verso revisada

abril de 2005
1
ndice

APRESENTAO 5
CRONOGRAMA DO CURSO 6
1. XENICAL

(ORLISTAT) 7
MECANISMO DE AO 7
Estudo dirigido 1.1 Estudo estrutural do orlistat e dos triacilgliceris 8
Atividade em software 1 Xenical 8
QUESTES 1.1 9
REFERNCIAS 10
2. LIPOSTABIL

11
Estudo dirigido 2.1 Fosfatidilcolina 12
QUESTES 2.1 13
REFERNCIAS 16
3. ESTRUTURA DA PELE I CABELO 17
APNDICES EPIDRMICOS 17
A ESTRUTURA DO CABELO 18
As razes 18
A papila drmica 18
A glndula sebcea 18
Os queratincitos 19
Os melancitos 19
Atividade em software 2 Detalhando a estrutura do cabelo 19
Estudo dirigido 3.1 Atividade em software 2 19
Estudo dirigido 3.2 - Cabelo 20
Colorao natural do cabelo 20
Cabelo grisalho 20
A fibra de cabelo 21
A cutcula 22
O crtex 22
A medula 23
Estrutura microscpica e molecular 24
Estudo dirigido 3.3 Estrutura molecular do cabelo 25
Estrutura molecular o filamento de queratina 26
Protenas Associadas Queratina 27
Estudo dirigido 3.4 Queratina e filamentos intermedirios 27
QUESTES 3.1 27
Diferenas tnicas 28
Forma do cabelo 28
Atividade em software 3 - Cabelo crespo 29
QUESTES 3.2 29
REFERNCIAS 32
4. LAVAGEM DE CABELO E CONDICIONADORES 33
XAMPUS 33
Composio e caractersticas dos constituintes: 33
Agentes de lavagem 33
Estrutura de um tensoativo 33
Classificao 34
Tensoativos aninicos 34
Tensoativos catinicos 35
Tensoativos anfteros 35
Tensoativos no-inicos 36
Como funcionam 36
Espuma 37
Estabilizadores de espuma 37
2
Espessantes 38
Agentes engordurantes 38
Agentes perolantes 38
Conservantes 38
Essncias e Corantes 38
Diluente 39
Como formular um xampu 39
CONDICIONADORES 40
Como formular um condicionador 40
Estudo dirigido 4.1 Detergentes e condicionadores 41
REFERNCIAS 43
5. ESTRUTURA DA PELE II - HISTOLOGIA 44
EPIDERME 44
DERME 45
HIPODERME 45
RENOVAO DA PELE 45
Estudo dirigido 5.1 Estrutura da pele II 46
REFERNCIAS 47
6. RADIAO SOLAR - ULTRAVIOLETA 48
Estudo dirigido 6.1 Radiao UV 50
EFEITOS BENFICOS DA RADIAO SOLAR 51
Vitamina D 51
EFEITOS NOCIVOS DA RADIAO SOLAR 51
Efeitos da radiao UV no DNA 54
Estudo dirigido 6.2 - Efeitos biolgicos do UV 54
RADIAO SOLAR E PELE 54
Estudo dirigido 6.3 - UV e pele 56
Bronzeamento, filtros solares e fator de proteo solar 57
Bronzeamento 57
Atividade em software 4 - Bronzeamento 57
Estudo dirigido 6.4 58
Filtros solares 58
Filtros de efeito fsico 59
Filtros de efeito qumico 59
Mecanismo de ao dos filtros qumicos 60
Efeito sobre o coeficiente de extino molar () 60
Bloqueador, protetor e bronzeador 61
Fator de proteo solar (FPS) 62
Estudo dirigido 6.5 - Protetores, bloqueadores e bronzeadores 64
MECANISMOS DE REPARO DO DNA 65
QUESTES 6.1 68
TEXTO COMPLEMENTAR 73
CMARAS DE BRONZEAMENTO ARTIFICIAL 73
AUTOBRONZEADORES 73
DIIDROXIACETONA (DHA) 74
ERITRULOSE 75
REFERNCIAS 76
7. RADICAIS E ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO 78
INTRODUO 78
Atividade em software 5 Radicais 78
ESPCIES REATIVAS DO OXIGNIO (EROS) E RADICAL LIVRE 78
Entendendo a terminologia 78
Formao 79
Reatividade 80
Fontes de ERO: endgenas e exgenas 80
Toxicidade das ERO: danos em biomolculas 81
Oxidao de lipdios: lipoperoxidao 82
Oxidao de protenas 82
Oxidao de cidos nucleicos 83
3
Estudo dirigido 7.1 Espcies Reativas de Oxignio 85
SISTEMA DE DEFESA ANTIOXIDANTE 85
Sistema antioxidante enzimtico 86
Superxido Dismutase (SOD) 86
Catalase (CAT) 86
Glutationa peroxidade (GPx), glutationa redutase (GRH) e glutationa reduzida (GSH) 87
Sistema de defesa antioxidante no enzimtico 88
Lipossolveis 90
-Tocoferol (vitamina E) 90
Carotenides 91
Estudo dirigido 7.2 Sistema oxidante 92
REFERNCIAS 92
8. ESTRUTURA DA PELE III A MATRIZ EXTRACELULAR 94
INTEGRAO DAS CLULAS EM TECIDOS 94
Adeso celular 94
Matriz Extracelular 94
Adeso clula-matriz 95
Colgeno 95
Elastina 99
Outros componentes da matriz extracelular 99
Atividade em software 6 Colgeno 100
Estudo dirigido 8.1 - Atividade em software 5 100
Estudo dirigido 8.2 Colgeno 100
QUESTES 8.1 100
REFERNCIAS 102
9. ENVELHECIMENTO MOLECULAR DA PELE 103
TEXTO 1 - Envelhecimento intrnseco e extrnseco 103
TEXTO 2 - Descrio dos efeitos moleculares do envelhecimento da pele (I) 103
Envelhecimento extrnseco 103
Mudanas do tecido conectivo 103
Estudo dirigido 9.1 Textos 1 e 2 104
TEXTO 3 - Descrio dos efeitos moleculares do envelhecimento da pele (II) 105
Estudo dirigido 9.2 Texto 3 107
TEXTO 4 - Efeitos macroscpicos do envelhecimento da pele 107
Estudo dirigido 9.3 Texto 4 110
TEXTO 5 - O modelo micro-inflamatrio de envelhecimento da pele 110
Atividade em software 7 Diapedese 111
Estudo dirigido 9.4 Texto 5 112
Estudo dirigido 9.5 Discusso 113
TEXTO 6 - Telmeros e envelhecimento 113
Atividade em software 8 Telmeros e telomerase 113
Estudo dirigido 9.6 Texto 6 114
Estudo dirigido 9.7 Texto 6 (cont.) 115
QUESTES 9.1 116
TEXTO 7 - Panorama de alteraes moleculares ocorridas em clulas envelhecidas 116
Estudo dirigido 9.8 Texto 7 117
QUESTES 9.2 117
10. BOTOX

118
TOXINA BOTULNICA - BOTOX

118
Atividade em software 9 Ao da toxina botulnica 119
Estrutura da toxina 119
Mecanismo de Ao 119
1. Bloqueio da transmisso neuromuscular 120
2. Stio de ao 121
Restabelecimento da transmisso neuromuscular 123
1. Aparecimento de novas terminaes nervosas 123
BOTOX E ESTTICA 123
QUESTES 10.1 124
REFERNCIAS 124
4
11. DIMETILAMINOETANOL OU DEANOL (DMAE) 125
HISTRICO DO DMAE 125
NEUROTRANSMISSORES 125
Atividade em software 10 - Segundos mensageiros 125
Estudo dirigido 11.1 Atividade em software 7 126
Atividade em software 11 - Protena G 126
Estudo dirigido 11.2 Animao 8 126
Acetilcolina (ACh) 126
DMAE 128
Efeito "Cinderela" de DMAE 128
Estudo dirigido 11.3 DMAE 129
QUESTES 11.1 129
REFERNCIAS 129
12. APNDICES 131
APNDICE I - CHEMISTRY OF THE MAILLARD REACTION 131
APNDICE II - EFEITOS DO SOLVENTE E PH NAS PROPRIEDADES DOS FILTROS QUMICOS 133
APNDICE III - MEDICAMENTOS PARA EMAGRECER 134
Frmacos para tratamento da obesidade 137
Derivados -fenetilamnicos e fenilpropanolamnicos 140
Inibidores seletivos da recaptao da serotonina 141
Estudos em humanos avaliando o efeito termognico 142
REFERNCIAS (APNDICES) 145
13. FIGURAS COLORIDAS 147

5
Apresentao

O curso Bioqumica da Beleza foi preparado e ser ministrado por oito alunos de
ps-graduao do Departamento de Bioqumica do Instituto de Qumica da USP, sob
superviso do Prof. Dr. Bayardo Baptista Torres.
O tema do curso foi escolhido pelos prprios professores com o intuito de abranger
tpicos de Bioqumica que no so contemplados no curso regular da graduao ou que
possam ser aprofundados e estudados de maneira interdisciplinar.
Evidentemente, o tema muito amplo e seria impossvel montar um curso que
abordasse todos ou mesmo a maioria dos tpicos acerca de Bioqumica da Beleza, a ser
ministrado em uma semana. Diversos tpicos sobre o assunto foram excludos e no sero
portanto mencionados no curso. Os tpicos a serem abordados foram escolhidos por
apresentarem alguma abrangncia do tema, mas principalmente por permitirem explorar a
Bioqumica subjacente, ou seja, os mecanismos moleculares de funcionamento de
produtos de beleza.
Assim, o objetivo deste curso utilizar alguns tpicos da Bioqumica da Beleza
para abordar Bioqumica.
O curso foi preparado para maximizar a interao do aluno com o assunto em
estudo. Preferimos substituir a maior parte das aulas expositivas por exerccios
participativos, permitindo ao aluno adquirir o conhecimento ativamente, atravs de um
estudo orientado, da resoluo de pequenos problemas propostos e da discusso com seu
grupo e com os professores.


Adriana Carvalho
Camila Moura Egdio
Helder Nakaya
Jacqueline Salotti
Juliana Cristina Fontanari
Karina Helena Morais Cardozo
Noboru Jo Sakabe
Paula Fontes Asprino

Bayardo B. Torres


fevereiro de 2005
6
Cronograma do curso





Segunda (14) Tera (15) Quarta (16) Quinta (17) Sexta (18)
(9-9:30 h)
Recepo dos
alunos e entrega
de material
(9:30-10 h)
Abertura do curso




9-12 h
(10-12 h)
1. Xenical
4. Xampu




3. Cabelo



5. Pele

6. Radiao
UV



8. Matriz
extracelular



10. Botox

11. DMAE
12-14 h Almoo Almoo Almoo Almoo Almoo

14-17 h



2. Lipostabil

3. Cabelo

7. Radicais
e ERO

9. Envelheci-
mento da pele

Correo de
exerccios




16-17 h

Correo de
exerccios


Correo de
exerccios

Correo de
exerccios

Correo de
exerccios

Avaliao do
curso
Encerramento





7
1. Xenical

(orlistat)

Xenical um inibidor especfico das lipases de triacilglicerol (pancretica e
gstrica), utilizado em tratamento de emagrecimento. O princpio ativo de Xenical a
molcula (S)-2-formilamino-4-metil-cido pentanico (S)-1-[[(2S, 3S)-3-hexil-4-oxo-2-
oxetanil] metil]-dodecil ester, tambm conhecida por orlistat (nome genrico). Sua
frmula estrutural pode ser visualizada na Figura 1.1.


Figura 1.1 - Estrutura do orlistat (C
29
H
53
NO
5
).

Mecanismo de ao

As lipases so enzimas que catalisam a reao de hidrlise de triacilgliceris,
resultando em glicerol e cidos graxos livres, possibilitando que estes sejam absorvidos.
Os produtos da digesto lipdica que ocorrem no estmago so emulsificados pelos sais
biliares, facilitando sua digesto duodenal e, portanto, sua absoro.
Orlistat um inibidor irreversvel de lipases. Ele exerce sua atividade teraputica
no lmen do estmago e intestino delgado (Figura 1.2) ao ligar-se covalentemente aos
resduos de serina do stio ativo das lipases gstricas e pancreticas. Com o stio ativo
ocupado, as enzimas no so mais capazes de hidrolisar a gordura alimentar.



Figura 1.2 - O Xenical age inibindo as lipases, principalmente a pancretica*.

8
Estudo dirigido 1.1 Estudo estrutural do orlistat e dos triacilgliceris

Para responder as questes abaixo leia a parte de xampu da Seo 4 e consulte algum livro
texto de bioqumica.

1. Baseado na estrutura molecular do orlistat, espera-se que esta molcula seja mais
solvel em gua ou em clorofrmio?

2. Esquematize uma molcula de triacilglicerol. Esquematize os produtos da hidrlise do
triacilglicerol. Que caractersticas triacilgliceris tm em comum com detergentes?

3. Obtenha estruturas de sais biliares e faa uma anlise das molculas quanto aos grupos
polares e apolares, tendo em mente sua funo biolgica. Por que sais biliares so
importantes para a absoro de lipdios?

4. Por que voc acha que o orlistat capaz de ligar-se covalentemente enzima? (No
preciso detalhar o mecanismo de reao ou mesmo apontar a ligao na molcula)




Continuao

Como na presena de orlistat as molculas de triacilglicerol no so absorvidas
pelo organismo, o dficit calrico resultante pode ter um efeito positivo no controle de
peso. A absoro sistmica da droga no necessria para sua atividade pois o Xenical
no absorvido (97% eliminado nas fezes) e, deste modo, efeitos sistmicos, com
exceo de problemas gastrointestinais, no so esperados. Estudos em pacientes com a
terapia de Xenical com mais de dois anos de acompanhamento mostram uma perda
mdia de peso de 10%.
O uso de Xenical faz com que parte da gordura alimentar no seja digerida ou
absorvida, sendo seu destino final, a excreo. Se um paciente recebe uma dieta muito
gordurosa, o uso deste medicamento resultar numa diarria. Esse efeito colateral
indesejado, muitas vezes far com que o paciente diminua a ingesto de gordura. Uma
educao alimentar e, claro, a ausncia de problemas clnicos causados pela droga so
necessrios para o tratamento.

Atividade em software 1 Xenical

Veja como funciona o Xenical [programa instalado].


9
Questes 1.1

1. Estudo realizado com pacientes em tratamento com Xenical mostrou uma pequena
reduo de certas vitaminas (Tabela 1).

Tabela 1 - Percentual de reduo de vitaminas.
Placebo Xenical
VITAMINA A
1,0% 2,2%
Vitamina D 6,6% 12,0%
Vitamina E 1,0% 5,8%
Beta-caroteno 1,7% 6,1%

De acordo com estes dados e com o modo de ao do Xenical, responda:
a) Por que houve a reduo destas vitaminas especificamente?
b) Seria esperado que os nveis de vitamina C ou do complexo B tambm fossem alterados?
c) Quais dados devem ser adicionados tabela para que os resultados sejam
cientificamente confiveis?
d) Qual conselho os mdicos deveriam dar aos pacientes em tratamento para evitar este
quadro?

2. Dois pacientes, A e B, obesos e em tratamento com Xenical, apresentam os seguintes
hbitos alimentares:

A B
Caf da manh Ovos, bacon, lingia e leite. Pes com gelia e goiabada e
sucos
Almoo Hambrguer, batata-frita e sorvete. Arroz, feijo e bife com cerveja.
Jantar Pastel e churros Macarro, frango e bolos

a) Qual dos dois pacientes obter o melhor resultado com o medicamento?
b) Em qual dos dois pacientes o efeito colateral ser mais intenso, ou seja, quem passar
mais tempo no banheiro? Justifique.

3. Quando o Xenical foi lanado no mercado foi considerado um remdio
revolucionrio. Comparando com outros medicamentos para emagrecer, como
derivados anfetamnicos, efedrinas, diurticos e hormnios da tireide, qual seria o
grande mrito do Xenical (veja Apndice III: Medicamentos para emagrecer)? Quais
seriam suas vantagens e desvantagens? Compare com outras drogas de emagrecimento
existentes .

4. Baseado no texto e com o auxlio dos livros didticos responda as questes abaixo.
a) Xenical um inibidor competitivo, no-competitivo ou nenhum dos dois?
Justifique.
b) Se o orlistat for um inibidor competitivo, como deve ser um grfico representando
velocidade de hidrlise (ordenadas) x concentrao de gorduras (abscissas) para a
ao da lipase na presena e ausncia do inibidor?
10
c) Baseado nas respostas dos itens anteriores, como seria a ao da lipase, se a dose do
medicamento for mantida e a quantidade de gordura na alimentao for aumentada?

5. O que se espera da absoro e dos nveis de colesterol de pacientes em tratamento com
Xenical?


Referncias

Canaan S, Roussel A, Verger R, Cambillau C. Gastric lipase: crystal structure and activity.
1999Biochim Biophys Acta.. 23;1441(2-3):197-204. 1999.

http://www.1stxenicalprescription.co.uk/dieting.html

http://www.xenical.com/




Preciso de Xenical para ver se o Viagra est funcionando.

11
2. Lipostabil

Fosfatidilcolina (PC) um glicerofosfolipdio sintetizado a partir de glicerol
(Figura 2.1). Os C1 e C2 so ocupados por diferentes cidos graxos, enquanto a posio 3
ocupada por uma fosfocolina. O nome qumico usual de PC lecitina, no entanto,
comercialmente este nome usado para denominar uma mistura de lipdios que pode
conter concentraes variadas de PC. Na indstria, lecitinas so usadas na preparao de
chocolates, cremes hidratantes, suplementos nutricionais, sorvetes, queijos, etc.

(CH
3
)
3
CH
2
CH
2
CH
2
(CH
2
)
14
CH
3
N
+
O
P
O
O
O
C
1
C
2
H H
H
O O
C=O O=C
(CH
2
)
7
CH
CH
(CH
2
)
7
CH
3


Figura 2.1 - Estrutura de uma fosfatidilcolina (1-palmitoil-2-oleil fosfatidilcolina).


PC um dos principais fosfolipdios que compem a membrana plasmtica da
clula. tambm um dos principais componentes dos tensoativos naturais e uma das
formas de reservar colina, um nutriente essencial, entre outras coisas, para sntese do
neurotransmissor acetilcolina. PC secretado na bile, facilitando a emulsificao,
transporte e absoro de gorduras, uma vez que esta uma molcula anfiptica.
Em mamferos, PC pode ser sintetizada por duas vias distintas: a partir de colina,
proveniente da dieta, ou a partir de etanolamina, no fgado. Esta uma forma de garantir o
suprimento do fosfolipdio mais abundante nos mamferos. Gros, legumes, carnes e ovos
so algumas das fontes alimentares das quais possvel obter lecitina.

12

Estudo dirigido 2.1 Fosfatidilcolina

Utilize algum livro de bioqumica para responder as questes abaixo.

1. O que fosfatidilcolina? O que ela tem em comum com um detergente?

2. Entendendo a molcula
Na Figura 2.1:
a) Identifique a molcula de glicerol, a ligao ster, os cidos graxos e o grupamento
da fosfocolina.
b) Esquematize separadamente a molcula de glicerol, os cidos graxos e a fosfocolina.
Identifique a poro polar e apolar.
c) Qual regio da molcula da fosfatidilcolina ser encontrada no interior da bicamada
lipdica?

3. Em que as molculas de fosfatidilcolina podem diferir estruturalmente? Quais
propriedades so variveis entre estas molculas?

4. Compare o ponto de fuso de:
a) um cido graxo de cadeia longa com o de um cido graxo de cadeia curta.
b) de diferentes cidos graxos com nmero crescente de insaturaes.

5. Esquematize as molculas abaixo, a partir dos radicais apresentados.

a) fosfatidilglicerol
b) fosfatidilcolina
c) fosfatidiletanolamina
d) fosfatidilserina

N
+
CH
2
CH
2
CH
3
CH
3
CH
3

colina

CH
2
CH
2
NH
3
+


etanolamina

C
H
2
C H
COO-
NH
3
+

serina


6. Em que estrutura celular encontrada a fosfatidilcolina?




13
Continuao

Lipostabil e Essentiale (Aventis Pharma) so nomes comerciais de frmacos a
base de fosfatidilcolina utilizados em princpio para tratamento de alteraes hepticas e
cardiovasculares. No Brasil, este medicamento no registrado na ANVISA (Agncia
Nacional de Vigilncia Sanitria) e, portanto, a fabricao, importao, distribuio, venda
e uso so proibidos.
O primeiro relato de uso cosmtico de fosfatildilcolina foi feito pelo mdico
italiano Sergio Maggiori em um encontro internacional de mesoterapia em 1988. No
Brasil, no final dos anos 90 algumas clnicas passaram a usar injees subcutneas de
Lipostabil no tratamento de gordura localizada.
Embora a reduo de gordura localizada parea ser real, o mecanismo pelo qual o
medicamento age e a segurana do procedimento permanecem incertos. Enquanto alguns
autores (Rittes 2003, Hexsel 2003) defendem a segurana do mtodo em artigos por vezes
controversos, outros argumentam que deve haver mais estudos antes do reconhecimento e
da autorizao da tcnica (Rotunda et al 2004). Questes que ainda no foram esclarecidas
dizem respeito especificidade tissular do medicamento, concentrao que deve ser
administrada, toxicidade, contra-indicaes e efeitos malficos a longo prazo.

Questes 2.1

1. Alguns dos mecanismos propostos para a ao da fosfatidilcolina nos adipcitos
incluem
i) emulsificao e transporte de triacilgliceris das clulas de gordura;
ii) ao como detergente.
Justifique de que forma cada uma destas aes poderia ocorrer. Leia a Seo 4 sobre
detergentes.

2. A figura abaixo foi extrada do artigo de Rotunda et al, 2004. A Tabela 1 mostra quais
so os constituintes da frmula injetvel de fosfatidilcolina. Desoxicolato de sdio um
sal biliar.

Tabela 1 - Frmula da fosfatidilcolina injetvel
Concentrao (massa/volume)
Fosfatidilcolina 5 %
Desoxicolato de sdio 4,75 %
lcool benzlico 0,9 %
gua 100 ml


14
CHOR
2
CH
2
O
P
O
O
OCH
2
CH
2
N
+
CH
3
CH
3
CH
3
CH
2
OR
1
Fosfatidilcolina
R
1
e R
2
= Resduos de cidos graxos

C
CH
3
ONa
O
O H
CH
3
OH
C H
3
H
Desoxicolato de sdio

CH
2
OH
lcool benzlico



a) Observe a estrutura de desoxicolato e destaque os grupamentos polares e apolares. Voc
acha que a molcula predominantemente polar ou apolar? Que propriedades o
desoxicolato de sdio e a fosfatidilcolina tm em comum? Veja sua resposta questo 3
do Estudo dirigido 1.1 de Xenical.
b) Por que se usa desoxicolato de sdio na formulao de Lipostabil?


3. A Figura 2 abaixo, extrada do mesmo artigo de Rotunda et al, 2004, mostra um
experimento no qual estimada a lise celular analisando a liberao de lactato
desidrogenase no meio de cultura. Em A, um ensaio metablico mostra a viabilidade
celular. Neste ensaio, clulas metabolicamente ativas alteram a cor de um marcador, o
qual detectado fazendo uso de um espectrofotmetro. Desta forma, a medida de
absorbncia diretamente proporcional ao nmero de clulas vivas. Em B, a medida de
lactato desidrogenase no meio de cultura, quantificada por espectrofotmetro, indica o
rompimento da membrana plasmtica.
Abs.490nm
0
0,5
1
1,5
0
0,005 0,05 0,5
A
Concentrao (%)

0
0,5
1
1,5
0 0,005 0,05 0,5
B
Concentrao (%)
2
Abs.490nm

Figura 2 - (A) Ensaio metablico da viabilidade de queratincitos expostos ao Lipostabil

( ) e desoxicolato de sdio ( ). A absorbncia relacionada diretamente com a
viabilidade celular. (B) Ensaio de lactato desidrogenase liberado por clulas expostas ao
Lipostabil

( ) e desoxicolado de sdio ( ). As barras representam um desvio padro.

15


a) Descreva o que acontece quando so ministradas diferentes concentraes de soluo
de fosfatidilcolina (Lipostabil

) e de desoxicolato de sdio.
b) O que pode ser concludo a partir desta figura?


4. A Figura 3 abaixo mostra a ao da soluo fosfatidilcolina + desoxicolato de sdio
(DOC) ou apenas DOC em gordura e msculo sunos, bem como a administrao do
detergente Empigen.


Figura 3 - Extrada de Rotunda et al, 2004: microscopia de bipsias de pele de porco. (a)
Adipcitos controle e (b) adipcitos depois de injeo da frmula de fosfatidilcolina. (c)
Adipcitos controle e (d) adipcitos depois de injeo desoxicolato. (e) Msculos controle
e (f) msculos depois de injeo da frmula de fosfatidilcolina. (g) Tecido adiposo depois
de injeo do detergente Empigen.

a) Por que a lmina (g) foi tratada com Empigen?
16
b) Aps analisar estes experimentos, qual mecanismo de ao do Lipostabil se torna
evidente?
c) Que risco imediato voc percebe neste tratamento?
d) Na sua opinio, os resultados so conclusivos quanto ao modo de ao do Lipostabil?
Que outro experimento voc proporia?

Referncias

Ablon G, Rotunda AM. 2004. Treatment of lower eyelid fat pads using hosphatidylcholine:
clinical trial and review. Dermatol Surg. 30(3):422-7.

Berg, Jeremy M.; Tymoczko, John L.; and Stryer, Lubert. 2002. Biochemistry. New York:
W.H. Freeman and Co.

Cooper, Geoffrey M. Sunderland MA. 2000. The Cell - A Molecular Approach. 2
nd
ed.
Sinauer Associates Inc.

Hexsel D, Serra M, Mazzuco R, DalForno T, Zechmeister D. 2003 Phosphatidylcholine
in the treatment of localized fat. J Drugs Dermatol. 2(5):511-8

Rittes PG. 2003. The use of phosphatidylcholine for correction of localized fat deposits.
Aesthetic Plast Surg. (4):315-8

Rittes PG. 2001. The use of phosphatidylcholine for correction of lower lid bulging due to
prominent fat pads. Dermatol Surg. 27(4):391-2.

Rotunda AM, Suzuki H, Moy RL, Kolodney MS. 2004. Detergent effects of sodium
deoxycholate are a major feature of an injectable phosphatidylcholine formulation used for
localized fat dissolution. Dermatol Surg. 30(7):1001-8.

Voet , D and Voet, J.G. 1995. Biochemistry 2
nd
ed.. John Wiley & Sons, Inc, New York
Pginas: 281; 286; 299; 320; 664; 714; 763

http://www.anvisa.gov.br/divulga/noticias/2002/301202.htm carta da ANVISA

http://www.heilpflanzen-welt.de/homoeopathie/apotheker-lexikon

http://www.woodmed.com/Phos%20Choline.htm

http://www.dermatologia.net/noticias/lipostabil_alerta.htm

http://www.dermatologia.net/estetica/fosfatidilcolina.htm

http://surgery.org/press/news-release.php?iid=208&section=news-lipoplasty

http://www.americanlecithin.com/lecithin.pdf
17
3. Estrutura da pele I cabelo

A pele forma a superfcie externa contnua ou tegumento do corpo, sendo o maior
rgo, constituindo quase um sexto do seu peso total. Possui quatro funes principais:

Proteo: a pele fornece proteo contra a luz ultravioleta e agresses mecnicas,
qumicas e trmicas; sua superfcie relativamente impermevel impede a desidratao
e atua como uma barreira fsica invaso por microrganismos.
Sensibilidade: a pele o maior rgo sensitivo do corpo e contm vrios
receptores para o tato, presso, dor e temperatura.
Termorregulao: em humanos, a pele um importante rgo de termorregulao.
O corpo isolado contra a perda de calor pela presena de plos e tecido adiposo
subcutneo (insulao). A perda de calor facilitada pela evaporao do suor na
superfcie cutnea e aumento do fluxo sangneo atravs da rica rede vascular da
derme.
Funes metablicas: o tecido adiposo subcutneo constitui um importante
reservatrio de energia, principalmente na forma de triacilgliceris. Por exemplo, a
vitamina D sintetizada na epiderme.

Em diferentes regies do corpo a pele varia em espessura, cor, presena de plos,
glndulas e unhas. Apesar dessas variaes que refletem diferentes demandas funcionais,
todos os tipos de pele possuem a mesma estrutura bsica. A pele espessa cobre a palma da
mo e a sola dos ps, possui glndulas sudorparas, mas no possui folculos pilosos,
msculos eretores do plo e glndulas sebceas. A pele delgada cobre a maior parte do
resto do corpo, contm folculos pilosos, msculos eretores do plo, glndulas sudorparas
e glndulas sebceas.
A superfcie externa da pele consiste de um epitlio pavimentoso estratificado
queratinizado denominado epiderme; sua espessura varia de acordo com as foras
funcionais e as influncias de desidratao s quais submetida.
A epiderme sustentada e nutrida por uma camada espessa de tecido fibroelstico
denso denominado derme, que altamente vascularizada e contm muitos receptores
sensitivos. A derme fixada aos tecidos subjacentes por uma lmina de tecido frouxo
denominada hipoderme ou camada subcutnea, que contm quantidade varivel de tecido
adiposo (Figura 3.1).


Figura 3.1 - Ver na Seo 13 "Figuras coloridas".

Apndices epidrmicos

O cabelo ou plo composto por clulas epidrmicas mortas que passaram por um
processo de queratinizao incluindo a expresso diferencial de queratinas
especficas. derivado dos folculos capilares ou pilosos, que so invaginaes
que se projetam da derme ou hipoderme. Os msculos eretores do plo tornam os
plos arrepiados para uma melhor insulao.
18
As glndulas sebceas so anexos dos folculos capilares e esto inseridas na
derme e hipoderme. So predominantes no rosto, pescoo e parte superior do corpo.
Elas secretam por secreo holcrina, na qual a clula secretora morre e torna-se o
prprio produto de secreo da glndula. As clulas mortas so repostas por mitose
na periferia da glndula. A secreo o sebo, uma mistura de triglicrides e
colesterol tipo cera. Funciona como um agente protetor e mantm a textura da pele
e a flexibilidade do cabelo.
As glndulas sudorparas crinas so glndulas tubulares em espiral, esto na
camada profunda da derme ou sobre a hipoderme e esto presentes em todo o
corpo. A sua funo primria o resfriamento por evaporao (transpirao).
As glndulas sudorparas apcrinas so glndulas tubulares que desembocam nos
folculos pilosos nas axilas e regies urogenitais. A secreo uma mistura de
protenas, carboidratos e ons frricos que no possui odor, porm torna-se ftida
aps ao de bactrias comensais da pele.

A estrutura do cabelo

As razes

Esto protegidas na derme, dentro do folculo piloso, onde o cabelo gerado e
colorido (Figura 3.2).

Figura 3.2 - Ver na Seo 13 "Figuras coloridas".



A papila drmica

O folculo piloso o resultado de uma associao e interao dos componentes
dermal e epidermal. Localizada a 4 mm abaixo da pele (Figura 3.2), a papila drmica
formada por tecido conectivo que secreta grandes quantidades de matriz extracelular (ver
Seo 8). Altamente vascularizada, a papila a fora real que dirige o folculo, provendo
toda informao necessria para a multiplicao e diferenciao das clulas da matriz e,
deste modo, regulando o ciclo de vida do cabelo.

A glndula sebcea

O folculo tem uma ou mais glndulas sebceas que, por sua vez, contm uma
grande quantidade de clulas, os sebcitos, que so preenchidos por lipdios (Figura 3.2).
A glndula libera seus lipdios na forma de uma substncia gordurosa, o sebo. Em
quantidades normais, o sebo essencial para a lubrificao e proteo da fibra capilar
mantendo sua flexibilidade e brilho. Controlado por hormnios, o correto funcionamento
da glndula sebcea pode se tornar irregular, produzindo muito ou pouco sebo, o que
acaba prejudicando o cabelo. Se produzido em excesso, pode tornar o cabelo oleoso e
pesado. Por outro lado, a falta de sebo pode tornar o cabelo danificado, seco ou opaco.
19

Os queratincitos

Os queratincitos do folculo piloso so clulas que se multiplicam numa taxa
muito maior do que os queratincitos da pele (Figura 3.2). Alm disso, eles se diferenciam
para formar as diferentes estruturas do cabelo. A produo e armazenamento de queratina,
um processo denominado queratinizao, causa um endurecimento destas clulas, levando
desintegrao de seus ncleos e conseqente morte.

Os melancitos

Os melancitos so clulas grandes presas no topo da papila drmica (Figura 3.2),
que produzem o pigmento melanina e o transferem aos queratincitos, que formam o
crtex da fibra capilar (ver abaixo). Os melancitos usam seus dendritos para injetar os
pequenos grnulos de pigmento. Deste modo, o cabelo incolor no incio. Diferentemente
da pele, os melancitos do folculo piloso no precisam da luz do sol para produzir
melanina.
Os melancitos produzem a melanina em organelas especializadas chamadas de
melanossomos. A transferncia dos melanossomos dos melancitos para os queratincitos
ocorre por um processo ainda no totalmente esclarecido. As hipteses so de que o
melanossoma injetado diretamente no queratincito ou ainda que ocorre fagocitose da
organela na extremidade dendrtica do melancito.
interessante notar que a melanina produzida por uma clula da pele consegue
suprir at 40 queratincitos, enquanto que uma do cabelo, apenas 4 ou 5.
As diferenas de colorao so devidas s diferenas no nmero, tamanho e arranjo
dos melanossomos.

Atividade em software 2 Detalhando a estrutura do cabelo

Veja um modelo virtual de cabelo em:
http://www.hair-science.com/_int/_en/R3D/US/droit_index.htm



Estudo dirigido 3.1 Atividade em software 2

1. Localize a papila drmica no modelo.

2. Localize a matriz do cabelo.

3. Localize a zona queratingena.

4. Localize a glndula sebcea.




20
Estudo dirigido 3.2 - Cabelo

1. Voc acha que a penltima frase do trecho sobre melanina na pele e no cabelo faz
sentido? Discuta.
interessante notar que a melanina produzida por uma clula da pele consegue suprir
at 40 queratincitos, enquanto que uma do cabelo, apenas 4 ou 5.

2. Faa um esboo de um fio de cabelo, com as principais estruturas e suas funes
principais, mostrando o processo de colorao de um fio de cabelo. Use o texto e a
animao.



Colorao natural do cabelo

A melanina existe na forma de dois pigmentos: eumelanina e feomelanina.
Eumelanina na verdade um polmero que ocorre em grnulos dentro dos melanossomos
em forma semelhante a um gro de arroz e sua colorao varia de vermelho escuro a preto.
Ela gerada a partir da tirosina, por ao da tirosinase. Feomelanina ocorre em
melanossomos com uma forma menos precisa e pode ser vista na forma de pontos difusos.
Sua colorao varia de amarelo para vermelho. Difere da eumelanina, porque, alm da
tirosina, outro aminocido, a cistena, est envolvido em sua produo.
A proporo destas duas melaninas determina a colorao do cabelo. Porm, fcil
entender que o cabelo negro dos japoneses contm virtualmente somente eumelanina e que
o cabelo ruivo dos irlandeses seja rico em feomelanina. mais surpreendente descobrir
que o cabelo loiro dos escandinavos formado por eumelanina e no feomelanina. Isto
est ligado imensa quantidade de misturas possveis destes dois pigmentos. Por isso, a
distribuio de melanina, determinada pela herana gentica, oferece uma paleta infinita
de cores, do loiro mais claro ao negro mais escuro.
Outros aspectos e biossntese da melanina sero abordados mais adiante (Seo 6).
Cabelo grisalho

Quando o cabelo cresce, ele pigmentado ou branco. A aparncia grisalha do
cabelo somente um produto de uma iluso de ptica, produzido pela mistura de um
cabelo colorido e cabelo branco.
O embranquecimento do cabelo pode ser explicado por uma incapacidade de
alguns melancitos em produzir pigmentos e de outros em transferir o pigmento aos
queratincitos.
No entanto, dado que aps receberem a melanina para sua colorao ocorre morte
celular dos queratincitos, para que o cabelo continue com sua cor natural preciso que
haja uma constante renovao dos mesmos. Isso feito por meio das chamadas clulas-
tronco, capazes de se diferenciar em vrias outras, inclusive em melancitos. Desse modo,
cientistas da Universidade de Harvard e do Hospital Infantil de Boston descobriram
recentemente que a perda gradual dessas clulas no diferenciadas est, literalmente, na
raiz do cabelo grisalho. Mais especificamente, no folculo capilar, estrutura que ancora o
cabelo na pele.
21
Experimentos em camundongos comprovaram a descoberta de que existe um gene,
o Bcl2, que fundamental para proteger as clulas-tronco no momento em que o folculo
capilar est em estado de dormncia, sem crescimento de cabelo (algo que ocorre em cerca
de 10% a 15% dos fios em qualquer momento). A equipe estudou camundongos que no
tinham o gene protetor Bcl2. O efeito foi dramtico: os camundongos mal nasceram, logo
ficaram grisalhos, por terem perdido as clulas-tronco que dariam origem aos melancitos.
Portanto, problemas com esse gene podem estar associados ao caso de pessoas que ficam
com os cabelos brancos prematuramente. Os estudos com camundongos tambm
revelaram uma relao clara entre a idade do animal, o nmero de clulas-tronco e a
quantidade de plo grisalho. Os testes foram reproduzidos em amostras do couro cabeludo
de seres humanos e o resultado foi o mesmo. Os pesquisadores imaginam que exista
algum mecanismo no folculo que deixe de funcionar com o envelhecimento, causando a
morte das clulas-tronco e tornando o cabelo grisalho.
O mesmo mecanismo celular que fez os camundongos ficarem grisalhos antes da
hora poderia ser til para atacar o melanoma, pois esse tipo de cncer de pele se
caracteriza pela proliferao acelerada de melancitos. Esse mecanismo poderia ser
imitado por uma droga capaz de envelhecer as clulas do melanoma.

A fibra de cabelo

A Figura 3.3 mostra diferentes estruturas que compem um fio de cabelo.

(a)




22
(b)


Figura 3.3 - (a) Imagens de microscopia eletrnica de varredura de um fio de cabelo e (b)
esquema de um fio de cabelo.


A cutcula

A cutcula o envelope externo da fibra do cabelo (Figura 3.3). As clulas que a
formam se chamam escamas e so extremamente pequenas e incolores. Elas so unidas
por um cimento intercelular rico em lipdios, sobrepondo-se umas s outras como telhas,
formando camadas de 3 a 10 clulas. Como as extremidades livres das clulas esto
orientadas para a ponta do cabelo, elas podem exercer seu papel principal que proteger o
crtex. A cutcula a parte do cabelo sujeita aos ataques dirios e as propriedades
cosmticas dos produtos para cabelo dependem de seu estado.

O crtex

O crtex o corpo real da fibra (Figura 3.3). Representando 90% de seu peso total,
ele formado por clulas preenchidas por queratina e esta organizao que d fibra
suas propriedades marcantes. Ao longo da maturao do cabelo, estas clulas corticais se
tornam alongadas e chegam a atingir cerca de 100 micrmetros. Arranjadas ao longo do
cabelo, elas so mantidas por uma substncia intercelular composta por queratina flexvel,
rica em lipdios. E tambm no crtex que os gros de melanina que do cor ao cabelo so
encontrados. A sua nica forma de proteo uma fina camada de sebo e a cutcula.
23
A medula

A medula, ou canal medular, est situada no centro da fibra e sua presena ao
longo do cabelo, geralmente, descontnua ou at ausente (Figura 3.3). Parece que as
clulas que a compem rapidamente degeneram, deixando espao para bolhas de ar. Em
humanos, o seu papel ainda desconhecido, porm, em alguns animais, esta estrutura
alveolar parece possuir um papel essencial na termorregulao.
24
Estrutura microscpica e molecular

O componente primrio da fibra do cabelo a queratina, uma protena
mecanicamente dura. Est presente em todos os vertebrados superiores, em unhas, plos,
chifres e penas. Existem mais de 50 genes para queratina que so expressos de modo
tecido-especfico.
(A) O cabelo tpico possui ~20 m de dimetro e constitudo de clulas mortas.
Cortando um fio de cabelo, podemos ver a disposio das
longas clulas corticais (1) envolvidas por uma substncia
intercelular rica em lipdios e protenas (2).
(B) Dentro de cada clula cortical, h uma srie de
macrofibrilas (~2000 de dimetro) de queratina (3)
dispostas na mesma direo da clula. Pequenos grnulos de
melanina (4) tambm podem ser visualizados.
(C) Em aumento maior, podemos ver que cada
macrofibrila composta por inmeros elementos menores, as
microfibrilas (~80 de largura) (5).
(D) Cada microfibrila aparece como um arranjo de
elementos menores denominados protofibrilas (6).
(E) Aumentando ainda mais, possvel visualizar as 4
cadeias de queratina formando uma alfa-hlice (7).
(F) E, por ltimo, a estrutura molecular de uma das
cadeias de queratina (8).

Dentro do crtex, a queratina organizada em
protofibrilas e composta por quatro cadeias polipeptdicas.
Esta estrutura mantida por ligaes entre os tomos das
diferentes cadeias. Estas ligaes podem ter foras variveis:
fracas como as pontes de hidrognio ou fortes como as
ligaes inicas ou pontes dissulfeto.
Os lipdios representam 3% da composio do cabelo.
Eles so produzidos no bulbo capilar e formados a partir de
esterides, cidos graxos e ceramida. Esto presentes
essencialmente no cimento intercelular do crtex e na
cutcula e conferem ao cabelo uma certa impermeabilidade,
garantindo a coeso da fibra capilar. A mistura de lipdios
produzidos pela glndula sebcea forma um filme na
superfcie da pele e lubrifica o fio de cabelo, preservando
assim sua flexibilidade e brilho.
A melanina, pigmento responsvel pela cor natural do
cabelo, representa apenas 1% da composio total do cabelo.
A gua constitui, em condies normais, 12 a 15% da
composio do cabelo. Alguns dos outros elementos so
provenientes do ambiente e esto presentes em pequenas
quantidades. Outros elementos vm diretamente do
organismo. Como a raiz do cabelo possui uma boa irrigao
sangunea, substncias trazidas pelo sangue podem ser
incorporadas no cabelo durante sua formao.

25
Estudo dirigido 3.3 Estrutura molecular do cabelo

Use algum livro de bioqumica para responder as questes abaixo. Referncia
Biochemistry (1995) Voet e Voet, Wiley and sons, NY, cap7.

1. Descreva a estrutura de um dmero de queratina. Inclua em sua descrio os seguintes
itens:
a) Nmero mdio de resduos em cada segmento polipeptdico.
b) Caractersticas cido/base de cada segmento (tipo I ou tipo II).
c) Estrutura primria e secundria.
d) Foras que estabilizam a estrutura.
e) Orientao das cadeias.
f) Nome dado ao tipo de estrutura de protena formada.

2. Qual a lgica da montagem de um fio de cabelo? Faa uma analogia com alguma
coisa do mundo macroscpico (dica: voc assistiu O nufrago, com Tom Hanks?
Voc se lembra como ele amarrou o barco?)

3. Por que a queratina forma uma alfa-hlice? Se ela usada para formar um fio, porque
no simplesmente esticar a molcula o mximo possvel, ao invs de gastar
aminocidos a cada volta da hlice?

4. Por que existe uma organizao peridica de aminocidos hidrofbicos em um dmero
de queratina?

5. Esquematize uma ponte dissulfeto ligando duas cadeias polipeptdicas. Para que elas
servem em um fio de cabelo?

6. Baseado em sua resposta anterior, voc espera que diferentes disposies de pontes
dissulfeto gerem filamentos diferentes de alguma forma? Isso se correlaciona com sua
experincia diria?

7. Por que tratamentos de cabelo como permanentes, alisamentos, etc. empregam produtos
com cheiro ruim? Qual a origem do cheiro ruim?

8. Voc diria para sua amiga que no cursou Bioqumica da Beleza que alisamento e
permanente so a mesma coisa, molecularmente falando? Esquematize as etapas do
processo de alisamento ou permanente.

9. Estruturalmente, em que diferem as queratinas duras (cabelo, unhas e cornos) e as moles
(pele, calos)?

10. Questes 5 e 6, pg. 189, Cap. 7, de Biochemistry - Voet e Voet, Wiley and Sons, NY,
segunda edio (1995).


26
Estrutura molecular o filamento de queratina

A queratina faz parte de um grupo de protenas de fibras do citoesqueleto de
eucariotos denominado Intermediate Filament Proteins (IF). A principal funo dessas
protenas estrutural, dando suporte mecnico para a membrana plasmtica quando esta
entra em contato com outras clulas ou com a matriz extracelular. Dentro deste conjunto
de protenas filamentosas, a queratina corresponde aos tipo I queratina cida e II
queratina bsica. Elas so expressas apenas em clulas epiteliais, associando-se numa
razo de 1:1, formando heterodmeros. Portanto, no existe nenhum filamento de queratina
formado por homodmeros.
As queratinas compem a classe de protenas IF com maior diversidade, com um
grande nmero de isoformas diferentes. Em tecidos epiteliais duros existem
aproximadamente 10 tipos de queratinas diferentes (mais especificamente unhas, cabelo,
l) e mais 20 tipos denominados citoqueratinas, que so geralmente encontradas
revestindo cavidades internas do corpo.
As protenas filamentosas no apenas compartilham a caracterstica de possuir
filamentos de 10 nm de dimetro, mas tambm possuem um domnio estrutural em
comum: uma estrutura de -hlice central. Este domnio, que conservado em todas as
protenas IF, consiste de quatro longas -hlices, separadas por trs regies no
helicoidais, que possuem posio altamente conservada evolutivamente (Figura 3.4). Esta
estrutura flanqueada por domnios globulares das regies N- e C- terminais, que variam
muito em peso molecular e seqncia entre as diferentes protenas IF.



27
Figura 3.4 O esquema mostra os nveis de organizao e macroestrutura das protenas
IF. Elas formam hetero ou homodmeros com um domnio central de -hlice altamente
conservado flanqueado por estrutura no helicais, que variam em tamanho e seqncia. O
domnio central contm quatro elementos espaadores no helicais (spacers). A partir
da, h a formao de um tetrmero por dmeros idnticos dispostos anti-paralelamente.
Estes tetrmeros ainda se agregam ponta-a-ponta, formando um protofilamento e pares
destes se associam lateralmente, formando uma protofibrila. A associao lateral de quatro
protofibrilas que vai formar um filamento cilndrico de 10 nm de dimetro.

Protenas Associadas Queratina

As protenas KAPs constituem uma matriz protica, onde as protenas IFs se
encontram depositadas. Elas podem ser divididas em 3 grandes grupos, de acordo com sua
composio protica: (i) grupo das glicina-tirosina; (ii) grupo sulfrico; (iii) grupo ultra-
high sulfrico. Esses grupos so codificados por seqncias gnicas diferentes.


Estudo dirigido 3.4 Queratina e filamentos intermedirios

1. Aps ler atentamente o trecho sobre o filamento de queratina, voc aprendeu que esta
protena faz parte de uma famlia (IF Proteins). A partir da, responda s seguintes
perguntas:
a) Que tipo de protenas so essas e qual sua principal funo?
b) Como voc poderia correlacionar a funo dessas protenas com sua estrutura?
c) O que faz com que estas protenas compartilhem um mesmo grupo? Esta
caracterstica pode ser correlacionada sua funo?

2. Experimentos com camundongos transgnicos expressando polipeptdeos da queratina
K14 mutantes (formam os heterodmeros com a queratina K4 mas no conseguem
formar os protofilamentos) resultaram em animais com anormalidades na pele, como
bolhas, semelhante ao que ocorre em uma doena de pele humana: Epidermlise
Bullosa Simples (epidermolysis bullosa simplex). Anlises histolgicas das regies mais
afetadas mostraram alta incidncia de clulas basais epidermais mortas. Considerando a
funo de estruturao celular das protenas filamentosas, como voc explica esta morte
celular?

3. Qual seria uma razo provvel para um dmero de queratina sempre ser constitudo de
tipo I e II, cido e bsico, respectivamente?


Questes 3.1

1. O que um domnio proteico? Por que a montagem de um filamento intermedirio
envolve a formao de um tetrmero antiparalelo? Isso se correlaciona idia de
domnio proteico?

28
2. Vamos nos concentrar em uma funo biolgica bem importante: a respirao. Trs ou
quatro minutos sem oxigenao j pode ser fatal para o tecido nervoso. Portanto, esta
funo extremamente importante para a manuteno da vida. Ela mantida, dentre
outras coisas, pela hemoglobina, que se liga ao oxignio nos pulmes entregando-o aos
tecidos. Agora pense em todo o processo evolutivo que ocorreu e continua ocorrendo
at hoje e reflita sobre a seguinte pergunta: ser que a molcula de hemoglobina
evolutivamente conservada ao longo da escala evolutiva?

Se a funo de uma protena pode estar (e est na maioria das vezes!) altamente
relacionada sua estrutura e, pelo que sabemos, a estrutura quaternria de uma
protena depende de sua estrutura primria (dada pela sua seqncia de DNA), o que
voc espera que ocorra ao provocarmos uma mutao na seqncia gnica nos
domnios altamente conservados das -hlices das protenas IF? E se essa mutao
ocorrer nos domnios altamente variveis N- e C-? Como voc faria para testar sua
hiptese?

3. Aps muitos experimentos, cientistas observaram que o encurtamento do N-terminal de
monmeros de protenas IF provocava o truncamento da organizao proteica destas,
com exceo da queratina. No entanto, o mesmo no ocorreu quando os experimentos
foram repetidos na poro do C-terminal. O que se pode concluir a partir da? Esse
resultado foi surpreendente? Por qu?

4. Como a descoberta de que as mutaes no N-terminal inviabilizam a organizao dos
protofilamentos, podem auxiliar nos estudos da funo destas protenas dentro de uma
clula, atravs de tcnicas como transformao ou microinjeo?


Diferenas tnicas

Forma do cabelo

Independente do fato de ser liso, ondulado, crespo ou encaracolado, um cabelo
sempre um cabelo. Sua composio bsica de queratina sempre a mesma.
Por outro lado, a forma do cabelo varia enormemente. As diferenas dependem em
grande parte da seco transversal do cabelo e de como ele cresce. Estudos indicam que
estes dois elementos esto intimamente relacionados forma do folculo piloso e sua
posio no couro cabeludo.
A seco transversal de um cabelo uma elipse que pode tender mais ou menos
para um crculo (Figura 3.5). Uma analogia com outros materiais mostra como a seco
transversal pode influenciar na aparncia do cabelo no espao: nas mesmas condies de
tamanho, uma faixa fina se enrola muito mais facilmente do que uma corda cilndrica. Por
isso, os asiticos possuem cabelo com uma seco transversal mais grossa e cilndrica,
enquanto que os africanos possuem uma seco transversal achatada e fina, formando o
cabelo crespo e encaracolado com anis de at poucos milmetros de dimetro.
Caucasianos possuem uma seco transversal muito mais variada, porm sendo mais ou
menos elptica. O cabelo dos caucasianos vai desde ondulado at bastante cacheado
(Tabela 3.1).

29
Atividade em software 3 - Cabelo crespo

Veja um modelo virtual de cabelo crespo em:
http://www.hair-science.com/_int/_en/R3D/US/frise_index.htm



Seco transversal de fio de cabelo de asiticos
Seco transversal de fio de cabelo de africanos
Seco transversal de fio de cabelo caucasianos
Figura 3.5 Estrutura do cabelo em diferentes etnias.

Tabela 3.1 Diferenas de cabelos entre raas.
Raa\Cabelo Crescimento Densidade Caracterstica
Asiticos 1,3 cm / ms +
O modo como o folculo est implantado faz
com que o cabelo cresa reto, perpendicular ao
coro cabeludo.
Africanos 0,9 cm / ms ++
Como o cabelo cresce quase paralelo ao coro
cabeludo, ele cresce enrolado nele mesmo.
Caucasianos 1,2 cm / ms +++
Cresce num ngulo oblquo ao coro cabeludo e
levemente curvado.


Questes 3.2

1. Embora a cor do cabelo seja determinada geneticamente estabelecendo concentrao e
proporo de melaninas, alguns fatores ambientais, bem como doenas, podem
30
influenciar na aparncia final. Relacione abaixo a aparncia do cabelo e o possvel fator
de causa.

( ) Fatores nutricionais podem causar alteraes apenas em casos extremos, sendo um
exemplo o Kwashiorkor, causado pela deficincia prolongada de protena na dieta. As
alteraes se restringem aos momentos de deficincia nutricional.
( ) Problema relacionado s altas concentraes de cobre na gua, capazes de se associar
ao cloro, resultando em um composto que capaz de ligar-se cutcula do cabelo
(Goldschmidt 1979, Goette 1978). Esta aparncia pode ocorrer com gua de piscina,
gua da torneira rica em cobre ou mesmo aps o uso de cosmticos contendo extratos
de plantas.
( ) Albinismo tipo 1 (deficincia na enzima tirosinase).
( ) Fumantes crnicos - substncias proveniente do tabaco bloqueiam a produo de
pigmentos por melancitos. O alcatro capaz de reagir quimicamente, aderir e tingir
os fios brancos.
( ) Fenilcetonria - deficincia na fenilalanina hidroxilase do fgado, incapacitando o
organismo de converter fenilalanina a tirosina.
( ) O cabelo torna-se mais escuro.
( ) Sndrome de Menkes - doena recessiva ligada ao cromossomo X. Os indivduos
portadores no so capazes de absorver cobre, necessrio, entre outras funes, para o
funcionamento da tirosinase.


(A) Reduo da produo e incorporao de pigmentos no fio de cabelo. Cabelos
castanho-escuros adquirem um tom vermelho-ferrugem, cabelos claros tornam-se
loiros. Algumas vezes h alternncia entre pores claras e escuras ao longo do fio de
cabelo.

(B) Perda de cor no cabelo, pele e olhos. Estes so apenas alguns sintomas leves desta
doena que pode incorrer em retardo mental grave.
(C) Cabelo torna-se curto, quebradio e retorcido (pixaim) com o passar da idade. H
perda de cor no cabelo, alm destas alteraes na estrutura do cabelo. H sintomas
relacionados com a pele e com sistema nervoso central. Administrao subcutnea de
cobre-histidinato capaz de reverter os sintomas.
(D) O indivduo afetado apresenta ausncia total ou muito acentuada de pigmentao.
(E) Cabelo loiro torna-se esverdeado.
(F) Cabelo grisalho prematuro. O cabelo branco pode adquirir colorao amarelada.
(G) Tratamentos com drogas relacionadas dopamina (Parkinson, por exemplo).

31


Esquema 1 Biossntese de melanina.

3. Algumas crianas loiras quando atingem a idade adulta apresentam cabelos escuros e,
posteriormente, os cabelos tornam-se grisalhos. Se desconsiderarmos fatores ambientais,
o que poderia contribuir para este fenmeno? Veja o Esquema 1 acima.

4. Para que seja alterada a cor do cabelo artificialmente, necessrio descolorir os fios. O
primeiro passo usar uma soluo alcalina, amnia, por exemplo, para abrir as cutculas
do cabelo. O prximo passo usar uma soluo de perxido de hidrognio, capaz de
reagir de forma irreversvel com a melanina presente no cabelo.
a) Que reao qumica deve estar ocorrendo? Que modificaes moleculares podem
ocorrer nesse tipo de reao? Isso ocorreria em qualquer protena?
b) Por que a gua em que lavado o cabelo aps o processo de descolorao no
apresenta cor?
c) De que cor fica o cabelo aps este processo? Por qu?

32

5. Em processos de alisamento permanente, o cabelo no altera a conformao final
mesmo aps as lavagens. No entanto, em alisamentos temporrios, como escova ou
chapinha, sem uso de agentes qumicos, o cabelo volta conformao original aps
contato com gua ou mesmo alta umidade. Qual a diferena entre estes dois processos?
Descreva tipos de reao e ligaes qumicas rompidas e formadas e os tipos de
reagentes necessrios.

6. Existem diversos mitos e crenas populares sobre questes que envolvem o cabelo.
Todas elas esto relacionadas, principalmente, ao crescimento/perda, tratamentos, cortes
ou doenas do cabelo. Tendo em mente o avano da pesquisa e cosmetologia atual,
discuta a veracidade das crenas abaixo usando possveis explicaes bioqumicas ou
biolgicas.
A Cortar o cabelo faz com que o mesmo se torne mais forte ou cresa mais rpido.
B As chamadas pontas duplas podem ser reparadas por tratamentos qumicos ou
fsicos.
C A ponta dupla pode subir para a raiz do cabelo.
D Cada fio branco de cabelo retirado dar lugar a dois em seu lugar.
E Cortar o cabelo de acordo com a fase da lua faz com que ele cresa mais rpido,
mais saudvel, mais volumoso ou mais longo.
F Colorir o cabelo durante a gravidez perigoso.
G Dormir com o cabelo molhado provoca seu apodrecimento.
H O cabelo se acostuma com um mesmo xampu.
I A qumica da piscina pode tornar o cabelo verde.
J Escovar o cabelo regularmente faz com que ele caia mais rpido.
K Unhas e cabelo continuam a crescer mesmo aps a morte do indivduo.
L O cabelo no pra de crescer se no for cortado.
M Estresse causa o aparecimento de cabelos brancos.
N gua quente estraga o cabelo.

Evoluo

1. Atualmente os cabelos tm papel principalmente esttico para os seres humanos, mas
esta no sua funo inicial. Que papis voc atribuiria ao cabelo na evoluo do
homem?
2. Alm do cabelo, sabe-se que existe uma grande concentrao de glndulas sudorparas
na regio peri-anal e nas reas dos genitais. Discuta os possveis aspectos evolutivos e
biolgicos deste fato.
3. Por que motivo elefantes e rinocerontes quase no apresentam plos? Quais seriam as
vantagens evolutivas de animais sem plos?


Referncias


Purvis IW, Franklin IR. Major genes and QTL influencing wool production and quality: a
review. Genet Sel Evol. 2005;37 Suppl 1:S97-107.
33
4. Lavagem de cabelo e condicionadores

Xampus

Os xampus tm por objetivo a limpeza dos cabelos e do couro cabeludo e, para tal,
eles devem ser capazes de:

deixar os cabelos soltos, leves, brilhantes e fceis de pentear;
lhes conferir ordem, sem eletricidade esttica;
no modificar o pH do couro cabeludo.

Composio e caractersticas dos constituintes:

Agentes de lavagem

O elemento essencial da composio dos xampus a presena de um ou mais
tensoativos, agentes de lavagem cuja concentrao deve ser suficientemente capaz de
limpar os cabelos em toda sua extenso (cuja superfcie pode atingir de 4-8 m
2
!). Estes
detergentes constituem a base de todos os xampus.

Estrutura de um tensoativo

Os tensoativos apresentam a propriedade de reduzir a tenso superficial da gua e
de outros lquidos (da a origem de seu nome, vide Box 4.1). Apesar de possurem uma
composio qumica muito varivel, apresentam uma caracterstica comum: sua molcula
apresenta um componente hidrfilo e outro hidrfobo (Figura 4.1).






Figura 4.1 O esquema representa uma molcula afiptica, isto , uma molcula que
possui uma poro apolar que interage com lipdios e uma poro polar que interage com a
gua.
34
Box 4.1. Tenso superficial

Tenso superficial definida como a fora necessria para romper uma superfcie. Ela
determinada pelo grau de coesividade entre as molculas que formam esta superfcie. A
gua lquida forma uma extensa rede de pontes de hidrognio que lhe confere uma grande
tenso superficial. Quando um tensoativo adicionado gua, as extremidades
hidroflicas que se espalham na superfcie competem pelas pontes de hidrognio que
contribuem para a coesividade da superfcie. Como resultado, a tenso superficial
diminuda.


Podemos distinguir os tensoativos quanto localizao dos grupos hidrfilos:

na posio terminal - apresentam timo poder detergente;
na posio central - fraco poder detergente, pouco solvel na gua, porm bom
poder dispersante;
vrios grupos - fraco poder detergente, boa solubilidade em gua, apresentando
bom poder dispersante.

Classificao
Tensoativos aninicos

Os tensoativos aninicos so os normalmente empregados nos xampus. Sua famlia
grande, mas os que se acham mais freqentemente na base de lavagem dos xampus so
os sulfatos ou ter sulfato de lcool graxo. So limpadores excelentes e ensaboam bem.
Mas sua ao deslipidante no deve ser levada ao extremo porque, se a queratina do
cabelo suporta bem esta deslipidao, o mesmo no ocorre com o couro cabeludo. Sua
ao, portanto, na maioria das vezes equilibrada pela associao com outros aninicos
mais leves ou com outros tensoativos tais como os anfteros ou os no inicos.
Os sabonetes entram nesta categoria, mas no representam um bom mtodo de
limpeza dos cabelos, danificando-os, pois so extremamente alcalinos em soluo. Alm
disso, eles formam com o calcrio da gua, sais de clcio insolveis que se depositam nos
cabelos, tornando-os sem brilho, speros e difceis de desembaraar.
So exemplos de tensoativos aninicos: lauril sulfato de sdio (Figura 4.2), lauril
ter sulfato de sdio, lauril ter sulfato de trietanolamina (Figura 4.3).




Figura 4.2 Exemplo de tensoativo aninico, utilizado em xampus: lauril sulfato de sdio.



35
N
OH
OH
O H
S O
O
O
O


Figura 4.3 Outro tensoativo aninico: o lauril sulfato de trietanolamina.

Tensoativos catinicos

Esses tensoativos tm uma grande afinidade com a queratina, qual conferem
maciez e brilho. Eles facilitam o desembaraar dos cabelos e diminuem a eletricidade
esttica. Mas esta afinidade os torna difceis de separar do cabelo no enxge, deixando-os
mais pesados. Eles no so muito utilizados e so incompatveis com os aninicos. Na
prtica, os tensoativos catinicos so formulados com no-inicos.
Podemos citar como exemplos de tensoativos catinicos as seguintes molculas:
cloreto de olealcnio, cloreto de distearildimnio (Figura 4.4), etersulfato de isostearil
etildimnio.


Figura 4.4 Estrutura esquemtica da molcula de cloreto de distearildimnio.

Tensoativos anfteros

Estes tensoativos apresentam um poder detergente e espumante menor que os
aninicos, mas em geral, so muito bem tolerados. Devem ser associados a outros
tensoativos para modular as propriedades de lavagem e espuma. Eles entram de
preferncia na composio dos xampus para uso freqente e xampus para bebs.
A betana (cidos graxos clorados e trimetilamina), a cocoamidopropil betana
(Figura 4.5) e a cocoamidopropil hidroxisultana so exemplos de tensoativos anfteros.

N
+ O
ONH
O



Figura 4.5 Estrutura esquemtica da cocoamidopropil betana, um tensoativo anftero.
36
Tensoativos no-inicos

So considerados bons emulsionantes, umectantes ou solubilizantes. Muitas vezes
esto associados aos tensoativos anfteros ou aninicos pouco agressivos, para fazer deles
xampus leves. Eles so considerados como os mais leves dos tensoativos tendo, no entanto,
um bom poder detergente, mas um fraco poder de espuma. De fato, o poder de espuma,
que no correlato ao poder detergente, o no esprito do pblico: um xampu que no
espume muito tem poucas chances de sucesso. Por outro lado, preciso reconhecer que a
quantidade de espuma gerada por um xampu permite dosar a quantidade necessria.
Tensoativos no-inicos utilizados na indstria cosmtica: alcanolamidas de cidos
graxos (MEA, DEA Figura 4.6, TEA), polietilenoglicol e derivados.
N
OH
OH
O


Figura 4.6 Estrutura esquemtica do tensoativo no-inico cocoamida DEA
(dietanolamida de cido graxo de coco).


Como funcionam

Lavar o cabelo ou o prato consiste em remover a sujeira com gua. Como a sujeira
do cabelo, ou em um prato de comida, tipicamente formada por substncias hidrofbicas
como gorduras, a interao gua/sujeira no muito grande. A propriedade tensoativa dos
detergentes possibilita um aumento de contato da gua com a sujeira a ser removida. Alm
disso, para minimizar o contato das caudas hidrofbicas com a gua, o detergente orienta-
se as inserindo na sujeira, que hidrofbica, deixando sua cabea polar em contato com a
gua. A gua ento pode interagir melhor com a sujeira, carregando-a da superfcie em
que est adsorvida (Figura 4.7).




Figura 4.7 Esquema representando a interao da gordura (gota de leo) com as
molculas de detergente, possibilitando sua remoo pela gua.


37
Espuma

Quando um tensoativo dissolvido em gua, as suas molculas orientam-se de tal
maneira que as extremidades hidroflicas se dirigem para gua e as hidrofbicas para as
interfaces gua/recipiente ou gua/ar (Figura 4.8-A). Havendo outro corpo presente, por
exemplo, sujeira, este tambm ser envolto por uma pelcula de tensoativo, orientada da
mesma forma. Em funo deste fenmeno de orientao dos produtos tensoativos quando
em soluo, temos a formao de espuma e o poder detergente (Figura 4.8-B).



Figura 4.8 (A) A figura mostra a disperso de um tensoativo (detergente) em gua. As
molculas do detergente tendem primeiramente superfcie da soluo, tornando as
interaes poro hidrofbica/ar e poro hidroflica/gua possveis. Com o aumento da
concentrao do detergente em gua, suas molculas iro para o interior da soluo,
formando micelas, numa tentativa de aumentar a interao entre suas prprias caudas
hidrofbicas para excluir as molculas de gua desta poro. (B) A figura mostra a
formao de uma bolha, que ocorre quando a quantidade de detergente em soluo ainda
maior e ele passa a interagir com o ar. Quando em soluo est presente a gordura (sujeira),
com ela que sua poro hidrofbica ir interagir, permitindo sua solubilizao e remoo
pela gua.

Quando uma bolha de ar penetra na soluo, forma-se na interface ar/gua ou
impureza/gua um filme de tensoativo, que pode no primeiro caso, sair do meio,
envolvendo uma fina pelcula de gua, e no segundo caso, a partcula de impureza tende a
manter-se suspensa no meio.
Assim, no caso especfico da limpeza dos cabelos contaminados por impurezas de
caracterstica graxa, ocorre o mesmo fenmeno de orientao, havendo com isto a
formao de uma micela, a qual se solta do fio de cabelo.

Estabilizadores de espuma

Popularmente aceito um xampu que apresente bom poder espumante, pois se
acredita que o efeito de limpeza encontra-se ligado ao poder espumante, o que na realidade
no ocorre. Por exemplo, os no inicos com alto grau de etoxilao apresentam bom
poder de limpeza, porm fraco poder espumante. A formao de espuma depende do pH
da soluo, do contedo em eletrlitos e da dureza da gua. Pode-se melhorar ou
estabilizar o poder espumante de um xampu pela adio de vrios componentes, tais como
carboximetilcelulose (CMC) (Figura 4.9), fosfatos, alcanolamidas etc. Normalmente estas
ltimas favorecem a formao de uma espuma de pequenas bolhas as quais apresentam
melhor estabilidade.
A B
38


Figura 4.9 Estrutura esquemtica do espessante carboximetilcelulose (CMC).


Espessantes

Os espessantes so substncias que permitem aumentar a viscosidade, dando ao
usurio a impresso de ter um produto mais concentrado. Uma srie de produtos pode ser
utilizada como espessantes. Entre estes podemos citar sais, alginatos, carboximetilcelulose
(CMC) (Figura 4.9), metilcelulose (MC). As principais so as alcanolamidas de cidos
graxos, pois apresentam uma srie de vantagens sobre os anteriores, tais como poder
engordurante e estabilizador de espuma. Os primeiros apresentam inconvenientes como
turvao, influenciam na transparncia e na estabilidade do produto. As alcanolamidas que
apresentam timo poder espessante so: dietanolamida do cido graxo de coco, do cido
mirstico, lurico e olico.

Agentes engordurantes

Para evitar a retirada excessiva de gordura pelo tensoativo, utiliza-se agentes
engordurantes. Os mais usados so alcanolamidas, lanolina e derivados hidrossolveis,
derivados de lecitina etc.

Agentes perolantes

Em casos especiais, pode-se desejar que o xampu apresente aspecto sedoso ou
perolado e para tanto se utilizam certos aditivos que sob certas condies apresentam esta
caracterstica. Tais aditivos so steres de cidos graxos, sabes metlicos e certas
alcanolamidas de cidos graxos.

Conservantes

Devido presena de gua e diversos componentes orgnicos, os xampus
apresentam susceptibilidade contaminao microbiana, tornando-os inadequados ao
consumo. Por isso, faz-se necessrio o uso de alguns conservantes tais como
metilparabeno e propilparabenos (Nipagin

e Nipazol

).


Essncias e Corantes

So destinados a dar ao xampu sua caracterstica olfativa e visual. Estas
caractersticas devem satisfazer as expectativas do consumidor.

39

Diluente

O diluente mais utilizado a gua. Utiliza-se gua tratada, destilada ou ionizada.

Como formular um xampu


Frmula geral de um xampu lquido:

Tensoativos (agentes de lavagem): 15-25%
Estabilizador de espuma: 1-4%
Espessante: 0-5%
Aditivos cosmticos ou de tratamentos: q.s.
Agente quelante (EDTA Na): 0-0,2%
Conservante: 0,1-0,3%
gua purificada: q.s.




40
Condicionadores


O condicionador de cabelo uma associao de diversos produtos que apresentam
caractersticas que complementam o tratamento do cabelo. O condicionador dever possuir
carter catinico, pois isto permite a sua fixao com a queratina. Dependendo do tipo de
cabelo e do tipo de xampu utilizado previamente, a composio de um condicionador pode
variar, mas, em linhas gerais, ele deve apresentar as seguintes caractersticas:

poder anti-esttico - na reduo da eletricidade esttica, facilita-se o pentear,
ficando o cabelo solto e relativamente macio;
poder engordurante, pois em alguns casos o xampu desengordura em excesso e
necessria a reposio desta gordura sobre o cabelo e couro cabeludo;
pH cido, pois normalmente o detergente aninico aumenta o pH do couro
cabeludo e, com a utilizao de um produto cido, o pH da epiderme volta ao
normal (ideal entre 4 e 5).

Como formular um condicionador


Frmula geral de um condicionador:

lcool ceto estearlico: 4%
Amnio quaternrio: 2,5-3,5%
cido ctrico: 0,5%
Essncia: 0,4-0,6%
gua: q.s.100ml
Aditivos: 2-6%
Conservantes: q.s.

41

Estudo dirigido 4.1 Detergentes e condicionadores

1. Indique quais composies (A, B ou C) so as mais adequadas para os cabelos oleosos,
normais e secos.

Composio A B C
Lauril ter sulfato de sdio 25-30% 25% 30-40%
Lauril sulfato trietanolamina 5-8% 8-10% -
Dietanolamina de cidos graxos 2-3% 3-3,5% 1,5-2,5%
Anftero betanico 3-4% 4-4,5% 2-3%
Conservantes q.s. q.s. q.s.
Agente perolante 1,5-3% 2,5-3% 1-1,5%
Essncia 0,3-0,6% 0,3-0,6% 0,3-0,6%
Aditivos 1-6% 1-6% 1-6%
gua q.s.p. 100% q.s.p. 100% q.s.p. 100%
cido ctrico 0,05-0,5% 0,05-0,5% 0,05-0,5%
NaCl 0,5-2% 0,5-2% 0,5-2%
Corante q.s q.s. q.s.
q.s.: quantidade suficiente.

2. Classifique os seguintes tensoativos como aninicos, catinicos, no inicos e
anfteros.

Estrutura do tensoativo Classificao
N
+
S O
O
O
OH

cocoamidopropil hidroxisultana



Triton X45

polietilenoglicol 4-terc-octilfenil ter



monoetanolamida de cido graxo de coco



42

Tween 20

polioxietilenosorbitan monolaurato


N
+
N
H
S O
O
O
OH
O

N-(3-laurilamidopropil)N-N-dimetil-N-(2-hidroxi-3-sulfopropil) amnio



cloreto de olealcnio



lauril ter sulfato de sdio




3. Um xampu que faz muita espuma limpa melhor? Explique.

4. O que voc acha dos xampus 2 em 1?

5. Se leos so compostos de molculas com uma cabea polar e uma cauda hidrofbica,
por que no lavamos o cabelo, as mos e os pratos com leo de soja?

6. a) Qual sua opinio a respeito de xampus contendo DNA vegetal em sua formulao?
b) Como o DNA poderia agir?
43
c) Qual a vantagem/desvantagem da origem vegetal deste cido nucleico?

7. Condicionadores de protenas tm se tornado bastante populares, pois do volume,
brilho e tornam o cabelo mais fcil de ser penteado. O xampu mais caro que existe feito
a partir de caviar, mas o mesmo resultado pode ser obtido usando ovos comuns ou cerveja
(escura) no cabelo. Propagandas deste tipo de condicionador prometem reparar o cabelo,
principalmente os condicionadores que usam solues de queratina, alegando que a
queratina em soluo ir ligar-se queratina do cabelo, reparando o cabelo danificado.
Quais so os erros destas propagandas?

8. Relacione o poder detergente com a posio do grupo hidrfilo.


Referncias

Peyrefitte G, Martini MC, Chivot M. Cosmetologia, biologia geral, biologia da pele. 1
a
ed.
Paris: Simep/Masson; 1998.

Tele Curso 2000. Aula 43 Como detergente tira gordura?

http://www.farmaciamagistral.com.br/formcabelo.html

http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

http://sis.nlm.nih.gov/Chem/ChemMain.html

http://hpd.nlm.nih.gov/products.htm

44
5. Estrutura da pele II - histologia



Epiderme

A epiderme a camada mais externa do corpo e est em contato direto com o meio
externo. um epitlio queratinizado estratificado composto principalmente de
queratincitos, as clulas epiteliais especializadas responsveis pela renovao, coeso e
barreira da epiderme. A Figura 5.1 mostra que esta camada externa da pele subdividida
em cinco camadas (de dentro para fora): stratum basale, stratum spinosum, stratum
granulosum, stratum lucidum e stratum corneum. Estas camadas so formadas pela
diferenciao seqencial de clulas migrando da camada basal para a superfcie. A
epiderme se renova a cada 14-30 dias dependendo da regio da pele.


A camada basal (stratum basale) a camada mais profunda e fica logo acima da
derme. a camada com a maior atividade mittica. As camadas de clulas basais
se ligam lmina basal (basement membrane).
A camada espinosa (stratum spinosum) a camada mais grossa da epiderme. As
clulas nesta camada chegam por migrao da camada basal, perdendo sua adeso
lmina basal e se aderindo a outros querancitos.
A camada granular (stratum granulosum) caracterizada pela presena de grnulos
de queratohialina entre os filamentos de queratina; consiste em 3-5 camadas de
queratincitos achatados. Esta a camada mais superficial em que as clulas ainda
possuem ncleo.
A camada crnea (stratum corneum) a camada mais superficial e composta de
clulas mortas. O alto contedo lipdico forma uma barreira para reteno de gua
e resistncia. Esta camada fornece 98% de habilidade de reteno de gua da
epiderme. A membrana plasmtica se torna grossa devido deposio e ligao
cruzada de protenas, como a involucrina, ao longo da superfcie interna para
formar o envelope crneo. Estas clulas no possuem ncleo e outras organelas
mas possuem inmeros filamentos de queratina. O stratum lucidum parte desta
camada.


Figura 5.1 - Ver na Seo 13 "Figuras coloridas"


Outros integrantes da epiderme so as clulas de Langerhans apresentadoras de
antgeno, os linfcitos T epidrmicos, ambos derivados da medula ssea, os melancitos
formadores de pigmentos e as clulas de Merkel neuroepiteliais, queratincitos
modificados que possuem queratinas e formam ligaes desmossomais de queratincitos.
Os melancitos possuem melanina, um pigmento que confere cor pele. Eles
residem na camada basal da epiderme e entram em contato com muitos queratincitos
45
(normalmente ~30) da camada basal e imediatamente acima dela. No formam conexes
desmossomais.


Derme

A derme um tecido conectivo, irregular e denso, composto de colgeno, elastina e
glicosaminoglicanos. mais grossa que a epiderme, contm extensiva vascularizao,
neurnios, msculo liso e fibroblastos (Figura 5.2). a principal barreira mecnica da pele.
Sua rede de fibras elsticas funciona para suportar a epiderme e ligar hipoderme. A
derme contm duas camadas, a camada papilar e a camada reticular.
A derme possui elementos neuronais para percepo de toque, dor, coceira e
temperatura. Os corpsculos de Meisser residem na camada papilar e funcionam como
mecanorreceptores na percepo do toque. Os corpsculos de Pacini so encontrados na
poro profunda da derme (e na hipoderme) e so responsveis pela sensao de presso.


Hipoderme

A hipoderme composta de tecido conectivo frouxo com um grande nmero de
clulas adiposas (Figura 5.2). A hipoderme confere insulao, absoro de impacto,
estoque de energia e flexibilidade. Tambm contm o maior nmero de vasos sanguneos
da pele. Muitos dos anexos epidrmicos se estendem at a hipoderme. Eles so uma fonte
de queratincitos quando a epiderme destruda por abraso ou queimadura.

Figura 5.2 Ver na Seo 13 Figuras coloridas.

Renovao da pele

A epiderme um tecido auto-renovador: uma nica clula-tronco adulta tem
capacidade proliferativa para produzir epiderme nova suficiente para cobrir a superfcie
corprea. Na pele de mamferos, clulas-tronco epiteliais de ciclo lento residem em uma
poro saliente do folculo piloso (bulge) (Figura 5.3).
Estas clulas-tronco so multipotentes (clulas-tronco que tm o potencial de dar
origem a mltiplas linhagens) e podem dar origem no s a clulas da epiderme como
tambm a folculos pilosos e glndulas sebceas. Estas clulas-tronco presentes na
salincia do folculo piloso e que migram para a epiderme vivem na camada (basal) mais
interna. A taxa de proliferao e migrao muito acelerada quando a pele foi danificada
e a ferida est sendo cicatrizada.

46


Figura 5.3 - Folculo piloso de mamferos. Observe a posio da salincia (bulge), onde
as clulas tronco esto localizadas.



Estudo dirigido 5.1 Estrutura da pele II

1. Quais as camadas da pele?

epiderme derme hipoderme
Localizao
Tipo de tecido
Clulas presentes
Vascularizao

2. Onde residem os melancitos? Qual o papel destas clulas?

3. Em qual poro da pele se encontra a maior parte do colgeno?

4. Qual o segredo da alta taxa de renovao da pele?

5. Suponha como age um creme hidratante para a pele.

47
Referncias


Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P. Molecular Biology of the
Cell. 4th ed. New York: Garland Publishing; 2002.

Burkitt HG, Young B, Heath JW. Wheaters Functional Histology. 3rd ed. London:
Longman Group UK Limited, 1994.

Fuchs E, Raghavan S. Getting under the skin of the epidermal morphogenesis. Nature
Reviews Genetics 2002, Mar (3):199-209.

Gambardella L, Barrandon Y. The multifaceted adult epidermal stem cell. Current
Opinion in Cell Biology 2003, 15:771-7.

Lodish H, Berk A, Zipursky SL, Matsudaira PB, David D, James E. Molecular Cell
Biology. 4th ed. New York: W. H. Freeman & Co.; 2000.

Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmentation in mammalian
skin and its hormonal regulation. Physiol Rev. 2004 Oct; 84(4):1155-228.

http://sprojects.mmi.mcgill.ca/dermatology/basics.htm

http://www.med-ed.virginia.edu/public/CourseSitesDocs/CellandTissueStructure/
handouts/unrestricted/original/MMHndt_skin.html

http://www.tarleton.edu/~anatomy/integpix1.html
48
6. Radiao solar - ultravioleta


A luz solar consiste de radiaes de diferentes comprimentos de onda
compreendendo os raios gama, os raios X, o ultravioleta (UV), o infra-vermelho (IV), as
microondas e as ondas de rdio (Figura 6.1), sendo que a luz visvel corresponde a uma
nfima parte deste espectro.


Figura 6.1 - Ver na Seo 13 "Figuras coloridas".


Infra-vermelho (IV, 700-2000 nm): Tem pouco poder de provocar reaes qumicas,
sendo essencialmente trmica (forma de perda de energia de certos ativos de protetores
solares de ao qumica). Os comprimentos de onda de 700 a 1500 nm podem atravessar
completamente a pele, dependendo da espessura e cor.

Visvel (VIS, 400-700 nm): Apresenta diferentes graus de energia trmica e luminosa e
capacidade de provocar reaes qumicas.

Ultravioleta (UV, 100-400 nm, Figura 6.2): a radiao mais energtica emitida pelo
sol capaz de atingir a superfcie terrestre. A radiao UV dividida em UVA (320-400
nm); UVB (280-320 nm) e UVC (100-280 nm). A radiao UVC, a mais energtica das
trs, bloqueada eficientemente na estratosfera pela camada de oznio. UVA o
componente principal da radiao solar ao qual estamos expostos e responsvel por
danos mais leves e crnicos. Embora seja fracamente carcinognico, capaz de induzir o
envelhecimento precoce da pele. UVB responsvel por danos agudos como queimaduras
e por ser mais energtico mais ativo na formao de tumores de pele.



Radiao ultravioleta
Raios X
UVC UVB UVA
100 150 200 250 300 350 400
Comprimento
de
onda
(nm)
Luz
visvel
Absoro de oznio
Produz
oznio
Germicida Eritema
Transmitida pelo
vidro comum


Figura 6.2- Espectro de radiao UV.


49

Apenas 7% da totalidade da energia emitida pelo sol atingem a superfcie da Terra
(o que chamamos de espectro solar terrestre) uma vez que 93% aproximadamente so
retidos pela atmosfera (Figura 6.3). Apesar da disparidade na literatura, o espectro solar
terrestre em um dia de vero, sem nuvens s 12hs composto por aproximadamente 50%
de IV, 5% de UV e cerca de 45% de VIS.




Figura 6.3- Radiao solar na superfcie da terra versus na atmosfera.



A intensidade da radiao UV depende de fatores como estao do ano, latitude,
altitude, poluio, condies atmosfricas e o horrio do dia.

UVA (3,9%): Ocorre o dia todo e caracteriza-se por ser um fraco indutor de eritema*, por
apresentar fraca ao bactericida, ser pigmentgena e por ser responsvel tanto pelo
bronzeado imediato quanto pelo tardio. Embora seja menos perigoso se comparado a UVB
e UVC, a faixa predominante a atingir a Terra. Devido ao comprimento de onda, a
faixa de UV capaz de penetrar at camadas mais profundas da pele.

*Eritema: A exposio ao sol causa vaso-dilatao, e este aumento do volume sanguneo na derme
percebido como um avermelhamento da pele. Esta alterao fisiolgica conhecida por eritema e o
resultado de uma inflamao da pele que pode ser facilmente induzida por radiao UVB.


UVB (0,4%): predominante entre 10 e 14 horas e caracteriza-se por provocar eritema
(cerca de 800-1000 vezes mais que UVA), alm de ser um dos responsveis pelo
bronzeamento tardio e de longa durao. Seu poder bactericida aumenta com a diminuio
do comprimento de onda. Alm disso, suspeita-se que a radiao UVB atue
sinergisticamente com a UVA, na formao do cncer de pele. O espectro de absoro
para a carcinognese parece coincidir com o do eritema (290-320 nm), salientando-se que
a carcinognese induzida pela radiao solar resultado de fenmeno cumulativo, ou seja,
a pele armazena os eventos bioqumicos ativados pela radiao. O UVB responsvel pela
50
transformao do ergosterol em vitamina D. Tambm est relacionado supresso do
sistema imune e a induzir tolerncia a antgenos.

UVC ( barrado pela camada de oznio estratosfrica): Ao bactericida, pouco
eritematgena, pouco pigmentgena. Em contato com a pele produz telangectasias
(vasinhos), ressecamento e epitelioma.

A penetrao da radiao depende do tipo de interao que ocorre do meio com o
fton de luz. No caso da pele, quanto maior o comprimento de onda, maior o grau de
penetrao (Figura 6.4). Portanto, mesmo sendo menos energtico que o UVB, o UVA
capaz de penetrar at a derme enquanto que o UVB afeta apenas a epiderme. bom
lembrar que por mais que o UVB no penetre na pele tanto quanto o UVA os seus efeitos
deletrios so mais prejudiciais que o UVA.


Figura 6.4 - Penetrao da radiao UV e visvel na pele.

Estudo dirigido 6.1 Radiao UV

1. a) Sabendo que a radiao UV varia em relao a diversos fatores tais como altitude,
latitude, estao do ano, porcentagem de nuvens, hora etc, esboce um grfico de
como a radiao deve variar de acordo com:
i- hora do dia;
ii- estao do ano.

b) Com base na resposta do item a anterior explique por que recomendado que seja
evitado o sol prximo ao meio-dia?

2. Qual seria uma conseqncia imediata da destruio da camada de oznio?

3. Por que a radiao UVB, mesmo sendo mais energtica que a UVA, penetra menos na
pele?

51


Efeitos benficos da radiao solar


Vitamina D

A exposio radiao UVB essencial para a transformao do ergosterol em
vitamina D3 em nosso organismo (Figura 6.5).
A deficincia de vitamina D aumenta o risco de doenas nos ossos, fraqueza
muscular e de certos tipos de cncer. H casos na literatura que relacionam a deficincia
desta vitamina diabete mellitus e hipertenso.
A suplementao com vitamina D no apenas segura, mas em muitos casos
recomendada por mdicos, havendo diferentes dosagens recomendadas de acordo com a
idade sendo que para idosos esta dosagem deve ser maior. Importante ressaltar que o uso
de filtro solar no causa deficincia de vitamina D, pois a quantidade de sol que tomamos
diariamente j suficiente para esta transformao.

7-Deidrocolesterol
Previtamina D
3
Calcitriol
(1,25- Diidroxicolecalciferol)
UV
Vitamina D
3
(Colecalciferol)

Figura 6.5- Via de converso de 7-deidrocolesterol em vitamina D3 e ento em calcitriol,
o hormnio ativo.
Efeitos nocivos da radiao solar


Os danos causados pela radiao UV podem ser divididos em agudos e crnicos
(Figura 6.6). Os agudos incluem o eritema calrico, a queimadura solar, a
fotossensibilidade induzida por drogas e o agravamento de doenas, enquanto que os
crnicos so o envelhecimento precoce e o cncer de pele (Box 6.1).
52










Figura 6.6 - Danos agudos e crnicos causados por radiao UV na pele.


53

Box 6.1- Cncer de pele.

Embora o cncer de pele seja o tipo de cncer mais freqente, correspondendo a
cerca de 25% de todos os tumores malignos registrados no Brasil, este tipo de cncer
apresenta alto percentual de cura quando detectado precocemente.

As neoplasias cutneas esto relacionadas a alguns fatores de risco, como o
qumico, a radiao ionizante, genodermatoses (xeroderma pigmentosum etc), e
principalmente a exposio aos raios UV do sol. Pessoas que vivem em pases tropicais
como o Brasil e a Austrlia, ou seja, que esto mais suscetveis exposio solar, possuem
o maior registro de cncer de pele no mundo.

Cncer de pele mais comum em indivduos com mais de 40 anos sendo
relativamente raro em crianas e negros, com exceo daqueles que apresentam doenas
cutneas prvias. Indivduos de pele clara, sensvel ao dos raios solares, ou com
doenas cutneas prvias so as principais vitimas do cncer de pele. Os negros
normalmente tm cncer de pele nas regies palmares e plantares.

Como a pele um rgo heterogneo, esse tipo de cncer pode apresentar
neoplasias de diferentes linhagens. Os mais freqentes so: carcinoma basocelular,
responsvel por 70% dos diagnsticos de cncer de pele, o carcinoma epidermide com
25% dos casos e o melanoma, detectado em 4% dos pacientes. Felizmente o carcinoma
basocelular, mais freqente, tambm o menos agressivo. Este tipo e o carcinoma
epidermide so tambm chamados de cncer de pele no melanoma, enquanto o
melanoma e outros tipos, com origem nos melancitos, so denominados de cncer de
pele melanoma.

Os carcinomas basocelular so originrios da epiderme e dos apndices cutneos
acima da camada basal, como os plos, por exemplo. J os carcinomas epidermides tm
origem no queratincito da epiderme, podendo tambm surgir no epitlio escamoso das
mucosas.

O melanoma cutneo um tipo de cncer que tem origem nos melancitos e tem
predominncia em adultos brancos. Embora s represente 4% dos tipos de cncer de pele,
o melanoma o mais grave devido sua alta possibilidade de metstase (capacidade de
espalhar para outras regies do corpo). Quando os melanomas so detectados em estgios
iniciais os mesmos so curveis, sendo que nos ltimos anos houve uma grande melhora
na sobrevida dos pacientes com este tipo de cncer. Nos pases desenvolvidos a sobrevida
mdia estimada em cinco anos de 73%, enquanto que, para os pases em
desenvolvimento a sobrevida mdia de 56%.

O nmero de casos novos de cncer de pele no melanoma estimados para o Brasil
em 2005 de 56.420 casos em homens e de 56.600 em mulheres. Estes valores
correspondem a um risco estimado de 62 casos novos a cada 100 mil homens e 60 para
cada 100 mil mulheres. Quanto ao cncer de pele melanoma, esto previstos 2.755 casos
novos em homens e 3.065 casos novos em mulheres.
Fonte: INCA (Instituto Nacional do Cncer)

54
Efeitos da radiao UV no DNA

Tanto a radiao UVA quanto UVB so capazes de produzir danos ao DNA, seja
de forma direta (atravs da absoro direta da radiao nesta regio do espectro pelo
DNA) ou indireta (atravs da formao das espcies reativas de oxignio, ERO). As ERO
so capazes de influenciar a diviso celular ou apoptose. A faixa mais citotxica
corresponde radiao UVB, que induz a formao de dmeros entre bases de pirimidinas
adjacentes na mesma fita (Figura 6.7). Os dmeros causam alteraes na estrutura da dupla
hlice, prejudicando a replicao e expresso gnica.



Figura 6.7 - Dmeros de timina: este tipo de dano ocorre no DNA de clulas expostas a
radiao UV. Dmeros similares podem ser formados entre quaisquer bases de pirimidina
(C e T) vizinhas.

Estudo dirigido 6.2 - Efeitos biolgicos do UV

1. Cite alguns efeitos benficos da radiao UV.

2. Cite alguns dos efeitos agudos e crnicos induzidos por radiao UV. Tente relacionar
efeitos agudos e crnicos.



Radiao solar e pele

Quando a radiao solar atinge a pele, provoca alteraes perceptveis como
espessamento da camada crnea, induo de sudorese e produo de melanina. Esta
resposta parte do sistema de proteo natural do nosso organismo contra a radiao solar.
Cerca de 24-36 horas aps a irradiao uma hiperpigmentao com conseqente
espessamento da epiderme observada, que tem como funo a absoro da radiao
incidente. A induo de sudorese promove a distribuio do cido urocnico, cuja
55
produo estimulada por UVB e possui alta capacidade de absoro de energia nesta
mesma faixa de UV. Porm esta produo no duradoura uma vez que h evaporao do
suor e perda do cido urocnico devido a sua solubilizao na gua.
A melanina constitui o principal mecanismo de defesa contra radiao solar. As
melaninas (eumelanina, pigmento escuro; feomelanina, pigmento vermelho; Figura 6.8)
so polmeros orgnicos que por possurem vrias duplas conjugadas absorvem nas faixas
do UV, visvel e infravermelho.
O esquema da biossntese da melanina mostrado na Figura 6.8. A primeira etapa
da biossntese catalisada pela enzima tirosinase. Aps a formao de dopaquinona, a
biossntese pode seguir por dois caminhos: na formao do pigmento escuro (eumelanina)
atravs da combinao com o oxignio e na formao do pigmento vermelho (feomelanina)
na reao com o enxofre. O composto com enxofre de maior interesse o aminocido
cistina e o tripeptdeo glutationa (GSH). A radiao UV tem capacidade de inibir a
enzima glutationa redutase, diminuindo a sntese de feomelanina e aumentando a de
eumelanina.




Figura 6.8 - Sntese de melaninas a partir de tirosina.




As melaninas (Figura 6.8) so produzidas a partir da tirosina nos melancitos,
clulas encontradas junto aos queratincitos na camada basal da epiderme. A transferncia
do melanossoma (organela responsvel pela produo de melanina) dos melancitos para
os queratincitos ainda no um processo totalmente esclarecido: o melanossoma
56
injetado diretamente no queratincito ou ocorre fagocitose pelo queratincito da
extremidade dendrtica do melancito. Em seguida, nos queratincitos, h degradao
progressiva dos melanossomas por ao de enzimas lisossomais (fosfatases cidas). Desta
forma a melanina eliminada na superfcie cutnea atravs dos queratincitos
descamantes, e tambm pela excreo na derme pela via linftica.
O nmero de melancitos varia ao longo do corpo resultando numa pigmentao
mais clara ou mais escura. Todos os humanos possuem aproximadamente o mesmo
nmero de melancitos. As diferenas de colorao so devidas s diferenas no nmero,
tamanho e arranjo dos melanossomos.
Importante ressaltar que estes mecanismos de proteo natural da pele no so
totalmente efetivos e, portanto, algumas manifestaes, tais como rubor, edema, formao
de bolhas e desprendimento da pele podem ocorrer em funo do perodo do dia em que o
indivduo se expe ao sol sem o uso de protetores. A agresso do sol cumulativa e
irreversvel, capaz de produzir alteraes normalmente imperceptveis aos nossos olhos,
porm muito graves, como alteraes bioqumicas inclusive nas fibras colgenas e
elsticas, perda de tecido adiposo subcutneo e fotocarcinognese.

Estudo dirigido 6.3 - UV e pele

1. Analisando o espectro abaixo responda:
a) Qual seria a vantagem da radiao UVB estimular a produo de cido urocnico na
pele?
b) Qual a similaridade quanto funo entre a melanina e o cido urocnico?
c) O que pode acontecer com a estrutura de protenas que possuam grandes quantidades
dos aminocidos triptofano e tirosina? Por qu?




2. Qual a vantagem (se existir) para a pele da radiao UV inibir a sntese de glutationa
redutase? Veja a funo desta enzima na Seo 7 (Espcies reativas de oxignio).

3. Quais so os 3 componentes principais de proteo da pele contra UV?

57
Bronzeamento, filtros solares e fator de proteo solar



Bronzeamento

Bronzeamento uma resposta exposio luz UV, espalhando grnulos de
melanina pela derme.

Atividade em software 4 - Bronzeamento

Veja animaes
http://www.bbc.co.uk/science/hottopics/sunshine/suntans.shtml#anim
http://coolshade.tamu.edu/tan_1.html


Queimadura o resultado de uma reao inflamatria envolvendo muitos
mediadores, incluindo histamina, enzimas lisossomais e pelo menos um tipo de
prostaglandina. Estes mediadores produzem vasodilatao perifrica quando a radiao
UV penetra na epiderme; a reao inflamatria envolvendo sistema linftico
desenvolvida. A intensidade do eritema induzido por UVB mxima aps 12-24 horas
aps exposio. A queimadura por sol mesmo uma queimadura, geralmente de primeiro
grau (superficial). Reaes severas ao excesso de exposio UV podem produzir
queimaduras de segundo grau, com o aparecimento de bolhas, bem como sintomas de
febre, fraqueza ou prostrao.
O grau de queimadura ou bronzeamento depende de vrios fatores tais como (1)
tipo e quantidade de radiao recebida; (2) espessura da epiderme e do estrato crneo; (3)
pigmentao da pele; (4) hidratao da pele; (5) distribuio e concentrao das veias
sanguneas perifricas.
O bronzeamento ocorre em duas fases. A primeira fase, pigmentao imediata
(immediate pigment darkening, IPD) mxima aps apenas alguns segundos de exposio
radiao, principamente UVA, sendo resultante da redistribuio da melanina j presente
na pele. Esta uma forma de proteger o ncleo das clulas basais da epiderme. O
bronzeamento tardio (delayed tanning, DT) deve-se tanto radiao UVA quanto UVB. A
radiao UVB est relacionada ao aumento em nmero e em atividade dos melancitos,
sendo necessrias vrias exposies para que ocorra diviso deste tipo celular. O
bronzeamento UVA, dependendo do comprimento de onda, apresenta efeitos distintos:
Irradiao entre 340 e 400 nm aumenta a densidade de melanina localizada na camada
celular basal; irradiao na faixa de 320 a 340 nm eleva a sntese e transferncia de
melanossomos carregados para a epiderme.








58
Estudo dirigido 6.4

1. a) Por que as pessoas claras so mais susceptveis aos danos causados pelo sol?
b) Por que ao tomar sol com a camiseta, a rea coberta se bronzeia menos?

2. a) Qual a diferena entre bronzear-se e queimar-se?
b) Bronzeado sinnimo de sade?

3. Por que as pessoas com pele mais escura bronzeiam-se rapidamente aps alguns
minutos de exposio ao sol enquanto as pessoas mais claras, no?



Filtros solares

Para um composto ser um eficiente filtro solar so necessrias duas caractersticas
principais alm de absorver na regio do UV: (I) ter um alto coeficiente molar () na faixa
de absoro do UV e (II) dissipar a energia absorvida com o mnimo impacto para os
tecidos da epiderme e derme, impedindo, portanto, a formao de espcies reativas. Alm
disso, fatores econmicos (baixo custo), estticos (inodoro, incolor) e antialergnico so
levados em conta para a aceitao pelo consumidor. Os filtros solares exercem efeitos de
proteo sobre a pele atravs de ao fsica ou qumica.

59

Box 6.2- Por que uma molcula absorve UV?

A absoro de luz por uma molcula depende da capacidade da molcula dos seus
eltrons absorverem a energia sem romper as ligaes covalentes (saindo do estado
fundamental S
0
) e se excitarem, mudando de orbital (S
n
, n1, veja figura abaixo). Assim, a
absoro de luz UV ou visvel dependem da estrutura eletrnica da molcula.


Figura Box 6.2- Diagrama de Jablonski mostrando as possveis transies de estados de
energia que um eltron pode realizar quando excitado.

A absoro por uma ligao C=C excita o eltron de um orbital molecular ocupado
ligante a um orbital antiligante * (um estado de maior energia), sendo que esta
transio * requer aproximadamente 7 eV, que justamente a energia correspondente
a 180 nm (UV distante).
Molculas que possuem um sistema de duplas ligaes alternadas com ligaes
simples (C=C-C=C) so chamadas conjugadas. Essa disposio eletrnica permite que
energias menores excitem os eltrons, de forma que a transio * mova-se para
comprimentos de onda maiores (UV prximo), podendo chegar luz visvel (quanto maior
a conjugao).

Filtros de efeito fsico

Protegem devido deposio sobre a pele, refletindo e/ou dispersando a radiao
incidente. O problema destes filtros o inconveniente antiesttico, pois como depositam
sobre a pele e refletem toda luz visvel, o efeito final um visual branco difcil de
mascarar. Com a reduo do tamanho das partculas destes compostos, estes produtos
passaram a ter uma maior aceitao. Principais filtros fsicos: dixido de titnio e xido de
zinco microparticulados (materiais seguros quanto a aspectos toxicolgicos e com
reduzido efeito visual).

Filtros de efeito qumico

Os filtros qumicos so compostos aromticos conjugados com um grupo
carboxlico (Figura 6.9). Em muitos casos, um grupo doador de eltrons (amina ou metoxil)
substitudo na posio orto ou para do anel aromtico.
60

R
O
Y
Y
Y=OH,NH
2
,OCH
3
,
N(CH
3
)
2
,
R= C
6
H
4
, OH, OR' (R'=octila, metila, etc)


Figura 6.9- Estrutura geral dos filtros solares.


Mecanismo de ao dos filtros qumicos

Esta configurao qumica permite molcula absorver comprimentos de ondas
curtos (mais energticos) correspondentes ao UV (250-340 nm), convertendo a energia
resultante em radiaes de baixa energia (geralmente superiores a 380 nm). Portanto,
quando a molcula do filtro atingida por um fton de luz com determinado nvel de
energia ela vai para um estado eletrnico excitado e como a molcula entra em
ressonncia ela dissipa esta energia, retornando ao seu estado fundamental, emitindo outro
fton com menor energia do que aquele que foi absorvido para promover a excitao
(Figura 6.10).


Molcula no estado fundamental
Luz UV (250-350nm)
Molcula excitada
Molcula no estado fundamental
Emisso de baixa energia
O
R'
R
R
N
O
O
O
R'
N
R
R
+
_

Figura 6.10- Mecanismo de ao geral de filtros qumicos.


A energia emitida pelo filtro solar pode ser na regio do infravermelho (na forma
de calor) ou ainda na regio do visvel (fluorescncia ou fosforescncia) (vide Box 6.2).
Este efeito comum aos filtros imidazolnicos.

Efeito sobre o coeficiente de extino molar ()

A absoro (A) de energia por uma molcula dada pela lei de Lambert-Beer:

A = c.l.

61
onde, c: concentrao da molcula (em mols. L
-1
), l: caminho tico (em cm), : coeficiente
de extino molar, uma constante de proporcionalidade da absoro que est relacionada
natureza da molcula (em cm
-1
M
-1
).

O valor do coeficiente de extino molar a base sobre a qual a efetividade do
filtro solar avaliada. Filtros que possuam altos soam mais eficientes em absorver a luz
dos que possuem baixo .

A transio eletrnica para um composto qualquer est ligada facilidade que esta
estrutura tem para produzir uma estrutura ressonante. Desta forma, existem molculas que
apresentam simetria que permite ou facilita o deslocamento eletrnico e outras cuja
simetria dificulta ou impede o deslocamento eletrnico. Comparando, por exemplo, as
molculas do octildimetil PABA e o salicilato de octila, no primeiro, os dois substituintes
do anel benznico esto em posio para enquanto que no salicilato de octila esto em
posio orto, produzindo assim um impedimento estrico em posio orto. Portanto no
derivado do PABA o maior do que no composto dissubstitudo em orto. Um aumento
em duplas conjugadas tambm facilita a ressonncia e conseqentemente aumenta o .



Bloqueador, protetor e bronzeador

De acordo com nossa legislao, os protetores solares disponveis comercialmente
so divididos em quatro categorias: i) baixa proteo no qual o FPS varia de 2 a 6; ii)
moderada proteo (FPS 6 a 12); iii) alta proteo (FPS 12 a 20) e iv) muito alta, no qual o
FPS igual ou superior a 20. As preparaes de baixa proteo so chamadas tambm de
bronzeadores. Os bronzeadores no apresentam em sua composio filtros de raios UVA,
apenas UVB e, portanto, o FPS obtido muito baixo. J os protetores solares de alta
proteo so associaes de filtros UVB com filtros UVA e/ou filtros fsicos cujo ndice
de proteo fica na faixa de 12-30.
O termo bloqueador solar foi proibido pela legislao americana, j que no
possvel um bloqueio de 100% da radiao solar.
Na Tabela 6.1 abaixo, alguns exemplos de filtros qumicos e fsicos mais
comumente usados em formulaes cosmticas so apresentados.


62
Tabela 6.1 - Filtros fsicos e qumicos utilizados em formulaes e suas faixas de proteo
contra radiao UV.




Fator de proteo solar (FPS)

O fator de proteo solar (FPS) foi institudo com o objetivo de ter um ndice para
o grau de proteo de uma determinada preparao com filtros. calculado segundo a
FDA (Food and Drugs Administration dos Estados Unidos) ou COLIPA (The European
Cosmetic Toiletry and Perfumary Association) como sendo a energia ultravioleta
necessria para produzir uma dose mnima de eritema (DME) sobre uma pele protegida,
dividida pela energia UV necessria para produzir uma DME em uma pele no protegida:

FPS = UV
DME_protegida
/UV
DME_desprotegida


Os testes utilizam dez a vinte voluntrios (dependendo da metodologia, vinte para
a FDA e dez para a COLIPA) e normalmente utilizam as costas dos indivduos
selecionados que devem apresentar o mesmo tipo de pele (geralmente indivduos fototipo I,
II e III - Tabela 6.2). As costas so quadriculadas e cada quadrante recebe uma
determinada quantidade de produto a ser testado (2 mg/cm
2
de rea). A DME
determinada de cada voluntrio atravs de uma sequncia de progresso geomtrica de
63
exposio luz ultravioleta (lmpadas de xennio). O tempo pode ser, por exemplo, de 2
minutos (FDA). Vinte e quatro horas aps a irradiao, o eritema dos locais so avaliados
por tcnicos treinados e define-se qual a DME em cada rea de teste.

Tabela 6.2 - Fototipos de pele
Tipo de pele reao exposio solar Cor da pele
I queima facilmente, nunca bronzeia Branca
II queima facilmente, bronzeia levemente Branca
III queima moderadamente, bronzeado
gradual e uniforme
Branca
IV queimadura mnima, bronzeado
moderado
Morena clara
V raramente queima, bronzeamento
abundante e escuro
Morena
VI nunca queima, pigmentao profunda Escura

O FPS est relacionado formao do eritema, que provocado por UVB. Sendo
assim, o mtodo para o clculo do FPS vlido somente para UVB. Entretanto existem
outros mtodos que avaliam o poder de proteo para os filtros que absorvem UVA,
embora ainda no exista uma padronizao. Dentre os modos de calcular o fator de
proteo de filtros UVA podemos citar o PPD (persistent pigment darkening) e o IPD
(immediate pigment darkening). Ou seja, enquanto os filtros UVB usam o eritema cutneo
para calcular o grau de proteo, os filtros UVA usam a pigmentao imediata ou tardia
como ndice. Outros mtodos indicam a porcentagem de UVA retida, outros so feitos por
quimioluminescncia e por espectroscopia de ressnancia eletrnica (ESR).
64

Estudo dirigido 6.5 - Protetores, bloqueadores e bronzeadores

1. a) Qual a diferena entre protetor, bloqueador e bronzeador?
b) Qual a diferena entre filtros fsicos e qumicos?
c) Qual o mtodo mais eficiente de se proteger do sol?

2. Para a ltima fase dos testes in vivo de fator de proteo solar, certos parmetros como
tempo de exposio, tipo de pele e quantidade de produto/rea a ser testada so fixados.

a) Os resultados obtidos para um determinado ensaio esto descritos abaixo, calcule: FPS
dos protetores I, II e III. O que significa FPS 15 em termos de tempo de exposio ao
sol?

Formao eritema: 0:ausncia-1:eritema (medido aps 24h) tipo de pele III, tempo
exposio: 2min
Intensidade
radiao UV
(ua)
1 2 4 16 30 40 FPS
I protegido 0 0 0 1 1
I desprotegido 0 1 1
II protegido 0 0 0 0 1 1
II desprotegido 0 1 1
III protegido 0 0 0 0 0 1
III desprotegido 0 1 1

b) Na tabela abaixo esto descritos a porcentagem de absoro da radiao solar para cada
FPS de formulaes de protetores solares. O que voc conclui ao comparar os diferentes
FPS? Voc acha que um filtro 40 protege o dobro do filtro 20?

FPS (in vitro) Absoro da radiao (in vivo)
8 87,5%
20 95,0%
30 96,7%
40 97,5%
70 98,6%
100 99,0%

c) Para estes testes so utilizados 2 mg de produto/cm
2
. Que quantidade de protetor solar
uma famlia de 4 pessoas utilizaria para passar duas horas exposta ao sol?
Dado: rea (m
2
) = (massa (kg) x altura (cm)/3600)
1/2
(Mosteller, 1987)

Altura (cm) Massa (kg) rea (m
2
) Produto (g)
Pai 190 92 2,2
Me 165 61 1,7
Filho 1 145 40 1,3
Filho 2 170 63 1,7
Total: 6,9
65

d) Se cada frasco de protetor solar apresenta, em geral, 120 mL de produto e cada frasco
custa em torno de R$ 20, quanto essa famlia gastaria para apenas uma manh de sol na
praia (cerca de 4 horas)? O que voc conclui com esses dados? O valor de FPS dos
produtos superestimado, apropriado ou subestimado?
Dado: densidade protetor solar = 1,02 g/mL


Mecanismos de reparo do DNA

A idia de que o reparo do DNA essencial na fotocarcinognese veio da
descoberta de que pacientes que sofrem de xeroderma pigmentosum (XP) tm o sistema de
reparo de DNA deficiente.
Na Tabela 6.3 esto indicadas algumas protenas relacionadas ao sistema de reparo,
sua funo e fentipo em camundongos que carregam a verso mutada da protena.
O reparo por exciso de nucleotdeo (nucleotide excision repair, NER) o
processo de reparo mais importante relacionado ao dano por UV. Este processo bastante
complexo, envolvendo mais de 30 genes. Os passos so: 1) reconhecimento da leso; 2)
inciso de fita simples nos dois lados da leso; 3) exciso da fita comprometida (24-32
bases); 4) reparo do DNA com sntese de uma nova fita; 5) ligao da fita recm
sintetizada. O reparo por exciso de base (base excision repair, BER) responsvel
principalmente por reparar os danos endgenos do DNA, produzidos por espcies reativas
de oxignio (ERO), hidrlise e agentes de metilao. A Figura 6.11 mostra estes dois
mecanimos de reparo do DNA.


66

Figura 6.11- Passos do mecanismo de reparo do DNA: (A) por exciso de base (BER); (B)
por exciso de nucleotdeo (NER).


So conhecidas duas vias principais de NER: reparo acoplado transcrio (TCR)
e reparo genminco global (GGR). Estas vias removem dmeros de pirimidina e grandes
adutos qumicos no DNA, trocando o DNA danificado por uma nova fita recm
sintetizada. TCR capaz de remover danos com maior velocidade de fitas transcritas, em
genes transcricionalmente ativos, enquanto GGR age de forma mais lenta, em regies no
transcritas. Visto que os danos ao DNA bloqueiam a transcrio, TCR uma forma
vantajosa de reparo uma vez que a clula d preferncia a genes ativos.



67
Tabela 6.3 - Protenas relacionadas ao sistema de reparo, sua funo e fentipo em
camundongos que carregam a verso mutada da protena.


68
Questes 6.1


1. Complete a tabela abaixo:

UVA (longas) UVB (medianas) UVC (curtas)
Comprimento de onda
(nm)

Capacidade bactericida
Capacidade de formar
eritema

Induo de tumor



Incidncia na Terra



Induo de bronzeamento
Induo de
fotoenvelhecimento

Nvel de penetrao na
pele



2. Dada as estruturas e espectros de absoro identifique as molculas que podem ser
usadas como filtro solar.

(a)





69
(b)




(c)





(d)

70
(e)

(f)
N
NH O H
O H
CO
2
H
OMe



(g)




3. Utilizando os espectros de absoro e emisso abaixo e a equao de Planck (E=h.c/,
onde E= energia; c= velocidade da luz, h= constante de Planck; =comprimento de
onda) explique em uma frase o conceito do funcionamento de filtros qumicos.

Linha contnua: espectro de absoro
Linha pontilhada: espectro de emisso

71
400 200 250 300 350
comprimento de onda



4. Dadas as formulaes de protetores solares com diferentes FPS, interprete a tabela
abaixo discutindo as possveis razes das diferenas. Consulte a Tabela 6.1.

% no filtro solar
Proteo
UV/
FPS
4
FPS
6
FPS
8
FPS
15
FPS
20
FPS
30
FPS
60
Octilmetoxicinamato UVB / 24200 4,0 4,5 5,5 6,5 7,0 7,5
Metil-
benzilidenocnfora
UVB / 42000 5,0
Salicilato de octila UVB / 4900 0,5 1,5 2,5 3,5 4,0
Benzofenona 3 UVA / 9300 0,5 1,0 1,0 1,0 2,0
Butilmetoxi-
dibenzoilmetano
UVA / 31000 0,3 3,5
Dixido de titnio UVA e UVB 1,0 2,0 4,0 5,0


5. Voc trabalha numa indstria farmacutica e est testando um novo produto que poder
ser lanado como protetor solar. Quais caractersticas voc acha que deveria ter esse
produto? Quais testes voc realizaria para testar sua eficincia?

6. O DNA susceptvel formao de dmeros de pirimidina. Este tipo de mutao
embora em princpio no altere a seqncia genotpica capaz de causar problemas ao
indivduo. Quais problemas podem acontecer? Por que isso ocorre?

7. O experimento abaixo mostra a porcentagem de dmeros de timina encontrada aps a
incidncia de radiao UV em fibroblastos humanos originados da derme de trs grupos
distintos de doadores: recm-nascidos; pessoas de 25-34 anos e pessoas de 63 a 88 anos.
72
20
40
60
80
100
Horas aps a irradiao
0,2 0,5 1 3 6 16 24
Dmeros de Timina
Porcentagem
remanescente
Goukassian, D. et alli (2000) The FASEB Journal 14:1325
Recm
nascidos
25-34
anos
63-88
anos



a) Descreva o grfico em termos das variveis biolgicas que voc considerar
importantes.
b) Formule explicaes de porqu ocorrem as diferenas observadas. Considere que os
indivduos dos trs grupos tm a mesma carga gentica.

9. Xeroderma pigmentosum (XP) uma doena autossmica recessiva que geralmente
leva cerca de 6 meses para ser diagnosticada. Um dos sintomas mais evidentes a alta
sensibilidade luz solar. Crianas com esta doena apresentam muitas sardas, e
exposies muito leves ao sol podem causar eritema e bolhas. A incidncia de cncer
de pele 1000 vezes maior que na populao em geral e a idade mdia de ocorrncia
de cncer de pele passa de 60 anos (populao geral) para 8 anos de idade. Os olhos
so afetados apenas na parte anterior, exposta luz UV. Pode haver perda auditiva
progressiva e, em 30% dos casos, h algum tipo de deficincia neurolgica. Pacientes
com XP fumantes podem apresentar cncer de pulmo muito cedo,

a) Com base nestas informaes, qual a causa desta doena?
b) Cite algumas protenas que podem estar envolvidas nesta doena e suas respectivas
funes (veja texto mecanismos de reparo do DNA).
c) Sabe-se que esta doena ocorre com sintomas em diferentes graus, variando de leves
a severos. Por qual motivo isso deve ocorrer?
d) Que recomendaes voc daria a um paciente com XP?




73
Texto complementar


Cmaras de bronzeamento artificial

As lmpadas usadas nas cmaras de bronzeamento emitem, em mdia, 95% de
UVA e 5% de UVB. Como as lmpadas podem variar de acordo com o equipamento ou
devido falta de fiscalizao, j foram reportados casos de lmpadas que emitiam
quantidades de radiao UVB equivalentes luz solar em um dia de vero de Nova York
ao meio-dia.
Embora a radiao UVB seja mais energtica, capaz de causar eritema e
relacionada ao surgimento de cncer, UVA tambm pode causar queimaduras solares,
fotoenvelhecimento e cncer de pele (tipo no-melanoma). Exposies curtas a cmaras de
bronzeamento artificial podem causar danos a longo prazo para a pele e aumentar as
chances de desenvolvimento de cncer de pele.
Alguns mdicos recomendam o uso de cmaras de bronzeamento em casos
especficos, como tratamento de doenas de pele e de desordens de comportamento
sazonais.

Autobronzeadores

A maioria dos autobronzeadores contm a diidroxiacetona (DHA), substncia
atxica que confere cor pele. Sem a necessidade de exposio ao sol, os
autobronzeadores representam uma forma segura e eficaz de bronzeamento. Atravs de
seu uso, pode-se obter o bronzeado desejado o ano todo, sem danos pele, evitando-se os
riscos da exposio solar e o uso de cmaras de bronzeamento. Atualmente, h vrios
trabalhos cientficos publicados, os quais alertam quanto aos riscos envolvidos no
bronzeamento artificial. Tal forma de bronzeamento tem contribudo para o aumento da
incidncia de cncer de pele e fotoenvelhecimento, pois os equipamentos usados no
bronzeamento artificial emitem, principalmente, a radiao UVA que, tambm,
responsvel pelo cncer de pele e fotoenvelhecimento. Nos EUA, o FDA recomenda a
incluso de uma advertncia nos equipamentos de bronzeamento artificial quanto aos
riscos envolvidos na exposio radiao UVA. Segundo dados da Academia Americana
de Dermatologia, 15-30 minutos de bronzeamento artificial correspondem a um dia inteiro
de exposio solar na praia. No Brasil, a ANVISA proibiu o uso de cmaras de
bronzeamento para menores de 16 anos e por jovens com idade entre 16-18 anos que no
apresentarem autorizao do responsvel legal. As clnicas de esttica que usam as
cmaras devem apresentar ANVISA o Termo de Cincia e Avaliao Mdica do Cliente,
o cadastro de clientes atendidos com datas de cada um, a durao e os intervalos das
sesses e o registro de reaes adversas.

Texto extrado de http://www.apele.com.br/beleza/read.asp?95
74
Dr. Carlos Roberto Antnio - CRM: 83.817-SP
Fonte: SKIN NEWS - STIEFEL Intl R&D BrasilData de publicao: 2/10/2003

Diidroxiacetona (DHA)

A diidroxiacetona um acar simples de trs carbonos, que no apresenta
toxicidade. Especificamente, esse acar um intermedirio da gliclise. A
diidroxiacetona usada em autobronzeadores preparada, principalmente, pela fermentao
do glicerol, utilizando-se Gluconobacter oxydans.
O stio de ao da diidroxiacetona na pele o estrato crneo. O processo de
autobronzeamento ocorre nas camadas mais externas da epiderme, atravs da reao de
Maillard (Figura 6.12), responsvel pelo bronzeamento que ocorre entre o grupo amino da
queratina da pele e o grupamento hidroxila da DHA, formando um produto de cor
marrom, conhecido como melanoidina.
O pH exerce uma importante funo no bronzeamento. O pH timo para a reao
de Maillard est entre 5 e 6, que o pH normal da pele saudvel. Quanto estabilidade
das formulaes base de diidroxiacetona, o pH ideal para as mesmas encontra-se entre 3
e 4, porm, considerando a tendncia ao decaimento de pH, algumas formulaes
apresentam pH inicial de 5,0.
A diidroxiacetona, quando aplicada pele, absorvida pelo estrato crneo, a
camada crnea mais externa da epiderme. A absoro sistmica da DHA, aps aplicao
tpica, considerada insignificante.
Atualmente, a colorao obtida com a utilizao de produtos base de
diidroxiacetona mais prxima do bronzeado natural, quando comparada quela obtida
com produtos mais antigos. As tonalidades obtidas podem ser mais aceitveis para as
pessoas com tom de pele de colorao intermedirio, em relao quelas de pele muito
clara ou muito escura. Por fim, fatores como a utilizao de DHA com maior grau de
pureza e o aprimoramento das formulaes, com valores de pH adequados, permitem um
bronzeamento mais rpido, empregando-se menores concentraes de DHA.
A vantagem da pigmentao cutnea induzida pela diidroxiacetona que ela no
pode ser removida por transpirao, mergulhos ou banho. O bronzeamento
proporcionado pela DHA somente sofre remoo atravs da descamao da pele
Com relao ao efeito protetor, este bastante limitado. Evidncias clnicas e
experimentais mostraram que a soluo tpica base de diidroxiacetona a 3% apresentou
FPS correspondente a 3, enquanto que uma soluo contendo DHA a 15% demonstrou
proteo UVA equivalente a 10.
A diidroxiacetona no aumenta a resistncia da pele ao sol. Os usurios de
produtos contendo DHA devem manter os cuidados normais em relao exposio solar,
atravs do uso regular e correto de protetores solares com FPS adequadamente definido,
segundo o tipo de pele, culos de sol, chapus e roupas protetoras.
Aps a aplicao das preparaes de diidroxiacetona, pode-se observar uma
alterao da colorao cutnea dentro de uma hora, e sob a luz de Wood, dentro de 20
minutos.
A maioria das pessoas pode alcanar a aparncia desejada de pele bronzeada com
duas a quatro aplicaes sucessivas, sendo que a aparncia desejada pode ser mantida
atravs de aplicaes contnuas a cada dois a quatro dias.
Em virtude do mecanismo de ao, que se caracteriza pela reao da
diidroxiacetona com as protenas do estrato crneo, a pigmentao cutnea correlaciona-se
75
diretamente com a espessura e compactao do estrato crneo. Assim, reas mais
queratinizadas, como joelhos, cotovelos, regio palmoplantar, pigmentam-se mais
intensamente do que outras reas cutneas em que o estrato crneo menos espesso.
Contudo, muito embora, em comparao com as extremidades, a face requeira menores
quantidades de produto para que se alcance a aparncia desejada, as reaplicaes devem
ser mais freqentes. Tambm, pelos motivos acima descritos, deve-se lavar bem as mos
aps a aplicao de produtos base de DHA.
Os plos, incluindo superclios e cabelos, e as unhas tambm so pigmentados pela
diidroxiacetona, enquanto que membranas mucosas no. As pessoas que tm cabelos
claros devem evitar o contato de autobronzeadores com os fios e a raiz. As preparaes de
DHA podem manchar tecidos.

Eritrulose

A eritrulose um ceto-acar natural que tambm reage com grupamentos amino
primrios e secundrios, pela reao de Maillard (Figura 6.12, ver Apndice I). A
eritrulose foi desenvolvida para reduzir ou eliminar as desvantagens dos autobronzeadores
atualmente disponveis no mercado, como bronzeamento manchado e irregular e
ressecamento cutneo intenso. As propriedades da eritrulose foram documentadas em
complexos estudos, realizados in vivo. Uma importante aplicao do conceito de novo
produto autobronzeador consiste em se fazer uso das vantagens complementares da
combinao eritrulose e diidroxiacetona. Em comparao com a formulao contendo
apenas DHA, a combinao produz um bronzeamento mais homogneo e duradouro e
isento de manchas. Adicionalmente, as reas tratadas com a combinao apresentam
menor ressecamento do que aquelas tratadas com DHA isoladamente. A eritrulose reage
mais lentamente com os aminocidos livres da camada crnea do que a diidroxiacetona. E
somando este fato distribuio mais uniforme da eritrulose no estrato crneo, acredita-se
que a combinao eritrulose/ DHA seja responsvel pelo bronzeamento mais uniforme e
duradouro. Resumindo, em comparao com o uso de diidroxiacetona isoladamente, a
eritrulose, em combinao com DHA, produz um bronzeamento intenso, uniforme, de
aspecto natural e sem manchas. Testes padronizados e bem definidos realizados com a
eritrulose demonstraram que esta substncia segura para o uso em produtos cosmticos.
A reao de Maillard (Figura 6.12) uma reao no enzimtica que depende de
acares simples (grupos carbonil) e aminocidos (grupos amino livres).




Figura 6.12 - Reao de Maillard.

76
Referncias

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Freeman and Co.; 2002.

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Vanicek, K., Frei, T., Litynska Z.,Schmalwieser, A..Um guia para a interpretao das
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77
http://www.pg.com/science/skincare

http://coolshade.tamu.edu/

http://www.cnn.com/2000/fyi/news/06/14/skin.cancer/index.html

http://www.apele.com.br/beleza/read.asp?95 (autobronzeadores)

http://www.agsci.ubc.ca/courses/fnh/410/colour/3_82.htm (reao de Maillard)

http://www.xps.org/
78
7. Radicais e espcies reativas de oxignio

Love is like oxygen: you get too much, you get too high,
not enough and you're gonna die

Atualmente, muitos cosmticos que prometem retardar o envelhecimento e at
rejuvenescer contm em sua formulao compostos (vitamina C, carotenos etc) que
combatem radicais livres. Mas afinal, o que so radicais livres, por que so to malficos e
como esto associados a envelhecimento?

Introduo

O aparecimento do oxignio liberado pelas cianobactrias entre 3,5 - 4 bilhes de
anos atrs alterou a composio da atmosfera terrestre drasticamente. Muitos organismos
no estavam adaptados a sobreviver a este gs txico, pois seus metabolismos no tinham
ainda os meios adequados para processar as reaes aerbicas (dependentes de oxignio).
Sendo assim, foi necessrio um longo processo de adaptao evolutiva at que fosse
possvel o aparecimento de organismos capazes de tirar proveito desta situao. Ento o
surgimento do oxignio, um gs a princpio muito txico, possibilitou posteriormente a
soluo de dois enormes entraves expanso da vida na Terra, que eram: (i) o rendimento
energtico, tornado muito mais eficiente pelo processo respiratrio dependente do
oxignio, e (ii) a proteo da atmosfera, contra as radiaes letais, raios ultravioleta etc.
pela camada de oznio (forma triatmica do oxignio) e assim foi possvel que se
instalasse e evolusse a fantstica diversidade da biosfera de nosso planeta, como a
conhecemos hoje em dia.


Atividade em software 5 Radicais

Software "Bioqumica - softwares educacionais" (Eduardo Galembeck e Bayardo Torres)



Espcies Reativas do Oxignio (EROs) e Radical
Livre

Entendendo a terminologia

O que um radical livre? A resposta mais simples a de um tomo ou grupo de
tomos que apresentam um ou mais eltrons desemparelhados. Um eltron
desemparelhado aquele que ocupa um orbital atmico ou molecular mais externo. Na
Tabela 7.1 abaixo podemos verificar alguns exemplos.
79

Tabela 7.1 Exemplos de radicais.
Espcies Nomes qumicos
CH
3
Radical metila
C
6
H
6
Radical fenil
RS

Radical Thiyl

OH Radical hidroxila


H ainda uma outra definio dada por Linus Pauling: Um tomo ou grupo de
tomos com um ou mais eltrons desemparelhados, os quais podem entrar na formao de
uma ligao qumica.
Historicamente, todos os substituintes presentes em uma molcula so
denominados de radical, como por exemplo, o radical metil no cianeto de metila (Figura
7.1) ou outras molculas.


H
3
C C N


Figura 7.1 - Estrutura qumica do cianeto de metila. Em destaque, o radical metil.


O trifenilmetil foi o primeiro radical descoberto pelo russo Moses Gomberg, que o
denominou livre uma vez que este radical no estava anexado a nenhum outro tomo ou
molcula. Entretanto, o termo livre, aps a palavra radical considerado, atualmente,
desnecessrio. Por fim, geralmente usa-se um ponto sobrescrito direita, antes da carga,
para se descrever um radical. Alguns exemplos de radicais reativos de oxignio e seus
respectivos nomes qumicos esto citados na Tabela 7.2 a seguir.

Tabela 7.2 - Exemplos de notaes comuns e abreviaes.
Espcies Nomes qumicos
O
2
-
Superxido
HO

hidroxil ou hidroxila
RO

alcoxil ou alcoxila
ROO

alquildioxil ou alquilperoxila
NO

monxido de nitrognio ou xido ntrico

As EROs (Espcies Reativas de Oxignio) so, como o prprio nome diz,
derivadas do O
2
e no precisam necessariamente ser radicalares. As mais comuns so:
nion superxido, radical hidroxil, perxido de hidrognio (H
2
O
2
) e oxignio singlete
(
1
O
2
).

Formao

As ligaes simples so constitudas por 2 eltrons de spins opostos:
A B ou A B

80
Essas ligaes podem ser rompidas de duas maneiras diferentes:

a) Ciso heteroltica: dois eltrons da ligao ficam presos a um dos fragmentos, que por
sua vez denominam-se ons:
A B A
+
B A B
+
+ + ou


Usualmente, as espcies com carga indicada na reao acima no so ons livres,
mas apenas carregam a carga parcial e esto apenas presentes no estado de transio.

b) Ciso homoltica: dois eltrons da ligao dividem-se simetricamente, e os
fragmentos so denominados radicais:


A B A

B

+


Este tipo de clivagem produz radicais, os quais, com algumas excees, so
espcies eletricamente neutras. Alm disso, a ciso homoltica requer o consumo de
energia seja essa energia trmica, fotoqumica, radiao ionizante e reaes de
transferncia de eltrons.

Reatividade

O oxignio molecular (O
2
) em seu estado fundamental um bi-radical, contendo
dois eltrons desemparelhados em seu orbital mais externo (estado este tambm conhecido
como triplete). Entretanto, estes dois eltrons desemparelhados apresentam spins de
mesma orientao, tornando o O
2
uma molcula pouco reativa, podendo reagir com apenas
um eltron por vez. Por outro lado, se um dos dois eltrons desemparelhados for excitado
e mudar sua orientao de spin, o resultado ser espcie altamente oxidante conhecida
como oxignio singlete, capaz de reagir com outros pares de eltrons, especialmente
duplas ligaes.
Os radicais esto sempre procurando por um outro eltron com o qual eles possam
formar pares. Alguns radicais, como o radical hidroxila, reagem com a maioria das
molculas prximas ao seu stio de formao, reagindo quase que a cada coliso (10
10
M
-1
s
-
1
). Entretanto, outras espcies so menos reativas ou ainda, muito pouco capazes de reagir
devido a sua alta estabilidade, como o radical trifenilmetila, capaz at de se manter num
tubo de ensaio.

Fontes de ERO: endgenas e exgenas

Em organismos aerbios, o oxignio molecular (O
2
) utilizado como aceptor final
de eltrons, durante a fosforilao oxidativa, onde reduzido a gua (H
2
O). Esta via
metablica responsvel pela manuteno do equilbrio energtico nesses seres.
A reduo incompleta do oxignio pela mitocndria durante a cadeia de transporte
de eltrons pode gerar espcies reativas de oxignio (ERO), tais como: (O
2
-
), H
2
O
2
e
radical hidroxila (OH

) (Figura 7.2). Estas espcies tambm podem ser geradas por

hipxia, isquemia-reperfuso ou ainda no processo de ciclo redox, por exemplo, durante a
81
oxidao de quinonas. Vale lembrar que as ERO representam um papel importante em
alguns processos fisiolgicos como, por exemplo, na proteo contra infeces
microbianas por clulas fagocticas (polimorfonucleares de macrfagos) e como
sinalizadoras em diferentes processos celulares. sabido ainda que a exposio de um
organismo radiao ionizante, cigarro, poluentes, pesticidas e ainda, durante a
biotransformao de xenobiticos pode ocasionar produo de intermedirios reativos de
oxignio. Algumas fontes endgenas e exgenas de ERO esto sumarizadas na Figura 7.3.


HO
2

e
-
+ H
+ e
-
+ H
+
e
-
+ H
+
H
2
O
2
e
-
+ H
+
O
2
O
2
-
HO
2
-
OH

H
2
O
HO
2

e
-
+ H
+ e
-
+ H
+
e
-
+ H
+
H
2
O
2
e
-
+ H
+
HO
2

e
-
+ H
+ e
-
+ H
+
e
-
+ H
+
H
2
O
2
e
-
+ H
+
e
-
+ H
+ e
-
+ H
+
e
-
+ H
+
H
2
O
2
e
-
+ H
+
O
2
O
2
-
HO
2
-
OH

H
2
O

Figura 7.2 - Reduo univalente do oxignio e formao de intermedirios reativos.



Fontes endgenas Fontes exgenas
Clulas
(macrfagos,
neutrfilo etc)
Processos patolgicos
(diabetes, inflamao,
cncer etc)
Poluentes Gases
atmosfricos
Produtos
qumicos
Radiao
Enzimas (xantina
oxidase, NO sintase
etc)
Mecanismos de defesa
Antioxidantes enzimticos
(SOD, CAT, GPx)
Antioxidantes no enzimticos
(tocoferis , cido ascrbico, carotenos )
FORMAO DE ESPCIES REATIVAS



Figura 7.3 - Algumas fontes de espcies reativas de oxignio e mecanismo de defesa.

Toxicidade das ERO: danos em biomolculas

conhecida a habilidade das ERO em reagir e oxidar componentes celulares tais
como lipdios, protenas e cidos nucleicos. Elas podem agir prximo ou distante do local


82
onde foram produzidas uma vez que a meia-vida dessas espcies pode variar de
nanossegundos a dias.

Oxidao de lipdios: lipoperoxidao

Sabemos que as membranas celulares so constitudas por lipdios polares que
perfazem de 20% a 80% de sua massa, sendo o restante, em sua maior parte, protenas. A
oxidao dos lipdios, conhecida como lipoperoxidao, pode diminuir a fluidez da
membrana e alterar sua funo como barreira semipermevel. A lipoperoxidao no-
enzimtica estimulada por metais de transio tais como sais de ferro e de cobre, que
causam a decomposio de lipoperxidos pr-formados. A lipoperoxidao enzimtica
catalisada pela ciclooxigenase e lipooxigenase, enzimas que catalisam a peroxidao
controlada de substratos graxos, produzindo hidroperxidos e endoperxidos (Figura 7.4),
que tm importantes funes biolgicas. Entretanto, os hidroperxidos podem interagir
com substratos oxidveis, como os compostos tilicos, carotenides e metais de transio
levando formao de espcies radicalares que podem causar danos e/ou reiniciar o
processo de lipoperoxidao.

Figura 7.4 - Mecanismo proposto para a formao de malonaldedo (MDA) a partir de um
cido graxo poliinsaturado (PUFA) (R1 e R2 podem ser qualquer cadeia aliftica para
formar um PUFA) via perxido ciclico. (1) Abstrao inicial de um hidrognio allico
(R3

). (2) Reao radicalar com O

2
formando um perxido cclico. (3) Ataque radicalar
intramolecular sendo seguido pela formao de um endoperxido cclico. O endoperxido
pode ser hidrolisado ou decompor-se termicamente, dando MDA e outros produtos.

Oxidao de protenas

Muitas protenas so constituintes de membranas e organelas celulares podendo,
portanto, ser danificadas pelas ERO, resultando em perda da estrutura da membrana. A
perda da especificidade de enzimas lesadas por ERO tambm pode resultar em graves
conseqncias, uma vez que a totalidade das reaes que ocorrem nas clulas so
catalisadas por enzimas.
(1)
(2)
(3)
or
hydrolysis
O
2

O
O
R
2
R
1
O
R
2
O
R
1

other
products
+
O
R
2
O
R
1

H H
O O
O
O
R
1
R
2
O
2

HR
3 R
2
R
1

+

R
2
H H
R
1
R
3

+
R
2
R
1

(1)
(2)
(3)
or
hydrolysis
O
2

O
O
R
2
R
1
O
R
2
O
R
1

other
products
+
O
R
2
O
R
1

H H
O O
O
O
R
1
R
2
O
2

HR
3 R
2
R
1

+

R
2
H H
R
1
R
3

+
R
2
R
1

83
Em protenas, as ERO podem causar: (i) alterao nos resduos de aminocidos
especficos, levando a alteraes conformacionais, bem como fragmentao ou
polimerizao; (ii) desnaturao e aumento da susceptibilidade hidrlise. Protenas com
altos ndices de grupos sulfidrilas so mais susceptveis ao ataque de ERO.


Oxidao de cidos nucleicos

Em DNA, as ERO tambm podem causar quebra de uma ou duas fitas,
modificao das bases nitrogenadas ou ainda modificaes de protenas ligadas ao DNA
(Figura 7.5). Vrias ERO podem estar envolvidas no dano ao DNA, entre elas, radicais
OH

, ferrila (Fe= O
2+
) ou perferrila (Fe=O
3+
), radicais estes que podem ser formados pela
reao do O
2
-
com Fe
3+
(reao de Fenton). Alm dessas espcies,
1
O
2
, oznio e H
2
O
2

reagem de forma mais especfica com o DNA. Essas alteraes podem ser demonstradas
pela formao de adutos de DNA, relacionadas presena de alguns hidrocarbonetos e,
ainda, pelas quebras de cromossomos, ocasionadas por oxi-radicais. A conseqncia
destas perturbaes estruturais pode ser incua, devido ao reparo do dano, ou resultar em
morte da clula danificada. Os reparos consistem em exciso e insero de bases,
ressntese e ligao. Entretanto, as leses no reparadas podem resultar em alteraes
permanentes que, eventualmente, podero ser transmitidas para as clulas filhas.
As modificaes causadas pelas ERO no DNA incluem a produo de bases
hidroxiladas resultantes do ataque do radical OH

a vrios stios do DNA. Exemplos

destas bases modificadas so a 8-hidroxidesoxiguanosina (8-OHdG) e a timina-glicol,
entre outras. A 8-OHdG, aparentemente, derivada do ataque do radical OH

na posio
C-8 da guanina.




Figura 7.5 - Fontes de ERO e seu potencial oxidativo em DNA.

O aumento na produo de ERO e a sua interao com macromolculas podem
tambm alterar o estado redox nas clulas e/ou tecidos. Clulas saudveis regulam a
manuteno de equivalentes redutores, como NADH e NADPH, responsveis pela energia
requerida em processos metablicos. A glutationa reduzida (GSH), fonte de poder redutor,
tambm importante por ser um cofator em reaes de detoxificao. Contudo, EROs
84
podem causar uma queda na concentrao intracelular destes equivalentes redutores,
interrompendo assim diversos processos metablicos.







85

Sistema de defesa antioxidante
Estudo dirigido 7.1 Espcies Reativas de Oxignio

1. O que so Espcies Reativas de Oxignio? Cite pelo menos quatro fontes de ERO. Toda
ERO um radical? Justifique.

2. O aumento de ERO capaz de causar a oxidao de importantes componentes celulares.
a) Cite dois desses componentes.
b) Explique porque reaes das EROs com estas biomolculas podem ser capazes de
provocar, em ltimo ponto, a morte celular.
c) De que maneira estas reaes podem provocar alteraes que sero posteriormente
passadas para clulas filhas?

3. Voc estudou que as EROs so capazes de reagir com biomolculas importantes,
podendo alterar desde a fluidez da membrana plasmtica como provocar a inativao de
certas enzimas. Entretanto, sabemos que estas espcies, em baixas concentraes,
apresentam funes extremamente importantes para as clulas. Quais so elas?

4. A figura abaixo foi obtida atravs de um experimento que consistia em submeter
moscas domsticas (Musca domestica) a cinco condies diferentes e verificar seus
tempos de vida.



Figura extrada de Halliwell B. & Gutteridge, 1999 - 50 moscas normais (A) ou moscas
que tiveram suas asas retiradas (B) foram colocadas em um grande aqurio. No grupo C,
cada mosca foi colocada sozinha em um grande aqurio. Nos outros grupos, moscas
normais (D) ou que tiveram suas asas retiradas (E) foram colocadas em garrafas pequenas,
uma por garrafa, para prevenir que voassem.

a) O que voc acha que estes cientistas pretendiam verificar com este experimento?
b) De acordo com o que voc aprendeu sobre ERO x metabolismo (A-D), justifique os
resultados encontrados.

P
e
r
c
e
n
t
a
g
e

s
u
r
v
i
v
i
n
g

Age (days)
86

If life gives you lemons, make lemonade

As clulas so capazes de se defender contra os efeitos deletrios das ERO por
mecanismos de defesa antioxidante. Em organismos aerbios saudveis, os nveis de ERO
esto em equilbrio com o sistema de defesa antioxidante. Entretanto, o desbalano
metablico entre a produo de ERO e o sistema de defesa antioxidante caracteriza o
estresse oxidativo celular. Esse desequilbrio pode ser causado pelos seguintes fatores: (i)
diminuio da defesa antioxidante causada por mutaes nas enzimas de defesa; (ii)
diminuio da ingesto de vitaminas e outros constituintes na dieta; (ii) aumento da
produo de ERO causada por fatores ambientais como, por exemplo, fumo, radiao
(ultravioleta, raios X etc.); (iii) excesso de atividade fsica; (iv) ingesto de gorduras; (v)
consumo de lcool; (vi) estresse fsico e mental; (vii) inflamaes e infeces, entre outros.
O sistema antioxidante de um organismo pode ser didaticamente dividido em
enzimtico e no enzimtico.
Dentre as substncias qumicas antioxidantes naturais encontram-se o cido
ascrbico (vitamina C), -tocoferol (vitamina E), carotenides, flavonides, bilirrubina,
cido rico e tiis, como por exemplo, o tripeptdeo glutationa reduzida (GSH).
Como parte do sistema de defesa antioxidante enzimtico, pode-se citar a
superxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx).


Sistema antioxidante enzimtico

Superxido Dismutase (SOD)

Em eucariotos, a SOD est presente sob duas formas: a isoforma CuZn-SOD,
localizada no citoplasma celular, que apresenta cobre e zinco em seu stio cataltico, e a
outra isoforma, Mn-SOD, que mitocondrial e apresenta um tomo de mangans em seu
stio ativo. De forma geral, a SOD est presente quase que exclusivamente no meio
intracelular, apresentando pequenas concentraes no plasma, fluido espinhal e linfa; esta
forma designada ECSOD (extra celular SOD). Sua funo dismutar o O
2
-
(Kv = 2
x10
9
M/s), como mostra a seguinte reao:


2 O
2
-
+ 2 H
+
H
2
O
2
+ O
2



Catalase (CAT)

A CAT uma hemoprotena, presente na maior parte dos tecidos e age removendo
tanto o H
2
O
2
gerado pela reduo de 2 eltrons do O
2
, quanto indiretamente pela
dismutao do O
2
-
(via SOD). Essa enzima apresenta-se ligada em organelas denominadas
peroxissomos e especfica para H
2
O
2,
no apresentando atividade para hidroperxidos
orgnicos, como descrito na reao a seguir:

H
2
O
2
+ H
2
O
2
2 H
2
O + O
2

SOD
CAT
87

Glutationa peroxidade (GPx), glutationa redutase (GRH) e glutationa
reduzida (GSH)

Embora a glutationa em sua forma reduzida (GSH) faa parte do sistema
antioxidante no enzimtico, conveniente que seu papel seja abordado juntamente com a
GPx e GRH. Vamos entender porqu:
Estas duas enzimas pertencem ao sistema enzimtico que auxilia o restabelecimento
dos nveis intracelulares de GSH. A GSH (L-glutamil-L-cisteinil-glicina) um dos
tripeptdeos mais abundantes (de 1 a 10 mM), presente tanto em clulas animais, quanto
em plantas e bactrias, sintetizado intracelularmente a partir do cido glutmico, cistena e
glicina. Desempenha um papel importante em muitos processos biolgicos, entre eles, a
sntese de protenas e de DNA, como cofator de vrias enzimas, na proteo celular contra
agentes ionizantes e compostos exgenos e, principalmente, contra as ERO.
A glutationa tem dois aspectos estruturais interessantes: a ligao peptdica -
glutamil, entre glutamato e cistena e o grupo tiol (SH) da cistena, que a chave para as
propriedades antioxidantes da GSH. Em soluo, quando o pH alcalino ou neutro, o tiol
facilmente oxidvel, especialmente na presena de algum on metlico, como o ferro e o
cobre. A glutationa celular est normalmente presente na forma reduzida, estando a forma
oxidada GSSG, presente em menos de 5% (Figura 7.6). Esta razo confere sua
importncia em diversas funes biolgicas que dependem do grupo tiol, de seu resduo
cisteinil.



-Glu - Cys - Gly
-Glu - Cys - Gly
S
S
-Glu - Cys - Gly
SH
Glutationa
reduzida
Glutationa
oxidada
(GSH) (GSSG)


Figura 7.6 Estrutura qumica da forma reduzida e oxidada da glutationa. Normalmente,
a forma intracelular predominante a reduzida, estando a oxidada presente em menos de
5%.


Dessa forma, a glutationa pode ser considerada fundamental no metabolismo do
perxido de hidrognio, perxidos orgnicos, bem como ERO, pois age como doadora de
eltrons nas reaes catalisadas pela GPx de acordo com as reaes:


H
2
O
2
+ 2 GSH 2 H
2
O + GSSG

LOOH + 2 GSH GSSG + H
2
O + LOH

GPx
GPx
88
Dessa forma, ela protege as clulas dos danos causados pelas Espcies Reativas de
Oxignio.
A glutationa oxidada (GSSG) pode ser convertida a sua forma reduzida pela
enzima glutationa redutase (GR), utilizando NAD(P)H como coenzima, restabelecendo
assim, os nveis intracelulares de GSH:


GSSG + NAD (P)H + H
+
2 GSH + NAD(P)
+


A glicose 6-fosfato desidrogenase (G-6PDH), enzima da via das pentoses-
monofosfato, fornece o equivalente redutor NADPH, indispensvel para manuteno da
atividade da GRH. A GRH utiliza os eltrons do NADPH para reduo da ponte dissulfeto
da GSSG, restabelecendo os nveis intracelulares de GSH.
A relao de concentrao entre GSH/GSSG mantida alta nas clulas normais,
pelas enzimas auxiliares, GRH e G-6PDH, que regeneram GSH. Esta relao deve ser
mantida alta, devido ao fato da GSSG poder reagir com vrias enzimas, inativando-as pela
adio de pontes disulfetos.


Sistema de defesa antioxidante no enzimtico

Existem vrias molculas que podem agir como antioxidantes celulares atravs de
diferentes mecanismos. Algumas destas molculas, como o -caroteno e o licopeno podem
atuar como supressores de oxignio singlete e de OH

. O ubiquinol-10 e o urato
apresentam uma alta eficincia, como supressores de radicais OH

, impedindo a fase de
propagao no processo de lipoperoxidao. Por sua vez, o -tocoferol (vitamina E)
interrompe a abstrao de hidrognio neste processo, agindo assim como supressor de
radicais peroxila e alcoxila. O ascorbato (vitamina C) e a GSH apresentam poder redutor,
restabelecendo a concentrao de tocoferol, a partir do radical tocoferoxila, formado no
processo acima citado. Existem tambm as molculas responsveis por quelar metais, que
so a ceruloplasmina, a metalotionena, a ferritina e a transferrina e antioxidantes
plasmticos, como a bilirrubina, urato e albumina.
Quanto solubilidade, estas molculas podem ser divididas em dois grupos:
lipossolveis e hidrossolveis, o que assegura clula, defesas antioxidantes tanto no
citossol quanto nas membranas celulares.
Dentre as vitaminas hidrossolveis que compem o sitema antioxidante no
enzimtico, a vitamina C, sem dvida, uma das mais conhecidas por sua freqente
utilizao em cosmticos (vide Box 7.1).









GR
89
Box 7.1. Vitamina C (cido ascrbico ou L-ascrbico) - Histrico

O primeiro isolamento da vitamina C foi obtido pelo cientista hngaro Albert Szent-
Gyrgyi em 1928, que trabalhava com a natureza das oxidaes dos nutrientes e sua
relao com a produo de energia. Ele isolou um fator redutor de glndulas supra-renais
em forma cristalina, que batizou de "cido hexurnico", um derivado da -D-glicose. Na
mesma poca, em 1932, King e Waugh encontraram um composto idntico no suco de
limo. Pouco depois, em 1933, Hirst e Haworth anunciaram a estrutura da vitamina C e
sugeriram, em conjunto com Szent-Gyrgyi, a mudana do nome para cido L-ascrbico,
por inferncia s suas propriedades antiescorbticas. Em 1933, T. Reichstein e
colaboradores publicaram as snteses do cido D-ascrbico e do cido L-ascrbico, que
ainda hoje formam a base da produo industrial de vitamina C. Ficou provado que o
cido L-ascrbico sintetizado possui a mesma atividade biolgica da substncia isolada de
tecidos naturais. Em 1937 Haworth (Qumica) e Szent-Gyrgyi (Medicina) foram
agraciados com o prmio Nobel por seus trabalhos com a vitamina C.

O cido ascrbico participa de vrias reaes enzimticas, como cofator de muitas
enzimas. Contudo, sua atuao como antioxidante devida habilidade de atuar como um
agente redutor (AH2), destacando desta forma uma de suas mais importantes propriedades
que so a de ser oxidado a cido dehidroascrbico (A) (Figura 7.7).





Figura 7.7 Estrutura qumica das formas do cido ascrbico: esquerda atua como
agente redutor e direita, j oxidado.


O ascorbato pode reagir rapidamente com O
2
-
e com o radical OH

e ainda, poder
agir como supressor de oxignio singlete.
O cido ascrbico quando administrado isoladamente tambm atua contra os danos
induzidos pela radiao UV, capturando as espcies reativas geradas.
Em pH fisiolgico, a vitamina C est presente na forma de nion ascorbato, sendo
que esta forma apresenta menor penetrao em comparao sua forma esterificada
(palmitato de ascorbila), que mais lipossolvel. interessante o fato de os estudos
mostrarem que a aplicao de uma formulao contendo ascorbato pode aumentar em at
25 vezes a sua concentrao na pele animal; contudo a suplementao oral no parece
contribuir significativamente na pele.
Por outro lado, a vitamina C, assim como o -tocoferol, pode atuar como pr-
oxidante, pois, por ser um forte agente redutor, alm de capturar espcies reativas, pode
tambm reduzir metais de transio, facilitando a formao dessas espcies, como
mostrado nas reaes abaixo:
90


Lipossolveis

-Tocoferol (vitamina E)

um antioxidante lipossolvel que, devido s suas caractersticas hidrofbicas,
tende a se concentrar nas membranas. Possui importante atuao na primeira linha de
defesa antioxidante, contra danos s membranas celulares. Esta proteo se deve ao do
-tocoferol que reage com oxignio singlete e com OH

. Entretanto, sua maior ao

antioxidante reside na sua eficiente propriedade de suprimir radicais peroxila (ROO

) das
pores lipdicas de membranas biolgicas, interrompendo assim, a reao em cadeia da
lipoperoxidao.
Inmeros so os trabalhos relatando que o -tocoferol pode atenuar o estresse
oxidativo, principalmente por proteger membranas contra a lipoperoxidao.

Por este fato,
uma vitamina amplamente utilizada tanto como suplemento oral, como em produtos de
uso tpico, para a preveno de doenas. Alm da biotransformao que pode ocorrer
durante a digesto, outros fatores como a composio da dieta, podem interferir na
biodisponibilidade dos suplementos administrados por via oral. A vitamina E, por ser uma
molcula lipossolvel, necessita de ingesto concomitante de gordura para que seja
absorvida, e assim possa atuar na pele. Vrios produtos fotoprotetores ou para aplicao
aps exposio ao sol contm o -tocoferol, ou seu ster, como princpio ativo
coadjuvante, por inibir no somente a lipoperoxidao como tambm a formao de
dmeros de timina e a imunossupresso.
A administrao de antioxidantes em combinao parece ser uma estratgia de
tratamento mais efetivo. Este sinergismo pode ser muito bem exemplificado pelo uso
concomitante das vitaminas E e C. Em estudos com voluntrios foi verificado que o uso da
vitamina E apresenta maiores efeitos benficos quando administrada em conjunto com a
vitamina C, pelo fato de ambas atuarem sinergisticamente, sendo que a vitamina C pode
reciclar o radical tocoferila e a combinao dessas vitaminas pode aumentar, em grande
parte dos casos, a atividade antioxidante total (Figura 7.8).

O R
HO
O R
O
-tocoferol
radical tocoferil
.
LOO
LOOH
.
vitamina C
radical
ascorbil


Figura 7.8 Comportamento sinergstico das vitaminas C e E. A vitamina C recicla o
radical tocoferila da vitamina E, responsvel por sua atividade antioxidante.


91
Outros metablitos da vitamina E, seja aplicada topicamente ou administrada via
oral, como quinonas ou produtos da oxidao de sua cadeia, tambm vm sendo
identificados e estudados. Alm de seus efeitos benficos, o risco do uso desta substncia
por via oral ou tpica tambm deve ser considerado e a relao custo-benefcio avaliada
antes de seu uso indiscriminado.


Carotenides

O -Caroteno e o licopeno so carotenides que exercem funes antioxidantes nas
fases lipdicas, atravs da supresso de radicais livres, como nion superxido (O
2
-
),
radical hidroperoxila (HO
2
-
) e o radical hidroxila.
Normalmente, os carotenides so conhecidos por esta funo antioxidante, contudo,
podem tambm diminuir a formao de oxignio singlete reagindo diretamente com ele e
liberando energia na forma de calor.
O -caroteno um precursor da vitamina A e sua taxa de converso baixa. Ela
depende da atividade de fatores condicionantes, da caroteno desidrogenase, da saturao
do organismo em vitamina A, da quantidade unitria ingerida e do aporte proteico. O
consumo de -caroteno deve ser em mdia 1,5mg/dia e todo o excesso ingerido pode ser
encontrado na pele, conferindo um tom alaranjado.
Os carotenides possuem a habilidade de interagir com espcies reativas,
formando adutos ou carotenides radicalares, inibindo processos oxidativos, alm de
atuarem sinergisticamente com outros antioxidantes. Por isso, fazem parte de outra classe
de compostos amplamente utilizados como suplementos para o restabelecimento do
equilbrio redox. Sua atividade antioxidante dependente da tenso parcial de O
2
presente
no meio. Em baixas presses de O
2
, como a encontrada na maioria dos tecidos, inibe a
oxidao, porm, pode ser pr-oxidante em maiores concentraes deste gs, podendo
reagir com cistena ou tirosina.
Ao lado do uso oral, a aplicao tpica de carotenides tambm uma maneira
eficaz de restabelecer o balano redox cutneo. Alguns trabalhos mostram sua atividade
frente ao estresse oxidativo causado pela radiao UV, sendo que sua habilidade protetora
aumenta quando aplicado na pele juntamente com vitaminas. Por serem molculas pouco
estveis, a veiculao dos carotenides requer um desenvolvimento farmacotcnico
elaborado, para a manuteno de sua integridade na formulao.
Tambm para o restabelecimento do equilbrio redox cutneo, bem como para
preveno ou tratamento de patologias causadas por estresse oxidativo, so utilizadas
muitas classes de substncias antioxidantes provenientes de produtos naturais. Muitos
extratos so veiculados em formulaes para uso tpico, tendo sua eficcia comprovada.
Alm disso, inmeras so as formas orais de suplementao, como a ingesto de chs,
cpsulas, decotos, entre outros. So vastos os estudos na literatura que abordam o uso de
antioxidantes oriundos de produtos naturais e seus efeitos so verificados principalmente
frente aos efeitos da radiao UV, sendo utilizados alguns extratos como o de Calendula
officinalis, de Polypodium leucotomos, de Pothomorphe umbellata, dentre outros.
O ch verde, nome popular dado para a infuso obtida a partir da planta Camellia
sinensis, rico em catequinas, que so poderosos antioxidantes. Dentre os efeitos
observados, pode-se citar a inibio da lipoperoxidao e dos danos causados ao DNA
pelas espcies reativas, a inibio da imunossupresso e da inflamao cutnea induzida
pela radiao UV, a induo de apoptose nas clulas tumorais e inibio do crescimento
do tumor induzido pela radiao UV. Alm de ser consumido por quase um tero da
92
populao mundial, tem sido encontrado tambm em produtos para uso tpico,
apresentando efeitos semelhantes.
Outra planta muito utilizada o Ginkgo biloba, que apresenta propriedades
antiinflamatrias, imunomodulatrias e antioxidantes, e vem sendo clinicamente testada
em desordens cutneas. Recentemente foi demonstrada a sua eficcia tambm no
tratamento de pacientes com vitiligo, sendo que a ingesto de 40mg de seu extrato
mostrou-se eficaz em controlar a doena, alm de repigmentar reas afetadas.
Alguns autores defendem ainda que os antioxidantes naturais so promissores na
preveno do cncer de pele, pois muitos j mostraram seus efeitos anticarcinognico e
antimutagnico, alm de baixa toxicidade.
Assim, o uso de substncias antioxidantes, por via oral ou tpica, pode colaborar
com os sistemas internos de proteo, alm de contribuir para preveno de problemas em
longo prazo, como o cncer de pele.

Estudo dirigido 7.2 Sistema oxidante

1. Caracterize estresse oxidativo. Cite algumas situaes em que ele pode ocorrer.

2. A figura abaixo representa o esquema de cooperao do sistema antioxidante
enzimtico. Com base no que j foi apresentado, complete-o.


Onde: CAT-catalase GR-Glutationa redutase

3. As vitaminas C e E so conhecidas por sua ao antioxidante.
a) Discuta brevemente porque elas devem ser ingeridas concomitantemente.
b) sabido que em altas concentraes, as vitaminas C e E podem agir, ao contrrio do
que se espera, como pr-oxidantes. Baseado nesta informao qual a sua opinio a
respeito da suplementao vitamnica sem prescrio mdica.


Referncias

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Sunrise Free Radical Scholl, Congresso de Radical Livre, Passadena.

2H2O + O2


OH

Fe
+2
Fe
+3

H2O
GSSG
GR

O
2
-

NADPH
+
LOOH


CAT
93
Beckamn, J.S. & Koppenol, W.H. (1996) Nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite: the
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94
8. Estrutura da pele III a matriz
extracelular


Integrao das clulas em tecidos

Para que as clulas se organizem em tecidos, necessrio que haja adeso entre
elas, de forma a manterem-se juntas. Protenas integrais de membrana, chamadas de
molculas de adeso celular CAMs (de cell-adhesion molecules) -, permitem adeso
forte e especfica de muitas clulas animais com clulas do mesmo tipo ou similares.
Outras protenas formam junes celulares especializadas que estabilizam estas interaes
e promovem a comunicao local entre clulas adjacentes.

Adeso celular

As CAMs podem mediar a adeso homoflica (entre clulas do mesmo tipo) e
heteroflica (entre clulas diferentes). A poro citosslica destas protenas est
normalmente conectada a elementos do citoesqueleto.
H cinco classes principais de CAMs: as caderinas, a superfamlia de
imunoglobulinas (Ig), as selectinas, as mucinas e as integrinas.
Alm das ligaes estruturais, as clulas em tecidos esto em comunicao direta
por gap junctions. As gap junctions esto distribudas pela superfcie lateral de clulas
adjacentes e permitem a troca de pequenas molculas.

Matriz Extracelular

As clulas animais organizadas em tecido tambm secretam uma ampla
diversidade de protenas e carboidratos, chamada de matriz extracelular ECM (de Extra
Cellular Matrix), criando um ambiente especial nos espaos entre as clulas. A matriz
auxilia a ligao das clulas em tecidos e um reservatrio para muitos hormnios que
controlam o crescimento e a diferenciao celular. A matriz tambm serve como um
suporte atravs do qual as clulas podem se mover, especialmente durante os estgios
primrios de diferenciao. Problemas nestas conexes podem levar ao cncer e
malformaes durante o desenvolvimento.

A matriz extracelular possui trs componentes proteicos majoritrios:

1- protenas estruturais: insolveis, que proporcionam fora e resistncia (colgeno e
elastina);
2- protenas especializadas (multiadesivas solveis): ligao, sinalizao (fibrilina,
fibronectina e laminina);
95
3- proteoglicanos: altamente viscosas, compostas de um ncleo proteico ao qual se ligam
longas cadeias de dissacardeos repetidos (glicosaminoglicanos), formando
componentes da ECM altamente complexos e de alto peso molecular.

Compostos especficos da matriz extracelular podem ativar diretamente vias de
transduo de sinal citosslicos, ao ligar-se a receptores de protenas de adeso celular na
membrana plasmtica. Alternativamente, pela ligao de fatores de crescimento e outros
hormnios, a matriz extracelular pode tanto seqestrar estes sinais das clulas ou
contrariamente, apresent-los s clulas, assim induzindo ou inibindo indiretamente as
vias de sinalizao intracelular.

Adeso clula-matriz

A matriz proporciona uma rota para migraes celulares, e molculas na matriz
ativam vias clssicas de transduo de sinal que induzem o crescimento, proliferao
celular e expresso gnica.
A principal classe de CAMs que medeiam a adeso clula-matriz so as integrinas.
As integrinas so heterodmeros de subunidades e . Em mamferos, so conhecidos
pelo menos 22 heterodmeros, formados de 17 tipos de subunidade e 8 tipos de
subunidade .
As clulas se ligam matriz extracelular atravs de dois tipos de junes
dependentes de integrinas:

adeses focais, que ligam o citoesqueleto de actina s fibras de fibronectina e
hemidesmossomos, que conectam filamentos intermedirios lmina basal.

Junes clula-matriz contendo integrinas so encontrados em clulas altamente
mveis como os queratincitos da pele, que so pouco aderentes; e tambm em clulas
imveis altamente aderentes como as do epitlio.


Fibras do tecido conjuntivo de sustentao
Os compostos fibrosos do tecido de sustentao so de dois tipos principais:
colgeno e elastina.

Colgeno

O colgeno a principal protena fibrosa encontrada na matriz extracelular. Em
vertebrados, h pelo menos 27 tipos de colgenos com 42 cadeias polipeptdicas distintas.
Todas as molculas de colgeno consistem em trs cadeias polipeptdicas, chamadas de
cadeias , contendo pelo menos um domnio com a seqncia Gly-X-Y, formando uma
estrutura de tripla hlice caracterstica, semelhante a uma trana Figura 8.1-A. Os
diferentes colgenos se distinguem pela habilidade das suas regies helicoidais e no
helicoidais de se associarem em fibrilas, formando folhas, ou de se ligarem com diferentes
tipos de colgeno.
96

Figura 8.1 - Colgeno e elastina: a) Colgeno uma tripla hlice formada por trs cadeias
proteicas estendidas que se entrelaam. Muitas molculas de colgeno em forma de haste
sofrem cross-link no espao extracelular, formando fibrilas de colgeno que apresentam
a fora tensora do ao. As listas na fibrila de colgeno so devidas repetio regular do
arranjo das molculas de colgeno na fibrila. b) Cadeias polipeptdicas de elastina sofrem
cross-link, formando fibras elsticas. Quando a fibra estendida, cada molcula de
elastina se desenrola em uma conformao mais estendida, retomando espontaneamente a
conformao original quando a fora tensora relaxada.

Molculas de colgeno fibroso (tipos I, II e III) se associam em fibrilas. Na Tabela
8.1 esto descritos alguns tipos de colgeno e algumas de suas propriedades.

Tabela 8.1 - Alguns tipos de colgenos e suas propriedades.
tipo frmula molecular forma polimerizada distribuio nos tecidos

Formao de fibrila
(fibrilar)
I [1(I)]
2
2 (I) fibrila ossos, pele, tendes, ligamentos, crnea,
rgos internos (90% do colgeno
corpreo)
II [1(II)]
3
fibrila cartilagem, disco invertebral, notocorda,
humor vtreo dos olhos
III [1(III)]
3
fibrila pele, vasos sanguneos, rgos internos
V [1(V)]
2
2(V) e
1(V)2(V)3(V)
fibrila (com tipo I) como tipo I
XI 1(XI)2(IX)3(XI) fibrila (com tipo II) como tipo II
Associada fibrila VI [a1(VI)][a2(VI)] associao lateral com
tipo I
tecidos intersticiais
IX 1(IX)2(IX)3(IX) associao lateral com
algumas fibrilas tipo II
cartilagem
XII [1(XII)]
3
associao lateral com
algumas fibrilas tipo I
tendes, ligamentos
Formao de rede IV [1(IV)]
2
2(IV) rede tipo folhas lmina basal
VII [1(VII)]
3
fibrilas de ancoramento epitlio escamoso estratificado
Transmembrana XVII [1(XVII)]
3
no conhecida hemidesmossomos
Outros XVIII [1(XVIII)]
3
no conhecida lmina basal nos vasos sanguneos

Note que os tipos I, IV, V, IX e XI so compostos de dois ou trs tipos de cadeias , enquanto que os tipos II, III, VII, XII, XVII e
XVIII so compostos de uma nica cadeia .


97
A maioria dos colgenos fibrilar e composto de molculas do tipo I. Uma rede
bidimensional de colgeno tipo IV caracterstico da lmina basal (Figura 8.2).


Figura 8.2 - Modelo da estrutura molecular da lmina basal. (A) A lmina basal
formada por interaes especficas (B) entre as protenas de colgeno tipo IV, laminina e
nidogeno, e a proteglicano perlecan. As setas em (B) conectam molculas que podem se
ligar diretamente umas s outras. H vrias isoformas do colgeno tipo IV e laminina,
cada uma com uma distribuio especfica nos diferentes tecidos. Acredita-se que os
receptores de laminina transmembranares (integrinas e distroglicanas) na membrana
plasmtica organizam o arranjo da lmina basal. Somente as integrinas esto mostradas.


O colgeno secretado para a matriz extracelular na forma de procolgeno, que
consiste em trs cadeias polipeptdicas (cadeias ) unidas para formar uma estrutura
helicoidal. Na matriz extracelular, as molculas de procolgeno polimerizam-se para
formar o colgeno (Figura 8.3).
98

Figura 8.3 - (A) Eventos intra e extracelulares da formao de uma fibrila de colgeno. (B)
Micrografia eletrnica de uma fibrila de colgeno.

As fibrilas de colgeno, compostas de diversas triplas hlices de colgeno, mantm
sua estrutura atravs da formao de ligaes covalentes (entre as triplas hlices). Dois
aminocidos esto envolvidos na formao destas ligaes cruzadas, Lys e His (Figura
8.4). As cadeias laterais destes dois aminocidos so ligadas covalentemente por uma
enzima chamada Lisil oxidase.



99
Figura 8.4 - Molculas de colgeno formam fibrilas. As molculas sobrepem cerca de
1/4 de seu comprimento e h um pequeno espao entre o N terminal de uma molcula e o
C terminal da outra. A fibrila mantida por ligaes cruzadas covalentes entre as cadeias
laterais de Lys, His ou hidroxi-Lys, principalmente nos trminos das molculas de
colgeno.


O colgeno fibroso possui exigncias estruturais especficas e muito susceptvel
mutao, especialmente nos resduos de glicina. Como as cadeias de colgeno mutante
podem afetar a funo das cadeias selvagens, estas mutaes tm um fentipo dominante.



Elastina

Molculas de elastina formam uma rede interligada de fibras e folhas na matriz
extracelular, particularmente na pele, pulmo e vasos sanguneos, onde conferem as
propriedades de estiramento e retrao elstica. A elastina sintetizada por fibroblastos
em uma forma precursora conhecida como tropoelastina, que sofre polimerizao no
ambiente extracelular. A deposio de elastina na forma de fibras requer a presena de
microfibrilas da glicoprotena estrutural fibrilina, que so incorporadas estrutura. A
Figura 8.1-B mostra detalhes da elastina.



Outros componentes da matriz extracelular

A laminina uma protena multiadesiva na lmina basal que se liga ao heparan
sulfato, colgeno tipo IV e a receptores especficos na membrana plasmtica.
As fibronectinas so protenas multiadesivas que ligam os colgenos e outras
protenas da matriz a integrinas na membrana plasmtica, assim anexando as
clulas matriz.
Os glicosaminoglicanos so cadeias lineares de 20-100 dissacardeos sulfatados.
Os dissacardeos mais comuns so sulfato de condroitina, heparina e heparan
sulfato, e dermatan sulfato.
Os proteglicanos consistem em mltiplas cadeias de glicosaminoglicanos que se
ramificam a partir de uma cadeia proteica linear. Proteglicanos extracelulares so
molculas grandes, altamente hidratadas que auxiliam na proteo das clulas.
Pequenos proteglicanos se ligam superfcie celular, onde facilitam as interaes
clula-matriz e auxiliam na apresentao de alguns hormnios aos seus receptores
na superfcie celular.
O cido hialurnico um polissacardeo extremamente longo e carregado
negativamente. Ele forma gis viscosos e hidratados que resistem a foras de
compresso. Quando ligado a receptores especficos em certas clulas, o cido
hialurnico inibe a adeso clula-clula e facilita a migrao celular.

Os componentes da matriz so degradados por enzimas proteolticas extracelulares.
A maioria delas so metaloproteases, que dependem de ligao de Ca
2+
ou Zn
2+
para a
atividade, enquanto que outras so serina proteases, que tm uma serina reativa no seu
centro ativo. Vrios mecanismos operam para assegurar que a degradao dos
100
componentes da matriz seja estritamente regulada. As clulas podem, por exemplo, causar
a degradao localizada de componentes da matriz extracelular para abrir um caminho
pela matriz (veja mais detalhes na Seo 9).


Atividade em software 6 Colgeno

Demonstrao de modelo de molcula de colgeno com Rasmol


Estudo dirigido 8.1 - Atividade em software 5

1. Poliprolina pode formar uma tripla hlice de colgeno?



Estudo dirigido 8.2 Colgeno

1. Complete a tabela abaixo, descrevendo os componentes envolvidos.

tripla hlice de colgeno fibrila de colgeno
ponte de hidrognio
ligao covalente
interao hidrofbica

2. Por que o colgeno insolvel em solventes que rompem pontes de hidrognio e
interaes inicas?



Questes 8.1

1. Primatas so incapazes de sintetizar cido ascrbico e, portanto devem obter este
elemento a partir da dieta. A necessidade do ascorbato evidente na doena conhecida
como escorbuto, um mal clssico dos marinheiros de longo curso que hoje em dia
praticamente desconhecido. Uma manifestao observada nos cabelos que pode
sugerir a carncia de vitamina C os plos tornarem-se crespos nos locais onde antes
eram lisos. O excesso de vitamina C pode causar formao de clculos de oxalato nos
rins.
Em 1536 Jacques Cartier escreveu a respeito do mal causado pela deficincia de
vitamina C que acometia os homens que exploravam o Rio Saint Lawrence.
Some did lose all their strength, and could not stand on their feet.(...) Others also had
all their skins spotted with spots of blood of a purple colour: then did it ascend up to their
ankles, knees, thighs, shoulders, arms, and necks. Their mouths became stinking, their gums so
rotten, that all the flesh did fall off, even to the roots of the teeth, which did also almost all fall
out

101
Abaixo est um grfico relacionando a estabilidade da protena de colgeno com a
temperatura.

50
100
Porcentagem
de
hlice
Colgeno
sem
hidroxiprolina
Colgeno normal
Temperatura (
0
C)
20
40 60

Com base nestas informaes e na reao de formao de 4-hidroxiprolina, como
poderia ser explicada a grande instabilidade da protena na ausncia de vitamina C?




Formao de 4-Hidroxiprolina: Prolina hidroxilada em C4 pela ao da prolil
hydroxilase.

102
2. Complete a tabela:

Colgeno Elastina Queratina
Tipo de protena
(globular/fibrosa)



Solubilidade em gua


Localizao celular


Estruturas moleculares
formadas



Estruturas formadas em
mamferos



Nmero de cadeias
polipeptdicas que formam a
unidade



Foras que estabilizam a
estrutura

Aminocido que ocupa o
centro da estrutura principal




3. O principal tipo de interao que mantm a estrutura de colgeno a mesma
responsvel pela manuteno da estrutura de queratina? Justifique.

4. Por que a carne de animais mais velhos costuma ser mais dura?

Referncias

Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P. Molecular Biology of the
Cell. 4
th
ed. New York: Garland Publishing; 2002.

Burkitt HG, Young B, Heath JW. Wheaters Functional Histology. 3
rd
ed. London:
Longman Group UK Limited, 1994.

Gelse K, Pschl E, Aigner T. Collagens - structure, function, and biosynthesis. Advanced
Drug Delivery Reviews 2003, 55:1531-46.

Lodish H, Berk A, Zipursky SL, Matsudaira PB, David D, James E. Molecular Cell
Biology. 4
th
ed. New York: W. H. Freeman & Co.; 2000.

Myllyharju J, Kivirikko KI. Collagens, modifying enzymes and their mutations in humans,
flies and worms. TRENDS in Genetics 2004, Jan 20(1):33-43.

Tzaphlidou M. The role of collagen and elastin in aged skin: an image processing
approach. Micron 2004, 35:173177.

Voet D, Voet J. Biochemistry. 2
nd
ed. USA: John Wiley & Sons, Inc.; 1995.

103
9. Envelhecimento molecular da pele


TEXTO 1 - Envelhecimento intrnseco e extrnseco

Mesmo em uma vida hipottica sem interao com o ambiente, com exceo da
alimentao e de oxignio, ERO so geradas durante o processo de fosforilao oxidativa,
podendo estar relacionadas a danos aos constituintes celulares como, por exemplo, DNA
mitocondrial. O acmulo de danos assim gerados pode ser definido como envelhecimento
intrnseco. Por outro lado, o acmulo de danos provocados pela interao com outros
fatores ambientais pode ser definido como envelhecimento extrnseco.
Foram identificados como fatores de envelhecimento em geral a radiao solar,
infeces, foras gravitacionais, campos eletromagnticos, estresse, fumaa de cigarro e
outros poluentes, anoxia, ferimentos e traumas.

Trecho traduzido e modificado de Giacomoni PU, Rein G (2004) A mechanistic model for
the aging of human skin. Micron 35:179-187


TEXTO 2 - Descrio dos efeitos moleculares do envelhecimento
da pele (I)

Envelhecimento extrnseco

O envelhecimento extrnseco resulta primeiramente da exposio radiao UV
(fotoenvelhecimento) e um processo biolgico complexo que afeta vrias camadas da
pele, principalmente o tecido conectivo da derme. Os trs principais componentes do
tecido conectivo so fibras de colgeno, a rede de fibras elsticas e os glicosaminoglicanos
que esto envolvidos tanto no envelhecimento intrnseco quanto no envelhecimento
extrnseco. Glicosaminoglicanos e proteoglicanos tm um papel na hidratao da pele e na
sinalizao biolgica. Mudanas em todos os trs componentes foram descritas no
envelhecimento extrnseco da pele. Clinicamente, o envelhecimento extrnseco
caracterizado pela perda de elasticidade, enrugamento profundo, uma aparncia de couro e
cicatrizao dificultada da pele.

Mudanas do tecido conectivo

A pele fotoenvelhecida caracterizada pela perda de colgeno drmico, resultado
de sua hipo-regulao. Esta reduo da produo de colgeno acompanhada pela
degenerao da rede colagenosa. Schwartz et al (1993) reportaram que o contedo total de
colgeno da pele danificada pelo sol era 20% menor que de pele no exposta ao sol. De
acordo com estes autores, a exposio ao sol desencadearia um mecanismo que aumenta a
degradao de colgeno. Outro trabalho sugere que as mudanas na composio de
104
colgeno no fotoenvelhecimento so parcialmente explicadas por alteraes no padro de
ligaes cruzadas (cross-link) tanto quanto por uma regulao desbalanceada da produo
e degradao de colgeno.
No estudo de Schwartz et al (1993) houve uma diminuio de 40% no contedo de
procolgeno tipo III em pele danificada pelo sol, em comparao com pele protegida do
sol. Outro estudo tambm sugere que em pele humana fotodanificada h reduo de
procolgenos tipo I e III. Esta reduo poderia ser resultante do aumento da degradao
destes por metaloproteinases e/ou da sntese de procolgeno reduzida.
Fisher et al (1996) e (1997) mostraram que radiao ultravioleta induz a sntese de
metaloproteinases de matriz (MMP) na pele humana in vivo. Eles propuseram que a
destruio de colgeno mediada por MMP responsvel, em grande parte, pelos danos no
tecido conectivo que ocorre no fotoenvelhecimento. Para eles, a sntese de colgeno mais
reduzida na pele fotoenvelhecida do que na pele naturalmente envelhecida. Varani et al
(2000) reportaram que com o aumento da idade, so observados in vivo nveis de MMP
maiores em pele humana protegida do sol, bem como so observados menores nveis de
sntese de colgeno.
Alm dos colgenos mais freqentes, tipos I e III, estarem reduzidos em pele
fotoenvelhecida, o colgeno tipo VII, contendo fibrilas de ancoramento que contribuem
para a estabilizao da juno epiderme-derme, severamente reduzido. Entretanto, o
fotoenvelhecimento tem pouco ou nenhum efeito tanto na distribuio, abundncia ou
nveis de expresso de colgeno tipo VI na pele humana. Assim, colgeno tipo VI parece
no ser afetado pelo processo de fotoenvelhecimento. A estabilidade deste tipo de
colgeno em pele fotoenvelhecida d suporte ao argumento que esta molcula crtica
integridade geral da derme.

Trecho traduzido e modificado do artigo Tzaphlidou M (2004) The role of collagen and
elastin in aged skin:an image processing approach. Mcron 35: 173-177

Estudo dirigido 9.1 Textos 1 e 2

1. No esquema da estrutura da pele da Figura 5.1 da Seo 5, indique o local descrito no
texto onde a maior parte dos danos que levam ao envelhecimento extrnseco ocorrem.

2. Qual(is) (so) o(s) componente(s) moleculares mais afetados no envelhecimento da
pele? Dado o papel do colgeno na pele, isto est de acordo com o senso comum? Com
base nisso, qual seria o principal componente de um tratamento contra o envelhecimento
da pele?

3. Por que a estabilidade de colgeno tipo VI esperada em pele fotoenvelhecida? O que
aconteceria na pele se este colgeno tambm fosse afetado?

4. Que razes moleculares poderiam existir para haver uma diminuio de colgeno na
pele fotoenvelhecida? Voc acha que essa diminuio igual na pele que sofreu apenas
envelhecimento intrnseco de uma que sofreu tambm envelhecimento extrnseco?
Considere para a resposta a pele das ndegas e do brao da mesma pessoa.




105
TEXTO 3 - Descrio dos efeitos moleculares do envelhecimento
da pele (II)

Derme

Fibras elsticas fibroblastos - substncia fundamental

A alterao microscpica mais proeminente na estrutura da derme fotodanificada
a substituio do padro fibrilar normal por grandes quantidades de fibras elsticas
espessadas, emaranhadas, degradadas e no funcionais que finalmente degeneram em uma
massa no-fibrosa, homognea e amorfa. Bioquimicamente, o material elastico mantm a
aparncia de elastina, embora seja desorganizado e anormal nas propores de seus vrios
constituintes. Foi proposto que este material seria gerado tanto atravs da transformao
de colgeno normal pr-existente e da fibra elstica como de atividades sintticas
anormais dos fibroblastos via liberao de citocinas de queratincitos epidrmicos.
Concomitantemente, h uma diminuio histolgica de fibras e feixes de colgenos,
embora a perda quantitativa de colgeno seja discutida. A descoberta de fibras de colgeno
deformadas de vrios dimetros na derme papilar sugere que a degradao e remodelao
do colgeno ocorrem na pele fotodanificada. A Figura 9.1 mostra micrografias eletrnicas
de mudanas na pele fotoenvelhecida.
A substncia fundamental constituda principalmente de proteoglicanos e
glicosaminoglicanos (alm de outras macromolculas e grande quantidade de gua). Estas
molculas hidroflicas so acumuladas na pele fotodanificada e depositadas anormalmente
no material elastico.
Outras mudanas que ocorrem na pele fotodanificada so o aumento do nmero e
da atividade de fibroblastos, presena de infiltrados celulares inflamatrios e um nmero
reduzido de vasos sanguneos irregularmente dilatados.
106


Figura 9.1 (a) Derme de uma rea do pescoo de um homem de 55 anos exposta ao sol.
As fibras elsticas so espessas e apresentam muitos buracos e redes densas (e). Restam
poucas fibrilas de colgeno entre as fibras elsticas (setas). (b) Derme de uma rea
relativamente coberta do cotovelo de um homem da mesma idade. As fibras elsticas se
apresentam em pontos densos e em tiras, mas sem buracos. As fibrilas de colgeno
formam feixes grossos (e). A escala de 1 m x 6000.

107
Fibras de colgeno

As mudanas relacionadas exposio crnica a UV podem ser devidas perda de
colgeno, que compensada pelo material elastico que compacto e uniforme ou pela
mistura de gua e substncia fundamental. Tambm pode haver um papel da mudana da
composio de colgeno. Foi mostrado que a proporo de colgeno tipo III aumentada
em pele fotodanificada.

Processo de envelhecimento das fibras de colgeno

As fibras de colgeno podem ser consideradas o arcabouo natural da pele.
Ligaes cruzadas entre molculas de colgeno so essenciais para fornecer estabilidade e
fora de tensionamento da pele. A ligao cruzada influenciada por muitos fatores e o
padro desta pode, portanto, refletir o status estrutural das fibrilas de colgeno. Com a
idade, observa-se o aumento da firmeza da pele, concomitantemente com o aumento das
ligaes cruzadas de colgeno. Dois mecanismos esto envolvidos: um o processo de
desenvolvimento e maturao precisos, controlados por enzimas, e outro o processo de
glicosilao no-enzimtica.
No primeiro processo, enzimas convertem as ligaes cruzadas divalentes
(imaturas) e redutveis em ligaes cruzadas trivalentes maduras e estveis de
HistidinoHidroxiLisinaouLeucina (HHL), pirridinolina (Pyr) e deoxipirridinolina (DPyr).
HHL corresponde maior parte das ligaes cruzadas naturais na pele. A glicosilao no-
enzimtica, tambm conhecida como reao de Maillard foi descrita em detalhe por
Monnier (1990). Os produtos da reao de Maillard so chamados produtos finais
avanados de glicosilao (Advanced Glycosilation Endproducts, AGE). Os AGEs
induzem dano molecular por formar ligaes cruzadas em protenas como o colgeno. At
agora apenas um AGE em colgeno - pentsidina (Pen) - foi isolado e caracterizado; Pen
uma ligao cruzada formada entre arginina e lisina em colgeno e pode ser formada pela
reao de Maillard com pentose.

Traduzido e modificado do artigo Wulf HC, Sandby-Moller J, Kobayasi T, Gniadeck R
(2004) Sking aging and natural photoprotection. Micron 35: 185-191

Estudo dirigido 9.2 Texto 3

1. Com base nos TEXTOS 2 e 3, como voc resumiria a principal caracterstica molecular
de uma pele envelhecida?

2. Como agentes extrnsecos poderiam levar a este quadro?

3. O TEXTO 2 tambm cita o papel das ligaes cruzadas de colgeno no envelhecimento
da pele. Para que servem essas ligaes? Como uma mudana no padro destas afetaria
a estrutura da pele?

TEXTO 4 - Efeitos macroscpicos do envelhecimento da pele

Foi estudado, em detalhes ultra-estruturais, a modificao histolgica e molecular
da pele de porcos exposta radiao ultravioleta artificial. A Figura 9.2 mostra que aps
108
24 meses de exposio a UV artificial, as fibras de colgeno no so mais orientadas
uniformemente, mas se encontram entralaadas disformemente. Isso poderia explicar a
perda de elasticidade e de resilincia da pele fotoenvelhecida. Estas descobertas, junto
com a observao que infiltrados de neutrfilos so encontrados na pele aps exposio
moderada a UVB, levaram primeira idia de que o reparo ps UV anlogo ao processo
de cicatrizao. De fato, este processo e o reparo ps UV compartilham como
caractersticas comuns os mecanismos de modificao do tecido, que incluem migrao
celular macia, proliferao, diferenciao fenotpica e atividades biossintticas
aumentadas. Macrfagos e fibroblastos expressam fibronectina embrinica durante a
cicatrizao cutnea, produzindo uma nova matriz extracelular que facilita o reparo da
ferida. Eles so capazes de promover a migrao celular de forma que sub-populaes de
fibroblastos, capazes de secretarem fatores estimuladores de migrao, possam sofrer
expanso transiente e local durante a cicatrizao. Mastcitos residentes na derme ento
removem o tecido ps-inflamatrio morto. O processo de desmontagem da ECM opera via
colagenases, proteoglicanases e outras enzimas lticas de origem macrofgica. A ltima
fase da cicatrizao envolve a dissoluo sistemtica do tecido de granulao (tecido que
surge aps um dano), com perda gradual de clulas da vasculatura e tambm de
reestruturao exaustiva da ECM. Molculas da ECM recm sintetizadas no se encaixam
sozinhas numa estrutura ordenada mas podem modular o arcabouo original, o qual
essencial para interao clula-matriz. De fato, a estrutura desordenada, que observada
aps irradiao com UV, pode ser a conseqncia de uma disposio particular de
molculas recm sintetizadas. Isso significa que para melhorar o reparo da pele e o
combate ao envelhecimento, no interessante que se acelere a sntese de colgeno, j
que o turnover do colgeno na pele humana da ordem de 15 anos ou mais. Ao invs
disso, seria mais interessante empregar um tratamento para manter as
macromolculas recm sintetizadas em uma estrutura ordenada. Isto possvel,
como j demonstrado com roedores de laboratrio, inibindo especificamente a
maturao de TGF-beta (Shah et al, 1992). interessante notar que TGF-beta um
agente freqentemente usado para estimular a sntese de colgeno. Os resultados de
Shah et al. poderiam ser mais interessantes ainda se fosse demonstrado que, de fato,
um aumento da quantidade de colgeno est inversamente relacionado ordem
da estrutura de fibras macromoleculares.

109


Figura 9.2 Anlise de microscopia eletrnica de transmisso em derme de mini-porco.
(a) controle.(b) aps 24 meses de exposio radiao UV artificial. Miniporcos albinos
foram depilados e expostos a UV artificial trs vezes por semana durante dois anos.
Bipsias foram feitas em diferentes tempos. A figura mostra a estrutura de fibras de
colgeno em bipsias de pele no exposta (a) e de pele exposta a UV (b).

110

Trecho e figura extrados de Giacomoni PU, Rein G (2004) A mechanistic model for the
aging of human skin. Micron 35:179-187.


Estudo dirigido 9.3 Texto 4

1. Reveja sua resposta pergunta 2 do Estudo Dirigido 9.1 considerando o que voc leu
nos textos 3 (em particular do item Fibras de colgeno, trecho As mudanas
relacionadas...) e 4.

2. Explique com suas palavras ou faa um esquema da lgica do argumento de
Giacomoni et al (TEXTO 4) no trecho em negrito em relao cicatrizao e
envelhecimento. Use o Resumo do artigo citado (Shah et al).


Lancet (1992) 339(8787) 25:213-214
Control of scarring in adult wounds by neutralising
antibody to transforming growth factor beta
M. Shah FRCS, D. M. Foreman PhD and M. W. J. Ferguson
PhD, Prof

Abstract
Adult wounds heal with scar-tissue formation, whereas fetal wounds heal without
scarring and with a lesser inflammatory and cytokine response. We injected the
margins of healing dermal wounds in adult rats with neutralising antibody (NA) to
transforming growth factor-beta (TGF-beta). All control wounds (irrelevant
antibody, or TGF-beta, or no injection) healed with scarring, whereas the NA-
treated wounds healed without scar-tissue formation; NA-treated wounds had fewer
macrophages and blood vessels, lower collagen and fibronectin contents, but
identical tensile strength and more normal dermal architecture than the other
wounds. Early manipulation of the concentrations of selected cytokines may be a
new approach to the control of scarring.



3. No pargrafo 4 do TEXTO 2 (Fisher et al (1996) e (1997) mostraram que radiao
ultravioleta...), o autor comenta que a destruio da ECM por metaloproteinases de
matriz seria um dos componentes do fotoenvelhecimento. Que vantagem biolgica voc
imagina que haja para que as metaloproteinases destruam a ECM? Dica: procure o papel
das MMPs em algum livro texto. Considerando o TEXTO 4, qual o sentido de UV
induzir sntese de MMP, se esta enzima est associada destruio do tecido?



TEXTO 5 - O modelo micro-inflamatrio de envelhecimento da pele

111
(...) Foi notado que todos os fatores causadores de envelhecimento aceitos
compartilhavam a caracterstica comum de induzir a sntese de ICAM-1* no endotlio.
Isso significava que todos os fatores reconhecidos como sendo responsveis por acelerar o
envelhecimento, tinham a capacidade de desencadear uma forma de resposta anti-
inflamatria auto sustentada.
De fato, face sntese de ICAM-1 no endotlio, moncitos circulantes e
macrfagos rolam sobre as clulas da parede vascular e realizam diapedese** atravs
desta. Uma vez na derme, as clulas imunes secretam enzimas lticas e espcies reativas de
oxignio (ERO), para abrir um caminho na derme. Elas podem seguir sinais quimiotticos
(e.g. para atingir e destruir agentes infecciosos, ou para remover clulas da pele
danificadas) ou seguir um caminho aberto por outros macrfagos que liberaram
colagenases e ERO (no caso de diapedese resultante de anoxia). Nestas condies,
altamente provvel que clulas residentes prximas, tais como fibroblastos ou
queratincitos, sejam danificadas por radicais livres. Quando isto acontece, o dano pode
desencadear a cascata do cido araquidnico, levando produo de prostaglandinas e
leucotrienos (reao inflamatria), que difundem at os mastcitos residentes prximos.
Aps ligao destes medidores a receptores especficos, os mastcitos residentes liberam
histamina e TNF-alfa que, por sua vez, estimulam a liberao de selectinas-P (passo inicial
na seqncia dos eventos que resultar na diapedese dos leuccitos nos stios de injria) e
a sntese de ICAM-1 em clulas endoteliais. O ciclo portanto fechado, e o status micro-
inflamatrio mantido. A Figura 9.3 (Giacomoni et al, 2000), sumariza o modelo micro-
inflamatrio de envelhecimento da pele.

*ICAM-1 (intracellular cell adhesion molecule 1, tambm chamada CD54) uma
molcula expressa tipicamente em clulas endoteliais e em clulas do sistema imune e
portanto est associada ativao da resposta imunolgica. uma protena envolvida no
processo de diapedese**.
**Diapedese: passagem de elementos corpusculares do sangue dos vasos sanguneos
para os tecidos, sem rompimento dos vasos.

Atividade em software 7 Diapedese

Veja animao sobre diapedese em
http://www.pucrs.br/fabio/imunopage/Diapedesis.html


112

Figura 9.3 O modelo micro-inflamatrio do envelhecimento da pele. Todos os
tratamentos conhecidos que aceleram a taxa de envelhecimento da pele compartilham
como caracterstica comum a capacidade de induzir sntese de ICAM-1 no endotlio.
Tratamentos capazes de induzir a sntese de ICAM-1 no endotlio so considerados
fatores de envelhecimento.

Estudo dirigido 9.4 Texto 5

1. Por que o autor baseia seu argumento no fato que fatores causadores de
envelhecimento aceitos compartilhavam a caracterstica comum de induzir a sntese de
ICAM-1* no endotlio?

2. Utilizando a Figura 9.3, enumere a ordem dos eventos, como narrados no texto.




Discusso

(...) Quando um dano a um tecido gerado (e.g. radiao UV, radicais livres,
agentes infecciosos ou por feridas e traumas), milhares de danos so provocados matriz
extracelular (ECM), s clulas residentes e s paredes dos vasos atravs dos radicais livres
e enzimas lticas que so liberados ao longo da resposta inflamatria, em conseqncia da
difuso de citocinas produzidas via cascata do cido araquidnico.
(...) Este modelo micro-inflamatrio do envelhecimento da pele enfatiza o
envelhecimento do tecido conectivo e da ECM. Conseqncias macroscpicas deste
modelo so conhecidas pelo senso comum. A aceitao que o reparo ps UV e
cicatrizao compartilham o remodelamento da ECM, permitiu entender porque os vasos
sanguneos esto localizados mais profundamente na pele envelhecida do que na pele
jovem. A perda de elasticidade da derme e enrugamento so conseqncias de uma ECM
113
modificada e so acompanhadas pelo aumento geral da superfcie da pele que recobre o
crnio. Como este constante em volume, a pele aumentada gera a aparncia de rugas, um
sinal visvel de envelhecimento. (...) Por outro lado, o modelo no fornece explicaes
detalhadas do surgimento de outros sinais visveis de envelhecimento associados
superfcie da pele, tal qual a descolorao e sequido da pele.

Trechos e figuras extradas de Giacomoni PU, Rein G (2004) A mechanistic model for the
aging of human skin. Micron 35:179-187.


Estudo dirigido 9.5 Discusso

1. Por que os vasos sanguneos esto localizados mais profundamente na pele
envelhecida?

2. Quais evidncias moleculares suportariam o modelo micro-inflamatrio? O modelo
molecular proposto explica todos os sinais do envelhecimento?

3. Em poucas palavras, qual a idia do modelo micro-inflamatrio no envelhecimento?
Segundo o modelo, qual a relao de UV e envelhecimento?


TEXTO 6 - Telmeros e envelhecimento


Atividade em software 8 Telmeros e telomerase

http://bcs.whfreeman.com/lodish5e/
(Cap.10 Gene and chromosome structure Telomere replication)



Trecho 1

O DNA o principal alvo de dano celular induzido por UV. A radiao ultravioleta
afeta diretamente o DNA formando dmeros de pirimidina e, indiretamente, via gerao de
espcies reativas de oxignio (ERO). Como ser discutido abaixo, pesquisas recentes tm
elucidado os eventos moleculares iniciais da maioria das manifestaes tpicas do
envelhecimento e do fotoenvelhecimento, fornecendo um arcabouo intelectual que liga os
dois processos.

Trecho 2

Mudanas no padro de expresso gnica e de capacidade de proliferao celular
associadas idade esto, em geral, sob controle de telmeros. Telmeros so os trminos
de cromossomos lineares, com muitas bases de comprimento que consistem de sequncias
de DNA repetidas em tandem. A fita 3 em mamferos tem a seqncia (TTAGGG)
n
e
estende-se 75-300 bases alm da fita 5 complementar, deixando uma simples fita livre em
114
cada ponta. A presena de repeties telomricas protege o cromossomo de degradao ou
fuso. Tambm foi determinado que o comprimento dos telmeros diminui em at 150
bases a cada diviso celular, como determinado em clulas humanas em cultura (Harley et
al, 1990; Ningu et al, 2003); e o comprimento do telmero em clulas derivadas de
adultos mais idosos e mais jovens inversamente relacionado idade fisiolgica do
indivduo (Harley et al, 1990; Allsopp et al, 1992). Quando os telmeros se tornam
criticamente curtos, as clulas entram em senescncia proliferativa e assim os telmeros
parecem servir como um relgio molecular, informando s clulas se elas so velhas ou
jovens. Alm do mais, o comprimento dos telmeros pode influenciar na expresso de
genes prximos a eles. Essa modificao evidencia, assim, a influncia da idade no padro
de expresso gnica.
(...) Estudos recentes sugerem que a funo telomrica determinada por mais do
que somente seu comprimento. Especificamente, a simples fita 3 livre dobra-se sobre a
dupla hlice criando um lao que protege o cromossomo de degradao. Esta estrutura de
lao estabilizada pelo fator de ligao a repeties telomricas (protena TRF2).
Experimentos em que esta protena retirada causam a abertura do lao, resultando em
digesto da sequncia simples fita livre e em vrias respostas a dano ao DNA, culminando
na apoptose ou senescncia, dependendo do tipo celular. Foi sugerido que o
desencapamento do telmero detectado pela clula como uma quebra no DNA,
ativando respostas de dano ao DNA. Foi postulado que a abertura do lao telomrico pode
ocorrer naturalmente aps encurtamento crtico do telmero, aps irradiao de UV ou
outro dano ao DNA; assim como experimentalmente em clulas expressando TRF
DN

(dominante negativo). De fato, senescncia proliferativa, parada do ciclo celular, reparo de
DNA e apoptose envolvem vias de sinalizao intracelular idnticas, tendo como protena
central a protena supressora de tumor e fator de transcrio p53 (tambm induzido aps
abertura experimental do lao telomrico).


Estudo dirigido 9.6 Texto 6

Utilize um livro texto para responder s questes abaixo.

1. O que so telmeros e qual sua funo?

2. Por que os telmeros diminuem a cada diviso celular? Voc espera que isso ocorra em
todas as clulas de mamferos? Que vantagem existe em tal diminuio, se eles possuem
uma funo biolgica to importante?

3. Faa um esquema da localizao dos telmeros, especificando onde est a simples fita
3 livre.

4. Modifique seu esquema para mostrar a simples fita 3 livre formando um lao sobre a
dupla fita e a interao da protena TRF2.



Continuao do TEXTO 6 (trecho 2)

Interessantemente, tratamento de clulas com oligonucleotdeos homlogos
sequncia telomrica livre tambm ativa respostas a dano ao DNA na ausncia de abertura
115
de telmeros, enquanto oligonucleotdeos complementares ou no relacionados essa
sequncia so ineficazes para induzir estas respostas. (...) Em outros tipos celulares, oligos
homlogos induzem uma parada no ciclo celular transiente ou apoptose, mimetizando os
efeitos do dano ao DNA e abertura do lao telomrico, sugerindo que a exposio da
simples fita 3 livre pode ser o sinal fisiolgico que desencadeia as respostas a danos no
DNA, incluindo a senescncia replicativa.
Este modelo fornece uma importante conexo entre envelhecimento intrnseco e
fotoenvelhecimento, propondo que ambos os processos levam desestabilizao do lao
telomrico e exposio da simples fita 3 livre: o primeiro estocasticamente por causa de
um lao mais curto ou mais apertado e o segundo porque dmeros de timidina e a
oxidao de resduos de guanina mediada por ERO distorcem o lao ou sua ponta livre de
ancoramento. Consistente com este modelo, em melancitos humanos normais, oligos
homlogos induzem melanognese (bronzeamento), replicando os eventos observados
durante a passagem serial de clulas para senescncia ou em consequncia da exposio de
melancitos radiao UV ou outros agentes que causam dano ao DNA.
O componente principal do envelhecimento intrnseco da pele o encurtamento
progressivo do telmero durante a diviso celular serial, enquanto fotoenvelhecimento
inclui a exposio adicional da pele radiao UV. Sabe-se que UV forma dmeros de
pirimidina em DNA, mais comumente em stios de ditimidina (TT). Danos oxidativos ao
DNA, induzidos ou pelo metabolismo celular ou por UV, ocorrem mais freqentemente
em resduos de guanina e foi demonstrado que aceleram o encurtamento telomrico. Neste
contexto, interessante notar que 1/3 da sequncia repetitiva da simples fita livre do
telmero TTAGGG so ditimidinas (TT) e metade so guaninas (G). Portanto, seria
esperado que exposio a UV e/ou o dano oxidativo introduzissem danos extensos aos
telmeros, desestabilizando a estrutura do lao e expondo a ponta 3 livre, desencapando o
telmero, e ativando uma via final comum (morte celular programada). Sabe-se que a
sinalizao atravs da via de p53 ocorre aps exposio UV, dano oxidativo ao DNA, ou
rompimento experimental de telmeros, assim como durante a entrada em senescncia ou
na presena de oligos homlogos, mimetizando a exposio da simples fita 3 livre. Esta
sobreposio mecanstica postulada entre envelhecimento intrnseco e extrnseco explica
suas similaridades clnicas substanciais. As caractersticas nicas da pele fotoenvelhecida,
incluindo sua predisposio ao cncer, refletem mutaes causadas por UV superpostas
em genes regulatrios-chave que se acumulam durante o processo de envelhecimento
dirigido por telmeros.

Trecho extrado do artigo Kosmadaki MG, Gilchrest BA (2004) The role of telomeres in
skin aging/photoaging. Micron 35:155-159.

Estudo dirigido 9.7 Texto 6 (cont.)

1. Faa um esquema de como radiao UV pode levar exposio do telmero,
ocasionando sua degradao e conseqente morte celular.

2. Por que os tais oligos homlogos que mimetizam telmeros livres causariam a morte
celular?




116
Questes 9.1


1. O trecho 2 sobre danos de UV em ditimidinas e de radicais em guaninas muito pouco
claro sobre como exatamente tais modificaes qumicas poderiam resultar na
desestabilizao do lao telomrico. Como voc acha que a desestabilizao do lao
poderia estar associada a tais modificaes? Lembre-se como a estrutura do lao
formado.

2. Se voc tivesse criado toda a vida na Terra, voc colocaria T e G nas sequncias
telomricas? Justifique sua resposta.

3. Um dos mais importantes fatores que causam envelhecimento extrnseco a radiao
solar. No entanto, todos os modelos de envelhecimento envolvem, de alguma maneira, a
formao de radicais. Que relaes so conhecidas entre os dois fatores (diretas ou
indiretas, mas com alguma correlao da participao de ambos os fatores no evento
danoso)?




TEXTO 7 - Panorama de alteraes moleculares ocorridas em
clulas envelhecidas

A viso de que a pele envelhecida predispe ao desenvolvimento de tumores
cancergenos parece um pouco paradoxal devido diminuio generalizada da atividade
dos queratincitos.
Queratincitos humanos atingem senescncia replicativa aps 50-100 duplicaes
da populao em cultura e ento ficam permanentemente na fase G0 do ciclo celular. Trs
molculas foram consideradas cruciais para a manuteno da senescncia replicativa: (i) a
protena inibitria p16
1NK4a
que desativa o complexo Cdk4/ciclina D; (ii) a protena pr-
apopttica p53 e (iii) a enzima telomerase que ativamente regenera os telmeros, que
iriam encurtar irreversivelmente aps cada ciclo de diviso celular. Entretanto, uma
propriedade ainda mais interessante das clulas senescentes o aumento da resistncia a
apoptose. Clulas normais danificadas (DNA ou protena) podem facilmente ser
eliminadas por apoptose. No entanto, clulas senescentes parecem sobreviver por perodos
muito longos de tempo sem serem capazes de dividir ou morrer por apoptose dando uma
janela de tempo para que danos em protena e em DNA acumulem.
(...) Em clulas senescentes h um acmulo progressivo de protenas e lipdios
danificados por estresse oxidativo e este processo acelerado devido diminuio da
defesa antioxidante. Tambm, a eficincia dos mecanismos de reparo de DNA diminuda
em clulas velhas resultando em instabilidade gentica.

Traduzido e modificado do artigo Wulf HC, Sandby-Moller J, Kobayasi T, Gniadeck R
(2004) Sking aging and natural photoprotection. Micron 35: 185-191


117
Estudo dirigido 9.8 Texto 7

1. Qual a relao entre as trs molculas cruciais para a manuteno da senescncia
replicativa?

2. Liste os fenmenos biolgicos citados, envolvidos em clulas envelhecidas. Monte um
esquema com os fenmenos encontrados, estabelecendo ligaes entre eles.

3. Qual seria a conseqncia de manter clulas danificadas?




Questes 9.2


1. Como voc definiria envelhecimento?

2. Com base no que voc aprendeu at agora, voc acha que teria sentido propor um
tratamento de cncer que fosse baseado na irradiao de luz UV? Em caso positivo, em
poucas palavras, quais seriam os eventos moleculares envolvidos?

3. Faa um esquema ou mapa de conceitos relacionando todos os eventos, fenmenos,
reaes que voc estudou sobre radiao UV, envelhecimento da pele, protetores solares e
radicais. No deixe de incluir os seguintes termos: elastina, colgeno, UVA/UVB,
envelhecimento extrnsico/intrnseco, protetor solar qumico e fsico, comprimento de
onda, radicais, melanina, anis aromticos, pigmento, DNA, telmeros, resposta
inflamatria, absoro, dmeros de timidina, ICAM, diapedese.

4. Por que embora a pele tenha diversas defesas contra fatores que levam ao
envelhecimento extrnseco, envelhece?
118
10. Botox

Toxina Botulnica - Botox

A toxina botulnica foi identificada pela primeira vez em 1897, como causadora de
uma doena conhecida como botulismo, adquirida aps a ingesto de alimentos
contaminados com a bactria anaerbica Clostridium botulinum. Esta bactria produz oito
sorotipos distintos de toxinas j isoladas, sendo que sete delas so neurotoxinas (tipos A a
G). Cada um dos sorotipos apresenta diferentes propriedades e aes, sendo que a do tipo
A a mais conhecida e estudada entre todas elas.
As pesquisas com a toxina botulnica do tipo A como um agente teraputico no
tratamento de doenas humanas comearam no final dos anos 60 com os pesquisadores
Alan B. Scott (Fundao de Pesquisas dos Olhos Smith-Kettlewell) e Edward J. Schantz
(diretor de microbiologia e toxicologia na Universidade de Wisconsin). Desde ento a
toxina botulnica do tipo A deixou de ser considerada apenas como um agente de doenas
e males humanos, mas tambm passou a ser vista como um poderoso agente teraputico
no tratamento de sintomas de diversas doenas, principalmente, neurolgicas e
oftalmolgicas.
Em 1989 a empresa Norte Americana Allergan adquiriu os direitos para
comercializar a toxina botulnica do tipo A sob a marca Botox, aprovada para uso em
doenas como estrabismo e blefaroespasmos (movimentos repetitivos e involuntrios da
plpebra).
A FDA (Food and Drug Administration) anunciou em abril de 2002 a aprovao
do Botox para fins estticos, aps a comprovao de que a toxina, usada para o
tratamento de doenas oftalmolgicas, era tambm capaz de reduzir as linhas de expresso
119
facial na regio das sobrancelhas, aps aproximadamente 120 dias de tratamento. A
agncia ento concedeu o uso da droga para essa condio.

Atividade em software 9 Ao da toxina botulnica

Veja uma animao da toxina botulnica em ao
http://www.bbc.co.uk/science/hottopics/extremecosmetics/botox.shtml#animation



Estrutura da toxina

O Botox um complexo de neurotoxina purificada, contendo neurotoxina tipo A
e protenas associadas. Existem semelhanas estruturais e funcionais entre todos os sete
tipos de neurotoxina botulnica (de A at G). Estas molculas de cadeia nica so ativadas
por enzimas proteolticas em um processo conhecido como corte ou seco. Em alguns
casos, as bactrias so eficientes na ativao da toxina (como a do tipo A). Em outros
casos, a ativao requer um perodo mais longo de fermentao ou exposio s enzimas
exgenas (como com os tipos B e E).
Uma vez clivada, a molcula de cadeia nica de ~150 kD forma uma molcula de
cadeia dupla consistindo de uma cadeia de ~100 kD (cadeia pesada), ligada por pontes
dissulfeto a uma cadeia de ~50 kD (cadeia leve) (Figura 10.1). A cadeia pesada
responsvel pela ligao de alta afinidade da neurotoxina ao receptor da terminao
nervosa pr-sinptica, possibilitando a internalizao celular da toxina. A cadeia leve
uma endopeptidase dependente de zinco que cliva as protenas da membrana celular que
ligam as vesculas de acetilcolina no lado interno da membrana da terminao nervosa,
durante o processo de externalizao da acetilcolina. Desta forma as vesculas no so
capazes de se fundir membrana celular e assim liberar a acetilcolina na fenda
neuromuscular.

Toxina inativa
Clivagem
proteoltica
Toxina ativa Tipo A
Cadeia leve (L)
Cadeia pesada (H)
S
S
S S
S
S
S S


Figura 10.1 - Ativao da toxina botulnica por endopeptidases.


Mecanismo de Ao

O Botox age bloqueando a transmisso neuromuscular. Acredita-se que aps este
bloqueio ocorra o reaparecimento de novas terminaes axnicas, resultando no
restabelecimento da transmisso neuromuscular.

120

1. Bloqueio da transmisso neuromuscular

Este processo ocorre em 3 etapas:

1.2 Ligao

A toxina botulnica tipo A liga-se regio externa da terminao neuromotora. Isto
ocorre devido ao reconhecimento de um receptor especfico da terminao neuromuscular
pela cadeia pesada da toxina (Figura 10.2).




Figura 10.2 - A figura ilustra a interao da terminao neuromotora com a cadeia pesada
da toxina botulnica.

1.2. Internalizao

Aps o reconhecimento e ligao, a toxina internalizada via endocitose mediada
por receptor. Neste processo a membrana plasmtica da clula nervosa invagina-se ao
redor do complexo receptor - toxina, formando uma vescula dentro da terminao nervosa
(Figura 10.3). J internalizada, a cadeia leve da toxina liberada no citoplasma da
terminao nervosa (Figura 10.4).



Figura 10.3 - Internalizao da toxina botulnica via endocitose.

121


Figura 10.4 Bloqueio da liberao de acetilcolina.

1.3. Bloqueio

A toxina botulnica tipo A bloqueia a liberao de acetilcolina atravs da clivagem
da SNAP-25, uma protena citoplasmtica localizada na membrana celular e necessria
para a liberao deste transmissor. As terminaes afetadas so impossibilitadas de
estimular a contrao muscular. Vale lembrar que a toxina no afeta a sntese ou
armazenamento de acetilcolina, nem mesmo a conduo de sinais eltricos ao longo da
fibra nervosa.


2. Stio de ao

A Figura 10.5 mostra a seqncia de eventos que levam liberao de acetilcolina
na fenda neuromuscular e a ao intracelular da toxina botulnica sobre a protena SNAP-
25.

122



Figura 10.5 Sequncia de eventos que levam a liberao da vescula contendo
acetilcolina na fenda neuromuscular.

Acredita-se que a intensidade e durao da ao da toxina tipo A deriva, pelo
menos em parte, de sua ao sobre a SNAP-25 (Figura 10.6). Outros subtipos como o B e
o F, clivam a sinaptobrevina, que tambm est envolvida na liberao da vescula.

Figura 10.6 Ver na Seo 13 Figuras coloridas: .



123
Restabelecimento da transmisso neuromuscular


1. Aparecimento de novas terminaes nervosas

As evidncias indicam que o bloqueio qumico do entroncamento neuromuscular
pela toxina botulnica tipo A resulta em uma expanso da regio terminal do axnio, bem
como na estimulao do aparecimento de novas terminaes (Figura 10.7-A).
A formao de novas terminaes nervosas acaba por estabelecer um novo
entroncamento neuromuscular, e a atividade muscular volta gradualmente (Figura 10.7-B).
Entretanto, pesquisas recentes sugerem que este novo entroncamento retrai e a terminao
original volta a funcionar. De qualquer forma, para que o efeito esttico permanea
necessrio repetir as injees de Botox para manter o efeito clnico desejado.




Figura 10.7 - (A) Esquema do aparecimento de novas terminaes nervosas e (B)
restabelecimento da conexo nervosa.


Botox e esttica

Em 2001 mais de 1,6 milhes de pessoas receberam injees de Botox como
tratamento esttico das rugas dinmicas ou rugas de expresso, que so aquelas
provocadas pela contrao muscular da mmica facial, que leva, ao longo do tempo,
formao de vincos na pele. A toxina botulnica atua impedindo a contrao dos msculos
faciais que do origem s rugas. Com o relaxamento da musculatura as rugas atenuam-se.
Os principais locais da face onde pode ser utilizado so a regio frontal (testa), a glabela
(entre os superclios) e regio peri-orbitria ("ps de galinha"). A toxina injetada
diretamente no msculo responsvel pela formao da ruga, com utilizao de uma agulha
bem fina. O efeito observado nas primeiras 48 horas e aumenta gradativamente nos 10 a
15 dias subseqentes aplicao, quando se estabiliza. O efeito do tratamento dura cerca
de quatro meses, sendo ento necessria uma nova aplicao para a manuteno dos
resultados. Este tempo pode variar de acordo com cada pessoa. O procedimento pode ser
A
B
124
repetido diversas vezes e, com a continuidade do tratamento, a durao do efeito tende a
aumentar.


Questes 10.1

1. O intervalo mnimo de aplicao de Botox na pele de 30 dias. Considerando que a
substncia botulnica uma toxina, tente imaginar por que um tratamento com maior
nmero de aplicaes por ms simplesmente no resulta em nenhum efeito esttico.

2. Para inibir a liberao de neurotransmissores do neurnio na clula muscular, a toxina
botulnica precisa entrar no citossol, onde se encontra sua protena alvo. No existem
estudos que expliquem perfeitamente como a cadeia leve da toxina botulnica consegue
atravessar a barreira hidrofbica da vescula e no a membrana plasmtica da clula
nervosa, porm alguns modelos foram propostos. Uma das hipteses explicaria tal
passagem por mudanas conformacionais das cadeias leve e pesada da toxina. A
vescula contendo a toxina exposta a um pH mais baixo devido fuso com
lisossomos da clula. Este pH cido promove a mudana conformacional das cadeias
expondo assim alguns fragmentos hidrofbicos das protenas. Isto permite que a cadeia
pesada forme um tnel na membrana das vesculas. A diminuio do pH causa tambm
o desdobramento da cadeia leve, permitindo que esta atravesse o poro formado pela
cadeia pesada. Em contato com o pH neutro do citosol, a cadeia leve se dobra
novamente em sua forma ativa e as pontes dissulfeto entre a cadeia leve e pesada so
reduzidas, liberando a toxina no citosol.

a) A capacidade de se desdobrar e se dobrar novamente na correta conformao, faz
com que a toxina botulnica consiga sobreviver passagem pela acidez do estmago e
cause o quadro de intoxicao alimentar. Explique como as interaes qumicas entre os
aminocidos de uma protena so alterados pela mudana do pH.

b) Quais seriam os aminocidos mais afetados pela mudana do pH? Explique.

Referncias


Lewis, C. Botox Cosmetic: A Look at Looking Good. U.S. Food and Drug Administration.
2002.

Lowe, N.J. and Yamauchi, P. Cosmetic use of Botulinum Toxins for Lower aspects of the
face and neck. Clinics in Dermatology . 2004, 22:18-22.

http://www.wplastia.com.br
http://www.edae.gr
http://www.aad.org
http://www.dermatologia.net

125
11. Dimetilaminoetanol ou deanol (DMAE)



Histrico do DMAE

Desde 1970, vrios autores estudaram o efeito do DMAE na melhora da cognio e
da memria em pacientes saudveis e em pacientes com sndromes como o autismo e o
mal de Alzheimer. Atualmente, a terapia oral com o DMAE est includa em protocolos
clnicos para pacientes peditricos portadores de hiperatividade. comprovado que a
farmacodinmica, que explica o efeito do uso interno do DMAE, o considera um
estimulante diferente, por exemplo, das anfetaminas, no provocando sndrome de
abstinncia. Entre 1999 e 2002, houve uma divulgao intensa da experincia clnica com
o DMAE aplicado topicamente em preparaes cosmticas visando um efeito tensor com
uma ao anti-envelhecimento.


Neurotransmissores

Os receptores de neurotransmissores localizados na membrana plasmtica das
clulas ps-sinpticas podem ser de dois tipos: ligados a canais inicos ou acoplados
protena G. As sinapses contendo ambos os tipos de receptores podem ser excitatrias ou
inibitrias, sendo que a velocidade de resposta principal caracterstica diferencial na
resposta mediada por cada uma destas classes (vide Apndice III, Box 1).
A ligao do neurotransmissor em receptores de canais causa uma alterao
conformacional imediata, abrindo os canais e permitindo a passagem de ons atravs da
membrana, levando o potencial de membrana a mudar em 0,1 a 2 milisegundos.
Receptores de neurotransmissores acoplados a protena G so mais lentos e
duradouros. A protena G capaz de ligar-se a uma protena de canal inico, causando um
aumento ou decrscimo de condutncia. Em outros casos, a protena G ativada induz
mudanas conformacionais na adenilato ciclase, uma protena integral de membrana. Esta
por sua vez, gera a formao de AMP cclico (cAMP) a partir de ATP. Outra forma de
ao da protena G ativar a fosfolipase C (PLC), elevando os nveis celulares de Ca
2+
.
Tanto Ca
2+
como cAMP so chamados de segundo mensageiros, capazes de desencadear
cascatas de sinalizao que levaro a alteraes na condutncia dos canais inicos
acoplados.

Atividade em software 10 - Segundos mensageiros

http://bcs.whfreeman.com/lodish5e/
(Cap.13 Signaling at the Cell Surface: Second Messengers in Signaling Pathways
prot.GPKC)



126
Estudo dirigido 11.1 Atividade em software 7

1. Como o sinal recebido apenas pelas clulas alvo?

2. Quais so os trs segundo-mensageiros na via de sinalizao celular descritos na
animao?

3. Por que DAG permanece ancorado na membrana enquanto IP3 se desloca no citoplasma
celular?


Atividade em software 11 - Protena G

http://bcs.whfreeman.com/lodish5e/
(Cap.13- Animations: Extracellular Signaling prot.G PKA)



Estudo dirigido 11.2 Animao 8

1. Qual o segundo-mensageiro nesta animao?

2. Nas duas animaes, o receptor est imerso na membrana celular; seria possvel um
receptor de sinal extracelular estar localizado em outra regio da clula?

3. Por que clulas diferentes podem responder de forma distinta a um mesmo sinal
extracelular?



Acetilcolina (ACh)

A firmeza da pele depende de efeitos variados e combinados, tanto de foras
extrnsecas quanto intrnsecas. sabido que o aumento da firmeza da pele poderia ser
causado por uma modulao da contrao do msculo liso da derme ou por um aumento
da contratilidade e adeso de outras clulas dermais e epidermais. A acetilcolina, sua
precursora colina (Figura 11.1) e um anlogo sinttico da colina, DMAE, poderiam ser
bons candidatos para este efeito.
CH
2
CH
2
C
+
(CH
3
)
3
HO N CH
2
CH
2
C
+
(CH
3
)
3
O
Acetilcolina
O N H
3
C -C
O
S CoA
Acetil-CoA
Colina
+
colina
acetiltransferase
H
3
C -C

Figura 11.1 - Acetilcolina sintetizada a partir de acetil coenzima A e colina em uma
reao catalisada pela colina acil transferase.

A acetilcolina um neurotransmissor clssico que age em sinapses denominadas
colinrgicas. Os receptores de acetilcolina que causam resposta excitatria com durao
127
curta (milissegundos) so denominados receptores nicotnicos de acetilcolina. Estes
receptores so acoplados a canais de Na
+
e K
+
. Existem ainda os receptores muscarnicos
de acetilcolina. Estes se encontram acoplados a protenas G, podendo induzir respostas
diferentes, excitatrias ou inibitrias, dependendo do tipo celular. A resposta
desencadeada por estes receptores mais lenta e duradoura (Figura 11.2). A ACh
liberada por neurnios motores na sinapse com clulas musculares, a juno
neuromuscular.
Aps a liberao do neurotransmissor ou neuropeptdeo, este deve ser removido e
destrudo para evitar o estmulo se perpetue. H trs maneiras terminar a sinalizao:
difuso para fora da fenda sinptica; ser retirado pelo neurnio pr-sinptico ou ser
degradado enzimaticamente. No caso de acetilcolina e neuropeptdeos, ocorre a
degradao enzimtica, diferindo da maioria dos outros neurotransmissores, que so
reabsorvidos pelo neurnio pr-sinptico. A acetilcolina degradada pela
acetilcolinesterase (AChE), uma enzima com elevada capacidade cataltica, concentrada
na fenda sinptica, capaz de degradar ACh em colina e acetato. O terminal nervoso
colinrgico tipicamente apresenta alta afinidade por Na
+
-colina, garantindo a ressntese do
neurotransmissor.



Figura 11.2 - Resposta excitatria de clulas ps-sinpticas estimuladas por acetilcolina.
a) A aplicao de acetilcolina (ou nicotina) em msculo esqueltico de sapo produz, na
clula ps-sinptica, a despolarizao rpida de 10mV por 20ms. Os receptores nicotnicos
de acetilcolina nestas clulas so acoplados a canais catinicos, que so abertos permitindo
a passagem de Na
+
e K
+
. b) A aplicao de acetilcolina (ou muscarina) ao msculo
cardaco de sapo induz resposta aps um perodo de cerca de 40ms (no visvel no
grfico). A hiperpolarizao de 2 a 3 mV dura vrios segundos. Estas clulas contm
receptores muscarnicos de acetilcolina, que so acoplados via a protena G a canais de K
+
.
Repare que a escala diferente entre os dois grficos. [H. C. Hartzell, 1981, Nature
291:539.]
128


DMAE

DMAE a sigla usada para o 2-dimetilaminoetanol ou deanol (Figura 11.3), uma
molcula pequena capaz de penetrar com facilidade a pele. Apresenta-se na forma de
lquido viscoso com um forte odor caracterstico das aminas. Na natureza, encontrada em
grandes quantidades em peixes como anchovas e salmo e em pequenas quantidades no
crebro humano.



Figura 11.3 - Estrutura qumica do 2-dimetilaminoetanol

O DMAE, como a colina (precursor biolgico da acetilcolina), pode aumentar os
nveis de acetilcolina. Entretanto, nem todos os estudos confirmam que DMAE serve
como um precursor da acetilcolina.
O mecanismo de ao de DMAE na pele ainda no est esclarecido. J foram
descritos receptores muscarnicos de acetilcolina em queratincitos, melancitos e
fibroblastos da derme; os receptores nicotnicos j foram descritos em queratincitos. O
papel de acetilcolina, e DMAE, como modulador das funes de acetilcolina na pele ainda
devem ser melhor estudados. Os benefcios de DMAE podem incluir o potencial anti-
inflamatrio, bem como aumento da firmeza da pele, possivelmente devido ao aumento do
tnus muscular facial.
Acredita-se que o DMAE aplicado topicamente aumente a produo e liberao de
acetilcolina na fenda neuromuscular e, desta forma, tenha uma amplificao efetiva no
tnus muscular (efeito lifting). A ao de DMAE rpida, iniciando-se alguns minutos
aps a aplicao. Um estudo duplo-cego realizado em 38 pacientes concluiu que DMAE
pode aumentar a firmeza da pele, porm seu mecanismo de ao continua incerto.

Efeito "Cinderela" de DMAE

O chamado efeito "Cinderela" um resultado que pode ser percebido em 30 a 60
minutos aps a aplicao. Com o uso continuado os resultados tornam-se duradouros,
dando firmeza pele e melhorando aspectos do envelhecimento cutneo.
Aps 3 a 6 meses de uso, podem ser percebidas melhoras significativas na flacidez
da regio das sobrancelhas, rugosidade da pele, flacidez da regio dos olhos e das
plpebras. H melhora na elasticidade e firmeza da pele do rosto e do pescoo que,
entretanto, no so definitivos.

129

Estudo dirigido 11.3 DMAE

1. Quais as diferenas entre os receptores muscarnicos e nicotnicos quanto :

a) transmisso do sinal?
b) velocidade de resposta?

2. Qual a relao entre receptores de canais inicos ou acoplados protena G e respostas
inibitrias e excitatrias?




Questes 11.1


1. O DMAE conhecido por muitos como botox em creme. Voc concorda com esta
afirmao?

2. Por que o DMAE exerce um efeito to efmero na pele, o conhecido efeito Cinderela?

3. Qual seria a vantagem de um mesmo ligante (acetilcolina) ligar-se a diferentes tipos de
receptores, com respostas distintas em diversos tipos celulares?

4. O que voc diria de um cosmtico que, ao invs de usar um precursor de acetilcolina,
faa uso de um inibidor da enzima responsvel pela degradao da acetilcolina, a
acetilcolinesterase?

5. Os organofosfatos so drogas que interagem com enzimas colinrgicas. Difenil
tricloroetano (DTT) foi inicialmente desenvolvido como inseticida. Outro representante do
grupo o gs sarin, usado alguns anos atrs por terroristas no metr de Tkio.
Organofosfatos podem ser letais para insetos mas tambm para mamferos, uma vez que
inibem a acetilcolinesterase (AChE), levando ao acmulo de acetilcolina (ACh) na regio
da sinapse. Qual deve ser a resposta fisiolgica de pessoas submetidas a estes compostos?



Referncias


Grossman R. 2005. The role of dimethylaminoethanol in cosmetic dermatology.Am J Clin
Dermatol.;6 (1):39-47.

Haubrich DR, Gerber NH, Pflueger AB. 1981. Deanol affects choline metabolism in
peripheral tissues of mice. J. Neurochem., 37: 476-482.
130

Jope RS, Jenden DJ. 1979. Dimethylaminoethanol (deanol) metabolism in rat brain and its
effect on acetylcoline synthesis. J. Pharmacol. Exp. Ther., 211: 472-479.

Molecular Cell Biology. 4th ed.Lodish, Harvey; Berk, Arnold; Zipursky, S. Lawrence;
Matsudaira, Paul; Baltimore, David; Darnell, James E. New York: W.H. Freeman & Co.:
cl1999

Uhoda I, Faska N, Robert C, Cauwenbergh G, Pierard GE.. 2002. Split face study on the
cutaneous tensile effect of 2-dimethylaminoethanol (deanol) gel. Skin Research and
Technology, 8:164-167.

Zahniser NR, Chou D, Hanin I. Is 2-dimethylaminoethanol (deanol) indeed a precursor of
brain acetylcholine? A gas chromatographic evaluation. J Pharmacol Exp Ther 1977;
200:54559.
131
12. Apndices

Apndice I - Chemistry of the Maillard reaction


An outline of the Maillard reaction is given in Figure 1. Maillard reactions have
three basic phases. The initial reaction is the condensation of the carbonyl group of a
reducing sugar (aldose) with a free amino group of a protein or an amino acid, which loses
a molecule of water to form N-substituted glycosylamine (Step A). This is unstable and
undergoes the "Amadori rearrangement" to form "1-amino-1-deoxy-2-ketoses" (known as
"ketosamines") (step B). The ketosamine products of the Amadori rearrangement can then
react three ways in the second phase. One is simply further dehydration (loss of two water
molecules) into reductones & dehydro reductones (step C). These are essentially
"caramel" products and in their reduced state are powerful antioxidants. A second is the
production of short chain hydrolytic fission products such as diacetyl, acetol,
pyruvaldehyde, etc (step D). These then undergo "Strecker degradation" with amino acids
to aldehydes (step E) and by condensation to aldols, or they may react in the absence of
amino compounds, to give aldols and high molecular weight, nitrogen-free polymers (step
F). A third path is the Schiff's base/furfural path. This involves the loss of 3 water
molecules (step C), then a reaction with amino acids and water. All these products react
further with amino acids in the third phase to form the brown nitrogenous polymers and
copolymers called melanoidins (step G). These can be off flavours (bitter), off aromas
(burnt, onion, solvent, rancid, sweaty, cabbage) or positive aromas (malty, bread crust-
like, caramel, coffee, roasted). Step H in Figure 1 illustrates a direct route to fission
products from N-substituted glycosylamines, without the formation of an ARP (Amadori
rearrangement product).

132



133
Apndice II - Efeitos do solvente e pH nas
propriedades dos filtros qumicos

O uso de diferentes solventes nas formulaes cosmticas pode influenciar
profundamente a efetividade dos filtros qumicos. As mudanas no espectro de absoro
no UV dependero do grau de solvatao da molcula no seu estado fundamental ou
excitado.
A solvatao de filtros polares como o PABA com solventes polares como a gua
ou etanol estabiliza o estado fundamental atravs da formao de pontes de hidrognio e
inibe, portanto, o deslocamento de eltrons para a formao do estado excitado.
necessria, portanto, uma quantidade de energia maior para excitar a molcula e o
resultado disso um deslocamento hipsocrmico (deslocamento para comprimentos de
onda mais baixos). Para os filtros menos polares como o octil-dimetil PABA, a interao
soluto-solvente diferente, pois o estado excitado mais polar que o estado fundamental.
H, portanto, uma estabilizao do estado excitado, diminuindo a energia requerida para a
transio eletrnica. Este deslocamento para comprimentos de onda mais altos chamado
de efeito batocrmico.
Quanto ao pH, mudanas no espectro de absoro no UV podem ser observados.
No caso de compostos cidos em meio alcalino (pH>9) ocorrer a formao de nions que
tendem a aumentar o deslocamento de eltrons e, portanto, um efeito batocrmico ser
observado (Figura II.1-A). Em condies cidas, ocorrer a formao de ctions com
aminas aromticas. Um efeito hipsocrmico ser observado visto que a protonao do par
de eltrons com cido desfavorecer qualquer deslocamento de eltrons (Figura II.1-B).


..
..
NH
2
..
NH
3
H
+
+
..
O
..
..
O
H
.
. .
.
_
OH
-
+ H
2
O
A
B

Figura II.1 (A) Efeito batocrmico no fenol em meio bsico; (B) Efeito hipsocrmico
na anilina em meio cido.

134
Apndice III - Medicamentos para emagrecer



Muito se tem discutido a respeito das drogas utilizadas no tratamento da obesidade.
Muitos especialistas so contra o uso de certas drogas, bem como alertam para o abuso
que muitos indivduos, ou mesmo profissionais, cometem na prescrio destes
medicamentos.
Seguem abaixo algumas reportagens alertando sobre o uso de medicamentos para
emagrecer.

Box 1

Especialista denuncia ao de mdicos (por Adriana Gordon)

O especialista Elisaldo Carlini, professor-titular de psicofarmacologia da Universidade Federal de So
Paulo e Diretor do Centro Brasileiro de Informaes sobre Drogas Psicotrpicas (Cebrid), est
denunciando os mdicos brasileiros por receitar, cada vez mais e de forma indiscriminada, medicamentos
com os princpios ativos dietilpropiona ou anfepramona, mazindol e femproporex, derivados das
anfetaminas, para emagrecimento, com danos claros sade dos pacientes. Carlini denuncia ainda a
existncia de uma espcie de conluio entre farmcias de manipulao e alguns mdicos, que indicariam aos
seus pacientes o estabelecimento e receberiam uma comisso por receita preparada.

De acordo com Carlini, remdios como as anfetaminas podem causar alteraes no sistema nervoso
central, hipertenso, delrios e insnia, por isso devem ser utilizados com muita cautela e s depois de um
exame mais preciso da situao fsica do paciente. Em casos como o de pacientes com obesidade mrbida,
a utilizao desse tipo de remdios pode se justificar, mas no a indicao indiscriminada para fins
estticos, afirma Carlini. Ele ainda lembra que os trs princpios ativos mais utilizados na maioria desses
medicamentos - anfepramona ou dietilpropiona, fenproporex e mazindol - acabam de ser proibidos na
Unio Europia.

Falta de tica - O especialista da Universidade Federal de So Paulo afirma ainda que muitas receitas de
medicamentos so preparadas em farmcias de manipulao, as chamadas farmcias magistrais, e acabam
induzindo o usurio a acreditar que a frmula individualizada, personalizada. Para Carlini, trata-se de
um procedimento enganoso.

(...)

O especialista tambm denuncia a existncia de uma espcie de conluio entre farmcias e alguns mdicos,
que indicariam aos seus pacientes o estabelecimento e receberiam uma comisso por receita preparada.
Essa prticas devem ser combatidas, afirma o vice-presidente da Sociedade Brasileira de Endocrinologia e
Metabologia (SBEM) Ricardo Meirelles. considerada conduta anti-tica do mdico prescrever remdio
manipulado se ele j existe industrializado, que oferece maior segurana ao paciente, e o Cdigo de tica
Mdica condena o vnculo de um profissional a uma farmcia, completa Meirelles.

Segundo Carlini, para contrabalanar os efeitos como ansiedade nos medicamentos usados no
emagrecimento, alm de inibidor de apetite, so colocadas na frmula drogas para relaxar, laxantes e
diurticos, o que deixa o paciente com a sensao de que est "murchando". Ou seja, para o paciente, o
efeito desejado, de emagrecimento, parece ocorrer. Meirelles argumenta, entretanto, que a associao
desses princpios ativos, classificados como anorexgenos, com outros na mesma formulao proibida.

Esttica x sade - A endocrinologista Ana Maria Charf tambm critica o uso de medicamentos como
anfetaminas para emagrecimento. "Esses remdios so indicados a pacientes com obesidade mrbida, uma
doena crnica, e no para melhoria esttica", afirma Ana. A primeira providncia do mdico deve ser a de
orientar o paciente com problemas de peso a modificar seus hbitos de vida, adotando uma dieta saudvel e
fazendo exerccios fsicos.
135

"H grande procura nos consultrios mdicos para tratamentos estticos e os pacientes sempre querem
perder peso para ontem", pondera Ana. Segundo o vice-presidente da SBEM, quando o medicamento
indicado com critrio, no h problema, mas preciso no descuidar, pois essas drogas atuam no sistema
nervoso central.

Para Meirelles, "toda medicina uma relao risco/benefcio, e se uma pessoa precisa perder 30 quilos e
tolera bem, poder ter o medicamento receitado".

(...)

Reportagem publicada em 10/04/2001:
http://diarionet.terra.com.br/resposta_pagina_area.asp?codigo_noticia=2082



Box 2

Emagrecedores: perigo vista

Estudo realizado por pesquisadores da Universidade de Braslia revela que substncia utilizada em vrios
remdios para emagrecer no Brasil representa grave risco sade.

O Brasil um dos pases campees no consumo de medicamentos auxiliares em dietas. Os remdios so
facilmente adquiridos em farmcias e, na maioria das vezes, sem receita mdica. O que muitos
consumidores no sabem que quase todos esses remdios contm uma substncia proibida em vrios
pases, que pode causar hipertenso e infarto. O fato foi constatado pelo professor Otvio Nbrega e pela
professora Marg Karnikowski, ambos do Ncleo de Estudos em Sade Pblica (Nesp) da UnB, em
parceria com o Instituto Brasileiro de Defesa ao Consumidor (Idec).

Segundo os pesquisadores, o uso de um anlogo sinttico do hormnio da tireide, o tiratricol, em
medicamentos para emagrecer deve ser proibido pelos rgos responsveis o mais rpido possvel. Dessa
forma, o resultado da pesquisa foi encaminhado ao Departamento de Proteo e Defesa do Consumidor
(DPDC) do Ministrio da Justia e Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (Anvisa).

O professor Otvio Nbrega explica que o tiratricol pode at ajudar a emagrecer por ter funes que
aceleram o metabolismo semelhantes s funes do hormnio tiroideano. Mas alerta: "O organismo j
produz hormnios da tireide naturalmente e no necessita do tiratricol. Ingerir uma sustncia semelhante
resulta numa taxa elevada e causa a hipertireidismo, entre outros males". Alm disso, o professor afirma
que a desnecessria acelerao das funes metablicas faz com que o consumidor do tiratricol elimine na
urina micronutrientes importantes sade. Alguns dos outros problemas causados pelo uso do tiratricol
so: taquicardia, febre, nusea, vmito, diarria, fraqueza e ataque cardaco. Alm disso, a substncia
possui efeito cumulativo podendo permanecer no organismo por at sete dias aps a ingesto.

Os pesquisadores alertam para o fato de que no apenas quem sofre de obesidade que est sujeito aos
males do tiratricol. Segundo eles, a substncia encontrada tambm em muitos suplementos alimentares
consumidos por fisiculturistas. Outro alerta de que esses produtos so vendidos livremente pela Internet.
"Esse fato exige da Anvisa uma atitude de maior controle", alerta Nbrega.

EXCEO - Embora o uso do tiratricol deva ser proibido nos compostos emagrecedores, existem casos em
que a substncia pode ser usada em busca de benefcios. "No cncer da tireide, por exemplo, o uso do
tiratricol pode reduzir os danos provocados pela doena", explica o professor, reforando que a substncia
deve estar presentes em medicamentos de uso essencialmente hospitalar.

Nbrega refora que a venda de remdios com tiratricol no Brasil deve ser proibida no pelo fato desse tipo
de medicamento tambm estar proibido em outros pases e sim pelo perigo que a substncia apresenta. "Os
benefcios conseguidos com o uso desses medicamentos so muito pequenos frente ao imenso risco que ele
oferece", esclarece.

136
Reportagem publicada em:
http://www.unb.br/acs/bcopauta/medicamentos1.htm


DUPLA PERIGOSA (por Ana Cristina Reis)

Consulta marcada com Florentino Sierra em dezembro passado. Cheguei s 6h55m. Meia hora depois,
fui chamada por uma assistente, que verificou meus dados (estivera na clnica h trs anos) e me
perguntou sobre hbitos alimentares e histrico familiar de doenas. Em outra sala, uma enfermeira tirou
minhas medidas de peso e altura, com fita mtrica, balana e adipmetro. Fui para a sala do mdico, que
mediu presso e auscultou corao. Perguntou se eu tinha feito exame de sangue recentemente. Respondi
que sim. Ele me encomendou uma bateria de exames, incluindo um novo de sangue. Mas me passou a
receita, na hora. O tratamento incluiria creme redutor de gordura e comprimidos com centella asitica.
Perguntou se desejava um redutor de apetite. Disse-lhe que sim. Ele deu a receita, indicou uma farmcia
e se despediu.

O que diz a receita:
Trs medicamentos. A receita indica o consumo de uma cpsula de cada, simultaneamente, s 8h, 12h,
15h, 18h.

O que diz o laudo:
O primeiro comprimido tinha cloridrato de femproporex, que inibe o apetite (anorexgeno de tipo
anfetamina). O segundo tinha clordiazepxido, um calmante (ansioltico de tipo benzodiazepnico). E o
terceiro era um composto de ervas como centella asitica, alona e alcachofra somadas vitamina B, a
um tnico cardaco (coenzima Q10) e a enzimas digestivas, como alfa-milase e sais biliares. Resoluo
do Conselho Federal de Medicina probe a prescrio simultnea de drogas anfetamnicas com
benzodiazepnicos no mesmo comprimido. Mas a lei omissa se as duas drogas estiverem em
comprimidos diferentes, mesmo se ingeridos simultaneamente.

O que diz o mdico:
"No caso da Ana, teoricamente no havia risco, mas medicina no matemtica. A portaria probe a
mistura das substncias no mesmo comprimido. Em plulas diferentes, no. Neste caso possvel
controlar a quantidade. Dar paciente caf com leite parece o mesmo que dar caf e depois leite
separado, mas a diferena que, no segundo caso, se pode graduar a quantidade de caf e de leite. Eu
tomo os dois comprimidos ao mesmo tempo quando quero emagrecer".

O que diz a farmcia:
Elisabeth Furtado Junger, responsvel tcnica da Skinbel, diz que no h problemas em manipular
comprimidos diferentes de femproporex e clordiazepxido: - Segui a prescrio mdica, que soberana.
Se as duas substncias estivessem misturadas, o que proibido, no teria feito o remdio e entraria em
contato com o mdico.

Relato retirado de:
http://acd.ufrj.br/consumo/leituras/lm_og00abr_09.htm


137

Cada vez mais cedo

Dobra a dependncia das drogas entre usurios com menos de 18 anos. As mulheres tambm disparam
nesta estatstica, principalmente por causa do uso de remdios contra depresso e medicamentos para
emagrecer rpido. O levantamento do Departamento de Narcticos do Estado (Denarc).
(...)
A pesquisa faz ainda outra constatao preocupante: o crescimento no total de mulheres que se tornam
dependentes de vrias drogas ao mesmo tempo. Entre as mulheres, esse uso maior em funo de alguns
problemas da nossa cultura, que d prioridade esttica e que acha que qualquer depresso tem que ser
tratada com remdio, prossegue Luchiari.
Os dependentes qumicos fizeram parte da pesquisa procuraram o Denarc por vontade prpria ou por
presso dos parentes. Mas o que, ou quem os levou a pedir ajuda o que menos importa. O que interessa
conseguir ajudar.
(...)

Reportagem publicada em 11/03/2004:
http://redeglobo6.globo.com/Sptv/0,19125,VSE0-2900-20040311-45304,00.html


comum que uma pessoa que deseja emagrecer procure a farmcia em busca de
uma soluo rpida, como se tomar determinado "remdio" fosse o necessrio para
alcanar o seu peso ideal achando que, se deu certo com um "colega" dar tambm
consigo. Porm, por trs dessa ilusria rpida perda de peso, escondem-se efeitos
colaterais e insucesso.
claro hoje entre os especialistas, e vrias pesquisas j mostraram isso, que
somente o uso de drogas para emagrecer no suficiente para uma perda de peso
permanente, saudvel e eficiente. A obesidade multifatorial e num plano para perda de
peso devem estar envolvidas mudanas nos hbitos alimentares, atividades fsicas e uma
equipe de apoio (mdicos e nutricionistas).
Por outro lado, j est bem estabelecido que em indivduos muito obesos, com
complicaes de sade, h uma forte indicao para o uso de drogas para a perda de peso.
Somente os mdicos podem prescrever alguma droga para um indivduo obeso,
fundamentando a sua escolha em rgidos critrios clnicos para a definio correta de qual
medicamento usar, bem como qual paciente deve ou no se beneficiar desse tipo de
tratamento, baseando sua deciso em evidncias cientficas comprovadamente seguras.
O tratamento farmacolgico da obesidade est indicado quando o paciente tem um
ndice de massa corporal (IMC, calculado pela diviso do peso em kg, pelo produto da
altura em m
2
) maior que 30 ou quando o indivduo tem doenas associadas ao excesso de
peso com IMC superior a 25 em situaes nas quais o tratamento com dieta, exerccio ou
aumento de atividade fsica e modificaes comportamentais provou ser infrutfero.


Frmacos para tratamento da obesidade

Um frmaco para tratamento da obesidade deve possuir as seguintes
caractersticas:
138

ter seu efeito final sobre os tecidos adiposos e no sobre a gua do corpo e/ou
sobre os msculos;
no ter efeitos colaterais importantes e ser bem tolerados (a curto e longo
prazos);
ser comprovado por estudos clnicos confiveis, e ser aprovado pelas
organizaes competentes de cada pas.

Os frmacos mais comuns so aqueles que tm ao no sistema nervoso central.
Modificaes da estrutura qumica da anfetamina (-metil--fenetilamina) levaram
sntese de uma gama de compostos com aes e respostas farmacolgicas variadas. Num
plo situam-se derivados -fenetilamnicos que influenciam a neurotransmisso
noradrenrgica e dopaminrgica (podendo agir estimulando a liberao e/ou bloqueando a
recaptao), como dietilpropiona e fentermina, que estimulam a liberao de noradrenalina
da terminao nervosa aumentando a quantidade desta que interage com receptores ps-
sinpticos. No plo oposto encontram-se as substncias que afetam a liberao e
recaptao de serotonina, como a dexfenfluramina e seu ismero levgiro, a l-
fenfluramina ou fenfluramina. No meio, situa-se a sibutramina, que bloqueia a recaptao
de noradrenalina e serotonina. Na Tabela III.1 esto apresentadas as drogas mais comuns e
seus respectivos nomes comerciais.

Tabela III.1 Moderadores do apetite.
Substncia Nome comercial*
Fentermina
Ionamin

, Adipex

, Fastin

,
Banobese

, Obenix

, Zantril

Fenproporex Desobesi-M

, Inobesin

, Lipomax AP

Anfepramona
(dietilpropiona)
Dualid S

, Hipofagin

, Inibex

,
Moderine

, Obesil

Mazindol
Dasten

, Fagolipo

, Mazanor

,
Sanorex

Fenilpropanolamina Accutrim

, Dexatrim

Fenfluramina Minifage AP

e Lipese AP

DexFenfluramina Isomeride

, Delgar

, Fluril

, Fatinil

Sibutramina Meridia

, Reductil

, Plenty

Fluoxetina Prozac

Sertralina Zoloft

* No Brasil ou EUA.


Outro frmaco amplamente utilizado nos ltimos tempos o orlistat (Xenical

).
Esta droga atua no lmen intestinal inibindo a lipase gstrica e pancretica que uma
enzima necessria para a absoro de gordura. Causa esteatorria (diarria gordurosa),
incontinncia fecal, interfere na absoro das vitaminas A, D, E e K, necessitando de
139
suplementao alimentar. Para maiores informaes, vide seo Xenical

que se encontra
nesta apostila.
A leptina, hormnio secretado pelos adipcitos, reflete o contedo lipdico
corporal, e objeto de amplos estudos para sua utilizao no emagrecimento. Trata-se de
um hormnio que regula o apetite atravs de atuao no sistema nervoso central,
bloqueando o neuropeptdeo Y (potente orexgeno) e o receptor de melanocortina-4, que
tambm tem funo estimulatria do apetite. At o momento seu uso s factvel em
animais.
A colecistocinina conhecida como hormnio da saciedade por estimular a
liberao de calcitonina e oxitocina, tambm inibidores do apetite, e diminuir o
esvaziamento gstrico. Porm ainda necessria a comprovao da eficincia dessa
substncia para a sua utilizao no emagrecimento.
Alm disso, outras substncias para o tratamento da obesidade so prescritas
irracionalmente associadas a um anorexgeno, como os ansiolticos, diurticos, hormnio
do crescimento e hormnios tiroideanos.
O uso de qualquer medicamento pode levar a simples efeitos colaterais,
suportveis, e que no agridam seriamente a sade do indivduo, mas tambm podem
ocasionar srios efeitos, com prejuzo a sade. Da a necessidade da realizao de estudos
clnicos bem controlados e bem desenhados para a real comprovao da eficcia e da
iseno de efeitos colaterais mais srios.

140
Derivados -fenetilamnicos e fenilpropanolamnicos


Figura III.1A - Biossntese de
catecolaminas

Como moderadores de apetite, para o tratamento
da obesidade, os derivados da anfetamina no tm
alcanado sucesso de modo geral, principalmente
porque sua eficcia muito curta e o risco de
produzir dependncia muito grande. O efeito
estimulante seguido de depresso e ansiedade. Por
isso, muitas vezes, estas drogas esto associadas
irracionalmente a algum ansioltico como os
benzodiazepnicos (diazepam, bromazepan etc).
Todos os medicamentos anorexgenos de ao
central, exceto o mazindol (Figura III.1B), so
derivados da -fenetilamina. O esqueleto -
fenetilamnico tambm a estrutura dos
neurotransmissores noradrenalina, adrenalina e
dopamina (monoaminas). Estes compostos so
formados a partir da fenilalanina e da tirosina. No
fgado, a fenilanina convertida tirosina numa
reao catalisada pela fenilalanina hidroxilase. A
tirosina ento transportada para os neurnios que
secretam as catecolaminas. Esses
neurotransmissores so ento sintetizados a partir da
tirosina em terminaes nervosas, armazenado em
grnulos e liberado na fenda sinptica para agir em
receptores ps-ganglinicos. A via biossinttica das
catecolaminas est mostrada na Figura III.1A. Aps
agir nesses receptores, as monoaminas podem ser
inativadas pela catecol-o-metiltransferase (CMT) ou
monoamina oxidase (MAO).ou ser recaptadas pela
terminao nervosa.



Figura III.1B - Estrutura molecular do mazindol


Os receptores adrenrgicos esto descritos no Box 2.
So observadas aes nos sistema nervosos central e perifrico e alm do papel
como neurotransmissores, a noradrenalina e a adrenalina exercem funo importante no
controle do metabolismo, aumentando a taxa de glicogenlise e de secreo de cidos
graxos.
Dados de farmacocintica, efeitos cardiovasculares, efeitos endcrinos e
metablicos, estudos clnicos e relatos de casos em humanos podem ser consultados na
141
reviso Mancini MC, Halpern, A. Pharmacological Treatment of Obesity. Arq Bras
Endocrinol Metab (2002), 46 (5):497-512.


Inibidores seletivos da recaptao da serotonina

A 5-hidroxitriptamina (5-HT), tambm
conhecida por serotonina, formada pela
hidroxilao e descarboxilao do triptofano (Figura
III.2). As maiores concentraes de 5-HT no
organismo esto na parede do intestino (cerca de
90%), no sangue e no sistema nervoso central.
No sistema nervoso central, os papis j
postulados da 5-HT incluem controle do apetite, do
sono, do humor, alucinaes, comportamento
estereotipado, percepo da dor e vmitos.
A degradao da serotonina ocorre
principalmente por meio de desaminao oxidativa
catalisada pela monoamina oxidades (MAO), uma via
idntica ao catabolismo da noradrenalina (Figura
III.2).
Os receptores serotoninrgicos esto descritos
no Box 3.






Figura III.2 - Biossntese da serotonina.


A sibutramina inibe a recaptao da noradrenalina, da dopamina e da serotonina,
central e perifericamente. Seus efeitos so semelhantes queles dos derivados
anfetamnicos.
A fluoxetina e a sertralina so inibidores seletivos da recaptao de serotonina no
terminal pr-sinptico, com indicao para tratamento de depresso e bulimia nervosa,
mas sem indicao formal de uso no tratamento da obesidade. Tanto fluoxetina como
sertralina reduzem a ingesto alimentar experimentalmente em animais.
O principal problema com a fluoxetina como agente anti-obesidade a recuperao
de peso observada em estudos a longo prazo. Em geral, aps os primeiros seis meses de
tratamento, o peso gradualmente se eleva, a despeito da continuao de uso da medicao.
A utilizao de fluoxetina no tratamento de obesidade esteve mais associada a sintomas
gastrointestinais, distrbios do sono, diminuio de libido, sudorese, tremor, amnsia e
sede.
Inibidores seletivos da recaptao de serotonina no so, portanto, agentes anti-
obesidade eficientes, embora seja indubitvel o fato de que podem ser teis em pacientes
obesos depressivos ou com outras comorbidades onde esses anti-depressivos sejam
tratamentos mais apropriados.
142
Dados de farmacocintica, efeitos cardiovasculares, efeitos endcrinos e
metablicos, estudos clnicos e relatos de casos em humanos podem ser consultados na
reviso Mancini MC, Halpern, A. Pharmacological Treatment of Obesity. Arq Bras
Endocrinol Metab (2002), 46 (5):497-512.


Estudos em humanos avaliando o efeito termognico

Geralmente, os medicamentos -fenetilamnicos demonstram ao termognica em
estudos em animais. O mazindol (analisado neste texto junto com os medicamentos -
fenetilamnicos, embora no seja um derivado -fenetilamnico) estimula o consumo de
oxignio (assim como a dietilpropiona) e aumenta a estimulao da noradrenalina na
gordura marrom (assim como a anfetamina, a fenfluramina e a dexfenfluramina) em ratos.
A sibutramina, que bloqueia a recaptao de noradrenalina e de serotonina, reduz a
ingesto alimentar e tambm estimula a termognese em tecido adiposo marrom em
animais de experimentao.
Vrios estudos em animais demonstram uma ao termognica de vrios derivados
-fenetilamnicos e do mazindol. Os estudos em humanos j no so to claros e as
diferenas nos resultados obtidos costumam ser atribudas heterogeneidade dos pacientes
obesos estudados.
A efedrina, que quimicamente pertence ao grupo das fenilpropanolaminas,
estimula a liberao de noradrenalina. Algumas modificaes em sua estrutura acarretam
um aumento de sua ao perifrica ao mesmo tempo em que reduzem a ao central sobre
receptores adrenrgicos. Isso fez com que a efedrina demonstrasse potencial para
tratamento da asma, e de fato, durante muitos anos, efedrina isoladamente ou a
combinao de efedrina e teofilina foram tratamentos de primeira escolha para essa
doena. A efedrina causa uma estimulao no seletiva do sistema nervoso simptico,
atuando em receptores -adrenrgicos (inclusive
3
), e gerando um aumento da
termognese.
A associao de efedrina com metilxantinas (como cafena, teofilina e aminofilina)
ou aspirina promove um aumento da durao da atividade da noradrenalina. A atividade
da noradrenalina diminuda pela adenosina e pelas prostaglandinas, que por sua vez
sofrem inibio pela cafena e pela aspirina. A inibio da fosfodiesterase pela cafena
parece ser o efeito mais importante, uma vez que essa enzima responsvel pela
metabolizao do AMP cclico, e sua inibio aumenta ainda mais a atividade da
noradrenalina.


Box 1 - O que so neurotransmissores?

Um neurotransmissor definido como uma molcula sinalizadora
extracelular que liberada pelo neurnio pr-sinptico na sinapse
qumica e que gera sinal no neurnio ps-sinptico. Um
neurotransmissor pode gerar uma resposta excitatria ou inibitria.
O tipo de resposta determinado pelo receptor ao qual o
neurotransmissor se liga. A acetilcolina, catecolaminas, serotonina,
cido -aminobutrico (GABA) so exemplos de neurotransmissores.



143
Box 2 - Receptores adrenrgicos

A principal classificao farmacolgica subdivide os receptores nos subtipos e ,
baseados originalmente na ordem de potncia dos agonistas e, posteriormente, em
antagonistas seletivos. Pelo menos nove subtipos j foram descritos, porm existem dois
subtipos principais de receptores -adrenrgicos (
1
e
2
) e trs subtipos de receptores -
adrenrgicos (
1
,
2
e
3
). Foi demonstrado que todos tm uma estrutura semelhante e
pertencem superfamlia dos receptores acoplados protena G com sete segmentos de -
hlice transmembranar (Figura III.3).
Receptores 1 ativam a fosfolipase C e assim, produzem inositol-trifosfato (IP
3
) e
diacilglicerol (DAG) como segundos mensageiros; os receptores
2
inibem a adenilato
ciclase e, assim reduzem a formao de AMP cclico (cAMP); todos os tipos de receptor
estimulam a adenilato ciclase e, assim aumentam a formao de cAMP (Figura III.3).




Figura III.3 - Vias de sinalizao intracelular ativadas por receptores acoplados protena
G (PKA, protena quinase dependente de cAMP; PKC, protena quinase dependente de
Ca
2+
).

A distino entre os receptores
1
e
2
importante, pois os receptores
1
so encontrados
principalmente no corao, onde so responsveis pelos efeitos inotrpicos e
cronotrpicos positivos das catecolaminas (aumento da fora de contrao e aumento da
freqncia cardaca, respectivamente) e os receptores
2
, por outro lado so responsveis
pela gerao de relaxamento da musculatura lisa em muitos rgos. Esforos
considerveis esto sendo empreendidos para identificar agonistas seletivos para os
receptores
2
, que relaxariam a musculatura lisa sem afetarem o corao e antagonistas
seletivos para os receptores
1
, que exerceriam um efeito bloqueador til no corao sem,
simultaneamente, bloquearem os receptores
2
da musculatura lisa brnquica.

Os principais efeitos da ativao dos receptores so:
144

Receptores
1
: vasoconstrio, relaxamento da musculatura lisa gastrintestinal,
secreo salivar e glicogenlise heptica.
Receptores
2
: inibio da liberao dos transmissores, agregao plaquetria,
contrao da musculatura lisa vascular.
Receptores
1
: aumento da freqncia e da fora cardacas, relaxamento da
musculatura lisa gastrintestinal.
Receptores
2
: broncodilatao, vasodilatao, relaxamento da musculatura lisa
visceral, glicogenlise heptica, tremor muscular.
Receptores
3
: liplise.




Box 3 - Receptores serotoninrgicos

At hoje, j foram descritos 14 subtipos de receptores serotoninrgicos. As subfamlias 5-
HT1, 5-HT2, 5-HT4, 5-HT5, 5-HT6 e 5-HT7 so acoplados protena G e o 5-HT3 um
canal catinico (Tabela 2).

Tabela 2 - Mecanismo de ao da 5-HT.
Sub-famlia de receptores de 5-HT Mecanismo efetor
5-HT1(A,D, D, E, F) Inibio da adenilato ciclase
5-HT2 (A, B, C) Ativao da fosfolipase C-fosfato de
inositol
5-HT3 Canal catinico (Na
+
/K
+
)
5-HT4 Ativao da adenilato ciclase
5-HT5 (A, B) Inibio da adenilato ciclase
5-HT6 Ativao da adenilato ciclase
5-HT7 Ativao da adenilato ciclase


O desenvolvimento de agonistas e antagonistas e os estudos envolvendo animais
nocauteados para estes receptores auxiliam no entendimento do papel da serotonina na
regulao do comportamento da alimentao e alm disso, podem levar ao
desenvolvimento de novos ligantes seguros para o tratamento da obesidade (Figura III.4).

Um exemplo de um efeito colateral srio aps o uso de drogas para emagrecer, foi o que
ocorreu com a combinao "fen-fen" (fentermina+fenfluramina, comercializados como
Pondimin

e Redux

). Em 1997, um grupo de pesquisadores da Clnica Mayo, relatou 24

casos de mulheres que haviam desenvolvido uma doena nas vlvulas cardacas aps a
utilizao dessa combinao. A partir de ento, o FDA (Food and Drug Administration)
recebeu vrias notificaes de novos casos, inclusive de pacientes que s usaram
fenfluramina ou dexfenfluramina. Ento, os laboratrios responsveis retiraram o
medicamento do mercado, e iniciaram uma extensa pesquisa sobre esse grave efeito
colateral. Alguns estudos mostraram que no h evidncia de efeitos colaterais do tipo
infarto do miocrdio, miocardiopatia e alguns tipos de doenas valvulares, mas
comprovaram que realmente h uma maior incidncia de regurgitao artica devido ao
145
comprometimento da vlvula cardica artica. Recentemente, os laboratrios envolvidos
pagaram $3,75 bilhes de dlares em indenizaes aos milhares de consumidores que
utilizaram essas medicaes. recomendado aos pacientes, que fizeram uso destas
medicaes, que procurem um mdico para fazerem um "check-up" para excluir qualquer
possibilidade de seqelas, apesar de ser pequeno o nmero de pacientes afetados.





Figura III.4 - A fenfluramina inibe o transporte de 5-HT atravs do (A) transportador
vesicular e do (B) transportador de serotonina. As anfetaminas substitudas como a
fenfluramina e 3,4-metilenodioximetanfetamina (MDMA), estimulam a liberao de 5-HT
dos terminais serotoninrgicos, aumentando assim o tempo de permanncia e
consequentemente seu efeito, como por exemplo, a inibio do apetite.




Referncias (Apndices)


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Cell. 4
th
ed. New York: Garland Publishing; 2002.

Haddock CK, Poston WSC, Dill PL, Foreyt JP, Ericsson M. Pharmacotherapy for obesity:
a quantitative analysis of four decades of published randomized clinical trials.
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24

Mancini MC, Halpern, A. Pharmacological Treatment of Obesity. Arq Bras Endocrinol
Metab (2002), 46 (5):497-512.

146
Rang HP, Dale MM, Ritter JM. Farmacologia. 3a ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan,
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Siegel GJ, Agranoff BW, Albers RW, Fisher SK, Uhler MD. Basic Neurochemistry. 6
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ed.
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Opin Investig Drugs (2004), 5(4):377-88



http://www.sbem.org.br

http://www.cfm.org.br

http://www.pgr.mpf.gov.br/pgr/saude/nutricao/medicamentoriscos.htm

http://www.weight-loss-i.com/weight-loss-drugs.htm

http://www.agsci.ubc.ca/courses/fnh/410/colour/3_82.htm (reao de Maillard)
147
13. Figuras coloridas



Figura 3.1 - Estrutura histolgica da pele.






Figura 5.1 - Estrutura da pele mostrando as diversas camadas da derme e epiderme.




148

Figura 5.2 - Pele espessa de mamferos. (A) Estes diagramas mostram a arquitetura da
pele. (B) Micrografia de uma seo transversal da sola de um p humano, corado com
hematoxilina e eosina. A pele pode ser vista como um grande rgo composto de dois
tecidos principais: a epiderme e o tecido conectivo que fica abaixo da epiderme, o qual
consiste da derme e hipoderme. Cada tecido composto de vrios tipos celulares. A derme
e a hipoderme so ricamente irrigadas com vasos sanguneos e nervos. Algumas fibras
nervosas se estendem at a epiderme.




Figura 10.6 - Stios de protelise para cada um dos tipos de toxina botulnica.
149
Figura 3.2 - Ilustrao da raiz de um fio de cabelo. O esquema mostra em detalhes seus
principais componentes.





Figura 6.1 - Espectro da radiao eletromagntica.