1 INTRODUO 1.

1 Antissepsia Antissepsia: o conjunto de medidas propostas para inibir o crescimento de microorganismos ou remov-los de um determinado ambiente, podendo ou no destrulos e para tal fim utilizamos antisspticos ou desinfetantes. a destruio de micro-organismos existentes nas camadas superficiais ou profundas da pele, mediante a aplicao de um agente germicida de baixa causticidade, hipoalergenico e passvel de ser aplicado em tecido vivo. Os detergentes sintticos no inicos praticamente so destitudos de ao germicida. Sabes e detergentes sintticos aninicos exercem ao bactericida contra microorganismos muito frgeis como o Pneumococo, porm, so inativos para Stafilococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e outras bactrias Gram negativas. Consequentemente, sabes e detergentes sintticos (no inicos e aninicos) devem ser classificados como degermantes, e no como antisspticos. A descontaminao de tecidos vivos depende da coordenao de dois processos: degermao e antissepsia. Degermao a remoo de detritos e impurezas depositados sobre a pele. Sabes e detergentes sintticos, graas a sua propriedade de umidificao, penetrao, emulsificao e disperso, removem mecanicamente a maior parte da flora microbiana existente nas camadas superficiais da pele, tambm chamada flora transitria, mas no conseguem remover aquela que coloniza as camadas mais profundas ou flora residente.

1.2 Colorao de gram Coloraes simples tornam possvel a visualizao das bactrias ao microscpio, mas isso no faz distino entre organismos de morfologia similar. Para tanto, necessrio realizar uma colorao diferencial. Existem diversos mtodos de colorao utilizados para a anlise de bactrias. Entre estes, o mais utilizado a colorao desenvolvida por Christian Gram em 1884.

Usando duas sequncias de colorao, com diferentes corantes, este mtodo permite a diviso das bactrias em 2 grandes grupos. O primeiro grupo, que retm a cor do primeiro corante (o cristal violeta), denominado Gram positivo. O segundo grupo perde a cor do primeiro corante e retm a cor do segundo corante utilizado (fucsina) e denominado Gram negativo. Uma soluo de iodo (lugol) utilizada como mordente (um composto qumico que fixa um corante ou outra substncia ao se combinar com o mesmo e formar um composto insolvel) para a primeira etapa da colorao. H tambm um agente descorante entre a utilizao de um e outro corantes. Pode-se utilizar diferentes descorantes, de acordo com a velocidade de descolorao desejada. O lcool etlico a 95% um agente descorante mais devagar, enquanto a acetona agiliza essa etapa. Geralmente utiliza-se uma mistura de lcool etlico e acetona (95:5), obtendo uma velocidade de descolorao intermediria. A maioria dos cocos Gram positiva com exceo dos gneros Neisseria e Veillonella que so os nicos Gram negativos. Assim tambm acontece com os bacilos, sendo a maioria Gram negativos. Entre os bacilos Gram positivos incluem-se aqueles pertencentes aos gneros Corynebacterium, Listeria, Bacillus, Lactobacillus e Clostridium. Os vbrios so Gram-negativos. A investigao das caractersticas morfolgicas e de colorao (morfo-tintoriais) das bactrias etapa inicial de grande importncia no isolamento e identificao de bactrias de material clnico bem como de alimentos. No entanto, a identificao completa de uma bactria sempre necessitar de dados fisiolgicos ou genticos da mesma. 2. OBJETIVO Observao da ao de antisspticos sobre bactrias a microbiota da pele. Fazer anlise de bactrias presente nas mos antes e depois de fazer antissepsia. 3. MATERIAIS E METODOLOGIA Placa de agar
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Bico de Busen Ala de Drigalski Lminas Corantes gua lcool cetona Estufa Microscpio

3.1 METODOLOGIA A metodologia usada em aula prtica foi anlise antes e depois da antissepsia. Foi feito os procedimentos de semeadura em placa de agar simples utilizando as pontas dos dedos molhados em gua deionizada. Em uma segunda placa com agar simples foi feito a semeadura utilizando a antissepsia com lcool da ponta dos dedos. Fez a antissepsia com lcool esperou secar para fazer a impresso dos dedos na placa, colocando a placa perto do bico de Bunsen para no contaminar com o ar. Em seguida foi colocado em estufa. Na aula seguinte foi feito a fixao de lminas e colorao de gram, que so feitas em trs etapas: 1 esfregao 2 fixao 3 colorao Com o auxilio de ala de Drigalski foi feito o esfregao, passou a lmina no bico de Bunsen para flambar, fez um delimitao com o lpis e em seguida colocou gua para comear a colorao. A colorao foi feita com cristal violeta e lugol por um minuto, lavou a lamina com lcool cetona para tirar o excesso de corante e em seguida foi
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lavado com gua. Por ultimo corou com fucsina por 20 segundos e secou com papel delicadamente. Colocou uma gota de leo de cedro no centro do esfregao e observou com objetiva. 4. RESULTADOS A placa sem a antissepsia cresceu duas colnias uma de bacilos, que provavelmente por contaminao do ar e outra colnia de sarcina. E com a antissepsia houve grande reduo dos bacilos e a sarcina foi eliminada por completo.

4.1 Fotos dos resultados

BACILOS STAPHYLOCOCCUS GRAM POSITIVO

GRAM

POSITIVO

5. REFERNCIA BIBLIOGRFICA http://www.fmrp.usp.br/revista/2008/VOL41N3/SIMP_3Assepsia_e_antissepsia.pdf http://www.uff.br/labac/Apostila_Pratica_Nutricao.pdf