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Universidade Federal do Rio Grande Disciplina de Bioqumica Industrial Prof. Dr. Carlos Andr Veiga Burkert MSc.

Elisane Odriosolla dos Santos Bruno Loureiro Ladeira (Doutorando) Aula Prtica: Determinao do teor de lipdeos pelo mtodo de Soxhlet 1. INTRODUO Em sua implementao clssica, a amostra colocada em um frasco extrator que gradualmente preenchido com solvente proveniente de um balo de destilao. Quando o lquido atinge o nvel de transbordamento, um sifo aspira o soluto dissolvido no solvente e descarrega de volta no balo de destilao, realizando assim a extrao dos lipdeos da amostra para o solvente. Esta operao repetida at a extrao ser completa. A extrao Soxhlet convencional apresenta algumas vantagens: a amostra posta em contato repetidamente com pores frescas de solvente extrator, o que facilita o deslocamento do equilbrio. Alm disso, o sistema mantm-se em uma temperatura relativamente elevada pelo efeito do calor aplicado no balo de destilao. Ainda, a extrao Soxhlet uma metodologia muito simples que requer equipamentos bsicos de baixo custo e pouco treinamento. As desvantagens mais graves de extrao de Soxhlet, em comparao a outras tcnicas para a preparao da amostra slida, so o longo tempo necessrio para a extrao e a grande quantidade de solvente desperdiado. As amostras so geralmente extradas no ponto de ebulio do solvente ao longo de perodos longos, o que pode resultar em decomposio trmica de compostos termolbeis. Alm disso, um dispositivo de Soxhlet convencional no fornece nenhuma agitao, o que ajudaria a acelerar o processo. 2. OBJETIVO Determinar lipdeos atravs do mtodo de Soxhlet em uma amostra. 3. MATERIAIS E MTODOS 3.1. Procedimento Secar em estufa a 100C por 30 min uma cpsula extratora. Esfriar em dessecador. Pesar. Secar, tambm, um pouco de algodo.

Na mesma ocasio, pesar com preciso de 5 a 10 g de material em anlise, finamente divido por moagem, para dentro da cpsula. Secar em estufa a 95-100C (material granfero) ou 100-102C (carnes) at peso constante. O balo extrator Soxhlet, contendo prolas de vidro, deve ser seco em estufa a 100C por 1 h e depois pesado at peso constante, aps esfriamento em dessecador. Tapar o cartucho com algodo e introduzir no aparelho extrator. Juntar 150 mL de ter de petrleo ou hexano. Montar o aparelho conforme Figura 1. Extrair durante 4 a 6 h (4-5 gotas de condensado por segundo). Desligar o aquecedor. Deixar esfriar. Fechar a gua. Retirar o balo do extrator e coloc-lo em banho maria quente at evaporao do solvente residual. Colocar o balo em estufa a 10-102C, durante 1 h. Esfriar o balo em dessecador e pesar at peso constante. 3.2. Expresso dos Resultados Expressar o resultado em % de lipdeos totais, calculada sobre base mida e seca, destacando esta particularidade. Indicar os clculos e comparar com os dados disponveis na literatura.

Figura 1: Extrator convencional de Soxhlet. 4. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

REGULY, J. C. Introduo analtica e tecnologia dos carboidratos, lipdios, protenas e enzimas. 2. ed. Pelotas: Editora Universitria/UFPel, 2009. CASTRO, M.D.L.; PRIEGO-CAPOTE, F. Soxhlet extraction: past and present panacea. Journal of Chromatography A, v. 1217, p. 23832389, 2010. PERGUNTAS

1. las? 2.

Defina rancificao hidroltica e oxidativa. Quais os mecanismos para atenu-

Alguns alimentos lipdicos, como o azeite de oliva, apresentam-se deteriorados

rapidamente aps exposio ao ar quando em temperatura ambiente, enquanto outros, como a manteiga, demoram um tempo maior para apresentam este efeito. Explicar a afirmativa, descrevendo bioqumicamente o que ocorre com estes alimentos. 3. 4. cidos graxos essenciais. O que so? Qual sua importncia? A tabela abaixo mostra a composio obtida, em termos de cidos graxos, para

algumas marcas comerciais de leos vegetais. A partir de uma anlise comparativa das composies, faa consideraes a respeito das propriedades, vantagens ou desvantagens destes leos, sobretudo no que diz respeito s caractersticas nutricionais.

cido Graxo C16:0 C16:1 C18:0 C18:1 C18:2 C18:3 C20:0 C20:1 C22:0 C22:1 5.

Oliva 10,06 0,73 2,62 75,80 10,81 -

Girassol 5,89 3,48 25,61 64,27 0,76 -

Soja 11,47 3,68 23,51 54,49 6,84 -

Canola 4,92 2,46 59,08 21,99 6,40 2,50 1,63 1,05

Milho 13,12 2,40 34,52 49,63 0,66 -

O que so cidos graxos Omega 3 e Omega 6? Qual sua importncia?

6.

Quais as etapas fundamentais da extrao e refino de um leo vegetal? Relacione

a etapa/operao e a(s) propriedade(s) dos lipdeos envolvidos. A lecitina pode causar perdas durante a neutralizao de um leo vegetal? Explique. 7. Durante a preparao industrial do molho Barnaise, gemas de ovo so

incorporadas em manteiga derretida a fim de estabilizar o molho e evitar a separao de uma fase oleosa. Aproximadamente 33% da gema de um ovo so lipdeos, dos quais ao redor de 67% so triacilgliceris, 28% so constitudos por lecitinas, cefalinas, lisofosfatildilcolinas (isto , lecitinas com apenas um resduo de cido graxo) e esfingomielinas, e o restante principalmente colesterol. Explicar porque isto funciona. 8. Os pontos de fuso de cidos graxos de 18 carbonos so: cido esterico, 69,60C;

cido oleico, 13,40C; cido linoleico, -50C; cido linolnico, -110C. Qual o aspecto estrutural relacionado ao ponto de fuso? Explique. Qual a diferena entre leos e gorduras e sua relao com a composio em cidos graxos? O que azeite? 9. Como se formam as gorduras trans? Quais as alternativas, em termos de

processo industrial, a fim de prevenir a sua formao? 10. Se o ter de petrleo ou o ter etlico no extraem apenas as gorduras e os leos

dos substratos naturais, mas os lipdeos de uma maneira mais ampla, como se justifica tal mtodo de extrao para anlise de gorduras e leos em alimentos ou outros substratos, naturais ou modificados?