INICIO

Produccion de inoculo en caldo lecitina

Inocular un vial de cada cepa obtenida en un erelenmeyer de 500 mL e incubar

Trasladar 100 mL de inoculo a un erlenmeyer que contenga 1000 mL de caldo lecitina

Lapso de tiempo de 30 min. Hasta llegar a 1 hora y media

Posteriormente o durante se retira el erlenmeyer y hacen muestreos consecutivos

En cada muestreo se toma 5 mL de muestra

Obtencin del extracto del crudo con enzima lipolitica

Se centrifuga a 1500 RPM durante 15 minutos

Prepara solucion buffer fosfato 1 M a pH 7 y se mezc con p - nitrofenol palmitato al 1%

Se mezcla 900 mL de solucion buffer con 500 mL de extracto del crudo

La solucion se encuba por 30 min a 55 C

Se realiza la lectura utilizando la solucion buffer sin crudo en el espectofotometro

FIN

INICIO

cion de inoculo en caldo lecitina

100 mL de inoculo

n vial de cada cepa obtenida en un nmeyer de 500 mL e incubar

pH inicial de 7,5, tiempo de incubacion 24 horas a 55 C

0 mL de inoculo a un erlenmeyer que nga 1000 mL de caldo lecitina

Se cultiva por 12 horas

e o durante se retira el erlenmeyer y se en muestreos consecutivos

uestreo se toma 5 mL de muestra

ga a 1500 RPM durante 15 minutos

n buffer fosfato 1 M a pH 7 y se mezcla p - nitrofenol palmitato al 1%

mL de solucion buffer con 500 mL del extracto del crudo

on se encuba por 30 min a 55 C

ctura utilizando la solucion buffer sin do en el espectofotometro

FIN