UNIDAD I. ASPECTOS BSICOS DE LABORATORIO DE HEMATOLOGA Prctica #1 Control de calidad en hematologa. Determinacin de precisin y exactitud. PREGUNTAS DE GUA 1.

- Qu es control de calidad? Son todos los mecanismos, acciones y herramientas que efectuamos para detectar la presencia de errores, iniciando de ese modo una accin correctiva adecuada. 2.- En qu consisten las fases preanaltica, analtica y postanaltica del control de calidad en un laboratorio clnico? Fase pre-analtica: Abarca todas las acciones desde que el mdico solicita el examen, las indicaciones que debe seguir el paciente, la correcta seleccin de los materiales, la toma de la muestra en el laboratorio o piso de un hospital, su transporte correcto, almacenamiento hasta el momento del anlisis y manejo, centrifugacin y separacin segn sea el caso de la muestra. Fase analtica: Comprende todas las acciones para la realizacin del anlisis, desde la seleccin de mtodos y equipos de medicin, calibracin de los mismos, mantenimiento, el sistema de control de calidad para la deteccin de los errores analticos posibles, las acciones correctivas da a da, control de la precisin y exactitud analticas, y el desarrollo correcto de la tcnica de medicin. Fase post-analtica: Incluye confirmacin de los resultados, intervalos o rangos de referencia de la poblacin, la puntualidad o prontitud en la entrega de los resultados, el informe del laboratorio el formato establecido y la confidencialidad de la informacin de los resultados. 3.- Cul es la diferencia entre una solucin estndar primaria (o calibrador primario) y una secundaria? Una solucin estndar o disolucin estndar es una disolucin que contiene una concentracin conocida de un elemento o sustancia especfica, llamada patrn primario (sustancia utilizada como referencia al momento de hacer una valorizacin o estandarizacin) que, por su especial estabilidad, se emplea para valorar la concentracin de otras soluciones, como las disoluciones valorantes, mientras que la solucin estndar secundaria es aquella que requiere del patrn primaria para conocer su concentracin exacta. 4.- Qu es una muestra control? Es una muestra de composicin/concentracin conocida, que ayuda a determinar la precisin de las pruebas. 5.- Qu significado tiene el coeficiente de variacin? Sirve para comparar variables que estn a distintas escalas pero que estn correlacionadas estadsticamente y sustantivamente con un factor en comn. Es decir, ambas variables tienen una relacin causal con ese factor. 6.- Cul es la diferencia entre la precisin y la exactitud analtica?

La precisin analtica es el grado de aceptacin estadstica entre la concentracin analizada y la concentracin real mientras que la exactitud analtica es el grado de concordancia entre el resultado y un valor de referencia certificado. Prctica #2 Uso de anticoagulantes, obtencin de muestra de sangre y preparacin de frotis. 1.- Qu son los anticoagulantes? Es una sustancia endgena o exgena que interfiere o inhibe la coagulacin de la sangre, creando un estado prohemorrgico. 2.- En qu caso se utilizan? Los anticoagulantes pueden usarse en la prevencin o en el tratamiento de cuadros trombticos o en el laboratorio de hematologa para conservarse adecuadamente para la realizacin de posteriores pruebas. 3.- Cules son los anticoagulantes ms utilizados en el laboratorio y cul es su mecanismo de accin? Anticoagulantes Slidos EDTA.- Es la sal disdica o tripotsica del cido etilendiaminotetractico; la sal disdica (Na2EDTA) es menos soluble que la sal tripotsica (K3EDTA). Estos compuestos realizan su accin a travs de un efecto quelante sobre el calcio, al fijarlo impiden su activacin y, por ende, la coagulacin sangunea. Anticoagulante de Wintrobe (Mezcla de Oxalatos).- Es una mezcla de oxalato de amonio y potasio. Acta por precipitacin del calcio y es fcil de preparar. Se emplea en forma de polvo en proporcin de 2 de oxalato de amonio por 1 de oxalato de potasio. Heparina.- Es un anticoagulante fisiolgico que acta impidiendo que la protrombina se transforme en trombina. Los frotis realizados con muestras sanguneas anticoaguladas con heparina producen en las tinciones panpticas un color azulado y una pseudovacuolizacin celular por lo tanto no se lo recomienda para tal fin. Anticoagulantes Lquidos Citrato trisdico.- Acta impidiendo que el calcio se ionice, evitando as la coagulacin. 4.- Cmo y para qu pruebas hematolgicas deben usarse cada uno de los anticoagulantes? EDTA.- Este anticoagulante se utiliza fundamentalmente para la realizacin de recuentos celulares, sobre todo en los autoanalizadores y permite adems la realizacin del hematocrito y del frotis sanguneo hasta dos horas despus de la extraccin de la muestra al mismo tiempo que impide la aglutinacin de las plaquetas. Anticoagulante de Wintrobe: Anticoagulantes de eleccin para tiempo de protrombina (TP) y tiempo de tromboplastina parcial (TTP). Heparina.- Se utiliza para las gasometras. Citrato trisdico.-Para realizar pruebas de hemostasia en una proporcin sangre: anticoagulante 9:1; as como para la velocidad de eritrosedimentacin en una proporcin sangre: anticoagulante 4:1.

5.- Cules son las posibles fuentes de error al utilizar un anticoagulante?

o o o

Las extensiones de sangre deben prepararse inmediatamente. Si en el plazo de 2-3 horas no van a llevarse a cabo otras determinaciones, la sangre debe refrigerarse a 4 C. Si la sangre se mantiene a T ambiente, es probable que entre 6- 24 horas se hinchen los eritrocitos elevndose el hematocrito y el VCM, disminuyendo la CHCM y la VSG. Durante 24 horas no se modifican: recuentos, hemoglobina, hematocrito y los indices eritrocitarios, si la sangre se ha mantenido incoagulada en EDTA y se ha almacenado a 4 C Homogenizar bien la sangre con anticoagulante

Frotis Sanguneo 6.- Al hacer un frotis en portaobjetos, de qu factores depende su grosor? Del dimetro de la gota de sangre colocada sobre el portaobjetos Al momento de realizar de forma el deslizamiento de la gota de sangre, hacerlo demasiado rpido o muy lento y de manera no muy uniforme. Efectuar el frotis desde un ngulo mayor a 45.

7.- Menciona las ventajas y desventajas de los frotis hechos en portaobjetos Ventajas: Son fciles de manipular Se rompen menos Se pueden rotular fcilmente No requieren montaje y pueden archivarse de inmediato Desventajas: No permite una distribucin muy homognea de los glbulos rojos 8.- Menciona las ventajas y desventajas de los frotis hechos en cubreobjetos Ventajas: Permite una distribucin ms homognea de los glbulos rojos. Desventajas: Son de manejo cuidadoso Se rompen con enorme facilidad ante el menor aumento de fuerza en su manipulacin Es difcil rotularlos 9.- Cules son los principales errores que pueden cometerse al hacer frotis sanguneos? Pueden presentarse los siguientes errores al momento de ser preparados de forma incorrecta, interfiriendo en la observacin microscpica: Excesiva longitud y escaso grosor o escasa longitud y excesivo grosor. Esto se debe a un inadecuado tamao de la gota de sangre o/y a un error en la velocidad o/y a un fallo en el ngulo de extensin de la misma. Presencia de escalones o estras. Esto est ocasionado por una falta de uniformidad en el deslizamiento de la gota.

Existencia de abundantes zonas redondeadas que carecen de sangre. Esto se produce por la presencia de restos de grasa o de suciedad en el porta. Extremo final excesivamente dentado.

UNIDAD II. ERITROCITOS Prctica#3 Eritrosedimentacin (Valoracin de sedimentacin globular). 1. Qu es la eritrosedimentacin? La precipitacin de los eritrocitos en un tiempo determinado (1-2 horas), que se relaciona directamente con la tendencia de los glbulos rojos hacia la formacin de cmulos (as como a la concentracin plasmtica de protenas (globulinas y fibringeno) con el solo agregado de anticoagulante. La capacidad y la velocidad de formar estos cmulos depende de la atraccin de la superficie de los glbulos rojos. Los principales usos de la medicin son: 1. Para detectar procesos inflamatorios o infecciosos. Como discriminador o reactante de presencia de enfermedad. 2. Como control de la evolucin de ciertas enfermedades crnicas infecciosas. 3. Para detectar procesos crnicos inflamatorios ocultos o tumores. El valor de la tcnica no es muy sensible y adems poco especfica, por s sola tiene poco valor y se debe asociar a otros estudios para poder orientar un diagnstico. 2. Cules son sus fases o etapas? La primera es la fase de agregacin que refleja el periodo en el cual los eritrocitos forman rouleaux (rosarios o cadenas de hemates) La segunda fase es la formacin de esferas de agregados de tamao uniforme y, posteriormente. La tercera fase es la sedimentacin de las esferas de agregados, tambin llamada de decantacin o de precipitacin, en la parte inferior del tubo. encuentran valores elevados o disminuidos de

3. En qu casos se eritrosedimenatcin?

Si las protenas del grupo de las globulinas est elevado con respecto a la albmina la velocidad se eleva. Tambin una alta proporcin de fibringeno puede provocar esta elevacin. Valores aumentados pueden significar: Anemia, Inflamacin, Embarazo, Fiebre reumtica, Tumores malignos, Paraproteinemia, Mieloma, Enfermedad de Waldenstrn, Artritis reumatoidea, Enfermedad de Kawasaki, Enfermedad infecciosa bacteriana. Los valores pueden encontrarse disminuidos en :

Descenso de protenas en el plasma (por problemas hepticos renales) Disminucin del fibringeno Fallos cardiacos Policitemia Muestra coagulada Procesar muestra > 2 horas Hipoalbuminemia Hiperviscosida

4. Cules son las posibles fuentes de error al realizar esta determinacin? La obtencin mediante un pinchazo de la vena puede producir cierto dolor. La posible dificultad en encontrar la vena apropiada puede dar lugar a varios pinchazos. Aparicin de un hematoma (moratn o cardenal) en la zona de extraccin, suele deberse a que la vena no se ha cerrado bien tras la presin posterior y ha seguido saliendo sangre produciendo este problema. Puede aplicarse una pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona. Inflamacin de la vena (flebitis), a veces la vena se ve alterada, bien sea por una causa meramente fsica o por que se ha infectado. Se deber mantener la zona relajada unos das y se puede aplicar una pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona. Si el problema persiste o aparece fiebre deber consultarlo con su mdico.

Prctica #4 Hematocrito. 1. Qu es el hematocrito? El hematocrito es el porcentaje ocupado por glbulos rojos del volumen total de la sangre. Los valores medios varan entre 42%-52% en los hombres, y 37%-47% en las mujeres. Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiolgicos, como la edad y la condicin fsica del sujeto. Es una parte integral del hemograma, junto con la medicin de la hemoglobina, y el conteo de leucocitos y plaquetas. 2. En qu casos se encuentran valores elevados o disminuidos del hematocrito? Valores altos: Se pueden asociar a deshidratacin o hipoxia. Patologas como la policitemia vera consisten en una desmedida produccin de glbulos rojos. En casos de enfermedad pulmonar obstructiva crnica, la hipoxia genera un aumento en la produccin de eritropoyetina por el rin, lo que puede resultar en un hematocrito alto. Valores bajos: La disminucin de glbulos rojos en la sangre es una anemia. Se puede relacionar con diferentes condiciones, como hemorragia o leucemia. Hay numerosos factores que pueden contribuir a desarrollar una anemia, como la baja en la ingesta de hierro, o pacientes con enfermedad renal crnica, que no generan suficiente eritropoyetina para estimular la produccin de glbulos rojos en la mdula sea. 3. Cules son las posibles fuentes de error al realizar esta determinacin?

Empleo de una relacin sangre-anticoagulante incorrecta. El exceso de EDTA produce un descenso del hematocrito.

Extraccin de sangre en condiciones defectuosas Oxigenacin excesiva de la sangre. Homogeneizacin defectuosa de la sangre. Empleo de tubos sucios o hmedos. Llenado de los tubos en forma insuficiente. Recalentamiento de la centrifuga.

Prctica #5 Citometria hemtica. A) RECUENTO DE GLBULOS ROJOS 1. Cules pueden ser las diversas fuentes de error en esta determinacin? Esta determinacin est desarrollada por hombres y como tal esta sujeta a errores como cualquier tipo de actividad humana. As para determinar esta cantidad se procede al recuento de Glbulos Rojos de una manera tal que se cuentan varias veces para as obtener un nmero ms acertado. As que el recuento de estas clulas puede ser considerado la parte ms propensa a errores. Exceso de sangre en relacin al anticoagulante. Lipemia: eleva falsamente el valor de la hemoglobina modificando los ndices eritrocitarios. - Hemlisis: Disminuye el hematocrito aumentando la concentracin media de hemoglobina corpuscular (falsa hipercroma). - Microcogulos: por extracciones venosas complicadas o incorrecta agitacin del tubo de sangre tras la extraccin. Deben desecharse para recuentos celulares ya que pueden obstruir canales de lectura y dar contajes falsamente disminuidos de plaquetas y leucocitos. - Exceso de sangre en relacin al anticoagulante: puede originar la formacin de cogulos y la crenacin de los eritrocitos (glbulos rojos con espculas). - Defecto de sangre en relacin al anticoagulante: cuando hay escasa cantidad de sangre, sta forma conglomerados con el anticoagulante afectando al recuento de todas las series. 2. Si en lugar de hacer el recuento de eritrocitos utilizando una dilucin 1:200 se requiere utilizar una dilucin 1:100 Cmo haras esta dilucin? Cmo se haran los clculos? Para poder realizar una dilucin 1:100 en lugar de hacer una dilucin 1:200 se podra realizar lo siguiente: C1V1=C2V2 1(200)=1(100) 200=100 200/100=2

Lo que supone que debemos tomar dos volmenes de sangre en lugar de uno, en el caso de la pipeta thoma se puede tomar sangre hasta la marca de 1 en lugar de la marca de 0.5 y tomar el resto del reactivo correspondiente.

3. Bajo que condiciones del paciente debe hacerse la toma de muestra para esta determinacin, es decir, se debe dar alguna indicacin especial? No se necesita preparacin previa para este examen. 4. Cules pueden ser las causas de que un paciente tenga elevado o disminuido su recuento de eritrocitos? Disminuidos Anemia Insuficiencia de la mdula sea (ejemplo, por radiacin, toxinas o tumor) Deficiencia de eritropoyetina (secundaria a enfermedad renal) Hemlisis (destruccin de glbulos rojos) debido a transfusin, lesin vascular u otra causa Hemorragia (sangrado) Leucemia Desnutricin Mieloma mltiple Deficiencias nutricionales de: o hierro o cobre o folato o vitamina B12 o vitamina B6 Sobrehidratacin Embarazo Aumentados Altitud: Un conteo de glbulos rojos alto es comn en personas que en altitudes elevadas debido a que es la manera en que el cuerpo se adapta a la falta de oxgeno. Consumo de cigarrillo Cardiopata congnita Cor pulmonale Deshidratacin (como por ejemplo, por diarrea severa) Tumor renal (carcinoma de clulas renales) Niveles bajos de oxgeno en la sangre (hipoxia) Fibrosis pulmonar Policitemia vera

B) CUANTIFICACIN DE LA CONCENTRACIN DE HEMOGLOBINA 1. Qu es la hemoglobina y cul es su funcin en nuestro organismo? La hemoglobina es una protena que contiene hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glbulos rojos y es la encargada del transporte de oxgeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. La hemoglobina tambin transporta el dixido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de produccin de energa, lo lleva a los pulmones desde donde es exhalado al aire

2. Qu otros mtodos existen para la determinacin de hemoglobina? El mtodo de hemiglobincianuro: Se diluye la sangre en una solucin de ferrocianuro potsico y cianuro potsico. El ferrocianuto potsico oxida las hemoglobinas a hemiglobinas (Hi; metahemoglobinas) y el cianuro potsico proporciona los iones cianuro (CN-) para formar hemiglobincianuro (HiCN; cianmetahemoglobina) que tiene una absorcin mxima amplia a una longitud de onda de 540nm. La capacidad de absoricn de la solucin se mide en un espectrofotmetro a 540nm y se compara con la de una solucin de HiCN estndar. 3. Cules son las ventajas de este mtodo? Es cmodo y de ser una solucin estndar estable, fcilmente disponible. 4. Qu precauciones debe tenerse al utilizar el lquido diluyente? Debido a que la cianometa es una solucin que contiene cianuro que en el momento en el que entra en contacto con la sangre forma una unin con la hemoglobina formando lo que se conoce como cianometa, sustancia que contiene cianuro y que como ya se sabe este es txico para el organismo, por lo que no debe ser ingerido y tampoco inhalado. 5. En qu casos se encuentra aumentada o disminuida la concentracin de hemoglobina en un paciente? Disminuidos:

Anemia (diversos tipos) Sangrado Destruccin de glbulos rojos Leucemia Desnutricin Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitamina B12 y vitamina B6 Sobrehidratacin Cardiopata congnita Cor pulmonale Deshidratacin Eritrocitosis Niveles bajos de oxgeno en la sangre (hipoxia) Fibrosis pulmonar Policitemia vera

Aumentada:

E) OBSERVACIN DE ANORMALIDADES DE LOS ERITROCITOS 1. Menciona las distintas anormalidades morfolgicas que pueden presentarse en los eritrocitos. Macrocitos: Son eritrocitos con dimetro superior a 8.5 micras. La macrocitosis est usualmente acompaada de un PVC por encima de 100 fL. Su aparicin puede estar asociada a: Deficiencia de vitamina B12 y/o cido flico. Estrs medular cuando hay

eritropoyesis acelerada. Trastornos hepticos. Es importante anotar que normalmente los extendidos de sangre perifrica de neonatos se caracterizan por presentar una macrocitosis significativa. Microcitos: Recibe este nombre el glbulo rojo que presenta un dimetro inferior a 6.0 micras, la microcitosis est usualmente acompaada de un PVC por debajo de 75 fL. Se observan microcitos en entidades que cursan con alteraciones cuantitativas de la hemoglobina como son las anemias por deficiencia de hierro y las talasemias. Generalmente los microcitos se acompaan de bajo contenido de hemoglobina por lo cual se denominan microcitos hipocrmicos. Megalocitos: Son los grandes macrocitos ovales, clulas donde se combina una alteracin del tamao y de la forma, pueden llegar hasta tener 12 micras de dimetro. Caractersticamente se observan en anemias megaloblsticas

Equinocito : Caractersticamente aparece como una clula dentada que presenta sobre su superficie pequeas progresiones redondeadas a manera de bombas o vesculas de tamao uniforme y simtricamente distribuidas que con el MEB, semejan un erizo de mar.

Acantocito. Al microscopio electrnico esta clula se observa como una estructura densa e irregularmente contrada. Bajo el microscopio de luz es un hemate con escasas proyecciones espiculadas que no presentan una distribucin homognea y varan en longitud y nmero.

Estomatocito. En los individuos normales el 3% o menos de las clulas rojas en el extendido de sangre perifrica son estomatociticas. El estomatocito se define como una clula unicncava que en los extendidos coloreados con Wright presenta una depresin central e longada con apariencia de boca o estoma (de all su nombre) que sustituye el rea de palidez central redondeada de los discos bicncavos.

C) DETERMINACIN DE HEMATOCRITO

D) CLCULO DE LOS NDICES ERITROCTICOS

Valores de referencia = 82-98fl ( ) ( ( ) )

Valores de referencia = 27-33pg ( ) ( )

Valores de referencia= 31-35%

F) RECUENTO DE GLBULOS BLANCOS

Prctica #6 Recuento de reticulocitos. 1. Qu son los reticulocitos y dnde se producen? Los reticulocitos son clulas anucleadas predecesoras de los eritrocitos que se producen en la mdula sea, con la diferencia de que poseen grnulos de ribosomas y algunas mitocondrias que les son utiles para sintetizar el 35% de la hemoglobina restante. Este tipo de clulas esta en circulacin perifrica aproximadamente un dia para convertirse posteriormente en un hemate maduro que cumplir con todas las funciones biologicas de estas clulas. A diferencia de los hemates o glbulos rojos maduros, los reticulocitos an poseen ARN. 2. Describe sus caractersticas morfolgicas Elemento anucleado que todava posee ciertas capacidades de sntesis de ARN, protenas y hemoglobinas, debido a que se mantienen algunas mitocondrias, ribosomas y restos de reticulpendoplasma. Su tamao es algo superior a un hemate maduro de 8 o 9 micras y conseva un cierto grado de basofilia. Tras la tincin supravital en su interior se observa una sustancia reticulada granulofilamentosa que obedece a la precipitacin del colorante sobre restos de ribosomas, ARN mensajero y otros organelos celulares. 3. Qu utilidad tiene efectuar a un paciente el recuento de reticulocitos? Es un dato muy til para establecer el ndice de efectividad global de la eritropoyesis y determinar el origen central y perifrico de una anemia, as como para enjuiciar su carcter regenerativo o arregenerativo. El recuento de reticulocitos es un reflejo de la actividad reciente

de la mdula sea. Si la mdula responde adecuadamente al incremento de la demanda de hemates, sta permite una liberacin temprana de glbulos rojos inmaduros (reticulocitos) y se observa un aumento en el recuento de reticulocitos 4. Qu nos indica encontrar valores elevados o disminuidos de reticulocitos en la sangre? Aumentados

Sangrado Eritroblastosis fetal Anemia hemoltica Enfermedad renal con aumento en la produccin de eritropoyetina

Disminuidos

Insuficiencia de la mdula sea (como por ejemplo la producida por toxicidad de drogas, tumor o infeccin) Cirrosis heptica Deficiencia de folato Deficiencia de hierro Enfermedad renal con disminucin en la produccin de eritropoyetina Radioterapia Deficiencia de vitamina B12

5. Por qu deber reportarse tanto el valor relativo como el absoluto en este recuento? 1. Porcentaje relativo de reticulocitos (PRR): Se obtiene al realizar varios conteos de 100 clulas eritroides, obteniendo el porcentaje correspondiente a aqullas que son compatibles con reticulocitos, en la mayora de las ocasiones expresa un valor que no es real, dando una falsa impresin diagnstica. Para lograr una correccin del porcentaje relativo de reticulocitos cuando se presentan los problemas descritos anteriormente se determina el CAR. 2. Conteo absoluto de reticulocitos (CAR): (PRR x Eri). Este parmetro corrige la falsa impresin de reticulocitosis expresada de PRR debido a que se determina la cantidad total de reticulocitos circulantes.

Prctica #7 Recuento de siderocitos. 1. Qu son los siderocitos? Eritrocito joven sin ncleo pero con RNA residual y mitocondrias en el citoplasma que contienen hierro no unido a la hemoglobina y pueden identificarse mediante la tincin de azul de Prusia de Perl 2. Describe sus caractersticas morfolgicas

Hemates en forma de diana con punteado policromatfilo El rasgo morfolgico patognomnico es la presencia de mitocondrias paranucleares grandes cargadas de Fe en los eritroblastos en tincin Prusia de Perl. 3. En qu casos se encuentra un nmero elevado de siderositos en sangre? Aparecen en anemias hemolticas, anemias sideroacrsticas y en el hipoesplenismo.

Prctica #8 Determinacin de hierro srico. 1. Cmo obtiene el ser humano el hierro necesario para su organismo? Un adulto sano absorbe aproximadamente entre 10% y 15% del hierro de la dieta. Pero dicha absorcin estar influenciada por diferentes factores que pueden favorecerla o disminuirla. As mismo depende del tipo de hierro que se consuma. La absorcin de hierro hmico es del 15% al 35% y no es significativamente afectada por la dieta. Contrariamente la absorcin del hierro no hmico es del 2% al 20% y tiene gran influencia de otros componentes de la dieta.

El hmico es de origen animal y se absorbe en un 20 a 30%. Su fuente son las carnes (especialmente las rojas). El no hmico, proviene del reino vegetal, es absorbido entre un 3% y un 8% y se encuentra en las legumbres, hortalizas de hojas verdes, salvado de trigo, los frutos secos, las vsceras y la yema del huevo.

2. En qu parte de nuestro organismo se encuentra la mayor proporcin de hierro? El hierro en el cuerpo humano est distribuido en la siguiente forma: 2.72 grs. en la sangre; 0.12 grs. en los msculos; 1 gr. almacenado entre el hgado y el bazo y 0.16 grs. en otros lugares. 3. Qu importancia tiene el efectuar a un paciente la determinacin de hierro srico? Las determinaciones de hierro no saturado en suero (UIBC), combinada con el hierro srico, es una herramienta diagnstica til para la determinacin de varios trastornos relacionados con el hierro. El valor combinado de UIBC con el hierro en suero da un valor para la capacidad de fijacin del hierro total (TIBC). Esto representa la concentracin mxima de hierro que las protenas del suero pueden fijar. Los niveles sricos de UIBC varan en los trastornos del metabolismo del hierro, donde las capacidades de fijacin de hierro con frecuencia aumentan en una deficiencia del mismo, y disminuyen en trastornos de inflamacin crnica o tumores malignos. 4. Cules pueden ser las causas y los sntomas de la deficiencia de hierro? La falta de hierro en el organismo se puede deber a la falta de su consumo en la dieta, la alteracin en su absorcin intestinal, aumento en su consumo, o por un aumento de prdidas (hemorragias, menstruacin, perdidas gastrointestinales ocultas, etc.) Algunos sntomas cuando hay falta de hierro son: palidez, irritabilidad, cansancio. Tambin puede presentarse hipertensin, mareos, falta de concentracin, debilidad muscular, prdida de cabello, zumbidos en odos, picazn en la piel.

5. Qu trastornos ocasiona la deficiencia de hierro? El desarrollo de la deficiencia de hierro es gradual y el comienzo se da con un balance negativo de hierro es decir cuando la ingesta de hierro de la dieta no satisface las necesidades diarias. Se produce una disminucin en el depsito de hierro del organismo pero los niveles de hemoglobina permanecen normales. Por otro lado la anemia por deficiencia de de hierro (anemia ferropnica) es un estado avanzado en la disminucin del hierro. Aqu los niveles de hemoglobina se encuentran por debajo de lo normal. Si falta el hierro en el organismo se disminuye la formacin de hemoglobina y por ello los glbulos rojos aparecen pequeos, plidos, que es lo define una anemia microctica o hipocroma. 6. Qu trastornos ocasiona el exceso de hierro? El exceso de hierro puede aparecer en forma de hemocromatosis o hemosiderosis. Se puede producir una sobredosis de hierro en los nios menores de 6 aos ante una ingesta accidental de suplementos de hierro dando vmitos , diarrea, dolor abdominal llegando a dificultades respiratorias, coma y muerte. Altas dosis de suplementos de hierro en adultos pueden traer complicaciones gastrointestinales como constipacin, nausea, vmitos, diarrea, especialmente si son tomados con el estomago vaco. Existe un alto potencial de tener toxicidad de hierro dado que muy poca cantidad d hierro es excretado por el organismo. Adems el hierro tiende a acumularse en los tejidos y rganos cuando sus depsitos estn saturados.

Prctica #9 Determinacin de la capacidad de fijacin de hierro. 1. Qu es la transferrina, cmo y dnde se produce? La transferrina es una protena encargada captar el hierro de la dieta para transportarlo por la sangre a donde sea necesario. Su funcin es transportadora, por lo que su valor no se ve alterado por la cantidad de hierro ingerida en la dieta. Si podra reflejar el estado nutricional en lo que se refiere a las protenas del paciente y la capacidad del hgado para producirla. 2. Qu diferencia hay entre la capacidad libre y la capacidad total de fijacin de hierro? El hierro srico est ligado a la transferrina, pero slo un tercio de su capacidad est saturada. La capacidad de fijacin no saturada de la transferrina o capacidad de fijacin residual (CFR) es indicativa de la disponibilidad de los receptores de fijacin sricos. La cantidad de hierro que la transferrina srica puede fijar cuando se halla completamente saturada con un exceso de Fe3+ es la capacidad de fijacin total (CFT)

3. En qu patologas se puede encontrar alteracin en la concentracin de la capacidad total de fijacin de hierro?

El dficit de hierro es una afeccin comn, particularmente una enfermedad de nios, mujeres jvenes y personas de edad. Aunque la medicin de hierro srico, la CFT y la saturacin de transferrina se emplean comunmente en los dficits de hierro, resultan inadecuados para diagnosticar la causa de la enfermedad pero tiles para confirmar y monotorizar la intoxicacin aguda por hierro en nios. La toxicidad por hierro es usualmente definida como la concentracin de hierro srico que excede la CFT. Aunque la medicin de estos parmetros se han empleado como complementos, el mtodo ms fiable de diagnstico del deficit de hierro es la tincin citoqumica de un aspirado de mdula sea que muestra la presencia o ausencia de hemosiderina. La CFT vara en diversos transtornos del metabolismo frrico vindose a menudo aumentado en la anemia por dficit de hierro y disminuido en desrdenes inflamatorios crnicos, enfermedades malignas y en la hemocromatosis (sobrecarga por hierro) presentando una tasa alta de hierro

Prctica #10 Fragilidad osmtica de los eritrocitos. 1. Qu es la fragilidad osmtica de los eritrocitos? Es un examen para detectar la fragilidad anormal de los glbulos rojos. La fragilidad osmtica de los hemates refleja su capacidad de captar una cierta cantidad de agua antes de la lisis. Viene dada por el cociente volumen/rea de superficie. La capacidad del hemate normal para soportar la hipotonicidad se debe a su forma bicncava, que permite que la clula incremente su volumen en cerca de un 70% antes de que la superficie de su membrana se distienda; una vez que se alcanza este limite se produce lisis. 2. Cules pueden ser las principales fuentes de error en estas determinaciones? Las venas y las arterias varan en tamao de un paciente a otro y de un lado del cuerpo a otro; por esta razn, puede ser ms difcil obtener una muestra de sangre de algunas personas que de otras. Otros riesgos asociados con la extraccin de sangre son leves, pero pueden ser:

Sangrado excesivo Desmayo o sensacin de mareo Hematoma (acumulacin de sangre debajo de la piel) Infeccin (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel) 3. Por qu en la esferocitosis hereditaria hay aumento de la fragilidad osmtica?

El aumento de la fragilidad osmtica o la reduccin de resistencia a la hemolisis es un rasgo de los esferocito, por los tanto esta prueba puede indicar esferocitosis congnita, anemia hemoltica idioptica adquirida, enfermedad hemoltica isoinmune del recin nacido, y otras anemias hemolticas, por consiguiente se muestra un cuadro de enfermedades identificadas de acuerdo al aumento o disminucin de la fragilidad osmtica. La esferocitosis hereditaria es un trastorno relativamente comn que se caracteriza por glbulos rojos sanguneos intrnsicamente defectuosos, debido a su forma esfrica. Estos glbulos

presentan un aumento en la fragilidad osmtica: son ms frgiles que lo normal. En las personas que sufren de talasemia, algunos glbulos rojos son ms frgiles que lo normal, pero una porcin mayor de los mismos es menos frgil que lo normal. 4. Explica qu significa que los eritrocitos tengan una fragilidad osmtica disminuida Los eritrocitos microciticos de las talasemias tiene fragilidad osmtica disminuida, debido a que la anemia ferropenica tambin tiene fragilidad osmtica disminuida la prueba no diferencia las dos enfermedades, al igual que en la talasemia menor.

Prctica #11 Observacin de cuerpos de Heinz. 1. Qu son los cuerpos de Heinz? Son estructuras localizadas en la membrana eritroctica producto de la desnaturalizacin de la hemoglobina causada por la accin oxidante de ciertas drogas o qumicos, estos cuerpos desorganizan la membrana eritroctica y se asocian con hemolisis intravascular. 2. Por qu la acetilfenilhidrazina provoca la formacin de cuerpos de Heinz? Debido a que la acetilfenilhidrazina es una sustancia oxidante provoca una desnaturalizacin de la hemoglobina por lo tanto se producen los cuerpos de Heinz, siempre y cuando la hemoglobina sea inestable, si la hemoglobina es suficientemente estable no se presentarn estas anormalidades. 3. Qu les sucede a las personas en cuya sangre se forman cuerpos de Heinz? Las personas que presentan un elevado nmero de cuerpos de Heinz pueden presentar alguna de las siguiente patologas. Talasemia alfa Anemia hemoltica congnita Deficiencia de G-6-PD Forma inestable de la hemoglobina

Prctica #12 Hemoglobina fetal. 1. Cul es la diferencia entre la hemoglobina fetal y la hemoglobina A? La hemoglobina fetal tiene una mayor captacin de oxigeno que la hemoglobina A, por su conformacin, es decir la hemoglobina fetal tiene dos cadenas alfa y dos cadenas gamma y la hemoglobina A cuenta con dos cadenas alfa y dos cadenas beta, esto hace que esta ultima tenga una menor afinidad por el oxigeno.

2. En qu casos se encuentran valores elevados de hemoglobina fetal en adulto? La hemoglobina fetal se caracteriza por la supresin de la actividad del complejo gentico estructural beta y delta, la cadena gamma continua producindose en cantidad creciente a lo largo de la vida para compensar la falta de las cadenas beta y delta. Se han descrito varios tipos diferentes de Hb-F, el tipo negro: en donde las cadenas Ggamma y Agamma se producen en cantidades casi iguales, la forma griega: en la que la mayor parte de la Hb-F la forman cadenas Agamma 3. Qu otro mtodo puede utilizarse para determinar la hemoglobina fetal? Los mtodos de identificacin pueden ser por frotis en donde se muestra anisocitosis y clulas diana, la prueba del metabisulfito sdico, la cual es positiva y la electroforesis de hemoglobina en donde se encuentra HbS, HbF y HbA2 con valores de HbF de alrededor de 15-35%.

UNIDAD III LEUCOCITOS Prctica #13 Recuento de glbulos blancos.

Prctica #14 Recuento diferencial de clulas blancas (Hemograma). 1. Describe la morfologa de cada uno de los leucocitos que se encuentran normalmente en la sangre Neutrofilos: Segn la forma de su ncleo se los puede clasificar en neutrfilos en banda o cayados y en neutrfilos segmentados. Presentan divisiones de sus ncleos en lbulos en un nmero que va de 3 a 5. Si es mayor el nmero de divisiones nucleares se habla de neutrfilos hipersegmentados. Linfocitos: Los Linfocitos son clulas esfricas o ligeramente ovoides con un dimetro de 8 a 12 micrones. El ncleo (azul oscuro) ocupa el 90% de la clula. El citoplasma es muy delgado y se tie de color azul claro formando un anillo alrededor del ncleo. Eosinofilos: Los Eosinfilos tienen actividad fagoctica, es decir que "se comen" a los agentes extraos al organismo. Sus grnulos tienen sustancias para degradar aquello que incorporan. Basfilos: Los Basfilos poseen grnulos de heparina e histamina. Estas sustancias son mediadores qumicos que modulan la inflamacin. Tienen funcin en los estados alrgicos en la hipersensibilidad retardada. La liberacin masiva del contenido de sus grnulos puede causar un shock anafilctico que puede llegar hasta la muerte si no es controlado. Monocitos: Los Monocitos son clulas fagocticas con gran capacidad bactericida. Ante estmulos de sustancias qumicas siguen a los neutrfilos en la reaccin inflamatoria. Por la fagocitosis aumentan de tamao y pueden fijarse a los tejidos del baza, hgado y pulmn.

2. Describe las distintas causas que pueden provocar una tincin celular inadecuada Algunas de las causas que pueden provocar una tincin inadecuada pueden ser, el tiempo que se dejan los reactivos, la realizacin del frotis, es decir que el frotis sanguneo tenga cmulos de clulas, que no se respeten los tiempos de lavado o que la fijacin haya sido inadecuada. 3. Qu utilidad tiene el efectuar un recuento diferencial de leucocitos? Sirve en la valoracin de una infeccin o inflamacin, en la determinacin de los defectos de intoxicacin posible por sustancias qumicas o drogas, en el monitoreo de trastornos sanguneos como la leucemia, y en los efectos secundarios de tratamientos como la quimioterapia 4. Cmo se denomina al aumento y cmo a la disminucin de cada uno de los distintos tipos de leucocitos y cules son las principales causas de estas variaciones? NEUTROFILIA: Aumento del nmero total de neutrfilos por encima del rango normal. Indica infeccin bacteriana. NEUTROPENIA: Disminucin del nmero de neutrfilos circulantes por debajo del rango normal. Se presenta en: enfermedades virales, tratamientos con corticosteroides, hiperesplenismo y afecciones mieloproliferativas. LINFOCITOSIS: Aumento en el nmero de linfocitos por encima del rango normal. Causas: fisiolgica (contraccin esplnica), afecciones virales e inmunomediadas, leucemia, hipoadrenocorticismo. LINFOPENIA: Disminucin del nmero de linfocitos por debajo del rango normal. Causas: estrs, tratamiento con glucocorticoides, hiperadrenocorticismo, fases agudas virales, endotoxemia, quilotorax y linfangiectasia. EOSINOFILIA: Aumento del nmero de eosinfilos por encima del rango normal. Se presenta en: estro, dermatitis, hipersensibilidad (alergias), parasitismo, neoplasias, hipoadrenocorticismo y miositis eosinoflica. EOSINOPENIA: Se hiperadrenocorticismo. presenta en: estrs, administracin de corticosteroides,

MONOCITOSIS: Aumento del nmero de monocitos por encima del rango normal. Causas: inflamaciones crnicas piogranulosas, necrosis tisular, enfermedades inmunomediadas, estrs, tratamientos con glucocorticoides, hiperadrenocorticismo y leucemia mielomonoctica. BASOFILIA: Aumento del nmero de basfilos por encima del rango normal. Se presenta en: reacciones de hipersensibilidad y en concomitancia eosinoflica. En esta determinacin podemos observar que el recuento diferencial de leucocitos se realizo adecuadamente y con la observacin cuidadosa de la muestra, de la misma manera era un paciente sano por lo que los valores de todo se encuentran dentro de lo normal, probablemente si se hubiera hecho un recuento en otro campo los valores hubieran salido semejantes.

Prctica #15 Frmula blanca.

Prctica #16 Citometra hemtica completa. 1. Qu informacin pueden darnos los resultados de una biometra hemtica acerca del estado de salud del paciente? La biometra hemtica tambin denominada hemograma, es uno de los estudios de rutina de mayor importancia, ya que da informacin que de aqu se deriva i nos proporciona una idea muy confiable del estado general de salud del paciente. La biometra hemtica es un auxiliar en el diagnostico y seguimiento de anemias, leucemias, pacientes con quimioterapias, sndrome febril e infecciones. -Determinar la cantidad de hemoglobina presente en la sangre. -Determinar el nmero de eritrocitos presentes en la sangre del paciente. -Conocer el porcentaje del volumen de los eritrocitos presentes en la sangre. -Identificar el nmero de leucocitos presentes en la sangre. -Hacer una correcta extensin sangunea. -Realizar una identificacin de los glbulos blancos. 2. Qu relacin hay entre los ndices eritrocticos y la observacin microscpica del frotis de sangre? En el frotis sanguneo se pueden observar las caractersticas de los eritrocitos y junto con los ndices eritrocticos podemos reconocer si existe alguna anemia, leucemia o talasemia gracias a que estos ltimos se encuentran elevados o disminuidos en los diferentes tipos de patologas, 3. Qu es la citometra de flujo? La Citometra de Flujo (CMF) es una tcnica de anlisis celular multiparamtrico cuyo fundamento se basa en hacer pasar una suspensin de partculas (generalmente clulas) alineadas y de una en una por delante de un haz de lser focalizado. El impacto de cada clula con el rayo de luz produce seales que corresponden a diferentes parmetros de la clula y que son recogidos por distintos detectores. Estos convierten dichas seales en seales electrnicas que posteriormente sern digitalizadas para permitir la medida simultnea de varios parmetros en una misma clula. Estos parmetros son: - Parmetros relacionados con caractersticas intrnsecas de la clula, como su tamao y la complejidad de su ncleo y citoplasma. - Parmetros relacionados con caractersticas antignicas de cada clula (inmunofenotipo). Por lo tanto la CMF es capaz de identificar una clula por medio de sus caractersticas antignicas y/o por sus caractersticas morfolgicas de tamao y complejidad. 4. Qu son los histogramas y cmo se interpretan? Es un resumen grfico de los valores producidos por las variaciones de una determinada caracterstica, representando la frecuencia con que se presentan distintas categoras dentro de

dicho conjunto. Permite el anlisis de los datos evidenciando esquemas de comportamiento y pautas de variacin que son difciles de captar en una tabla numrica. 1. Nmero de eritrocitos (No. GR) 2. Volumen corpuscular medio (VCM) 3. Amplitud de distribucin eritrocitaria (ADE)

Prctica #17 Citodiagnstico de mucosa nasal 1. Qu es un exudado y qu es un trasudado? El exudado es el resultado de la inflamacin, y se forma por el aumento de la permeabilidad capilar o disfuncin de la reabsorcin linftica. Estos pueden ser Serosos :aparecen en algunos procesos inflamatorios. Hemorrgicos: tienen color rosado. Se observan en general en neoplasias ditesis hemorrgicas y traumatismos. Lactescentes: neoplasias o tuberculosas Purulentos: son turbios por la resencia de numeroso leucocitos

Los trasudados son acumulaciones de liquido debidas a un aumento de la presin hidrosttica de los capilares pleurales o a una disminucin de la presin oncotica plasmtica. Las causas incluyen la insuficiencia cardiaca congestiva, la cirrosis heptica y el sndrome nefrotico. 2. Por qu se encuentran leucocitos en algunos exudados y trasudados? Son los mismos que hay en la sangre? La mayora de trasudados tienen una concentracin inferior a 106 leucocitos / ml mientras que en la mayora de los exudados es superior a 106 leucocitos / ml. En derrames paraneumnicos es frecuente encontrar concentraciones superiores a 109leucocitos / ml. El conteo diferencial de leucocitos debe realizarse cuando la concentracin es superior a 0.25 x 106 leucocitos / ml mediante examen microscpico de las extensiones celulares teidas por los mtodos de May-Grunwald-Giemsa , Wright o Trk. Los leucocitos en este tipo de lquido se pueden encontrar por En la inflamacin leucocitaria predominan las clulas leucocitarias en el exudado. Ellas tienden a sufrir rpidamente alteraciones degenerativas: tumefaccin del citoplasma, vacuolizacin, degeneracin grasosa, necrosis.

Prctica # 18 Prueba para clulas L.E. 1. Qu son las clulas L.E.? Las clulas LE son polimorfonucleares que fagocitaron restos nucleares alterado, proveniente de la destruccin del ncleo de otros leucocitos, por el llamado Factor LE (factor nuclear), este es Ig G-anti ADNque puede atacar a los neutrfilos. La clula se rompe y queda en libertad el ncleo,

convertido en una masa eosinoflica amorfa y de gran tamao. Esta masa es fagocitada por otro neutrfilo el cual ocupa casi todo el espacio celular. Por accin del factor srico LE, l ncleo pierde su estructura cromatnica normal para convertirse en una masa tumefacta y algo homognea de color prpura o pardo rojizo. 2. En qu casos se observan estas clulas en la sangre? En caso de lupus eritematoso. 3. Cul es la diferencia entre las clulas L.E., la clula roseta y las clulas en tarta o pastel? Cuando el ncleo alterado no es fagocitado sino slo rodeado por varios neutrfilos se denomina roseta. Se puede demostrar con el mtodo de cogulo de Hargraver-Zimmer en el diagnstico del lupus eritematoso. 4. Qu otra prueba de laboratorio puede realizarse para el diagnstico del lupus eritematoso? Se basa en los sntomas que presenta el enfermo, la exploracin que realiza el mdico y los anlisis de sangre y orina, donde pueden aparecer alteraciones caractersticas, las ms importantes la deteccin de autoanticuerpos, de los que los ms conocidos son los antinucleares (ANA) que aparecen en prcticamente todos los enfermos, aunque tambin aparecen en personas sanas y con otras enfermedades y los antiDNA y anti Sm que son los que ms completan el diagnstico, siempre en un contexto de sntomas sugestivo. Anticuerpo antitiroglobulina Anticuerpo microsmico antitiroideo Componente 3 del complemento (C3 y C4) Examen de Coombs directo Crioglobulinas ESR Exmenes de sangre para la actividad renal Exmenes de sangre para la actividad heptica Factor reumatoideo.