Tese para obteno do ttulo de Bacharel em Cincias Biolgicas Por: Mariana Carvalho Assad Carneiro Orientador: Ester Silveira

Ramos

Ttulo: Sexagem de embries bovinos a parir de clula nica.

Universidade de So Paulo - Faculdade de Cincias, Filosofia e Letras de Ribeiro Preto.Departamento de Biologia, defendida em 04 de Dezembro de 2008.

Resumo: As informaes obtidas mediante pesquisas com diferentes genes e a caracterizao de seus padres de expresso durante o estgio pr-implantacional podem contribuir para melhoria das tecnologias de reproduo humana e de outros animais. A produo de embries bovinos com sexo identificado, alm de ser til para o diagnstico de doenas genticas, necessrio para controlar o sexo da prole no mercado da reproduo assistida. O gene TSPY um bom marcador Y-especfico por apresentar-se na forma de mltiplas cpias tanto no genoma humano como no bovino. No presente trabalho, foram utilizados embries bovinos para observar a eficincia da Nested-reao em cadeia da polimerase (Nested-PCR) utilizando seqncia do gene TSPY como marcador macho-especfico em blastmeros biopsiados. Foram analisados 10 embries resultantes de fertilizao in vitro (FIV) obtidos a partir de semem no sexado, como controle, oito embries resultantes de fiv obtidos a partir de semem sexado . A anlise molecular foi realizada em dois blastmeros pareados obtidos de cada embrio no estgio de 8-16 clulas a partir de bipsia. O resultado obtido para cada clula nica foi confirmado com o resultado da amplificao do DNA do restante do embrio. Pde-se verificar que a sexagem com o gene TSPY de um nico blastmero bovino por Nested PCR se mostrou sensvel (resultados obtidos a partir de uma nica clula) e especfica (em 100% dos casos os resultados dos blastmeros foram compatveis com o restante do embrio), sendo obtidos sete resultados TSPY- positivos (possivelmente embries machos) e trs embries TSPY-negativos (possivelmente embries fmeas). O gene TSPX mostrou-se um bom marcador para a sexagem de clula nica de embries bovinos. Outras pesquisas no mbito do diagnstico gentico pr-implantacional podero ser desenvolvidas utilizando este gene visando o aprimoramento da tcnica. Os embries bovinos, em substituio para estudos futuros. Adicionalmente, os achados so teis para a reproduo programada e melhoramento gentico das raas em bovinos.
Apoio: ANCP, CNPq, FAEPA, FAPESP.