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20 Esterilizacao
20 Esterilizacao
O objectivo fundamental o estudo de cada microorganismo per si, para posteriormente o poder enquadrar e observar nas suas relaes com outros elementos, no s no seu ecossistema, mas tambm nas mais diversas condies (muitas das vezes adversas) que se usam in vitro. Este estudo s possvel atravs do isolamento e obteno de culturas puras, isto , o conjunto de indivduos oriundos de uma clula-me que a priori, reagiram de igual modo frente a padres pr-estabelecidos. Uma condio fundamental a utilizao de meios esterilizados, isto , ambientes isentos de todos os microorganismos vivos nomeadamente de bactrias ou formas de resistncia. Assim sendo, necessrio ter a noo de esterilizao e desinfeco.
Antispticos so desinfectantes que podem ser utilizados sobre a pele e em casos especiais as
mucosas.
Agentes fsicos
1. Calor hmido 2. Autoclavagem aquecimento a 121C durante 15-20 min a 1.02 atm. Este processo
o mais eficaz, pois o seu poder de penetrao maior. Numa atmosfera hmida e a uma temperatura elevada os microrganismos morrem quando se d a coagulao e desnaturao das enzimas e protenas que fazem parte da sua estrutura. Ex: autoclave um aparelho essencial no laboratrio de microbiologia, sendo usado para esterilizar meios de cultura e outros materiais contaminados termoestveis, como batas, compressas, etc. Nos laboratrios tambm prtica corrente a descontaminao de todo o material infectado, quer do que vai ser colocado posteriormente no lixo, quer do que vai ser posteriormente reutilizado.
3. Pateurizao
LTH (low temperature holding) aquecimento a 62.8 C 65.6C, por 30 minutos. HTST (high temperature short time) aquecimento a 71.7C, 15 segundos. UHT (ultra high temperature) aquecimento a 141C, 3 segundos.
4. Ebulio
Consiste no aquecimento a 100C durante 5 a 10 minutos. Destri todas as formas vegetativas presentes na gua e alguns dos endsporos, contudo, alguns esporos resistem a 100C por perodos de tempo superiores a uma hora (ex. Bacillus subtilis).
5. Tindalao
Processo muito antigo, utilizado para esterilizao de meios de cultura e solues nutritivas. Consiste no aquecimento a 80-100C, durante 30-60 min em 3 dias consecutivos.
6. Calor Seco
Aquecimento em forno ou estufa a 180C durante 1-2 horas. Destri os microrganismos por oxidao dos seus constituintes celulares essenciais e coagulao das suas protenas. Este mtodo usado principalmente na esterilizao de material de vidro, metal, de certos produtos nos quais a percentagem de gua muito pequena e no se deixam penetrar pela humidade (ex.: vaselina), bem como de certos produtos termoestveis que necessrio manter no estado seco. Todo o material deve estar devidamente limpo, seco, empacotado e cuidadosamente acondicionado. Contudo, no se deve carregar demasiado a estufa, evitando a falta de espao que dificulta a livre circulao de ar quente.
7. Incinerao
Utilizado em larga escala para distribuio (??) de resduos hospitalares. - aquecimento ao rubro as elevadas temperaturas a que se submetem estes materiais (fios e ansas de platina e pinas) matam rapidamente os microorganismos presentes por carbonizao.
8. Radies
Radiaes ionizantes (X e Gama)
So radiaes de elevada energia e poder de penetraao. Actuam sobre os constituintes da clula, nomeadamente DNA e protenas celulares. Usam-se para esterilizao de material plstico (seringas, placas de Petri, etc) e de borracha.
Agentes qumicos
1.
Formaldedo e gluteraldedo
2.
Desinfectantes e antispticos
- Bactericida / Bacteriosttico (impedindo a clula de se dividir) / Bacterioltico (efectuando a lise da parede da clula) - Fungicida / Fungisttico - Virucida / Virusttico - Esporicida Bactericida induz a morte celular sem ocorrer lise. Bacteriosttico inibe crescimento e diviso, sem morte celular. Bacterioltico induz a morte celular por lise.
Sais metlicos e compostos mercuriais (nitrato de prata, mercurocromo, mertiolato): inactivao das protenas celulares. Detergentes catinicos (compostos quaternrios de amnio -
Ozono.
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0 nenhum ; + fraca ; ++ moderada ; +++ boa ; * a actividade esporicida dos aldedos ncessita de contacto prolongado (>3 horas) ** existem dvidas da actividade do gluteraldedo sobre algumas micobactrias atpicas *** a actividade destes compostos varia com a concentrao
Avaliao da Esterilizao
1) Qumica (ex. Fita que muda de cor ao atingir certa temperatura). 2) Biolgica (ex. Ampola lacrada que vai ao autoclave e fica, supostamente, desinfectada; ao colocar essa mesma ampola na estufa no dever revelar-se crescimento de nenhum microorganismo; caso se verifique p.ex.B. subtilis ou Geobacillus stearothermophylus recomenda-se verificao do autoclave).
Although physicians cannot be all-knowing, they can still be all-caring. Such physicians may not immediately know the best approach to a patients condition, but they will not rest until they have found it. There is real dignity in that. in, Quiet in the library, NEJM Aula desgravada por Tiago Magalhes e Tiago Veloso