ADSORPSI KOMPLEKS 188RE DENGAN AMINOMETHYLENEPHOSPHONATE PADA HIDROKSIAPATIT

Makalah ini dibuat untuk memenuhi tugas mata kuliah radiokimia yang di ampu oleh Bapak Drs. Mohammad Misbah Khunur, M.Si.

Oleh: Yulia Nur Isnaini 115090201111021 Kimia A 2011

JURUSAN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG 2013

ADSORPSI KOMPLEKS 188RE DENGAN AMINOMETHYLENEPHOSPHONATE PADA HIDROKSIAPATIT

Kazuyuki Hashimoto, * Hiromitsu Matsuoka, dan Mishiroku Izumo Departemen Riset Reaktor, Japan Atomic Energy Research Institute, Tokai-mura, Ibarakiken 319-1195, Jepang Diterima: August 23, 2001; Dalam Bentuk Akhir: November 25, 2001 Sifat adsorpsi kompleks
188

Re

yang

baru-baru

ini

dikembangkan

dengan

aminomethylenephosphonate (amp) (EDTMP-Etilenadiamina-N, N, N ', N'-tetrakis (asam methylenephosphonic), EDBMP - Ethylenediamine-N, N'-bis (asam metil-enephosphonic) dan NTMP - Nitrilotris (asam methylenephosphonic)) pada hidroksiapatit telah diselidiki. Adsorpsi kompleks
188

Re ini sangat dipengaruhi oleh pH dan kekuatan ion dalam larutan.

Koefisien Adsorpsi (ml/g), yang didefinisikan sebagai rasio konsentrasi kompleks per unit berat hidroksiapatit dengan konsentrasi dalam satuan volume larutan, meningkat dengan pH menurun dan kekuatan ion. Pengamatan ini menunjukkan bahwa salah satu penyebab dari adsorpsi
188 188

Re-amp dianggap menjadi gaya elektrostatik antara kompleks negatif

188 188 188 188

Re-amp

dan permukaan posistif HAP. Afinitas adsorbs kompleks dengan urutan Re-EDBMP <
188

Re-amp untuk HAP meningkat

Re-NTMP <

Re-EDTMP. Selanjutnya, koefisien

adsorpsi pembawa-bebas

Re-EDTMP adalah lebih besar dari pembawa-tambahan satu di

188

bawah kondisi yang sama. Dari perbandingan rinci pengaruh efek konsentrasi pembawa Re pada koefisien adsorpsi dari Re-EDTMP dengan analisis struktural dengan HPLC, kami

menyimpulkan bahwa efek pembawa Re pada koefisien adsorpsi disebabkan oleh distribusi yang berbeda dari komponen tambahan kompleks. Pendahuluan Renium-186 (186Re: T1/2, 89,24 jam; E, 1,07 MeV, E, 137 keV) dan renium-188 (188Re: T1/2, 17,005 jam; E, 2.12 MeV; E, 155 keV) yang menarik saat ini untuk aplikasi terapeutik pada bidang kedokteran nuklir terutama untuk pengobatan paliatif nyeri tulang metastatik, karena energi partikel beta dan partikel sinar gamma yang cocok untuk penggambaran (imaging).1-3 Renium-186 dengan pembawa (carrier) dapat diproduksi dalam reaktor nuklir, Namun 188Re dapat diperoleh pada tingkat pembawa bebas (carrier-free) dari generator 188W 188

Re-EDTMP campuran antara pembawa-bebas dan pembawa

188

Re.4 Ligan diphosphonate seperti MDP (asam methylenediphosphonic), HMDP (asam 199m

hydroxymethylene-1,1-diphosphonic) diberi label dengan sebagai agen penggambaran tulang. Preparasi dari diphosphonate termasuk MDP,
5,6 186

Tc telah banyak digunakan

188

Re dan Kompleks

Re dengan ligan

HEDP (asam 1-hydroxyethylidene-1,1-diphosphonic),7-13

AEDP (asam amino-1-ethylenediphosphonic),14 APD (asam 3-amino-1-hydroxypropylidene1,1-bisphosphonic)15 dan ABP (4 - amino-1-hydroxybutylidene-1 asam,1-bisphosphonic)16 telah dilaporkan dan mereka ditemukan untuk menjadi agen penggambaran tulang yang baik mirip dengan 99mTc diphosphonates. Di antara mereka, 186Re-HEDP dilaporkan menunjukkan metastatis paliasi yang paling efektif untuk nyeri tulang.17-22 EDTMP, turunan aminomethylenephosphonate, diberi label dengan
153

Sm juga telah terbukti menjadi agen

menjanjikan untuk pengobatan paliatif skeletal metastases yang efektif dan meluas.23-26 Studi in vitro tentang sifat adsorpsi senyawa berlabel dengan ligan yang mengandung fosfonat pada tulang hanya terbatas seperti pada 99mTc-diphosphonate,27-31 timah (117m,119mSn) - diphosphonate32 dan 153Sm-EDTMP.33,34 Penelitian adsorpsi pada kompleks 186/188Re belum dilaporkan secara lebih jauh. Dalam makalah sebelumnya,35 kami menentukan kondisi optimum untuk sintesis kompleks
188

Re dengan aminomethylenephosphonate (EDTMP,

188

EDBMP dan NTMP) seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1. Pada makalah ini, kami menggambarkan sifat adsorpsi kompleks Re baru dikembangkan dengan

aminomethylenephosphonate pada hidroksiapatit, yang merupakan unsur utama dari jaringan tulang keras. Pengaruh getaran waktu, pH dan kekuatan ion pada adsorpsi diselidiki dari aspek dasar. Perbedaan sifat adsorpsi antara pembawa-bebas (cf-) dan pembawa-tambahan (ca-) 188Re-EDTMP juga dipelajari.

Gambar 1. Struktur ligan aminomethylenephosphonate yang digunakan dalam penelitian ini

Experimen Produksi Generator

188

W/188Re. Biasanya 25-35 mg

188

186

W yang diperkaya sebagai

WO3 (99,79% pengayaan: euriso-atas) adalah diiradiasi selama 26-52 hari di JAERI JMTR (neutron termal fluks 2,7 1014 n cm-2 s-1). Generator W/188Re disiapkan oleh sistem
188

kolom alumina.4 iradiasi WO3 dilarutkan dalam 2 M NaOH. PH larutan

W disesuaikan

menjadi sekitar 2 menggunakan HCl. Larutan ini adalah diabsorp ke kolom alumina (10 mm x 60 mm; BioRad, AG-4, 100-200 mesh), yang dikondisikan dengan 0,01 M HCl. Kolom kemudian dicuci dengan garam. Renium-188 dielusi dengan normal saline setelah kesetimbangan antara
188 188 188 188

W dan

Re hampir tercapai. Bentuk kimia dari

Re yang
188

diperoleh dari generator diperiksa dengan kromatografi kertas pada 0,9% garam. Bentuk kimia dari Re ditemukan sebagai ion perrhenate (188ReO4-) dan bentuk bebas dari W. Larutan renium-188 (2 105-1 106 Bq ml-1) diperoleh dari generator dalam larutan garam dan digunakan untuk tujuan pelabelan tanpa proses pemurnian lebih lanjut. Sintesis kompleks
188

Re-Aminomethylenephosphonate

(188Re-amp).

Turunan

Aminomethylenephosphonate (EDTMP, EDBMP dan NTMP) yang dibeli dari Laboratorium Dojindo, Jepang. Semua bahan kimia lain yang digunakan adalah dari reagen grade yang terjamin. Untuk larutan 0,2 M aminomethylenephosphonate, 38 mg/ml (0,216 M) larutan asam l-askorbat, 3 M HCl untuk penyesuaian pH, larutan
188

Re dari Generator, dan 38 mg/ml

(0,168 M) larutan timah (II) klorida dihidrate (0,6 M HCl) ditambahkan. Konsentrasi akhir aminomethylenephosphonate, asam l-askorbat dan timah (II) klorida dihidrat dalam campuran reaksi adalah 0,1 M, 2,85 mg/ml dan 0,57 mg/ml. PH larutan adalah 0,8-0,9. Konsentrasi akhir Re bervariasi dari tingkat pembawa-bebas 20 g Re/ml (1,074 10-4 M) dengan menambahkan NH4ReO4 ke dalam larutan
188

Re. Campuran reaksi diaduk dengan

188

kuat dan dibiarkan bereaksi dalam air mendidih selama 30 menit. Pembentukan
188 188

Re-amp

diperiksa oleh silika gel TLC dengan aseton seperti dijelaskan dalam paper sebelumnya.35 Kompleks Re-amp diperoleh yield lebih dari 95%. Distribusi Re dalam TLC diukur

dengan sistem imaging radioanalitik (AMBIS-100). Studi adsorpsi Kompleks 188Re-amp pada Hidroksiapatite. Hidroksiapatite untuk kromatografi fase cair digunakan sebagai adsorben, disediakan oleh Wako Pure Chemical Co sebagai Ca10(PO4)6(OH)2. 100 mg HAP dalam botol dihentikan secara ultrasonik dalam 1 ml HCl, air suling, natrium asetat atau larutan NaOH untuk menyesuaian pH dan 0,5 ml 4 M larutan NaCl untuk menyesuaian kekuatan ion. Kemudian ditambahkan 0,5 ml larutan kompleks
188

Re.

Konsentrasi aminomethylenephosphonate dalam larutan akhir adalah 2,5 10-2 M. botol itu dikocok secara mekanis dalam water bath pada suhu 37C. Pada interval waktu yang teratur, campuran disentrifugasi dan aliquot dari larutan diambil untuk pengukuran radioaktivitas. Radioaktivitas kompleks 188Re sendiri dalam larutan itu dikoreksi oleh fraksi kompleks 188Re yang diukur dengan TLC silika gel. Koefisien adsorpsi (ml/g), yang didefinisikan sebagai rasio konsentrasi kompleks per satuan berat hidroksiapatit dengan konsentrasi satuan volume larutan, ditentukan dengan mengukur radioaktivitas dari larutan dan larutan standar Radioaktivitas
188 188

Re.

Re diukur dengan Metode Cherenkovcounting menggunakan cairan

188

scintillation counter (Beckman LS3801).36 Analisis HPLC Re-EDTMP. Cairan kromatografi yang digunakan adalah
188

pemisahan Waters 2690 dilengkapi dengan detector Waters 996 photodiode array dan detector radio-HPLC (Packard Radiomatic 515TR). Re-EDTMP dianalisis dengan kromatografi pasangan-ion fase terbalik (Hypersil BDS-5 C18, 4,6 mm 150 mm) menggunakan sistem gradien terdiri dari 0.008 M tetrabutil amonium hidroksida (TBA) / 10% metanol (pH 6,0) (pelarut A) dan 0,008 M TBA / 60% metanol (pH 6,0) (pelarut B). Laju aliran adalah 1,0 ml/menit dan gradien didefinisikan oleh hal-hal berikut (min- % B): 00, 5-85, 30-100. Hasil dan Pembahasan. Fraksi 188Re-EDTMP teradsorpsi pada HAP meningkat dengan berjalannya waktu dan mencapai nilai hampir konstan setelah 24 jam tanpa kesalahan eksperimental, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2. Untuk percobaan adsorpsi isoterm, digunakan jangka waktu 24 jam digunakan. Dalam paper sebelumnya,35 stabilitas
188 188

Re-amp pembawa-bebas (cf-)

ditemukan lebih rendah daripada 188Re-amp pembawa-tambah (ca-). Namun, dekomposisi cfRe-EDTMP nyaris tak diamati selama percobaan, seperti yang ditunjukkan pada Gambar

3. yaitu kurang dari 3-4% bahkan setelah 24 jam. Kurva huhungan konsentrasi 188Re-EDTMP dan adsorben dalam larutan

menunjukkan isoterm linear spserti ditunjukkan pada Gambar 4. Linearitas dalam kurva setara dengan koefisien adsorpsi pada kisaran konsentrasi kompleks dalam percobaan ini.

Gambar 2. Variasi waktu khas di adsorpsi 188 Re-EDTMP pembawa-bebas (cf-) dan pembawa-tambah (ca-) (pH 3,5, HAP 100 mg, I = 1,0).

Gambar 3. Spesi kimia selama percobaan 188 adsorpsi menggunakan Re-EDTMP pembawa-bebas (pH 3,5-3,6, HAP 100 mg, I = 1,0).

Pengaruh pH dan kekuatan ion pada koefisien adsorpsi telah diselidiki. Gambar 5 menunjukkan pengaruh pH pada koefisien adsorpsi. Koefisien adsorpsi meningkat dengan menurunnya pH. Hasil ini sesuai dengan perilaku adsorpsi
99m

Tc (Sn) pirofosfat pada

Ca3(PO4)2.31 Telah dilakukan observasi pula bahwa adsorpsi 99mTc (Sn) pirofosfat pada pH 4,0 lebih tinggi dari pada pH 7,4. PH dipengaruhi oleh muatan permukaan (potensial zeta) dari HAP. Permukaan HAP adalah heterogen, dengan muatan positif dan muatan negatif, tetapi densitas muatan tergantung pada pH. Bila pH lebih tinggi dari muatan nol (PZC), potensi zeta akan negatif dan muatan negatif pada permukaan HAP akan mendominasi, ketika pH lebih rendah dari PZC, potensi zeta akan positif dan muatan positif pada HAP akan mendominasi. PZC pada HAP telah ditemukan berada diantara pH 6.4 dan 8.5.37-41 Oleh karena itu, muatan HAP dalam range pH (3-4,5) dari penelitian ini akan positif karena pH lebih rendah dari PZC tersebut. Mempertimbangkan bahwa Kompleks
188

Re-amp memiliki
188

muatan negatif dianalisis dengan elektroforesis,35 salah satu penyebab dari adsorpsi

Re-

amp dianggap sebagai gaya elektrostatik antara kompleks negative 188Re-amp dan permukaan positif HAP Gambar 6 menunjukkan pengaruh kekuatan ion pada koefisien adsorpsi. Koefisien adsorpsi menurun dengan meningkatnya kekuatan ion. Hasil ini juga menunjukkan bahwa

adsorpsi adalah elektrostatik. Artinya, koefisien adsorpsi menurun karena efek perisai elektrostatiki dan adsorpsi kompetitif antara keduanya dengan menambahkan NaCl.

Gambar 4. Adsorpsi isoterm 188Re-EDTMP (konsentrasi akhir Re:1,3610-11 mol/l (pembawa-bebas, 92,5 kBq/ml) ~ 2.8510-5 mol/l). Koefisien korelasi R = 0.997.

Gambar 6. Pengaruh kekuatan ion pada koefisien adsorpsi 188Re-EDTMP (pH 3,6, HAP 100 mg, 24 h).

Gambar 5. Pengaruh pH pada koefisien adsorpsi 188Re-EDTMP (HAP 100 mg, I = 1,0, 24 h).

Gambar 7. Perbandingan koefisien adsorpsi dari pembawa-tambahan (20 mg Re ml-1) 188Re-amp kompleks (HAP 100 mg, I = 1,0, 24 h).
188

Perbandingan koefisien adsorpsi dari kompleks 7. Koefisien adsorpsi meningkat dengan urutan:
188 188

Re-amp ditunjukkan pada Gambar

188

Re-EDBMP <

Re-NTMP <

188

Re-

EDTMP dibawah kondisi yang sama. Namun, hal ini menunjukkan bahwa koefisien adsorpsi dari Re-amp kompleks juga dipengaruhi oleh kelebihan aminomethylene-fosfonat dalam

larutan. Dua reaksi adsorpsi kompetitif yang terjadi dalam percobaan ini. Salah satunya adalah adsorpsi antara
188

Re-amp dan HAP, yang lain adalah adsorpsi antara

188

aminomethylenephosphonate dan HAP. Dalam rangka untuk memperkirakan pengaruh aminomethylenephosphonate pada adsorpsi ke HAP, koefisien adsorpsi kompleks
188

Re

diukur dengan menambahkan larutan aminomethylenephosphonate secara berkelanjutan. Koefisien adsorpsi Re-amp menurun sejalan dengan penambahan larutan aminomethylenephosphonate. Besarnya penurunan adalah dengan urutan EDBMP NTMP <EDTMP, maka, afinitas adsorpsi aminomethylenephosphonate untuk HAP akan meningkat dengan urutan EDBMP NTMP <EDTMP. Dengan mempertimbangakan hal tersebut, maka afinitas adsorpsis dari kompleks 188Re-amp untuk HAP meningkat dengan urutan EDBMP <188Re-NTMP <188Re-EDTMP. Urutan afinitas adsorpsi kompleks diperoleh dalam
188 188 188

Re-

Re-amp yang pada

penelitian

ini

sesuai

dengan

jumlah

gugus

fosfonat

aminomethylenephosphonate, mendukung bahwa interaksi antara gugus-gugus fosfonat pada kompleks Re-amp dan ion kalsium pada permukaan HAP adalah salah satu faktor utama dalam hal penyerapan afinitas 188Re-amp untuk HAP.

Gambar 8. Pengaruh konsentrasi pembawa pada koefisien adsorpsi (HAP 100mg, pH 3,6, 24 h).

188

Re-EDTMP

Seperti ditunjukkan dalam Gambar 5 dan 6, koefisien adsorpsi pembawa-bebas 188ReEDTMP adalah lebih besar dari pembawa-tambah satu (20 ug / ml) di bawah kondisi yang

sama. Dari garis linear isoterm seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4, koefisien adsorpsi dari Kompleks 188Re harus bebas dari konsentrasi pembawa Re. Untuk memperjelas efek pembawa, pengaruh konsentrasi pembawa Re pada koefisien adsorpsi dari EDTMP dilakukan secara
188

Re-

rinci.

Koefisien adsorpsi akan konstan dalam kisaran dari pembawa-bebas untuk 0.002 g/ml, tetapi menurun dengan meningkatnya konsentrasi Re pembawa dalam sampel
188

Re-EDTMP lebih dari

0,002 g/ml sampai 20 g / ml, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 8. Kompleks Reniumdiphosphonate,

serta kompleks teknesium, dianggap sebagai campuran kompleks polimer yang mengandung timah (Sn) dengan analisis HPLC5,8 dan data EXAFS.42 Dan rasio komponen teknesium-

diphosphonates diketahui tergantung pada kondisi pembentukan seperti pH, penambahan diphosphonate pembawa, dan konsentrasi perbedaan Gambar 9. Pengaruh konsentrasi pembawa pada iondipasangkan fase terbalik HPLC kromatogram 188ReEDTMP.

pereduksi (SnCl2 atau NaBH4),43-46 Dan, analisis 188Re-EDTMP oleh kromatografi pasanganion fase terbalik menunjukkan bahwa kromatogram kompleks pembawa-bebas berbeda dari yang kompleks pembawa-tambahan.47 Pengaruh konsentrasi Re pada kromatogram
188

Re-

EDTMP telah diperiksa oleh kromatografi pasangan-ion fase terbalik, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 9. Kromatogram hampir konstan dalam rentang 0,002 g/ml untuk pembawa-bebas, tapi berubah secara bertahap dengan meningkatnya konsentrasi pembawa Re lebih dari 0,002 g/ml sampai 20 g/ml. Perubahan kromatogram berhubungan dengan perubahan koefisien adsorpsi. Sebagai kesimpulan, pengaruh konsentrasi Re pada koefisien

adsorpsi disebabkan oleh distribusi yang berbeda dari komponen dalam campuran EDTMP antara kompleks pembawa-bebas dan pembawa-tambah.

188

Re-

Acknowledgement. Para penulis berterima kasih kepada Dr Tsutomu Sekine dari Universitas Tohoku untuk diskusi nya dalam penelitian ini.

Referensi (1) V. J. Lewington, Eur. J. Nucl. Med. 20, 66 (1993). (2) L. F. Mausner and S. C. Srivastava, Med. Phys. 20, 503 (1993). (3) H. Vera-Ruiz, IAEA Bulletin 35, 24 (1993). (4) A. P. Callahan, D. E. Rice, and F. F. Knapp, Jr., NucCompact 20, 3 (1989). (5) M. Eisenhut, Int. J. Appl. Radiat. Isot. 33, 99 (1982). (6) K. Hashimoto, S. Bagiawati, M. Izumo, and K. Kobayashi, Appl. Radiat. Isot. 47, 195 (1996). (7) L. Mathieu, P. Chevalier, G. Galy, and M. Berger, Int. J. Appl. Radiat. Isot. 30, 725 (1979). (8) E. Deutsch, K. Libson, J-L. Vanderheyden, A. R. Ketring, and H. R. Maxon, Nucl. Med. Biol. 13, 465 (1986). (9) H. R. Maxon, E. A. Deutsch, S. R. Thomas, K. Libson, S. J. Lukes, C. C. Williams, and S. Ali, Radiology 166, 501 (1988). (10) J. M. H. de Klerk, A. D. van het Schip, B. A. Zonnenberg, A. van Dijk, M. P. M. Stokkel, S. H. Han, G. H. Blijham, and P. P. van Rijk, J. Nucl. Med. 35, 1423 (1994). (11) Y. Arano, M, Ono, K. Wakisaka, T. Uezono, H. Akisawa, Y. Motonari, Y. Makata, J. Konishi, and A. Yokoyama, Radioisotopes 44, 514 (1995). (12) H. S. Bai, X. H. Jin, F. Wang, J. Du, Y. M. Liu, and D. M. Chen, J. Radioanal. Nucl. Chem. Art. 206, 43 (1996). (13) K. Hashimoto, Appl. Radiat. Isot. 49, 351 (1998). (14) L. Qingnuan, Z. Xiaodong, S. Rong, and L. Wenxin, Appl. Radiat. Isot. 53, 993 (2000). (15) S. Alyafei, K. Tomiyoshi, M. Sarwar, K. Ahmed, H. Zhang, N. Oriuchi, T. Inoue, and K. Endo, Nucl. Med. Comm. 20, 551 (1999). (16) C. Arteaga de Murphy, G. Ferro-Flores, M. Pedraza- Lpez, L. Melndez-Alafort, B. Y. Croft, Flor de Mara Ramrez, and J. Padilla, Appl. Radiat. Isot. 54, 435 (2001).

(17) H. R. Maxon III, L. E. Schroder, S. R. Thomas, V. S. Hertzberg, E. A. Deutsch, H. I. Scher, R. C. Samaratunga, K. F. Libson, C. C. Williams, J. S. Moulton, and H. J. Schneider, Radiology 176, 155 (1990). (18) J. M. S. P. Quirijnen, S. H. Han, B. A. Zonnenberg, J. M. H. de Klerk, A. D. van het Schip, A. van Dijk, H. F. J. ten Kroode, G. H. Blijham, and P. P. van Rijk, J. Nucl. Med. 37, 1511 (1996). (19) S. H. Han, B. A. Zonnenberg, J. M. H. de Klerk, J. M. S. P. Quirijnen, A. D. van het Schip, A. van Dijk, G. H. Blijham, and P. P. van Rijk, J. Nucl. Med. 40, 639 (1999). (20) R. Sciuto, A. Tofani, A. Festa, D. Giannarelli, R.Pasqualoni, and C. L. Maini, J. Nucl. Med. 41, 647 (2000). (21) H. Kolensnikov-Gauthier, P. Carpentier, P. Depreux, P. Vennin, A. Caty, and C. Sulman, J. Nucl. Med. 41, 1689 (2000). (22) W. F. Goeckeler, B. Edwards, W. A. Volkert, R. A. Holmes, J. Simon, and D. Wilson, J. Nucl. Med. 28, 495 (1987). (23) A. Singh, R. A. Holmes, M. Farhangi, W. A. Volkert, A. Williams, L. M. Stringham, and A. R. Ketring, J. Nucl. Med. 30, 1814 (1989). (24) J. C. Lattimer, L. A. Corwin, Jr., J. Stapleton, W. A. Volkert, G. J. Ehrhardt, A. R. Ketring, S. K. Anderson, J. Simon, and W. F. Goeckeler, J. Nucl. Med. 31, 1316 (1990). (25) C. Collins, J. F. Eary, G. Donaldson, C. Vernon, N. E. Bush, S. Petersdorf, R. B. Livingston, E. E. Gordon, C. R. Chapman, and F. R. Appelbaum, J. Nucl. Med. 34, 1839 (1993). (26) A. S. Alberts, S. W. Brighton, P. Kempff, W. K. Louw, A. V. Beek, V. Kritzinger, H. P. Westerink, and A. J. van Rensburg, J. Nucl. Med. 36, 1417 (1995). (27) A. J. Tofe and M. D. Francis, J. Nucl. Med. 15, 69 (1974). (28) A. van Langevelde, O. M. J. Driessen, E. K. J. Pauwels, and C. W. Thesingh, Eur. J. Nucl. Med. 2, 47 (1977). (29) M. D. Francis, D. L. Ferguson, A. J. Tofe, J. A. Bevan, and S. E. Michaels, J. Nucl. Med. 21, 1185 (1980). (30) M. W. Billinghurst, D. Jette, and E. Somers, Int. J. Appl. Radiat. Isot. 32, 559 (1981). (31) J. Kroesbergen, A. M. P. van Steijn, W. J. Gelsema, and C. L. de Ligny, Int. J. Nucl. Med. Biol. 12, 411 (1986). (32) R. A. M. J. Claessens and Z. I. Kolar, Langmuir 16, 1360 (2000). (33) D. Chirby, S. Franck, and D. E. Troutner, Appl. Radiat. Isot. 39, 495 (1988).

(34) L. Shunzhong, Q. Jian, P. Manfei, L. Zhonglin, Z. Pengji, and F. Yibei, Nucl. Sci. Tech. 6, 241 (1995). (35) K. Hashimoto, Appl. Radiat. Isot. 51, 307 (1999). (36) K. N. Kushita and J. Du, Appl. Radiat. Isot. 49, 1069 (1998). (37) P. Somasundaran and Y. H. C. Wang, in Adsorption on and Surface Chemistry of Hydroxyapatite, edited by D. N. Misra (New York, USA: Plenum Press, 1984), p. 129. (38) H. Tanaka, Y. Nuno, S. Irie, and S. Shimomura, Talanta 39, 893 (1992). (39) P. Ducheyne, C. S. Kim, and S. R. Pollack, J. Biomed. Mater. Res. 26, 147 (1992). (40) T. V. Vasudevan, P. Somasundaran, C. L. Howie-Meyers, D. L. Elliott, and K. P. Ananthapadmanabhan, Langmuir 10, 320 (1994). (41) D. T. H. Wassell, R. C. Hall, and G. Embery, Biomaterials 16, 697 (1995). (42) R. C. Elder, J. Yuan, B. Helmer, D. Pipes, K. Deutsch, and E. Deutsch, Inorg. Chem. 36, 3055 (1997). (43) S. Tanabe, J. P. Zodda, E. Deutsch, and W. R. Heineman, Int. J. Appl. Radiat. Isot. 34, 1577 (1983). (44) M. V. Mikelson and T. C. Pinkerton, Anal. Chem. 58, 1007 (1986). (45) J. P. Zodda, S. Tanabe, W. R. Heineman, and E. Deutsch, Appl. Radiat. Isot. 37, 345 (1986) (46) G. J. de Groot, H. A. Das, and C. L. de Ligny, Appl. Radiat. Isot. 38, 611 (1987). (47) K. Hashimoto, Abstract of Papers, The Second Japanese- Russian Seminar on Technetium, Shizuoka, Japan, Nov. 29-Dec. 2, 1999; paper 3006.