FACULDADE DE TECNOLOGIA SENAI ROBERTO MANGE TECNOLOGIA EM PROCESSOS QUMICOS

PERODO: 3 PERODO MATERIA: CONTROLE MICROBIOLGICO TEMA: QUESTIONARIO 1.VA

1. As bactrias so divididas em dois grupos. Quais so eles e cite as caractersticas de ambos? EUBACTRIAS ARQUEOBACTRIAS - parede celular: peptidoglicano - protenas ou polissacardeos - estr.quimica da membr.citopl - alcois de cadeia longa ramificada cidos graxos de cadeias - formam produtos finais incomuns e longas. moram em ambientes adversos - Sintese protica: aminocido - metionina for-mil-metionina 2. Atravs de que tcnica podemos identificar as caractersticas morfolgicas dos microorganismos? Descreva sucintamente a tcnica, e explique como ocorre. Atravs da tcnica da colorao de Gram Tcnica: 1. Confeco do esfregao 2. Corar com violeta de cristal por 60 seg A cor fixa na membrana das bactrias 3. Lavar com esguicho de gua destilada 4. Cobrir com lugol 60 seg Complexo cristal violeta e lugol se formam na membrana da clula 5. Lavar com esguicho de gua destilada 6. Descorar com lccol-acetona 10-20 seg Gram (+)poros peptidoglicano contraem deixando a cor roxa fixada na clula. Gram (-) o lipdio da membrana desaparece deixando livre para a colorao rosa da fucsina 7. Lavar com esguicho de gua destilada 8. Corar com safranina ou fucsina bsica de Gram por 60 seg 9. Lavar com gua, secar e observar no microscpio Resultados: Gram(+) coram de roxo ; Gram(-) coram de vermelho

3. Qual a diferena dos meios seletivos e dos meios de enriquecimento? Meio enriquecimento: meio que favorece o crescimento de certo micro-organismo em em uma populao mista, no possuem nenhum agente inibidor. Meio seletivo: Seleciona especificamente o crescimento de um certo microorganismo, inibindo o crescimento dos outros em uma populao mista,graas a um agente inibidor.

4. Quais so os cuidados que devem ser tomados no preparo dos meios de POR E.ROMANPgina 1

cultura? - Leitura do rtulo no frasco verificando: validade do produto, instrues de preparao do meio, peso, temperatura, pH , etc. - A cor, aparncia, hidratao do produto (higroscpico) - A perfeita homogeneizao do meio durante sua preparao - A temperatura e esterilizao, evitando assim a desnaturalizao do meio 5. Quais so os efeitos do superaquecimento nos meios de cultura? E o impacto? O superaquecimento pode causar queda do pH, escurecimento, precipitao, perda do poder geleificante. O impacto a reduo do desempenho microbiolgico do meio, perdendo sua capacidade de recuperao. 6. Quais so os grupos de micro-organismos de acordo com a variao da temperatura? Explique sucintamente cada grupo.

7. Quais so as tcnicas de isolamento de microorganismos ? Explique-as. Tcnica de semeadura em superfcie: Uma gota da amostra diluda colocada na superfcie do gar e com o auxilio da ala de Digralky, a gota espalhada sobre o meio. Tcnica de Pour Plate ou Mtodo de profundidade: A amostra diluda em tubos, logo misturado 1mL das amostras com o meio de cultura a uma temperatura de 40-50C dentro das placas de Petri, homogeneizando sempre em forma circular ou fazendo o nmero 8. 8. Quais so os agentes fsicos responsveis pelo mecanismo de destruio dos micro-organismos? - Altas temperaturas: que podem ser calor mido(vapor), seco(ar quente), incinerao(bico de Bunsen) - Baixas temperaturas: inibe o metabolismo dos M.O., no mata, mais ficam latentes. - Radiao:classificada dependendo do comprimento de onda - Filtrao: atravs de membranas filtrantes, esterilizam e separam os M.O. - Dessecao 9. Cite 5 equipamentos do laboratrio, a utilizao e importncia no controle de qualidade microbiolgico? 1. Autoclave: serve como esterilizador dos materiais e meios de cultura, eliminando a carga microbiana presente na amostra. Deve ser calibrada e qualificada. 2. Balana analtica: Exatido na pesagem, utilizada para o preparo dos meios de cultura, a mesma deve ser calibrada. 3. Bancada de Fluxo Laminar: Se for vertical protege o analista e a amostra; se for POR E.ROMANPgina 2

horizontal, protege s a amostra, tambm deve ser qualificada. 4. Estufa bacteriolgica: Cria condies ideais para que o M.O. se desenvolva em certa temperatura, tambm deve ser calibrada e qualificada. 5. pHmetro: Permite determinar o pH do meio na sua preparao, tambm deve ser calibrado.

10. Quais so os EPI'S necessrios no controle de qualidade microbiolgico ao se manusear as cepas? Explique a utilizao. 1. Luva: evita o contato direto da pele com o M.O., protegendo ambos (analista e amostra) de alguma contaminao. 2. Mscara: evita a contaminao do M.O. pela respirao do analista, como tambm o contagio do analista pelo M.O. 3. Touca: Evita a contaminao do analista e de M.O. atravs do cabelo. 4. Jaleco: Protege a roupa do analista de qualquer contaminao por M.O. e vice-versa . 5. culos: Evita a contaminao do analista de M.O. atravs da mucosa do globo ocular. 11. Qual o objetivo da tcnica de diluio dos micro-organismos? Quantificao da amostra ou M.O. 12. Quantas passagens podem ser realizadas com as cepas padro? Por que? Cinco passagens, porque pode gerar uma mutao do M.O. alterando as caractersticas da cepa. Podendo gerar como resultado um falso-positivo 13. Explique o teste de promoo de crescimento, em meios de cultura? E por que realiz-lo. - O Teste de promoo de crescimento consiste na avaliao dos meios de cultura quanto a sua capacidade promotora de crescimento e a sua esterilidade. - feito aps cada preparao e esterilizao do meio de cultura. - Utiliza-se uma cepa j quantificada entre 10 e 100 UFC/mL. - Dilui-se 1 mL dessa cepa e mistura-se com o meio de cultura a uma temperatura entre 40 50C. - Leva-se o meio estufa microbiolgica para incubao dos M.O. - Tudo isso se faz em paralelo com o controle positivo e negativo. O teste realizado para saber se o meu meio vivel e est estril. O teste s aprovado se conseguir 70% de recuperao do M.O. inoculado 14. Quais micro-organismos devem ser utilizados na avaliao do meio de cultura TSA? Staphylococcus aureus Escherichia coli Pseudomona aeruginosa Bacillus subtilis Clostridium tetanis

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15. No controle de qualidade microbiolgico na indstria farmacutica, qual a classificao de risco da rea de risco biolgico? E por que possuem essa classificao?

Classe de risco 2
Por que , mesmo que as exposies laboratoriais possam causar alguma infeco, existem medidas eficazes de tratamento e preveno que limitam esse risco.

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