ENCAPSULACIN DE CIDOS NUCLEICOS EN LIPOSOMAS

Extensin natural de su aplicacin como sistema de liberacin controlada de drogas. Eficiencia de encapsulacin de ADN es mucho menor que otras biomoleculas. Disminucin del tamao del ADN facilita su internalizacin. Sin embargo el compactamiento debe ser reversible. El ADN unido a protenas o compuestos orgnicos es competente para su transfeccin.

 No todos los polielectrolitos cationicos son apropiados para condensar el ADN.

Complejo con histonas Asociacin con lisozimas a pH fisiolgico, incremento de 100 veces eficiencia de transfeccin . Condensado con protenas de bacterifagos.

Desventajas de encapsulamiento de ADN con lizosimas:

Limitada al uso de especies lipidias cargadas negativamente, limita aplicacin in vivo. Inconveniente en reducida interaccin con las membranas celulares , incapacidad de ingresar al citosol.

Se intentan realizar modificaciones qumicas para superar el problema. Encapsulamiento para aplicacin in vivo: liposomas sensibles a pH que liberan su contenido de respuesta a un pH bajo. DOPE y acido oleico o hemisuccinato de colesterol. Su cabeza hidrofbica desestabiliza la membrana en medios cidos.

COMPLEJACIN DE CIDOS NUCLEICOS EN LIPOPLEX

El lipoplex se forma por interacciones electroestticas entre las cabezas de los lpidos y las cargas negativas de los cidos nucleicos. Solucin liposomal en contacto con ADN, la energa liberada en la interaccin es muy elevada, esta se use en reordenamiento de las bicapas que conducen su formacin. Heterogneos en tamao y forma:
Relacin lpido cationico/ADN Relacin de cargas Concentracin Estructuras lipidicas Mtodos de preparacin.

 Baja fuerza inica de las soluciones empleadas en la preparacin maximizan la interaccin, mientras que una fuerza inica mayor contribuye a desestabilidad en el complejo. Lpidos comunes en terapias gnicas:
DOTMA DOSPA DOTAP Tfx-50 DOSPER DOGS DDAB; TM Y TPS DMRIE DLRIE OTRAS DERIVADAS DEL COLESTEROL

LIPOPLEX: COMPLEJOS LIPOSOMAS-CATIONES-ADN

Dificultades asociadas a la administracin in vivo de lipoplex:
Forman partculas grandes y heterogneas Se une inespecficamente a componentes sricos negativos. Son rpidamente destruidos por el sistema mononuclear fagocitario.

Pobre condensacin del ADN con lpidos cationicos, se agrega un polication de eleva densidad de carga; L-lipolilisina o protaminas. Se forma un vector autoensamblado mas compacto que el lipoplex denominado lipopoliplex. Las protaminas se cree que poseen seales de localizacin de nuclear que facilitan la entrada de genes al ncleo desde el citoplasma

VECTORES LIPIDICOS Y OLIGONUCLEOTIDOS: UNA PERSPERCTIVA DIFERENTE

La captacin de ON antisentidos es pobre y en forma de lipoplex o en liposomas la captura celular se incrementa. La generacin de lipoplex es dificultosa ya que los ON son no forman estructuras ordenadas, no pueden condensarse y no tienen rigidez. Encapsulamiento en liposomas aun no ha podido llevarse con eficiencia, dada su extrema hidrofilicidad y carcter acido. Ofrecen las siguientes ventajas:
Pocos ON antisentido son suficientes para ofrecer actividad teraputica Cantidad reducida de ON para bloquear eficientemente la expresin de un gen

 Los complejos cationicos parecen ser mejores para proveer una liberacin intracelular de ON antisentido, al menos in vivo. Probablemente estos complejos son captados por endocitosis y este camino se interrumpa permitiendo la liberacin intracitoplasmtica del material y que luego se transporta al interior del ncleo.

Estabilidad de liposomas y lipoplex in vivo

Parmetros tiles para caracterizar formulaciones liposomales o complejos lipdicos:
Porcentaje de carga Eficiencia de carga o porcentaje de encapsulacin Liberacin o cantidad de agente liberado de las partculas transportadoras que induzcan perdida o liberacin controlada .

Para administracin endovenosa se requiere un alto porcentaje de carga y una alta tasa de liberacin en el sitio blanco. Si se disean adecuadamente retienen el material gentico encapsulado in vivo y puede regularse la tasa de liberacin a la vez que se le protege mecnica y fisicoqumicamente. Los lipoplex extremadamente inestables en plasma