BioSMART ISSN: 1411-321X

Volume 7, Nomor 1 April 2005

Halaman: 14-16

Tes Diagnostik Sputum pada Penderita Tuberkulosis Paru

Diagnostic tests of sputum in patien with pulmonary tuberculosis

ADI PRAYITNO1,♥, BAMBANG SUYONO2, EDI SURYANTO3, R. SUPARTO2

1
Bagian Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret (UNS) Surakarta 57126
2
Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret (UNS) Surakarta 57126
3
Bagian Pulmonologi RS dr Muwardi, Surakarta 57126

Diterima: 25 Januari 2005. Disetujui: 11 Maret 2005.

ABSTRACT

Pulmonary tuberculosis is infection disease that caused by Mycobacterium tuberculosis. The Incidence of pulmonary tuberculosis
patient in Indonesia was note as 583.000 cases or 3.43 per 1000 people per year. This data can decreased by the accurate diagnosis, so it
can get the successfully prognoses. The aims of this research are to compare the sensitivity and the specificity one to another sputum
assay in pulmonary tuberculosis patient. The experimental laboratory-analytic with cross sectional approach done in Balai Pengobatan
dan Perawatan Penyakit Paru (BP4) Surakarta. The data were collected from patient with pulmonary tuberculosis in the number of
patient with M. tuberculosis positive. The data were analyzed by diagnostic test for known the level of sensitivity and specificity in one
to another assay. The result of this experiment are that Fluorescent assay have a highest sensitivity and than Kinyoun Gabett, ICT TB,
Phage Tek MB (100%, 100%, 90%, 75%). Another result are that fluorescent assay have a highest specificity and than Kinyoun Gabett,
ICT TB, Phage Tek MB (93.75%, 93.75%, 93.33%, 92%). The other experiment about diagnostic for tuberculosis is extremely
suggested.

Key words: diagnostic tests, sputum, pulmonary tuberculosis.

PENDAHULUAN ditemukannya BTA dalam pemeriksaan hapusan langsung

TBC paru adalah penyakit infeksi yang disebabkan oleh
Mycobacterium tuberculosis. Penyakit ini masih
merupakan masalah besar di seluruh dunia, terutama di
negara-negara yang sedang berkembang. Tahun 1990
tercatat lebih dari 45 juta kematian di dunia, sebanyak 3
juta (7%) di antaranya terjadi akibat TBC. Oleh karenanya
pada tahun 1992 dicanangkan sebagai Global Emengency
oleh WHO. Laporan lain menunjukkan bahwa Indonesia
adalah penyumbang kasus penderita TBC terbesar ketiga
setelah Cina dan India. Insidensi TBC paru di Indonesia
sebanyak 583.000 kasus pertahun atau 3,43 per 10.000
penduduk, sedang di Cina tercatat 1.779.000 kasus
pertahun dan India sebesar 1.402.000 kasus per tahun
(Aditama dan Priyanti, 2000).
Karena besarnya angka kematian akibat TBC, maka
peranan diagnosis dan perawatan menjadi sangat penting.
Pemeriksaan mikroskopik bakteriologi masih merupakan
cara rutin yang digunakan, yaitu dengan menemukan
Bakteri Tahan Asam (BTA) untuk menegakkan diagnosis
penderita TBC paru, khususnya di negara-negara yang
sedang berkembang. Banyak hal yang mempengaruhi
♥ Alamat
Alamat korespondensi:
korespondensi:
Jl. Ir. Sutami 36A,
Candikuning, Surakarta
Baturiti, 57126
Tabanan, Bali 82191.
Tel. & Fax.: +62-271-632494.
+62-368-21273.
e-mail: direkbg@singaraja.wasantara.net.id,
drgadiprayitno@yahoo.com igtirta59@yahoo.com
antara lain keadaan bahan yang diambil, jumlah atau
konsentrasi kuman dan luas lesi di paru, dan cara
pemeriksaan. Untuk mendapatkan hasil positif BTA dalam
sputum, maka di dalam sediaan tersebut harus terkandung
5.000 kuman setiap 1 mL bahan (Suradi, 1989).
Banyak pemeriksaan mikrobiologi yang telah
diperkenalkan, tetapi pemeriksaan melalui kultur masih
merupakan standar emasnya. Pemeriksaan lain seperti
Kinyoun Gabett, flourosensi, dan lain-lain mempunyai
keunggulan sendiri-sendiri. Kinyoun Gabett lebih praktis
karena hanya memerlukan waktu 4,5 menit dan 4 langkah
saja (Suradi, 1989). Pemeriksaan fluorosensi dapat
memeriksa 15 kali lebih banyak sediaan dalam waktu yang
sama dan memperoleh hasil positif lebih tinggi
dibandingkan cara konvensional (Sanjaya dan Kruyt,
1995). Pemeriksaan ICT TB dapat dikerjakan cepat, namun
memerlukan biaya mahal, tenaga profesional, dan sering
dijumpai reaksi silang (Natasja, 2001). Pemeriksaan Phage
Tek MB cepat pengerjaannya, efektif dalam biaya dan
mudah dalam pengerjaannya (Kutter, 1997).
Dari latar belakang di atas peneliti ingin mengetahui
bagaimana sensitivitas dan spesifitas pemeriksaan-
pemeriksaan tersebut dibandingkan dengan pemeriksaan
kultur sebagai standar emasnya.

 2005 Jurusan Biologi FMIPA UNS Surakarta

 PRAYITNO dkk. – Tes diagnostik sputum 15

BAHAN DAN METODE Tabel 3. Hasil pemeriksaan sputum dengan pewarnaan Kinyoun
Gabett setelah dilakukan pemeriksaan kultur
Sputum penderita sebelum dilakukan pemeriksaan
terlebih dahulu dilakukan homogenisasi dan pemekatan Pemeriksaan kultur
untuk mendapatkan kuman M. tuberculosis yang Positif Negatif Total
Pemeriksaan Positif 9 1 10
proporsional. Pemeriksaan kultur dilakukan dengan
Kinyoun Negatif 0 15 15
merujuk Suradi (1989). Pemeriksaan mikroskop fluorosensi Gabett Total 9 16 25
dikerjakan dengan merujuk Utji dan Harun (1994),
pemeriksaan Kinyoun Gabett dilakukan sesuai prosedur
Suradi (1989), pemeriksaan ICT TB dilakukan seperti Tabel 4. Hasil pemeriksaan sputum dengan ICT TB setelah
prosedur Natasja (2001), dan pemeriksaan Phage Tek MB dilakukan pemeriksaan kultur.
dikerjakan sesuai yang tertera pada petunjuk dari Biotec
Laboratories Ltd (Biotec Lab., 2000). Pemeriksaan kultur
Penelitian ini merupakan penelitian laboratorium yang Positif Negatif Total
bersifat eksperimental-analitik dengan pendekatan cross Pemeriksaan Positif 9 1 10
sectional. Subyek penelitian adalah penderita TBC paru ICT TB Negatif 1 14 15
Total 10 15 25
yang datang pada BP4 Surakarta. Teknik sampling yang
digunakan adalah insidental dengan perkiraan sampel
sebesar 25 orang. Rancangan penelitian pada penelitian ini Tabel 5. Hasil pemeriksaan sputum dengan Phage tek MB setelah
menggunakan posttest-only control group design. Data dilakukan pemeriksaan kultur.
yang diperoleh dianalisis menggunakan uji diagnostik
(Aswin, 1997). Pemeriksaan kultur
Sebagai catatan, yang dimaksud dengan sensitifitas Positif Negatif Total
adalah jumlah kasus penyakit yang terdeteksi positif baik Pemeriksaan Positif 9 1 10
oleh pemeriksaan standar emasnya maupun pemeriksaan Phage Tek Negatif 3 12 15
alat baru (kotak a) dibandingkan dengan jumlah positif MB Total 12 13 25
maupun negatif yang oleh pemeriksaan standar emasnya
terdeteksi positif (kotak a+c), artinya dapat dibedakan
antara yang benar-benar positif dengan positif semu. Analisis data menggunakan test diagnostik yang
Sedang spesifitas adalah jumlah kasus penyakit yang dibandingkan dengan pemeriksaan kultur (sebagai standar
terdeteksi negatif baik oleh pemeriksaan standar emasnya emas) memberikan hasil sebagai berikut: (i) Pemeriksaan
maupun pemeriksaan alat baru (kotak d) dibandingkan fluorosensi mempunyai sensitivitas 100% dan spesifitas
dengan jumlah positif maupun negatif yang oleh 93,75%. (ii) Pemeriksaan Kinyoun Gabett mempunyai
pemeriksaan standar emasnya terdeteksi negatif (kotak sensitivitas 100% dan spesifitas 93,75%. (iii) Pemeriksaan
b+d), artinya dapat dibedakan antara yang benar-benar ICT TB mempunyai sensitivitas 90% dan spesifitas
negatif dengan negatif semu (Azwar, 1988) 93,33%. (iv) Pemeriksaan Phage Tek MB mempunyai
sensitivitas 75% dan spesifitas 92%.
Tabel 1. Disain tabel untuk tes diagnostik. Banyak pemeriksaan mikrobiologi yang telah
dicobakan, tetapi hingga saat ini masing-masing
Standar emas mempunyai kelebihan dan kekurangan. Walaupun
Positif Negatif demikian diagnosis TBC melalui kultur masih menjadi
Alat baru Positif a b a+b pilihan dan standar emas di Indonesia dan negara-negara
Negatif c d c+d yang sedang berkembang karena pelaksanaannya sangat
a+c b+d a+b+c+d mudah dan berbiaya murah. Namun masih terdapat
Keterangan: Sensitifitas = a / a+c X 100%; Spesifitas = d / b+d X kelemahan, yaitu dalam bahan sediaan harus terkandung
100%. minimal 5000 kuman per mililiter (Suradi, 1989; Utji dan
Harun, 1994).
Kemampuan mikroskop cahaya sangat terbatas untuk
HASIL DAN PEMBAHASAN
mendeteksi kuman dalam jumlah sangat sedikit. Dengan
Data yang terkumpul dari berbagai pemeriksaan baik mikroskop fluorosensi kemampuan melihat menjadi lebih
pemeriksaan standar emas maupun pemeriksaan lainnya besar antara lain karena obyek yang dilihat akan berpendar
disajikan pada Tabel 2, 3, 4, 5. dengan penambahan zat warna auramin rhodamin (Utji dan
Harun, 1994). Auramin rhodamin adalah fluorocrom yang
Tabel 2. Hasil pemeriksaan mikroskopik sputum dengan mengikat mycolic acids dan resisten terhadap decolorizer
mikroskop fluorosensi setelah dilakukan pemeriksaan kultur. dengan asam alkohol (Murray dkk., 1995). Di bawah
Pemeriksaan kultur
mikroskop fluorosensi, kuman tahan asam akan terlihat
Positif Negatif Total berwarna kuning menyala dengan latar belakang gelap
Pemeriksaan Positif 9 1 10 (Bailey dan Scott’s, 1983; Black, 1999). Dari penelitian ini
Fluorosensi Negatif 0 15 15 tercatat sensitivitas sebesar 100%, sedang spesifitasnya
Total 9 16 25 hanya mencapai 93,75%, dengan cara ini tidak dapat
16 B i o S M A R T Vol. 7, No. 1, April 2005, hal. 14-16
dibedakan antara M. tuberculosis dengan spesies
Mycobacterium lainnya yang bukan penyebab TBC.
Pemeriksaan dengan pewarnaan Kinyoun Gabett yang
merupakan penyempurnaan dari pengecatan Ziehl Neelsen
merupakan pilihan lain untuk mendiagnosis keberadaan M.
tuberculosis (Rini, 1998). Pemeriksaan Kinyoun Gabett
dianggap lebih praktis, cukup unggul, dan memerlukan
waktu yang singkat, bahkan lebih singkat dari cara awalnya
yaitu Ziehl Neelsen (Suradi, 1989; Black, 1999). Dari
penelitian ini didapatkan bahwa pemeriksaan dengan
pengecatan Kinyoun Gabett mempunyai sensitivitas
sebesar 100% dan spesifitas 93,75%. Hasil ini sesuai
dengan pengertian bahwa bakteri M. truberculosa
mengandung sejumlah besar zat lipid pada dinding selnya
dan menyebabkan dinding sel tersebut relatif tidak dapat
ditembus oleh zat-zat warna umum, sehingga sel bakteri
tersebut tidak terwarnai oleh metode-metode pewarnaan
biasa. Kuman ini disebut Bakteri Tahan Asam (BTA)
(Suradi, 1989; Ratna, 1993).
Pemeriksaan dengan ICT TB merupakan uji serologi
dengan teknik imunodiagnosis. Uji ini dikembangkan
untuk mendeteksi respon antibodi yang signifikan terhadap
antigen M. tuberculosis (Rini, 1998). Terdapat pula
beberapa uji serologi dengan teknik ELISA, yang
membutuhkan peralatan dan ketrampilan yang khusus,
sehingga tidak semua institusi kesehatan dapat
melakukannya untuk negara yang sedang berkembang
seperti Indonesia. Lima macam antigen spesifik yang
berasal dari membran sel M. tuberculosis digunakan untuk
pemeriksaan ini (Natasja, 2001). Dari penelitian ini
didapatkan sensitivitas sebesar 90% dan spesifitas 93,33%.
Uji ini mudah dan cepat dilakukan, tetapi tidak cukup baik
untuk digunakan sebagai uji diagnosis rutin, karena banyak
faktor yang mempengaruhinya, antara lain: imunitas
penderita, stadium penyakit, dan antigen yang digunakan.
Saat ini dikembangkan cara baru untuk mendeteksi
penyakit TBC paru yang lebih mudah, cepat, murah dan
akurat, yaitu pemeriksaan Phage Tek MB. Pemeriksaan ini
merupakan pemeriksaan yang menggunakan bacteriophage
untuk menemukan keberadaan M. tuberculosis dalam
sputum. Tes ini menggunakan phage, yaitu virus yang
mempunyai reseptor khusus untuk M. tuberculosis, untuk
menggambarkan adanya bakteri tersebut yang aktif dalam
sputum. Dalam hal ini sel phage akan menginfeksi kuman
TBC dan setelah diberikan antiphage, maka phage di luar
M. tuberculosis akan mati. Tahap kedua adalah phage
tersebut berkembang biak melalui sel indung M.
tuberculosis yang akhirnya bakteri tersebut akan lisis dan
phage yang keluar akan menginfeksi sel sensor yang
ditambahkan pada tahap kedua. Kematian atau lisis sel-sel
sensor itulah akan membentuk gambaran plague, makin
luas plague makin banyak kuman yang ada (Kutter, 1997).
Pada pemeriksaan ini didapatkan sensitifitas 75% dan
spesifitas 92%. Banyak faktor yang mempengaruhi hasil ini
antara lain ketelitian, sterilitas, dan ketelatenan operator;
dituntut sangat tinggi mengingat pekerjaan ini sangat peka
terhadap berbagai macam hal.
KESIMPULAN
Pemeriksaan fluorosensi mempunyai sensitivitas 100%
dan spesifitas 93,75%. Pemeriksaan Kinyoun Gabett
mempunyai sensitivitas 100% dan spesifitas 93,75%.
Pemeriksaan ICT TB mempunyai sensitivitas 90% dan
spesifitas 93,33%. Pemeriksaan Phage Tek MB mempunyai
sensitivitas 75% dan spesifitas 92%.
UCAPAN TERIMAKASIH
Terima kasih diucapkan kepada Balai Pemeriksaan dan
Pengobatan Penyakit Paru (BP4) Surakarta, Neno Maryuni,
Melvia Navratilova, dan Nurelis.
DAFTAR PUSTAKA
Aditama, T.Y. dan Priyanti. 2000. Tuberculosis Diagnosis, Terapi dan
Masalahnya, Edisi 3. Jakarta: Laboratorium Mikrobiologi RSUP
Persahabatan Jakarta/WHO Collaborating Center for Tuberculosis.
Aswin, S. 1997. Metodologi Penelitian Kedokteran. Yogyakarta: Fakultas
Kedokteran Universitas Gajah Mada.
Azwar, A. 1988. Pengantar Epidemiologi. Edisi 1. Jakarta: PT Binarupa
Aksara.
Bailey and Scotts. 1983. Diagnostic Mycrobiology. 6th. ed., St. Louis: The
C.V. Mosby Company.
Biotec Laboratories Ltd., 2000.Fast Plaque TB a Rapid Bacteriophage
Assay for The Detectionof Mycobacterium Tuberculosis Complex in
Clinical Samples. Fast Plaque TB Catalogue No. 5/100. Brisbane:
Biotec Laboratories Ltd
Black, J.G. 1999. Mycrobiology, Principle and Explorations. 4th ed. New
Jersey: Marymount University.
Kutter, E. 1997. Phage Therapy: Bacteriophages as Antibiotics,
www.organonteknika.com.
Murray, P.R., E.J. Baron, A. Micheal, Pealler, F.C. Tenover, and R.H.
Volken. 1995. Mannual of Clinical Microbiology. 6th ed. Washington
DC.Asm Press.
Natasja, K.R. 2001. The role of ICT TB serologic test in diagnosis of
pulmonary tuberculosis. Journal of Respirindo 21 (1): 20-23.
Ratna, S.H. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek, Teknik Dan
Prosedur Dasar Laboratorium. Bogor: Lab. Mikrobiologi FMIPA
IPB.
Rini, S.N. 1998. Pemeriksaan tes uji serap imun - rapid
immunocromatography. Pekan Ilmiah FK Universitas Pajajaran
Bandung. 3 Oktober 1998.
Sandjaja, B. dan E. Kruyt. 1995. Deteksi dini tuberculosis. Majalah
Kesehatan Masyarakat Indonesia 22 (2): 137.
Suradi. 1995. Perbandingan Pemeriksaan BTA Dari Bahan Dahak
Dengan Cairan Kurasan Lambung Untuk Diagnosa Bakteriologi TB
Paru Dewasa. Surabaya: FK UNAIR/RSUD dr Sutomo.
Utji, R. dan H. Harun. 1994. Kuman tahan asam. Dalam: Syahrurachman,
A. (ed.). Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Edisi revisi. Jakarta:
Binarupa Aksara.