14/12/2012

UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO INSTITUTO DE BIOLOGIA ROBERTO ALCNTARA GOMES DEPARTAMENTO DE HISTOLOGIA E EMBRIOLOGIA Disciplina Mtodos para o Estudo da Clula

MICROSCOPIOS ELETRNICOS

MICROSCOPIA ELETRNICA

MICROSCOPIO ELETRNICO DE TRANSMISSO - MET Prof Las de Carvalho

MICROSCOPIO ELETRNICO DE VARREDURA - MEV

Microscpio de Luz

PROCESSAMENTO para M. OPTICA ou de LUZ: FIXAO - formol DESIDRATAO - etanol INCLUSO - parafina MICROTOMIA = 5um - 7um COLORAO =

MO

MEV

MET

H-E

OBSERVAR ao MO

Hemcias

Tipos de Microscpios

Microscopia Eletrnica de Transmisso

ou Microscpio de Luz

A microscopia eletrnica de transmisso e de varredura se baseia na interao entre eltrons e componentes dos tecidos.

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Obteno de amostras biolgicas para microscopia eletrnica de transmisso

Coleta do material

ME TRANSMISSO FIXAO GLUTARALDEIDO (fixa proteinas) PS-FIXAO TETRXIDO DE SMIO (fixa lipdeos) DESIDRATAO ETANOL INCLUSO EPON ULTRAMICROTOMIA 50nm -70nm obteno de cortes ultrafinos CONTRASTAO OBSERVAR ao M ET

MICROSCOPIO ELETRNICO DE TRANSMISSO ( MET)

Microscpio Eletrnico de Transmisso

.Fixao do material Glutaraldeido Tetrxido de smio .Incluso Epon .Ultramicrotomia .Contrastao Uranila Chumbo

ULTRAMICRTOMO

obteno de cortes ultrafinos

TIPOS de FACA para MET : VIDRO DIAMANTE PIRAMITOME

Aparelho para aparar os blocos de MET.
Facas de VIDRO

Preparao de cortes semifinos para localizar a regio de interesse para depois fazer cortes ultrafinos.

Facas de DIAMANTE

cortes semifinos

rea para obter cortes ultrafinos

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COMPARAO entre os PROCESSAMENTOS para

M OPTICA ou de LUZ FIXAO FORMOL ----------------ME TRANSMISSO

MO e MET:

Microscpio Eletrnico de Varredura

FIXAO GLUTARALDEIDO - (fixa proteinas) PS-FIXAO TETRXIDO DE SMIO - (fixa lipdeos) DESIDRATAO INCLUSO = EPON ULTRAMICROTOMIA 50nm -70nm CONTRASTAO OBSERVAR ao M ET

DESIDRATAO INCLUSO = PARAFINA MICROTOMIA = 5um - 7um COLORAO =

H-E

OBSERVAR ao MO

Microscpio de varredura de vcuo varivel, LEO 1450VP - UERJ

Microscopia Eletrnica de Varredura

Microscopia Eletrnica de Varredura

Clulas do

COMPARAO entre os PROCESSAMENTOS para

M OPTICA ou de LUZ FIXAO FORMOL ----------------ME TRANSMISSO FIXAO Glutaraldeido PS-FIXAO Tetrxido de smio DESIDRATAO INCLUSO - epon ULTRAMICROTOMIA
50nm -70nm

MO, MET e MEV:

ME VARREDURA FIXAO Glutaraldeido PS-FIXAO Tetrxido de smio DESIDRATAO

MO

EPITLIO RESPIRATRIO

MET

MEV

DESIDRATAO INCLUSO = PARAFINA MICROTOMIA = 5um - 7um COLORAO =

PONTO CRITICO METALIZAO OBSERVAR ao M EV

H-E

CONTRASTAO OBSERVAR ao M ET

OBSERVAR ao MO