20/06/2013

Centro universitrio Estadual da Zona Oeste Coordenao de Tecnologia de Produo de Frmacos e Farmcia

Ressonncia Magntica Nuclear Pela quantidade de informaes fornecidas, a RMN reconhecidamente o mtodo fsico de anlise mais potente em termos de determinao estrutural. A espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN) atualmente uma tcnica poderosa e verstil, largamente empregada na soluo de problemas qumicos, fsicos e biolgicos. Suas aplicaes incluem: a determinao da estrutura tridimensional de um produto natural desconhecido, a localizao dos stios ativos de biomolculas ou de molculas adsorvidas na superfcie de catalisadores e a interpretao de seus respectivos mecanismos de ao, entre muitas outras.
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Disciplina: Anlise Orgnica Ressonncia Magntica Nuclear Alessandro Kappel Jordo

Ressonncia Magntica Nuclear Instrumentao

Ressonncia Magntica Nuclear e suas Aplicaes em Qumica Orgnica

Ressonncia Magntica Nuclear Instrumentao

Ressonncia Magntica Nuclear e suas Aplicaes em Qumica Orgnica

Diagrama esquemtico de um espectrmetro de RMN com transformaes de Fourier e um magneto supercondutor. O compartimento de amostra paralelo ao eixo z do magneto, que resfriado por hlio lquido circundado por nitrognio lquido, em um grande frasco de Dewar. 4

Ressonncia Magntica Nuclear Embora exista uma variedade de espectrmetros usando diferentes tcnicas, a teoria bsica de RMN comum a todos os experimentos e todo ncleo. A propriedade fundamental de ncleos atmicos envolvidos o spin nuclear (I), que tem valores de 0, , 1, 1, etc. em unidade de h/2. Os ncleos com l = 0 no tero momento magntico e conseqentemente nenhuma propriedade de RMN. Ncleos com l = 1/ so ncleos mais adequados para RMN. Haveria, em geral, dois 2 efeitos a considerar: (1) se a condio de ressonncia (onde o momento magntico nuclear, a constante magnetogrica e B o campo magntico) satisfeita, um sinal de RMN pode ser obtido; (2) estes ncleos podem interagir com outro ncleo similar, resultando em padres de desdobramento nos sinais deste outro ncleo.
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Ressonncia Magntica Nuclear

Representao clssica de um ncleo de hidrognio em precesso em um campo magntico de magnitude B0, por analogia com um pio em processo.
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Ressonncia Magntica Nuclear Observa-se em particular que estes incluem istopos comuns de hidrognio (1H), flor (19F) e fsforo (31P); que podem facilmente serem observados pelo RMN. Tambm, os istopos menos abundantes de carbono (13C) e nitrognio (15N) apresentam spin 1/2, mas, devido a problemas de sensibilidade, a observao destes importantes ncleos em abundncia natural requer tcnicas FT. Um ncleo com spin l 1 possui um momento quadrupolo eltrico alm de seu momento magntico. O momento quadrupolo interage com o gradiente do campo eltrico do ncleo, e isto pode resultar em um mecanismo muito eficiente para a relaxao do spin do ncleo. Esta relaxao produz um alargamento do sinal de RMN. E em casos extremos, no se consegue observar nenhum sinal nem efeito sobre outro ncleo.
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Ressonncia Magntica Nuclear H, portanto muitos ncleos que podem apresentar sinais de RMN e da fornecerem as informaes usuais para o qumico. Hoje, com os espectrmetros disponveis comercialmente, uma grande variedade de ncleos podem ser observados por RMN. Sob condies apropriadas em um campo magntico, uma molcula pode absorver radiao eletromagntica na regio de radiofreqncias em uma freqncia regida pelas caractersticas estruturais da molcula. A absoro funo de determinados ncleos da molcula.

Ressonncia Magntica Nuclear Um espectro de RMN um registro grfico na forma de picos de absoro cujo posicionamento o deslocamento qumico que definido como a blindagem nuclear dividida pelo campo aplicado e expresso em ppm, que mais usado pois independe do campo magntico empregado, ou em Hz que dependente da freqncia do aparelho.

Ressonncia Magntica Nuclear (A) Espectros FID e FT de hidrognio da acetona. (B) Espectros FID e FT de hidrognio do acetato de etila. Ambos em CDCl3 em 300 MHz.

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Ressonncia Magntica Nuclear sempre medido em termos de uma substncia de referncia. Tanto pode ser uma referncia externa contida num tubo capilar colocado no tubo da amostra ou, mais comumente, a referncia adicionada soluo investigada, que para RMN de 1H o padro recomendado o tetrametilsilano (TMS). A conveno recomendada escala-, que medida a partir da absoro do TMS, fixada em 0 ppm, e aumenta com a freqncia. Algumas vezes o pico do solvente pode ser usado como referncia.

Ressonncia Magntica Nuclear O ncleo de hidrognio (1H) representa um caso especial, pois corresponde a um ncleo sem nenhum eltron p e, portanto no h termo paramagntico correspondente aos seus prprios eltrons da camada de valncia. Esta a razo fundamental da pequena variao na faixa de deslocamento qumico de hidrognio (ca. 10 ppm) quando comparado com outros ncleos, que possuem eltrons p e apresentam uma faixa de variao nos deslocamentos qumicos acima de 200 ppm, como por exemplo o ncleo de 13C. Uma consequncia adicional que, em RMN de hidrognio, a influncia direta da contribuio paramagntica pode ser detectada. Por exemplo, em metanos substitudos, CH3X, quando o X torna-se mais eletronegativo, a densidade eletrnica em torno dos seus hidrognios diminui e, portanto, eles entram em ressonncia a freqncias mais altas, isto os valores do deslocamento qumico, H, 12 aumentam.

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Ressonncia Magntica Nuclear Os sinais observados em espectros de RMN frequentemente apresentam uma estrutura fina. O deslocamento qumico de um ncleo determina a posio da sua absoro em um espectro, enquanto a sua estrutura fina resulta do acoplamento indireto spinspin com outros ncleos magnticos nas redondezas. A separao entre picos, ou o desdobramento de seu deslocamento qumico, denominado constante de acoplamento spin-spin e representada pelo smbolo J.

Ressonncia Magntica Nuclear Isto acontece porque os eltrons da ligao tendem a alinhar seu spin com o spin do ncleo mais prximo. E isto afeta o spin do eltron de ligao mais prximo, ou seja, o ncleo (hidrognio, por exemplo) mais prximo. Desta forma, JAB o acoplamento entre os ncleos A e B. Corresponde a uma constante independentemente do campo aplicado, e tem a unidade de Hz.

Acoplamento spin-spin entre dois hidrognios com deslocamentos qumicos muito diferentes.

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Ressonncia Magntica Nuclear Neste ponto, j podemos predizer o espectro de um composto simples se conhecermos sua estrutura. Vejamos os grupos metileno e metino do composto

Ressonncia Magntica Nuclear Na figura abaixo, podemos ver um tripleto e um dubleto, muito separados, com reas relativas na proporo 1:2. O dubleto o resultado da diviso do sinal da absoro do hidrognio do grupamento CH2 pelo hidrognio CH. O tripleto o resultado da diviso consecutiva da absoro de CH pelos hidrognios de CH2. Os picos se superpem porque as constantes de acoplamento so idnticas.

No qual o nico hidrognio do grupo metino est em um ambiente qumico muito diferente dos dois hidrognios de metileno. Os dois hidrognios de CH2 se acoplam igualmente com o hidrognio de metino.

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Ressonncia Magntica Nuclear Em um multipleto simples de primeira ordem, o nmero de picos

determinado pelo nmero de hidrognios vizinhos acoplados com a mesma constante de acoplamento (ou muita prxima). Os hidrognios vizinhos podem ser geminais ou vicinais, isto , envolvem duas ou trs ligaes. Como vimos, um hidrognio vizinho produz um dubleto, e dois hidrognios igualmente acoplados produzem um tripleto. A multiplicidade , portanto, n + 1, em que n o nmero de hidrognios. A frmula geral, vlida para todos os ncleos, 2nI + 1, em que I o nmero de spin. As intensidades relativas dos picos de um multipleto simples de primeira ordem dependem tambm de n. Como vimos, os picos de um dubleto (n = 1) esto na proporo 1:1, os de um tripleto (n = 2), na proporo 1:2:1, os de um quarteto (n = 3), na proporo 1:3:3:1 e assim por diante.
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Ressonncia Magntica Nuclear As exigncias para um multipleto simples de primeira ordem podem ser sumariadas: A razo v/J deve ser maior que 8. v a distncia em Hz entre os centros dos multipletos acoplados. J a constante de acoplamento. O nmero de picos do multipleto n + 1, em que n o nmero de hidrognios vizinhos com a mesma constante de acoplamento. A distncia em Hz entre os picos de um multipleto simples de primeira ordem a constante de acoplamento. O multipleto simples de primeira ordem centrossimtrico. Os picos mais intensos so os picos centrais (veja o tringulo de Pascal).

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Ressonncia Magntica Nuclear Tringulo de Pascal. Intensidades relativas dos multipletos de primeira ordem; n = nmero de ncleos equivalentes de spin que se acoplam (isto , ncleos de hidrognio).

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos O interesse em determinar a estereoqumica absloluta de um composto orgnico quiral proveniente do fato que a estereoqumica frequentemente determina propriedades importantes na qumica, fsica, biologia e aspectos farmacuticos dos compostos. A necessidade de se obter frmacos e reagentes qumicos enantiomericamente puros produziu um fantstico crescimento de campos tais como sntese assimtrica e catlise assimtrica. Muitos mtodos instrumentais existem para a determinao da configurao absoluta. Os mais conhecidos so: cristalografia de raio-x, rotao ptica, infravermelho vibracional etc. Recentemente, diferentes abordagens para a determinao de configurao absoluta surgiram, baseados na espectroscopia de RMN.
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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos Estas tcnicas so muito atraentes, em funo das indubitveis vantagens, que incluem: a) instrumento disponvel na maioria dos laboratrios; b) um entendimento aprofundado dos fundamentos no necessrio para aplicao neste mtodo; c) uma pequena quantidade de amostra requerida e pode ser reaproveitada; d) Podem ser utilizadas amostras slidas ou lquidas.

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos

A seguir sero abordados exemplos de emprego desta tcnicas utilizadas na determinao da configurao absoluta de diversos compostos. Pureza tica: determinada pela % e.e. (para enantimeros) ou % d.e. (para diastereoismeros) de um produto de sntese, extrao etc.

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos

3'' O 5 2N 1N 2' HN 1' 3' 5'' 6'' H 6' 5' 4' Br 3N 4 N H N H 2'' 1''

4'' 5'' 6''

3'' O 4 N 3N N 5 H 2N 1N 2' HN 1' 3' 6' 2'' 1''

4''

5'

4' Br

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos Entretanto, apesar de todos os recursos da espectroscopia de RMN monodimensional, possvel fazer combinaes de espectros, at mesmo de ncleos diferentes, no intuito de se fazer correlaes entre os mesmos e sua vizinhana.

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos Os experimentos bidimensionais (2D) so um ferramenta de grande utilidade na elucidao estrutural de molculas pois permite a correlao entre ncleos permitindo a conectividade estrutural. Dentre os experimentos 2D mais utilizados, pode-se citar: COSY uma correlao que mostra o acoplamento de um determinado hidrognio com os hidrognios vizinhos; HETCOR uma correlao heteronuclear entre 1H e 13C a uma ligao, mostrando o hidrognio est ligado a determinado carbono diretamente; HMQC uma correlao heteronuclear como o HETCOR por deteco inversa (a partir do hidrognio, logo mais sensvel e mais rpido) entre 1H e 13C a uma ligao, mostrando o hidrognio est ligado a determinado carbono diretamente;

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos

HMBC uma correlao por deteco inversa entre e a mltiplas ligaes, assinalando o hidrognio vizinho ao carbono a distncias de 3 ligaes e em alguns casos a 4 ligaes; NOESY uma correlao bidimensional que mostra a correlao espacial entre hidrognios. TOCSY uma correlao por transferncia de magnetizao entre spins no diretamente acoplados, mas no mesmo sistema de spins. Existe nas verses 1D e 2D. INADEQUATE uma correlao homonuclear que mostra a conectividade entre carbonos (13C). Embora muito til e poderoso, s usada em casos das outras tcnicas no resolverem a elucidao estrutural, pois tem uma sensibilidade muito pequena e exige grande quantidade de amostra, cerca de 200-300 mg / 0,5 mL de solvente deuterado. Ainda existem os experimentos tridimensionais que so mais aplicados na elucidao estrutural de molculas mais complexas como protenas que podem combinar experimentos como NOESY- HMQC, TOCSY-NOESY, NOESYCOSY, etc.
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1H 13C

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos

3'' O 4 N 3N N 5 H 2N 1N 2' HN 1' 3' 6' 4' Br 2'' 1'' H

4'' 5'' 6''

5'

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos I Diastereoismeros: O mais comum determinar a % d.e. a partir da integrao relativa dos sinais do hidrognio, no 1H-RMN. Possuem deslocamentos qumicos diferentes, sob condies de simetria.
O O Bu
1H:

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos OBS.: Em casos onde no h duplicidade de sinais, para medir a % d. e. deve-se preparar uma mistura (R,S) e comparar com o espectro do produto quiral.

O O O O H O
1H:

O O Bu O

4 cm O O O H O 5,35 5,27

1 cm 80:20 = 60% d.e.

5,35

(1H, d, J = 2,7 Hz)

5,27

(1H, d, J = 2,7 Hz)

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos OBS.: Uma correlao qumica pode ajudar a determinar a pureza tica!

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos

H1 He Ha (Trans) Ha He Br

Ha e Ha - enantiotpicos He e He - enantiotpicos 1 Ha e He - diastereotpicos (diferenciado por RMN de H) a = 0,9 ppm(JHa,H1 = 8Hz) J so diferentes e = 0,7 ppm(JHe,H1 = 3,2Hz) 1 = 1,4 ppm(dt, J = 8 e 3,2Hz) Ha e Ha - enantiotpicos He e He - enantiotpicos Ha e He - diastereotpicos a = 0,9 ppm(JHa,H1 = 3,2Hz) e = 0,7 ppm(JHe,H1 = 3,2Hz) 1 = 1,4 ppm(quintupleto)

Br He Ha (Cis) Ha He H1

so magneticamente equivalentes

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos II Enantimeros: Enantimeros: tm H1 e H2 iscronos, logo tm espectros de RMN de 1H e de 13C idnticos, sob condies de simetria.
H3 Bu H1 O OH H2 H3 Bu H1 O OH H2 RMN de 1H (300 MHz, CDCl3)

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos A) RMN de amostras derivatizadas Espectros de diastereoismeros preparados a partir de enantimeros e reagentes quirais. No d a configurao absoluta (R,S).
MeO OH Ph * (% ee = ?) CF3 O Ph O MeO CF3 O Ph O MeO CF3

Ph CO2H MTPA (COCl)2 Ph

Ph steres de Mosher (diastereoismeros)

Intregrao relativa dos sinais de CF3 no 9F-RMN

d % d.e. (igual a % e.e.)

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos B) RMN em solventes quirais Nem sempre d boa separao de sinais. No d a configurao absolura R,S.

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos C) RMN com reagente de deslocamento quiral D boas separaes no RMN de 1H. o mtodo mais usado e os derivados de lantandeos (so cidos de Lewis e formam complexos fracos com bases de Lewis) so os mais comuns.

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos C) RMN com reagente de deslocamento quiral

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos D) RMN de amostras derivatizadas com resina Uma metodologia geral para o assinalamento da configurao de compostos mono- e polifuncional por RMN apresentada. A abordagem baseada no uso de agentes de derivatizao quiral acoplado a poliestireno (resinas CDA) especialmente desenvolvidas para efetuar a formao em alto rendimento das ligaes covalentes (amidas ou steres) entre o substrato e o auxiliar de quiralidade dentro do tubo de RMN, sem a necessidade de outras manipulaes, em microescala em um perodo cutro de tempo. Os solventes deuterados utilizados em RMN (CDCl3, CD3CN, CS2/CD2Cl2) tambm so solventes de reao e separaes, purificaes ou isolamentos.

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos D) RMN de amostras derivatizadas com resina Estas resinas preparadas incluem MPA, 9-AMA, BPG, MTPA e 2-NTBA como agentes de quiralidade incorporados como enantimeros simples ou como misturas de enantimeros (R) e (S) em propores desiguais e conhecidas. A alta versatilidade destes sistemas foi demonstrada com sucesso em uma variedade de modos baseados em simples e duplas derivatizaes, experimentos a baixa temperatura, ou a formao de complexos metlicos.

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos D) RMN de amostras derivatizadas com resina

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos D) RMN de amostras derivatizadas com resina A abordagem permitiu a determinao de aminas primrias, alcois primrios e secundrios, cianoidrinas, tiis, diis, triis e amino-alcois. A quantidade apropriada da resina-CDA e o substrato de configurao desconhecida foram adicioandos ao tubo de RMN com uma pequena quantidade do solvente deuterado. Aps agitao da mistura heterognea por alguns minutos, adiciona-sse mais solvente deuterado e o espectro de RMN realizado diretamente. O CDA ligado ao substrato na soluo enquanto a resina livre flutua na superfcie sem causar qualquer interferncia na gravao do espectro conforme mostrado na figura a seguir.
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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos D) RMN de amostras derivatizadas com resina

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Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos D) RMN de amostras derivatizadas com resina Pelo fato das resinas-CDA usadas nesta abordagem consistirem de um nico enantimero CDA, duas derivatizaes in tube (mtodo da dupla derivatizao) so necessrios e as configuraes so deduzidos por comparao dos espectros das duas amidas diastereoisomricas.

Aplicao da RMN na caracterizao de compostos orgnicos D) RMN de amostras derivatizadas com resina

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Exerccios 1) Assinale o espectro de 1H do p-toluilacetato de etila mostrado abaixo usando os deslocamentos qumicos e constantes de acoplamento.

Exerccios 2) Assinale e correlacione os espectros de 1H a seguir as trs estruturas qumicas abaixo.

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Exerccios 3) Uma molcula desconhecida forneceu o espectro de 1H a seguir. Baseado nisto, e sabendo que a frmula molecular C5H10O, sugira uma estrutura para esta molcula.

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