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REAO DE ASLUTINAO

REAO DE ASLUTINAO
Reudo entre unticorpo e Reudo entre unticorpo e untgeno insoIveI untgeno insoIveI
{purtcuIu} {purtcuIu} muItivuIente muItivuIente ou purtcuIus contendo ou purtcuIus contendo
determinuntes untignicos {peIo menos Z} determinuntes untignicos {peIo menos Z} formu formud do o
de ugregudos de ugregudos
REAO DE ASLUTINAO
REAO DE ASLUTINAO
IT HSPE IT HSPE
FCF/USP FCF/USP
- - Reu Reud do o Ag Ag/Ac /Ac revers revers veI veI no in no in cio cio - - ufetudu peIu ufetudu peIu
constunte de equiI constunte de equiI brio, brio,
- - AgIutinu AgIutinud do depende du o depende du propor propord do o entre entre Ag Ag e Ac, e Ac,
Fen Fen5 5meno de pr meno de pr -zonu = ecesso de unticorpo -zonu = ecesso de unticorpo
Ocorre em Z fuses Ocorre em Z fuses
1" 1" interudo interudo Ag Ag e Ac e Ac
Z" formudo de Z" formudo de ugregudos ugregudos
Muis Muis sensveI sensveI {~1000} {~1000} e muis e muis rpidu rpidu que u que u
precipitudo precipitudo
Detectu ~30-0 ng/mI Detectu ~30-0 ng/mI
REAO DE ASLUTINAO
REAO DE ASLUTINAO
Tesfe quoIifofivo Tesfe quoIifofivo
Tesfe Tesfe semi-quonfifofivo semi-quonfifofivo: defermino o concenfroo : defermino o concenfroo
reIofivo de Ag ou de Ac no omosfro, por fifuIoo reIofivo de Ag ou de Ac no omosfro, por fifuIoo
PeoIi;odo em: PeoIi;odo em:
Imino Imino - Z-8 min. - Z-8 min.
fubo - fubo - Ib min. - I noife Ib min. - I noife
pIocos pIocos de microfifuIoo de microfifuIoo
I-Zh I-Zh
em coIuno de em coIuno de geI geI - I0 min - I0 min
Aufomoo Aufomoo
ogIufinoo em pIocos de microfifuIoo: PI7Z00 ogIufinoo em pIocos de microfifuIoo: PI7Z00
microogIufinoo de Iofex : nefeIomefrio microogIufinoo de Iofex : nefeIomefrio
AgIufino AgIufino o direfo o direfo : : onf onf geno de geno de bocf bocfe erios, profo;o rios, profo;oo orios rios
Ex: reo Ex: reo o de o de WidoI WidoI poro onf poro onf genos O e H, genos O e H,
bruceIose, bruceIose, Iisferiose Iisferiose, Iepfospirose. Idenfifico , Iepfospirose. Idenfifico o o
de bocf de bocfe erios em cuIfuro com rios em cuIfuro com onfissoros onfissoros espec espec ficos ficos

HemogIufino HemogIufino o o direfo direfo : sisfemo A8O, pesquiso : sisfemo A8O, pesquiso
de onficorpos de onficorpos hefer hefero ofiIos fiIos onfi onfi- -hem hemo ocios de cios de
corneiro, corneiro, crioogIufininos crioogIufininos (Ac onfi-I em (Ac onfi-I em infec infec o o
por por M. M. pneumonioe pneumonioe) )

Inibi Inibi o de o de hemogIufino hemogIufino o o: v : v rus rus hemogIufinonfes hemogIufinonfes


como rub como rube eoIo, sorompo, infIuen;o, efc. oIo, sorompo, infIuen;o, efc.
TIPOS DE ASLUTINAO TIPOS DE ASLUTINAO
PARA O DIASNSTICO PARA O DIASNSTICO
AgIufinoo possivo em porfcuIos de Iofex AgIufinoo possivo em porfcuIos de Iofex
- Ex. em Imino - FP, fesfe de grovide;, PCP, ASLO - Ex. em Imino - FP, fesfe de grovide;, PCP, ASLO
- Ex. nefeIomefrio - Ig, c3, c4, PCP, ASLO, FP, oufros - Ex. nefeIomefrio - Ig, c3, c4, PCP, ASLO, FP, oufros
AgIufinoo possivo em porfcuIos de geI (PA) AgIufinoo possivo em porfcuIos de geI (PA)
Ex. Anfi-HIV, onfi-HCV, onfi-HTLV I/II, TPHA Ex. Anfi-HIV, onfi-HCV, onfi-HTLV I/II, TPHA
HemogIufinoo possivo ou indirefo HemogIufinoo possivo ou indirefo (HAP ou HAI) (HAP ou HAI)
Ex. Anfi- Ex. Anfi-T. cru;i T. cru;i, foxopIosmose, EMAs, TPHA , foxopIosmose, EMAs, TPHA
HemogIufinoo possivo reverso HemogIufinoo possivo reverso - HAPP - HAPP
PCP, H8sA0 PCP, H8sA0
AgIufinoo em coIuno de geI AgIufinoo em coIuno de geI
A8O, Ph, Chogos A8O, Ph, Chogos
LTEX
LTEX
Tesfes r Tesfes ro opidos em I pidos em I mino mino - esferos de poImero de - esferos de poImero de
poIiesfireno ~ 0,3-0,8 poIiesfireno ~ 0,3-0,8 m, corgo negofivo m, corgo negofivo - - Adsorve Adsorve
profe profe nos nos

Turbidimefrio Turbidimefrio/ /nefeIomefrio nefeIomefrio - porfcuIos de dimefro - porfcuIos de dimefro
inferior o 0,I inferior o 0,I m m
PEAO DE FLOCULAO - VDPL PEAO DE FLOCULAO - VDPL
R, DE HEMASLUTINAO R, DE HEMASLUTINAO / HA / HA PASSIVA PASSIVA
SFILIS diagnstico laboratorial SFILIS diagnstico laboratorial
KT FCF USP KT FCF USP
HSPE IAMSPE HSPE IAMSPE
TESTES TREPONMICOS HAP ou PA
TESTES TREPONMICOS HAP ou PA
PROLA PROLA
A
g
A
g
Ag Ag
Ag Ag
Ag Ag
Hemcia Hemcia
Ou gelatina Ou gelatina
PROLA PROLA
A
g
A
g
Ag Ag
Ag Ag
Ag Ag
Hemcia Hemcia
Ou gelatina Ou gelatina
A
g
A
g
Ag Ag
PROLA
PROLA
Ag Ag
Ag Ag
Hemcia
Hemcia
Ou gelatina
Ou gelatina
Ag Ag = = sonicado sonicado de T. de T.pallidum pallidum e soro absorvido com T. e soro absorvido com T.Reiter Reiter
PARTCULAS DE SELATINA
PARTCULAS DE SELATINA
PA de ~3 PA de ~3 m de di m de di mefro. Superf mefro. Superf cie oIfomenfe hidrof cie oIfomenfe hidrof Iico Iico
- impede Iigo - impede Iigo o o inespec inespec fico fico de componenfes do omosfro de componenfes do omosfro
TESTE DE ASLUTINAO EM
TESTE DE ASLUTINAO EM
PARTCULAS DE SELATINA - PA
PARTCULAS DE SELATINA - PA
Po0IA Imunoensoio Po0IA Imunoensoio em coIuno de geI em coIuno de geI
Po0IA Po0IA
DesesfobiIi;oo DesesfobiIi;oo de de suspenso suspenso de de onfgeno reIofivomenfe onfgeno reIofivomenfe
esfoveI esfoveI peIo Iigoo peIo Iigoo com com onficorpo onficorpo confro confro os seus os seus
deferminonfes onfignicos deferminonfes onfignicos. . PeIofivomene poucos moIecuIos PeIofivomene poucos moIecuIos
de Ac de Ac so suficienfes so suficienfes ng ng de Ac de Ac podem podem ser ser defecfodos defecfodos. .
Tomonho do porfcuIo Tomonho do porfcuIo onfignico onfignico ~I0 ~I0 m: m:
- - hem hemo ocios cios, , bocf bocfe erios rios, , I Io ofes fes
- - porf porf cuIos sinf cuIos sinfe eficos ficos: : I Io ofex fex, , geIofino geIofino
PEAO DE A0LUTIMAO
PEAO DE A0LUTIMAO
Meconismo
Meconismo
Pef. Von Pef. Von Oss Oss. - Precipifofion ond . - Precipifofion ond ogIufinofiuon ogIufinofiuon. J. Immunoossoy,ZI(Z&3):I43-Io4, Z000 . J. Immunoossoy,ZI(Z&3):I43-Io4, Z000
VisuoIi;oo do ogIufinoo VisuoIi;oo do ogIufinoo
Lei de Sfokes Lei de Sfokes - - foro foro de de resisfncio resisfncio de de umo porfcuIo umo porfcuIo
no no meio Iquido meio Iquido e e proporcionoI oo seu roio proporcionoI oo seu roio, , enquonfo que enquonfo que
o o foro que indu; foro que indu; o o sedimenfoo sedimenfoo e e proporcionoI oo proporcionoI oo r r
3. 3.
Foro Foro de de sedimenfoo sedimenfoo de de porfcuIos porfcuIos e e proporcionoI oo proporcionoI oo
quodrodo quodrodo dos dos seus roios seus roios
Assim Assim, , os ogregodos os ogregodos (com (com fomonho fomonho x x ve;es oumenfodo ve;es oumenfodo) )
sedimenfom sedimenfom x x
Z Z
ve;es mois ropidos que porfcuIos ve;es mois ropidos que porfcuIos
individuois dispersos individuois dispersos. .
Ex. Ex. Sedimenfoo Sedimenfoo de de hemocios hemocios no no meio soIino meio soIino ~ Icm/h ~ Icm/h no grovidode ombienfe no grovidode ombienfe
Idem de Idem de ogregodo ogregodo de 30 de 30 hemocios hemocios ~I cm/omin. ~I cm/omin.
Cenfrifugoo oceIero Cenfrifugoo oceIero o o ogIufino ogIufino
Leifuro do ogIufinoo opos cenfrifugoo Leifuro do ogIufinoo opos cenfrifugoo
Difereno Difereno de de oderncio oderncio no no fundo fundo do do fubo ou do covidode fubo ou do covidode
Mo ogIufinodos Mo ogIufinodos - - sedimenfom compocfomenfe sedimenfom compocfomenfe
no no fundo fundo do do fubo fubo
AgIufinodos AgIufinodos - - em em fIocos fIocos oderem por fodo superfcie oderem por fodo superfcie do do
fundo fundo do do fubo fubo
Diferono no Diferono no formo de formo de disperso disperso do do sedimenfo sedimenfo
Mo ogIufinodos Mo ogIufinodos - - Pedisperso compIefomenfe Pedisperso compIefomenfe
AgIufinodos AgIufinodos - - no fornom no fornom o se o se dispersor dispersor
Pef. Von Pef. Von Oss Oss. - Precipifofion ond . - Precipifofion ond ogIufinofiuon ogIufinofiuon. J. Immunoossoy,ZI(Z&3):I43-Io4, Z000 . J. Immunoossoy,ZI(Z&3):I43-Io4, Z000
PEAO HEMA0LUTIMAO PEAO HEMA0LUTIMAO
Sisfemo Sisfemo A8O A8O
IgM IgM ( (Ac Ac compIefo compIefo) - ) - fomonho fomonho (d~30nm) e (d~30nm) e voIncio voIncio b b
Ig0 Ig0 ( (Ac Ac incompIefo incompIefo) - ) - fomonho fomonho (d~IZ-I4nm) e (d~IZ-I4nm) e voIncio voIncio Z Z
Disfncio enfre superfcie Disfncio enfre superfcie de de porfcuIos porfcuIos
Condies fisioIogicos Condies fisioIogicos (pH, (pH, foro inico foro inico) - ) - gIicocoIice exferno gIicocoIice exferno
de de hemocios no hemocios no se se oproximom enfre s monfendo disfncio oproximom enfre s monfendo disfncio
moior moior (Ib-Ionm) (Ib-Ionm) que oIconce que oIconce do do Ig0 Ig0 (IZ-I4nm) (IZ-I4nm)
Pef. Von Pef. Von Oss Oss. - Precipifofion ond . - Precipifofion ond ogIufinofiuon ogIufinofiuon. J. Immunoossoy,ZI(Z&3):I43-Io4, Z000 . J. Immunoossoy,ZI(Z&3):I43-Io4, Z000
VisuoIi;oo do ogIufinoo por VisuoIi;oo do ogIufinoo por oc oc Ig0 Ig0 - - fesfe fesfe de Coombs de Coombs

ASLUTINAO PASSIVA OU HEMASLUTINAO PASSIVA ASLUTINAO PASSIVA OU HEMASLUTINAO PASSIVA




Anfgeno Anfgeno no no e e porfe infegronfe porfe infegronfe dos dos hemocios hemocios
Ag Ag soIveI soIveI e e odsorvido superfcie de suporfes odsorvido superfcie de suporfes
inerfes como hemocios inerfes como hemocios
esfobiIi;odos
esfobiIi;odos humonos do humonos do
grup grupo o O, O, ou ou de de gonso ou goIinho, Iofex, porfcuIos de gonso ou goIinho, Iofex, porfcuIos de
geIofino, geIofino, benfonifo benfonifo, siIicofo, corvo coIoidoI. , siIicofo, corvo coIoidoI.

ASLUTINAO OU HEMASLUTINAO PASSIVA REVERSA ASLUTINAO OU HEMASLUTINAO PASSIVA REVERSA


Ac especfico odsorvido no superfcie de suporfes Ac especfico odsorvido no superfcie de suporfes
inerfes. inerfes.
COASLUTINAO COASLUTINAO
AgIufinoo misfo AgIufinoo misfo
Ex.: Ex.: fipogem fipogem de de bocferio bocferio com Ac com Ac
Especfico Especfico e e coogIufinoo coogIufinoo com com
profeno profeno A de S A de SfophyIococcus fophyIococcus oureus oureus
SensibiIi;oo
SensibiIi;oo
dos
dos
suporfes soIidos
suporfes soIidos
Hemocios Hemocios
PoIissocorides PoIissocorides soIveis soIveis - - odsorvem odsorvem-se o -se o superfcie ceIuIor superfcie ceIuIor
por meio por meio de de recepfores simiIores recepfores simiIores o o Iecfino Iecfino
Profenos Profenos - - odsoro opos frofomenfo odsoro opos frofomenfo dos dos hemocios hemocios com com
ocido fnico ocido fnico ~0,00b7 ~0,00b7 ou gIuforoIdedo ou gIuforoIdedo ~I,ob7 ~I,ob7
Iigoo covoIenfe por dio;ofoo ou oufros Iigoes Iigoo covoIenfe por dio;ofoo ou oufros Iigoes
qumicos qumicos
Lofex Lofex ( (poIiesfireno poIiesfireno de 0,Zb-0,8nm) de 0,Zb-0,8nm) ou oufros porfcuIos ou oufros porfcuIos
Iigoo hidrofobico Iigoo hidrofobico
Iigoo covoIenfe Iigoo covoIenfe
TITULAO DO AMT0EMO EM 8LOCO TITULAO DO AMT0EMO EM 8LOCO
- - - - - - - + Dilue
nte
- - - - - - + ++ 1/160
- - - - + + ++ ++++ 1/80
- - - - ++ +++ ++++ ++++ 1/40
- + + + ++ ++++ ++++ ++++ 1/20
- + - + +++ ++++ ++++ ++++ 1/10
+ + + ++ ++++ ++++ ++++ ++++ 1/5
Soro -
1/4
Soro -
1/2
Soro
+
1/64
Soro
+
1/32
Soro
+
1/16
Soro
+
1/8
Soro
+
1/4
Soro
+
1/2
Ag
TifuIoo TifuIoo do onfgeno - em bIoco - moior diIuio do do onfgeno - em bIoco - moior diIuio do Ag Ag que fornece ofimo que fornece ofimo
sensibiIi;oo, ou sejo, copo; de fornecer moior ffuIo poro o soro posifivo sensibiIi;oo, ou sejo, copo; de fornecer moior ffuIo poro o soro posifivo
e negofivo poro o soro negofivo e negofivo poro o soro negofivo
REAO DE ASLUTINAO REAO DE ASLUTINAO - CONTROLES - CONTROLES
AgIufinoo no reoo e no confroIe de hemocios ou de AgIufinoo no reoo e no confroIe de hemocios ou de
geIofino ~ reoo geIofino ~ reoo inespecco inespecco
- - - - + + + + + + + + + + ConfroIe ConfroIe
- - - - + + + + + + + + + + Peoo Peoo
T T o o b b 4 4 3 3 Z Z I I Tubo Tubo
- - - - - - - - - - + + + + ConfroIe ConfroIe
- - - - + + + + + + + + + + Peoo Peoo
T T o o b b 4 4 3 3 Z Z I I Tubo Tubo
- - - - - - + + + + + + + + ConfroIe ConfroIe
- - - - + + + + + + + + + + Peoo Peoo
T T o o b b 4 4 3 3 Z Z I I Tubo Tubo
Megofivo Megofivo
Posifivo Posifivo
InconcIusivo InconcIusivo
Po0IA
Po0IA
Anfgeno
Anfgeno
ImunohemofoIogio ImunohemofoIogio - - fipogem fipogem A8O, Ph A8O, Ph
Suspenso o 0,Ib7 de porfcuIos de poImero, coIoridos, Suspenso o 0,Ib7 de porfcuIos de poImero, coIoridos,
sensibiIi;odos com onfgeno especfico (Chogos - sensibiIi;odos com onfgeno especfico (Chogos - Ags Ags
sinfeficos que represenfom AgZ, sinfeficos que represenfom AgZ, TcD TcD e e TcE TcE) )

Meconismo
Meconismo

Seporoo do ogIufinoo, por cenfrifugoo Seporoo do ogIufinoo, por cenfrifugoo
(I0 min.), em mofri; de geI de (I0 min.), em mofri; de geI de SephocryI SephocryI
fomponodo fomponodo
Inferprefoo Inferprefoo
Linho vermeIho no superfcie do geI ~ Linho vermeIho no superfcie do geI ~ + +
"8ofo" no fundo do geI ~ "8ofo" no fundo do geI ~ - -
ASLUTINAO DE PARTCULAS DE SELATINA - PA ASLUTINAO DE PARTCULAS DE SELATINA - PA
PorfcuIos de geIofino PorfcuIos de geIofino no no so so onfignicos onfignicos
Mo reoge com Ac Mo reoge com Ac heferofiIos heferofiIos
O soro pode ser ensoiodo em boixos diIuies O soro pode ser ensoiodo em boixos diIuies
oIfomenfe oIfomenfe sens sens veI veI
Tecnico - monuoI Tecnico - monuoI
Equipomenfo semi-oufomofico Equipomenfo semi-oufomofico
Aufomofico: Z40 omosfros/horo, IZ conois Aufomofico: Z40 omosfros/horo, IZ conois
Peoo em Peoo em micropIocos micropIocos U U - Ac confro HIV, HCV, - Ac confro HIV, HCV,
HTLV I/II, ASLO, Chogos, MHA- HTLV I/II, ASLO, Chogos, MHA-Tp Tp, TA, T0, , TA, T0,
CMV, CMV, M. M. pneumonioe pneumonioe
IMFLUEMCIAM A PEAO DE A0LUTIMAO IMFLUEMCIAM A PEAO DE A0LUTIMAO
Pro-;ono Pro-;ono - Excesso de Ac. - Excesso de Ac. o probobiIidode de um o probobiIidode de um
onficorpo Iigor-se onficorpo Iigor-se deferminofes deferminofes de porfcuIos de porfcuIos
diferenfes - diIuir o soro diferenfes - diIuir o soro
Ac Ac bIoqueodores bIoqueodores
pH pH geroImenfe pH o-8 geroImenfe pH o-8
Temperofuro Temperofuro - 37"C, 4"C, TA - 37"C, 4"C, TA
Tempo Tempo - - depende do mefodoIogio depende do mefodoIogio
IgM IgM ~ 7b0 ve;es mois eficienfe que ~ 7b0 ve;es mois eficienfe que Ig0 Ig0. .
Ig0 Ig0 - os ve;es requer condies especiois - os ve;es requer condies especiois
EIefroIifos EIefroIifos - concenfroo fisioIogico - neufroIi;oo - concenfroo fisioIogico - neufroIi;oo
porcioI de corgos porcioI de corgos
MocromoIecuIos MocromoIecuIos hidrofIicos - modificom corgos hidrofIicos - modificom corgos
no fose Z. Impedem o oufo-ogIufinoo no fose Z. Impedem o oufo-ogIufinoo
E EsfobiIi;odor sfobiIi;odores es: Ieife desnofodo, 8SA, : Ieife desnofodo, 8SA, profenos profenos
do soro do soro