Citoesqueleto e movimento celular

Prof. Vinicius Farias Campos, BSc., MSc.

fariascampos@gmail.com

Abordagens...
O que e qual a constituio do citoesqueleto
Quais funes o citoesqueleto desempenha na clula

Tipos de Filamentos do citoesqueleto

Aplicaes Biotecnolgicas

O que o citoesqueleto?
- uma rede complexa de filamentos de protenas que se estendem por todo citoplasma; forma um arcabouo interno para o grande volume do citoplasma, sustentando-o da mesma forma que uma estrutura metlica sustenta um prdio;

uma estrutura altamente dinmica que se reorganiza rpida e continuamente;

- presente em clulas eucariticas

Composio
Composto por 3 tipos de filamentos proticos

1. Microfilamentos (filamentos de actina) 7 nm 2. Filamentos Intermedirios 10 nm

3. Microtbulos 25 nm

Esses 3 tipos interagem entre si conferido estabilidade e dinmica no citoesqueleto. Cada tipo de filamento formado pela polimerizao de monmeros especficos

Funes do citoesqueleto
- Dar estrutura e forma a clula - permitir que a clula altere sua forma - permitir o movimento celular - fornece a maquinaria necessria para movimentos intracelulares - na diviso celular segregao dos cromossomos - na interao clula-clula - na interao clula-matriz extracelular

Microfilamentos

Filamentos intermedios

25nm

25m

10 nm
25nm

7 nm

25m

Microtbulos

25 nm

25nm

25m

Microfilamentos
Principal protena: Actina
Estrutura: Polmeros helicoidais, duas cadeias de actina (G-Actina + ATP + Mg e K = Polmero)

Estruturas flexveis, com dimetro de 5 a 9 nm,

Organizados na forma de feixes lineares, redes bidimensionais e gis tridimensionais.

Microfilamentos
Filamentos de actina concentrados logo abaixo da membrana plasmtica Endocitose, pinocitose, migrao celular, contrao muscular Sustenta as microvilosidades superfcie celular
Encontra-se nas junes celulares manter clulas unidas Associam-se com inmeros complexos proticos

Microfilamentos em microvilosidades

Microfilamentos em protuses temporrias

Microfilamentos na contrao muscular

Microfilamentos na citocinese
Anel contrctil de actina e miosina

Microtbulos (MT)
So polmeros rgidos formados por 13 protofilamentos de tubulina a e b, em forma de filamentos longos e ocos, com 25 nm de dimetro e so muito mais rgidos do que os filamentos de actina.

Polimerizao

Tubulina
Tipos: a, beg Altamente conservadas Possuem aprox. 450 aa (50 kDa) So originados por 5 genes de uma famlia que tem 5 isoformas.

Microtbulos (MT)
Nas clulas em interfase, partem do centrossoma, onde se encontram os centrolos e uma reserva de tubulina. A polimerizao dos dmeros de tubulina possibilita o alongamento do microtbulo e a despolimerizao seu encurtamento. O sentido da polimerizao da tubulina vai conferir uma polaridade ao microtbulo: uma extremidade + (positiva) onde continua a polimerizao e outra (-) negativa.

Polarizao
1. Microtubulos organizam o interior da clula 2. A maioria das clulas diferenciadas so polarizadas

Polarizao
1. Microtubulos so responsveis pelo movimento de organelas, vesculas, protenas

Microtbulos (MT)

shows the microtubules in longitudinal sample

Microtbulos (MT)

MET mostrando a distribuio de microtbulos em clulas

Funes dos Microtbulos

Transporte (vesculas, organelas,

cromossomos, etc)
Formao do fuso mittico Arquitetura celular (junto com FI e Microfilamentos) Movimento axonal

Movimento de vesculas e organelas

Movimento de clios e Flagelos

MICROTUBULOS (organising centres and polarity)

Basal body
Cillia or Flagella

Migrating cell

MTOC Centrosome Centrioles

+
+ + Neurones Mitotic spindle Dividing cell +

Spindle poles

Microtbulos
Possuem polaridade - essa polaridade que possibilita protenas motoras trafegarem vesculas, organelas ou complexos proticos associados aos microtbulos num ou noutro sentido.

DINENA leva vesculas para o polo (-) CINESINA para o polo (+).

MT protenas motoras

Transporte Pelos Microtbulos

DINENA leva vesculas para o polo (-)
CINESINA leva para o polo (+)

MT protenas motoras

MT protenas motoras
1. Organelas movem-se pelos microtbulos 2. ER e Golgi so posicionado pelos microtbulos

3. Cria diferenas locais necessrios para a funo celular

Microtbulos Organizados
Tipos
Flagelos

Estruturas Localizao

9+2

Espermatozides e em protozorios

Clios
Centrolo Corpsculo basal

9+2
3x9

3x9

Clulas epiteliais do pulmo, deslocamento do vulo Todas as clulas animais; regio organizadora de microtbulos Ancoragem e origem dos clios

Clios e Flagelos
- Estruturas responsveis pela motilidade celular - Constitudos por pequenos apndices, especialmente diferenciados, que variam em nmero e tamanho.

- Se so escassos e longos recebem o nome de flagelos,

- Se numerosos e curtos so denominados clios
Cilios Clulas epiteliais do pulmo, deslocamento do vulo, Flagelos Espermatozides e em protozorios

Clios

Clios e Flagelos

Desenho mostrando as diferenas de movimentos entre o clios e o flagelo

Dinena gera movimento dos cilios e flagelos

Cilio
Micrografia eletrnica de seces transversal e vertical de um clio (arranjo em 9+2)
corpsculo basal

Centrolo
- Estruturas cilndricas, com 0,2 mm de largura e 0,4 mm de comprimento. - 9 grupos de trs microtbulos, fundidos em tripletes, formam a parede do centrolo e cada triplete se incline para dentro como as lminas de uma turbina.

Desenho esquemtico do corpsculo basal e Centrolo

Centrolo
1. formado de um par e dispostos em em um ngulo reto 2. Formam o fuso mittico para segregao dos cromossomos

Caractersticas comuns a microfilamentos e microtbulos

1) Tanto os microfilamentos como os microtbulos so constituidos por protenas globulares

2) Em ambos casos, ~ 50% da protena constituinte se encontra em forma solvel os 50% restantes em forma de filamentos.
3) Formam estruturas MUITO DINMICAS, com um intercambio rpido de subunidades entre o "pool" solvel e filamentoso. 4) Tanto os microfilamentos como os microtbulos so estruturas "polarizadas (extremos distintos).

5) As estruturas formadas por microtbulos e/ou microfilamentos, possuem a capacidade de transportar e gerar foras, sendo chamadas de citomusculatura

Vdeo

http://www.youtube.com/watch?v=uGK9CYetCvM&feature=fvwrel

Filamentos Intermedirios
So polmeros constitudos de polipeptdios fibrosos. Dimetro entre 8 e 12 nm

Parte mais estvel do Citoesqueleto

Participam: estrutura, estabilidade, sustentao, resistncia, interao celular.

Filamentos Intermedirios
Grupos heterogneos (+50) de protenas de FI Citoqueratina - clulas epiteliais, bexiga Vimentina Clulas de fibroblastos, leuccitos Neurofilamentos das clulas nervosas

Lamina - forma a lmina fibrosa que se estende sob o envelope nuclear

2. Monmeros de FI

2. Versatilidade FI

2. Formao dos FI
monmero Dimero enovelado

Tetramero antiparalelo dois tetrameros

8 protofilamentos

Como o citoesqueleto pode ser usado em biotecnologia?

Alvo para drogas

Alvo para deteco de cncer

Ao de drogas no citoesqueleto
Cochicina, Colcemida e Nocadazol inibem a polimerizao de MT inibindo a ligao nas extremidades + Vincristina e a vimblastina se agregam aos MT e levam a despolimerizao dos MT Taxol - acelera a polimerizao e estabiliza os microtbulos, impedindo a despolimerizao

Identificao de tumores atravs do citoesqueleto

Bipsias de tumores Imunocitoqumica para identificar protenas especficas dos filamentos intermedirios Identificao da origem do tumor Auxlio no direcionamento do tratamento

Obrigado pela ateno!!!

Vinicius Farias Campos fariascampos@gmail.com vcampos_ib@ufpel.edu.br