ASIGNATURA

:MICROBIOLOGIA MEDICA

UNIDAD 3

:ESTUDIO DE LOS MICROORGANISMOS BACTERIANOS PRODUCTORES DE INFECCIONES :CITOLOGIA BACTERIANA :2 HORAS

TEMA DURACIN

FOE

:CONFERENCIA

SUMARIO
CARACTERISTICAS GENERALES DE LA CLULA

BACTERIANA
FUNCIONES DE LAS ESTRUCTURAS DE LA CLULA OTRAS FORMAS BACTERIANAS FUNDAMENTO DE LA TINCIN DE GRAM Y ZIEHL

NEELSEN

OBJETIVOS

MENCIONAR LAS CARACTERSTICAS GENERALES DE LA CELULA BACTERIANA

CONOCER LAS PRINCIPALES ESTRUCTURAS DE LA CLULA

DESCRIBIR LAS FUNCIONES DE LAS ESTRUCTURAS DE LA CLULA NOMBRAR OTRAS FORMAS BACTERIANAS EXPLICAR EL FUNDAMENTO CIENTIFICO DE LA TINCIN DE GRAM Y ZIEHL NEELSEN

Caractersticas Generales de las Bacterias

Miden 0.5 a 5 um, reproduccin asexual Formas: esfricos, bastoncillos y helicoidales Disposicin: racimos, cadenas, espirilos etc. Gram positivas o negativas ADN nico y circular

A) Pili B) Ribosoma C) Capsula D) Pared celular E) Flagelo F) Citoplasma G) Vacuola H) Plsmido I) Nucleoide J) Membrana citoplasmtica

ESTRUCTURAS DE LAS CLULAS BACTERIANAS

I.Constituyentes internos:

1) Material Gentico 2) Citoplasma II.Estructuras de envoltura: 1) Membrana celular 2) Mesosomas 3) Pared celular Gram positivas: peptidoglucano, cido teicoicos y teicurnicos,

polisacridos. Gram negativas: peptidoglucano, lipoprotenas, membrana externa, lipopolisacridos, espacio periplsmico

4) Cpsula 5) Glucocliz

III. Apndices: Flagelos, pilis, fimbrias

I) CONSTITUYENTES INTERNOS
1) Material gentico
a) Nucleoide:
- Fibrillas de ADN, nica molcula circular - Cromosoma haploide de 1 mm longitud - 10 millones pares de bases - Constituido por ARN, ARN polimerasa, protenas - Ausencia de una membrana nuclear y de un aparato mittico.

b) ADN extracromosmico: Plsmidos

2) Citoplasma

Contiene ADN cromosmico, ARN m, ribosomas,

protenas, 70 % agua y metabolitos.

Se almacena material de reserva en forma de grnulos

insolubles depositados como polmeros.

Ejemplo de polmeros: cido poli B hidroxibutrico,

azufre, polifosfato, volutina, carboxisomas, vacuolas de gas, chaperonas moleculares.

II.Estructuras de Envoltura
1) Membrana celular /citoplasmtica:

a) Fosfolpidos: (doble capas) actan como

barreras de contencin para los nutrientes.

b) Protenas y enzimas:
- Participan en los mecanismos de produccin y transporte de energa. - Facilitan el transporte de sustancias a travs de la membrana.

Funciones de la Membrana Celular

a) Permeabilidad selectiva y transporte solutos b) Transporte de e- y fosforilacin oxidativa c) Excrecin de exoenzimas hidrolticas y protenas de patogenicidad d) Funciones biosintticas e) Sistemas quimiotcticos.

2. Mesosomas
Son estructuras especializadas originadas por invaginaciones de la membrana celular. Existen dos tipos: a) Tabique: Forman paredes transversales durante la divisin celular. b) Laterales: Participa en la secrecin de protenas extracelulares o en el metabolismo de los carbohidratos.

3. A) Pared Celular de las Bacterias Gram Positivas

a) Peptidoglucano: (50 90%) - Columna vertebral: Formado por el disacrido Nacetilglucosamina y el cido N- acetilmurmico, alternados unidos por enlaces B 1,4 glucosdicos.

- Cadenas laterales tetrapeptdicas fijadas al N- acetilmurmico:

Posicin 1 : L- alanina Posicin 2 : cido D - glutmico Posicin 3 : L - lisina (Gram negativas: cido diaminopimlico) Posicin 4 : D - alanina - Conjunto paralelos.

de puentes peptdicos transversales: Forman enlaces cruzados con espinazos

Ejemplo de peptidoglucano de S. aureus

N acetil N- acetil glucosamina murmico
cH2oH o H NH-COCH3 H NH-COCH3 cH2oH

enlaces Beta 1, 4

L - alanina D - isoglutamina L- lisina

D- alanina

Entrecruzamiento del peptidoglucano de una bacteria Gram negativa.

b) cidos Teicoicos y teicurnicos

- Teicoicos: (10%) Son polmeros hidrosolubles de fosfatos
que contienen ribitol o residuos de glicerol unidos por enlaces fosfodister al peptidoglucano. Existen de dos tipos: * De pared: van unidos al peptidoglucano. * De membrana: unidos a glucolpidos de membrana y concentrado en los mesosomas.
- Teicurnicos: Son polmeros que se sintetizan cuando la

existencia de fosfato es limitada.

Funciones de los cidos Teicoicos y Teicurnicos

- Forman antgenos de superficie - Adhesin a las clulas del husped - Intervienen en el funcionamiento de la envoltura

celular

- Lugar de recepcin de fagos.

c) Polisacridos:
Azcares que existen como subunidades de

polisacridos en la pared celular de las bacterias Gram positivas.

Azcares neutros: manosa, arabinosa, glucosamina,

galactosa y ramnosa.
Azcares cidos: glucornico y manurnico.

3 B) Pared Celular de las Bacterias Gram Negativas

a) Peptidoglucano: (5-10%) La diferencia es que en la posicin 3 de las cadenas laterales se encuentra el cido diaminopimlico (DAP). b) Lipoprotenas: (40-45%) Enlazadas a los residuos del cido diaminopimlico. Funcin: estabilizar la membrana externa y fijarla a la capa de peptidoglucano.

c) Membrana externa: (20 - 25%) Es una bicapa de fosfolpidos y la capa externa es sustituida por lipopolisacridos. Funciones:
- Mantiene la estructura bacteriana, filtro molecular

- Proteger a la clula de condiciones del medio

- Contiene protenas estructurales y molculas receptoras de bacterifagos

- Propiedad de superficie (humedad, adhesividad), resistencia a los antibiticos - Sitio donde se fijan los componentes del complemento

d) Lipopolisacridos: (30%)

- Es un complejo lipdico denominado lpido A

- LPS se disocia en lpido A (toxicicidad) y en polisacrido (Ag O)

- Se sintetiza en la membrana citoplasmtica y se transporta hasta membrana externa - Es una endotoxina, estimulador de las respuestas inmunolgicas. - Regin central o core: Viabilidad de la bacteria.

e) Espacio periplsmico: (20 40 %)

- Espacio entre la membrana interna y externa

- Contiene capa de murena y protenas - Enzimas hidrolticas: proteasas, fosfatasa alcalina, nucleasas, 5`nucleotidasa.

- Factores de virulencia: colagenasa, hialuronidasa, amino glucsido fosforilasa, beta lactamasa.

 Funciones de la Pared Celular:

- Da forma a la bacteria y proteccin contra la presin

osmtica del medio

- Acta como primordio de su biosntesis durante la

divisin celular

- Responsable de la antigenicidad somtica

- Receptor de fagos: virus que infectan a las bacterias.

BACTERIAS

Gram positivas

Gram negativas

4) Cpsula
Revestimiento viscoso o muscilaginoso de

polisacridos sintetizado por la membrana celular.

Contiene el antgeno K.
Funciones: - Aumenta la virulencia y la invasividad - Estructura antifagoctica y capacidad antignica - Protege a la clula frente al medio ambiente - Facilita la adherencia a las clulas del husped.

5) Glucocliz
Es una maraa de fibras de polisacridos, se

extienden fuera de la clula.

Funcin: - Sirve como medio de adherencia a la superficie del medio (ej.: piel, vlvulas cardacas, catteres, esmalte de los dientes etc.)

III. APENDICES
a) Flagelos: Son apndices filiformes huecos,

constituidos por molculas de protenas denominada flagelina.

-

Presentan el Ag H
Se insertan a la bacteria mediante un gancho y un cuerpo parabasal formado por una serie de anillos: Gram (+)1 par de anillos Gram (-) 2 pares de anillos. Funciones: motilidad, evitar sustancias toxicas, detectan diferencias entre la concentracin del medio.

Tipos de Arreglos Flagelares

- Monotrico: flagelo polar nico.

- Anfitrico: Un flagelo en cada extremo.

- Lofotrico: flagelos polares mltiples. - Peritrico: Flagelos alrededor de la clula.

b) Pilis y Fimbrias Pilis: son apndices rgidos constituidos por subunidades proteicas denominadas pilina.

a) Pilis ordinarios o comunes: (100-200 x cell)

sirven como medio de adherencia a las clulas del husped.

b) Pilis sexuales: (menos de10 x cell)

Fimbrias: Filamentos de protenas.
a) Ordinarias: Adherencia b) Sexuales

CRITERIOS DE CLASIFICACIN BACTERIANA 1) Segn su Morfologa y Disposicin:

2) Segn Tincin de Gram: a) Positivas b) Negativas

3) Segn dao o beneficio: a) Patgenos b) No patgenos, Microbiota normal c) Ser parte de la industria

4) Segn aceptor final de electrones: a) Aerobios o anaerobios estrictos b) Aerobios y anaerobios obligados c) Aerobios o anaerobios facultativos

5) Segn donadores de electrones: a) Litotrofas b) Organotrofas 6) Segn fuente de energa:

A) Fototrofas B) Quimiotrofas

7) Segn fuente de carbono: a) Auttrofas b) Hetertrofas c) Quimiolittrofas

Otras formas bacterianas

- Protoplastos: Son bacterias Gram (+) que han sufrido

remocin o destruccin total de su pared.

- Esferoplastos: Son bacterias Gram (-) que han sufrido

remocin parcial de su pared con retencin de la membrana externa.

- Formas L: Son formas de protoplastos o esferoplastos

que son capaces de crecer

- Endosporas: Cada clula forma una nica espora

interna y se libera cuando la clula madre sufre autolisis.

Fundamento Tincin de Gram

- Permite diferenciar a las bacterias en dos grupos:

a) Gram positivas: Retienen el cristal violeta, debido a los cidos teicoicos, peptidoglucano y la disminucin de la permeabilidad de la pared celular para solventes orgnicos (color azul oscuro o prpura).
b) Gram negativas: Toman el colorante zafranina, debido a que los lpidos son disueltos por los solventes orgnicos (alcohol acetona) causando huecos en la pared celular (color rojo o rosado).

Fundamento de la Tincin de Ziehl Neelsen

- Tincin utilizada en bacterias con alto contenido de

lpidos (cidos miclicos) y ceras en su pared celular.

- Las bacterias que se tien con carbol fucsina y resisten a

la decoloracin se denominan cido alcohol resistentes y se observan de color rojo.

- Colorante primario: carbol fucsina (5 minutos)

Decolorante: alcohol cido (30 segundos) Colorante secundario: azul de metileno (1 minuto)

Unidad 3
TEMA 2 : NUTRICIN, CRECIMIENTO Y METABOLISMO BACTERIANO.

Duracin: 2 horas Foe: Conferencia Sumario: - Definicin de nutricin, crecimiento y multiplicacin bacteriana - Requerimientos nutricionales y factores adversos - Medios de cultivo en Microbiologa y fases del crecimiento - Definicin de metabolismo - Funciones del metabolismo y su clasificacin.

OBJETIVOS
Definir nutricin, crecimiento y multiplicacin bacteriana Mencionar los requerimientos nutricionales que

necesitan las bacterias y los factores adversos a ellas

Mencionar los medios de cultivo utilizados en la

Microbiologa

Explicar la curva de crecimiento bacteriano

Explicar las funciones del metabolismo bacteriano y su clasificacin.

DEFINICIN DE NUTRICIN, CRECIMIENTO Y MULTIPLICACIN DE LAS BACTERIAS

- Nutricin: Provisin de nutrientes para el crecimiento de

los microorganismos.

- Tipo de nutricin: (haloftica): Nutricin a base de

pequeas molculas en solucin.

- Crecimiento: Incremento ordenado de todos los

componentes de una clula.

microorganismos.

- Multiplicacin: Aumento en el nmero de

REQUERIMIENTOS PARA EL CRECIMIENTO BACTERIANO Elementos Funciones en el Metabolismo

C, H, O
N

Componente del material celular

Componente de las protenas y cidos nucleicos. Componentes de los aa azufrados, cistena, metionina, coenzima A, biotina, pirofosfato de tiamina. Componente de cidos nuclicos, Fosfolpidos, nucletidos, pared celular

Elementos
K

Funciones en el metabolismo

Integridad de los ribosomas

Esencial sistemas de transporte

Na

Fe

Presente en las coenzimas de los citocromos y peroxidasas, ferredoxinas y protenas Cofactor de enzima (cinasa) Componente de las paredes celulares, membranas, ribosomas y steres de fosfato Componente de exoenzimas (amilasa, proteasa) y de paredes celulares en las Gram +, principalmente en las endosporas.

Mg

Ca

Factores del Crecimiento Bacteriano

Carbohidratos: Intervienen en la produccin de

energa y la estructura celular.

Precursores metablicos de los cidos

nucletidos: Representan los bloques fundamentales para la sntesis de protenas y cidos nucleicos.

Lpidos: Son los componentes mayores de la

membrana celular.

Vitaminas: Precursores de las coenzimas.

Fuentes de Energa Metablica

A) Fermentacin: Se caracteriza por la fosforilacin del
sustrato.
Ejemplos de fermentaciones microbianas basadas en la

va Embden Meyerhof

Microorganismos

Fermentacin Lactato cidos mixtos

Productos Lactato Lactato, acetato, Formato, etanol.

Streptococcus Escherichia, Salmonella Shigella, Proteus

B) Respiracin: La

reduccin qumica de un oxidante a lo largo de portadores de e- en la membrana (establecen la fuerza motriz protnica para cruzar la membrana bacteriana).

C) Fotosntesis: se crean
fotoqumicamente por medio de la energa luminosa absorbida por los pigmentos de la membrana.

Reductores = cido lctico, hidrgeno Oxidantes = oxgeno, CO2, Sulfatos, nitratos.

Ej.: H20 es un reductor del CO2 (se libera Ox y se produce materia orgnica.

Factores Ambientales que Afectan el Crecimiento de los Microorganismos

- Nutrientes

- PH o Concentracin de hidrgeno: Acidfilos (3), Alcalfilos (10), Neutralfilas (6)

- Temperatura: Termfilas (50-60), Psicrfilas (15-20), Mesfilas (30-37)

- Presin osmtica: a) Osmfilas (altas presiones) b) Halfilas (altas [ ]sal) - Humedad, desecacin, luz ultravioleta y radiaciones

Medios de Cultivos utilizados en Microbiologa

Medios de cultivo: Soluciones de nutrientes.

Condiciones del medio de cultivo:

Nutrientes, pH, temperatura, aireacin, concentracin de sales, potencial inico del medio, esterilidad.
Clasificacin de los medios de cultivo:

1) Segn su estado fsico: Lquidos, Slidos, Semislidos. 2) Segn su origen: Naturales, Artificiales o Sintticos y Semisintticos.

3) Segn sus requerimientos: Comunes o corrientes, Especiales, Selectivos, Enriquecidos, Diferenciales y de Transporte.

Fases del crecimiento bacteriano

METABOLISMO BACTERIANO Metabolismo: Es el conjunto de reacciones qumicas que

ocurren en la clula, producen y/o utilizan energa para la sntesis de sus componentes y realizar sus funciones.

Fases del metabolismo: Catabolismo y anabolismo Importancia del Metabolismo: Brinda las bases para comprender el modo de vida y hbitat de las bacterias.
-

Diferenciar las caractersticas fisiolgicas de las bacterias.

Permite conocer aspectos de la Fisiopatologa de las infecciones y la facilidad de algunas bacterias para crecer en determinado rgano o tejido.

 El Metabolismo Bacteriano se divide en 4 Categoras:

1) Interconversin de metabolitos focales (ej. Glucosa 6 fosfato en fosfato de hexosa para obtener carbohidratos) 2) Vas de asimilacin para la formacin de los metabolitos focales (ej. Acetil CoA, Ciclo del cido tricarboxlico, Ciclo de Calvin) 3) Secuencias biosintticas para la conversin de metabolitos focales a productos terminales: (ej. Sntesis de peptidoglucano, LPS, Polmeros capsulares y grnulos de reserva) 4) Vas que producen energa metablicas para el crecimiento y la conservacin: (ej. Fosforilacin del sustrato y del ADP)

TEMA 3: GENETICA BACTERIANA SUMARIO: - Caractersticas y replicacin del cromosoma - Importancia de: plsmidos, bacterifagos y transposones - Mutaciones y mecanismos de intercambio gentico - Resistencia intrnseca y adquirida de de las bacterias a los antimicrobianos - Mecanismos de accin de los antimicrobianos
Duracin: 2 horas FOE: Conferencia

OBJETIVOS: Mencionar las caractersticas del cromosoma bacteriano

- Explicar la replicacin del cromosoma bacteriano - Enunciar la importancia de los plsmidos, bacterifagos y

transposones

- Describir los diferentes tipos de mutaciones y explicar los

mecanismos de intercambio gentico

- Conocer los tipos de resistencia intrnseca y adquirida de las

bacterias a los antimicrobianos

- Describir los mecanismos de accin de los antimicrobianos.

Caractersticas del Cromosoma Bacteriano

Cromosoma nico, haploide, circular.

las molculas de ADN son de doble cadena con bases complementarias. Longitud del ADN se expresa en kilopares de bases.

ADN
Bases nitrogenadas Azcar Grupo Localizacin Papel en la clula A T, G C Desoxirribosa Fosfato Ncleo Determinan informacin gentica

ARN
A U, C G Ribosa Fosfato Ncleo, citoplasma Sntesis de protenas

Modelo del ADN:

Replicacin del cromosoma

Importancia de los Plsmidos

La mayora son molculas circulares de ADN de doble

cadena. Son llamados replicones y algunos episomas.

Confieren propiedades patognicas:

a) Resistencia a antibiticos b) Produccin de toxinas (bacteriocinas) c) Sntesis de estructuras celulares

Clasificacin: Resistencia, Col, Metablicos, Virulencia,

Conjugativos, Factor F.

Bacterifagos:
- Son agentes infecciosos

Transposones:

que se replican como parsitos obligados en las bacterias o ARN y protenas.(virus bacterianos) Temperados.

- El genoma puede ser ADN

Son segmentos de ADN, los cuales pueden moverse desde un sitio en una molcula de ADN a otro sitio blanco en la misma o en otra diferente.
- No son capaces de

- Fagos: Lticos y

replicarse de forma autnoma.

Mutaciones Bacterianas
Mutacin: Cambio en la secuencia de ADN.
Pueden ser: - Sustitucin - Supresin - Insercin - Inversin - Mutgenos fsicos o qumicos

Mecanismos de Intercambio Gentico

a) Conjugacin: Intercambio de informacin gentica
entre dos bacterias a travs de pili sexual.

b) Transformacin: Es el proceso mediante el cual las

bacterias captan fragmentos de ADN exgeno y lo incorporan en su cromosoma.

c) Transduccin: Consiste en la transferencia de

informacin gentica de una bacteria a otra, por medio de un bacterifago.

Mecanismos de Resistencia de las Bacterias

1) Inactivacin Enzimtica:
Participan enzimas Constitutivas e Inducibles, que neutralizan el efecto del Tx

2) Alteracin de la permeabilidad de la membrana. 3) Eflujo activo de antibiticos

4) Alteracin del sitio de ligacin del antibitico.

Tipos de Resistencia de las Bacterias

Resistencia Intrnseca: Caracterstica natural en las

bacterias.
Resistencia Adquirida: A) Mutacin cromosmica

B) Transferencia de ADN: a) Conjugacin b) Transduccin c) Transformacin d) Transposicin

Mecanismos de Accin de los Antimicrobianos

1) Efectos sobre la sntesis de la pared celular:
- Participan protenas reguladoras (Protena de liga de la penicilina = PBPs). 4) Interferencia en la sntesis de

cidos nucleicos:
- Liga al ARN polymerasa o Inhibicin del ADN girasa.
5) Actividad antimetablica: - Las sulfonamidas compiten con el cido P aminobenzoico, impidiendo la sntesis del cido flico necesario en ciertos microorganismos.

2) Inhibicin de sntesis de protenas:

- El antimicrobiano penetra la membrana a travs de canales proteicos (Porinas).

3) Efecto sobre la estructura y funciones de la membrana celular:

- Actividad detergente, penetran en la membrana externa.

 Gracias, por su atencin