Transport activ

Cotransport

Transport pasiv

Transport membrana r

Sistem uniport

Transport de micromolecul e (ioni)

Transport de macromolecul e

Efectuarea transportului prin membrane sau prin plasmalem este asigurat de proprietatea membranelor sau a plasmalemei de permeabilitate selectiv. Se disting mai multe tipuri de transport, n funcie de: a) consumul energetic: transport pasiv (fr consum de energie) i transport activ (cu consum de energie prin intermediul ATP); b) mrimea moleculei transportate: transport de ioni (molecule mici), transportul macromoleculelor c) numrul substanelor transportate (sistem uniport, cotransport (simport, antiport)).

A. TRANSPORTUL PASIV Difuziunea simpl poate avea loc prin stratul dublu lipidic sau prin proteine. Ca exemplu pentru difuziunea simpl prin stratul dublu lipidic putem lua ptrunderea substanelor liposolubile conform coeficientului de partiie ntre ulei i ap. Overton a constatat faptul c ptrunderea substanelor n celule este proporional cu solubilitatea substanelor n lipide, msurat prin coeficientul de partiie al substanei ntre ulei i ap. Cu ct acest coeficient este mai mare, cu att substana este mai liposolubil i ptrunde mai repede n celule. Exist ns i excepii de la regula lui Overton: apa, ureea i metanolul. Referitor la difuziunea simpl mediat de peptide amintim transportul ionilor prin intermediul ionoforilor (polipeptide produse de microorganisme). Exist 2 tipuri de ionofori: transportori mobili (crui) i de tip canal. Ionoforii din prima categorie sunt peptide ciclice care au la interior un spaiu polar n care sechestreaz un anumit ion: de exemplu valinomicina leag K+. Exteriorul ionoforului este hidrofob. Ionoforii din aceast categorie preiau ionul de pe o suprafa a membranei, difuzeaz prin stratul dublu lipidic i elibereaz ionul pe faa cealalt, acetia formnd pori care strbat bistratul lipidic, prototipul fiind gramicidina (peptid liniar compus din 15 aminoacizi cu resturi laterale hidrofobe). Ionoforii produi de microorganisme sunt antibiotice. Ele sunt arme de aprare ale unor microorganisme mpotriva altora fiindc anihileaz potenialul de membran. Ionofori de tip canal sunt: filipina, nistatina, amfotericina B, care formeaz pori doar n membranele cu coninut de steroli (de exemplu membranele fungilor). De aceea sunt utilizate n practica medical drept antifungice (antimicotice). Ionoforii sunt folosii ca instrumente de investigare a multor procese n biologia celular i molecular. Printre altele, ionoforul A 23187 introduce Ca2+ i Mg2+ n celule transportnd n afar 2 H+. Acest ionofor nu influeneaz potenialul membranar, doar crete concentraia intracelular de Ca2+, astfel fiind folosit pentru studiul efectelor Ca2+. Difuziunea facilitat se produce de la o concentraie mai mare la una mai mic, dar substanele transportate trec mult mai rapid (de 100.000 de ori) dect ar fi de ateptat pentru dimensiunea i solubilitatea lor n lipide. Substanele sunt transportate de proteine specifice, care se comport ca nite enzime legate de membran, deoarece difuziunea facilitat are caracteristici comune cu cataliza enzimatic. Fiecare protein transportoare are un loc specific de legare a substratului (substana transportat). Viteza transportului atinge valoarea maxim (V max) caracteristic pentru fiecare transportor, atunci cnd acesta este saturat (toate locurile de legare sunt ocupate). Apoi, fiecare transportor are o constant caracteristic de legare a substanei ce o transport, numit KM,

egal cu concentraia substanei cnd viteza de transport atinge din valoarea maxim . Alte caracteristici asemntoare catalizei enzimatice ar fi: 1) dependena de pH; 2) inhibiia competitiv prin compui similari cu substratul; 3) inhibiia necompetitiv prin alte substane (ioni de metale grele) prezente n urme. Prin difuziune facilitat se realizeaz: a) transportul anionilor; b) transportul ureei; c) transportul glicerolului; d) transportul unor neelectrolii prin membrana eritrocitului; e) transportul glucozei; f) transportul aminoacizilor prin plasmalema celulelor. n cadrul acestui tip de transport, transportatorul este o protein transmembranar care sufer modificri conformaionale reversibile. ntr-o anumit stare conformaional (pong) locurile de legare pentru substana ce trebuie transportat sunt expuse la exteriorul bistratului lipidic. n cealalt stare (ping) aceleai locuri de legare sunt expuse spre partea opus a membranei, iar substana este eliberat. Acesta este mecanismul de ping-pong. Difuziunea simpl mediat de proteine-canal se deosebete de difuziunea facilitat prin faptul c viteza transportului poate fi mai mare dect n cazul difuziunii facilitate i transportul nu se satureaz, adic nu exist Vmax. Unele canale de transport sunt deschise n mod continuu, iar altele numai tranzitoriu. Acestea se numesc canale de poart. Unele canale se deschid la legarea unui ligand pe un receptor i le numim canale cu poart comandate de ligand. Alte canale dependente de potenialul membranei (voltaj) le numim canale cu poart comandate de voltaj. Mai exist i canale proteice care se deschid ca rspuns la creterea concentraiei intracelulare a unor ioni: de exemplu canalele pentru K+ se deschid atunci cnd crete concentraia Ca2+ n citosol. Exemple de canale cu poart exist n funcionarea jonciunii neuromusculare, n care un impuls nervos produce contracia muchiului. Cel puin 4 canale se deschid n mai puin de o secund. Descreterea potenialului plasmalemei (depolarizarea) terminaiei neuronului deschide canalul pentru Ca2+. Creterea concentraiei intracelulare de Ca2+ produce descrcarea veziculelor cu acetilcolin, care se leag de receptorul acetilcolinei din plasmalema celulei musculare. Acesta este un canal cu poart comandat de receptor; se produce deschiderea lui, ceea ce permite timp de 1 msec difuziunea Na+ spre interior i a K+ la exteriorul celulei. Cum gradientul de concentraie al Na+ este mult mai mare ca cel al K+, influxul de Na+ depete efluxul de K+, deci se produce depolarizarea plasmalemei muchiului. Aceast depolarizare deschide canalele pentru Na+, dependente de voltaj. Ceea ce produce o und de depolarizare (potenial de aciune) ce se rspndete pe ntreaga membran muscular. Ca rezultat al potenialului de aciune, se deschid canalele de Ca 2+ n citosol. Aceast cretere brusc a Ca 2+ n citosol produce contracia miofibrilelor. B. TRANSPORTUL ACTIV

Transportul activ este realizat de proteine transportoare cu o nalt specificitate i are i el caractere comune cu cataliza enzimatic: cinetica de tip Michaelis-Mentel. Ceea ce l deosebete de difuziunea facilitat este consumul de energie. Transportul ionilor prin plasmalem i alte membrane se realizeaz de proteine care folosesc direct energia din ATP, aceste pompe ionice avnd i proprietate ATP-azic. n transportul aminoacizilor i glucidelor prin plasmalem se folosete energia gradientelor ionice (realizate prin ATP), deoarece transportul acestor substane se face cuplat cu transportul de Na+ (cotransport). n cazul bacteriorodopsinei se folosete energia luminii pentru pomparea H+. La unele bacterii se folosete fosfoenolpiruvatul ca surs de energie pentru mecanismul numit translocare de grup. Transportul ionilor pompa de Na+ i K+ din plasmalem i pompa de Ca2+ din plasmalem i din reticulul sarcoplasmic al celulelor musculare. Plasmalema tuturor celulelor este polarizat, adic prezint un potenial de membran cu valori cuprinse ntre 20mV i 200mV. Faa citoplasmatic a plasmalemei este ncrcat negativ, iar cea extern pozitiv. Exist 2 proteine care joac un rol foarte important n generarea i meninerea potenialului de membran: pompa de Na + i K+, pe de o parte, i canalul de pierdere al K+, pe de alt parte. Concentraia intracelular de K+, de circa 400mM, este mult mai mare ca cea extracelular (20mM). Pentru Na + situaia este invers, concentraia intracelular fiind mult mai mic (50mM) fa de cea extracelular (440mM). Proteina cu canalul de K+ permite difuziunea pasiv a K+ din celul la exterior (n sensul gradientului de concentraie). Dar prin aceasta interiorul celulei devine mai electronegativ i de aceea la o anumit valoare a potenialului de membran (-75mV) tendina K+ de a prsi celula datorit gradientului de concentraie este contrabalansat de tendina K + de a intra n celul datorit potenialului membranar. Deci gradientul electrochimic al K + se anuleaz i numrul de ioni de K+ ce ies din celul devine egal cu numrul celor ce intr n celul. Dar canalul de K + este uor permeabil i pentru Na+. Deci unii ioni de Na+ intr n celul conform gradientului electrochimic al Na+. Prin transport de sarcini pozitive la interiorul celulei scade potenialul membranar, ceea ce permite ieirea altor ioni de K+. prin repetarea proceselor descrise s-ar ajunge la egalarea concentraiilor de Na+ i K+ de o parte i cealalt a membranei i la dispariia potenialului membranar, dac nu ar exista pompa de Na + i K+ care pompeaz Na+ n afara celulei i K+ n citoplasm (sistem antiport). Pompa de Na+ i K+ se afl n plasmalema tuturor celulelor animale i este responsabil de meninerea potenialului membranar, dar i de controlul volumului i de ntreinerea transportului activ al aminoacizilor i glucidelor. De aceea, peste 1/3 din necesarul de energie al celulei este consumat de aceast pomp, iar n celulele nervoase se ajunge pn la 70% din consumul energetic s revin pompei. Dup 1957 s-a descoperit c pompa de Na+ i K+ este aceeai protein cu Na+K+ATPaza, o enzim care scindeaz ATP-ul n ADP i fosfat anorganic (Pi) i care necesit Na + i K+ pentru activitatea optim, fiind inhibat specific de glicozidele cardiotonice (digital i oubain) Pompele de Ca2+ sunt importante n meninerea concentraiei sczute de Ca 2+ n citosol(10-7 M) fa de o concentraie mult mai mare a Ca 2+ extracelular (10-3M). Exist n plasmalem o pomp de Ca2+ numit i Ca2+-ATP-aza care transport activ Ca2+ la exterior. Gradientul mare de concentraie al Ca 2+ asigur condiii pentru transmiterea de semnale de la exterior la interiorul celulei prin plasmalem. Reglarea concentraiei de Ca 2+ n citosol este important i pentru procesele de secreie celular i motilitate.

De asemenea funcioneaz o Ca 2+-ATP-az n membrana reticulului sarcoplasmic din muchi, care pompeaz Ca2+ din citosol. Aceast enzim este destul de bine caracterizat: const dintr-un singur polipeptid format din circa 100 resturi de aminoacizi, pompeaz 2Ca 2+ pentru fiecare molecul de ATP hidrolizat i poate hidroliza pn la 10 molecule ATP/secund. Cnd impulsul nervos depolarizeaz plasmalema celulei musculare, Ca 2+ este eliberat din reticulul sarcoplasmic n citosol, stimulnd contracia muchiului. Bacteria Halobacterium halobium are ntr-o zon specializat a membranei sale, numit membrana purpurie, proteina bacteriorodopsina ce funcioneaz la lumin ca o pomp de protoni, expulznd protonii la exterior, crend astfel potenialul membranar. O caracteristic general a pompelor ionice este reversibilitatea lor. Transportul activ cuplat cu gradiente ionice este reprezentat de transportul glucozei i al Transportul glucozei prin plasmalema celulelor din mucoasa intestinal i a celulelor din tubii renali prezint importan foarte mare. Astfel, dei filtratul glomerular al rinichiului conine glucoz n concentraie aproape egal cu cea din plasm, n urin nu apare n mod normal glucoz, fiindc ea este reabsorbit n tubii renali printr-un proces de transport activ. Absorbia intestinal de glucoz ar fi foarte ineficient dac s-ar face prin transport pasiv, fiindc ar nsemna c n intestin concentraia glucozei s fie mai mare ca cea din plasm. n realitate, n ambele cazuri, glucoza este transportat mpotriva gradientului de concentraie de ctre un cru al glucozei de care se leag i Na +. Este un sistem simport: Na+ tinde s intre n celul conform gradientului su electrochimic i ntr-un sens antreneaz glucoza. Cu ct gradientul de Na+ este mai mare i viteza transportului este mai mare; dac se reduce mult gradientul de Na+ se oprete transportul glucozei. Na+ care intr cu glucoza este pompat n afar de Na+-K+-ATP-aza ce menine gradientul Na+. Transportul aminoacizilor se face tot prin sisteme simport cu Na+, existnd cel puin 5 proteine diferite n plasmalema celulelor animale Translocarea de grup se ntlnete la unele bacterii i const n fosforilarea unor glucide n cursul trecerii lor prin plasmalem. Sistemul de fosforilare (fosfoenolpiruvat transferaza) este complex, implicnd 4 proteine i fsfoenolpiruvatul ca surs de energie. Tot la bacterii se mai ntlnesc sisteme pentru transportul activ al glucidelor i aminoacizilor ce implic proteine hidrosolubile localizate n spaiul dintre plasmalem i peretele celular. TRANSPORTUL DIRECT AL UNOR MACROMOLECULE PRIN MEMBRANE Exist cazuri speciale cnd macromoleculele (ADN sau proteine) pot strbate direct membranele celulare fr a se forma vezicule. Asemenea situaii se ntlnesc la bacterii n cursul procesului de transformare genetic, n care molecule de ADN trec att prin peretele celular ct i prin plasmalem. n celulele eucariote proteinele de secreie trec direct prin membrana reticulului endoplasmic rugos pe msur ce sunt sintetizate. Unele toxine bacteriene trec prin plasmalema celulelor animale i i exercit efectele n citosol. n cele mai multe cazuri macromoleculele sunt trecute prin membrane prin intermediul veziculelor.

TRANSPORTUL PRIN VEZICULE: ENDOCITOZA, EXOCITOZA I TRANSCITOZA

Un mod special de transport prin membranele biologice l reprezint transportul rpin vezicule. Se disting 3 procese: endocitoza, exocitoza i transcitoza, dup cum transportul are loc spre interiorul celulei, din citoplasm la exterior sau, respectiv, prin vezicule ce strbat complet celula dintr-o parte n cealalt. Exocitoza se produce prin fuziunea unor vezicule din citoplasm cu plasmalema i astfel materialele din vezicule sunt vrsate n afara celulei. Asemenea procese apar la nivelul sinapselor, cnd veziculele coninnd mediatori chimici acetilcolin, noradrenalin fuzioneaz cu membrana plasmatic a terminaiei neuronului. Mediatorii chimici vrsai n spaiul sinaptic se leag de receptorii specifici din membrana postsinaptic producnd depolarizarea ei. n acest fel se asigur transmiterea influxului nervos la nivelul sinapselor. Endocitoza este de 2 feluri dup natura substanelor ce ptrund n celule: fagocitoza i pinocitoza. Prin fagocitoz ptrund substane solide, pe cnd prin pinocitoz ptrund macromolecule n soluie. n ambele cazuri de endocitoz materialele ptrund n celul nglobate n vezicule ce se deprind din plasmalem i care ajunse n citoplasm se numesc endozomi. Acetia se unesc apoi cu un lizozom primar, se formeaz un lizozom secundar n care materialele ncorporate sunt digerate, produii de digestie trecnd n citoplasm. Fagocitoza este o modalitate de hrnire la protozoare. La mamifere i la om aceasta joac un rol important n procesele de aprare ale organismului, pe aceast cale fiind nglobate i apoi distruse bacteriile, paraziii, substanele strine, resturile celulare, celulele degenerate, mbtrnite i celulele maligne. Celulele capabile de fagocitoz se numesc fagocite. La om i la mamifere acestea sunt de 2 tipuri: macrofage i neutrofile. Ambele rezult din celule precursoare aflate n mduva osoas, apoi circul n snge cteva zile, dup care trec din vase n esuturi unde i exercit funcia lor fagocitar. Se pot distinge mai multe faze ale fagocitozei: a) Chemotactismul (chemotaxia) este micarea dirijat a fagocitelor spre locul infeciei, ca semnale servind componente bacteriene sau ale organismului: proteine serice, componentele sistemului numit complement, produse ale limfocitelor, factori eliberai de neutrofile. b) Recunoaterea i ataarea fagocitelor de particule se face prin receptori din plasmalema fagocitului ce recunosc liganzi de pe suprafaa particulei. c) nglobarea se face prin emiterea de ctre fagocit a unor prelungiri numite pseudopode, ce nconjoar particula i o nchid apoi complet ntr-o vezicul internalizat n citoplasm numit fagozom. Pinocitoza este de 2 feluri: independent de receptori i dependent de receptori. Pinocitoza independent de receptori se mai numete endocitoz n faz fluid i se ntlnete la multe celule. Pinocitoza dependent de receptori sau endocitoza mediat de receptori se realizeaz cu ajutorul receptorilor din plasmalem ce recunosc macromoleculele specifice din lichidul extracelular.

BIBLIOGRAFIE

1. Benga, Gh, Biologie celulara si moleculara, Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1976. 2. Ionescu-Varo, M., Biologie celular, Ed. Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1976.