LABORATORIO N 3 COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS EN 24 HORAS

ANDREA CECILIA ALVAREZ GRANADOS 09171046

UNIVERSIDAD DE SANTANDER BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CUCUTA-2013

LABORATORIO N 3 COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS EN 24 HORAS LABORATORIO N 3 COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS EN 24 HORAS

1. Realice un glosario de los trminos ms importantes encontrados en el estudio de los Compuestos Nitrogenados no Proteicos Intermediarios metablicos. R/: NITROGENO: es un elemento qumico, de nmero atmico 7, smbolo N y que en condiciones normales forma un gas diatmico (nitrgeno diatmico o molecular) que constituye del orden del 78% del aire atmosfrico. En ocasiones es llamado zoe antiguamente se us tambin Az como smbolo del nitrgeno. NITROGENO UREICO: es la cantidad de nitrgeno circulando en forma de urea en el torrente sanguneo. La urea es una sustancia secretada a nivel del hgado, producto del metabolismo proteico, a su vez, es eliminada a travs de los riones UREA: La urea es un compuesto qumico cristalino e incoloro; de frmula CO (NH2)2. Se encuentra abundantemente en la orina y en la materia fecal. Es el principal producto terminal del metabolismo de protenas en el hombre y en los dems mamferos. La orina humana contiene unos 20g por litro, y un adulto elimina de 25 a 39g diariamente. AMONIACO: El amonaco (NH4+) es producido por clulas que se encuentran en todo el cuerpo, especialmente en los intestinos, hgado y los riones. En los riones, el NH4+ juega un papel menor en el equilibrio cido-bsico, pero por lo dems es un residuo metablico (principalmente el resultado del metabolismo de protenas). La mayor parte del amonaco que el organismo produce es utilizado por el hgado en la produccin de urea. sta tambin es un residuo, pero es mucho menos txico que el amonaco. El amonaco es especialmente txico para el cerebro aun en concentraciones 100 veces menor que las concentraciones normales de urea El amonaco es especialmente txico para el cerebro y puede producir confusin, letargo y en algunas ocasiones coma. AMINOACIDO: Un aminocido es una molcula orgnica con un grupo amino (NH2) y un grupo carboxilo (-COOH). Los aminocidos ms frecuentes y de mayor inters son aquellos que forman parte de las protenas. Dos aminocidos se combinan en una reaccin de condensacin entre el grupo amino de uno y el carboxilo del otro, liberndose una molcula de agua y formando un enlace amida que se denomina enlace peptdico; estos dos "residuos" de aminocido forman un dipptido. Si se une un tercer aminocido se forma un tripptido y as,

sucesivamente, hasta formar un polipptido. Esta reaccin tiene lugar de manera natural dentro de las clulas, en los ribosomas. PROTEINAS: Las protenas son molculas formadas por cadenas lineales de aminocidos.as protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las biomolculas ms verstiles y ms diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan: Estructural. Esta es la funcin ms importante de una protena (Ej: colgeno),Inmunolgica (anticuerpos),Enzimtica (Ej: sacarasa y pepsina),Contrctil (actina y miosina), Homeosttica: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actan como un tampn qumico),Transduccin de seales (Ej: rodopsina) Y Protectora o defensiva (Ej: trombina y fibringeno). TRANSAMINACION: La primera es la reaccin entre un aminocido y un alfacetocido, en la que el grupo amino es transferido de aquel a ste, con la consiguiente conversin del aminocido en su correspondiente alfa-cetocido. Despus de la formacin de glutamato, ste transfiere su grupo amino directamente a una variedad de alfa-cetocidos por varias reacciones reversibles de transaminacin: donacin libremente reversible de un grupo amino alfa de un aminocido al grupo ceto alfa de un alfa-cetocido, acompaado de la formacin de un nuevo aminocido y un nuevo alfa-cetocido. Un ejemplo importante de transaminacin se presenta entre glutamato y oxaloacetato, que produce alfacetoglutarato y aspartato, el que puede transferir su grupo amino a otros alfacetocidos para formar aminocidos diferentes por reacciones de transaminacin. DESAMINACION OXIDATIVA: La desaminacin oxidativa es una reaccin qumica que se caracteriza por la ruptura de un grupo amino. Esta reaccin es muy importante a nivel biolgico en la degradacin de los aminocidos.El glutamato es desaminado oxidativamente en la mitocondria por la glutamato deshidrogenasa, la nica enzima conocida que al menos en algunos organismos, puede trabajar con NAD+ o NADP+ como coenzima redox. Se piensa que la oxidacin ocurre con la transferencia de un ion hidruro del carbono a del glutamato al NAD(P)+ formando a-iminoglutarato el cual es hidrolizado a a-cetoglutarato y amonio. CICLO DE LA UREA: El ciclo de urea es un proceso en el cual los desechos (amonaco) son eliminados del cuerpo. Cuando uno consume protenas, el cuerpo las descompone en aminocidos. El amonaco se produce a partir de los aminocidos sobrantes y se tiene que eliminar del cuerpo.El hgado produce varios qumicos (enzimas) que convierten el amonaco en una forma llamada urea, que el cuerpo puede eliminar en la orina. Si este proceso se altera, los niveles de amonaco empiezan a elevarse. ACIDO URICO: Es un qumico creado cuando el cuerpo descompone sustancias llamadas purinas, las cuales se encuentran en algunos alimentos y bebidas, como el hgado, las anchoas, la caballa, las judas y arvejas secas, y la cerveza. PURINAS: La purina es una base nitrogenada, un compuesto orgnico heterocclico aromtico. La estructura de la purina est compuesta por dos anillos fusionados, uno de seis tomos y el otro de cinco. En total estos anillos presentan cuatro nitrgenos, tres de estos son bsicos, ya que tienen el par de electrones sin

compartir en orbitales sp2 en el plano del anillo, el nitrgeno restante no tiene carcter bsico ya que el par de electrones no compartidos que posee, es parte del sistema de electrones del sistema aromtico, por lo cual se encuentran deslocalizados e incapaces de captar un protn. FOSFATO DE CREATINA: Fosfocreatina, tambin conocido como creatina fosfato o PCr, es una molcula de creatina fosfolizada la cual es una importante almacenadora de energa en el msculo esqueltico. Es usado para generar, de forma anaerbica, ATP del ADP, formando creatina para los 2 o 7 segundos seguidos de un intenso esfuerzo. Hace eso al donar un grupo fosfato, y esta reaccin es catalizada por creatinquinasa (la presencia de creatinquinasa en el plasma es un indicador de tejido daado y es usado en el diagnostico de un infarto del miocardio. Esta reaccin es reversible y por tanto acta como un espacio y amortiguador temporal de la concentracin de ATP. En otras palabras, la fosfocreatina es parte de un par de reacciones; la energa que se libera en una reaccin es usada para regenerar otro compuesto siendo el ATP. La fosfocreatina juega un papel particularmente importante en tejidos que tienen una alta y fluctuante demanda de energa como el cerebro o el msculo. CREATINA: La creatina (tambin denominada -metilguanido-actico y frecuentemente abreviado en la literatura como Cr) es un cido orgnico nitrogenado que se encuentra en los msculos y clulas nerviosas de algunos organismos vivos. Es un derivado de los aminocidos muy parecido a ellos en cuanto a su estructura molecular. Se sintetiza de forma natural en el hgado, el pncreas y en los riones a partir de aminocidos como la arginina, la glicina y la metionina a razn de un gramo de creatina por da.1 Constituye la fuente inmediata y directa para regenerar ATP y proveer de energa a las clulas musculares. DEPURACION ENDOGENA DE LA CREATININA:El examen de depuracin de creatinina compara el nivel de creatinina en la orina con su nivel en la sangre. (La creatinina es un producto de la descomposicin de la creatina, que es una parte importante del msculo.) El examen ayuda a suministrar informacin sobre la funcin renal. 2. Elaborar un Cuadro diferencias y semejanzas entre estos Compuestos, con referencia a la determinacin en el laboratorio, utilidad clnica, y otras. R/:

COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS

DETERMINACION EN EL LABORATORIO
El cido rico es oxidado por la enzima especfica uricasa generndose alantona y H2O2, el cual en una reaccin mediada por la enzima peroxidasa (POD), reacciona con el cido 3,5-Dicloro-2HidroxiBencensulfnico y 4-AAP producindose un compuesto coloreado con un mximo de absorcin a 505nm., en cantidad proporcional a la cantidad de cido rico presente en la muestra. Se puede analizar en sangre y orina de 24 H.

UTILIDADCLINICA
Este examen se puede hacer para diagnosticar la causa de clculos renales. Tambin se puede hacer para vigilar a personas con gota, ya que muchos de estos pacientes desarrollan clculos renales por cido rico.

OTROS
Los valores normales van desde 250 a 750 miligramos por 24 horas. Usted no debe comer ni beber nada durante cuatro horas antes del examen, a menos que le hayan indicado algo diferente. El mdico tambin puede pedirle que deje de tomar cualquier frmaco que pueda afectar los resultados del examen, pero NUNCA suspenda ningn medicamento sin consultarlo con l.

ACIDO URICO

CREATININA

La reaccin qumica de Jaff no es especfica para la creatinina. Tambin reacciona principalmente con las protenas, bilirrubina y hemoglobina. Es por esta razn que la muestra debe ser desproteinizada al mismo tiempo que se diluye. Suero desproteinizado + cido Pcrico Picrato de creatinina (formador de picrato) (cromgeno naranja a = 50 Se hace en sangre y orina para hacer la depuracin endgena de la creatinina.

NITROGENO UREICO (BUN)

Basado en el siguiente esquema reaccionante: Urease

Este examen se realiza para ver qu tan bien funcionan los riones. La creatinina es eliminada del cuerpo completamente por los riones. Si la funcin renal es anormal, los niveles de creatinina se incrementarn en la sangre, debido a que se elimina menos creatinina a travs de la orina.. El examen de nitrgeno ureico en sangre (BUN) con frecuencia se hace para evaluar la funcin renal.

Un resultado normal es de 0.7 a 1.3 mg/dL para los hombres y de 0.6 a 1.1 mg/dL para las mujeres. Las mujeres generalmente tienen niveles de creatinina ms bajos que los hombres, debido a que ellas normalmente tienen menor masa muscular.

El resultado normal generalmente es de 6 a 20 mg/dL Una elevacin de la concentracin srica de urea, se interpreta generalmente como una posible disfuncin renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valores sricos de urea se encuentran ntimamente relacionados con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier alteracin en estas variables se traducir en un cambio de la concentracin de urea en suero.

3. Elabore un resumen que evidencie su conocimiento acerca del tema en general. R/: ACIDO URICO El cido rico es un compuesto orgnico de carbono, nitrgeno, oxgeno e hidrgeno. Es un producto de desecho del metabolismo de nitrgeno en el cuerpo humano (el producto de desecho principal es la urea), y se encuentra en la orina en pequeas cantidades. En algunos animales, como aves, reptiles y muchos artrpodos, es el principal producto de desecho, y se expulsa con las heces; los animales que excretan mayoritariamente cido rico se denominan uricotlicos. En la sangre humana, la concentracin de cido rico comprendida entre 2,5 a 6 para la mujer y hasta 7,2 para el hombre mg/dl es considerada normal por la Asociacin Mdica Americana, aunque se pueden encontrar niveles ms bajos en los vegetarianos. La gota en el ser humano est asociada con niveles anormales de cido rico en el sistema. La saturacin de cido rico en la sangre humana puede dar lugar a un tipo de clculos renales (litiasis) cuando el cido cristaliza en el rin. Un porcentaje considerable de enfermos de gota llegan a tener clculos renales de tipo rico. El aumento de los niveles de cido rico en la sangre no slo puede estar relacionado con la gota, sino que puede ser simplemente una hiperuricemia, que presenta algunos de los sntomas anteriores o puede ser asintomtica. Sin embargo cuanto mayor es el aumento de cido rico en sangre mayores son las posibilidades de padecer afecciones renales, artrticas, etc. CREATININA La creatinina (anhdrido de la creatina) es uncompuesto orgnicode desecho, generado a partir de ladegradacin de lacreatina(que es un nutriente til para losmsculos). Es producida por el cuerpo enuna tasa muy constante (dependiendo de la masa y funcin muscular), normalmente filtrada por losrionesy excretada en laorina La Creatinina es un producto de desecho que se forma en el msculo por la degradacin de la fosfo-creatina, en cantidad proporcional a la masa y funcin muscular. La Creatinina es eliminada delorganismo por va renal, siendo retirada del plasma por filtracin glomerular. Su medicin es til en eldiagnstico de diversas nefropatas, y su control permanente es de gran utilidad en aquellos pacientesque requieren de dilisis. La DEPURACION ENDOGENA DE LA CREATININA compara el nivel de creatinina en la orina con su nivel en la sangre.El examen ayuda a suministrar informacin sobre la funcin renal.

Esta prueba se utiliza para valorar la funcin renal en individuos debilitados, para vigilar larespuesta al tratamiento y la progresin de muchas enfermedades renales para ajustar la dosis demedicamentos Los estados tempranos de la enfermedad renal crnica son silenciosos, y solamente pueden ser detectados por los exmenes de laboratorio. La evaluacin de la enfermedad renal crnica depende delnivel actual de la funcin renal. La velocidad de filtracin glomerular es considerada la prueba standardde oro para identificar el nivel de funcin renal tanto en individuos sanos como afectados LA DEPURACION DE CREATININA DISMINUYE EN: Alteraciones de la funcin renal, enfermedades renales intrnsecas, glomerulonefritis, pelonefritis, sndrome nefrtico, disfuncin tubular aguda, amiloidosis. Choque Hemorragia Insuficiencia cardiaca congestiva Insuficiencia heptica LA DEPURACION DE CREATININA SE LEVA EN: Gasto cardiaco elevado Embarazo Quemaduras Intoxicacin por monxido de carbono LA CREATININA URIANRIA SE LEVA EN: Acromegalia Gigantismo Diabetes sacarina Hipotiroidismo LA CREATININA URIANRIA DISMINUYE EN: Hipertiroidismo Anemia Distrofia muscular Poliomiositis, atrofia neurognica Enfermedad vascular inflamatoria muscular Nefropatia avanzada, estenosis renal Leucemia

NITROGENO UREICO El nitrgeno ureico mide la cantidad de nitrgeno contenido en la urea. La urea es un producto de deshecho principalmente del metabolismo de las protenas. La urea, que es formada en el hgado, es llevada por la sangre a los riones quienes la expulsan en la orina. Por esta razn la medicin del nitrgeno ureico se usa para valorar el funcionamiento de los riones. Si por algn motivo los riones no son capaces de excretar, el nitrgeno ureico comienza a acumularse en la sangre (sus niveles aumentan). El nitrgeno ureico, a diferencia de la creatinina, si es influenciado por varios factores. Problemas cardacos, la deshidratacin y una dieta con alto contenido de protenas pueden elevar falsamente el resultado de la medicin del nitrgeno ureico. No obstante, el nitrgeno ureico tiene una ventaja: puede ayudar a detectar un dao renal ms tempranamente que la creatinina. Es por eso que corrientemente, junto al anlisis de nitrgeno ureico, se solicita el de creatinina. Ambos en conjunto componen lo que se conoce en el laboratorio clnico como funcin renal. La causa ms comn para un BUN elevado, azotemia, es una disminucin en la funcin renal, aunque en ese sentido, los niveles elevados de creatinina son ms especficos para evaluar la funcin renal. Un BUN muy elevado (>60mg/dl) generalmente indica un dao moderado-severo en la funcin renal. La disminucin en la excrecin renal de urea, puede deberse a condiciones temporales como deshidratacin o shock, o tambin puede tener un carcter agudo o crnico segn la enfermedad de trasfondo. Un BUN elevado con valores normales de la creatinina puede ser el reflejo de una respuesta fisiolgica a la disminucin del flujo sanguneo hacia los riones ( como en aquellos casos en donde existe una baja de presin, deshidratacin o falla cardiaca) sin que esto signifique un dao orgnico en los riones. El aumento en la produccin de urea es visto en casos de sangramiento a nivel del tracto gastrointestinal ( por ejemplo en las lceras). Los compuestos nitrogenados de la sangre son reabsorbidos por el resto del tracto digestivo, llegando al hgado y aumentando la produccin de urea. El aumento del metabolismo de las protenas tambin puede aumentar la produccin de urea, como se puede observar en dietas hiperproticas, uso de esteroides, quemados o personas afiebradas Cuando la relacin del BUN/CREA es mayor a 20, se debe sospechar que el paciente tiene una falla prerenal, llevando el anlisis a las posibles causas de la disminucin del flujo hacia los riones. 4. Describa a travs de un diagrama de flujo como se realiza el procedimiento para la determinacin en el laboratorio de BUN/UREA, Creatinina y cido rico. R/:

DETERMINACION DE BUN/UREA
Tomar 5 tubos y marcarlos como Bl, St, Mx,CN y CP.

DETERMINACION BUN 24 HORAS

Se mide el volumen de la orina del paciente y se toman 15 ml en un tubo

Agregar a los 5 tubos 25l de ureasa

Se hace una dilucion a la orina segun la densidad 1005-1015: 1/10 1016-1020: 1/20 Mayor 1020: 1/40

Adicionar 10 l de Standar al tubo St, 10 l del suero dle paciente al tubo Mx y 10 l de CN y 10 L CP

Mezclar y dejar 5 min a 37C y ahi mismo agregar 0.5 cc de reactivo 1 y reactivo 2.

Se toman 4 tubos. Bl. St, Mx dil y Bl Mx diluida.

mezclar por inversion y dejar 5 minutos a 37 C y agregar 5 cc de agua destilada.

Agregar 25l de ureasa a los 4 tubos, adicionar 10l de Standar al tubo St y 10 l de la Mx orina diluida al tubo Mx diluida.

sacar del bao, mezclar por inversion y dejar 10 min a T amnb.

Leer a 540 nm contra blanco reactivo por absorbancia y realizar calculos.

Mezclar y dejar 5 min a 37C y agregar 0.5 cc reactivo 1 a todos los tubos; 10 l de Mx orina diluida al Bl Mx diluida y 0.5 cc reactivo 2

mezclar y dejar 5 min a 37C y agregar 5 cc de agua destilada.

mezclar y sacar del bao. Dejar 10min a T amb y leer a 540 nm.

DETERMINACION CREATININA
Prepara el picrato alcalino 1 parte de NaOH + 4 parte Acido picrico.

DETERMINACION ACIDO URICO EN 24 H.

Mide volumen d eorina se saca una alicuota

Diluir la orina 1/50 diluir orina 1/11 con agua destilada. Tomar 4 cubetas una Bl, St, Mx 1 y Mx 2. Agregar a las 4 un ml del reactivo preparado.

Tomar 3 tubos Bl, St, Mx orina diluida.

Agregar 100l del standar al tubo St, 100l Mx suero y 100l de la Mx orina diluida.

Agregar 1 cc reactivo enzimatico a los 3 tubos, 20l St y 20l de la orina diluida.

Leer a 505 nm por canal. Mezclar y dejar 5 min a 37C y leer a 505 nm por canal.

DETERMINACION ACIDO URICO

Tomar 4 tubos Bl, St,Mx,CN y CP.

Agregar 1 ml de reactivo enzimatico a los 4 tubos,20l de St, 20l Mx suero,20l de CN y 20l CP.

Mezclar y dejar 5 min a 37C y leer a 505 nm contra Blanco reactibo por canal.

5. Construya un mapa Conceptual que explique claramente la formacin de estos Intermediarios metablicos R/:
FORMACION DE COMPUETSOS NITROGENADOS NO PROTEICOS

Hidrolisis de acidos nucleicos a mononucleotidos

Inicio de la biosintesis: Carbomoil fosfato sintetasa I

Fosfato de creatina

Mononucleotidos degradados a nucleotidos

Formacion de citrulina

Convierte en energia ATP

Desaminacion adenosin

Formacion de argininosuccinato

Degradarse

Nucleosido fosforilasa actua en la inosina

Formacion de arginina y fumarato

CREATINA

hipoxantina y guanina forma xantina

Formacion de ornitina

ACIDO URICO

UREA

6. Elabore un grfico que explique La Azoemias Prerrenal, Renal y Posrenal R/:

-causada

AZOEMIA PRERRENAL

por una disminucin del volumen expulsivo cardiaco. -La relacin BUN: Crea es superior a 20.

I.F.G Disminuido y BUN y CREATININA Aumentado

-Causas

AZOEMIA RENAL

falla glomerulonefritis, tubular aguda, y otros.

renal, necrosis

AZOEMIAS

-La relacin BUN: Crea es inferior a 10.

Causada por anormalidades congnitas como reflujo vsicoureteral, bloqueo de los urteres por clculos renales.
-

AZOEMIA POSRENAL

-La relacin BUN:Cr en la azotemia posrenal es normal en el rango de 10-20.

7. Identifique las Patologas que se asocian con el estudio de los Compuestos nitrogenados No Proteicos. R/: Algunas patologas asociadas a los compuestos nitrogenados no proteicos son: Insuficiencia renal Shock Obstruccin de las vas urinarias Dao o enfermedad graves en los riones Clculo renal Insuficiencia cardaca Deshidratacin Prdida excesiva de sangre que causa choque Gota o afecciones musculares (gigantismo, acromegalia, distrofia muscular y polimiositis) Insuficiencia cardaca congestiva Niveles excesivos de protenas en el tubo digestivo Sangrado gastrointestinal Hipovolemia Ataque cardaco Glomerulonefritis, pielonefritis y necrosis tubular aguda

8. Elabore un Caso Clnico que permita explicar la Correlacin clnico patolgica de estos compuestos. R/: Paciente de 22 aos de edad, residente en Cuero y Salado, Atlntida, con embarazo de 25 semanas de gestacin y antecedente de nefrectoma, quien fue trasladada al Hospital Escuela por presentar sndrome anmico y cardiopata hiperquintica secundaria. Fue Manejada con la transfusin de dos unidades de sangre completa previo a su traslado. Fue recibida en Emergencia de Obstetricia del Hospital Materno Infantil, Tegucigalpa. Se le pidieron exmenes de laboratorio los cuales reportaron hematocrito de 21%, hemoglobina de 6.8 g/dL, cido rico de 12.1 mg/dL nitrgeno ureico de 95 mg/dL y creatinina de 9.4 mg/dL, por lo que fue presentada al Servicio de Nefrologa como un caso de insuficiencia renal quienes indicaron ultrasonido abdominal, el cual report hidronefrosis, esplenomegalia, hipertensin portal y nefromegalia. Se le indic eritropoyetina 4000 unidades subcutnea dos veces por semana, se le coloc catter de hemodilisis la cual se realiz tres veces a la semana. La paciente fue manejada de esta forma por nueve semanas logrando disminuir el nitrgeno ureico a 14 mg/dL y la

creatinina hasta 1.2 mg/dL, por lo que se retir el catter de hemodilisis. A las 34 semanas de gestacin se le realiz ultrasonido obsttrico que report placenta posterior grado II, ndice de lquido amnitico normal, peso estimado fetal de 2443 gramos y edad gestacional de 34 semanas por biometra. La evaluacin de bienestar fetal se hizo a travs de la prueba sin estrs (NST) la cual fue reactiva. En base a estos hallazgos y de acuerdo al plan completar el embarazo a 34 semanas, se decidi interrumpir el mismo por va vaginal con oxitocina (ya que paciente tenia puntaje de Bishop mayor de seis). No hubo respuesta a la oxitocina por lo que se realiz cesrea y naci producto de 2260 gramos con APGAR de 8 y 8 al primer y quinto minuto respectivamente y 36 semanas por examen fsico. Madre e hijo evolucionaron satisfactoriamente y fueron dados de alta a los cinco das postcesarea, la paciente se fue con niveles de nitrgeno ureico de 18 mg/dL y creatinina de 2.6 mg/dL. Actualmente la madre es manejada por el servicio de Nefrologa del Hospital Escuela, y se mantiene clnica y laboratorialmente compensada 9. Investigue que innovaciones, avances que se han presentado en el estudio de estos Compuestos. R/: AVANCES EN LA INVESTIGACIN DE LA ENFERMEDAD RENAL CRNICA En los ltimos aos, a raz de la publicacin de las Guas KDOQI (Kidney Disease Outcome Quality Iniciative), se ha establecido una clasificacin y una definicin de la enfermedad renal crnica o ERC basndose en unos estadios segn el nivel de filtrado glomerular, que se considera que debera aplicarse de igual manera a toda la poblacin. Basndose en estas guas, la prevalencia de ERC es tan elevada, sobre todo en la poblacin anciana, que se ha llegado a considerar una epidemia en los ltimos aos, de manera que se hace hincapi en el diagnstico precoz para evitar llegar a la nefropata terminal, cuando los riones ya no ejercen las funciones mnimas necesarias para la vida. Sin embargo, la principal herramienta en la que se basa esta clasificacin de ERC es el nivel de filtrado glomerular (el volumen de plasma sanguneo que filtran los glomrulos del rin) y algunos profesionales consideran que no es un buen indicador, sobre todo porque se tienen en cuenta los mismos criterios para personas jvenes y ancianas, de manera que podra haber demasiados casos diagnosticados sin motivo. As lo creen el investigador Manuel Heras y su equipo y por eso han desarrollado un seguimiento de un grupo de 80 pacientes a lo largo de cinco aos en un intento de encontrar herramientas diagnsticas ms adecuadas. "Nuestra idea es hacer una nueva clasificacin de los pacientes (o evitar usar la clasificacin actual KDOQI en los ancianos) y no considerar enfermos a personas ancianas que puedan tener un filtrado glomerular disminuido de forma fisiolgica y sin presentar otras manifestaciones de enfermedad renal", explica.

De hecho, otros indicadores, como la cantidad de creatinina, una sustancia que se elimina por medio de los riones, tienen una mejor correlacin con otros parmetros de enfermedad renal (hipocalcemia, hiperpotasemia). Segn los expertos, cada vez parece ms claro que la valoracin debe ser individualizada y no a travs de frmulas matemticas genricas de estimacin del filtrado glomerular. Parmetro importante Por otra parte, transcurridos los cinco aos de este estudio, que se ha llevado a cabo con pacientes que tenan una media de edad de 83 aos, los cientficos han relacionado otro parmetro con la mortalidad: el cido rico (AU), hasta el punto de que consideran que puede ser un buen marcador pronstico en esta patologa. De los 80 pacientes, que haban sido seleccionados en las consultas de geriatra y nefrologa, 39 sobrevivieron pasado el lustro y 41 haban fallecido. Los datos indican que los que tenan mayores niveles de cido rico presentaron mayor mortalidad, comenta. Sin embargo, esta correlacin plantea una duda: los investigadores no saben si el cido rico en s mismo es txico para el rin y provoca un menor nivel de filtracin glomerular o si, por el contrario, su incremento en sangre es la consecuencia de la isquemia renal. En cualquier caso, parece que el AU puede ser un marcador de mortalidad significativo. Para progresar en esta lnea de investigacin, se plantean estudios prospectivos, tanto en poblacin general como en enfermos con insuficiencia renal a travs de medidas que trataran de disminuir los niveles de cido rico. Un aspecto importante es que este elemento tambin parece ser un factor de riesgo cardiovascular y, de hecho, entre los pacientes con insuficiencia cardiaca, el AU era significativamente mayor. Asimismo, quienes tenan un mayor nivel de cido rico en el periodo basal presentaban un filtrado glomerular menor y una mortalidad a cinco aos ms elevada. Estas investigaciones han sido publicadas recientemente en distintos artculos de la revista cientfica Nefrologa. 10. Investigue y elabore en su cuaderno como realiza la curva para la determinacin de protenas en 24 horas

R/: La curva para la determinacin de protenas de 24 horas en muchas determinaciones

se cumple una relacin proporcional entre la magnitud o intensidad de color que da una reaccin y la cantidad del reactivo que la provoca. Por ejemplo: si la presencia de 10 ug de protenas en una solucin genera la aparicin de un color azul plido cuando es agregada a una mezcla reactiva, la presencia de 20 ug de protena dar lugar a que la solucin se torne azul ms oscuro y as sucesivamente.

MTODO Tubo 1: agua destilada 0.5ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 2 a y 2 b: Muestra proteica 0.5ml + Reactivo de biuret 2ml Tubo 3: Solucin estndar 0.5 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml

Tubo 4: Solucin estndar 1.0 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 5: Solucin estndar 2.5 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 6: Solucin estndar 5.0 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 7: Solucin estndar 7.5 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml Tubo 8: Solucin estndar 10.0 mg/ml + Reactivo de Biuret 2ml

El paso ms importante en esta etapa es el agregado del reactivo de Biuret que solo se agrega cuando todos los tubos estn con su disolucin lista ya que a partir de que se coloca comienza la reaccin, y deben comenzar todas las soluciones al mismo tiempo. Mezclamos y agitamos los tubos durante 10 a 30 segundos en el Vrtex Dejamos incubar los tubos a temperatura ambiente durante 15 minutos y comienza la etapa de la utilizacin del espectrofotmetro. Para ello tuvimos que elegir 10 cubetas para espectrofotmetro que estuvieran en buen estado, esto es dentro del rango de error permitido de +/- 0,015 absorbancia. Despus de esto con nuestra muestra blanco lo calibramos a cero para comenzar con nuestro ltimo paso prctico que corresponde a la lectura de la absorbancia. Llenamos las 10 cubetas elegidas con las respectivas soluciones de los tubos kahan hasta de su capacidad total, cuidando de limpiarlas despus de haber vaciado el contenido. Luego introducimos cada cubeta en el espectrofotmetro, anotando los datos de absorbancia de cada muestra y a partir de estos datos se construy una curva de calibracin RESULTADOS Se prepararon seis disoluciones de 500l, cada una con distinta concentracin de BSA, a partir de una solucin madre 10mg/ml. Para esto se utiliz la igualdad: Cinicial . Vinicial = Cfinal . Vfinal Donde C = Concentracin de la solucin (mg/ml) V = Volumen de la solucin (l) Ejemplo para calcular el volumen del tubo n 1: Cinicial = 10mg/ml (concentracin de la solucin madre) Vinicial = X Cfinal = 0,5mg/ml (concentracin de la solucin que se obtendr despus de la dilucin) Vfinal = 500l (volumen de la solucin obtenida) Luego, reemplazando los valores en (1) tenemos:10mg/ml . X = 0,5mg/ml . 500l Multiplicamos la expresin por 1/10mg/ml 1/10mg/ml . (10mg/ml . X ) = (0,5mg/ml . 500l) . 1/10mg/ml Simplificando llegamos a:

25l Si el volumen total de la solucin es 500l, necesitaremos 500l 25l = 475l de agua destilada para completar la dilucin.

Luego, usando el espectrofotmetro, se midi la absorbancia del blanco reactivo, de la muestra problema y de los estndares. Se obtuvieron los siguientes resultados:

Se realizaron dos diluciones iguales a partir de la M.P. n 5, al medir la absorbancia de cada una de estas soluciones problema, se obtuvo 0,180 y 0,195 lo que promedia 0,188. ste valor ser el utilizado para calcular la concentracin de la solucin. Luego, a partir de la tabla n 2, se realiza el grfico de la curva: Grfico de la curva (realizado en papel milimetrado)

De acuerdo a la ecuacin de la recta del Grfico I, calculamos la concentracin de la muestra. y = Valor de la absorbancia de la solucin. = 0,188 x = Concentracin de la solucin en mg/ml Luego: 0,188 = 0,0339. x x1 = 5,546mg/m

BIBLIOGRAFIA

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