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SEPARAO DE PIGMENTOS VEGETAIS POR EXTRAO

I - INTRODUO As folhas dos vegetais contm vrios pigmentos, em particular: clorofilas, xantofilas e carotenos. Como apresentam estruturas diferentes, diferem em suas caractersticas de solubilidade e, portanto, podem ser extrados, simultaneamente, por uma mistura de solventes e posteriormente separados entre si mediante a utilizao de solventes seletivos. II - MATERIAL E REAGENTES - ter de petrleo - Metanol - Soluo de KOH em MeOH - Soluo saturada de NaCl - HCl concentrado - Nitrito de sdio - Soluo de cido sulfrico (1:4) III - PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Triturar trs ou quatro folhas de espinafre, ou de uma planta similar (que no esteja seca) em um almofariz e transferir para um erlenmeyer de 125 mL com o auxlio de uma mistura de 45 mL de ter de petrleo (p.e. 60 a 70 C ), 5 mL de ter etlico e 15 mL de metanol. Deixar esta mistura em repouso por 30 minutos e em seguida filtrar, lavando-se o resduo com um pouco da mistura extratora. Recolher o filtrado em um funil de separao e lavar com gua. OBSERVAO: No agitar demasiadamente pois poder formar emulso. Deixar o funil em repouso para separar a camada aquosa inferior. Retirar 10 mL da soluo do extrato e adicionar 5 mL de uma soluo a 10% de hidrxido de potssio em metanol e observar que na interface se forma uma camada escura (devida a saponificao das clorofilas e ). A seguir adicionar 10 mL de gua, agitar a mistura e anotar as cores da camada metanol-gua. Separar a camada orgnica superior e lavar com 10 mL de gua e em seguida com 10 mL de uma soluo saturada de cloreto de sdio. Depois extrair a xantofila, adicionando fase orgnica com um volume igual de metanol a 92%. Separar a fase metanlica e repetir uma vez mais a extrao com metanol a 92%. Na fase orgnica precipitam os carotenos. Observar as cores de cada um dos extratos. IV - PROVAS COLORIDAS Xantofila: Adicionar a 4 mL da soluo metanlica, 2 mL de cido clordrico concentrado e observar as mudanas de cores (verde brilhante, a seguir lentamente a azul pavo, depois prpura e finalmente, incolor). Carotenos: Adicionar 2 mL do extrato em ter de petrleo a uma mistura de 0,1 g de nitrito de sdio e 3 mL de soluo de cido sulfrico (1:4). - Erlenmeyers de 125 mL (03) - Erlenmeyers de 50 mL (03) - Funil de Bchner - Funil de separao - Papel de filtro - Kitasato

V - QUESTIONRIO 1. Escrever a reao de saponificao das clorofilas a e. b. 2. Por que os carotenos permaneceram na fase orgnica, isto no foram extrados pelo metanol? 3. Que so xantofilas ? D exemplo. 4. O que so carotenos? D exemplo.

V - BIBLIOGRAFIA 1. DOMINGUEZ, J.X.S. Experimentos de qumica orgnica, Mexico, Ed. Limusa, 1980. 2. FINLAY,. H.S.; WADDINGTON, D.J. Organic chemistry through experiment. London, Mills & Bonn LTDA, 1977.