Quim. Nova, Vol. XY, No.

00, 1-9, 200_ DEFESA QUMICA: HISTRICO, CLASSIFICAO DOS AGENTES DE GUERRA E AO DOS NEUROTXICOS Gustavo Rocha Silva, Itamar Borges Jr. e Jos Daniel Figueroa-Villar* Seo de Qumica, Instituto Militar de Engenharia, Pa Gal. Tibrcio, 80, 22290-270 Rio de Janeiro RJ, Brasil Alexandre Taschetto de Castro Centro Tecnolgico do Exrcito, Av. das Amricas, 28705, 23020-470 Rio de Janeiro RJ, Brasil Recebido em 26/10/11; aceito em 26/7/12; publicado na web em 4/9/12

CHEMICAL DEFENSE: HISTORY, WARFARE AGENT CLASSIFICATION AND ACTION OF NEUROTOXIC AGENTS. Chemical agents are substances used for their toxic effects on humans, animals and plants. The main objective of chemical defense is to develop systems that reduce these effects while minimizing impact on the operational capacity of military troops. In this work, a report on the development of chemical warfare agents since the First World War and their classification is presented. Special attention is given to neurotoxic agents, the most lethal group of chemical agents known to date. Keywords: chemical defense; warfare agents; neurotoxic agents.

INTRODUO Segundo a Organizao Mundial de Sade (OMS), agentes qumicos de guerra so substncias empregadas por causa dos efeitos txicos provocados em homens, animais e plantas.1 A experincia de duas grandes guerras e o aperfeioamento que os agentes qumicos de guerra tiveram, assim como seus processos de lanamento e utilizao, situam a Guerra Qumica como uma das formas mais letais de atividade blica, ainda que proibidas pela Organizao das Naes Unidas (ONU). Para estas substncias trs grandes aplicaes lhe so atribudas:2 o emprego contra pessoas e animais por meio de gases; a cobertura ou sinalizao pela fumaa em reas e alvos militares e, a destruio de materiais e ataque a pessoas pelo fogo. Das trs formas de emprego blico, ressalta-se a primeira, que o foco deste artigo. Os agentes qumicos tm seu uso citado desde a Antiguidade, porm, foi com o advento da indstria qumica na segunda metade do sculo XIX que seu uso como arma poderosa de destruio em massa tornou-se tecnicamente vivel. Em um contexto militar, podem-se mencionar dois objetivos bsicos para o uso de armas qumicas contra pessoas:2 causar baixas (mortos e feridos) nas tropas e diminuir o desempenho operacional das tropas inimigas, em razo da necessidade do uso prolongado de equipamentos de proteo. Juntamente com as armas nucleares e biolgicas, as armas qumicas formam o grupo das armas no convencionais, que causam um nmero de baixas muito maior que as armas convencionais, baseadas em explosivos. Uma estimativa para o custo de uma operao em larga escala com armas convencionais empregadas contra uma populao civil de US$ 2.000 por km2. Para armas nucleares o custo baixa para US$ 800; para armas qumicas, US$ 600, e para armas biolgicas, US$ 1. Como o custo das armas qumicas e biolgicas menor do que o das armas nucleares, as primeiras foram chamadas de bomba atmica dos pobres.3 As armas qumicas ganharam importncia militar na Primeira Guerra Mundial, quando em 1915, o exrcito alemo utilizou gs cloro contra tropas aliadas na Blgica. Porm, foi somente na Segunda Guerra Mundial que se desenvolveram os mais potentes agentes
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qumicos de guerra, os chamados organofosforados neurotxicos, ou agentes dos nervos. Estes agentes possuem toxicidade vrias vezes maior do que seus similares conhecidos at ento e que foram inicialmente planejados como pesticidas.4 Nas ltimas dcadas, devido ao baixo custo e fcil manufatura, os organofosforados passaram a ser alvo de interesse de organizaes terroristas,5 fazendo com que a defesa contra tais agentes passasse a ser um foco de preocupao tanto no meio militar quanto civil.6,7 Todos os agentes neurotxicos, agentes de guerra qumica e pesticidas organofosforados possuem um tomo de fsforo quiral, que leva formao de um par de ismeros em propores iguais. O fundamento principal da toxicidade dos agentes neurotxicos est na inibio da enzima acetilcolinesterase, que participa de forma fundamental na terminao do processo de transmisso dos impulsos nervosos em vrias estruturas do corpo humano. Atualmente, so realizadas pesquisas em defesa contra armas qumicas tanto na rea de deteco, com o desenvolvimento de novos biossensores,8 como na rea de proteo, com o surgimento de novas tecnologias para os equipamentos de proteo.9 Porm, no nvel do tratamento mdico que se concentra a maior parte do esforo, especificamente, no caso dos neurotxicos, no desenvolvimento de novos frmacos para serem usados no pr-tratamento (como os carbamatos) e antdotos (oximas). Apesar do esforo dispendido, atualmente ainda no existe nenhum frmaco totalmente eficaz contra todos os agentes neurotxicos. Em geral, o tratamento para intoxicao com organofosforados neurotxicos feito em vrias etapas.10,11 Dependendo do grau de intoxicao e do tempo de exposio, os antdotos disponveis podem no apresentar resposta adequada, o que pode levar a graves danos irreversveis ou morte da vtima. A pesquisa sobre antdotos para agentes fosforados neurotxicos tambm de interesse civil em funo do grande uso de agroqumicos organofosforados, o que ocasiona muitos casos de intoxicao em agricultores. Estima-se que a exposio acidental a pesticidas organofosforados seja de aproximadamente um milho de casos anuais, com a maior ocorrncia em pases subdesenvolvidos.12 HISTRICO DA GUERRA QUMICA Desde a Antiguidade, existem relatos da utilizao de substncias

Assuntos Gerais

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qumicas txicas como agentes de guerra. Formas primitivas de uso so encontradas em textos de pesquisadores das Idades Antiga e Mdia. Na Amrica do Sul, os nativos utilizavam o curare, um anestsico muscular extrado da pele de rs, para a caa, bem como em guerras contra tribos rivais. Um exemplo curioso dos nativos brasileiros foi a utilizao do gs pimenta pelos ndios da provncia de Pernambuco. Eles aguardavam soprar um vento favorvel, para ento fazer uma fogueira na qual colocavam grandes quantidades de pimenta em cima. A fumaa desprendida, altamente irritante aos olhos, penetrava as fortificaes da poca e fazia com que os soldados sassem de seus postos em condies prejudicadas de luta. Assim, o ataque podia ser realizado com mais chances de sucesso. Estas situaes tiveram lugar no sculo XVI.13 Mais tarde, um dos agentes lacrimognios mais comuns, a cloroacetofenona (ClCH2COC6H5), ganhou o nome tambm de gs pimenta. Naturalmente, a substncia qumica no a mesma aplicada pelos nativos da poca da colonizao, porm a forma de ao a mesma. No final do sculo XIX, a polcia francesa fazia uso de outro tipo de agente lacrimognio, agora baseado em bromoacetato de etila e envasado em granadas de mo. Na mesma poca, os alemes experimentaram o brometo de xilila em munies de artilharia. Dcadas depois, no comeo do sculo XX, ingleses e americanos haviam desenvolvido a cloroacetofenona (CN), que foi o lacrimognio mais utilizado at depois da metade daquele sculo. As armas qumicas ganharam importncia militar na Primeira Guerra Mundial quando, em abril de 1915, o exrcito alemo descarregou 180 t de gs cloro contra tropas aliadas na Blgica, o que causou 15.000 vtimas, das quais 5.000 fatais. Seguindo uma sugesto de Fritz Haber (Prmio Nobel de Qumica em 1918, mais conhecido pelo processo de produo da amnia que leva seu nome), os alemes colocaram aproximadamente 5500 cilindros de cloro em uma linha de 6 km e esperaram que o vento soprasse em direo s tropas aliadas. No esperando que o ataque tivesse sucesso, os aliados foram surpreendidos, assim como os alemes, que no possuam tropas suficientes na rea para aproveitar o grande espao criado nas linhas defensivas aliadas. A indignao generalizada com a natureza imoral do ataque na Blgica no foi suficiente para evitar que os aliados traassem planos imediatos de retaliao com armas qumicas, que foram levados a cabo com os mesmos mtodos, em setembro de 1915, contra posies alems em Loos, na Frana. A partir deste ponto, a guerra foi marcada pelo advento de tcnicas ofensivas e defensivas de ambos os lados. Com a mesma rapidez que mscaras contra gases e novos filtros eram criados, novos agentes qumicos, que no fossem retidos pelas mscaras ou que destrussem o filtro permitindo a passagem de outros mais txicos, eram empregados. Deste embate surgiu o emprego militar do fosgnio (COCl2), disfognio (ClCOOCl3), cianeto de hidrognio (HCN) e cloreto de cianognio (CNCl) como armas de guerra qumica. Em dezembro do mesmo ano (1915) foi introduzido efetivamente o gs fosgnio no conflito atravs de armas de artilharia para tal fim e, em abril de 1917, o gs mostarda ((CH2CH2Cl)2S).14 Ao contrrio dos agentes empregados at ento, que agiam sobre o sistema respiratrio, os gases mostarda causavam queimaduras qumicas ao entrar em contato com a pele,15 o que forava a utilizao de vestimentas impermeveis, que diminuam sensivelmente a operacionalidade de combate da tropa. Estima-se que 120.000 britnicos foram vtimas de ataque com gs mostarda, porm a mortalidade foi considerada baixa, da ordem de 3%. Devido a sua grande eficincia, o gs mostarda foi o agente qumico que mais causou baixas na Primeira Guerra Mundial, que o levou a ser chamado de Rei dos Gases. Estima-se que ao final da Primeira Guerra Mundial o nmero de vtimas dos agentes qumicos foi cerca de 1,3 milho, sendo 100 mil mortos.16 A

denominao gs mostarda, s vezes utilizada de forma genrica, corretamente aplicada mostarda de enxofre destilada, isto porque na estrutura qumica apresentada, a mostarda tambm pode ser derivada do nitrognio ao invs do enxofre. Desde 1918 at a Segunda Guerra Mundial, vrios casos de uso de agentes qumicos nos mais diversos conflitos foram relatados, alguns de difcil comprovao. Os eventos documentados mais importantes foram o uso de gs mostarda na Etipia pela Itlia em 1936, gs mostarda e outros agentes na invaso da China pelo Japo a partir de 193714 e outros casos no comprovados nos conflitos da Espanha contra tribos locais no Marrocos e da Rssia contra tribos do Curdisto.10 Em 1925 foi assinado o Protocolo de Genebra que previa a proibio do uso, mas no a posse, de armas qumicas. O Protocolo s se aplicava aos pases signatrios e no continha a previso de sanes para quem o violasse. Alm disso, alguns pases no o assinaram, como os Estados Unidos, enquanto outros o fizeram com ressalvas. Apesar de bastante limitado, o Protocolo de Genebra foi o primeiro marco na luta pela proibio do uso de armas qumicas em nvel mundial. J durante a Segunda Guerra Mundial houve um retrocesso no uso, mas no no desenvolvimento, de agentes qumicos. Apenas um caso de uso de armas qumicas foi relatado na Segunda Guerra Mundial, sendo que o mesmo foi um incidente no planejado: em 1943, o porto de Bari, Itlia, sofreu um bombardeio alemo que atingiu o navio norte-americano SS John Harvey, ancorado com uma carga de 2.000 munies contendo um agente mostarda. O incndio decorrente formou vapores txicos que se espalharam pela cidade. No foi registrado o nmero de feridos civis, porm entre as tripulaes do navio atingido e os demais ancorados, 617 vtimas foram contabilizadas com 14% de mortalidade.10 Apesar de no terem sido efetivamente empregados durante a Segunda Guerra Mundial, foi nesta poca que se desenvolveram os mais potentes agentes qumicos, com toxicidade vrias vezes maior comparados com os j conhecidos e utilizados na Primeira Guerra Mundial: os organofosforados neurotxicos, conhecidos como agentes dos nervos e desenvolvidos pelos alemes.4 Grandes quantidades de agentes neurotxicos foram estocadas pela Alemanha durante este conflito mundial, especificamente entre 10.000 e 30.000 t destas substncias acondicionadas em munies. Com o final da Segunda Guerra Mundial surgiu o problema do que fazer com a gigantesca quantidade de agentes qumicos capturada pelos aliados. Estas substncias tiveram os mais diferentes destinos: incineradas, enterradas em minas inundadas, jogadas ao mar ou transportadas para bases de pesquisa aliadas. O lanamento de munies qumicas alems nas guas relativamente rasas do Mar Bltico gera consequncias ambientais at hoje.17 Durante o perodo da Guerra Fria, a pesquisa em armas qumicas continuou a ser realizada pelos pases da Organizao do Tratado do Atlntico Norte (OTAN) e do Pacto de Varsvia. Estes pases acumularam grandes estoques de munies qumicas. Especial ateno s armas qumicas era dada pela antiga Unio das Repblicas Socialistas Soviticas (URSS) no s na pesquisa, mas tambm na rea de defesa. As foras militares soviticas possuam um efetivo estimado de 50 a 100 mil homens especialistas em guerras qumica, biolgica e nuclear, sendo este o maior grupo deste gnero no mundo. Apesar de terem sido sintetizados na poca da Segunda Guerra Mundial, s em 1988 que se teve o primeiro relato confirmado do uso de um agente de guerra neurotxico: o agente sarin foi empregado contra os curdos pelo Iraque.18 Em 1994, um ataque terrorista pela seita Aum Shinrikyo em Matsumoto, no Japo, utilizou sarin contra civis e acarretou a morte de 7 pessoas com 200 intoxicados que precisaram de cuidados mdicos.19 Em 1995, um outro ataque terrorista

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com sarin pelo mesmo grupo no Japo, agora em Tquio, provocou 5.000 vtimas, sendo 12 fatais imediatamente e vrias outras ao longo de alguns anos.20-22 Em 1996, o governo dos Estados Unidos reconheceu que suas tropas poderiam ter sido expostas ao sarin durante a Guerra do Golfo, em 1991.23 Isto teria ocorrido durante a destruio de um depsito de armas qumicas em Khamisiyah, Iraque.24 Sob o pretexto da possvel existncia de depsitos de armas qumicas pelo governo de Sadam Houssein no Iraque, os Estados Unidos, apoiados pela Inglaterra, em desacordo com resolues da ONU, invadiram o Iraque em 2003. Esses fatos mostram que a utilizao desse tipo de arma continua a representar uma ameaa iminente segurana de qualquer pas, seja ela interna ou externa. Liderada pela Organizao para Proibio de Armas Qumicas (OPAQ), a Conveno de Proibio de Armas Qumicas (CPAQ), assinada em 1993 em Paris e em vigor desde 1997, probe o desenvolvimento, produo, estocagem e uso de armas qumicas bem como promove a eliminao de estoques existentes de tais armas.25 Porm at hoje existem vrios pases que no assinaram esse documento. O Brasil, por sua vez, assinou a conveno no dia da sua abertura, em 1993. Devido ao baixo custo e facilidade de manufatura, as armas qumicas passaram do interesse estritamente militar para o interesse de organizaes terroristas.5 Isto faz com que a defesa contra tais agentes, a chamada defesa contra guerra qumica, deixe de ser um objeto de preocupao essencialmente militar e se torne uma preocupao tambm do mbito civil. DEFESA QUMICA O principal objetivo da Defesa Qumica desenvolver sistemas que minimizem os efeitos txicos dos agentes qumicos, com um impacto mnimo na capacidade operacional da tropa exposta.26 Pode-se, ento, destacar trs nveis de defesa contra armas qumicas: deteco e/ou descontaminao da rea exposta ao agente txico, evitando contato indireto do mesmo com os indivduos; proteo individual e/ou coletiva para evitar o contato direto com o agente txico, caso seja necessrio entrar em uma rea exposta e, tratamento mdico especializado, caso haja contato com o agente txico. Estas atividades representam uma sobrecarga atividade operacional das tropas, onde a utilizao de equipamentos de proteo individual limita a operacionalidade em geral. O impacto psicolgico provocado pela perspectiva de exposio a um agente qumico letal faz com que o treinamento militar deva ser o mais detalhado e especializado possvel. Estudos mostram que a exposio aos agentes qumicos leva a uma srie de respostas psicolgicas que incluem perda de memria e concentrao, reaes esquizofrnicas e depresso.27 Em exerccios de treinamento, entre 10 a 20% dos participantes sofrem de ansiedade, pnico e claustrofobia em funo do uso de equipamentos de proteo. EXPOSIO27 Quando acontece a exposio ao agente txico, a substncia qumica deve vencer barreiras para atingir o sistema circulatrio. Este transporte pode ser facilitado por vrias caractersticas, especialmente a lipofilicidade, facilidade de gerao de sprays ou baixo ponto de ebulio. As formas de absoro dessas substncias se subdividem em: ingesto oral - agente pode ser absorvido por qualquer regio do sistema gastrointestinal, dependendo de fatores como tempo de reteno e pH, com maior probabilidade de absoro em reas especficas, especialmente no intestino delgado, que o principal rgo de absoro;

absoro por inalao respiratria, que a forma mais importante devido pequena barreira proporcionada pelas clulas pulmonares, o que permite uma eficiente troca de gases e partculas entre o meio externo e o sistema circulatrio. Outro importante fator o tamanho da partcula, que determina se ela ser retida nos clios ou chegar aos alvolos; absoro cutnea, que a mais resistente penetrao devido s clulas epiteliais, cujas membranas so mais espessas e contm queratina. A via cutnea impede a penetrao da maioria das substncias, com exceo das muito lipossolveis. Toxicodinmica A maioria das substncias txicas especfica, ou seja, interage com um s tipo de estrutura-alvo no organismo, sendo os alvos principais as protenas (enzimas, receptores, protenas de transporte, etc), os lipdios (membranas celulares) e cidos nucleicos. As enzimas catalisam as reaes biolgicas. O stio ativo o local da enzima onde a reao com um determinado substrato se processa. Uma substncia qumica pode dificultar o acesso do substrato ao stio, seja impedindo sua passagem ou reagindo ela mesma com o stio. A substncia tambm pode ligar-se enzima, provocando uma mudana de conformao que impea seu funcionamento. No caso de receptores, um processo bioqumico desencadeado pela interao com um ligante, como a liberao de um hormnio ou neurotransmissor. Molculas com o mesmo efeito do ligante natural so chamadas agonistas, caso contrrio, antagonistas. A hemoglobina do sangue tem uma afinidade ao monxido de carbono duzentas vezes maior do que ao oxignio, prejudicando assim o transporte do ltimo. Neste caso, o monxido um exemplo de antagonista. As membranas celulares so compostas por uma camada dupla fosfolipdica. Solventes orgnicos e gases muito lipossolveis dissolvem-se com facilidade nas membranas do sistema nervoso e outros rgos, alterando a estrutura e prejudicando a funo da membrana. Os nucleotdeos que compem o DNA so suscetveis aos ataques de substncias qumicas que interagem com os cidos nucleicos. O cido nitroso, por exemplo, pode remover um grupo amino de dois tipos de bases dos nucleotdeos; j o gs mostarda tem o poder de alquilar as bases. Quando a estrutura danificada do DNA no corrigida pelo organismo e ainda se reproduz, ocorrem mutaes que podem provocar o aparecimento de cncer. CLASSIFICAO A definio de agente qumico como qualquer substncia qumica empregada em funo de seus efeitos txicos diretos no homem, em animais ou plantas1 uma definio muito abrangente. Alm de incluir os agentes qumicos de alta toxicidade, inclui tambm os agentes de controle de distrbios urbanos (cloroacetofenona e lacrimognios, em geral), herbicidas e toxinas de origem biolgica. Para a Conveno de Proibio de Armas Qumicas (CPAQ), agentes controladores de distrbios urbanos e herbicidas no esto includos na lista de armas qumicas. J as toxinas de origem biolgica so melhor classificadas como armas biolgicas de guerra, sendo tratadas na Conveno de Toxina e Armas Biolgicas (BWTC), mas tambm includas na CPAQ. Militarmente, fumgenos e incendirios so tambm classificados como agentes qumicos de guerra, devido sua importncia ttica durante um combate.2 Os agentes qumicos de guerra podem ser classificados quanto ao seu emprego ttico, efeito fisiolgico e persistncia (Tabela 1). Os agentes neurotxicos, vesicantes, hemotxicos e sufocantes so causadores de baixas, enquanto que vomitivos e lacrimognios so classificados como inquietantes (conhecidos mais como

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agentes controladores de distrbio ou irritantes). Segundo o Exrcito Brasileiro, apenas os psicoqumicos so enquadrados como agentes incapacitantes.2 A linha que separa os agentes causadores de baixas e os incapacitantes tnue, pois em altas concentraes qualquer agente incapacitante pode causar baixas. Esta distino feita atravs da razo entre a dose incapacitante mdia (ID50) e a dose letal mdia (LD50). Caso esta razo seja inferior a 1/100 o agente considerado incapacitante. Lembra-se que a LD50 definida como a dose que leva morte 50% dos indivduos expostos, j a ID50 definida como a dose que incapacita ao combate 50% dos indivduos.
Tabela 1. Classificao dos agentes qumicos Classificao Emprego ttico Tipo causadores de baixas inquietantes incapacitantes Emprego fisiolgico neurotxicos vesicantes hemotxicos sufocantes vomitivos lacrimognios psicoqumicos Persistncia persistentes Descrio causam a morte ou leses permanentes causam irritao sensorial causam confuso mental atuam sobre o sistema nervoso causam queimaduras qumicas por contato interferem com o processo de respirao celular atuam sobre o sistema respiratrio causam irritao das vias areas superiores causam irritao s mucosas dos olhos atuam sobre as funes mentais persistem no ambiente por longos perodos

solo e na vegetao (podendo evaporar posteriormente, formando a chamada nuvem secundria), enquanto as gotas menores permanecem dispersas na atmosfera em forma de aerossis.27 AGENTES NEUROTXICOS Agentes de guerra10 O primeiro organofosforado (OP) a ser sintetizado foi o tetraetilpirofosfato (TEPP), em 1854. Apesar dos avanos subsequentes na qumica desses compostos, seu potencial txico no foi explorado at o sculo seguinte. No final da dcada de 30, um cientista alemo, Gerhard Schraeder, ao pesquisar inseticidas com base em uma estrutura organofosforada, chegou ao tabun (o-etil-N,N-dimetil-fosforamido-cianidato). Porm, devido sua alta letalidade para os mamferos, seu uso como inseticida foi descartado. Nesta mesma poca, Schraeder tambm sintetizou o o-isopropil- metil-fosfono-fluoridato, que mais tarde seria denominado sarin. A alta toxicidade desta substncia levou-a, da mesma forma que no caso do seu antecessor, a ter seu emprego como inseticida tambm descartado. No entanto, os militares alemes tiveram os interesses despertados para estas substncias como armas qumicas e iniciaram sua produo e acondicionamento em munies. Em 1944, Richard Kuhn sintetizou o o-pinacolil-metil-fosfono-fluoridato (soman). Ao final da Segunda Guerra Mundial, os alemes tinham grandes estoques dos agentes tabun e sarin. Foram estimados estoques entre 10.000 a 30.000 t de tabun e menores quantidades de sarin, todos destinados a uso militar. O soman no foi produzido em larga escala, j que sua descoberta ocorreu pouco antes do final da guerra. Apesar deste arsenal qumico e dos aliados no terem conhecimento dos antdotos contra tais agentes, os mesmos nunca chegaram a ser empregados pelos alemes. Aps o fim da guerra, a captura de munies, instalaes de produo e cientistas alemes pelos aliados, deu-se origem pesquisa nessa rea em outros pases. A OTAN atribuiu os seguintes cdigos de identificao aos agentes qumicos: GA (tabun), GB (sarin), GD (soman). No incio da dcada de 50, em funo de pesquisas sobre inseticidas, na Inglaterra foi sintetizada uma nova classe de neurotxicos, com destaque para o o-etil-S-[2-(di-isopropilamino)-etil]-metilfosfonotioato (VX - cdigo OTAN). Os quatro agentes, GA, GB, GD e VX (Figura 1), devido s suas caractersticas, foram padronizados para uso em munio qumica e estocados em grandes quantidades por vrios pases. Os maiores

No persistentes dispersam rapidamente

A persistncia tambm considerada um fator de classificao. A maioria dos agentes qumicos militares, incluindo os neurotxicos, lquida temperatura ambiente (apesar de serem conhecidos como gases de guerra) e sua volatilidade determina sua forma de emprego. Agentes muito volteis so considerados no persistentes, sendo este tipo de substncia empregada quando se quer ocupar uma rea logo aps ter ocorrido um ataque qumico. J os agentes persistentes so aqueles que apresentam uma baixa volatilidade e, dependendo das condies ambientais, podem permanecer depositados na forma lquida por longos perodos de tempo. Esta deposio inviabiliza o uso de uma determinada rea e contamina outras, uma vez que os resduos podem ser transportados para reas no contaminadas em calados, viaturas e vestimentas. O VX e as mostardas de enxofre so exemplos de agentes persistentes.5 EMPREGO Apesar do grande nmero de substncias txicas conhecidas, somente poucas so adequadas ao uso como agentes qumicos de guerra. Muitas delas foram empregadas, mas apenas algumas apresentam os requisitos blicos necessrios, a saber: alta toxicidade; estabilidade qumica; baixa corrosividade; resistncia ao calor liberado no processo de disperso; resistncia degradao por fatores externos (ambientais); baixo custo e fcil manufatura. O agente a ser usado e sua forma de emprego depender sempre do objetivo a ser atingido. O processo de disperso vaporizar parte do agente (nuvem primria) enquanto que o restante ser espalhado na forma de gotas. As gotas maiores caem, ficando depositadas no

Figura 1. Principais agentes neurotxicos: nomenclatura da OTAN, nome comum e estrutura qumica

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Defesa Qumica: histrico, classificao dos agentes de guerra e ao dos neurotxicos

Tabela 2. Propriedades fsicas dos agentes neurotxicos Propriedades Ponto de ebulio ( C)

o

GA 230 0,035 vapor (ar = 1) lquido (g/mL) (20 C)

o

GB 158 2,1 4,86 1,10 Miscvel

GD 198 0,34 6,3 1,01 2,1

VX 298 0,0004 9,2 1,013 3

Presso de vapor (mm Hg) (20 oC) Densidade Solubilidade em gua (%) (20 oC) Fonte: ref. 10

5,6 1,077 9,8

estoques foram mantidos pelos EUA (GB e VX) e a antiga URSS (GD e VX), sendo o GA (tabun) geralmente descartado pelas grandes potncias por ser o menos txico. Por outro lado, sua sntese mais simples o tornou atraente para pases menos avanados que queriam se iniciar na rea. Isto faz com que eles sejam os principais agentes neurotxicos estudados na pesquisa em Defesa Qumica. Alm deles, houve registros de um outro agente neurotxico, designado GF ou ciclo-sarin (o-ciclo-hexil-metil-fosfonofluoridato), muito similar ao predecessor sarin. Este agente teria sido descartado pelos Estados Unidos pela falta de interesse militar e teria sido supostamente fabricado pelo Iraque durante a Guerra do Golfo. O VR ou VX-russo (o-isobutil S-[2-(dietilamina)etil]-metil-fosfonotioato) seria um anlogo russo ao VX. Todas as estruturas citadas esto dispostas na Figura 1. Propriedades fsico-qumicas Todos os agentes qumicos so lquidos incolores temperatura ambiente, empregados na forma de aerossol a partir da arrebentao da munio que os possui ou por aspergimento. A srie G, devido sua moderada volatilidade, tem como sua principal rota de absoro a inalao, enquanto o VX, por ser um agente de menor volatilidade de carter persistente e sua absoro ocorre atravs de permeao da pele como a principal rota. Estas caractersticas podem ser vistas com mais clareza na Tabela 2, onde faz-se uma comparao de parmetros fsico-qumicos importantes para o emprego ttico, tais como ponto de ebulio, presso de vapor e densidade.10 Todos os agentes neurotxicos possuem um tomo de fsforo quiral, o que gera um par de ismeros ticos em propores iguais. O soman, por possuir tambm um carbono oticamente ativo no grupamento pinacolil, d origem a mais dois pares de enantimeros. Estes estereoismeros podem ou no diferirem entre eles na velocidade com que reagem com a AChE, no havendo uma regra pr-definida.28 O rompimento da ligao P-F por ataque nucleoflico rege a qumica do soman e do sarin. Para tal rompimento ocorrer, no so necessrias condies enrgicas. O processo se d em condies brandas e vrios nuclefilos cumprem este papel. Por outro lado, quando se envolve o grupamento ster, as reaes com nuclefilos ocorrem em condies mais extremas de pH e temperatura. Para o tabun e para o VX, a ruptura das ligaes do fsforo com os respectivos grupos de sada varia com os reagentes nucleoflicos e as condies de reao. A base da toxicidade dos agentes neurotxicos consiste no ataque nucleoflico pelo resduo serina do stio ativo da acetilcolinesterase, que provoca a ciso das ligaes P-X com o desprendimento dos grupos de sada (X).29 Toxicidade A Tabela 3 apresenta a toxicidade estimada dos agentes neurotxicos em seres humanos comparados aos do cianeto de hidrognio. Nesta tabela nota-se que a exposio letal mdia, LCt50, que

corresponde concentrao do agente no ar pelo tempo de exposio, muito menor do que a de um reagente considerado altamente txico, o cianeto de hidrognio, comumente usado na indstria qumica.10
Tabela 3. Toxicidade estimada dos agentes neurotxicos para seres humanos Agente Tabun (GA) Sarin (GB) Soman (GD) VX Cianeto de hidrognio Fonte: ref. 10 LCt50 (inalao) (mg min/m3) 400 100 50 10 2500-5000 LD50 (pele) (mg) 1000 1700 350 6-10 -

Agroqumicos Os organofosforados tambm constituem a classe de compostos mais empregada como agroqumicos. So produtos qumicos utilizados no meio rural para reduzir as perdas de produtividade causadas principalmente pelo ataque de pragas, doenas e plantas daninhas.30 Na Figura 2 destacam-se dois exemplos usuais destes compostos: o paraoxon (dietil-p-nitrofenil-fosfato) e o metil-paraoxon (dimetil-p-nitrofenil-fosfato). Ressalta-se que, apesar da grande similaridade das estruturas, a toxidez aos mamferos menor quando comparada aos agentes qumicos neurotxicos destinados ao uso militar.

Figura 2. Exemplos de organofosforados utilizados como agroqumicos

Estima-se que a exposio acidental a agroqumicos organofosforados seja de cerca de um milho de casos anuais, sendo a maior ocorrncia em pases subdesenvolvidos.12 Mesmo assim, s nos Estados Unidos, The American Association of Poison Control Centers National Incidence Report indica que vtimas de pesticidas em territrio norte-americano chegam a 80.000 anualmente, sendo que 3,9% devido a inseticidas.31 A taxa de mortalidade mundial pode chegar at a 25% das vtimas de exposio. Internacionalmente, o envenenamento por pesticidas organofosforados chega a ser a forma mais comum de sucidio em alguns pases como, por exemplo, no Sri Lanka.31,32 Um estudo realizado em Perth, oeste australiano, tomando como base os anos de 1987 a 1996, constatou que homens entre 30 e 50 anos eram mais propensos ao suicdio por organofosforados e, das 69 pessoas estudadas, 68 eram homens.33 Outro estudo revela que, em 190 casos de intoxicao aguda por organofosforados que deram entrada no Hospital Cvico de Ahmedabad, ndia, a faixa etria entre 21 e 30 anos abrangeu o maior

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nmero deles. A proporo homem:mulher desta pesquisa foi de 2,1:1. Do total dos casos, 67,4% tiveram a inteno de cometer suicdio, 16,8% resultaram de exposio ocupacional e somente 15,8% se deveram a envenenamento acidental.34 No Brasil, a ocorrncia de intoxicaes por pesticidas do grupo dos organofosforados continua alta, apesar de seu uso ter diminudo em relao dcada de 80. Os dados estatsticos dos Centros de Toxicologia de Belo Horizonte, Campinas, Florianpolis, Ribeiro Preto, Londrina e Maring mostram que de 495 casos de intoxicaes ocupacionais, cerca de 34,9% foram devidos a organofosforados; de 622 casos de tentativas de suicdio, 38,1% resultaram do uso de compostos deste grupo; de 38 casos de bitos, 44,7% foram devidos a organofosforados.35,36 A ACETILCOLINESTERASE E SEU MODO DE AO As colinesterases pertencem a uma famlia de hidrolases de serinas, que faz parte de uma famlia maior de alfa/beta (a/b) hidrolases.37,38 As colinesterases se dividem em acetilcolinesterases (AChE) e butirilcolinesterases (BuChE). Cada uma delas tem diferentes especificidades dos seus substratos, e o mesmo acontece com os organofosforados, seus inibidores.39 A BuChE sintetizada no fgado e encontrada no plasma sanguneo; sua funo ainda desconhecida. A AChE, por sua vez, tem uma importante funo no organismo dos mamferos e outras classes. Tem participao fundamental na transmisso dos impulsos nervosos na fibra colinrgica, sendo tambm encontrada em outras partes do sistema nervoso e em outros stios do organismo. Atualmente, j se encontram depositadas no Protein Data Bank as estruturas cristalogrficas de vrias espcies de AChE, inclusive a humana.40 A acetilcolinesterase a enzima responsvel pela hidrlise do neurotransmissor acetilcolina em colina e cido actico nas fibras colinrgicas do sistema nervoso. A acetilcolina responsvel pela transmisso do impulso nervoso atravs das sinapses at os receptores (nicotnicos e muscarnicos) e a transmisso se encerra no momento da hidrlise. As fibras colinrgicas so responsveis pela estimulao de vrios rgos do corpo e dos msculos voluntrios e o processo de intoxicao por agentes neuroqumicos ocorre no sistema nervoso central e perifrico. Caso a acetilcolina no seja hidrolisada, ocorrer um acmulo nos stios de transmisso colinrgica, o que levar superestimulao das estruturas enervadas. Os efeitos dessa acumulao so vrios, sendo os mais relevantes convulses, depresso respiratria, arritmia cardaca e fraqueza. A letalidade do processo deriva da parada respiratria central (depresso do centro respiratrio) ou perifrica (paralisia dos msculos respiratrios). Os organofosforados tm imensa afinidade com a enzima acetilcolinesterase, e uma vez ocorrida a reao, a enzima estar inibida e no conseguir desempenhar seu papel principal, que a hidrlise da acetilcolina. Estudos indicam que a sndrome colinrgica ocorre por volta de 50% de inibio da enzima e a morte a partir dos 90%.41,42 INIBIO A reao de inibio da AChE por organofosforados apresenta algumas diferenas primordiais quando comparada hidrlise da acetilcolina:43,44 menor influncia do grupo de sada e maior estabilidade da estrutura fosforilada da AChE inibida. Com tais caractersticas percebe-se que a estrutura inibida preferida pela enzima. A reao de inibio pode ser descrita em trs etapas:45 1) formao do complexo de Michaelis reversvel entre o agente e a enzima; 2) fosforilao e posterior inativao da enzima, atravs da substituio

nucleoflica do grupo de sada pela hidroxila do resduo serina do stio ativo; 3) perda do radical alquila (aging ou envelhecimento) pelo organofosforado.46 As etapas da reao de inibio esto descritas na Figura 3.

Figura 3. Mecanismo simplificado da inibio da AChE por organofosforados. Adaptada da ref. 43

Como mencionado, a alta estabilidade da estrutura fosforilada formada faz com que esses inibidores sejam confundidos como irreversveis quando comparados a outros agentes txicos, como carbamatos e piretroides. Porm, at a segunda etapa, a reao de reativao da enzima ainda ocorre espontaneamente, mesmo que de forma lenta para ter importncia clnica.45 A reao irreversvel a que ocorre na ltima etapa, o aging ou envelhecimento. Dentre os quatro neurotxicos citados, destaca-se nesta etapa o soman, com tempo de meia-vida de aproximadamente 2 min. Por esta razo, ele um dos desafios clnicos mais representativos.47 Em geral, para possuir uma grande atividade anti-ChE e alta toxicidade aos mamferos, o organofosforado deve ter a frmula geral descrita na Figura 4: 29

Figura 4. Estrutura geral de alguns organofosforados inibidores de AchE. Adaptada da ref. 26

Quando o grupo de sada X do tipo OR3, onde R3 alquila ou arila, a toxicidade aos mamferos diminui. Os agroqumicos organofosforados possuem este grupo, como pode ser visto na Figura 2. TRATAMENTO O tratamento mdico da intoxicao por agentes neurotxicos no campo de batalha se pauta na administrao de antdotos especficos que, geralmente, so empregados atravs de seringas autoinjetoras, administradas pela prpria vtima ou por companheiro prximo. Uma sequncia de drogas empregada na seguinte ordem, de acordo com a posologia descrita em diversas referncias sobre o assunto:10,27 Atropina: substncia anticolinrgica para diminuir os efeitos do acmulo de acetilcolina nas fibras colinrgicas (Figura 5). Diazepam: depressor do sistema nervoso central, agindo para conter os efeitos da sndrome colinrgica, evitando assim convulses e espasmos musculares (Figura 6).

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Figura 5. Atropina

tambm s eficaz com a administrao dos antdotos. Alm disto, tais mtodos esto mais voltados ao ambiente militar. Uma populao civil quanto exposta a um ataque qumico dificilmente ter acesso s tcnicas mais sofisticadas, estando limitada ao tratamento com uso dos antdotos. As oximas tambm so empregadas na reativao de colinesterases utilizadas em biossensores de deteco dos agentes qumicos,52 em equipamentos de descontaminao53 e, tambm, servindo de revestimento, junto uma matriz polimrica, para roupas de proteo.54 REATIVAO DA ACETILCOLINESTERASE Reagentes nucleoflicos adequados so capazes de se combinar com o grupo organofosforado ligado ao resduo serina do stio ativo da AChE inibida. Esta estrutura formada, reativador-OP-AChE, se decompe em dois produtos, um formado por reativador-OP e o outro a prpria AChE regenerada. Associando um grupo de amnia quaternrio, que favorece a reao devido a ligaes eletrostticas no stio ativo da AChE, a um grupo altamente nucleoflico, como as oximas, em 1955 chegou-se primeira oxima empregada como reativador da AChE, a 2-PAM.55,56 Estudos identificaram uma relao entre a capacidade de reativao e a acidez do grupo oxima. Reativadores em geral apresentam pKa entre 7,0 e 8,0. Esta dependncia explicada pelo fato que oximas cidas em excesso no seriam bons nuclefilos e oximas pouco cidas apresentariam uma pequena frao dissociada, que considerada a forma ativa.57,58 Na Tabela 4 encontram-se alguns reativadores e seus pKas.
Tabela 4. pKa de reativadores da AChE Reativador 2-PAM Estrutura pKa 7,68

Figura 6. Diazepam

Oxima: reativador da AChE. Devido rpida etapa de envelhecimento do complexo AChEsoman, cujo tempo de meia-vida de 2 min, estas oximas tm seu uso muito restrito contra este agente. Para se ter uma ideia, define-se como fator de proteo (FP) a razo entre as doses letais com e sem administrao dos antdotos. Para estudos em condies esperadas de um ataque real por agentes qumicos, se considera FP = 5 como um valor razovel. Para o soman, os antdotos atingem valores mximos de FP = 2.10 Novas linhas de pesquisa esto sendo desenvolvidas a cada dia na rea de defesa qumica. Tradicionalmente, os EUA e Israel so os pases que mais publicam pesquisas sobre esse assunto. Dentre estas linhas de pesquisa destacam-se:48 sntese de novos tipos de oximas, das quais se destacam as denominadas oximas de Hagedorn (H), que tm apresentado resultados melhores que os usuais para os casos de intoxicao por soman. Neste grupo, a oxima com maior nmero de descries na literatura a HI-6 (4-carbamoil-1-[({2-[(E)-(hidrxi-imino) metil]piridnio-1-il}metxi)metil]piridnio). Proteo da AChE atravs da pr-contaminao por inibidores reversveis do tipo carbamatos, por exemplo, a fisostigmina ((3aR,8aS)-1,3a,8-trimetil-1H,2H,3H,3aH,8H,8aH-pirrolo[2,3-b] indol-5-il-N-metilcarbamato) e piridostigmina (3-[(dimetilcarbamoil)xi]-1-metilpiridnio) (Figura 7).

TMB-4

7,78

Toxogonina

7,80

HI-6

7,28

Fonte: refs. 57 e 58

Estudos experimentais
Figura 7. Inibidores reversveis utilizados como pr-tratamento.

Utilizao de scavengers (ou sequestrantes), que seriam diferentes enzimas ou at mesmo a prpria AChE, cuja funo seria sequestrar o agente neurotxico antes que ele chegue AChE corporal. O problema desta metodologia a estequiometria 1:1 entre a AChE e o organofosforado, o que pode levar a um consumo proibitivo dos sequestrantes.49 Utilizao de anticorpos especficos. Apesar das novas tcnicas, a utilizao de antdotos ainda se faz necessria, em especial as substncias reativadoras, as oximas. No caso dos scavengers, as oximas so utilizadas como coadjuvantes para melhorar a estequiometria.50,51 A proteo pelos inibidores reversveis

A reao de reativao da AChE depende de vrios fatores: da oxima empregada; do inibidor em questo; da espcie na qual a AChE foi obtida e, em alguns casos, do stio de origem da AChE dentro de uma mesma espcie.59 Fora estes fatores, diferentes condies de reao (concentrao da oxima, concentrao do inibidor, frao da enzima inibida) levam a resultados diferentes, chegando ao ponto de inverter a ordem de eficincia dentro de um dado grupo de oximas.60 No se tm relatos de estudos em seres humanos e, apesar de vlidos, estudos com outras espcies so inconclusivos, devido grande variabilidade entre elas.61 Dados experimentais da reativao da TcAChE inibida por agentes de guerra in vitro59 podem ser encontrados na Tabela 5.

8 Tabela 5. Reativao da TcAChE por diferentes oximas in vitro (%) Tabun 2-PAM Toxogonina TMB-4 HI-6 Fonte: ref. 59 45 43 50 31 Sarin 23 12 18 12 Soman 4 19 18 35 VX 21 40 38 26

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agentes qumicos, os efeitos predominantes da gua e sabo so a remoo fsica e a diluio. Uma das mais importantes formas de descontaminao a clorao oxidativa dos agentes por substncias qumicas capazes de liberar cloro quando em soluo, por exemplo, hipoclorito. Quanto mais alcalino o pH, maior ser a quantidade de cloro livre em soluo. J a hidrlise alcalina dos organofosforados iniciada pelo ataque nucleoflico da hidroxila ao tomo de fsforo. Novamente o uso de hipoclorito em meio alcalino utlilizado para hidrolisar mostardas e VX. Para agentes da classe G lana-se mo de solues com dietanolamina e hidrxido de sdio.60 CONCLUSES

Estudos tericos O emprego de tcnicas de qumica computacional no estudo de questes relativas a agentes qumicos de guerra especialmente til como forma de reduzir a necessidade de manipulao destas substncias em laboratrio.62 Na rea especfica de proteo mdica contra a intoxicao por neurotxicos, os estudos tericos na rea de Defesa Qumica esto relacionados com a utilizao da modelagem molecular, sejam por mecnica molecular ou mecnica quntica, para se entender o efeito causado pelos organofosforados no stio ativo da AChE, assim como o efeito das diferentes oximas empregadas na desinibio. Os dados obtidos referentes s conformaes dos antdotos e aos mecanismos e cinticas dessas reaes permitem um melhor planejamento no desenvolvimento de antdotos novos e mais potentes contra a intoxicao por organofosforados. No Brasil, o estudo na rea de defesa qumica foi iniciado pelo Exrcito Brasileiro63 em meados da dcada de 90, sendo a pesquisa sobre agentes neurotxicos iniciada com o estudo conformacional por mtodos qunticos da molcula de 2-PAM e a construo de um modelo de stio ativo inibido pelos agentes.64 Na sequncia, foi realizado o estudo conformacional da molcula de HI-6 e o estudo da reao de reativao da AChE inibida por tabun, ambos utilizando tambm mtodos qunticos.65 Ainda na linha da modelagem, estudos por dinmica molecular indicaram que molculas neutras, ao invs dos sais de amnio quaternrio das oximas, teriam mais sucesso na desinibio da AChE. Isto se deve ao fato que, uma vez ocorrida a reativao, necessrio que o composto oxima-organofosforado abandone o stio ativo nucleoflico o mais rpido possvel, evitando a reversibilidade da reao.66 Em uma etapa posterior, novamente usando mtodos qunticos, outras substncias foram propostas como potenciais reativadores da AChE inibida, em vez das tradicionais oximas. Grupos nuclefilos como enolatos, peroxilatos, sulfenatos e hidrazonatos foram estudados.67 Apesar do esforo para se buscar alternativas mais eficientes do que as oximas, elas at hoje continuam sendo o principal alvo da qumica computacional.68,69 Seguindo por outro caminho fora do estudo especfico da reao de reativao, modelos qunticos tambm so utilizados para estudar a degradao de agentes de guerra neurotxicos quando adsorvidos por bases de metais alcalino-terrosos.70,71 DESCONTAMINAO Os mtodos de descontaminao seguem trs mecanismos, basicamente: lavagem com gua e sabo, oxidao ou hidrlise bsica. A hidrlise cida negligvel. As mostardas e o VX possuem tomos de enxofre que so facilmente oxidados. Por outro lado, os agentes neurotxicos da srie G possuem tomos de fsforo em ligaes tipo fosfato que so hidrolisados em meio bsico. Tanto a gua doce quanto a gua salgada removem os contaminantes pela ao mecnica e atravs da hidrlise lenta. Entretanto, dada a baixa solubilidade e a baixa taxa de hidrlise da maioria dos

Este trabalho apresentou uma rea da qumica at hoje restrita a poucos pases, a Defesa Qumica. Apesar do crescimento de novas linhas de pesquisa nessa rea, os dados disponveis na literatura cientfica so poucos devido ao carter sensvel do assunto. Alm disso, a maior parte dos dados teis se encontra em estudos da rea mdica, e no em bibliografia militar. Novas tecnologias para fabricao de agentes de querra qumica como, por exemplo, a utilizao de microrreatores de operao contnua controlados por computadores72 mostra a importncia da continuidade nos estudos. No Brasil, a atuao nesta rea iniciou-se com o Exrcito Brasileiro na dcada de 90. Alm disso, este assunto encontra ligao direta com estudos de novos antdotos para casos de intoxicao devido aos agroqumicos. Atualmente, grupos ligados a este tema no Exrcito Brasileiro trabalham em parcerias com outras universidades e institutos. Um dos exemplos a parceria do Grupo de Qumica Medicinal do Instituto Militar de Engenharia com o Instituto Nacional de Cincia e Tecnologia de Biologia Estrutural e Bioimagem (INBEB) e do Grupo de Fsico-qumica Terica e Computacional do Instituto Militar de Engenharia com o Grupo de Fsico-qumica de Slidos e Interfaces da Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF). REFERNCIAS
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