ser lavada com gua corrente em abundncia; lcool iodado deve ser passado na rea afetada (com exceo dos olhos, que devem ser lavados exaustivamente com gua destilada); Em caso de ferida, deve ser lavada com gua corrente e comprimida de forma a sair sangue (cuidado para no aumentar as dimenses da ferida deve ser tomado); Os acidentes devem ser comunicados, imediatamente, ao responsvel pelo setor e a direo do Instituto para discusso das medidas a serem adotadas; 17. As normas de trabalho com material radioativo e com material patognico devem ser lidas com ateno antes de se comear a trabalhar com os mesmos; 18. Sigilo tambm uma das principais normas e deve ser seguido em todos os casos, o que foi realizado dentro do laboratrio fica dentro do laboratrio; 19. Recomendao final para minimizar o risco de acidentes: no trabalhe sob tenso.

II BIOSSEGURANA
Biossegurana um conjunto de procedimentos, aes, tcnicas, metodologias, equipamentos e dispositivos capazes de eliminar ou minimizar riscos inerentes as atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de servios, que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do meio ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos. Os riscos que acometem o profissional vo depender da rea que o mesmo est atuando. E estes riscos ele podem ser classificados de acordo com a Portaria do Ministrio do Trabalho, MT no. 3214, de 08/06/78, que classifica os riscos em: Riscos de Acidentes Riscos Ergonmicos Riscos Fsicos Riscos Qumicos Riscos Biolgicos

1- RISCOS DE ACIDENTES Considera-se risco de acidente qualquer fator que coloque o trabalhador em situao de perigo e possa afetar sua integridade, bem estar fsico e moral. So exemplos de risco de acidente: as mquinas e equipamentos sem proteo, probabilidade de incndio e exploso, arranjo fsico inadequado, armazenamento inadequado, etc.
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2- RISCOS ERGONMICOS Considera-se risco ergonmico qualquer fator que possa interferir nas caractersticas psicofisiolgicas do trabalhador causando desconforto ou afetando sua sade. So exemplos de risco ergonmico: o levantamento e transporte manual de peso, o ritmo excessivo de trabalho, a monotonia, a repetitividade, a responsabilidade excessiva, a postura inadequada de trabalho, o trabalho em turnos, etc. 3- RISCOS FSICOS Consideram-se agentes de risco fsico as diversas formas de energia a que possam estar expostos os trabalhadores, tais como: rudo, vibraes, presses anormais, temperaturas extremas, radiaes ionizantes, radiaes no ionizantes, ultra-som, materiais cortantes e pontiagudos, etc. 4- RISCOS QUMICOS Consideram-se agentes de risco qumico as substncias, compostas ou produtos que possam penetrar no organismo pela via respiratria, nas formas de poeiras, fumos, nvoas, neblinas, gases ou vapores, ou que, pela natureza da atividade de exposio, possam ter contato ou ser absorvido pelo organismo atravs da pele ou por ingesto. 5- RISCOS BIOLGICOS Consideram-se agentes de risco biolgico as bactrias, fungos, parasitos, vrus, entre outros. Classificao de risco biolgico: Os agentes de risco biolgico podem ser distribudos em quatro classes de 1 a 4 por ordem crescente de risco (anexo 1), classificados segundo os seguintes critrios: Patogenicidade para o homem. Virulncia. Modos de transmisso Disponibilidade de medidas profilticas eficazes. Disponibilidade de tratamento eficaz. Endemicidade. Classes de risco biolgico: Classe de Risco I - Escasso risco individual e comunitrio. O Microrganismo tem pouca probabilidade de provocar enfermidades humanas ou enfermidades de importncia veterinria. Ex: Bacillus subtilis Classe de Risco II - Risco individual moderado, risco comunitrio limitado. A exposio ao agente patognico pode provocar infeco, porm, se dispe de medidas eficazes de tratamento e preveno, sendo o risco de propagao limitado. Ex: Schistosoma mansoni Classe de Risco III - Risco individual elevado, baixo risco comunitrio. O agente patognico pode provocar enfermidades humanas graves, podendo propagar-se de uma pessoa infectada para outra, entretanto, existe profilaxia e/ou tratamento. Ex: Mycobacterium tuberculosis

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Classe de Risco IV - Elevado risco individual e comunitrio. Os agentes patognicos representam grande ameaa para as pessoas e animais, com fcil propagao de um indivduo ao outro, direta ou indiretamente, no existindo profilaxia nem tratamento. Ex: Vrus Ebola Nveis de conteno fsica para riscos biolgicos: Para manipulao dos microrganismos pertencentes a cada um das quatro classes de risco devem ser atendidos alguns requisitos de segurana, conforme o nvel de conteno necessrio. - O nvel 1 - de conteno se aplica aos laboratrios de ensino bsico, nos quais so manipulados os microrganismos pertencentes a classe de risco I. No requerida nenhuma caracterstica de desenho, alm de um bom planejamento espacial, funcional e a adoo de boas prticas laboratoriais. - O nvel 2 - de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de risco II, se aplica aos laboratrios clnicos ou hospitalares de nveis primrios de diagnstico, sendo necessrio, alm da adoo das boas prticas, o uso de barreiras fsicas primrias (cabine de segurana biolgica e equipamentos de proteo individual) e secundrias (desenho e organizao do laboratrio). - O nvel 3 - de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de risco III ou para manipulao de grandes volumes e altas concentraes de microrganismos da classe de risco II. Para este nvel de conteno so requeridos alm dos itens referidos no nvel 2, desenho e construo laboratoriais especiais. Devem ser mantidos controles rgidos quanto operao, inspeo e manuteno das instalaes e equipamentos. O pessoal tcnico deve receber treinamento especfico sobre procedimentos de segurana para a manipulao desses microrganismos. - O nvel 4 - ou conteno mxima destina-se a manipulao de microrganismos da classe de risco IV, o laboratrio com maior nvel de conteno e representa uma unidade geogrfica e funcionalmente independente de outras reas. Esses laboratrios requerem, alm dos requisitos fsicos e operacionais dos nveis de conteno 1, 2 e 3, barreiras de conteno (instalaes, desenho, equipamentos de proteo) e procedimentos especiais de segurana. MTODOS DE CONTROLE DE AGENTE DE RISCO Os elementos bsicos para conteno de agentes de risco: A. - BOAS PRTICAS DE LABORATRIO - GLP (Good Laboratory Practices) Observncia de prticas e tcnicas microbiolgicas padronizadas. Conhecimento prvio dos riscos. Treinamento de segurana apropriado. Manual de biossegurana (identificao dos riscos, especificao das prticas, procedimentos para eliminao de riscos). A.1. - RECOMENDAES GERAIS Nunca pipete com a boca, nem mesmo gua destilada. Use dispositivos de pipetagem mecnica. No coma, beba, fume, masque chiclete ou utilize cosmticos no laboratrio. Evite o hbito de levar as mos boca, nariz, olhos, rosto ou cabelo, no laboratrio.
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Lave as mos antes de iniciar o trabalho e aps a manipulao de agentes qumicos, material infeccioso, mesmo que tenha usado luvas de proteo, bem como antes de deixar o laboratrio. Objetos de uso pessoal no devem ser guardados no laboratrio. Utilize jalecos ou outro tipo de uniforme protetor, de algodo, apenas dentro do laboratrio. No utilize essa roupa fora do laboratrio. No devem ser utilizadas sandlias ou sapatos abertos no laboratrio. Utilize luvas quando manusear material infeccioso. No devem ser usados jias ou outros adornos nas mos, porque podem impedir uma boa limpeza das mesmas. Mantenha a porta do laboratrio fechada. Restrinja e controle o acesso do mesmo. No mantenha plantas, bolsas, roupas ou qualquer outro objeto no relacionado com o trabalho dentro do laboratrio. Use cabine de segurana biolgica para manusear material infeccioso ou materiais que necessitem de proteo contra contaminao. Utilize dispositivos de conteno ou minimize as atividades produtoras de aerossis, tais como operaes com grandes volumes de culturas ou solues concentradas. Essas atividades incluem: centrifugao (utilize sempre copos de segurana), misturadores tipo Vortex (use tubos com tampa), homogeneizadores (use homogeneizadores de segurana com copo metlico), sonicagem, triturao, recipientes abertos de material infeccioso, frascos contendo culturas, inoculao de animais, culturas de material infeccioso e manejo de animais. Qualquer pessoa com corte recente, com leso na pele ou com ferida aberta (mesmo uma extrao de dente), devem abster-se de trabalhar com patgenos humanos. Coloque as cabines de segurana biolgica em reas de pouco trnsito no laboratrio, minimize as atividades que provoquem turbulncia de ar dentro ou nas proximidades da cabine. As cabines de segurana biolgica no devem ser usadas em experimentos que envolvam produtos txicos ou compostos carcinognicos. Neste caso utilizam-se capelas qumicas. Descontamine todas as superfcies de trabalho diariamente e quando houver respingos ou derramamentos. Observe o processo de desinfeco especfico para escolha e utilizao do agente desinfetante adequado. Coloque todo o material com contaminao biolgica em recipientes com tampa e a prova de vazamento, antes de remov-los do laboratrio para autoclavao. Descontamine por autoclavao ou por desinfeco qumica, todo o material com contaminao biolgica, como: vidraria, caixas de animais, equipamentos de laboratrio, etc., seguindo as recomendaes para descarte desses materiais. Descontamine todo equipamento antes de qualquer servio de manuteno. Cuidados especiais devem ser tomados com agulhas e seringas. Use-as somente quando no houver mtodos alternativos. Seringas com agulhas ao serem descartadas devem ser depositadas em recipientes rgidos, a prova de vazamento e embalados como lixo patolgico.
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Vidraria quebrada e pipetas descartveis, aps descontaminao, devem ser colocadas em caixa com paredes rgidas rotuladas vidro quebrado e descartada como lixo geral. Saiba a localizao do mais prximo lava olhos, chuveiro de segurana e extintor de incndio. Saiba como us-los. Mantenha preso em local seguro todos os cilindros de gs, fora da rea do laboratrio e longe do fogo. Zele pela limpeza e manuteno de seu laboratrio, cumprindo o programa de limpeza e manuteno estabelecido para cada rea, equipamento e superfcie. Todo novo funcionrio ou estagirio deve ter treinamento e orientao especfica sobre BOAS PRTICAS LABORATORIAIS e PRINCPIOS DE BIOSSEGURANA aplicados ao trabalho que ir desenvolver. Qualquer acidente deve ser imediatamente comunicado chefia do laboratrio, registrado em formulrio especfico e encaminhado para acompanhamento junto a Comisso de Biossegurana da Instituio. Fique atento a qualquer alterao no seu quadro de sade e dos funcionrios sob sua responsabilidade, tais como: gripes, alergias, diarrias, dores de cabea, enxaquecas, tonturas, mal estar em geral, etc., e notifique imediatamente chefia do laboratrio. B. BARREIRAS As barreiras so instrumentos ou equipamentos que ns auxiliar nas medidas de biossegurana e podem ser divididas em Equipamentos de Proteo Pessoal EPI e Equipamentos de Proteo Coletiva EPC. B.1. EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL EPI So empregados para proteger o pessoal da rea de sade do contato com agentes infecciosos, txicos ou corrosivos, calor excessivo, fogo e outros perigos. A roupa e o equipamento servem tambm para evitar a contaminao do material em experimento ou em produo. So exemplos: LUVAS As luvas so usadas como barreira de proteo prevenindo contra contaminao das mos ao manipular material contaminado, reduzindo a probabilidade de que microrganismos presentes nas mos sejam transmitidos durante procedimentos. O uso de luvas no substitui a necessidade da LAVAGEM DAS MOS porque elas podem ter pequenos orifcios imperceptveis ou danificar-se durante o uso, podendo contaminar as mos quando removidas. Usar luvas de ltex SEMPRE que houver CHANCE DE CONTATO com sangue, fludos do corpo, dejetos, trabalho com microrganismos e animais de laboratrio. Usar luvas de PVC para manuseio de citostticos (mais resistentes, porm menos sensibilidade). Lavar instrumentos, roupas, superfcies de trabalho SEMPRE usando luvas.
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NO usar luvas fora da rea de trabalho, NO abrir portas, NO atender telefone. Luvas (de borracha) usadas para limpeza devem permanecer 12 horas em soluo de Hipoclorito de Sdio a 0,1% (1g/l de cloro livre = 1000 ppm). Verificar a integridade das luvas aps a desinfeco. NUNCA reutilizar as luvas, DESCART-LAS de forma segura. JALECO Os vrios tipos de jalecos so usados para fornecer uma barreira de proteo e reduzir a oportunidade de transmisso de microrganismos. Previnem a contaminao das roupas do pessoal, protegendo a pele da exposio a sangue e fluidos corpreos, salpicos e derramamentos de material infectado. So de uso constante nos laboratrios e constituem uma proteo para o profissional. Devem sempre ser de mangas longas, confeccionados em algodo ou fibra sinttica (no inflamvel). Os descartveis devem ser resistentes e impermeveis. Uso de jaleco PERMITIDO somente nas REAS DE TRABALHO. NUNCA EM REFEITRIOS, ESCRITRIOS, BIBLIOTECAS, NIBUS, ETC. Jalecos NUNCA devem ser colocados no armrio onde so guardados objetos pessoais. Devem ser descontaminados antes de serem lavados. OUTROS EQUIPAMENTOS culos de Proteo e Protetor Facial (protege contra salpicos, borrifos, gotas, impacto). Mscara (tecido, fibra sinttica descartvel, com filtro HEPA, filtros para gases, p, etc.). Avental impermevel. Uniforme de algodo, composto de cala e blusa. Luvas de borracha, amianto, couro, algodo e descartveis. Dispositivos de pipetagem (borracha peras, pipetadores automticos, etc.). B.2. - EQUIPAMENTOS DE PROTEO COLETIVA (EPC) So equipamentos que possibilitam a proteo do pessoal do laboratrio, do meio ambiente e da pesquisa desenvolvida. So exemplos: CABINES DE SEGURANA As Cabines de Segurana Biolgica constituem o principal meio de contenso e so usadas como barreiras primrias para evitar a fuga de aerossis para o ambiente. H trs tipos de cabines de segurana biolgica: Classe I Classe II A, B1, B2, B3. Classe III Procedimento correto para uso da Cabine de Segurana Biolgica. Fechar as portas do laboratrio. Evitar circulao de pessoas no laboratrio durante o uso da cabine. Ligar a cabine e a luz UV de 15 a 20 minutos antes de seu uso.
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Descontaminar a superfcie interior com gaze estril embebida em lcool etlico ou isoproplico a 70%. Lavar as mos e antebraos com gua e sabo e secar com toalha ou papel toalha descartvel. Passar lcool etlico ou isoproplico a 70% nas mos e antebraos. Usar jaleco de manga longa, luvas, mscara, gorro e pr-p quando necessrio. Colocar os equipamentos, meios, vidraria, etc. no plano de atividade da rea de trabalho. Limpar todos os objetos antes de introduzi-los na cabine. Organizar os materiais de modo que os itens limpos e contaminados no se misturem. Minimizar os movimentos dentro da cabine. Colocar os recipientes para descarte de material no fundo da rea de trabalho ou lateralmente (cmaras laterais, tambm, so usadas). Usar incinerador eltrico ou microqueimador automtico (o uso de chama do bico de Bunhsen pode acarretar danos no filtro HEPA e interromper o fluxo de ar causando turbulncia). Usar pipetador automtico. Conduzir as manipulaes no centro da rea de trabalho. Interromper as atividades dentro da cabine enquanto equipamentos como centrfugas, misturadores, ou outros equipamentos estiverem sendo operados. Limpar a cabine, ao trmino do trabalho, com gaze estril embebida com lcool etlico ou isoproplico a 70%. Descontaminar a cabine (a descontaminao poder ser feita com formalina fervente; aquecimento de paraformaldedo (10,5g/m3) ou mistura de formalina, paraformaldedo e gua com permanganato de potssio. (35 mL de formalina e 7,5 g de permanganato de potssio). Deixar a cabine ligada de 15 a 20 minutos antes de deslig-la. No introduzir na cabine objetos que causem turbulncia. No colocar na cabine materiais poluentes como madeira, papelo, papel, lpis, borracha. Evitar espirrar ou tossir na direo da zona estril (usar mscara). A cabine no um depsito, evite guardar equipamentos ou quaisquer outras coisas no seu interior, mantendo as grelhas anteriores e posteriores desobstrudas. No efetue movimentos rpidos ou gestos bruscos na rea de trabalho. Evite fontes de calor no interior da cabine, utilize microqueimadores eltricos. Emprego de chama, s quando absolutamente necessrio. Jamais introduzir a cabea na zona estril. A projeo de lquidos e slidos contra o filtro deve ser evitada. As lmpadas UV no devem ser usadas enquanto a cabine de segurana estiver sendo utilizada. Seu uso prolongado no necessrio para uma boa esterilizao e provoca deteriorao do material e da estrutura da cabine. As lmpadas UV devem ter controle de contagem de tempo de uso. Os recipientes para descarte de material devem estar sobre o cho, carrinhos ou mesas ao lado da cabine de segurana.
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Papis presos no painel de vidro ou acrlico da cabine limitar o campo de viso do usurio e diminuir a intensidade de luz podendo causar acidentes.

FLUXO LAMINAR DE AR Massa de ar dentro de uma rea confinada movendo-se com velocidade uniforme ao longo de linhas paralelas. CAPELA QUMICA NB Cabine construda de forma aerodinmica cujo fluxo de ar ambiental no causa turbulncias e correntes, assim reduzindo o perigo de inalao e contaminao do operador e ambiente. CHUVEIRO DE EMERGNCIA Chuveiro de aproximadamente 30 cm de dimetro, acionado por alavancas de mo, cotovelos ou joelhos. Deve estar localizado em local de fcil acesso. LAVA OLHOS Dispositivo formado por dois pequenos chuveiros de mdia presso, acoplados a uma bacia metlica, cujo ngulo permite direcionamento correto do jato de gua. Pode fazer parte do chuveiro de emergncia ou ser do tipo frasco de lavagem ocular. MANTA OU COBERTOR Confeccionado em l ou algodo grosso, no podendo ter fibras sintticas. Utilizado para abafar ou envolver vtima de incndio. VASO DE AREIA Tambm chamado de balde de areia, utilizado sobre derramamento de lcalis para neutraliz-lo. EXTINTOR DE INCNDIO A BASE DE GUA Utiliza o CO2 como propulsor. usado em papel, tecido e madeira. No usar em eletricidade, lquidos inflamveis, metais em ignio. EXTINTOR DE INCNDIO DE CO2 EM P Utiliza o CO2 em p como base. A fora de seu jato capaz de disseminar os materiais incendiados. usado em lquidos e gases inflamveis, fogo de origem eltrica. No usar em metais alcalinos e papel. EXTINTOR DE INCNDIO DE P SECO Usado em lquidos e gases inflamveis, metais do grupo dos lcalis, fogo de origem eltrica. EXTINTOR DE INCNDIO DE ESPUMA Usado para lquidos inflamveis. No usar para fogo causado por eletricidade.
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EXTINTOR DE INCNDIO DE BCF Utiliza o bromoclorodifluorometano. usado em lquidos inflamveis, incndio de origem eltrica. O ambiente precisa ser cuidadosamente ventilado aps seu uso. MANGUEIRA DE INCNDIO Modelo padro, comprimento e localizao so fornecidos pelo Corpo de Bombeiros. PROCEDIMENTOS LABORATRIO PARA DESCARTE DOS RESDUOS GERADOS EM

1 - RESDUOS INFECTANTES Estes resduos podem ser divididos em quatro grupos, a saber: MATERIAL PROVENIENTE DE REAS DE ISOLAMENTO Incluem-se aqui, sangue e secrees de pacientes que apresentam doenas transmissveis. MATERIAL BIOLGICO Composto por culturas ou estoques de microrganismos provenientes de laboratrios clnicos ou de pesquisa, meios de cultura, placas de Petri, instrumentos usados para manipular, misturar ou inocular microrganismos, vacinas vencidas ou inutilizadas, filtros e gases aspiradas de reas contaminadas. SANGUE HUMANO E HEMODERIVADOS Composto por bolsas de sangue com prazo de utilizao vencida, inutilizada ou com sorologia positiva, amostras de sangue para anlise, soro, plasma, e outros subprodutos. PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE As disposies inadequadas dos resduos gerados em laboratrio podero constituir focos de doenas infecto-contagiosas se, no forem observados os procedimentos para seu tratamento. Lixo contaminado deve ser embalado em sacos plsticos para o lixo tipo 1, de capacidade mxima de 100 litros, indicados pela NBR 9190 da ABNT. Os sacos devem ser totalmente fechados, de forma a no permitir o derramamento de seu contedo, mesmo se virados para baixo. Uma vez fechados, precisam ser mantidos ntegros at o processamento ou destinao final do resduo. Caso ocorram rompimentos freqentes dos sacos, devero ser verificados, a qualidade do produto ou os mtodos de transporte utilizados. No se admite abertura ou rompimento de saco contendo resduo infectante sem tratamento prvio. Havendo derramamento do contedo, cobrir o material derramado com uma soluo desinfetante (por exemplo, hipoclorito de sdio a 10.000 ppm), recolhendo-se em seguida. Proceder, depois, a lavagem do local. Usar os equipamentos de proteo necessrios. Todos os utenslios que entrarem em contato direto com o material devero passar por desinfeco posterior. Os sacos plsticos devero ser identificados com o nome do laboratrio de origem, sala, tcnica responsvel e data do descarte.
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Autoclavar a 121 C (125F), presso de 1 atmosfera (101kPa, 151 lb/in acima da presso atmosfrica) durante pelo menos 20 minutos. As lixeiras para resduos desse tipo devem ser providas de tampas. Estas lixeiras devem ser lavadas, pelo menos uma vez por semana, ou sempre que houver vazamento do saco. 2 - RESDUOS PERFUROCORTANTES Os resduos perfurocortantes constituem a principal fonte potencial de riscos, tanto de acidentes fsicos como de doenas infecciosas. So compostos por: agulhas, ampolas, pipetas, lminas de bisturi, lminas de barbear e qualquer vidraria quebrada ou que se quebre facilmente. PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE Os resduos perfurocortantes devem ser descartados em recipientes de paredes rgidas, com tampa e resistentes autoclavao. Estes recipientes devem estar localizados to prximo quanto possveis da rea de uso dos materiais. Os recipientes devem ser identificados com etiquetas autocolantes, contendo informaes sobre o laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo descarte e data do descarte. Embalar os recipientes, aps tratamento para descontaminao, em sacos adequados para descarte identificados como material perfurocortantes e descartar como lixo comum, caso no sejam incinerados. A agulha no deve ser retirada da seringa aps o uso. No caso de seringa de vidro, lev-la juntamente com a agulha para efetuar o processo de descontaminao. No quebrar, entortar ou recapear as agulhas. 3 - RESDUOS RADIOATIVOS Compostos por materiais radioativos ou contaminados com radionucldeos com baixa atividade provenientes de laboratrios de pesquisa em qumica e biologia, laboratrios de anlises clnicas e servios de Medicina Nuclear. So normalmente, slidos ou lquidos (seringas, papel absorvente, frascos, lquidos derramados, urina, fezes, etc.). Resduos radioativos, com atividade superior s recomendadas pela Comisso Nacional de Energia Nuclear (CNEN), devero ser acondicionados em depsitos de decaimento (at que suas atividades se encontrem dentro do limite permitido para sua eliminao). PROCEDIMENTOS ESPECFICOS PARA O DESCARTE No misturar rejeitos radioativos lquidos com slidos. Preveja o uso de recipientes especiais, etiquetados e apropriados natureza do produto radioativo em questo. Coletar materiais como agulhas, ponteiras de pipetas e outros objetos afiados, contaminados por radiao, em recipientes especficos, com sinalizao de radioatividade. Os containers devem ser identificados com: Istopo presente, tipo de produto qumico e concentrao, volume do contedo, laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo descarte e a data do descarte. Os rejeitos no devem ser armazenados no laboratrio, mas sim em um local previamente adaptado para isto, aguardando o recolhimento.
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Considerar como de dez meias vidas o tempo necessrio para obter um decrscimo quase total para a atividade dos materiais (fontes no seladas) empregados na rea biomdica. Pessoais responsveis pela coleta de resduos radioativos devem utilizar vestimentas protetoras e luvas descartveis. Estas sero eliminadas aps o uso, tambm, como resduo radioativo. Em caso de derramamento de lquidos radioativos, podero ser usados papis absorventes ou areia, dependendo da quantidade derramada. Isto impedir seu espalhamento. Estes devero ser eliminados juntos com outros resduos radioativos. OBSERVAES IMPORTANTES: Os Procedimentos estabelecidos para a eliminao de rejeitos radioativos foram padronizados pela Norma CNEN-NE-6.05 (CNEN, 1985). O pessoal envolvido na manipulao desses rejeitos deve receber treinamento especfico para realizao dessa atividade, alm de uma regular vigilncia mdico sanitria. 4 - RESDUOS QUMICOS Os resduos qumicos apresentam riscos potenciais de acidentes inerentes s suas propriedades especficas. Devem ser consideradas todas as etapas de seu descarte com a finalidade, de minimizar, no s acidentes decorrentes dos efeitos agressivos imediatos (corrosivos e toxicolgicos), como os riscos cujos efeitos venham a se manifestar ao mais longo prazo, tais como os teratognicos, carcinognicos e mutagnicos. So compostos por resduos orgnicos ou inorgnicos txicos, corrosivos, inflamveis, explosivos, teratognicos, etc. Para a realizao dos procedimentos adequados de descarte, importante a observncia do grau de toxicidade e do procedimento de no mistura de resduos de diferentes naturezas e composies. Com isto, evitado o risco de combinao qumica e combusto, alm de danos ao ambiente de trabalho e ao meio ambiente. Para tanto, necessrio que a coleta desses tipos de resduos seja peridica. Os resduos qumicos devem ser tratados antes de descartados. Os que no puderem ser recuperados, devem ser armazenados em recipientes prprios para posterior descarte. No armazenamento de resduos qumicos devem ser considerados a compatibilidade dos produtos envolvidos, a natureza do mesmo e o volume. PROCEDIMENTOS GERAIS DE DESCARTE Cada uma das categorias de resduos orgnicos ou inorgnicos relacionados deve ser separada, acondicionada, de acordo com procedimentos e formas especficas e adequadas a cada categoria. Na fonte produtora do rejeito e em sua embalagem devero existir os smbolos internacionais estabelecidos pela Organizao Internacional de Normalizao (ISO) e pelo Comit de Especialistas em Transporte de Produtos Perigosos, ambos da Organizao das Naes Unidas, adequados a cada caso. Alm do smbolo identificador da substncia, na embalagem contendo esses resduos deve ser afixada uma etiqueta auto-adesiva, preenchida em grafite
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contendo as seguintes informaes: Laboratrio de origem, contedo qualitativo, classificao quanto natureza e advertncias. Os rejeitos orgnicos ou inorgnicos sem possibilidade de descarte imediato devem ser armazenados em condies adequadas especficas. Os resduos orgnicos ou inorgnicos devero ser desativados com o intuito de transformar pequenas quantidades de produtos qumicos reativos em produtos derivados incuos, permitindo sua eliminao sem riscos. Este trabalho deve ser executado com cuidado, por pessoas especializadas. Os resduos que sero armazenados para posterior recolhimento e descarte/incinerao, devem ser recolhidos separadamente em recipientes coletores impermeveis a lquidos, resistentes, com tampas rosqueadas para evitar derramamentos e fechados para evitar evaporao de gases. Resduos inorgnicos txicos e suas solues aquosas Sais inorgnicos de metais txicos e suas solues aquosas devem ser previamente diludos a nveis de concentrao que permitam o descarte direto na pia em gua corrente. Concentraes mximas permitidas ao descarte direto na pia para cada metal: Cdmio - no mximo 1 mg/L Chumbo- no mximo 10 mg/L Zinco- no mximo 5 mg/L Cobre- no mximo 5 mg/L Cromo- no mximo 10 mg/L Prata- no mximo 1 mg/L Resduos inorgnicos cidos e suas solues aquosas Diluir com gua, neutralizar com bases diludas e, descartar na pia em gua corrente. Resduos inorgnicos bsicos e suas solues aquosas Diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente. Resduos inorgnicos neutros e suas solues aquosas Diluir com gua e descartar na pia em gua corrente. Resduos inorgnicos insolveis em gua: Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar, para posterior recolhimento. Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em saco plstico e descartar como lixo comum. Resduos orgnicos e suas solues aquosas txicas coletar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recolhimento. Resduos orgnicos cidos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente. Resduos orgnicos bsicos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente. Resduos orgnicos neutros e suas solues aquosas diluir com gua e descartar na pia em gua corrente. Resduos orgnicos slidos insolveis em gua: Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recolhimento.
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Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em sacos plsticos e descartar em lixo comum. Resduos de solventes orgnicos: Solventes halogenados puros ou em mistura armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recolhimento. Solventes isentos de halogenados, puros ou em mistura coletar em frascos etiquetados e de contedo similar, para posterior incinerao. Solventes isentos de toxicidade, puros ou em soluo aquosa, utilizados em grande volume coletar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recuperao. Solventes que formam perxidos e suas misturas coletar em frascos, adicionar substncias que impeam a formao de perxidos, etiquetar, para posterior incinerao. 5 - RESDUOS COMUNS Composto por todos os resduos que no se enquadram em nenhuma das categorias anteriores e que, por sua semelhana com os resduos domsticos comuns, podem ser considerados como tais. ROTINAS DE ESTERILIZAO Vidraria a ser autoclavada de rotina: A vidraria deve ser autoclavada a 120O C por 20 minutos e postas para secar em estufa. A vidraria com tampa de poliestireno no deve ser submetida temperatura acima de 50O C no forno. Os demais materiais a serem esterilizados devem ser solicitados, diretamente, ao pessoal da esterilizao, pelos prprios usurios. 1. Tubos de ensaio, frascos e pipetas: a) Contaminados ou sujos com material protico: Aps o uso imerg-los em soluo de hipoclorito de sdio a 1% em vasilhames apropriados (pipetas Pasteur e demais separadamente) por, no mnimo, 12 horas. b) Vidraria suja com material aderente (Nujol, Percoll, Adjuvantes oleosos, etc.): Lavar em gua de torneira e coloc-los em soluo de Extran a 2% prximos a pia das salas dos laboratrios por um perodo mnimo de 04 horas (Pipetas Pasteur e demais separadamente). Observao: A vidraria maior que no couber dentro dos vasilhames deve ser tratada colocando-se a soluo desinfetante ou detergente dentro da mesma. c) Vidrarias utilizadas com gua ou solues tampes sem protenas: Os frascos devero ser lavados pelo prprio usurio, em gua corrente e, em seguida, trs vezes em gua destilada, colocados para secar deixando-os emborcados sobre papel toalha no laboratrio, prximo a pia. Aps secarem, devero ser tampados com papel alumnio e guardados nos armrios. Tubos e pipetas devero ser processados como se estivessem contaminados. d) Pipetas sujas com gel: Colocar em vasilhames separados e ferver antes de juntar as demais pipetas. 2. Lminas e Lamnulas
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Colocar nos vasilhames apropriados e rotulados para as mesmas com soluo de hipoclorito a 1%. Aps o trabalho, colocar as lminas e lamnulas em vasilhames separados. Lavar as lamnulas no laboratrio e colocar em vasilhames contendo lcool, na mesa de apoio do fluxo. 3 - Cmara e Lamnula de Neubauer e Homogeneizadores de Vidro: Aps uso, colocar em vasilhame imergindo em hipoclorito a 1%. Aps 1 hora, lavar em gua corrente, secar e guardar. MATERIAL PLSTICO 1) Frasco, tubos de ensaio, seringas, ponteiras e tampas a) Contaminados: Imergir em hipoclorito de sdio a 1% no mesmo vasilhame utilizado para as vidrarias, com exceo das ponteiras, que devero ser colocadas em recipientes menores, separados. Observao: Encher as ponteiras com a soluo de hipoclorito ao desprez-las. b) No contaminados, porm sujos com material aderente (adjuvante oleoso, Nujol, Percoll,etc): Lavar em gua corrente e imergir em Extran a 2% por tempo mnimo de 04 horas em vasilhame apropriado. 2) Pipetas Descartveis a) Contaminadas: Colocar no vasilhame para pipeta de vidro. b) Sujas com material aderente: Lavar em gua corrente e colocar no vasilhame para pipeta de vidro. 3) Tampas pretas de poliestireno: Imergir em formol a 10% ou glutaraldedo a 2% por um mnimo de 24 horas ou 02 horas respectivamente. OUTROS MATERIAIS: 1) Agulhas descartveis a) Contaminadas: Aps o uso imergir no vasilhame de paredes duras contendo formol a 10%, para isso destinado, pelo menos 24 horas. Observao: DESPREZ-LAS SEM USAR O PROTETOR a fim de se evitar o risco de acidentes (puno acidental do dedo). b) Sujas com material aderente: Desprez-las com o respectivo protetor bem preso. Aps a descontaminao dever ser incinerado. 2) Material Cirrgico a) Contaminado: Imergir em soluo de glutaraldeido a 2% por 02 horas para desinfectar. Aps lavar em gua corrente e destilada, secar com gases e guardar. Se desejar esterilizar o material, submeter glutaraldeido a 2% durante 10 horas, lavar e secar com gua e gaze estreis dentro do fluxo laminar. Alternativamente. 3) Tampes de Gaze a) Molhados com cultura
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Colocar no vasilhame com hipoclorito de sdio a 1% para ser desprezado aps desinfeco. b) Secos Deixar em vasilhame reservado por, no mnimo, 48 horas e em seguida reutiliz-los. 4) Filtros Millipore Pequenos Devem ser desmontados pelo operador, colocados dentro de um frasco com hipoclorito e entregues esterilizao (at as 16 horas). 5) Culturas de parasitos no utilizados Colocar um volume duas vezes maior de hipoclorito dentro dos frascos e em seguida desprezar dentro do vasilhame para vidrarias ou plsticos. 6) Ims para agitadores magnticos Aps uso, lavar com gua corrente e destilada, secar e guardar. 7) Placas de gel de poliacrilamida Aps o uso, lavar em gua corrente, gua destilada e lcool, secar e guardar. EQUIPAMENTOS, BANCADAS E PIAS 1) Cada usurio dever limpar e arrumar as bancadas e equipamentos aps o uso. 2) No final do expediente as bancadas devero ser limpas com hipoclorito a 0,5% e, na sexta-feira, tarde, no caso, na sala de cultura, fazer a mesma limpeza com fenol semi-sinttico (Germipol 50 mL/L), utilizando mscara. 3) As pias devero ser limpas no incio do expediente, quando forem removidos os materiais a serem lavados. 4) Verificar se os refrigeradores e freezers precisam ser descongelados e limpos, semanalmente, e executar a limpeza, se necessrio. ALGUMAS NORMAS DA SALA DE ESTERILIZAO A) - LAVAGEM: 1) Retirar, os vasilhames com materiais a serem lavados, da sala, no incio do expediente. 2) Lavar o material que estava com hipoclorito de sdio, fenol ou glutaraldedo em gua corrente. 3) Mergulhar o material em Extran em vasilhames especficos para cada tipo de material, pelo perodo mnimo de 04 horas. 4) Retirar o Extran do material aps escov-los (quando necessrio), escorrendo-os , repetidas vezes, com gua de torneira seguido por gua destilada. 5) Fazer a lavagem das pipetas graduadas dentro do lavador de pipetas. 6) Secar o material em estufa. Colocar papel alumnio para cobrir a vidraria no autoclavvel e devolver ao laboratrio. B) ESTERILIZAO: 1) PIPETAS Colocar chumao de algodo, empacotar em papel pardo ou porta-pipetas e esterilizar em forno (170O C 180O C) por 01 hora.

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MICROORGANISMOS QUE APRESENTAM RISCOS EM LABORATRIO Agentes Bacterianos Agente: Bacillus anthracis Numerosos casos de carbnculo adquiridos no laboratrio que acontecem primariamente em locais onde so conduzidas pesquisas do antraz, tm sido relatados. Nenhum caso de antraz que no esteja associado a laboratrio foi relatado nos Estados Unidos desde o final dos anos 50 quando a vacina contra o carbnculo foi introduzida. Nenhum trabalho com o B. anthracis requer consideraes de segurana especiais devido ao seu uso potencial no terrorismo biolgico. Os animais naturalmente e experimentalmente infectados oferecem um risco potencial equipe do laboratrio e aos tratadores de animais. Riscos no Laboratrio: O agente pode estar presente no sangue, em exudatos de leso de pele, no lquido crebro-espinhal, no lquido pleural, no escarro e raramente na urina e fezes. O contato direto e indireto da pele intacta e rachada com culturas e superfcies laboratoriais contaminadas, inoculaes parenterais por acidente e raramente atravs de aerossis infecciosos so considerados como riscos primrios para os trabalhadores de um laboratrio. Precaues Recomendadas: As prticas, o equipamento de conteno e as dependncias do Nvel de Biossegurana 2 devero ser os procedimentos indicados para as atividades que utilizem materiais clnicos e quantidades de culturas infecciosas para diagnstico. As prticas, os equipamentos de conteno e as dependncias do Nvel de Biossegurana Animal 2 so as recomendadas para estudos que utilizem roedores de laboratrio infectados experimentalmente. J as prticas, o equipamento de conteno e as dependncias do Nvel de Biossegurana 3 so indicados para o trabalho que envolva quantidades ou concentraes de produo de culturas, e para as atividades com um alto potencial para a produo de aerossis. Observao: Uma vacina licenciada est disponvel atravs dos Centers for Disease Control and Prevention; porm, a imunizao de toda a equipe no recomendada a no ser que o freqente trabalho com amostras clnicas ou culturas para diagnstico esteja previsto (por exemplo, laboratrio de diagnstico de doena animal). Nestas dependncias, a imunizao recomendada para todas as pessoas que trabalhem com o agente, todas as pessoas que trabalhem na mesma sala do laboratrio onde as culturas so manuseadas e para as pessoas que trabalhem com animais infectados. Agente: Bordetella pertussis O Bordetella pertussis, um patgeno presente no sistema respiratrio humano e de distribuio mundial, o agente causador da coqueluche. A doena tipicamente uma doena que ocorre na infncia; entretanto, o agente tem sido cada dia mais associado com a doena em adultos. Vrios surtos em trabalhadores da rea da sade foram relatados na literatura. Adolescentes e adultos com doena atpica ou sem diagnstico podem servir como reservatrios da infeco e podem transmitir o patgeno para recm nascidos e crianas. Oito casos de infeco em adultos pelo B. pertussis foram documentados em um instituto de grandes pesquisas. Os indivduos infectados no trabalhavam diretamente com o microorganismo, mas possuam um acesso aos espaos em comum de um laboratrio onde o agente era manipulado. Um caso de transmisso secundria para
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uma pessoa da famlia foi tambm documentado. Um incidente semelhante ocorreu em uma grande universidade do Meio-Oeste dos Estados Unidos que resultou em dois casos documentados de infeco adquirida em laboratrio e um caso documentado de transmisso secundria. Outras infeces com o B. pertussis adquiridas em laboratrio foram relatadas, assim como a transmisso de adulto para adulto no local de trabalho. As infeces adquiridas em laboratrios resultantes de manipulao de amostras clnicas ou substncias isoladas no foram relatadas. A incidncia desta infeco disseminada no ar influenciada pela intimidade e freqncia da exposio de indivduos susceptveis. Riscos em Laboratrio: O agente pode estar presente em secrees respiratrias, mas no encontrado no sangue ou tecido. Uma vez que o modo de transmisso via respiratria, quanto maior a gerao de aerossis durante a manipulao de culturas ou de suspenses concentradas do agente, maior ser o risco. Precaues Recomendadas: As prticas, o equipamento de conteno e as dependncias do Nvel de Biossegurana 2 so recomendados para todas as atividades que envolvam a manipulao de materiais ou culturas conhecidamente ou potencialmente infecciosas. J o Nvel de Biossegurana Animal 2 dever ser usado para o alojamento de animais. Os dispositivos e equipamentos de conteno primria (por exemplo, cabines de segurana biolgica, conchas de segurana para centrfugas ou centrfugas de segurana especialmente projetadas) devero ser utilizados para as atividades que provavelmente iro causar a formao de aerossis potencialmente infecciosos. As prticas, os procedimentos e as dependncias do Nvel de Biossegurana 3 so indicados para produes em grande escala. Observao: As vacinas contra a coqueluche esto disponveis, mas no so atualmente recomendadas para uso em adultos. Sugerimos ao leitor consultar as recomendaes atuais do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) publicada no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR) para a vacinao de adultos contra a coqueluche. Agente: Brucella (B. abortus, B. canis, B. melitensis, B. suis). A Brucelose continua sendo a infeco bacteriana associada a laboratrio mais comumente relatada. O B. abortus, o B. canis, o B. melitensis e o B. suis tm provocado vrias doenas em trabalhadores de laboratrios. A hipersensibilidade aos antgenos da Brucella tambm prejudicial equipe do laboratrio. Casos ocasionais tm sido atribudos exposio a animais infectados experimentalmente ou naturalmente e aos seus tecidos. Riscos em Laboratrio: O agente pode estar presente no sangue, no lquido cerebroespinhal, no smen e ocasionalmente na urina. A maioria dos casos associados a laboratrio ocorreu em dependncias para pesquisas e envolveu a exposio ao agente Brucella largamente produzido. Vrios casos em laboratrios clnicos tambm foram constatados em culturas bacteriolgicas desprezadas. O contato direto da pele com culturas ou com amostras clnicas infecciosas de animais (por exemplo, sangue, secrees uterinas) est comumente envolvido nestes casos. Os aerossis formados durante os procedimentos laboratoriais tm provocado grandes surtos. Pipetagem com a boca, inoculaes parenterais acidentais e sprays lanados nos olhos, nariz e boca tambm tm provocado infeces. Precaues Recomendadas: Recomenda-se as prticas do Nvel de Biossegurana 2 para atividades que envolvam amostras clnicas de origem humana
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ou animal contendo ou potencialmente contendo Brucella spp. patognico. J as prticas, o equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 3 e do Nvel de Biossegurana Animal 3 so recomendados, respectivamente, para todas as manipulaes de culturas do Brucella spp. patognico relacionadas neste resumo e para estudos de animais experimentais. Observao: Embora as vacinas humanas contra a brucelose tenham sido desenvolvidas e testadas em outros pases com limitado sucesso, at o momento da publicao deste volume, nenhuma vacina humana encontrava-se disposio nos Estados Unidos. Agente: Burkholderia pseudomallei (Pseudomonas pseudomallei) Dois casos de melioidose associados a laboratrio foram relatados: um associado exposio massiva da pele aos aerossis; e o segundo provocado pela formao de aerossis durante uma destruio de uma cultura, que se supunha ser de Ps. Cepacia, em frasco aberto atravs das ondas sonoras de alta freqncia. Riscos em Laboratrio: Este agente pode estar presente no escarro, sangue, exsudatos de um ferimento e em vrios tecidos, dependendo do local da infeco. O contato direto com culturas e materiais infecciosos de homens, animais ou do meio ambiente, a ingesto, auto-inoculao e exposio aos aerossis e perdigotos infecciosos so considerados como riscos primrios de um laboratrio. O agente tem sido encontrado em sangue, escarro e materiais de abscesso e pode estar presente em amostras de solo e de gua de reas endmicas. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so recomendadas para todas as atividades que envolvam lquidos corporais, tecidos e culturas reconhecidamente ou potencialmente infecciosas. Deve-se usar luvas ao manusear animais infectados durante a necropsia e quando existir a possibilidade de contato direto da pele com os materiais infecciosos destes animais. A conteno primria e precaues pessoais adicionais, como quelas descritas para o Nvel de Biossegurana 3, podem ser indicadas para atividades com um alto potencial para produo de aerossis ou perdigotos, e para as atividades envolvendo quantidades ou concentraes de produo de materiais infecciosos. As vacinas no se encontram atualmente a disposio para o uso em homens. Agente: Clostridium tetani Embora o risco de infeco da equipe do laboratrio seja insignificante, cinco incidentes relacionados exposio do pessoal durante a manipulao da toxina foram relatados. Riscos em Laboratrio: A inoculao parenteral acidental e a ingesto da toxina so consideradas como risco primrio para a equipe laboratorial. Como no se tem certeza se a toxina pode ser absorvida atravs das membranas mucosas, os riscos associados aos aerossis e perdigotos ainda permanecem desconhecidos. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades envolvendo a manipulao de culturas ou toxinas. Embora o risco de ttano associado a laboratrio seja baixo, a administrao de um toxide ttano-difteria adulto em intervalos de 10 anos, reduz o risco de exposio toxina e de contaminao por ferimento do pessoal do laboratrio e dos tratadores de animais, e , portanto, altamente recomendada.
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Agente: Corynebacterium diphtheriae As infeces com o C. diphteriae associadas a laboratrio tm sido relatadas, mas as associadas a animais de laboratrio ainda no foram relatadas. Riscos em Laboratrio: O agente pode estar presente em exudatos ou secrees de nariz, garganta (amdala), faringe, laringe, ferimentos, sangue e sobre a pele. A inalao, a inoculao parenteral acidental e a ingesto so os riscos primrios em um laboratrio. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so as indicadas para todas as atividades utilizando materiais clnicos ou culturas potencialmente ou conhecidamente infectadas. J as prticas do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para estudos que utilizem animais de laboratrios infectados. Embora o risco da difteria associado a laboratrio seja baixo, a administrao de um toxide ttano-difteria adulto em intervalos de 10 anos pode posteriormente reduzir o risco de exposies toxina e a trabalhos com materiais infecciosos pela equipe do laboratrio e aos tratadores de animais. O leitor dever consultar as atuais recomendaes do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR) para a vacinao contra o C. diphteriae. Agente: Escherichia coli (organismos produtores (VTEC/SLT) de citotoxina) As cepas produtoras de citotoxina (VTEC/SLT) da Escherichia coli (tambm chamada de cepas enterohemorrgicas) so riscos comprovados para as pessoas que trabalham em laboratrios nos Estados Unidos e em outros locais. A sndrome urmica hemoltica ocorre em uma pequena proporo de pacientes (geralmente crianas) e a responsvel pela maioria das mortes associadas s infeces com esses organismos. Os animais domsticos de fazendas (em particular os bovinos) so reservatrios significativos do organismo. Porm, os pequenos animais experimentalmente infectados tambm so fontes de infeces no laboratrio. Riscos em Laboratrio: A E. coli enterohemorrgica geralmente isolada nas fezes. Uma grande variedade de alimentos contaminados com esses agentes pode servir como veculo de transmisso e incluem a carne moda crua e produtos de laticnio no pasteurizados. Ela raramente encontrada no sangue de homens e animais infectados. A ingesto o risco laboratorial primrio. A importncia da exposio aos aerossis ainda no conhecida. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do nvel de Biossegurana 2 so as indicadas para todas as atividades utilizando materiais clnicos ou culturas conhecidamente ou potencialmente infecciosos. J as prticas do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para as atividades com animais naturalmente ou experimentalmente infectados. Atualmente, as vacinas para uso em homens no se encontram a disposio. Agente: Heliobacter pylori Desde a sua descoberta em 1982, a Heliobacter Pylori tem recebido uma grande ateno como um agente causador da gastrite. O habitat principal do H. pylori a membrana mucosa gstrica humana. A infeco com este agente pode ser longa quanto durao, com poucos ou nenhum sintoma, ou pode-se apresentar como uma doena gstrica aguda. Tanto as infeces humanas associadas a laboratrios experimentais ou as acidentais foram relatadas. O agente pode estar
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presente nas secrees gstricas ou orais e nas fezes. A transmisso, embora no seja completamente clara, acredita-se ser atravs da via oral-fecal ou oral-oral. Riscos em Laboratrio: Este agente pode ser encontrado nas secrees gstricas e orais ou nas fezes. A ingesto o principal risco dentro de um laboratrio. A importncia da exposio aos aerossis desconhecida. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para as atividades com materiais clnicos e culturas conhecidamente ou potencialmente infectados por este agente. J as prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para atividades com animais naturalmente ou experimentalmente infectados. Atualmente, as vacinas no se encontram a disposio para o uso em homens. Agente: Leptospira interrogans todos os sorotipos A leptospirose um risco laboratorial muito bem documentado. Pike relatou 67 infeces associadas a laboratrio e 10 mortes, e ainda trs casos foram relatados em outros locais. Um coelho infectado experimentalmente foi identificado como uma fonte de contaminao do L. interrogans sorotipo icterohemorrhagiae. O contato direto e indireto com lquidos e tecidos de mamferos naturalmente ou experimentalmente infectados durante o manuseio, o cuidado, ou a necropsia uma fonte potencial de infeco. Em animais com infeces renais crnicas, o agente encontrado na urina em numerosas quantidades por longos perodos. Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado na urina, sangue e tecidos de animais e homens infectados. A ingesto, a inoculao parenteral acidental e o contato direto ou indireto da pele ou da membrana mucosa com culturas, tecidos ou lquidos corporais infectados especialmente a urina so considerados riscos laboratoriais primrios. Ainda no se conhece a importncia da exposio aos aerossis. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades que envolvam o uso ou a manipulao de tecidos, lquidos corporais e culturas conhecidamente ou potencialmente infecciosas e para o alojamento de animais infectados. Recomenda-se o uso de luvas para o manuseio e a necropsia de animais infectados e quando houver uma possibilidade de contato direto da pele com os materiais infectados. Atualmente, as vacinas contra este agente no se encontram a disposio para uso em homens. Agente: Mycobacterium leprae A transmisso parenteral acidental da lepra de homens para homens tem sido relatada aps a contaminao de um cirurgio atravs de uma picada acidental de uma agulha, e atravs do uso de uma agulha para tatuagem provavelmente contaminada. No existem casos relatados que tenham sido provocados pelo trabalho em um laboratrio envolvendo bipsias ou outros materiais clnicos de origem humana e animal. Embora a lepra que ocorre naturalmente ou as doenas semelhantes lepra tenham sido relatadas em tatus e em primatas no humanos, o ser humano o nico reservatrio importante desta doena. Riscos em Laboratrio: O agente infeccioso pode ser encontrado em tecidos e exudatos de leses de homens infectados e em animais naturalmente ou experimentalmente infectados. O contato direto da pele e das membranas mucosas
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com materiais e inoculaes parenterais acidentais infecciosas considerado risco primrio de um laboratrio, associado com o manuseio de materiais clnicos infecciosos. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades com materiais clnicos sabidamente ou potencialmente infecciosos de homens e animais infectados. Um cuidado especial deve ser tomado para evitar uma inoculao parenteral acidental com instrumentos cortantes contaminados. As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para estudos animais que utilizem roedores, tatus e primatas no humanos. Atualmente, as vacinas para uso em humanos no se encontram a disposio. Agente: Mycobacterium spp. diferente do M. tuberculosis, M. bovis ou M. leprae. Pike relatou 40 casos de tuberculose no-pulmonar que se acreditava estar relacionada a acidentes ou incidentes ocorridos no laboratrio ou na sala de autpsia66. Provavelmente, essas infeces eram provocadas por um outro tipo de micobactria que no a M. tuberculosis ou a M. bovis. Um nmero de micobactrias que so ubquas na natureza associado com outras doenas que no a tuberculose ou a lepra em homens, animais domsticos e selvagens. Em relao s caractersticas, esses organismos so infecciosos, mas no so contagiosos. J clinicamente, as doenas associadas com as infeces por essas atpicas bactrias podem ser divididas, em geral, em trs categorias: 1. Doenas semelhantes tuberculose, que podem estar associadas com a infeco pelo complexo M. kansasii, M. avium e raramente pelos M. xenopi, M. malmoense, M. asiaticum, M. simiae e M. szulgai. 2. Limfadenitis, que podem estar associadas com a infeco pelo complexo M. scrofulaceum, M. avium e raramente pelo M. fortuitum e M. kansasii. 3. lceras de pele e infeces de ferimentos do tecido mole, que podem estar associadas com infeco pelo M. ulcerans, M. marinum, M. fortuitum e M. chelonei. Riscos em Laboratrio: Os agentes podem ser encontrados no escarro, exudatos de leses, tecidos e em amostras do meio ambiente (por exemplo, solo e gua). O contato direto da pele ou da membrana mucosa com materiais infecciosos, ingesto e inoculao parenteral acidental o risco primrio laboratorial associado aos materiais clnicos e s culturas. Um risco de infeco potencial aos trabalhadores de laboratrio tambm oferecido pelos aerossis infecciosos criados durante a manipulao do caldo de culturas ou homogeneizao de tecidos contendo esses organismos associados com a doena pulmonar. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades com materiais clnicos e culturas de Mycobacterium spp. com exceo dos tipos M. tuberculosis ou M. bovis. As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para estudos animais com a micobactria que no a M. tuberculosis, M. bovis ou M. leprae. Atualmente, as vacinas para uso humano ainda no se encontram disponveis.

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Agente: Mycobacterium tuberculosis e M. bovis. As infeces com a Mycobacterium tuberculosis e a M. bovis (incluindo a BCG) so um risco comprovado aos trabalhadores de laboratrio assim como para outras pessoas que podem estar expostas aos aerossis infecciosos no laboratrio. A incidncia da tuberculose em pessoas que trabalham com a M. tuberculosis em laboratrio tem sido relatada como sendo trs vezes maior do que em pessoas que no trabalham com o agente. Primatas no-humanos infectados naturalmente ou experimentalmente so uma fonte comprovada de infeco humana (por exemplo, o ndice de converso anual de tuberculina em pessoas que trabalham com primatas no-humanos infectados de aproximadamente 70/10.000 se comparada ao ndice de menos de 3/10.000 da populao em geral). Cobaias ou camundongos experimentalmente infectados no oferecem o mesmo risco, uma vez que ncleos em perdigotos no so produzidos pela tosse nestas espcies; porm, o dejeto de animais infectados pode se tornar contaminado e servir como uma fonte de aerossis infecciosos. Riscos em Laboratrio: Os bacilos da tuberculose podem ser encontrados no escarro, lquidos de lavagem gstrica, lquido cerebroespinhal, urina e nas leses em vrios tecidos. A exposio aos aerossis produzidos em laboratrio o risco mais importante encontrado. Os bacilos da tuberculose podem sobreviver em esfregaos fixados com o calor e podem ser nebulizados na preparao de seces congeladas e durante a manipulao de culturas lquidas. Devido baixa dose infecciosa do M.tuberculosis para homens (i.e., DI50 < 10 bacilos) e, em alguns laboratrios, um alto ndice de isolamento de organismos resistentes ao cido originado de amostras clnicas (>10%), o escarro e outras amostras clnicas de casos de tuberculose suspeitos ou j comprovados deve ser considerados potencialmente infecciosos e manipulados com os adequados cuidados. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do nvel de Biossegurana 2 so indicadas para as manipulaes de materiais clnicos que no produzam aerossis como a preparao de esfregaos cido-resistentes. Todas as atividades que formem aerossis devero ser conduzidas em cabines de segurana biolgicas Classe I ou II. Recomenda-se o uso de uma bandeja para aquecer a lmina ao invs de sec-la em um Bico de Bunsen. A liquidificao ou a concentrao do escarro para a colorao cido-resistente pode tambm ser conduzida de forma segura em uma bancada aberta, tratando, primeiramente, a amostra (em uma cabine de segurana Classe I ou II) com um igual volume de soluo de hipoclorito de sdio a 5% (branqueamento domstico no diludo) e depois esperando 15 minutos antes da centrifugao. As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 3 so indicadas para atividades laboratoriais na propagao e manipulao de culturas de M. tuberculosis ou M. bovis, e para estudos animais que utilizem primatas no-humanos naturalmente ou experimentalmente infectados com a M.tuberculosis ou a M. bovis. Estudos animais utilizando cobaias ou camundongos podem ser conduzidos em um Nvel de Biossegurana Animal 2. Observao: O teste cutneo com uma protena purificada derivada (PPD) de pessoas que trabalham em laboratrios e que apresentem um teste cutneo negativo podem ser usados como um procedimento de vigilncia. Uma vacina de vrus vivo atenuado (BCG) encontra-se a disposio, mas no usada nos Estados Unidos para equipes de laboratrio. O leitor deve consultar as recomendaes atuais do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP)
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publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR) para as recomendaes atuais para vacinao. Agente: Neisseria meningitis A meningite meningoccica um risco demonstrado, mas raro de ocorrer com trabalhadores de laboratrio. Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado em exudatos faringneos, lquido cerebroespinhal, sangue e saliva. A inoculao parenteral, a exposio da membrana mucosa a perdigotos e a ingesto so os riscos primrios para a equipe do laboratrio. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades que utilizem lquidos corpreos, tecidos e culturas conhecidamente ou potencialmente infecciosas. Precaues pessoais e de conteno primria adicional, como as descritas para o Nvel de Biossegurana 3, podem ser indicadas para atividades com um alto risco potencial para formao de perdigotos ou aerossis, e para as atividades que envolvam quantidades de produo ou concentraes de materiais infecciosos. Observao: As vacinas para a N. meningitidis esto disponveis e devem ser consideradas para as pessoas que trabalham regularmente com materiais infecciosos. O leitor deve consultar as atuais recomendaes do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR) para as recomendaes sobre vacinao contra a N. meningitidis. Agente: Salmonella todos os sorotipos com exceo do typhi A salmonelose um risco documentado para as pessoas que trabalham em uns laboratrio. Os hospedeiros - reservatrios primrios incluem um amplo espectro de animais domsticos e selvagens incluindo os pssaros, mamferos e rpteis, sendo que todos podem servir como uma fonte de infeco para a equipe laboratorial. Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado nas fezes, sangue, urina e em alimentos, raes e materiais provenientes do meio ambiente. A ingesto ou a inoculao parenteral um perigo primrio para um laboratrio. A importncia da exposio aos aerossis ainda desconhecida. Animais naturalmente ou experimentalmente infectados so uma fonte potencial de infeco para funcionrios do laboratrio e para os que tratam dos animais, alm de serem perigosos para outros animais tambm. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para as atividades com materiais clnicos e culturas conhecidas por possurem ou potencialmente conterem os agentes. As prticas, equipamento de conteno e instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so recomendadas para atividades com animais naturalmente ou experimentalmente infectados. As vacinas ainda no se encontram a disposio da populao.

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Agente: Salmonella typhi A febre tifide um risco comprovado para pessoas que trabalham em laboratrio. Riscos em Laboratrio: Esse agente pode ser encontrado nas fezes, sangue, vescula biliar (bile) e urina. O ser humano o nico reservatrio conhecido da infeco. A ingesto e a inoculao parenteral do agente representam o risco primrio em laboratrio. No se conhece ainda a importncia da exposio aos aerossis. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades que utilizem materiais clnicos e culturas sabidamente ou potencialmente infecciosas. As prticas do Nvel de Biossegurana 3 so indicadas para atividades que possivelmente provoquem a formao de aerossis ou de atividades que envolvam quantidades de produo de microorganismos. As vacinas para a S. typhi esto disponveis no mercado e devem ser consideradas para as pessoas que trabalhem regularmente com materiais potencialmente infecciosos. O leitor deve consultar as recomendaes atuais do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) publicadas pelo CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR) para as recomendaes sobre a vacinao contra a S. typhi. Agente: Treponema pallidum A sfilis um risco comprovado para as pessoas de um laboratrio que manipulam ou coletam materiais clnicos de leses cutneas. Pike relacionou 20 casos desta infeco associada a laboratrio. O ser humano o nico reservatrio conhecido deste agente. Um exemplo o caso onde o agente foi transmitido a um indivduo da equipe de um laboratrio que trabalhava com uma suspenso concentrada do T. pallidum obtido de um coelho com orquite experimental. A transferncia hematognica da sfilis tem ocorrido atravs da transfuso de uma unidade de sangue fresco obtida de um paciente com sfilis secundria. O T. pallidum se encontra presente na circulao durante a sfilis primria e secundria. O nmero mnimo de organismos do T. pallidum (DL50) necessrios para infectar um indivduo atravs de uma injeo subcutnea de 23. A concentrao do T. pallidum no sangue de pacientes durante o incio da sfilis, porm, ainda no foi determinada. Nenhum caso de infeco associado a laboratrios animais foi relatado at o momento; porm cepas do T. pallidum (Nichols e possivelmente outras) adaptadas a coelhos conservaram suas virulncias em homens. Riscos em Laboratrio: Esse agente pode ser encontrado em materiais coletados de leses cutneas, de membranas mucosas primrias e secundrias e no sangue. A inoculao parenteral acidental, o contato das membranas mucosas e de pele lesada com os materiais infecciosos e possivelmente com aerossis infecciosos so os riscos primrios para as pessoas que trabalham em laboratrio. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades que envolvam o uso ou a manipulao de sangue ou material de leses de homens ou de coelhos infectados. Recomenda-se o uso de luvas quando houver a possibilidade do contato direto da pele com os materiais da leso. O monitoramento sorolgico peridico deve ser considerado para pessoas que trabalham com materiais infecciosos. As vacinas, atualmente, no se encontram disponveis para o uso em humanos.
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Agente: Vibrionic enteritis (Vibrio cholerae, V.parahaemolyticus). A enterite vibrinica causada pelo Vibrio cholerae ou pelo Vibrio parahaemolyticus uma doena associada a laboratrio documentada, mas rara. Os animais naturalmente ou experimentalmente infectados so uma fonte potencial de infeco. Riscos em Laboratrio: Os vibries patognicos podem ser encontrados nas fezes. A ingesto do V. cholerae e a ingesto ou inoculao parenteral de outros vibries constituem os riscos primrios laboratoriais. A dose infecciosa oral humana de aproximadamente 106 organismos. A importncia da exposio aos aerossis ainda desconhecida. O risco de infeco aps uma exposio oral pode ser aumentado em indivduos aclordricos. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades com culturas ou materiais clnicos potencialmente infecciosos. J as prticas, equipamento de conteno e as instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicados para atividades com animais naturalmente ou experimentalmente infectados. Embora existam vacinas contra a clera, no se recomenda o uso rotineiro pela equipe laboratorial. O leitor deve consultar as atuais recomendaes do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR) sobre as recomendaes para a vacinao humana contra V. parahaemolyticus. Agentes Fngicos Agente: Blastomyces dermatitidis Infeces locais associadas a laboratrio tm sido relatadas aps a inoculao parenteral acidental com tecidos ou culturas infectadas contendo formas da B. dermatitidis semelhantes levedura. Infeces pulmonares ocorreram depois de uma suposta inalao de condios; duas pessoas desenvolveram pneumonia e uma apresentou uma leso osteoltica de onde se retirou amostra da. B. dermatitis para cultura. Provavelmente, as infeces pulmonares esto associadas somente s formas semelhantes levedura formadoras de esporos (condio). Riscos em Laboratrio: Formas semelhantes a leveduras podem ser encontradas nos tecidos de animais infectados e em amostras clnicas. A inoculao parenteral (subcutnea) destes materiais pode provocar granulomas locais. As culturas das formas fngicas da B. dermatitidis contendo condios infecciosos, solo processado ou outras amostras ambientais podem oferecer um risco quanto exposio aos aerossis. Precaues Recomendadas: As prticas e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 e Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para as atividades com materiais clnicos, tecidos animais, culturas, amostras ambientais e animais infectados.

Agente: Coccidioides immitis


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A coccidioidomicose adquirida em laboratrio um risco documentado. Smith relatou que de 31 infeces adquiridas em laboratrios da sua instituio, 28 (90%) resultaram em uma doena clnica, onde mais da metade destas infeces adquiridas na natureza eram assintomticas. Riscos em Laboratrio: Devido ao tamanho (2-5 milimicrons), os artrocondios tendem a ser prontamente espalhados no ar e retidos nos profundos espaos pulmonares. Quanto maior o tamanho da esfrula (30-60 milimcrons) mais reduzida ser a eficcia desta forma de fungo como um patgeno areo. As esfrulas dos fungos podem estar presentes em amostras clnicas e tecidos animais. J os artrocondios infecciosos so encontrados em culturas e solo mofados ou em outras amostras de locais naturais. A inalao do artrocondio contido nas amostras ambientais ou nas culturas da forma fngica um perigo srio dentro de um laboratrio. Um risco terico dentro de um laboratrio imposto por amostras clnicas ou tecido de animais ou homens infectados que foram armazenados ou embalados de forma a produzir a germinao de artrocondios. H um nico relatrio sobre um veterinrio com uma coccidiodomicose que se iniciou 13 dias depois da autpsia de um cavalo com esta infeco, embora o veterinrio morasse em uma rea endmica. A inoculao percutnea acidental da esfrula pode resultar na formao de um granuloma local. A doena disseminada ocorre com uma freqncia muito maior em negros e em filipinos do que em brancos. Precaues Recomendadas: As prticas e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para o manuseio e processamento de amostras clnicas, identificao isolada e processamento dos tecidos animais. J as prticas e as instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para estudos de experimentao animal quando a via de transmisso do agente a via parenteral. As prticas e as instalaes do Nvel de Biossegurana 3 so indicadas para a reproduo e manipulao de culturas que formam esporos j identificados como C. immitis, e para o processamento de solo ou outros materiais do meio ambiente que contenham ou possivelmente contenham artrocondios infecciosos. Agente: Cryptococcus neoformans A inoculao acidental de uma pesada quantidade de Cryptococcus neoformans nas mos de um trabalhador de laboratrio ocorreu durante a injeo ou a necropsia de animais de laboratrios. Mas no houve a formao de um granuloma local e nem uma leso, sugerindo uma baixa patogenicidade por esta via. As infeces respiratrias como conseqncia de exposio laboratorial ainda no foram registradas. Riscos em Laboratrio: A inoculao parenteral acidental de culturas ou de outros materiais infecciosos representa um risco potencial para a equipe laboratorial, particularmente queles que possam estar imunodeprimidos. Mordidas de camundongos experimentalmente infectados e as manipulaes de materiais do meio ambiente infeccioso (por exemplo, excrementos de pombos) tambm representam um risco primrio ao pessoal do laboratrio. Precaues Recomendadas: As prticas e as instalaes do Nvel de Biossegurana 2 e do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas, respectivamente, para atividades com materiais clnicos, ambientais ou de culturas sabidamente ou potencialmente infecciosas e ainda com animais infectados experimentalmente. O processamento do solo ou de outros materiais do meio ambiente que contenha ou que potencialmente contenha clulas infecciosas semelhantes
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levedura dever ser conduzida em cabines de segurana biolgicas Classe I ou II. Esta precauo tambm indicada para a cultura do estado perfeito ou sexual do agente. Agente: Histoplasma capsulatum A histoplasmose associada a laboratrio um risco comprovado em instalaes onde so conduzidos trabalhos de investigao ou de diagnsticos. As infeces pulmonares so resultantes de culturas que formam fungos. J uma perfurao na pele durante uma autpsia de um indivduo infectado e uma inoculao parenteral acidental de uma cultura vivel provoca uma infeco local. A coleta e processamento de amostras de solo retiradas de reas endmicas tm provocado infeces pulmonares em trabalhadores de laboratrio. Os esporos encapsulados so resistentes a secagem e podem permanecer viveis durante longos perodos de tempo. O pequeno tamanho do condio infeccioso (menos que 5 mcrons) possibilita sua disperso no ar e a reteno intrapulmonar. Furcolow relatou que em camundongos 10 esporos foram quase que to infecciosos quanto uma dose letal de 10.000 a 100.000 esporos. Riscos em Laboratrio: O estgio infeccioso deste fungo dimrfico (condio) est presente nas culturas de formas esporuladas e no solo de reas endmicas. A forma de levedura em tecidos ou lquidos de animais infectados pode produzir uma infeco local aps uma inoculao parenteral. As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 e Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para o manuseio e processamento de materiais clnicos, identificao de substncias isoladas, tecidos animais e culturas fngicas, identificao de culturas na rotina de laboratrios de diagnsticos e para estudos animais experimentais quando a via do agente for parenteral. As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 3 so indicadas para a reproduo e manipulao de culturas j identificadas como de H. capsulatum, e para o processamento de solo ou de outros materiais ambientais conhecidos por conter ou possivelmente conter condio infeccioso. Agente: Sporothrix schenckii O S. schenckii tem causado um nmero expressivo de infeces locais na pele e nos olhos de pessoas que trabalham em laboratrios. A maioria dos casos est associada a acidentes que ocorrem com borrifos do material de uma cultura dentro do olho, arranho ou mordida de um animal infectado ou ao injetar material infectado na pele. As infeces dermatolgicas so causadas tambm pelo manuseio de culturas ou necropsias de animais sem que ocorra um conhecido erro tcnico na hora do procedimento. No houve nenhum caso de infeco pulmonar resultante da exposio laboratorial, embora se supe que a doena pulmonar tenha ocorrido naturalmente como resultado de uma inalao. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 e do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para todas as atividades em laboratrios e em atividades com experimentao animal com S. schenckii. Recomenda-se o uso de luvas ao manusear animais experimentalmente infectados e durante operaes com culturas lquidas (caldos) que possam resultar em uma contaminao da mo. Agente: Membros patognicos dos Gneros Epidermophyton, Microsporum e Trychophyton.
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Embora as infeces de pele, cabelo e unhas provocadas por estes fungos dermatofdites estejam entre as infeces humanas mais freqentes, o processamento do material clnico ainda no foi associado s infeces laboratoriais. As infeces relatadas foram adquiridas atravs de contatos com animais de laboratrios naturalmente ou experimentalmente infectados (camundongo, cobaias, etc.) e ocasionalmente com o manuseio de culturas. Perigos em Laboratrio: Os agentes podem ser encontrados na pele, cabelo e unhas de hospedeiros humanos e animais. O contato com animais de laboratrios infectados que apresentem infeces aparentes ou no aparentes considerado como risco primrio para a equipe do laboratrio. As culturas e materiais clnicos no so uma fonte importante de infeco humana. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 e do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para todas as atividades em laboratrios e em atividades com experimentao animal com os dermatofitdes. Os animais infectados experimentalmente devem ser manipulados com luvas descartveis. Agente: Fungos diversos Vrios fungos tm provocado srias infeces em hospedeiros imunocompetentes aps uma provvel inalao ou inoculao parenteral acidental de fontes do meio ambiente. Esses agentes so os Penicillium marneffei, Exophiala (Wangiella) dermatitidis, Fonsecaea pedrosoi, Ochroconis gallopavum, Clauduphialopora bantians e Ramichlorisium mackenzieim. Embora nenhuma infeco causada por grande parte destes agentes associados a laboratrios tenha sido registrada, a gravidade desta patologia adquirida naturalmente suficiente para adotarmos cuidados especiais no laboratrio. O Penicillium marneffei causou uma infeco local por inoculao acidental em um laboratorista. J o Stachybotrus atra provavelmente no o agente causador da infeco em seres humanos quando o fungo ou fomitos contidos no mofo so inalados, embora a ingesto de gros mofados que possuam o fungo tenha envenenado animais. Riscos em Laboratrio: A inalao de condios em culturas de fungos com esporos ou a injeo acidental na pele durante um procedimento de infeco de animais de experimentao so riscos tericos aos trabalhadores de um laboratrio. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para a reproduo e manipulao de culturas conhecidas por conterem esses agentes. Agentes Parasitrios Agente: Protozorios Parasitas de Tecido e Sangue Humanos Infeces com o Plasmodium spp. (incluindo o P. cynomolgi), o Trypanosoma spp e a Leishmania spp. adquiridas em laboratrio foram relatadas. Embora nenhuma infeco laboratorial com a Babesia spp. tenha sido relatada, um indivduo pode adquirir uma infeco atravs de uma picada acidental com agulha ou atravs de uma picada de um carrapato infectado. Embora infeces associadas a animais de laboratrio no sejam comuns, a malria transmitida pelo mosquito realmente ocorre. Outras fontes diretas potenciais de infeco para a equipe de um laboratrio incluem o contato com um material extrado de uma leso de roedores que apresentam uma leishmaniose
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cutnea e o contato com fezes ou sangue de animais experimentalmente ou naturalmente infectados com T. cruzi. Riscos em Laboratrio: Os estgios contagiosos destes agentes podem estar presentes no sangue, fezes, fludo cerebroespinhal, medula ssea ou em outros tecidos de bipsia, exudatos de leso e artrpodes infectados. Dependendo do parasita, os riscos primrios laboratoriais incluem a ingesto, penetrao na pele atravs de ferimentos ou microabrases, inoculao parenteral acidental e transmisso atravs de vetores artrpodes. A exposio aos aerossis ou perdigotos de organismos nas membranas mucosas dos olhos, nariz ou boca considerada como um risco potencial quando o trabalho com culturas de Leishmania spp., T. cruzi ou com homogeneizao de culturas ou de sangue contendo hemoflagelados realizado. Os indivduos imunocomprometidos devem evitar qualquer trabalho com esses agentes vivos. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades com estgios infecciosos dos parasitas acima relacionados. Os artrpodes infectados devem ser mantidos em dependncias que impeam a exposio do pessoal do laboratrio ou a sada do artrpode para fora do local. A conteno primria (por exemplo, cabine de segurana biolgica) ou proteo pessoal (por exemplo, proteo facial) pode ser indicada quando o trabalho com culturas de Leishmania spp., de T. cruzi, ou a homogeneizao de tecidos ou de sangue contendo hemoflagelados forem realizados. Recomenda-se o uso de luvas para atividades onde exista a possibilidade do contato direto da pele com os estgios infecciosos dos parasitas acima listados. O tratamento apropriado para a maioria das infeces provocadas por protozorios existe e as informaes sobre dosagem, fonte da droga, etc. se encontram a disposio. Agente: Protozorios Parasitas do Intestino Humano. Infeces com o Toxoplasma spp.; Entamoeba spp.; Isospora spp.; Giardia spp.; Sarcocystis spp. e o Cryptosporidium spp. associadas a laboratrio foram relatadas. Nenhuma infeco laboratorial com microspordios foi registrada, mas a ingesto de esporos encontrados nas fezes, urina, escarro, fludo cerebroespinhal ou culturas pode provocar uma infeco. Infeces associadas ao laboratrio de experimentao animal tm sido relatadas e constituem uma fonte direta de infeco para as pessoas que trabalham nestes laboratrios e que esto em contato com as fezes de animais naturalmente ou experimentalmente infectados. No caso de roedores inoculados experimentalmente com o Toxoplasma via intraperitoneal, o contato com o lquido peritoneal pode provocar uma exposio aos organismos infecciosos. J as infeces com o Cryptosporidium adquiridas em laboratrio ocorrem com regularidade em quase todos os laboratrios que trabalham com esse agente, especialmente aqueles nos quais os bezerros so usados como fonte de ocitos. Outros animais infectados experimentalmente tambm oferecem riscos potenciais. A evidncia circunstancial sugere que a transmisso area de ocitos deste pequeno organismo pode acontecer. Uma obedincia rigorosa a todas essas recomendaes reduz a ocorrncia de infeces nos laboratrios e em tratadores de animais. Riscos em Laboratrio: Os estgios ativos infecciosos podem ser encontrados nas fezes ou em outros fludos e tecidos corporais. Dependendo do parasita, a ingesto o risco primrio laboratorial. Embora no se conhea o nvel
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do risco, as exposies das membranas mucosas dos olhos, nariz ou boca aos aerossis ou perdigotos de trofozotas podem ser riscos potenciais quando trabalhos com culturas de amebas que vivem livremente, como a Naegleria fowleri, Acanthamoeba ou a Balamuthia esto sendo realizados. Os indivduos imunocomprometidos devem evitar o trabalho com organismos vivos. Devido s graves conseqncias da toxoplasmose em fetos em desenvolvimento e em mulheres sorologicamente negativas que podem engravidar, cabe ao supervisor do laboratrio informar essas mulheres sobre os riscos potenciais ao feto. Caso os empregados bem informados sobre os riscos se recusarem a ficar expostos a esses agentes, o laboratrio dever designar outras atividades em uma rea de trabalho onde o Toxoplasma no esteja sendo manipulado. O trabalho com ocitos contagiosos oferece um risco maior de se adquirir uma infeco. As picadas de agulhas com material contendo taquizotas ou bradizotas atravs da membrana mucosa ou de abrases na pele tambm so riscos significativos. A infeco por taquizotas ou bradizotas atravs da membrana mucosa ou de abrases da pele tambm so possveis. Os laboratrios que conduzem estudos somente com materiais de parasitas mortos ou inativados e com fraes de parasitas no oferecem riscos significativos de infeco. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades com estgios contagiosos dos parasitas acima listados. A conteno primria (por exemplo, cabine de segurana biolgica) ou a proteo pessoal (por exemplo, protetor facial) pode ser indicada em trabalhos envolvendo culturas de Naegleria fowleri ou Cryptosporidium. O tratamento apropriado para a maioria das infeces provocadas por protozorios j existe e mais informaes sobre a dose, fonte das drogas, etc. esto disponveis. Agente: Trematdeos Parasitas de Humanos (Schistosoma spp. e Fasciola spp.) Infeces com o Schistosoma spp. e a Fasciola spp. Adquiridas em laboratrio tm sido relatadas. Nenhuma infeco estava diretamente associada aos animais de laboratrio, com exceo dos moluscos infectados, que so os hospedeiros intermedirios. Riscos em Laboratrio: Os estgios contagiosos do Schistosoma spp. (cercria) e da Fasciola spp. (metacercria) podem ser encontrados, respectivamente, na gua ou encistados em plantas de aqurios de laboratrios usados para manter os caracis hospedeiros. A penetrao das cercrias do esquistossomo na pele e a ingesto da metacercria de qualquer trematdeo so considerados riscos primrios. A disseco ou o esmagamento de caracis infectados pelo esquistossomo pode tambm resultar na exposio da pele ou da membrana mucosa aos tecidos contendo as cercrias. Alm disto, a metacercria pode ser transferida inadvertidamente das mos para a boca atravs dos dedos ou das luvas, depois do contato com a vegetao aqutica contaminada ou com as superfcies contaminadas do aqurio. A maioria das exposies laboratoriais ao Schistosoma spp. Supostamente resultaria em baixas cargas de vermes com um potencial mnimo da doena. Drogas seguras e eficazes para o tratamento da esquistossomose j se encontram no mercado. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades com os estgios contagiosos dos parasitas acima citados. Recomenda-se o uso de luvas onde houver um contato direto com gua contaminada por cercrias, ou onde houver vegetao contendo metacercria de caracis infectados experimentalmente ou naturalmente. Jalecos de
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mangas compridas ou outro traje de proteo devero ser usados quando um trabalho ao redor do aqurio ou em outras fontes de gua que possam conter cercrias do esquistossomo estiver sendo realizado. Os caracis e as cercrias encontradas na gua proveniente do aqurio do laboratrio devem ser eliminados atravs de substncias qumicas (por exemplo, hipoclorito, iodo) ou atravs do calor antes de serem jogados no esgoto. O tratamento apropriado para grande parte das infeces causadas por trematdeos existe, e as informaes sobre a fonte das drogas, dosagens, esto disponveis. Agente: Cestides Parasitas de Humanos Echinococcus granulosus, Taenia solium (cysticercus cellulosae) e Hymenolepis nana. Embora nenhuma infeco com o E. granulosus ou a T. solium relacionada a laboratrio tenha sido relatada, as conseqncias destas infeces aps a ingesto de ovos infectados por E. granulosus ou T. solium so potencialmente srias. A H. nana um parasita cosmopolita que no requer um hospedeiro intermedirio e a contaminao se d diretamente atravs da ingesto de fezes humanas ou de roedores infectados. Riscos em Laboratrio: Os ovos infectados podem ser encontrados nas fezes de ces ou de outros candeos (hospedeiro definitivo do E. granulosus) ou nas fezes humanas (o hospedeiro definitivo da T. solium). A ingesto de ovos infectada destas fontes considerada como risco primrio em laboratrios. Os cistos e fludo de cistos do E. granulosus no so infecciosos para o homem. J os cistos que contm a larva da T. solium (Cysticercus cellulosae) prontamente produzem a infeco humana com a solitria adulta. A ingesto de um nico ovo infectado pelos dois parasitas e proveniente das fezes do hospedeiro definitivo pode potencialmente resultar em uma sria patologia. A ingesto dos ovos da H. nana nas fezes do hospedeiro definitivo pode causar uma infeco intestinal. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para o trabalho com os estgios contagiosos destes parasitas. Deve-se dar uma ateno especial a higiene pessoal (por exemplo, a lavagem das mos) e evitar a ingesto de ovos infectados. Recomenda-se o uso de luvas quando houver um contato direto com as fezes ou com superfcies contaminadas por fezes frescas de ces infectados por E. granulosus, com humanos infectados pela T. solium adulta ou com humanos ou roedores infectados pela H. nana. O tratamento adequado para muitas infeces causadas por cestides existe e informaes sobre a fonte das drogas, dosagem, etc. j se encontram disponveis. Agente: Nematides Parasitas de Humanos Infeces por Ascaris spp.; Strongyloides spp; ancilstomos e Enterobius spp. j foram relatadas. As reaes alrgicas a vrios componentes antignicos de nematides (por exemplo, antgenos de Ascaris nebulizados) podem representar um risco ao indivduo sensvel. As infeces associadas a laboratrio (incluindo artrpodes) no foram registradas, mas as larvas contagiosas encontradas nas fezes de primatas no-humanos infectados com o Strongyloides spp. so consideradas como um risco potencial de infeco para trabalhadores de laboratrio e tratadores de animais. Riscos em Laboratrio: Os ovos e larvas de fezes frescas do hospedeiro definitivo no so geralmente infecciosos, uma vez que o desenvolvimento dos estgios infecciosos pode levar de um dia at vrias semanas. A Trichinella preocupa porque o tecido fresco ou digerido pode conter larvas que seriam
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infecciosas se ingeridas. A ingesto de ovos infectados ou a penetrao na pele de larvas infectadas so os riscos primrios para as pessoas que trabalham em um laboratrio e as que tratam dos animais. Os artrpodes infectados com os parasitas filariais oferecem um risco potencial para a equipe laboratorial. comum o desenvolvimento de uma hipersensibilidade em trabalhadores de laboratrios que freqentemente so expostos aos antgenos aerolizados de Ascaris spp. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades que envolvam os estgios contagiosos relacionados. A exposio aos antgenos sensibilizados aerolizados do Ascaris spp. deve ser evitada. Uma conteno primria (por exemplo, cabine de segurana biolgica) pode ser necessria para o trabalho com estes materiais por indivduos hipersensveis. O tratamento adequado para maior parte das infeces causadas por nematides existe, e maiores informaes sobre a dosagem, fonte das drogas e etc. j se encontram disponveis. Agentes Virais Agentes: Hantavrus O trabalho com o vrus de Hantaan (febre hemorrgica com sndrome renal) e outros hantavrus (Puumala, Seul e Sin Nombre sendo ou no registrados no International Catalogue of Arboviruses and Certain Other Viruses 1985, como o vrus El Moro Canyon) em ratos, ratazana e outros roedores de laboratrio, dever ser conduzido com especial cuidado devido ao risco extremo de contgio por aerossis, especialmente da urina de roedores infectados. A Sndrome Pulmonar por Hantavrus (HPS) uma nova doena grave e freqentemente fatal, causada pelo vrus Sin Nombre e/ou um vrus relacionado. A maioria dos casos de patologias humanas resultou de exposies a roedores selvagens naturalmente infectados. Os vetores artrpodes no so conhecidos como transmissores do hantavrus. Nenhuma transmisso de um indivduo para outro foi provocada por um vrus associado a essa doena. Riscos em Laboratrio: A transmisso laboratorial do hantavrus de roedores para os homens atravs do aerossol bem documentada. As exposies s excrees de roedores, material fresco para necropsia e roupas que envolvem os animais de laboratrio so supostamente associadas ao risco. Outras vias potenciais de infeco incluem a ingesto, o contato de materiais contagiosos com membranas mucosas ou pele rachada e, em particular, mordidas de animais. Quatro trabalhadores de laboratrio foram infectados enquanto trabalhavam com o vrus Hantaan adaptado a uma cultura de clulas. Embora os procedimentos associados s infeces ainda no estejam bem explicados, esses quatro indivduos trabalharam repetidas vezes com culturas de hantavrus e realizaram a centrifugao do vrus concentrado. O RNA viral foi detectado em amostras de necropsias e no sangue e plasma de um paciente coletados no incio da doena. As implicaes destas descobertas para a infectividade do sangue ou dos tecidos so desconhecidas. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para o manuseio laboratorial de soros de pessoas potencialmente infectadas com os agentes da HPS. O uso de uma cabine de segurana biolgica certificada recomendado para todas as manipulaes com lquidos humanos corporais quando existe um potencial para a formao de borrifos ou aerossis.
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Amostras de tecidos potencialmente infectados devero ser manipuladas em instalaes do NB-2 seguindo as prticas e procedimentos do NB-3. A reproduo do vrus em culturas de clulas dever ser realizada em uma instalao do NB-3, seguida das prticas e procedimentos do NB-3. O crescimento em grande escala do vrus, incluindo a preparao e manuseio dos concentrados virais, dever ser feito em instalaes de conteno do NB-4. Espcies de roedores experimentalmente infectados conhecidos por no apresentarem o vrus nas fezes podero ser alojados em instalaes do NBA-2, usando prticas e procedimentos do NBA-2. As cabines de segurana e outros dispositivos de conteno fsica primria devero ser utilizados onde procedimentos com um alto potencial para formao de aerossis estiverem sendo conduzidos. O soro ou amostras de tecidos de roedores potencialmente infectados dever ser manipulado em NB 2, usando prticas e procedimentos de um NB-3. Todo o trabalho envolvendo a inoculao do vrus contendo amostras do P. maniculatus ou outras espcies permissivas dever ser conduzido em NBA-4. Transferncia do Agente: A licena para importao destes agentes deve ser conseguida atravs do CDC. A licena para exportao dever ser conseguida junto ao Department of Commerce e necessrio o registro do laboratrio junto ao CDC antes do envio ou recebimento destes agentes. Agente: Hendra e Vrus Semelhantes a Hendra (inclusive o vrus anteriormente conhecido como Morbilivirus Eqino) Surtos de um paramixovrus anteriormente desconhecido, que foi primeiramente chamado de morbilivrus eqino e posteriormente denominado de vrus Hendra, ocorreram em cavalos na Austrlia em 1994 e 19958. Trs pessoas que possuam um contato prximo com cavalos enfermos desenvolveram a encefalite ou a doena respiratria e duas falecerem. Nenhum surto associado doena humana foi reconhecido, mas dois indivduos que trabalhavam em chiqueiro de porcos lembraram de uma doena que tiveram semelhante gripe, na mesma poca em que ocorreram os surtos. Alm disto, todos os dois indivduos possuam titulaes neutralizadoras de anticorpos ao vrus de Menangle. De 1998 a 1999, um surto da doena provocado por um vrus semelhante, mas distinto do Hendra aconteceu na Cingapura e Malsia. Nestes dois pases, a doena humana caracterizada por febre, dor de cabea grave, mialgia e sinais de encefalite acometeu indivduos que tiveram um contato prximo com porcos (isto , fazendeiros e trabalhadores de abatedouros). Poucos pacientes desenvolveram uma doena respiratria. Metade das pessoas infectadas por esse vrus faleceram. O(s) hospedeiro(s) natural(is) da Hendra e de vrus semelhantes a Hendra no foram identificados. Porm, na Austrlia os morcegos eram animais suspeitos de carregarem o vrus Hendra. Estudos epidemiolgicos e laboratoriais esto em andamento. Nenhuma infeco adquirida em laboratrio conhecida por ter sido resultante da exposio ao Hendra ou ao vrus semelhante a Hendra. Porm, devese observar que nos surtos da Austrlia e da Malria/Cingapura, o vrus foi reconhecido como um significativo patgeno veterinrio. Estudos laboratoriais foram limitados aos laboratrios de doenas infecciosas humanas e/ou veterinrias de alta conteno. Os cientistas e veterinrios da sade pblica, por sua vez, tm acompanhado de perto todos estes estudos. Riscos em Laboratrio: O modo exato de transmisso ainda no foi estabelecido. Todos os casos at hoje estavam associados ao contato prximo com
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cavalos, e com o sangue ou lquidos corporais de cavalos (Austrlia) ou de porcos (Malsia/Cingapura). O vrus Hendra e o semelhante a ele foram encontrados nos tecidos de animais contaminados durante os surtos descritos acima. Em um recente surto na Malsia e em Cingapura, o antgeno viral foi descoberto no sistema nervoso central, tecidos renais e pulmonares de casos humanos fatais. Precaues Recomendadas: Devido aos riscos desconhecidos para os trabalhadores do laboratrio e ao impacto potencial sobre criaes de animais nativos, o vrus dever ser pesquisado ou diagnosticado no laboratrio. Os fiscais da sade e os gerentes dos laboratrios devero avaliar a necessidade de se realizar um trabalho com esse vrus e a capacidade das dependncias antes de iniciarem qualquer trabalho com o Hendra, com o vrus semelhante ao Hendra ou com vrus suspeitos relacionados. Especialistas em doenas da sade pblica e veterinria devero desenvolver planejamentos como estudos laboratoriais e transporte de amostras e de substncias isoladas para o laboratrio. At que mais informaes sejam conseguidas, o manuseio de amostras clnicas humanas ou tentativas de isolamento deste vrus dever ser realizado em dependncias de um NB-3 e por pessoas experientes. O NB-4 (laboratrio escafandro ou cabines de segurana Classe III) dever ser utilizado em qualquer trabalho envolvendo animais contaminados ou envolvendo grandes quantidades de vrus. Agente: Vrus da Hepatite A, Vrus da Hepatite E As infeces com os vrus da hepatite A e E adquiridas em laboratrio no parecem ser importantes riscos ocupacionais para as equipes laboratoriais. Porm, a doena um risco documentado para as pessoas que manuseiam animais e para outros que trabalham com chimpanzs e outros primatas no-humanos experimentalmente ou naturalmente contaminado16. O vrus da hepatite E parece ser um risco menor para as pessoas que trabalham com ele do que o grande risco envolvendo os que manuseiam o vrus da hepatite A, exceto durante a gravidez quando a infeco pode resultar em uma doena fatal ou grave. Os trabalhadores que manipulam outros primatas recentemente capturados e susceptveis (macacos coruja, sagis) podem tambm estar correndo um srio risco. Riscos em Laboratrio: Os agentes podem ser encontrados nas fezes, saliva e sangue de humanos e primatas no-humanos contaminados. A ingesto de fezes, gua de vaso sanitrio e de outros materiais contaminados o risco primrio para a equipe laboratorial. A importncia da exposio aos aerossis no foi demonstrada. Cepas atenuadas ou no virulentas dos vrus da hepatite A resultantes de passagens em srie em cultura celular foram descritas. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de segurana e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicados para atividades com fezes humanas ou de primatas no humanos conhecidamente ou potencialmente contaminada. J as prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para atividades que usem primatas no-humanos naturalmente ou experimentalmente contaminados. Os tratadores de animais devero usar luvas e tomar outras precaues adequadas para evitar possveis exposies fecal-oral. Uma vacina inativada licenciada contra a hepatite A est disponvel na Europa. Nos Estados Unidos encontramos somente uma vacina de pesquisa que a recomendada para os trabalhadores de laboratrio. As vacinas contra a hepatite E no esto disponveis para o uso em humanos.

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Agente: Vrus da Hepatite B, Vrus da Hepatite C (anteriormente conhecido como Vrus no-A e vrus no-B) e Vrus da Hepatite D A hepatite B tem sido uma das infeces associadas a laboratrio mais freqentemente encontrada e os trabalhadores de laboratrio so reconhecidos como o grupo de maior risco de contaminao por este vrus. Os indivduos contaminados pelo vrus da hepatite B correm o risco de contrarem o vrus da hepatite D (delta), que incompleto e requer a presena do vrus da hepatite B para se reproduzir. A infeco por hepatite C pode acontecer em um laboratrio. A prevalncia do anticorpo da hepatite C levemente maior em trabalhadores da rea da sade pblica do que na populao em geral. Evidncias epidemiolgicas indicam que a hepatite C disseminada predominantemente pela via parenteral. Riscos em Laboratrio: O vrus da hepatite B pode ser encontrado no sangue e produtos sanguneos de origem humana, na urina, smen, lquido cerebroespinhal e saliva. A inoculao parenteral, exposio das membranas mucosas e da pele lesada aos perdigotos so os riscos primrios laboratoriais. O vrus pode ser estvel no sangue ou nos componentes do sangue seco. Cepas atenuadas ou no virulentas no foram identificadas. O vrus da Hepatite C tem sido detectado primariamente em sangue e soro, menos freqentemente na saliva e raramente em urina ou semen. E aparece ser relativamente instvel, quando estocado em temperatura ambiente, e em congelamentos e descongelamentos repetidos. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades utilizando lquidos corporais e tecidos conhecidamente ou potencialmente contaminados. Precaues pessoais e conteno primria adicional, como as descritas para o Nvel de Biossegurana 3, podem ser indicadas para atividades com potencial para a formao de perdigotos ou aerossis e para as atividades envolvendo quantidades ou concentraes de produo de materiais infecciosos. As prticas, equipamento de conteno e instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicadas para atividades que utilizem chimpanzs ou outros primatas no-humanos contaminados naturalmente ou experimentalmente. Deve-se usar luvas quando trabalhos com animais contaminados estiverem sendo realizados ou quando houver a possibilidade de contato da pele com materiais contaminados. As vacinas recombinantes licenciadas contra a hepatite B esto disponveis e so altamente recomendadas e oferecidas aos trabalhadores e laboratrios. J as vacinas contra a hepatite C e D ainda no esto disponveis para uso humano. Agente: Herpesvrus Humano Os herpesvrus so patgenos humanos ubquos e so comumente encontrados em uma variedade de materiais clnicos submetidos ao isolamento do vrus. Embora poucos vrus sejam agentes comprovadamente causadores de infeces associadas a laboratrios, eles so patgenos primrios e oportunistas, especialmente em hospedeiros imunocomprometidos. Os vrus herpes simples 1 e 2, e o vrus da varicela apresentam algum risco pelo contato direto e/ou aerossis. J os citomegalovrus e o vrus Epstein-Barr apresentam riscos de infeco relativamente baixos para as equipes de laboratrios. O risco de uma infeco laboratorial tendo os herpesvrus 6 e 7 como agentes etiolgicos ainda desconhecido. Embora esse grupo diversificado de agentes virais nativos no
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atenda aos critrios para que possam ser includos no resumo das caractersticas dos agentes (isto , risco comprovado ou alto risco potencial para infeces associadas a laboratrio e para graves seqelas provocadas por uma infeco), a freqncia de sua presena em materiais clnicos e o uso comum deste grupo em pesquisas garante sua incluso nesta publicao. Riscos em Laboratrio: Os materiais clnicos e as substncias isoladas dos herpesvrus apresentam um risco de infeco aps a ingesto, inoculao parenteral acidental, exposio das membranas mucosas dos olhos, nariz ou boca aos perdigotos ou inalao de materiais concentrados nebulizados. As amostras clnicas contendo o Herpesvirus simiae (vrus B) mais virulento podem ser inadvertidamente submetidas a diagnstico de uma suspeita infeco por herpes simples. O vrus tambm foi encontrado em culturas de clulas renais primrias do macaco reso. O citomegalovrus pode ser um risco especial durante a gravidez devido infeco potencial do feto. Precaues Recomendadas: As prticas, equipamento de conteno e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades que utilizem materiais clnicos sabidamente ou potencialmente infecciosos ou culturas de agentes virais nativos que estejam associadas ou sejam identificadas como patgeno Primrio de doena humana. Embora existam poucas evidncias de que os aerossis infecciosos sejam uma fonte significativa de infeces associadas a laboratrio, mais prudente evitar a formao de aerossis durante a manipulao de materiais clnicos ou de produtos isolados, ou durante a necropsia de animais. Os dispositivos de conteno primria (cabines de segurana biolgica) constituem a barreira bsica de proteo dos trabalhadores para evitar a exposio de aerossis infecciosos. Agente: Influenza As infeces adquiridas em laboratrios e que possuem o vrus da influenza como agente causador no so normalmente documentadas na literatura. Entretanto deve-se considerar dados informais e relatrios publicados que indicam que quando novas cepas que apresentam um desvio ou uma flutuao antignica foram introduzidas em um laboratrio para o diagnstico ou pesquisa acabaram por causar infeces deste tipo. As infeces adquiridas em laboratrios animais, por sua vez, no foram relatadas, mas h uma grande possibilidade de transmisso atravs de doninhas infectadas para o ser humano e vice e versa. Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado em tecidos ou secrees respiratrias de humanos ou de grande parte de animais contaminados e na cloaca de muitas espcies de aves contaminadas. O vrus pode ser disseminado em mltiplos rgos de algumas espcies animais infectadas. O risco laboratorial primrio a inalao do vrus atravs de formao de aerossis de materiais de animais contaminados ou pela aspirao, suspenso ou mistura de amostras contaminadas pelo vrus. A manipulao gentica tem um potencial de alterar o alcance, a patogenicidade e a composio dos vrus da influenza. Existe um potencial desconhecido na introduo de vrus humanos transmissveis com uma nova composio antignica. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para o recebimento e inoculao rotineira de amostras laboratoriais para diagnsticos. O material para autpsia dever ser manipulado em uma cabine de segurana biolgica usando os procedimentos do Nvel de Biossegurana 2.
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Atividades Utilizando Cepas de Vrus No Contemporneas: Os requisitos para a Biossegurana no caso de uma infeco adquirida em laboratrio e transmisso subseqente, devem estar de acordo com as informaes disponveis sobre a patogenicidade e virulncia das cepas que esto sendo usadas e o potencial de danos para o ser humano ou para a sociedade. As atividades de produo e pesquisa utilizando cepas contemporneas podem ser realizadas com segurana usando as prticas de conteno do Nvel de Biossegurana 2. A susceptibilidade infeco com cepas humanas no contemporneas mais velhas, recombinantes, ou com substncias isoladas de animais garante o uso de procedimentos de conteno do Nvel 2. Mas no h evidncias para infeces adquiridas em laboratrio com referncia as cepas A/PR/8/34 e A/WS/33, ou com suas variantes neurotrpicas mais comumente usadas. Agente: Vrus da Coriomeningite Linfoctica As infeces com o vrus LCM adquiridas em laboratrios so bem documentadas onde ocorram infeces em roedores de laboratrio especialmente camundongos, hamsters e cobaias. Os camundongos desprotegidos podem oferecer riscos especiais por alojarem infeces crnicas silenciosas. As culturas celulares, que inadvertidamente se tornaram contaminadas, representam uma fonte potencial de infeco em de disseminao do agente. As infeces naturais so encontradas em primatas nohumanos, incluindo chimpanzs e macacos sagis (o vrus Callitrichid um vrus coriomening te linfoctica) e pode ser fatal para os sagis. Os sunos e ces so vetores menos importantes. Riscos em Laboratrio: Esse agente pode ser encontrado no sangue, lquido cerebroespinhal, urina, secrees da nasofaringe, fezes e tecidos de hospedeiros animais contaminados e possivelmente do homem. A inoculao parenteral, inalao, contaminao das membranas mucosas ou de peles rachadas por tecidos ou lquidos contaminados de animais infectados so os riscos mais comuns. A transmisso por aerossis tambm bem documentada. O vrus pode oferecer um risco especial durante a gravidez devido infeco potencial do feto. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para as atividades que utilizam lquidos corporais sabidamente ou potencialmente infecciosos e passagem de cultura celular de cepas de clulas cerebrais de camundongo adaptadas para laboratrio. As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so adequadas para estudos em camundongos adultos com cepas de passagem cerebrais de rato. Porm, a conteno e precaues individuais adicionais, como as descritas para o Nvel de Biossegurana 3, so indicadas para atividades que possuam um alto potencial para a formao de aerossis ou atividades que envolvam quantidades ou concentraes de produo de materiais infecciosos. Estas precaues tambm so recomendadas para a manipulao de tumores contaminados infectveis, isolamento de campo e materiais clnicos de casos humanos. As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 3 so recomendadas para o trabalho com hamsters contaminados. As vacinas no esto disponveis para uso em humanos. Agente: Poliovrus As infeces com o poliovrus adquiridas em laboratrios so raras e se limitam s pessoas que trabalham diretamente com este vrus em laboratrio e que
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no so vacinadas55. Existem no mnimo 12 casos documentados de infeces por poliovrus associados a laboratrio, incluindo duas mortes entre 1941 e 197656. Porm, uma vez que ~1% das infeces com o poliovrus resultou em patologia, sem uma confirmao laboratorial impossvel estimar precisamente os nmeros das infeces adquiridas em laboratrio. Com vacinas eficazes, instalaes laboratoriais eficazes, tecnologia e procedimentos so bem possvel que estas infeces j sejam raras em laboratrios. Mas, se os trabalhadores de um laboratrio se contaminarem, esses se tornaro uma fonte de vrus para a populao no vacinada57. As infeces em animais, associadas a laboratrio, entretanto, no tem sido relatadas58, mas os primatas no-humanos experimentalmente ou naturalmente contaminados poderiam ser uma fonte de infeco se expostos s pessoas no imunizadas. Os ratos transgnicos apresentam o receptor humano para o poliovrus e podem tambm ser fontes potenciais de infeco humana. Riscos em Laboratrio: Esse agente est presente nas fezes e em secrees de garganta de pessoas infectadas. A ingesto ou a inoculao parenteral de tecidos ou lquidos infecciosos por trabalhadores no imunizados considerada como risco primrio de infeco em laboratrios. As exposies laboratoriais oferecem um risco insignificante para as pessoas adequadamente imunizadas. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades que utilizam lquidos sabidamente ou potencialmente infecciosos e materiais clnicos contendo ou suspeitos de conter cepas do tipo selvagens. Todos os trabalhadores de laboratrios que trabalhem diretamente com o agente devero possuir um atestado de vacinao ou provas sorolgicas da imunidade a todos os trs tipos de poliovrus. As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana Animal 2 so indicados para estudos de vrus virulentos em animais. menos que existam fortes razes cientficas para o trabalho com poliovrus virulentos (que foram erradicados dos Estados Unidos), os laboratrios devero usar cepas de vacina oral Sabin de poliovrus atenuado. Essas no oferecem risco algum equipe imunizada dos laboratrios. A Organizao Mundial de Sade (WHO) tem publicado guias documentadas relacionados ao trabalho com este poliovrus selvagem. A partir de 1999, os laboratrios que manipulam o poliovrus devero estabelecer um NB-2 (especfico para plio) para todos os trabalhadores que manipulam ou que forem manipular o poliovrus selvagem. As NB-2 para plio seguem os requisitos do NB-2 tradicional quanto s instalaes, prticas e procedimentos com os seguintes acrscimos: 1) todos os estoques de poliovrus e materiais potencialmente infecciosos sero descartados quando no houver mais a necessidade de ret-los para a realizao de pesquisa ou diagnsticos; 2) todas as pessoas que entrarem no laboratrio devero estar completamente imunizadas contra o vrus da plio; 3) o acesso ao laboratrio dever ser restrito; 4) todos os poliovrus selvagens retidos no laboratrio devero ser relacionados e armazenados em uma rea separada e segura com acesso limitado; 5) somente os vrus que forem prontamente identificveis por mtodos moleculares sero usados se as cepas de vrus selvagens ou estoques de trabalho forem necessrios; e 6) o descarte de poliovrus selvagens, materiais infecciosos e materiais potencialmente infecciosos dever ser feito utilizando a esterilizao e/ou a incinerao. Todos os laboratrios que desejarem guardar materiais contaminados por poliovrus selvagem ou potencialmente infeccioso devero comear a implementao dos procedimentos de conteno do Nvel de Biossegurana 3 para plio e fornecer a documentao necessria para implementao at o segundo ano.
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No caso de laboratrios que desejarem ser qualificados como uma instalao de NB-3/plio e quiserem reter materiais contaminados por poliovrus devero, ento, ser relacionados na Agency/Institutional e no National Inventories. J os que no desejarem a converso para uma conteno de NB especfica para a plio devero destruir todos os materiais contendo o poliovrus selvagem ou potencialmente infecciosos atravs da incinerao ou uso da autoclave. Uma outra alternativa seria o contato com um depsito designado pela Organizao de Sade Pblica especfico para conteno de agentes de um NB-3/plio, e que sero responsveis pelo transporte e armazenamento dos materiais selecionados. Quando a imunizao pela OPV (vacina oral de poliovrus vivos) terminar, todo o trabalho com o poliovrus selvagem ficar restrito a laboratrios de conteno mxima (NB-4). Essas devero ser em laboratrios cabines ou laboratrios de roupa de proteo. Agente: Poxvrus Casos espordicos de infeces por poxvrus (catapora, vacnia, yabapox, tanabox) foram relatados. Evidncias epidemiolgicas sugerem que a transmisso do vrus do macaco para homens ou de roedores para homens possa ter ocorrido na natureza, mas no nas dependncias de um laboratrio. Animais de laboratrios naturalmente ou experimentalmente contaminados so fontes potenciais de infeco para pessoas que trabalham em um laboratrio e que no so vacinadas. Vrus da vacnia recombinantes reproduzidos geneticamente oferecem um risco potencial ainda maior para a equipe laboratorial devido ao contato direto ou contato com materiais clnicos de voluntrios ou animais contaminados. Riscos em Laboratrio: Esses agentes podem ser encontrados em lquidos de leses ou em escaras, secrees respiratrias ou tecidos de hospedeiros contaminados. A ingesto, inoculao parenteral e a exposio de membranas mucosas ou da pele rachada aos perdigotos ou aerossis de lquidos ou tecidos infecciosos so os riscos primrios para trabalhadores de laboratrios e tratadores de animais. Alguns poxvrus so estveis em temperatura ambiente quando secos e podem ser transmitidos atravs dos fomitos. Precaues Recomendadas: A posse e uso do vrus da varola ficam restritos ao Collaborating Center for Smallpox and Other Poxvirus Infections da Organizao Mundial de Sade localizado nos Centros de Controle e Preveno de Doenas em Atlanta, Gergia. As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so recomendadas para todas as atividades envolvendo o uso ou a manipulao de poxvrus, com exceo do vrus da varola, que apresentam um grande risco de infeco aos homens. Todas as pessoas que trabalham dentro de um laboratrio ou que forem entrar nas reas de laboratrios ou reas dos animais onde atividades com os vrus vaccnia, vrus da varola bovina e de macacos estiverem sendo conduzidas devero possuir um atestado de vacinao. Esta imunizao dever ter sido realizada dentro de um perodo de dez anos. As atividades com os vrus relacionados acima em quantidades maiores que as apresentadas nas culturas para diagnstico, podero tambm ser conduzidas em um Nvel de Biossegurana 2, mas por pessoas imunizadas j que todas as manipulaes de materiais viveis devero ser realizadas em cabines de segurana biolgica Classe I ou II. Indivduos imunodeprimidos correm um risco de adquirirem uma patologia ainda mais grave quando infectado por um poxvru. Agente: Vrus da Raiva
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As infeces provocadas por este agente e adquiridas em laboratrio so extremamente raras. Somente duas foram documentadas. Todas as duas resultaram de uma suposta exposio a nevoas infecciosa de altas titulaes, sendo uma formada em um local de produo da vacina e a outra em um local de pesquisa. Os animais naturalmente ou experimentalmente contaminados, seus tecidos e excrees constituem uma fonte potencial de exposio para o pessoal do laboratrio e tratadores de animais. Riscos em Laboratrio: Este agente pode estar presente em todos os tecidos de animais contaminados. As maiores titulaes so encontradas em tecidos, glndulas salivares e saliva do Sistema Nervoso Central. A inoculao acidental, cortes ou farpas de equipamento laboratorial contaminado, mordidas de animais infectados e exposio de membranas mucosas ou pele rachada a lquidos ou tecidos contaminados, so as fontes mais provveis de riscos para a equipe laboratorial e tratadores de animais. J os aerossis contaminados ainda no foram demonstrados como sendo um perigo comprovado ao pessoal que trabalha com materiais clnicos e que conduzem exames de diagnsticos. Cepas fixas ou atenuadas deste vrus so supostamente menos perigosas, mas os nicos dois casos comprovados de raiva adquiridos em laboratrios resultaram de exposio de um Padro Viral Desafiador (CVS) fixo e de uma cepa atenuada derivada de uma cepa SAD (Street Alabama Dufferin), respectivamente. Precaues Recomendadas: As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades que utilizam materiais sabidamente ou potencialmente infecciosos. A imunizao recomendada para todos os indivduos antes que se inicie o trabalho com o vrus da raiva ou com animais infectados, ou atividades que envolvam o diagnstico, produo ou pesquisa do vrus. A imunizao tambm recomendada para todos os indivduos que forem entrar na mesma sala onde o vrus da raiva ou de animais contaminados estiver sendo usado. Embora no seja sempre possvel abrir o crnio ou retirar o crebro de um animal infectado dentro de uma cabine de segurana biolgica, essencial o uso de luvas pesadas de proteo para prevenir cortes ou farpas de instrumentos cortantes ou de fragmentos de ossos e tambm o uso de um escudo facial para proteo das membranas mucosas dos olhos, nariz e boca quanto exposio destas aos perdigotos infecciosos ou fragmentos de tecidos. Se a serra de Stryker for usada para abrir o crnio, evite o contato do crebro com a lmina da serra. A conteno primria e as precaues individuais adicionais, como as descritas para o Nvel de Biossegurana 3, podero ser indicadas para atividades com um alto potencial de formao de aerossis ou perdigotos e para as atividades que envolvam quantidades ou concentraes de materiais infecciosos em grande escala. Agente: Retrovrus, incluindo o Vrus da Imunodeficincia Humana e o Vrus da Imunodeficincia Smia(HIV e SIV) Os dados sobre a transmisso da HIV ocupacional em trabalhadores de um laboratrio so coletados atravs de dois sistemas de vigilncia nacional apoiados pelos CDC: vigilncia quanto a: 1) AIDS e 2) pessoas infectadas pelo HIV que no adquiriram a infeco atravs de exposies ocupacionais. Para propsitos de vigilncia, os trabalhadores de laboratrios so definidos como as pessoas, incluindo estudantes e estagirios, que trabalham ou j trabalharam em um laboratrio para diagnstico do HIV ou laboratrio clnico a partir de 1987. Os casos reportados nestes dois sistemas so classificados como uma transmisso ocupacional possvel ou documentada. As que so classificadas como transmisso
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ocupacional documentada possuem evidncias de uma soroconverso do HIV (um teste HIV negaivo no momento da exposio que se alterou e se tornou positivo) seguido de uma discreta exposio ocupacional percutnea ou mucocutnea ao sangue, lquidos ou outras amostras clnicas ou laboratoriais. At junho de 1998, o CDC havia registrado 16 trabalhadores de laboratrios (todos clnicos) nos Estados Unidos com transmisso ocupacional documentada. Em 1992, dois trabalhadores de diferentes laboratrios desenvolveram o Vrus da Imunodeficincia de Smios (SIV) aps terem se exposto. Um caso estava associado a uma picada de agulha que aconteceu enquanto o trabalhador estava manipulando uma agulha contaminada com sangue aps uma hemorragia em um macaco infectado por SIV. J o outro envolveu um trabalhador que manipulava amostras de sangue de um macaco infectado pelo SIV sem usar luvas. Embora ele no se lembrasse deste incidente especfico, este indivduo apresentou dermatites nos antebraos e mo enquanto trabalhava com amostras de sangue infectado. O primeiro trabalhador apresentou uma soroconverso e, portanto no apresentou evidncia alguma de infeco pelo SIV. O segundo era soropositivo durante pelo menos nove anos sem evidncia alguma da doena ou de deficincia imunolgica. Publicaes recentes identificaram a prevalncia (4/231,1.8%) da infeco por vrus espumosos de smios (SFV) entre humanos ocupacionalmente expostos a primatas no-humanos. O diagnstico de infeces por SFV inclui a soropositividade, deteco de DNA proviral e isolamento do vrus espumoso. O SFV se originou do macaco-verde africano (uma pessoa) e de babunos (trs pessoas). Essas infeces ainda no provocaram doenas ou transmisso sexual, e podem representar infeces endpoints benignas. Riscos em Laboratrio: O HIV tem sido isolado do sangue, smen, saliva, lgrimas, urina, lquido cerebroespinhal e tecido de pessoas infectadas e de primatas no-humanos experimentalmente infectados. O CDC recomenda que o cuidado com o sangue e lquidos corporais seja usado consistentemente quando amostras de sangue contaminadas estejam sendo manipuladas. Esta abordagem, chamada de precaues universais, inclui a necessidade de identificar as amostras clnicas obtidas de pacientes soropositivos ou de se realizar um teste HIV da amostra. Embora o risco de um HIV adquirido ocupacionalmente ser primariamente atravs da exposio ao sangue contaminado, deve-se usar luvas quando outros lquidos corporais como fezes, saliva, urina, lgrimas, suor, vmito e leite do seio humano estiverem sendo manipulados. Este procedimento tambm reduzir o potencial de exposio a outros microorganismos que possam causar outros tipos de infeces. No laboratrio, deve-se supor que o vrus esteja presente em todas as amostras sanguneas e clnicas contaminadas por sangue, em qualquer tecido ou rgo (que no seja a pele intacta) humano (vivo ou morto) no fixado, em culturas de HIV, em todos os materiais derivados de culturas de HIV e em/sobre equipamentos e dispositivos que tenham um contato direto com qualquer um destes materiais. J o SIV tem sido isolado no sangue, lquido cerebroespinhal e em uma variedade de tecidos de primatas no-humanos infectados. Existem dados limitados sobre a concentrao do vrus no smen, saliva, lquido cerebroespinhal, urina, leite materno humano e no lquido amnitico. No laboratrio, deve-se supor que o vrus esteja presente em todas as culturas com SIV, em animais experimentalmente infectados ou inoculados com SIV, em todos os materiais derivados de culturas de
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HIV ou de SIV e em/sobre todos os equipamentos de dispositivos que tenham um contato direto com qualquer um destes materiais. No laboratrio, a pele (especialmente quando arranhes, cortes, abrases, dermatites ou outras leses estiverem presentes) e as membranas mucosas dos olhos, nariz e boca devero ser consideradas como vias de entradas potenciais destes retrovrus. No se sabe se a infeco pode ocorrer via trato respiratrio. A necessidade do uso de objetos cortantes no laboratrio dever ser avaliada. Agulhas, instrumentos afiados, vidros quebrados e outros objetos afiados devero ser cuidadosamente manipulados e adequadamente descartados. Deve-se tomar cuidado para prevenir a formao de borrifos ou vazamento do lquido de cultura de clulas contaminadas e de outros materiais contendo o vrus ou potencialmente contaminados. Precaues Recomendadas: 1. O padro do NB-2 e prticas especiais, equipamento de conteno e instalaes so indicadas para as atividades que envolvam todas as amostras clnicas contaminadas com sangue, lquido corporal e tecidos de todos os homens ou de animais laboratoriais inoculados ou infectados com SIV ou HIV. 2. As atividades como a produo de quantidades em grande escala para laboratrios de pesquisas de HIV ou SIV, manipulao de preparaes concentradas de vrus e conduo de procedimentos que possam formar perdigotos ou aerossis, devero ser realizadas em um local de NB-2, mas usando prticas e equipamentos de conteno adicionais recomendadas para o Nvel de Biossegurana 3. 3. As atividades que envolvem volumes em escala industrial ou preparao de HIV ou SIV concentrado devero ser conduzidos em um local de NB3, usando prticas e equipamento de conteno 3. 4. Primatas no-humanos ou outros animais infectados com HIV ou SIV devero ser alojados em instalaes de NB-2 usando prticas especiais e equipamento de conteno de NBA-2. Agente: Vrus da Estomatite Vesicular (VSV) Um nmero de infeces por cepas nativas do VSV adquiridas em laboratrio foi relatado. As atividades laboratoriais com essas cepas apresentam dois diferentes nveis de risco ao pessoal do laboratrio e esto relacionadas, pelo menos em parte, histria das passagens das cepas utilizadas. As atividades que usam criaes, seus tecidos infectados e substncias virulentas isoladas destas fontes so um perigo demonstrado aos funcionrios do laboratrio e aos tratadores de animais. Os ndices de soroconverso e doena clnica em pessoas que trabalham com estes materiais so altos. Riscos semelhantes podem estar associados s cepas exticas como a Piry. Em contraste, informaes no oficiais indicam que as atividades com cepas menos virulentas adaptadas a laboratrio (por exemplo, Indiana, San Juan e Glascow) so raramente associadas com a soroconverso ou com a doena. Essas cepas so comumente utilizadas por bilogos moleculares, freqentemente em grandes volumes e altas concentraes, sob condies de conteno mnima ou nenhuma conteno primria. Algumas cepas do VSV so consideradas organismos restritos pelos regulamentos da USDA (9CFR 122.2). Ratos infectados experimentalmente no serviram como uma fonte documentada de infeco humana. Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado no lquido vesicular, tecidos de animais infectados e no sangue e secrees de garganta de homens
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infectados. A exposio aos aerossis ou perdigotos contaminados, ao contato direto da pele e da membrana mucosa com os tecidos e lquidos infectados e a autoinoculao acidental, so os perigos primrios associados com a substncia virulenta isolada. A inoculao parenteral acidental e a exposio aos aerossis infectados representam os riscos potenciais ao pessoal que trabalha com cepas menos virulentas adaptadas aos laboratrios. Precaues Recomendadas:As prticas e instalaes do nvel de biossegurana 3 so indicadas para atividades que envolvam o uso ou a manipulao de tecidos infectados e substncias virulentas isoladas de animais de criao infectados naturalmente ou experimentalmente. As luvas e a proteo respiratria so recomendadas para a necropsia e manuseio de animais infectados. As prticas e instalaes do Nvel de Biossegurana 2 so indicadas para atividades que utilizam cepas adaptadas em laboratrios de baixa virulncia. As vacinas no esto disponveis para uso em humanos. IMUNIZAO A imunizao definida como a aquisio de proteo imunolgica contra uma doena infecciosa. Prtica que tem como objetivo aumentar a resistncia de um indivduo contra infeces. administrada por meio de vacina, imunoglobulina ou por soro de anticorpos. As vacinas so usadas para induzir a imunidade ativa; sua administrao resulta numa resposta biolgica e na produo de anticorpos especficos. Assim, a imunidade induzida contra futuras infeces pelo mesmo microorganismo. A imunidade ativa dura muitos anos; a passiva induzida pela administrao de anticorpos contra uma infeco particular. Os anticorpos colhidos dos humanos so chamados imunoglobulina e os dos animais, soros. A imunidade passiva dura apenas algumas semanas. Imunizao ativa vs. passiva A imunizao ativa ocorre quando o prprio sistema imune da criana, ao entrar em contato com uma substncia estranha ao organismo, responde produzindo anticorpos e clulas imunes (linfcitos T). Esse tipo de imunidade geralmente dura por vrios anos, s vezes, por toda uma vida.Os dois meios de se adquirir imunidade ativa so contraindo uma doena infecciosa e a vacinao. A imunizao passiva obtida pela transferncia criana de anticorpos produzidos por um animal ou outro homem. Esse tipo de imunidade produz uma rpida e eficiente proteo, que, contudo, temporria, durando em mdia poucas semanas ou meses. A imunidade passiva natural o tipo mais comum de imunidade passiva, sendo caracterizada pela passagem de anticorpos da me para o feto atravs da placenta e tambm pelo leite. Essa transferncia de anticorpos ocorre nos ltimos 2 meses de gestao, de modo a conferir uma boa imunidade criana durante seu primeiro ano de vida. A imunidade passiva artificial pode ser adquirida sob trs formas principais: a imunoglobulina humana combinada, a imunoglobulina humana hiperimune e o soro heterlogo. A transfuso de sangue uma outra forma de se adquirir imunidade passiva, j que, virtualmente, todos os tipos de produtos sanguneos (i.e. sangue total, plasma, concentrado de hemcias, concentrado de plaquetas, etc) contm anticorpos.

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Classificao das vacinas 1- Vacinas vivas atenuadas Compostas de microrganismos vivos atenuados em laboratrio, que devem ser capazes de multiplicarem-se no organismo hospedeiro para que possa ocorrer a estimulao de uma resposta imune. Essa resposta imune ao microrganismo atenuado idntica a produzida pela infeco natural, pois o sistema imune incapaz de diferenciar entre uma infeco pelo microrganismo vacinal e o microrganismo selvagem. A multiplicao do microrganismo vacinal no costuma ser capaz de causar doena. Exemplos de vacinas vivas atenuadas: Sarampo, caxumba, rubola, plio-Sabin, febre amarela, varicela, BCG. 2- Vacinas inativadas Compostas de microrganismos inativados, o que significa que estes no mais se encontram vivos, logo incapazes de multiplicarem-se. A resposta imune vacina inativada principalmente humoral, com pouca ou nenhuma imunidade celular. Exemplos de vacinas inativadas: DPT,hepatite A, hepatite B, raiva, plioSalk, pneumococo, meningococo, influenza, haemophilus do tipo-b, febre tifide, clera. Nmero de doses de uma vacina As vacinas vivas atenuadas geralmente produzem imunidade prolongada com uma nica dose; exceo vacina oral da poliomielite.As vacinas inativadas requerem mltiplas doses para produzir imunidade e, eventualmente, necessitam de uma dose de reforo para a manuteno da imunidade. Intervalo entre doses de uma mesma vacina No existe um intervalo mximo entre as doses de uma mesma vacina. Assim sendo, apesar de cada vacina possuir seu prprio intervalo de tempo recomendvel entre as doses, no caso desse intervalo ter sido ultrapassado, no existe a indicao de se reiniciar nova vacinao e deve-se administrar as doses subseqentes da vacina. Por outro lado, a no obedincia do intervalo mnimo permitido entre as doses pode implicar em reduo da eficcia da vacina. Aplicao simultnea e no simultnea de diferentes vacinas No existe contra-indicao a administrao simultnea de quaisquer vacinas. A nica exceo a essa regra fica por conta da administrao simultnea das vacinas da febre amarela e clera, que devem ser separadas por um perodo mnimo de 3 semanas. A administrao no-simultnea de diferentes vacinas deve seguir os seguintes intervalos entre elas: Duas vacinas vivas atenuadas- Esperar 4 semanas Febre amarela e clera- Esperar 3 semanas Todas as outras- Sem restries Observao: A vacina oral da poliomielite no precisa ser separada por 4 semanas de outra vacina viva atenuada

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Interferncia da presena de anticorpos na resposta vacinao A multiplicao dos microrganismos nas vacinas vivas atenuadas necessria para que ocorra a resposta imune. A presena de anticorpos circulantes pode resultar numa inibio dessa multiplicao e, conseqentemente, numa imunizao ineficiente. A administrao de vacinas vivas atenuadas x anticorpos : Se a vacina foi administrada antes- Esperar 2 semanas antes de administrar o anticorpo Se o anticorpo foi administrado antes- Esperar > 3 meses antes de administrar a vacina Observao: A vacina oral da poliomielite no afetada por anticorpos, possivelmente porque o vrus plio multiplica-se no trato GI. Reaes adversas das vacinas As reaes locais so as mais freqentes e incluem dor, edema e eritema no stio de injeo. Essas reaes geralmente so leves e auto-limitadas, no entanto, em raras ocasies, podem se tornar graves (reaes de Arthus). As reaes sistmicas incluem febre, mal-estar, rash cutneo, mialgias, cefalia e anorexia. Esses sintomas usualmente ocorrem 1-2 semanas aps a administrao de vacinas vivas atenuadas e so considerados como uma doena leve provocada pela multiplicao do microrganismo da vacina. As reaes alrgicas so as mais graves, inclusive colocando a vida da criana em risco, porm, felizmente, so muito raras. Contra-indicaes vacinao 1-Contra-indicaes gerais vacinao: Alergia grave a uma dose prvia da vacina Alergia grave a um dos componentes da vacina Doena aguda moderada grave Observao: As vacinas contra influenza (gripe) e febre amarela no so recomendadas a indivduos alrgicos protena do ovo de galinha. Por no conter protenas do ovo, a vacina contra o sarampo, caxumba e rubola (SCR) pode ser seguramente aplicada em pessoas com alergia ao ovo. 2-Contra-indicaes s vacinas vivas atenuadas: Gravidez Imunossupresso Transfuso recente de produtos sanguneos 3-Contra-indicaes vacinao BCG: Todas relativas s vacinas vivas atenuadas Criana com peso < 2 Kg (impossibilidade tcnica da aplicao ID) 4-Contra-indicaes vacinao DPT (devido ao componente pertussis): Encefalopatia nos 7 dias ps-vacinao Convulses nas 72 horas ps-vacinao Choro persistente e inconsolvel, com 3 horas ou mais de durao 5-Falsas contra-indicaes vacinao: Doena aguda leve (infeces de vias areas superiores, resfriados, diarria, doenas de pele) Desnutrio Doena neurolgica estvel (p.ex. sndrome convulsiva controlada)
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Antecedente familiar de convulso Uso de corticides em doses no imunossupressoras Alergia a produtos que no compe a vacina; alergia no-anafiltica a componente da vacina Aleitamento materno Contactante domiciliar de grvida Prematuridade Uso de antibiticos Necessidade de fazer PPD Vacinao e infeco pelo HIV No se deve aplicar vacinas vivas em crianas imunossuprimidas pelo HIV (ou por qualquer outra etiologia) devido possibilidade aumentada da ocorrncia de multiplicao descontrolada dos microrganismos vacinais e reaes adversas graves. Observao: A vacinao oral da poliomielite est contra-indicada s crianas que possuem um contactante domiciliar imunossuprimido, pois existe o risco da criana expelir o vrus vacinal no ambiente e, com isso, o indivduo imunossuprimido desenvolver poliomielite paraltica. As vacinas do sarampo e varicela, apesar de serem vacinas vivas atenuadas, esto indicadas s crianas HIV positivas assintomticas ou levemente imunossuprimidas, em virtude destas duas doenas representarem infeces graves em pacientes HIV positivos. Indicaes de imunizao passiva Imunoglobulina humana combinada: Possui indicao na profilaxia psexposio da hepatite A e sarampo. Imunoglobulina humana hiperimune: Profilaxia ps-exposio da hepatite B, ttano e varicela. Soro heterlogo: Tratamento da difteria, profilaxia da raiva e ttano.

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