BIO-TRANSFORMACIN DE VINAZA EN UN SISTEMA AEROBIO

Elaborado por: Carlos Alberto Lozano Moreno Supervisado por: Astrid Xiomara Garzn Diciembre 2011

1.

INTRODUCCIN

El problema ms grande que presentan las destileras destinadas a la produccin de biocombustibles es el manejo de los grandes volmenes de vinaza logrados despus del proceso de destilacin, por lo cual, se han desarrollado varias tecnologas destinadas a disminuir la cantidad de vinaza generada en el proceso de produccin de alcohol. Las caractersticas de las vinazas obtenidas como efluentes de la produccin de alcohol a partir de la fermentacin de las mieles finales de la caa de azcar, en las destileras, varan muy poco, independientemente del tratamiento de las mieles finales, del sistema de fermentacin o de la recuperacin o no de las levaduras. Entre las tecnologas ms usadas para la disminucin de litros de vinaza generado por litro de alcohol producido, se encuentra la recirculacin de vinaza al proceso fermentativo lo cual permite una generacin cercana a 3 litros de vinaza/ litro de alcohol producido. Aunque la recirculacin de vinaza tiene un gran impacto ambiental dado la disminucin en volumen de vinaza producido, sigue siendo elevado el volumen de vinaza a tratar. Entonces, surgen tecnologas alternativas para el tratamiento y aprovechamiento de la vinaza y sus caractersticas qumicas como la produccin de abonos bioorgnicos y la utilizando como suplemento alimenticio para ganado. Por lo cual, la bsqueda de nuevas tecnologas que permitan reducir el impacto ambiental de la vinaza, han sido impulsadas al encontrarse microorganismos que se pueden desarrollar en un medio a base de vinaza y adems estos microorganismos tienen grandes potencialidades que permiten

la obtencin de productos atractivos comercial y ecolgicamente (entre los que se destacan biocombustibles, biopolmeros, otros).

2.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Sabiendo que la vinaza proviene de un proceso fermentativo llevado a cabo por un microorganismo prcticamente inocuo, que tienen una carga orgnica muy alta, que el volumen es tres veces al alcohol producido y que adems esta sustancia cuenta con propiedades nutricionales atractivas para el desarrollo de diversos microorganismos, animales y plantas. Surge la necesidad de una bio-transformacion con ensayos aerbicos para evaluar si existe una disminucin de la contaminacin ambiental y la obtencin de tecnologas que generen un valor agregado a los ingenios.

3. OBJETIVOS

3.1 OBJETIVO GENERAL Evaluar el comportamiento de los contaminantes presentes en la vinaza con la inyeccin de aire.

3.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS Comparar la vinaza obtenida de Compostaje y vinaza de Bio-Destileria. Evaluar cidos voltiles, DBO y DQO. Evaluar la carga microbiana presente en las muestras.

4. DESCRIPCIN ENSAYOS BIO-TRANSFORMACIN DE VINAZA

Figura 1. Protocolo montaje de ensayos

Inoculo vinaza compostaje CUBA 1 Inoculo Vinaza Bio-Destileria 80% vinaza

Aire

4.1Condiciones de anlisis
Cuadro 1. Descripcin de los anlisis realizados

FRECUENCIA DE INOCULO DURACIO MUESTREO VINAZA N (Dias) (Dias) Compostaje Bio-Destileria 15 30 5 5 PH BRIX

ANALISIS FISICOQUIMICO ACIDEZ COLOR DBO VOLATIL DQO TURBIDEZ FAN

ANALISIS MICROBIOLOGICOS SOLIDOS MESOFILOS BAL PSEUDOMONAS COLIFORMES LEVADURAS TOTALES

Nota:Los ensayos fueron realizados en condiciones aerbicas y por duplicado.

5. ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS 5.1. Sitio toma de muestra: la vinaza fue tomada de las piscinas de compostaje y llevada a la destilera para el anlisis correspondiente.

Figura 2. Sitio toma de muestra piscina de compostaje

Figura 3. Cuba 1 montaje de los ensayos

Anlisis Fisicoqumico
Cuadro 2. Protocolo anlisis fisicoqumicos

Acidez voltil

14000 12000 10000 ppm 8000 6000 4000 2000 0 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA
Grafico 1. Comportamiento de la acidez voltil

0 9944 12923

8 1535 1265

15 1297 1042

La acidez voltil disminuye rpidamente en ambos ensayos, esto se debe a la oxido reduccin que hacen los microorganismo y a la presencia constante de aire lo cual convierte los cido actico, cido propinico, cido valrico, cido isovalrico, cido isobutrico y cido butrico en cidos menos voltiles.

Color

Figura 4. A. vinaza bio-transformacin aerobia Bio-Destileria, B. vinaza bio-transformacin aerobia compostaje, C. vinaza bio-transformacin aerobia Bio-Destileria y Compostaje.

1.6 % v/v a 375 nanometros OD 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA
Grafico 2. Comportamiento color

0 0.069 0.112

8 0.104 0.333

15 0.138 1.433

El color es ms intenso en la vinaza obtenida de Bio-Destileria debido a la oxido-reduccin del medio, al crecimiento acelerado de microorganismos aerobios y a la presencia de partculas complejas que contienen ciertos materiales colorantes.

6.1 pH
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 VINAZA BIO-DESTILERIA VINAZA COMPOSTAJE
Grafico 3. Comportamiento de pH

0 4.56 4.35

15 8.4 7.9

30 8.9 7.89

El pH aumenta debido al aceleramiento de crecimiento de los microorganismos, se ve evidenciado un aumento considerable en ambos ensayos.

6.2 FAN (amino nitrgeno libre).

Grafico 3. Comportamiento del FAN

180 160 140 120 ppm 100 80 60 40 20 0 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA 0 157 145 8 27 75 15 0 0

El nitrgeno libre nos indica la rapidez que aumenta el metabolismo de los microorganismos en ambos ensayos permitiendo de esta forma disminuir el nitrgeno presente en la vinaza el cual es utilizado por estos para su reproduccin. 6.3 Slidos totales
Grafico 4. Comportamiento de slidos totales

10 9 8 7 % w/w 6 5 4 3 2 1 0 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA 0 7.7 9.2 8 6.6 8.6 15 6.3 8.4

La concentracin de materia suspendida disminuye en ambos ensayos, y no es tan significativa para que pueda inferir en el proceso de evaporacin dela vinaza. 6.4 Brix
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0

0 7.8 9.3

8 6.8 8.6

15 6.2 8.2

VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA

Grafica 5. Comportamiento del Brix

Los grados Brix disminuyen en ambos casos debido a que los microorganismos utilizan la sacarosa como fuente de energa y adems nos da un indicio de la cantidad de solidos totales concentrados. 6.5 Turbidez
Grafica 6. Comportamiento de turbidez

25000 20000 15000 NFT 10000 5000 0 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA

0 4350 4240

8 2840 19600

15 2730 20600

La turbidez es ms intensa en la vinaza obtenida de Bio-Destileriaesto se debe al crecimiento acelerado de microorganismos aerobios y la presencia de materiales en suspensin. 6.6 DBO
Grafica 7. Comportamiento de DBO

120000 100000 80000 mgO2/l 60000 40000 20000 0 VINAZA BIODESTILERIA VINAZA COMPOSTAJE 0 59940 53315 8 24190 25970 15 7145 10165

En los dos ensayos la DBO disminuy debido a la gran cantidad de microorganismos presentes en el medio. Lo cual, dificulta el proceso de xidoreduccin. 6.7 DQO
Grafica 8. Comportamiento de DQO

180000 160000 140000 120000 mgO2/l 100000 80000 60000 40000 20000 0 VINAZA BIODESTILERIA VINAZA COMPOSTAJE 0 92716 68501 8 64846 41670 15 60758 29735

En los dos ensayos se observa una baja por la utilizacin de oxigeno de microorganismos y esto hace que se vea evidenciado con la disminucin de la acidez voltil.

3 Anlisis Microbiolgico
Cuadro 3. Protocolo anlisis microbiolgicos

CONDICIONES AEROBICAS

VINAZA COMPOSTAJE Anlisis 0 Mesofilos (ufc/ml) BAL (ufc/ml) 8 Das 15

VINAZA BIO-DESTILERIA 0 15 30

3,00E+09 3,04E+09 1,18E+10 8,00E+07 3,44E+09 8,00E+08

2,96E+04 2,34E+09 5,04E+08 7,20E+03 3,36E+09 3,36E+08

Pseudomonas (ufc/ml) 0,00E+00 9,00E+04 1,62E+04

0,00E+00 0,00E+00 0,00E+00

Coliformes (ufc/ml) Levaduras (ufc/ml)

5,40E+07 5,00E+09 2,51E+10 3,00E+09 1,23E+08 8,70E+07

1,86E+04 2,28E+08 6,00E+06 7,60E+04 4,48E+08 4,80E+07

7.1 Mesofilos
Grafica 9. Comportamiento de mesofilos

1.40E+10 1.20E+10 1.00E+10 ufc/ml 8.00E+09 6.00E+09 4.00E+09 2.00E+09 0.00E+00 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIODESTILERIA 0 3.00E+09 2.96E+04 8 3.04E+09 2.34E+09 15 1.18E+10 5.04E+08

Control positivo Control negativo Figura 5. Lectura presencia de colonias brillantes y redondas

Crecimiento de colonias Ausencia de crecimiento

Figura 6. Vista microscopio objetivo 100x bacillos Gram positivos Levaduras

7.2 Levaduras.
Grafica 10. Comportamiento de levaduras

3.50E+09 3.00E+09 2.50E+09 ufc/ml 2.00E+09 1.50E+09 1.00E+09 5.00E+08 0.00E+00 -5.00E+08 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIODESTILERIA 0 3.00E+09 7.60E+04 8 1.23E+08 4.48E+08 15 8.70E+07 4.80E+07

Control positivo Control negativo Figura 7. Lectura presencia de colonias brillantes y blancas

Crecimiento de colonias Ausencia de crecimiento

Figura 8. Vista microscopio objetivo 100x Levaduras

7.3 Acido lcticas.

Grafica 11. Comportamiento de cido lcticas 4.00E+09 3.50E+09 3.00E+09

ufc/ml

2.50E+09 2.00E+09 1.50E+09 1.00E+09 5.00E+08 0.00E+00

0 8.00E+07 7.20E+03

8 3.44E+09 3.36E+09

15 8.00E+08 3.36E+08

VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA

Control positivo Control negativo Figura 9. Lectura presencia de colonias azules

Crecimiento de colonias Ausencia de crecimiento

Figura 10. Vista microscopio objetivo 100x bacillos Gram positivos

7.4 Coliformes totales.

Grafica 12. Comportamiento de coliformes

3.00E+10 2.50E+10 2.00E+10 ufc/ml 1.50E+10 1.00E+10 5.00E+09 0.00E+00 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIO-DESTILERIA 0 5.40E+07 1.86E+04 8 5.00E+09 2.28E+08 15 2.51E+10 6.00E+06

Control positivo Control negativo Figura 11. Lectura presencia de colonias rojas

Crecimiento de colonias Ausencia de crecimiento

Figura 12. Vista microscopio objetivo 100x bacillos cortos Gram negativos

7.5 Pseudomonas.
Grafica 13. Comportamiento Pseudomonas

1.00E+05 9.00E+04 8.00E+04 7.00E+04 6.00E+04 5.00E+04 4.00E+04 3.00E+04 2.00E+04 1.00E+04 0.00E+00 VINAZA COMPOSTAJE VINAZA BIODESTILERIA

ufc/ml

0 0.00E+00 0.00E+00

8 9.00E+04 0.00E+00

15 1.62E+04 0.00E+00

Control positivo Control negativo Figura 13. Lectura presencia de colonias verdes

Crecimiento de colonias Ausencia de crecimiento

Figura 14. Vista microscopio objetivo 100x bacillos cortos Gram negativos

Hubo ms crecimiento por parte de algunos microorganismos como mesofilos y coliformes. A partir del 8 da las bacterias acido lcticas, levaduras y las Pseudomonas disminuyen en el tratamiento con vinaza de compostaje. Posiblemente, se deba a que los otros microorganismos estn compitiendo por sustrato aumentando as su poblacin e inhibiendo el desarrollo de estos. sin embargo las Pseudomonas no se observan en el tratamiento de la vinaza obtenida de Bio-Destileria. A partir del da 8 en el tratamiento de la vinaza obtenida de Compostaje se observ la presencia de organismos ciliados, los cuales obtienen su alimento de los microorganismos presentes en el medio.

7. ANALISIS DE LODOS RESULTANTES Acidez voltil (ppm) Color (% v/v a 375 nanometros
OD)

38900 0.145 4.53 8 0 300E+07 264E+07 300E+07 256E+03 57E+06

pH Brix FAN (ppm) Mesofilos (UFC/ml) BAL(UFC/ml) Coliformes(UFC/ml) Pseudomonas (UFC/ml) Levaduras (UFC/ml)

8.

CONCLUSIONES

Olor desagradable que atrae la presencia de mosquitos e la vinaza de compostaje mientras que en la vinaza de bio-desetileria no se evidencio malos olores. En el tratamiento realizado con vinaza de compostaje se evidencia de lodos con alta carga microbiana se caracterizanlos siguientes microorganismo (mesofilos, coliformes totales, levaduras, acido lcticas, E. coli,Pseudomonas y ciliados)sin embargo en el tratamiento con vinaza de bio-destileria no se evidencio lodos. El porcentaje de remocin de DBO en los dos ensayos es ms significativos debido a la disminucin de los microorganismos presentes. Mientras que en los dos ensayos la DQO el porcentaje de remocin esmslento esto se debe a que no se evidencia microorganismo que en su metabolismo utilicen los contaminantes qumico para su crecimiento. El nitrgeno presente en los dos ensayos resulta bajo por lo que la adicin de este nutrimento puede ser favorable para el desarrollo de la biotransformacion aerobia. Ya que estos elementos son fundamentales para el desarrollo de procesos metablicos esenciales como crecimiento, divisin celular, sntesis de energa. La presencia de protozoarios ciliados es conveniente ya que estos ayudan a eliminar los microorganismos patgenos y a disminuir la biomasa formada por bacterias muertas. Durante el proceso se desarrollan bacterias como la Pseudomonasla cual durante su metabolismo utiliza contaminantes de alta carga. La acidez voltil cae notablemente en los dos ensayos debido al proceso de oxido-reduccin que est ocurriendo por la presencia de oxigeno. 9. RECOMENDACIONES

Si se va a emplear la bio-transformacion aerobia se deben construir piscinas acondicionadas con un manto para evitar la salida de malos olores. Con los lodos se propone realizar ensayos de bio-tranformacion anaerobia con los que se puede obtener biogs, emplearlos para realizar ensayos de bio-transformacion aerobio o directamente analizarlos para ser utilizados en fertiriego. Construir dos piscinas de vinazas garantizando un proceso 100% aerobio o anaerobio sin fluido constante de este material, por lo menos durante 1 mes

para que se puede garantizar la disminucin de acidez voltil y la remocin de DBO y DQO. Realizar ensayo con vinaza en tratamiento aerbico de destilera ms Pseudomonas ya que es un saprofito del suelo , oportunista, cosmopolita, metablicamente verstil, por poseer una dioxigenasa inicial, una tolueno dioxigenasa, es una buena candidata para las aplicaciones biotecnolgicas, tales como agricultura, biocatalisis, biorremediacion, biocontrol en proteccin de las plantas y produccin de bioplasticosy con esto observar si con la presencia de este microorganismo se acelera la remocin de DBO y DQO. 10. BIBLIOGRAFIA Bermdez R. C. (1991). Aprovechamiento de la vinaza de destilera en la alimentacin. X foro de Ciencia y Tcnica. Cuba. Bermdez R. C. (1991). Una variante alternativa para la alimentacin animal: vinaza de destilera. Rev. Cubana de veterinaria 4.