Esta separata se revisar para incluir la clasificacin ms reciente. Se usar para la informacin relevante a organismos a ver en el laboratorio.

Refirase a la presentacin para la informacin ms reciente. Son responsables del material que esta destacado en amarillo. Organismos Eucariontes: Protistas Objetivos: Reconocer la diversidad de los protistas, su filogenia y clasificacin actual. Reconocer los diversos mtodos de nutricin y locomocin dentro de este grupo. Identificar organismos representativos de algunos grupos de los protistas y sus caractersticas distintivas. Reconocer la importancia ecolgica y econmica de algunos protistas. Hace ms de 2 billones de aos los organismos eucariontes aparecieron en la Tierra. Su gran diversidad, numerosas adaptaciones y gran complejidad es un reflejo de su larga historia evolutiva. Reconocemos y clasificamos con ms certeza los organismos macroscpicos, ej. plantas y animales. Sin embargo, las relaciones evolutivas de la mayor parte de la vida microscpica eucariota, los protistas, son poco conocidas y en parte controversiales. A diferencia de los dems reinos eucariontes, que pertenecen cada uno a ramas evolutivas distintivas, los protistas son un grupo polifiltico, es decir, forman parte de varias ramas evolutivas. La mayora de los protistas son unicelulares, acuticos y microscpicos, pero tenemos algas pardas que pueden tener un tamao de hasta 70 a 100 m de largo. Entre los caracteres que aportan a la gran diversidad de organismos que se encuentran en este grupo tenemos las distintas maneras obtener la energa y las de llevar a cabo su motilidad. Los protistas pueden obtener su energa de varias maneras: pueden ser fotosintticos, saprofticos, hetertrofos, mixotrficos, parasticos o simbiticos. En cuanto a la motilidad, algunos grupos son mtiles y otros no. Entre los modos usados para la locomocin tenemos flagelos, pseudpodos y cilios. Tenemos, adems, desde protistas unicelulares, hasta agregados, coloniales y multicelulares. Cmo los protistas con tanta diversidad han llegado a ser clasificados juntos dentro de un reino? Estos organismos se han colocado juntos principalmente porque son organismos eucariontes que tienen caractersticas que no permiten clasificarlos como hongos, plantas o animales. Muchos bilogos todava usan el Reino Protista mientras se hacen ms claras las evidencias que apoyen la filogenia de los grupos. Se est usando la biologa molecular, junto a la morfologa y fisiologa, para poder clasificarlos de una manera ms correcta. Son varias las propuestas existentes en cuanto a la clasificacin completa de los organismos eucariontes, en especial de los que tradicionalmente se han conocido como protistas. Ms que enfocarnos en aprender una clasificacin especfica, para fines de este laboratorio nos enfocaremos en las caractersticas evolutivas

importantes de grupos de organismos. Una propuesta para clasificar los eucariotas, incluyendo los protistas, se presenta a continuacin:

De: Keeling, Patrick, Brian S. Leander, and Alastair Simpson. 2009. Eukaryotes. Eukaryota, Organisms with nucleated cells. Version 28 October 2009. http://tolweb.org/Eukaryotes/3/2009.10.28 in The Tree of Life Web Project, http://tolweb.org/

Este rbol filogentico es una de las propuestas existentes segn la evidencia molecular y taxonmica ms reciente. Podemos observar que este rbol coloca a los organismos protistas en varias ramas evolutivas separadas. Por ejemplo, las algas verdes se encuentran en la misma rama evolutiva que las plantas debido a que tienen ms afinidad con las mismas que con las dems algas. Los coanoflagelados tambin se separan de los dems protistas debido a que comparten ms caractersticas con los animales. Ambos, las algas verdes y los coanoflagelados se consideran grupos que fueron ancestros de las plantas y los animales, respectivamente. En este laboratorio se estudiarn ejemplos de organismos considerados como protistas pertenecientes a cinco supergrupos o clados monofilticos dentro de los eucariontes: Excavata, Chromalveolata, Rhizaria, Archaeplastida y Unikonta.

Ejercicio 1: Reconociendo la diversidad de organismos dentro del Reino Protista: Durante este laboratorio examinaremos ejemplos de varios protistas dentro de los supergrupos y las caractersticas distintivas que nos pueden ayudar a separarlos en grupos ms discretos. Tendr disponible laminillas preparadas, agua de estanques, fotos, diagramas y algunos cultivos para que pueda observar los organismos que se listan a continuacin. Al observar los organismos recuerde que es posible que no pueda ver todos los caracteres del organismo ya que no contar con un microscopio lo suficientemente potente para poder apreciar los organismos con mayor resolucin. Vea entonces las fotografas y/o diagramas al final de este laboratorio. Grupo Excavata Los excavata son un grupo diverso de organismos que incluye protistas que tienen mitocondrios modificados y protistas con flagelos que difieren estructuralmente de otros organismos. Muchos organismos dentro de este grupo poseen un surco para alimentarse, producto de un ancestro comn. Dentro de este grupo encontramos parsitos reconocidos del hombre (Trypanosoma, Giardia) y los euglenoides, que incluyen especies mixotrpicas, con capacidad de ingerir su alimento y fotosintetizar. Euglena

Organismos de agua dulce, mtiles, con uno o dos flagelos, y fotosintticos como las plantas porque poseen cloroplastos y clorofilas a y b. Sin embargo, se diferencian de las plantas porque su pared celular se compone mayormente de protenas que forman una pelcula sobre las clulas que las hace ms flexibles. Adems, tienen la capacidad de ser organismos hetertrofos. Poseen un ojo o estigma, que tiene un receptor de luz que los ayuda a localizar la fuente de luz y maximizar la fotosntesis. Poseen una vacuola contrctil para procesar el exceso de agua que entra en la clula. Se colocan aparte de las algas debido a que la evidencia molecular sugiere que los cloroplastos de las euglenas vienen de un ancestro diferente del que provey los cloroplastos de las plantas. Adems,

almacenan los productos fotosintticos en el polisacrido paramilo. Qu entiende representara el que grupos diferentes adquieran cloroplastos de manera similar? Vea la laminilla preparada de Euglena y compare con la figura. Qu organelos puede distinguir? Observe los cultivos de Euglena y busque en el agua de los estanques. Observe el movimiento de las euglenas. Cmo es su movimiento? Qu pasara si no se le provee luz a la euglena? Observe el diagrama de la euglena, reconozca sus partes principales y compare con los organismos que pueda ver en cultivos o laminillas.

Ojo estigma Pelicula Vacuola contractil Flagelo largo Flagelo largo

Ncleo

Cloroplasto

Figura 2. Euglena Grupo Chromalveolata Los cromalveolados componen varios grupos entre los cuales estn los alveolados (dinoflagelados y ciliados) y los estramenofilos (diatomeas y algas pardas). La secuencia de ADN sugiere que los cromalveolados forman un grupo monofiltico. Adems la evidencia disponible apoya la hiptesis de que se originaron hace ms de un billn de aos cuando un ancestro comn adquiri por fagocitosis un alga roja fotosinttica. Debido a que se entiende que las algas rojas surgieron por endiosimbiosis, se entiende que los cromalveolados surgen por endiosimbiosis secundaria. Alveolados: Ciliados Organismos terrestres, de agua dulce y salada. La caracterstica que los une es que se encuentran cubiertos de pequeos cilios que utilizan para locomocin y, adems, para dirigir el alimento hacia su boca. La mayora de los ciliados poseen dos tipos de ncleos:, macroncleo grande y uno o varios microncleos. El macroncleo contiene la

informacin necesaria para el funcionamiento normal del organismo, mientras que el microncleo contiene la informacin gentica del organismo. Paramecium

La gran mayora de los paramecios son de agua dulce; slo una especie se encuentra en agua de mar. Son ciliados unicelulares que cuando se mueven en el agua giran sobre su eje y se alimentan principalmente de bacterias. Tienen dos vacuolas contrctiles para regular la presin osmtica y sacar el exceso de agua y que tambin sirven para excrecin. Podemos ver adems dos tipos de ncleos: un macroncleo y uno o varios microncleos para reproduccin sexual. Otras estructuras distintivas que tienen son los tricocistos, que son como unos hilos que sueltan cuando son amenazados por alguna sustancia o depredador. La reproduccin usualmente es por fisin binaria, ocasionalmente por conjugacin. Observe la laminilla preparada de Paramecium y compare con la figura 3. Identifique todas las estructuras que pueda distinguir. Trate de localizar los paramecios en el agua de cultivo y agua de estanques. Describa cmo es el movimiento del paramecio. Puede ver algunos organismos llevando a cabo reproduccin?

Figura 3. Paramecium

Stentor

Uno de los protozoarios que se encuentran en agua dulce y uno de los ms grandes ya que puede llegar a ser hasta 2 mm de largo. Pueden encontrarse en estanques de agua dulce adheridos a hojas flotantes en estanques o nadando libremente. Pueden, adems, formar colonias. Cuando est adherido a un substrato tiene la forma caracterstica de una trompeta con una corona de cilios que forma un vrtice que atrae las partculas de comida. El resto de su cuerpo tiene cilios que usan para nadar. Cuando estn nadando su forma parece la de una pera. Es usual, adems, que sean coloridos, con colores azules, verdes o violceos. El color se debe a un alga que vive en simbiosis con este organismo. Otra caracterstica que poseen es la capacidad para regenerarse de pedazos pequeos. Observe la laminilla preparada de Stentor. Localice la corona de cilios y trate de ver la lnea de cilios que tienen en el cuerpo. Trate de encontrar la vacuola contrctil que debe estar localizada cerca de la corona de cilios. Segn la forma que tienen los organismos que puede ver en la laminilla, estaban adheridos a un substrato o nadando libremente? Trate de localizar a Stentor en el agua de los estanques. Busque en reas donde se encuentre material vegetal en descomposicin o pedazos de hojas. Puede encontrar los organismos pegados a el material vegetal o nadando libremente. Los reconocer por su tamao y forma. Podr encontrar desde organismos verde oscuro hasta casi transparentes. Cmo es su movimiento? Puede determinar cunto mide uno de los organismos? Puede observar las algas dentro del organismo? Puede ser probable que encuentre Vorticella que se parece mucho a Stentor. La podr distinguir por su forma parecida a una trompeta con un tubo largo y formando colonias pegadas a un substrato. Si no mueve mucho el agua podr observar cmo el movimiento de la corona de cilios forma un vrtice que atrae partculas hacia la cavidad bucal. Podr observar adems que el tubo se estira y contrae como un resorte. Blepharisma Este organismo es un ciliado filtrador. Algunas de las especies tienen un color rosado distintivo. Atrae las bacterias que se encuentran en la vegetacin en descomposicin, llevndolas hacia su cavidad bucal. Este alimento pasa a un cistostoma (cavidad bucal) y llevado hacia vacuolas de comida en la parte posterior del organismo. Al final del organismo se puede ver una vacuola contrctil para regular la presin osmtica. Poseen tambin macroncleos, que se ven como las cuentas de un collar, y microncleos ms difciles de ver. En el agua de cultivo y agua de estanques busque las blepharismas. Qu estructuras puede distinguir? Puede observar algunos organismos llevando a cabo reproduccin? Qu tipo de reproduccin puede ver? Observe las vacuolas llenas de alimento y al final la vacuola contrctil. Trate de localizar los ncleos. Compare los organismos vivos con la figura 4.

Macroncleos Citostoma o cavidad bucal Microncleos

Vacuolas con alimento

Vacuola contractil

Figura 4. Blepharisma Estramenofilos Diatomeas

Las diatomeas son organismos unicelulares, libres o formando colonias. Se encuentran en agua dulce y salada y, aunque son muy pequeas, la importancia ecolgica y econmica es enorme. Son el componente mayor del fitoplancton y producen adems grandes cantidades de oxgeno. Producen esqueletos de slice que forman parte del sedimento de los ocanos. Entre los beneficios econmicos se encuentra el uso como abrasivo en la pasta de dientes. Su membrana celular est constituida fundamentalmente por pectina, fuertemente impregnada de slice, de modo que resiste la accin de los cidos y bases fuertes. Este caparazn silceo est formado por dos valvas. Son muy resistentes a la accin de los elementos, incluso a altas temperaturas. Observe la laminilla preparada de las diatomeas. Describa la forma de las mismas. Puede detectar las dos valvas? En las muestras de agua que tiene disponible trate de encontrar diatomeas. Qu significado puede tener el que encuentre o no diatomeas en su muestra? Algas pardas

Protistas multicelulares, la mayora de aguas fras de zonas templadas. Dentro del grupo encontramos organismos pequeos, pero adems algas multicelulares que pueden crecer sobre 100 m (325 pies) de largo, lo cual le hacen ser de los organismos ms grandes que

existen. Al mar de los sargasos se le llama as por el alga parda, Sargassum. Las algas pardas tienen ese color por la presencia del pigmento fucoxantina y la clorofila a. Las algas pardas adems tienen un gran valor comercial. La algina, un polisacrido en la pared celular de estos organismos, se usa comercialmente como emulsificador en pinturas, pasta de dientes, helado y pudines. Laminaria se usa como alimento en pases orientales. Observe los ejemplos de algas pardas en demostracin. Note su color. Note las vejigas de aire en Sargassum usadas como mecanismo de flotacin. Grupo Rhizaria Rhizaria se compone de un grupo grande y diverso de flagelados, ameboides y ameboflagelados. Aun cuando varan grandemente en morfologa, la evidencia de ADN sugiere que forman un grupo monofiltico. Foraminferos y radiolarios

Los foraminferos y radiolarios son ejemplos de otros organismos que se mueven y alimentan por seudpodos. Los radiolarios secretan una testa con poros por los cuales salen y se extienden los seudpodos. Los restos fosilizados de estas testas forman parte de los sedimentos marinos. Los radiolarios tienen esqueletos de slice de los cuales irradian los seudpodos que son reforzados por microtbulos. Los radiolarios tambin, al morir, forman parte de los lechos marinos. Observe las laminillas preparadas de foraminferos y radiolarios. Puede observar los poros por los cuales salen los seudpodos? Grupo Archaeplastidia Dentro de este grupo se encuentran las algas rojas, verdes y las plantas verdaderas. Estos organismos tienen en comn el que poseen un plastidio resultado de un evento de endosimbiosis primaria. Algas rojas

La mayora son organismos pequeos filamentosos o formando lminas. Aunque son fotosintticos no se encuentran cercanas a las plantas. Un compuesto importante que se saca de algas rojas es el agar. El agar es un medio importante para cultivos de laboratorio que se extrae de la pared celular de las algas rojas. Otro compuesto de la pared celular de estas algas es la caragenina o carrageno, que se usa para dar textura a algunos alimentos. Las algas rojas tienen los pigmentos ficocianina y ficoeritrina que enmascaran la clorofila a, dandole la apariencia roja a estas algas. Estos pigmentos permiten absorber largos de ondas verdes y azules que llegan a grandes profundidades en el mar.

Observe los ejemplos de algas rojas en demostracin. Por qu cree que este grupo de algas es menos frecuente en aguas poco profundas? Algas verdes

Aunque se colocan con los protistas tienen un mismo ancestro comn que las plantas. Son fotosintticos, con una ultraestructura y composicin de pigmentos similares a las plantas terrestres. Pueden ser unicelulares, coloniales o multicelulares. Tenemos organismos de agua dulce, salada o terrestres. Observe las laminillas de algas verdes disponibles y los ejemplos: dsmidos, Ulva, Volvox. Debe poder encontrar varios ejemplos de algas verdes unicelulares y coloniales en el agua estancada. Grupo Unikonta Este grupo presenta una gran diversidad ya que incluye los animales, los hongos y algunos protistas. Existen dos grupos principales dentro de este supergrupo: los amebozoos y los opistokontos. Existe evidencia molecular considerable que determina la relacion entre estos grupos. Amebozoos

Incluye los mohos deslizantes, las amebas y las entamoebas. Dentro de este grupo encontramos organismos de tierra, agua salada y dulce. Se caracterizan por tener seudpodos, que son extensiones del citoplasma que ayudan al organismo a moverse y a alimentarse. Al encontrar el alimento los seudpodos rodearn la partcula para ingerirla por medio de fagocitosis. Algunas de las infecciones gastrointestinales que suelen ser frecuentes en turistas son causadas por organismos de este grupo. Amoeba: Observe la laminilla preparada de amebas y compare con la figura a continuacin. Distinga los seudpodos, la forma irregular del cuerpo y el ncleo. Cmo se lleva a cabo el movimiento de las amebas?

Vacuola con alimento

Vacuola contractil

Ncleo

Pseudpodos

Figura 5. Diagrama de Amoeba proteus con algunas de las partes ms visibles. Mohos deslizantes

Los mohos deslizantes forman en parte de su ciclo de vida masas grandes de clulas que se deslizan alimentndose de material que encuentran a su paso. Parte de su vida la pasan como clulas individuales ameboides, pero cuando la situacin se torna difcil y el alimento escasea se unen para generar cuerpos fruticosos multicelulares que forman esporas resistentes que germinaran cuando las condiciones vuelvan a ser favorables. Physarum

Este es un moho deslizante plasmodial. Su etapa vegetativa se compone de una masa multinuclear de protoplasma sin paredes celulares. Esta masa se alimenta de bacterias al deslizarse por las superficies vegetativas de las plantas. Cuando las condiciones son adecuadas se forma un cuerpo fructifero que produce esporas. Observe la laminilla de Physarum. De estar disponible, observe el organismo vivo dentro de un plato Petri. Especule acerca de cmo es el movimiento. Si encuentra cuerpos fructferos presentes, observe y describa. Ejercicio 2: Anlisis de muestras de agua de estanques Prepare una o varias laminillas de agua de los estanques. Trate de que el agua que escoja tenga elementos de superficie, fondo o del material vegetal que se encuentre. Trate de buscar algunos de los organismos estudiados Clasifique en la tabla provista a

continuacin. Es casi seguro que no podr identificar todos los organismos presentes. Pida ayuda a su instructor. Organismo Grupo Forma de alimentarse Forma de locomocin Caractersticas distintivas Dnde se encuentran

Preguntas adicionales 1. Segn la evidencia mostrada en el laboratorio, cmo usted tratara la filogenia de este grupo?

2. Dibuje un posible rbol filogentico y los grupos que usted hara. Explique los criterios usados que sustente su rbol filogentico.

3. Qu ejemplos de protistas causantes de enfermedades puede mencionar?

4. Qu ejemplos de protistas formadores de productos de beneficio econmico conoce?

5. Mencione ejemplos de eventos en la naturaleza que sean causados por protistas

6. Cmo participan los protistas de la cadena alimentaria?

Manejo del tiempo: Discutir resultados del ejercicio de inhibicin de crecimiento de bacterias e instrucciones para preparar informe de laboratorio- 25 min. Objetivos y teora del lab de protistas-20 min. Agua estancada para algas, algas marinas y productos de algas-50 min. Agua estancada del zoolgico para protozoarios y tubos o placas de cultivos de protistas 50 min. Mohos deslizantes y hoja de ciclo de vida 10 min. Prueba corta 10 min. Resumen de las caractersticas de organismos observados 10 min. Recoger y organizar 5 min. Instrucciones y recordatorios del laboratorio de protistas: Se trabajar individualmente Asegurarse que en el laboratorio tengan peceras con agua estancada de los estanques de frente de la casa del rector y de los estanques de las jaulas de los monos del zoolgico. Cotejar si hay tubos disponibles con cultivos de protozoarios. Como asignacin pueden pedir a los estudiantes que busquen informacin en Internet de 3 a 4 de los organismos que vieron en el laboratorio o contestar las preguntas para el pensamiento. El Physarum (el moho deslizante) debe reactivarse una semana antes colocando en una hoja de papel de filtro humedecido en oscuridad y proveyendo algunas hojuelas de avena como alimento. Usen las copias del ciclo de vida del Physarum para estudiarlo y conocer caractersticas del mismo. Den tiempo suficiente para que los estudiantes puedan observar con calma las laminillas, platos o tubos y que puedan buscar organismos. Supervise los estudiantes ayudndolos en la bsqueda. Monten ustedes un plato y/o laminillas para encontrar algunos organismos que puedan enserselas a los estudiantes. Circulen por las mesas y asegrese que los estudiantes compartan lo que encuentran con los dems compaeros. Asegrese que los estudiantes puedan identificar organismos que NO son protistas, como por ejemplo los rotferos. Se har responsable al estudiante de conocer los gneros incluidos en el laboratorio y las caractersticas distintivas de los mismos.