Você está na página 1de 0

KODE DIKLAT : AA.AHP.PM.

115
KODE PAKET DIKLAT : AA.AHP.PM.115.L
KODE MODUL : AA.AHP.PM.115.L.8
JENJANG DIKLAT : LANJUT
MODUL/BAHAN AJAR
ANALISIS BAHAN HASIL PERTANIAN
SECARA MIKROBIOLOGI
Oleh:
Noni Mulyai! S"TP"! M"Si"
PUSAT PENGEMBANGAN DAN PEMBERDA#AAN PENDIDIK DAN
TENAGA KEPENDIDIKAN PERTANIAN CIANJUR
$%&&
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
I" PENDAHULUAN
A. La'a( Bela)an*
Bahan hasil peranian !an pr"!#$ "lahann%a &er#pa$an 'ahan pan(an 'a(i &an#sia.
)elain har#s 'er(i*i !an &enari$+ 'ahan pan(an ,#(a har#s 'e'as !ari 'ahan-'ahan
'er'aha%a %an( !apa 'er#pa .e&aran $i&ia+ &i$r"'a !an 'ahan lainn%a. Mi$r"'a
!apa &en.e&ari pan(an &elal#i air+ !e'#+ #!ara+ anah+ ala-ala pen("lah /sela&a
pr"ses pr"!#$si aa# pen%iapan0 ,#(a se$resi !ari #s#s &an#sia aa# he1an.
Pen%a$i a$i'a pan(an /2""! '"rne !iseases0 %an( er,a!i se(era seelah
&en($"ns#&si pan(an+ #&#&n%a !ise'# !en(an $era.#nan. Pan(an !apa &en,a!i
'era.#n $arena elah er$"na&inasi "leh 'a$eri pa"(en %an( $e&#!ian !apa
#&'#h !an 'er$e&'an( 'ia$ sela&a pen%i&panan+ sehin((a &a&p# &e&pr"!#$si
"$sin %an( !apa &e&'aha%a$an &an#sia. )elain i#+ a!a ,#(a &a$anan %an( se.ara
ala&i s#!ah 'ersi2a ra.#n seperi 'e'erapa ,a&#r3#&'#han !an he1an.
U&#&n%a 'a$eri %an( er$ai !en(an $era.#nan &a$anan !ianaran%a a!alah
Salmonella, Shigella, Campylobacter, Listeria monocytogenes, ersinia enterocolityca,
Staphylococcus aureus, Clostri!ium per"ringens, Clostri!ium botulinum, Bacillus cereus,
#ibrio cholerae$ #ibrio parahaemolyticus, %$coli enteropatogenik !an %nterobacter
saka&aki.
Dala& ran($a pen(a1asan &## se.ara &i$r"'i"l"(is+ !ila$#$an pen(#,ian
la'"ra"ri#& #n#$ &en(is"lasi !an &en(i!eni2i$asi .e&aran 'a$eri pa"(en %an(
&#n($in a!a. Pen(#,ian aa# analisis $#aniai2 &i$r"'i"l"(i pa!a 'ahan pan(an
penin( !ila$#$an #n#$ &en(eah#i &## 'ahan pan(an erse'#.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 1
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
B. Tu+uan Pe,-ela+a(an
&" Tu+uan U,u, :
)eelah &e&pela,ari &aa !i$la ini+ pesera !i$la !iharap$an &a&p#
&en(analisis 'ahan hasil peranian !an pr"!#$ "lahann%a se.ara &i$r"'i"l"(is.
$" Tu+uan Khu.u. :
)eelah &e&pela,ari &aa !i$la ini+ pesera !i$la !iharap$an &a&p#:
a. Men%iap$an lar#an ."n"h #,i &i$r"'i"l"(is sise& pen(en.eran
'. Menseril$an ala-ala !an per$a$as %an( !i(#na$an !ala& analisis 'ahan hasil
peranian se.ara &i$r"'i"l"(is
..Me&'#a &e!ia per#&'#han &i$r"'a
!. Men(in"$#lasi$an lar#an ."n"h $e !ala& &e!ia per#&'#han
e. Men(a&ai hasil analisis se.ara &i$r"'i"l"(is
2.Men("lah !aa hasil analisis 'ahan hasil peranian se.ara &i$r"'i"l"(is.
C. Ruan* Lin*)u/
Maa Di$la ini er!iri !ari 4 $e(iaan pe&'ela,aran %ai# 10. Men%iap$an lar#an
."n"h #,i &i$r"'i"l"(is sise& pen(en.eran+ 50. Menseril$an ala-ala !an per$a$as
%an( !i(#na$an !ala& analisis 'ahan hasil peranian se.ara &i$r"'i"l"(is+ 60.
Me&'#a &e!ia per#&'#han &i$r"'a+ 70. Men(in"$#lasi$an lar#an ."n"h $e
!ala& &e!ia per#&'#han+ 50. Men(a&ai hasil analisis se.ara &i$r"'i"l"(is !an 40.
Men("lah !aa hasil analisis 'ahan hasil peranian se.ara &i$r"'i"l"(is.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 5
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
II" RANCANG BANGUN PEMBELAJARAN MATA DIKLAT/GBPP/SILABUS
Maa Di$la Analisis Bahan Hasil Peranian se.ara Mi$r"'i"l"(is
Al"$asi 8a$# 8 ,a& 9 75 &eni
Des$ripsi )in($a Maa !i$la ini &e&'ahas enan( e$ni$ pen%iapan lar#an ."n"h #,i &i$r"'i"l"(is sise&
pen(en.eran $h#s#sn%a peni&'an(an 'ahan+ pelar#an !an la'ellin(+ e$ni$ serilisasi &e!ia
se.ara 'asah !ala& a#"$la2+ persiapan &e!ia 'ia$an !ala& $#l#r .air !an pa!a+ e$ni$
in"$#lasi lar#an ."n"h $e !ala& &e!ia per#&'#han+ e$ni$ pen(a&aan hasil analisis
se.ara &i$r"'i"l"(i+ !an pen("lahan !aa hasil analisis 'ahan hasil peranian se.ara
&i$r"'i"l"(is.
T#,#an Pe&'ela,aran
a. K"&peensi
Dasar
'. In!i$a"r
Ke'erhasilan
:
:
Pesera !i$la !apa &en(analisis 'ahan hasil peranian se.ara &i$r"'i"l"(is
No
INDIKATOR
KEBERHASILAN
MATERI POKOK SUB MATERI POKOK METODE
ALAT BANTU
MEDIA
ESTIMASI
0AKTU
Pe.e('a ,a,/u:
1.
Men%iap$an lar#an
Te$ni$ pen%iapan lar#an
Tes er#lis L:D 1 ; 75 &eni
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 6
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
No
INDIKATOR
KEBERHASILAN
MATERI POKOK SUB MATERI POKOK METODE
ALAT BANTU
MEDIA
ESTIMASI
0AKTU
."n"h #,i
&i$r"'i"l"(is
sise& pen(en.eran
."n"h #,i &i$r"'i"l"(is
sise& pen(en.eran
$h#s#sn%a peni&'an(an
'ahan+ pelar#an !an
la'ellin(
O'ser<asi
Pra$e$
Lap"ran
ATK
8hai
B"ar!
Ala !an
'ahan
pra$e$
5.
Menseril$an ala-
ala !an per$a$as
%an( !i(#na$an
!ala& analisis
'ahan hasil
peranian se.ara
&i$r"'i"l"(is
Te$ni$ serilisasi &e!ia
!an peralaan se.ara 'asah
!ala& a#"$la2

Jenis-,enis
serilisasi
)erilisasi &e!i#&
per#&'#han
&i$r"'a
)erilisasi
peralaan (elas
Tes er#lis
O'ser<asi
Pra$e$
Lap"ran
L:D
ATK
8hai
B"ar!
Ala !an
'ahan
pra$e$
5 ; 75 &eni
6.
Me&'#a &e!ia
per#&'#han
&i$r"'a
Persiapan &e!ia 'ia$an
!ala& $#l#r .air !an pa!a
:ara pe&'#aan &e!ia
pa!a pa!a .a1an peri
se.ara asepi$
Pen(erian !an
2#n(si
Bahan-'ahan
&e!ia
per#&'#han
Tes er#lis
O'ser<asi
Pra$e$
Lap"ran
L:D
ATK
8hai
B"ar!
Ala !an
'ahan
pra$e$
5 ; 75 &eni
7.
Men(in"$#lasi$an
lar#an ."n"h $e
!ala& &e!ia
per#&'#han
Te$ni$ in"$#lasi lar#an
."n"h $e !ala& &e!ia
per#&'#han
Te$ni$ in"$#lasi
!ari s#spensi
Te$ni$ In"$#lasi
!en(an G"resan
Tes er#lis
O'ser<asi
Pra$e$
Lap"ran
L:D
ATK
8hai
B"ar!
Ala !an
1 ; 75 &eni
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 7
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
No
INDIKATOR
KEBERHASILAN
MATERI POKOK SUB MATERI POKOK METODE
ALAT BANTU
MEDIA
ESTIMASI
0AKTU
'ahan
pra$e$
5.
Men(a&ai hasil
analisis se.ara
&i$r"'i"l"(is
Te$ni$ pen(a&aan hasil
analisis se.ara
&i$r"'i"l"(i
Men(a&ai
&"r2"l"(i $"l"ni
'a$eri
Men(a&ai
&"r2"l"(i $"l"ni
%eas
Men(a&ai
&"r2"l"(i $"l"ni
$apan(
Tes er#lis
O'ser<asi
Pra$e$
Lap"ran
L:D
ATK
8hai
B"ar!
Ala !an
'ahan
pra$e$
1 ; 75 &eni
4. Men("lah !aa
hasil analisis 'ahan
hasil peranian
se.ara
&i$r"'i"l"(is.
Pen("lahan !aa hasil
analisis 'ahan hasil
peranian se.ara
&i$r"'i"l"(is.
Per#&'#han
p"p#lasi
Pen(hi#n(an
1a$# (enerasi
Pen(#$#ran
per#&'#han
Menen#$an
#$#ran
&i$r""r(anis&e
Menen#$an
,#&lah
&i$r""r(anis&e
Tes er#lis
O'ser<asi
Pra$e$
Lap"ran
L:D
ATK
8hai
B"ar!
Ala !an
'ahan
pra$e$
1 ; 75 &eni

Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 5
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
III" KEGIATAN PEMBELAJARAN
A. Ke*ia'an Pe,-ela+a(an &
TEKNIK PEN#IAPAN LARUTAN CONTOH UJI MIKROBIOLOGIS
SISTEM PENGENCERAN
Le,-a( In1o(,a.i
Pa!a &"!#l se'el#&n%a /Men(a&'il ."n"h 'ahan hasil peranian0 s#!ah !i'ahas enan(
'er'a(ai e$ni$ pen(a&'ilan sa&pel 'ahan hasil peranian #n#$ !ianalisis &##n%a+ 'ai$
analisis 'ahan hasil peranian se.ara 2isis+ $i&ia &a#p#n &i$r"'i"l"(i. )elain e$ni$ !ala&
pen(a&'ilan sa&pel+ ,#(a s#!ah !i'ahas enan( 'a(ai&ana penan(anan sa&pel 'ahan hasil
peranian se'el#& !ila$#$an analisis se.ara &i$r"'i"l"(i.
)eperi %an( elah $ia $eah#i+ &e"!e %an( !i(#na$an #n#$ pen(#,ian &i$r"'i"l"(i san(a
!ien#$an "leh pers%araan %an( !ia.#+ #&#&n%a pen(#,ian !ila$#$an se.ara $#aliai2
!en(an &e"!e pen($a%aan /enrichment0 %ai# is"lasi !an i!eni2i$asi &i$r"'a !an
inerpreasi hasil /ne(ai2 per (ra&3&l aa# ne(ai2 per 55 (ra& aa# per 1== (ra&3&l0 !an
pen(#,ian se.ara $#aniai2 /enumerasi0 !en(an pen(hi#n(an ,#&lah &i$r"'a !an
inerpreasi hasil 'er#pa $"l"ni per &l3( aa# $"l"ni per 1== &l.
Me'oe Kuali'a'i1 2Pen*)ayaan3" Pa!a &e"!e $#aliai2 !ila$#$an per'an%a$an
/enri.h&en3pen($a%aan0 erle'ih !ah#l# !ari sel &i$r"'a %an( #&#&n%a !ala& ,#&lah
%an( san(a se!i$i !an 'ah$an $a!an(-$a!an( !ala& $"n!isi le&ah. A!a 'e'erapa ahap
%an( !ila$#$an %ai# ahap pen($a%aan /enri.h&en0+ ahap is"lasi pa!a &e!ia sele$i2+ ahap
i!eni2i$asi !en(an rea$si 'i"$i&ia+ !an !ilan,#$an !en(an analisa ani(eni$ aa# ser"l"(i
aa# i&&#n"l"(i !an 'ila !iperl#$an !apa ,#(a !ila$#$an i!eni2i$asi DNA 'a$eri !en(an
&e"!e P:> /Polymerase Chain *eaction0.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 4
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Me'oe )uan'i'a'i1 2Enumerasi3" Me"!e $#aniai2 !i(#na$an #n#$ &en(eah#i ,#&lah
&i$r"'a %an( a!a pa!a s#a# sa&pel+ #&#&n%a !i$enal !en(an An($a Le&pen( T"al /ALT0
!an An($a Palin( M#n($in aa# Most Probable +umber /MPN0.
U,i An($a Le&pen( T"al /ALT0 !an le'ih epan%a ALT aer"' &es"2il aa# anaer"' &es"2il
&en((#na$an &e!ia pa!a !en(an hasil a$hir 'er#pa $"l"ni %an( !apa !ia&ai se.ara <is#al
!an !ihi#n(+ inerpreasi hasil 'er#pa an($a !ala& $"l"ni /.2#0 per &l3( aa# $"l"ni31==&l.
:ara %an( !i(#na$an anara lain !en(an .ara #an(+ .ara ees !an .ara se'ar.
An($a Palin( M#n($in /MPN0 &en((#na$an &e!ia .air !en(an i(a repli$asi !an hasil a$hir
'er#pa $e$er#han aa# per#'ahan 1arna !an aa# pe&'en#$an (as %an( ,#(a !apa !ia&ai
se.ara <is#al+ !an inerpreasi hasil !en(an &er#,#$ $epa!a Ta'el MPN. Di$enal 5 .ara %ai#
&e"!e 6 a'#n( !an &e"!e 5 a'#n(.
Me"!e $#aniai2 !ila$#$an !en(an 'e'erapa ahap %ai# : h"&"(enisasi+ pen(en.eran+
pen.a&p#ran !en(an &e!ia+ in$#'asi !an pen(a&aan. Dala& pe&'ela,aran ini a$an !i'ahas
enan( pen(en.eran aa# e$ni$ pen%iapan lar#an ."n"h #,i &i$r"'i"l"(is sise&
pen(en.eran.
&" La(u'an Pen*en4e(
Lar#an pen(en.er3 lar#an 2isi"l"(is a!alah lar#an %an( !i(#na$an #n#$ &en(en.er$an
."n"h pa!a analisis &i$r"'i"l"(i. Dala& pen(en.eran 'iasan%a &en((#na$an lar#an
pen(en.er %an( 'er2#n(si #n#$ &en((ia$an $e&'ali sel-sel &i$r"'a %an( &#n($in
$ehilan(an <ialiasn%a $arena $"n!isi !i !ala& sa&pel %an( $#ran( &en(#n#n($an.
Pen(en.eraan s#spensi sa&pel !ila$#$an #n#$ &en!apa$an $"l"ni %an( #&'#h
se.ara erpisah !an !apa !ihi#n( !en(an &#!ah %ai# anara 6= sa&pai 6== sel
&i$r"'a per &l. Pen(en.eran 'iasan%a !ila$#$an 1:1=+ 1:1==+ 1:1===+ !an seer#sn%a+ hal
ini a$an san(a &e&'an# er#a&a #n#$ sa&pel !en(an .e&aran %an( san(a in((i.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian ?
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
U&#&n%a pen(en.er %an( !i(#na$an a!alah pep"ne 1aer =+1@+ '#22er 2"s2a aa#
lar#an rin(ers /7 $ali $#a0+ !an pep"ne =+1@ pl#s Na:L =+85@ /I)O 488?:1A860.
$" Te)ni) Pen*en4e(an Be('in*)a'
T#,#an !ari pen(en.eran 'erin($a %ai# &e&per$e.il aa# &en(#ran(i ,#&lah &i$r"'a
%an( ers#spensi !ala& .airan. Penen#an 'esarn%a aa# 'an%a$n%a in($a pen(en.eran
er(an#n( $epa!a per$iraan ,#&lah &i$r"'a !ala& sa&pel. Di(#na$an per'an!in(an 1 :
A #n#$ sa&pel !an pen(en.eran pera&a !an selan,#n%a+ sehin((a pen(en.eran
'eri$#n%a &en(an!#n( 131= sel &i$r""r(anis&a !ari pen(en.eran se'el#&n%a.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 8
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Le,-a( Ke(+a
TEKNIK PEN#IAPAN LARUTAN CONTOH UJI MIKROBIOLOGIS SISTEM PENGENCERAN 2TEKNIK
PENGENCERAN BERTINGKAT3
Ala' :
Ta'#n( rea$si /%an( s#!ah !iserilisasi0
>a$ pen%i&panan
Pipe #$#r /%an( s#!ah !iserilisasi0
Pe&'a$ar '#nsen
Bahan:
)a&pel
Lar#an pen(en.er
Al$"h"l ?=@
Ca(a Ke(+a :
a. )a&pel %an( &en(an!#n( 'a$eri !i&as#$an $e !ala& a'#n( pen(en.eran pera&a
/131= aa# 1=
-1
0 se.ara asepis /!ari preparasi s#spensi0. Per'an!in(an 'era sa&pel !en(an
<"l#&e a'#n( pera&a a!alah 1 : A !an in(a lar#an pen(en.er %an( !i(#na$an ,i$a
&e&a$ai e$ni$ rinse !an s1a' s#!ah er&as#$ pen(en.er 1=-1. )eelah sa&pel &as#$ lal#
!ilar#$an !en(an &en("."$n%a.
b. Dia&'il 1 &l !ari a'#n( 1=
-1
!en(an pipe #$#r $e&#!ian !ipin!ah$an $e a'#n( 1=
-
5
se.ara asepis $e&#!ian !i$"."$ !en(an &e&'en#r$an a'#n( $e elapa$ an(an sa&pai
h"&"(en. Pe&in!ahan !ilan,#$an hin((a a'#n( pen(en.eran era$hir /1=
-n
0 !en(an .ara
%an( sa&a+ hal %an( perl# !iin(a 'ah1a pipe #$#r %an( !i(#na$an har#s selal# !i(ani+
arin%a seiap in($a pen(en.eran !i(#na$an pipe #$#r seril %an( 'er'e!a3'ar#.
Prinsipn%a 'ah1a pipe i!a$ perl# !i(ani ,i$a &e&in!ah$an .airan !ari s#&'er %an( sa&a.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian A
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Le,-a( E5alua.i
1. Jelas$an apa %an( !i&a$s#! !en(an lar#an pen(en.erB
5. )e'#$an ,enis-,enis lar#an pen(en.er %an( 'iasa !i(#na$an #n#$ &en(en.er$an
sa&pel !ala& analisis &i$r"'i"l"(iB
6. Jelas$an e$ni$ pen(en.eran 'erin($aB
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 1=
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
B. Ke*ia'an Pe,-ela+a(an $
TEKNIK STERILISASI MEDIA DAN PERALATAN #ANG DIGUNAKAN DALAM ANALISIS BAHAN
HASIL PERTANIAN SECARA MIKROBIOLOGIS
Le,-a( In1o(,a.i
)erilisasi %ai# pr"ses aa# $e(iaan &e&'e'as$an3pe&#snahan 'a$eri !en(an .ara
&e&'#n#h &i$r""r(anis&e s#a# 'ahan aa# 'en!a !ari se&#a 'en#$ $ehi!#pan. Bahan
aa#p#n peralaan %an( !iper(#na$an !i !ala& &i$r"'i"l"(i+ har#s !ala& $ea!aan seril.
Arin%a+ pa!a 'ahan aa# peralaan erse'# i!a$ er!apa &i$r"'a %an( i!a$ !iharap$an
$eha!irann%a+ 'ai$ %an( a$an &en((an((#3 &er#sa$ &e!ia aa#p#n &en((an((# $ehi!#pan
!an pr"ses %an( se!an( !i$er,a$an.
&" Jeni.6Jeni. S'e(ili.a.i
Pa!a prinsipn%a serilisasi !apa !ila$#$an !en(an 6 .ara %ai# se.ara &e$ani$+ 2isi$ !an
$i&ia1i
a. Sterilisai secara mekanik /2ilrasi0 &en((#na$an s#a# sarin(an %an( 'erp"ri san(a $e.il
/=.55 &i$r"n aa# =.75 &i$r"n0 sehin((a &i$r"'a erahan pa!a sarin(an erse'#. Pr"ses
ini !i#,#$an #n#$ serilisasi 'ahan %an( pe$a panas+ &isaln%a lar#an en*i& !an
ani'i"i$. )ise& $er,a 2iler+ seperi pa!a sarin(an lain a!alah &ela$#$an sele$si erha!ap
pari$el-pari$el %an( le1a /!ala& hal ini a!alah &i$r"'a0.
'. Sterilisasi secara fisik !apa !ila$#$an !en(an pe&anasan C pen%inaran.
a) Pe,ana.an
a0. Pemijaran /!en(an api lan(s#n(0: &e&'a$ar ala pa!a api se.ara lan(s#n(+
."n"h ala : ,ar#& in"$#l#&+ pinse+ 'aan( L+ !ll.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 11
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
'0. Panas kering: serilisasi !en(an "<en $ira-$ira 14=-18=
=
:. )erilisasi panas $erin(
."."$ #n#$ ala %an( er'#a !ari $a.a &isaln%a erlen&e%er+ a'#n( rea$si !ll.
.0. ,ap air panas: $"nsep ini &irip !en(an &en(#$#s. Bahan %an( &en(an!#n( air
le'ih epa &en((#n(a$an &e"!e ini s#pa%a i!a$ er,a!i !ehi!rasi.
!0. ,ap air panas bertekanan : &en((#na$an a#"$la2
-3 Penyina(an en*an U7
)inar Ulra Di"le ,#(a !apa !i(#na$an #n#$ pr"ses serilisasi+ &isaln%a #n#$
&e&'#n#h &i$r"'a %an( &ene&pel pa!a per&#$aan ineri"r )a2e% :a'ine
!en(an !isinari la&p# UD. Pe&anasan !en(an &en((#na$an sinar (el"&'an(
pen!e$ lain seperi sinar-;+ sinar (a&&a !ll.
.. Sterilisaisi secara kimiawi, 'iasan%a &en((#na$an sen%a1a !esin2e$an anara lain
al$"h"l+ lar#an 2"r&alin+ lar#an AM: /.a&p#arn asa& $l"ri!a !en(an (ara& H(0 !s'.
$" S'e(ili.a.i Meiu, Pe('u,-uhan Mi)(o-a
a. Dala& a'a! 18 "ran( &enseril$an &e!i#& .#$#p !en(an &en!i!ih$an &e!i#& erse'#
sela&a 'e'erapa ,a&. Den(an ,alan ini &a$a &ailah se&#a 'enih $ehi!#pan. :ara %an(
!e&i$ian ini !ila$#$an "leh )pallan*ani /1?5A E 1?AA0 #n#$ &e&'#$i$an i!a$
&#n($inn%a a'i"(enesis.
'. 'yn!allisasi$ Me"!e ini 'er#pa &en!i!ih$an &e!i#& !en(an #ap #n#$ 'e'erapa &eni
sa,a. )eha'is !i!ia&$an sa# hari E sela&a i# sp"ra-sp"ra se&pa #&'#h &en,a!i
'a$eri <e(eai2 E &a$a &e!i#& erse'# !i!i!ih$an la(i sela&a 'e'erapa &eni.
A$hirn%a pa!a hari $ei(a+ &e!i#& erse'# !i!i!ih$an se$ali la(i. Den(an ,alan !e&i$ian
ini !iper"lehlah &e!i#& %an( seril+ !an la(i p#la+ *a-*a "r(ani$ %an( er$an!#n( !i
!ala&n%a i!a$ &en(ala&i 'an%a$ per#'ahan seperi haln%a pa!a /a0.
.. Den(an autokla", %ai# ala ser#pa an($i &in%a$ %an( !apa !iisi !en(an #ap. Me!i#&
%an( a$an !iseril$an !ie&pa$an !i !ala& a#"$la2 ini sela&a 15 sa&pai 5= &eniF hal ini
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 15
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
'er(an#n( $epa!a 'an%a$ se!i$in%a 'aran( %an( perl# !iseril$an. Me!i#& %an( a$an
!iseril$an i# le'ih 'ai$ !ie&pa$an !ala& 'e'erapa '""l %an( a(a$ $e.il !aripa!a
!i$#&p#l !ala& sa# '""l %an( 'esar. )eelah pin# a#"$la2 !i##p rapa+ 'ar#lah $ran
pa!a pipa #ap !i'#$a+ !an e&pera#r a$an er#s &ener#s nai$ sa&pai 151
"
:. Biasan%a
a#"$la2 s#!ah !ia#r !e&i$ian r#pa+ sehin((a pa!a s#h# erse'#+ e$anan a!a se'esar
15 l's /p"#n!s0 per in.h perse(i %an( 'erari 1 a&"s2er per 1 .&
5
.
Perhi#n(an 1a$# 15 aa# 5= &eni i# !i&#lai se&en,a$ er&"&eer pa!a a#"$la2
&en#n,#$ 151
"
:. )eelah .#$#p 1a$#+ &a$a $ran #ap !i##p+ selan,#n%a s#h# a$an
&#lai #r#n se!i$i !e&i se!i$i+ !e&i$ian p#la &an"&eer. A#"$la2 i!a$ '"leh !i'#$a
se$"n%"n(-$"n%"n(. Ji$a !ila$#$an !e&i$ian+ &a$a isi '""l %an( a!a !i !ala& a#"$la2
a$an &el#ap $e &ana-&ana. Pen!in(inan !ila$#$an se!i$i !e&i se!i$i. Ji$a &e!i#&
&en(an!#n( <ia&in+ (elain aa# 'an(sa (#la+ &a$a seelah serilisasi sepen!e$-
pen!e$n%a !ala& a#"$la2+ &e!i#& erse'# har#slah se(era !i!in(in$an ses#!ahn%a
!i$el#ar$an !ari a#"$la2. Per'#aan ini perl# #n#$ &en(hin!ar$an er#rain%a *a-*a
erse'#. Me!i#& %an( s#!ah seril !apa !isi&pan !ala& al&ari es..
!. Dengan penyaringan -"iltrasi.. Me!i#& !isarin( !en(an sarin(an p"rselin aa# !en(an
anah !ia"&. Den(an ,alan ini+ &a$a *a-*a "r(ani$ i!a$ a$an &en(ala&i pen(#raian
sa&a se$ali. Han%a sa%an(+ <ir#s a$ !apa erpisah !en(an pen%arin(an+ &e!i#& &asih
perl# !ipanasi !ala& a#"$la2+ &es$ip#n i!a$ sela&a 15 &eni !en(an e&pera#r 151
"
:.
Pen%arin(an !apa !ila$#$an ,#(a !en(an sarin(an %an( !i'#a !ari as'es. )arin(an ini
le'ih &#rah !an le'ih &#!ah pen((#naann%a !aripa!a sarin(an p"rselin. )arin(an as'es
!apa !i'#an( seelah !ipa$ai+ se!an($an sarin(an p"rselin erlal# &ahal #n#$ !i'#an(+
!an erlal# s#li #n#$ !i'ersih$an.
8" STERILISASI PERALATAN GELAS
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 16
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Un#$ serilisasi $erin( ala-ala !ari (elas seperi la'# Enlen&e%er+ a'#n( rea$si+ pipe
!an lain-lain %an( s#!ah 'ersih !i&as#$$an !i !ala& "<en sela&a 5-6 ,a& pa!a e&pera#r
14=
"
E 1?=
"
:F hal ini 'er(an#n( $epa!a 'an%a$ se!i$in%a &#aan %an( !i&as#$$an !ala&
"<en. Ala-ala %an( 'el#& 'ersih !an 'el#& $erin( i!a$ '"leh !i&as#$$an !ala& "<en $erin(.
Un#$ serilisasi 'asah &en((#na$an a#"$la2+ '#n($#s se&#a peralaan %an( a$an
!iserilisasi !en(an &en((#na$an $eras aa# al#&ini#& 2"il sera '#n($#s $e&'ali !en(an
plasi$ ahan panas a(ar i!a$ a!a #ap air %an( &as#$ $e!ala& peralaan. Peralaan %an( s#!ah
siap !iserilisasi !i&as#$an $e!ala& a#"$la2 !an !ipanas$an sa&pai s#h# 151
=
: sela&a 15
&eni. )eelah G 15 &eni+ ala !ian($a !an !i'#$a !ari se&#a pe&'#n($#s %an( !ipa$ai.
Peralaan %an( s#!ah !iserilisasi s#!ah siap !i(#na$an #n#$ $e(iaan selan,#n%a.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 17
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Le,-a( Ke(+a &
STERILISASI MEDIA DAN PERALATAN DENGAN AUTOKLA9
Ala'
A#"$la2
plasi$ ahan panas+
$apas+ $eras !an al#&ini#& 2"il.
Bahan
Bahan %an( a$an !iseril$an
Lan*)ah Ke(+a
1. Isi a#"$la2 !en(an air sa&pai !e$a an(san( /!asar %an( 'erl#'an(-l#'an( e&pa
&elea$$an 'ahan %an( !iseril$an0.
2. Bahan-'ahan %an( a$an !iseril$an !i&as#$$an. Me!ia %an( !iseril$an !ala&
Erlen&e%er aa# a'#n( rea$si har#s !i##p rapa !en(an $apas !an al#&#ni#& 2"il. Un#$
peralaan (elas+ '#n($#s se&#a peralaan %an( a$an !iserilisasi !en(an &en((#na$an
$eras aa# al#&ini#& 2"il sera '#n($#s $e&'ali !en(an plasi$ ahan panas.
6. T##p a#"$la2 !an $en.an($an #lir pen##pn%a.
7. B#$a $ran pen(el#aran $ran #ap air.
5. )el 1a$# %an( !iin(in$an #n#$ &enserilisasi /15 &eni0.
6. Te$an "&'"l #n#$ &en(hi!#p$an.
7. Ji$a #ap air s#!ah &#lai $el#ar+ ##plah $eran pen(el#aran #ap air. Te$anan #ap
!ala& a#"$la2 a$an nai$ sa&pai 5 a&+ !an s#h#n%a a$an &en.apai 151
"
:.
8. Ji$a 1a$# serilisasi elah !i.apai+ e$anan !ala& a#"$la2 a$an #r#n perlahan+ !an
#n((# sa&pai e$anan &en#n,#$$an an($a n"l+ aa# !i#n((# sa&api a(a$ !in(in.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 15
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
A. B#$a a#"$la2 hai-hai !an $el#ar$an 'ahan %an( elah !iseril$an erse'#. )i&pan
!an pisah$an e&pan%a !en(an 'ahan-'ahan %an( 'el#& !iserilisasi.
Le,-a( Ke(+a $
STERILISASI PERALATAN DENGAN O7EN
Ala'
"<en
$apas
$eras !an al#&ini#& 2"il.
Bahan
Bahan %an( a$an !iseril$an
Lan*)ah Ke(+a
1. T##plah era-era peralaan (elas &isaln%a Erlen&e%er+ a'#n( re$asi !en(an $apas.
Pipe !i$el"&p"$$an &en#r# <"l#&en%a !an &as#$$an !ala& 1a!ah %an( erse!ia aa#
!i'#n($#s !en(an $eras pa%#n( aa# al#&ini#& 2"il. De&i$ian ,#(a #n#$ .a1an peri.
5. Mas#$$an $e !ala& "<en.
6. T##p "<en !en(an 'ai$.
4. A#r "&'"l pen(a#r 1a$# !an s#h# ses#ai !en(an #,#an serilisasi /1?= E 18=
"
:0+
sela&a 5 ,a&.
5. )eelah serilisasi+ #n((# sa&pai s#h# !ala& "<en &en!e$ai s#h# r#an(+ $e&#!ian
'#$alah "<en haihai.
4. Kel#ar$an ala-ala %an( s#!ah seril !an pisah$an e&pan%a !en(an ala-ala lain
%an( 'el#& seril.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 14
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Le,-a( E5alua.i
1. Jelas$an pa!a %an( !i&a$s#! !en(an serilisasi B
2. )e'#$an !an ,elas$an ,enis-,enis serilisasi B
3. )erilisasi se.ara 2isi$ !apa !ila$#$an !en(an pe&anasan C pen%inaran. Jelas$an
$e!#a .ara erse'#B
4. Jelas$an .ara serilisasi &e!i#&B
5. Jelas$an .ara serilisasi peralaanB
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 1?
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
4.
C. Ke*ia'an Pe,-ela+a(an 8
PEMBUATAN MEDIA PERTUMBUHAN MIKROBA
Le,-a( In1o(,a.i
&" Pen*e('ian an 9un*.i
Me!ia per#&'#han &i$r""r(anis&e a!alah s#a# 'ahan %an( er!iri !ari .a&p#ran *a-
*a &a$anan /n#risi0 %an( !iperl#$an &i$r""r(anis&e #n#$ per#&'#hann%a.
Mi$r""r(anis&e &e&an2aa$an n#risi &e!ia 'er#pa &"le$#l- &"le$#l $e.il %an( !ira$i #n#$
&en%#s#n $"&p"nen sel. Den(an &e!ia per#&'#han !apa !ila$#$an is"la &i$r""r(anis&e
&en,a!i $#l#r &#rni !an ,#(a &e&anip#lasi $"&p"sisi &e!ia per#&'#hann%a.
$" Bahan6-ahan ,eia /e('u,-uhan
a. Bahan !asar
air /H
5
O0 se'a(ai pelar#
a(ar /!ari r#&p# la#0 %an( 'er2#n(si #n#$ pe&a!a &e!ia. A(ar s#li
!i!e(ra!asi "leh &i$r""r(anis&e pa!a #&#&n%a !an &en.air pa!a s#h# 75
"
:.
(elain ,#(a &e&ili$i 2#n(si %an( sa&a seperi a(ar. Gelain a!alah p"li&er
asa& a&in" %an( !ipr"!#$si !ari $"la(en. Ke$#ran(annn%a a!alah le'ih 'an%a$
,enis &i$r"'a %an( &a&p# &en(#rai$ann%a !i'an!in( a(ar.
Silicagel+ %ai# 'ahan %an( &en(an!#n( nari#& sili$a. H#n(sin%a ,#(a se'a(ai
pe&a!a &e!ia. )ili.a (el $h#s#s !i(#na$an #n#$ &e&a!a$an &e!ia 'a(i
&i$r""r(anis&e a#"r"2 "'li(a.
'. N#risi aa# *a &a$anan
Me!ia har#s &en(an!#n( #ns#r-#ns#r %an( !iperl#$an #n#$ &ea'"lis&e sel %ai#
'er#pa #ns#r &a$r" seperi :+ H+ O+ N+ PF #ns#r &i$r" seperi He+ M( !an #ns#r
peli$an3trace element$
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 18
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
)#&'er $ar'"n !an ener(i %an( !apa !iper"leh 'er#pa sen%a1a "r(ani$ aa#
an"r(ani$ es#ai !en(an si2a &i$r"'an%a. Jasa! heer"r"2 &e&erl#$an s#&'er
$ar'"n "r(ani$ anara lain !ari $ar'"hi!ra+ le&a$+ pr"ein !an asa& "r(ani$.
)#&'er nir"(en &en.a$#p asa& a&in"+ pr"ein aa# sen%a1a 'ernir"(en
lain. )e,#&lah &i$r"'a !apa &en((#na$an s#&'er N an"r(ani$ seperi #rea.
Dia&in-<ia&in.
.. Bahan a&'ahan
Bahan-'ahan a&'ahan %ai# 'ahan %an( !ia&'ah$an $e &e!i#& !en(an #,#an
eren#+ &isaln%a phenolre! /in!i$a"r asa& 'asa0 !ia&'ah$an #n#$ in!i$a"r
per#'ahan pH a$i'a pr"!#$si asa& "r(ani$ hasil &ea'"lis&e. Ani'i"i$
!ia&'ah$an #n#$ &en(ha&'a per#&'#han &i$r"'a n"n- ar(e3$"na&inan.
!. Bahan %an( serin( !i(#na$an !ala& pe&'#aan &e!ia
A(ar+ a(ar !apa !iper"leh !ala& 'en#$ 'aan(an+ (ran#la aa# '#'#$ !an
er'#a !ari 'e'erapa ,enis r#&p# la#. Ke(#naann%a a!alah se'a(ai pe&a!a
/gelling0 %an( pera&a $ali !i(#na$an "leh Hra1 C 8alher Hesse #n#$
&e&'#a &e!ia. Ji$a !i.a&p#r !en(an air !in(in+ a(ar i!a$ a$an lar#. Un#$
&elar#$ann%a har#s !ias#$ !an !ipanasi+ pen.airan !an pe&a!aan 'er$ali-$ali
aa# serilisasi %an( erlal# la&a !apa &en#r#n$an $e$#aan a(ar+ er#a&a
pa!a pH %an( asa&
Peptone+ peptone a!alah pr"!#$ hi!r"lisis pr"ein he1ani aa# na'ai seperi
""+ li<er+ !arah+ s#s#+ .asein+ la.al'#&in+ (elain !an $e!elai.
K"&p"sisin%a er(an#n( pa!a 'ahan asaln%a !an 'a(ai&ana .ara
&e&per"lehn%a.
Meate/tract. Meate/tract &en(an!#n( 'asa "r(ani$ er'#a !ari "a$+ li&pa+
plasena !an !a(in( sapi.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 1A
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
easte/tract. easte/tract er'#a !ari ra(i pen(e&'an( r"i aa# pe&'#a
al."h"l. Ieas e;ra. &en(an!#n( asa& a&in" %an( len($ap C <ia&in /B
comple/0.
Kar'"hi!ra. Kar'"hi!ra !ia&'ah$an #n#$ &e&per$a%a pe&'en#$an asa&
a&in" !an (as !ari $ar'"hi!ra. Jenis $ar'"hi!ra %an( #&#&n%a !i(#n$an
!ala& a&il#&+ (l#$"sa+ 2r#$"sa+ (ala$"sa+ s#$r"sa+ &ani"l+ !ll. K"nsenrasi
%an( !ia&'ah$an #n#$ analisis 2er&enasi a!alah =+5-1@.
8" Ma4a,6Ma4a, Meia Pe('u,-uhan
a. Me!i#& 'er!asar$an si2a 2isi$
Me!i#& pa!a %ai# &e!ia %an( &en(an!#n( a(ar 15@ sehin((a seelah !in(in
&e!ia &en,a!i pa!a. Me!i#& seen(ah pa!a %ai# &e!ia %an( &en(an!#n(
a(ar =+6-=+7@ sehin((a &en,a!i se!i$i $en%al+ i!a$ pa!a+ i!a$ 'e(i# .air.
Me!ia se&i s"li! !i'#a !en(an #,#an s#pa%a per#&'#han &i$r"'a !apa
&en%e'ar $e sel#r#h&e!ia eapi i!a$ &en(ala&i per.a&p#ran se&p#rna
,i$a er("%an(. Misaln%a 'a$eri %an( #&'#h pa!a &e!ia N2B
/+itrogen"reeBromthymolBlue0 se&is"li! a$an &e&'en#$ .in.in hi,a# $e'ir#an
!i 'a1ah per&#$aan &e!ia+ ,i$a &e!ia ini .air &a$a .in.in ini !apa !en(an
&#!ah han.#r. )e&is"li! ,#(a 'er#,#an #n#$ &en.e(ah3&ene$an !i2#si
"$si(en+ &isaln%a pa!a &e!ia +itrateBroth+ $"n!isi anaer"' aa# se!i$i "$si(en
&enin($a$an &ea'"lis&e nira eapi 'a$eri ini ,#(a !ihar#s$an #&'#h
&eraa !isel#r#h &e!ia.
Me!i#& .air %ai# &e!ia %an( i!a$ &en(an!#n( a(ar+ ."n"hn%a a!alah NB
/+utrientBroth0+ LB /LactoseBroth0.
'. Me!i#& 'er!asar$an $"&p"sisi
Me!i#& sinesis %ai# &e!ia %an( $"&p"sisi *a $i&ian%a !i$eah#i ,enis !an
a$arann%a se.ara pasi+ &isaln%a 0lucose Agar, Mac Conkey Agar.
Me!i#& se&i sinesis %ai# &e!ia %an( se'a(ian $"&p"sisin%a !i$eah#i se.ara
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 5=
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
pasi+ &isan%a PDA /Potato De/trose Agar0 %an( &en(an!#n( a(ar+ !e$sr"sa !an
e$sra$ $enan(. Un#$ 'ahan e$sra$ $enan(+ $ia i!a$ !apa &en(eah#i
se.ara !eail enan( $"&p"sisi sen%a1a pen%#s#nn%a.
Me!i#& n"n sinesis %ai# &e!ia %an( !i'#a !en(an $"&p"sisi %an( i!a$
!apa !i$eah#i se.ara pasi !an 'iasan%a lan(s#n( !ie$sra$ !ari 'ahan
!asarn%a+ &isaln%a 'omato 1uice Agar, Brain Hear In2#si"n A(ar+ Pancreatic
%/tract.
.. Me!i#& 'er!asar$an #,#an
Me!ia #n#$ is"lasi
Me!ia ini &en(an!#n( se&#a sen%a1a esensial #n#$ per#&'#han &i$r"'a+
&isaln%a +utrient Broth, Bloo! Agar.
Me!ia sele$i23pen(ha&'a
Me!ia %an( selain &en(an!#n( n#risi ,#(a !ia&'ah s#a# *a eren# sehin((a
&e!ia erse'# !apa &ene$an per#&'#han &i$r"'a lain !an &eran(san(
per#&'#han &i$r"'a %an( !iin(in$an. :"n"hn%a a!alah L#ria Berani &e!i#&
%an( !ia&'ah A&phisilin #n#$ &eran(san( E$coli resisen ani'"i$ !an
&en(ha&'a $"na&inan %an( pe$a+ Ampiciline. Salt broth %an( !ia&'ah Na:l
7@ #n#$ &e&'#n#h Streptococcus agalactiae %an( "leran erha!ap (ara&.
Me!ia !iper$a%a /enrichment0
Me!ia !iper$a%a a!alah &e!ia %an( &en(an!#n( $"&p"nen !asar #n#$
per#&'#han &i$r"'a !an !ia&'ah $"&p"nen $"&ple$s seperi !arah+ ser#&+
$#nin( el#r. Me!ia !iper$a%a ,#(a 'ersi2a sele$i2 #n#$ &i$r"'a eren#.
Ba$eri %an( !i#&'#h$an !ala& &e!ia ini i!a$ han%a &e&'##h$an n#risi
se!erhana #n#$ 'er$e&'an( 'ia$+ eapi &e&'##h$an $"&p"nen $"&ple$s+
&isaln%a Bloo! 'ellurite Agar, Bile Agar, Serum Agar+ !ll.
Me!ia #n#$ pere&a,aan $#l#r
Me!ia #&#& aa# spesi2i$ %an( !i(#na$an #n#$ pere&a,aan $#l#r
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 51
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Me!ia #n#$ &enen#$an $e'##han n#risi spesi2i$.
Me!ia ini !i(#na$an #n#$ &en!ia(n"sis aa# &en(analisis &ea'"lis& s#a#
&i$r"'a. :"n"hn%a a!alah (oser2s Citrateme!ium, %an( !i(#na$an #n#$
&en(#,i $e&a&p#an &en((#na$an asa& sira se'a(ai s#&'er $ar'"n.
Me!ia #n#$ $ara$erisasi 'a$eri
Me!ia %an( !i(#na$an #n#$ &en(eah#i $e&e&p#an spesi2i$ s#a# &i$r"'a.
Ka!an(-$a!an( in!i$a"r !ia&'ah$an #n#$ &en#n,#$$an a!an%a per#'ahan
$i&ia. :"n"hn%a a!alah +itrate Broth, Lactose Broth, Arginine Agar.
Me!ia !i2erensial
Me!ia ini 'er#,#an #n#$ &en(i!eni2i$asi &i$r"'a !ari .a&p#rann%a 'er!asar
$ara$er spesi2i$ %an( !i#n,#$$an pa!a &e!ia !i2erensial+ &isaln%a T)IA /'riple
Sugar 3ron Agar0 %an( &a&p# &e&ilih Ener"'a.eria 'er!asar$an 'en#$+
1arna+ #$#ran $"l"ni !an per#'ahan 1arna &e!ia !i se$elilin( $"l"ni.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 55
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Ci(i64i(i -e-e(a/a -ahan )o,/le). yan* i*una)an .e-a*ai -ahan /e,-ua' ,eia:
Bahan Men'ah Ci(i Nilai Nu'(i.i
E$sra$ !a(in( sapi
/'ee2 e;ra.0
)#aa# e$sra$ .air ,arin(an
!a(in( sapi %an( e&p#$+
!i$"nsenrasi$an &en,a!i
pasa
Men(an!#n( $ar'"hi!ra+
sen%a1a nir"(en "r(ani.+
<ia&in %an( lar# !ala& air
!an 'er'a(ai (ara&
Pep"n Pr"!#$ %an( !ihasil$an !ari
'ahan-'ahan %an(
&en(an!#n( pr"ein seperi
!a(in(+ $asein+ !an (elain
)#&'er #a&a nir"(en
"r(ani.+ !apa p#la
&en(an!#n( <ia&in !an
$a!an(-$a!an( $ar'"hi!ra+
'er(an#n( pa!a ,enis
'ahan a1al.
A(ar )#a# $ar'"hi!ra $"&ple$s
%an( !iper"leh !ari al(ae
&arin eren#
/a(ar la#0+ !i"lah #n#$
&e&'#an( s#'sansi %an(
i!a$ !i$ehen!a$i
Di(#na$an se'a(ai 'ahan
pe&a!a &e!ia+ '#$an
s#&'er n#rien 'a(i 'a$eri
E$sra$ $ha&ir /%eas
e;ra.0
)#a# e$sra$ .air sel
$ha&ir+ erse!ia ,#(a !ala&
'en#$ '#'#$
/$"&ersial0
)#a# s#&'er %an( san(a
$a%a !en(an <ia&in B+
&en(an!#n( nir"(en
"r(ani. !an sen%a1a-
sen%a1a $ar'"n
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 56
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
1.
Le,-a( Ke(+a &
PEMBUATAN NUTRIENT AGAR
1. Ti&'an( $"&p"nen &e!i#& !en(an &en((#na$an i&'an(an analiis #n#$ <"l#&e
%an( !iin(in$an ses#ai !en(an $"&p"sisi 'eri$#:
Bee"e/tract 6 (
Peptone 5 (
A(ar 15 (
A$#a!es s.! 1=== &l
2. A$#a!es se'an%a$ 1== &l !i'a(i &en,a!i !#a sa# 'a(ian
#n#$ &elar#$an Bee"e/tract !an peptone !an se'a(ian la(i
#n#$ &elar#$an a(ar. )e'ai$n%a air #n#$ &elar#$an a(ar
le'ih 'an%a$
3. Lar#$an a(ar pa!a se'a(ian air erse'# !en(an &en(a!#$ se.ara $"nsan !an
!i'eri panas. Dapa &en((#na$an $"&p"r (as aa# hot plate stirrer /,an(an sa&pai
o4erheat+ $arena a$an er'en#$ '#sa !an &e&#ai sehin((a #&pah0.
4. )e&enara i# se'a(ian a$#a!es !i(#na$an #n#$ &elar#$an peptone !an bee"
e/tract+ .#$#p !en(an pen(a!#$an.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 57
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
5. )eelah $e!#an%a lar#+ lar#an !i#an($an $e lar#an a(ar !an !ia!#$ sa&pai
h"&"(en. Ke&#!ian pH &e!ia !i#$#r !en(an &en.el#p$an $eras pH in!i$a"r. Ji$a pH
i!a$ neral &a$a !apa !ia&'ah$an H:l3NaOH.
4. )eelah i# &e!ia !i&as#$$an $e !ala& la'# Erlen&e%er !an !iserilisasi !en(an
a#"$la2.
7. T#an( &e!ia seril $e .a1an peri seril se.ara asepis. Ji$a !iin(in$an &e!ia e(a$
aa# &irin( pa!a p"in $e 5+ &e!ia lan(s#n( !i#an( $e a'#n( $e&#!ian !iserilisasi.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 55
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Le,-a( Ke(+a $"
PEMBUATAN NUTRIENT BROTH
K"&p"sisi #n#$ &e!ia NB sa&a !en(an NA eapi i!a$ &e&a$ai a(ar se'a(ai pe&a!a.
Pr"ses pe&'#aann%ap#n le'ih se!erhana+ in((al &elar#$an peptone !an bee" e/tract
$e&#!ian !ia&p#n( !ala& la'# Erlen&e%er aa# a'#n( rea$si !an siap !iserilisasi. Pr"ses
pe&'#aan ini i!a$ &e&erl#$an panas+ peptone !an bee" e/tract a$an &#!ah lar# se&p#rna
pa!a air s#h# $a&ar ,i$a !ia!#$
Le,-a( Ke(+a 8"
PEMBUATAN POTATO DEXTROSE AGAR 2PDA3
1. Ti&'an( $"&p"nen &e!ia !en(an &en((#na$an i&'an(an analiis #n#$ <"l#&e
%an( !iin(in$an ses#ai !en(an $"&p"sisi 'eri$#:
P"a"3$enan( 6 (
Peptone 5 (
A(ar 15 (
A$#a!es s.! 1=== &l
/se'el#& !ii&'an(+ se'ai$n%a $enan( !i$#pas !an !iiris $e.il-$e.il0
2. >e'#s $enan( !ala& se'a(ian a$#a!es a!i sela&a 1-6 ,a& sa&pai l#na$+ $e&#!ian
!ia&'il e$sra$n%a !en(an &en%arin( !an &e&erasn%a &en((#na$an $eras sarin( lal#
!ia&p#n( !i Beakerglass 'ar#.
3. A(ar !ilar#$an !en(an Hot Plate Stirrer !ala& 5= &l a$#a!es lal# seelah lar# !apa
!ia&'ah$an !e$sr"sa !an !ih"&"(en$an la(i.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 54
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
4. )eelah se&#a lar#+ e$sra$ $enan( !an a(ar-!e$sr"sa !i.a&p#r !an
!ih"&"(en$an. A#r pH &e!ia &en,a!i 5-4 !en(an &enees$an H:l3NaOH.
5. Me!ia !i#an( $e !ala& Erlen&e%er aa# $e a'#n( rea$si $e&#!ian siap #n#$
!iserilisasi.
Le,-a( E5alua.i
1. Jelas$an %an( !i&a$s#! !en(an &e!ia per#&'#han &i$r""r(anis&eB
2. Jelas$an ,enis !an 2#n(si 'ahan-'ahan &e!ia per#&'#hanB
3. )e'#$an &a.a&-Ma.a& Me!ia Per#&'#han B
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 5?
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
D" Ke*ia'an Pe,-ela+a(an :
TEKNIK INOKULASI LARUTAN CONTOH KE DALAM MEDIA PERTUMBUHAN
Le,-a( In1o(,a.i
&" Te)ni) ino)ula.i a(i .u./en.i
Te$ni$ in"$#lasi ini &er#pa$an la,#an !ari pen(en.eran 'erin($a. Pen(a&'ilan s#spensi
!apa !ia&'il !ari pen(en.eran &ana sa,a api 'iasan%a #n#$ #,#an is"lasi /&en!apa$an
$"l"ni #n((al0 !ia&'il 'e'erapa a'#n( pen(en.eran era$hir.
a" Srea! Plate 2a*a( 'a-u( ula.3
Sprea! plate a!alah e$ni$ &enana& !en(an &en%e'ar$an s#spensi 'a$eri !i per&#$aan
a(ar !iper"leh $#l#r &#rni. A!ap#n pr"se!#r $er,a %an( !apa !ila$#$an a!alah se'a(ai
'eri$# :
A&'il s#spensi .airan se'an%a$ =+1 &l !en(an pipe #$#r $e&#!ian ees$an !iaas
per&#$aan a(ar %an( elah &e&a!a.
Baan( L aa# 'aan( !r#(al !ia&'il $e&#!ian !ise&pr" al$"h"l !an !i'a$ar !iaas
'#nsen 'e'erapa saa+ $e&#!ian !i!in(in$an !an !i#n((# 'e'erapa !ei$.
Ke&#!ian !ise'ar$an !en(an &en(("s"$ann%a pa!a per&#$aan a(ar s#pa%a
eesan s#spensi &eraa+ pen%e'aran a$an le'ih e2e$i2 'ila .a1an i$# !ip#ar.
Hal %an( perl# !iin(a 'ah1a 'aan( L %an( erlal# panas !apa &en%e'a'$an sel-sel
&i$r""r(anis&e !apa &ai $arena panas.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 58
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
-" P"ur Plate 2a*a( 'uan*3
Te$ni$ ini &e&erl#$an a(ar %an( 'el#& pa!a /J75
"
:0 #n#$ !i#an( 'ersa&a s#spensi
'a$eri $e !ala& .a1an peri lal# $e&#!ian !ih"&"(en$an !an !i'iar$an &e&a!a. Hal
ini a$an &en%e'ar$an sel-sel 'a$eri i!a$ han%a pa!a per&#$aan a(ar sa,a &elain$an sel
eren!a& a(ar /!i !ala& a(ar0 sehin((a er!apa sel %an( #&'#h !iper&#$aan a(ar %an(
$a%a O
5
!an a!a %an( #&'#h !i !ala& a(ar %an( i!a$ 'an%a$ &en(an!#n( "$si(en.
A!ap#n pr"se!#r $er,a %an( !ila$#$an a!alah se'a(ai 'eri$# :
)iap$an .a1an seril+ a'#n( pen(en.eran %an( a$an !iana& !an &e!ia pa!a %an(
&asih .air /J75
"
:0
Tees$an 1 &l se.ara asepis+ s#spensi sel $e!ala& .a1an $"s"n(
T#an($an &e!ia %an( &asih .air $e .a1an $e&#!ian p#ar .a1an #n#$
&en(h"&"(en$an s#spensi 'a$eri !an &e!ia+ $e&#!ian !iin$#'asi.
Alasan !iees$ann%a 'a$eri se'an%a$ =+1 &l #n#$ sprea! plae !an 1 &l #n#$ p"#r
plae $arena sprea! plae !i#,#$an #n#$ &en#&'#h$an !iper&#$aan%a sa,a+ se!an($an
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 5A
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
pour plate &e&'##h$an r#an( %an( le'ih l#as #n#$ pen%e'arann%a sehin((a !i'eri$an
le'ih 'an%a$ !ari pa!a sprea! plate.
$" Te)ni) Ino)ula.i en*an Go(e.an 2Streak3
Ber#,#an #n#$ &en(is"lasi &i$r""r(anis&e !ari .a&p#rann%a aa# &ere&a,a$an $#l#r
$e !ala& &e!i#& 'ar#.
a" Go(e.an Sina,-un*
:ara $er,a :
)en#h$an in"$#l#& l""p pa!a $"l"ni !an ("res se.ara $"nin%# sa&pai seen(ah
per&#$aan a(ar.
Jan(an pi,ar$an l""p+ lal# p#ar .a1an 18=
"
: lan,#$an ("resan sa&pai ha'is.
G"resan sina&'#n( #&#&n%a !i(#na$an '#$an #n#$ &en!apa$an $"l"ni #n((al+
&elain$an #n#$ pere&a,aan $e .a1an aa# &e!i#& 'ar#.
-" Go(e.an T
:ara $er,a :
Ba(i .a1an &en,a!i 6 'a(ian &en((#na$an spi!"l &ar$er
In"$#lasi !aerah 1 !en(an srea$ *i(-*a(
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 6=
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Panas$an ,ar#& in"$#lan !an #n((# !in(in+ $e&#!ian lan,#$an srea$ *i(- *a( pa!a
!aerah 5 /streak pa!a (a&'ar0. :a1an !ip#ar #n#$ &e&per"leh ("resan %an(
se&p#rna
La$#$an hal %an( sa&a pa!a !aerah 6
4" Go(e.an Kua(an 2Streak#ua!rant3
:ara $er,a :
Ha&pir sa&a !en(an ("resan T+ na&#n 'erp"la ("resan %an( 'er'e!a %ai# !i'a(i e&pa.
Daerah 1 &er#pa$an ("resan a1al sehin((a &asih &en(an!#n( 'an%a$ sel
&i$r""r(anis&a. G"resan selan,#n%a !ip""n($an aa# !isilan($an !ari ("resan pera&a
sehin((a ,#&lah se&a$in se!i$i !an a$hirn%a erpisah-pisah &en,a!i $"l"ni #n((al.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 61
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Le,-a( Ke(+a
INOKULASI MIKROBA DENGAN CARA GORESAN
Tu+uan : Mela$#$an in"$#lasi !ari s#spensi sel se.ara ("resan
Ala' an Bahan:
1. )#spensi sel %eas
5. Me!ia MEA !ala& .a1an peri /!isiap$an sehari se'el#&n%a #n#$ &e%a$in$an i!a$
a!a $"na&inasi0
6. Ose 'er&aa
7. Pe&'a$ar '#nsen
Lan*)ah )e(+a:
1. Pi,ar$an "se 'er&aa+ !an #n((# sa&pai !in(in+ a&'il sa# "se s#spensi sel
5. )el &i$r"'a %an( s#!ah &ene&pel pa!a "se ini selan,#n%a !i("res$an pa!a
per&#$aan &e!ia a(ar e$sra$ &al /MEA0+ !i&#lai !ari 'a(ian pin((ir .a1an peri+ se.ara
$"nin%# "se !i(era$$an $e$iri !an $e$anan sa&pai sel#as 135 E 137 l#asan &e!ia.
6. Pi,ar$an "se+ #n((# sa&pai !in(in+ sa&'il p"sisi .a1an peri !ip#ar se!i$i $e arah
$iri. G"res$an "se seril erse'# !en(an ("resan a1al &en(enai 'a(ian a$hir !ari ("resan
pera&a. Ini 'erari arah ("resan $e!#a &en%ilan( !en(an ("resan pera&a. De&i$ian
seer#sn%a #n#$ ("resan $ei(a !an $e e&pa. Ose har#s !ip,ar$an seiap a$an !i(#na$an
#n#$ &en(("res /#n#$ &en(#ran(i er,a!in%a $"na&inasi+ sela&a &ela$#$an ("resan
##p .a1an !i'#$a se.#$#pn%a sa,a0.
7. In$#'asi pa!a s#h# ses#ai+ sela&a 57-78 ,a&.
5. Pilih !ari &asin(-&asin( ipe $"l"ni sa# $"l"ni sa,a+ a&'il se.ara asepis+ pin!ah$an
$e !ala& &e!ia MEA &irin(+ #n#$ #,#an pen(a&aan si2a-si2an%a.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 65
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Le,-a( E5alua.i
1. Jelas$an e$ni$ penana&an !en(an .ara )prea! PlaeB
5. Jelas$an e$ni$ penana&an !en(an .ara P"#r PlaeB
6. Jelas$an e$ni$ penana&an !en(an .ara )rea$B
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 66
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
E" Ke*ia'an Pe,-ela+a(an ;
TEKNIK PENGAMATAN HASIL ANALISIS SECARA MIKROBIOLOGI
Le,-a( In1o(,a.i
)eelah 57 sa&pai 78 ,a& !ila$#$an in$#'asi &a$a i'alah saan%a #n#$ &en(a&ai !an
&en(hi#n( ,#&lah $"l"ni &i$r"'a pa!a &e!ia per#&'#han. )eperi elah !i,elas$an
se'el#&n%a ,#&lah $"l"ni %an( !apa !iperhi#n($an a!alah ,#&lah $"l"ni anara 6= s.! 6==
sel &i$r"'a.
1. Men(hi#n( ,#&lah &i$r"'a
Un#$ &elap"r$an hasil analisis &i$r"'i"l"(i !en(an .ara hi#n(an a(ar .a1an !i(#na$an
s#a# san!ar %an( !ise'# Stan!ar! Plate Count /)P:0. Dala& Stan!ar! Plate Count
!i,elas$an &en(enai .ara &en(hi#n( $"l"ni pa!a .a1an sera .ara &e&ilih !aa %an( a!a
#n#$ &en(hi#n( ,#&lah $"l"ni !i !ala& s#a# 'ahan pan(an %an( !ianalisis.
:ara &en(hi#n( $"l"ni a!alah se'a(ai 'eri$#:
a. :a1an %an( !ipilih !an !ihi#n( a!alah %an( &en(an!#n( ,#&lah $"l"ni anara
6= sa&pai 6==.
'. Be'erapa $"l"ni %an( 'er(a'#n( &en,a!i sa# &er#pa$an s#a# $#&p#lan
$"l"ni %an( 'esar !i&ana ,#&lah $"l"nin%a !ira(#$an !apa !ihi#n( se'a(ai sa#
$"l"ni.
.. )#a# !erean /ranai0 $"l"ni %an( erliha se'a(ai s#a# (aris e'al !ihi#n(
se'a(ai sa# $"l"ni.
A!ap#n r#&#s #n#$ &en(hi#n( ,#&lah $"l"ni per &l a!alah se'a(ai 'eri$#:
J#&lah $"l"ni per &l K ,#&lah $"l"ni per .a1an ; /13Hp0
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 67
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Keeran(an: Hp K Ha$"r pen(en.eran
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 65
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Ke*ia'an Pe,-ela+a(an <
PENGOLAHAN DATA HASIL ANALISIS BAHAN HASIL PERTANIAN SECARA
MIKROBIOLOGIS
Le,-a( In1o(,a.i
&" Menen'u)an +u,lah ,i)(oo(*ani.,e 2enu,e(a.i3
a" Pen*hi'un*an +u,lah -a)'e(i hiu/ 2'ia) lan*.un*3
&" Pla'e Coun' 2hi'un*an 4a=an3
Plae ."#n 3 <ia'le ."#n !i!asar$an pa!a as#&si 'ah1a seiap sel
&i$r""r(anis&e hi!#p !ala& s#spensi a$an #&'#h &en,a!i sa# $"l"ni seelah
!i#&'#h$an !ala& &e!ia per#&'#han !an lin($#n(an %an( ses#ai. )eelah
!iin$#'asi+ ,#&lah $"l"ni %an( #&'#h !ihi#n( !an &er#pa$an per$iraan aa#
!#(aan !ari ,#&lah &i$r""r(anis&e !ala& s#spensi erse'#.
K"l"ni %an( #&'#h i!a$ selal# 'erasal !ari sa# sel &i$r""r(anis&e $arena
'e'erapa &i$r""r(anis&e eren# .en!er#n( &e&'en#$ $el"&p"$ aa# 'eranai.
Ber!asar$an hal erse'# !i(#na$an isilah :"l"ni H"r&in( Unis /:HULs0 per &l.
$"l"ni %an( #&'#h 'erasal !ari s#spensi %an( !iper"leh &en((#na$an pen(en.eran
'erin($a !ari se'#ah sa&pel %an( in(in !i$eah#i ,#&lah 'a$erin%a.
)%ara $"l"ni %an( !ien#$an #n#$ !ihi#n( a!alah se'a(ai 'eri$#:
)a# $"l"ni !ihi#n( 1 $"l"ni.
D#a $"l"ni %an( 'er#&p#$ !ihi#n( 1 $"l"ni.
Be'erapa $"l"ni %an( 'erh#'#n(an !ihi#n( 1 $"l"ni.
D#a $"l"ni %an( 'erhi&pian !an &asih !apa !i'e!a$an !ihi#n( 5 $"l"ni.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 64
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
K"l"ni %an( erlal# 'esar /le'ih 'esar !ari seen(ah l#as .a1an0 i!ah !ihi#n(.
K"l"ni %an( 'esarn%a $#ran( !ari seen(ah l#as .a1an !ihi#n( 1 $"l"ni.
:ara &en(hi#n( sel relai2 3 :HULs per &l
:HULs 3 &l K ,#&lah $"l"ni M 2a$"r pen(en.eran
Misal : penana&an !ila$#$an !ari a'#n( pen(en.eran 1= -4 !en(an &e"!e )prea!
Plae !an P"#r Plae. )prea! plae : $"l"ni K 5= K 5= ; 1=4 :HULs 3 =+1 &l Hp K 131= -4
K 5= === === :HULs 3 =+1 &l )P K =+1 &l K 5== === === :HULs 3 &l
K 5;1=8 :HULs 3 &l
P"#r plae : $"l"ni K 5= K 5= ; 1=4 :HULs 3 1
&l
Hp K 131= -4 K 5= === === :HULs 3 =+1 &l
)P K 1 &l K 5;1=? :HULs 3 &l
Pen(hi#n(an $"l"ni pa!a .a1an se'ai$n%a !i'#a ranse$ aa# !i'a(i-'a(i ,i$a
$"l"ni %an( #&'#h erlal# 'an%a$. Transe$ !i'#a !en(an spi!"l3&ar$er !i 'a(ian
'a1ah .a1an peri. P"la ranse$ !apa !i'#a 'er<ariasi+ er(an#n( $e'##han.
Pen(hi#n(an a$an le'ih &#!ah 'ila &e&a$ai Colony Counter.
$" Pen*hi'un*an +u,lah -a)'e(i .e4a(a )e.elu(uhan 2lan*.un*3
Pen(hi#n(an se.ara lan(s#n( !apa !ila$#$an se.ara &i$r"s$"pis %ai# !en(an
&en(hi#n( ,#&lah 'a$eri !ala& sa#an isi %an( san(a $e.il. Ala %an( !i(#na$an a!alah
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 6?
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Petro"")Hauser Chamber aa# Haemocytometer. J#&lah .airan %an( er!apa anara
co4erglass !an ala ini &e&p#n%ai <"l#&e eren# sehin((a sa#an isi %an( er!apa
!ala& sa# '#,#r san($ar ,#(a eren#.
>#an( hi#n( er!iri !ari A $"a$ 'esar !en(an l#as 1 &&N. )a# $"a$ 'esar !i
en(ah+ !i'a(i &en,a!i 55 $"a$ se!an( !en(an pan,an( =+5 &&. )a# $"a$ se!an( !i'a(i
la(i &en,a!i 14 $"a$ $e.il. Den(an !e&i$ian sa# $"a$ 'esar erse'# 'erisi 7== $"a$
$e.il. Te'al !ari r#an( hi#n( ini a!alah =+1 &&. )el na$eri %an( ers#spensi a$an
&e&en#hi <"l#&e r#an( hi#n( erse'# sehin((a ,#&lah 'a$eri per sa#an <"l#&e
!apa !i$eah#i.
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 68
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
L#as $"a$ se!an( :
K p ; l
K =+5 ; =+5 K =+=7 &&5 ,a!i &isaln%a !iper"leh: D"l#&e $"a$ se!an( : 5= sel !ala&
sa# $"a$ se!an(
K =+=7 &&5 ; =+1 && &a$a ,#&lah sel $esel#r#han :
K =+==7 &&6 K 5= ; /1370 ; 1=4
Karena 1 &l K 1.&5 K 5 ; 1=4 sel3&l
Ma$a :
K =+==7 &&6
K =+=====7 .&6
K 7;1=-4 &l
)el3&l K ,#&lah sel37;1=-4 &l
)el3&LK /,#&lah sel370 ; 1=4
sel3&LK ,#&lah sel ; /O0 ; 1=4
sel3&LK ,#&lah sel ; 5+5 ; 1=5
K"a$ se!an( :
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 6A
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
J#&lah sel3&l K ,#&lah sel ; 5+5 ; 1=5
Den(an perhi#n(an %an( sa&a &a$a !iper"leh r#&#s #n#$ $"a$ $e.il:
J#&lah sel3&l K ,#&lah sel ; 7 ; 1=
4
S#ARAT6S#ARAT PERHITUNGAN JUMLAH BAKTERI MENURUT AOAC
2Ass"ciati"n Of Official Anal$tical %&emistr$3 EDISI &: Tahun &>?::
a. Hi#n( ,#&lah $"l"ni+ $ali$an ,#&lah $"l"ni /aa# raa-raa ,#&lah + ,i$a !ila$#$an
#lan(an !ala& pen(en.eran %an( sa&a0 !en(an $e'ali$an !ari pen(en.erann%a.
:aa pen(en.eran %an( !i(#na$an !an ,#&lah $"l"ni %an( erhi#n( aa# !i!#(a
pa!a iap peri. Un#$ &en.e(ah $esalahan $eeliian !an a$#rasi+ .aa han%a !#a
!i(i pera&a sa,a. Di(i $e!#a !apa !iin($a$an ,i$a !i(i $ei(a !i aas 5. G#na$an
n"l #n#$ !i(i seelah !i(i $e!#a. Lap"r$an ,#&lah aa# !#(aan ,#&lah se'a(ai
.2#3( aa# .2#3&L
'. Ji$a ,#&lah pa!a #lan(an peri aa# pen(en.eran 'er#r#an !iraa-raa+ han%a %an(
&e&en#hi s%ara %an( !iraa-raa.
:"n"h:
Pen(en.eran 1:1== ,#&lah $"l"ni 557 !an 18=
Pen(en.eran 1:1=== ,#&lah $"l"ni 58 !an sp /sprea!er0
Pen(en.eran 1:1== !iraa-raa+ hasiln%a 5=5. Pen(en.eran 1:1=== %an( !ia&'il
han%a 58 $arena sp i!a$ &e&en#hi s%ara.
rasi"3 per'an!in(anK K1+ 7
raa-raaK K571
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 7=
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
raa-raa &i$r"'a K K571
K571; K57.1==
Karena !i(i $ei(a $#ran( !ari 5+ &a$a ,#&lah &i$r"'a a!alah 57.=== .2#3(
ATURAN LENGKAP UNTUK PERHITUNGAN JUMLAH KOLONI
1. J#&lah $"l"ni 55-55=
)ele$si peri !en(an ,#&lah $"l"ni anara 55 sa&pai 55=+ i!a$ er&as#$ srea!er.
Hi#n( se&#a $"l"ni er&as#$ %an( $e.il+ .aa pen(en.eran %an( !i(#na$an lal#
hi#n( ,#&lah &i$r"'an%a.
Pen(en.eran
J#&lah &i$r"'a /.2#3( aa# .2#3&L0
1:1== 1:1===
567P 56 56.===
)p 61P 61.===
6=5 75P 75.===
576P $l 57.===
Keeran(an:
PK ,#&lah $"l"ni %an( &e&en#hi s%ara
)pK sprea!er
KlK $esalahan la'"ra"ris
5. Ulan(an
Pa$ai pen(en.eran %an( ,#&lah $"l"nin%a &e&en#hi s%ara+ lal# !iraa-raa
$e&#!ian !i$ali Hp /2a$"r pen(en.eran0hin((a !iper"leh ,#&lah &i$r"'an%a
:"n"h:
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 71
Analisis Bahan Hasil Pertanian Secara Mikrobiologis
Diklat pengawasan Mutu Lanjut
Pen(en.eran
J#&lah &i$r"'a /.2#3( aa# .2#3&L0
1:1== 1:1===
1?5
5=8
14
1?
*ata)rata5 5 676,8
jumlah5676,8 5 6799 c"u:g
Ji$a han%a sa# peri !ari pasan(an peri %an( &e&en#hi s%ara 55-55=+ hi#n(
$e!#a peri+ $e.#ali #n#$ sprea!er
Departemen Agroin!ustri !an 'eknik (imia)PPPP'( Pertanian 75

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
:"n"h:
Pen(en.eran
J#&lah &i$r"'a /.2#3( aa# .2#3&L0
1:1== 1:1===
5?5
57
57
65P
*ata)rata5 5 ;7,8
jumlah5;,8 5 <9$999 c"u:g
6. Pen(en.eran 'er#r#an !en(an ,#&lah $"l"ni 55-55=
Ji$a ,#&lah $"l"ni anara 55-55=+ &a$a .ari rasi" anar pen(en.eran. Apa'ila
rasi"n%a $#ran( !ari 5+ &a$a ,#&lah &i$r"'a !iper"eh !ari nilai raa-raa. Ji$a
rasi"n%a le'ih 'esar aa# sa&a !en(an 5+ &a$a !i(#na$an !aa !ari pen(en.eran
eren!ah
:"n"h:N" Pen(en.eran rasi" J#&lah &i$r"'a
/.2#3( aa# .2#3&L0
1:1== 1:1===
1. 576P 67P 1+7 5A.===
5. 17=P 65P 5+6 17.===
6. 558P 58P 1+5 55.===
7. 168P
145P
75P
6=P
5+7 15.===
5. 558P
57=P
58P
56
1+1 55.===
4. 557P
18=P
58P
sp
1+7 57.===
:"n"h perhi#n(an:
Con'oh no &"
rasio 5 5 6,= > ;
jumlah 5 5 ;7$999
Con'oh no :"

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
rasio 5 5 ;,= ? ;
jumlah 5 /@p5689/ 5 68$999
7. Ti!a$ a!a peri !en(an ,#&lah $"l"ni anara 55-55= !an salah sa# peri &e&ili$i
,#&lah $"l"ni le'ih !ari 55=+ &a$a pilih %an( palin( &en!e$ai 55= !an #lis
se'a(ai hasil !#(aan /!#(0.2#3&L
:"n"h:
Pen(en.eran
J#&lah &i$r"'a /.2#3( aa# .2#3&L0
1:1== 1:1===
655 5=
1ml 5 ;;8 5 <<$999 c"u:g
5. )e&#a peri !en(an ,#&lah $"l"ni $#ran( !ari 55
:aa ,#&lah $"l"ni %an( se'enarn%a pa!a pen(en.eran palin( ren!ah !an
lap"r$an se'a(ai !#(aan .2#3&L aa# .2#3(
:"n"h:
Pen(en.eran
J#&lah &i$r"'a /.2#3( aa# .2#3&L0
1:1== 1:1===
= = Q 1== /!#(0 .2#3(
18
14
5
=
Q 1== /!#(0 .2#3(
4. Ti!a$ a!a $"l"ni %an( #&'#h /i!a$ a!a sen%a1a pen(ha&'a0
Lap"r$an ,#&lah pen!#(aan !en(an $#ran( !ari pa!a pen(en.eran palin( ren!ah
:"n"h:

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
Pen(en.eran
J#&lah &i$r"'a /.2#3( aa# .2#3&L0
1:1== 1:1===
= = Q 1== /!#(0 .2#3(
1) J#&lah $"l"ni le'ih !ari 55=
Hi#n( $"l"ni !ala& 'a(ian peri 'er!asar !isri'#si %an( &e1a$ili.
Ji$a !ala& hi#n(an a!a Q1= $"l"ni3 .&
5
+ pilih !ala& 15 .&
5
!en(an .ara 4
l#asan h"ri*"nal 'er#r#an !an 4 l#asan s#!# $anan 'er#r#an
Ji$a !ala& hi#n(an a!a Q1= $"l"ni3 .&
5
+ hi#n( $"l"ni !ala& 7 l#asan
%an( &e1a$ili /seperi !i aas0 $ali$an !en(an raa-raa ,#&lah $"l"ni per .&
5
!en(an l#as peri /pa!a #&#&n%a se$iar 54 .&
5
0.
2) sprea!er
ipe pera&a 3 ranai $"l"ni
.iri: $"l"ni i!a$ !apa !ipisah$an se.ara epa $arena a!a !isine(rasi
(#&palan 'a$eri $ei$a in"$#l#& !ie'ar$an !ala& &e!ia ana&.
Ji$a sa# aa# le'ih ranai ,elas 'erasal !ari s#&'er erpisah+ hi#n( &asin(-
&asin( se'a(ai 1 $"l"ni. Jan(an hi#n( iap-iap $"l"ni in!i<i!# !ala& ranai
se'a(ai $"l"ni erpisah.
ipe $e!#a
.iri: per$e&'an(an $"l"ni &el#as !ala& 2il& air anara a(ar !an !asar peri+
er,a!i $arena a!a a$#&#lasi $ele&'a'an pa!a iap se'aran asli
sprea!er ini !apa &e1a$ili per#&'#han $"l"ni in!i<i!# ,i$a pen(en.eran
er!isri'#si se.ara &eraa !ala& &e!i#&
ipe $ei(a
.iri: er'en#$ !ala& 2il& air pa!a per&#$aan a(ar+ sa&a seperi ipe $e!#a+
sprea!er ini er,a!i $arena a!a a$#&#lasi $ele&'a'an pa!a iap se'aran asli
sprea!er ini ,#(a !apa &e1a$ili per#&'#han $"l"ni in!i<i!# ,i$a
pen(en.eran er!isri'#si se.ara &eraa !ala& &e!i#&

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
Le,-a( Ke(+a &
PENGHITUNGAN JUMLAH BAKTERI HIDUP 2TIDAK LANGSUNG3
DENGAN METODE PLATE COUNT
Ala' an Bahan
Lan*)ah Ke(+a
La$#$an preparasi s#spensi $epa!a sa&pel erle'ih !ah#l# /s1a'+ &aserasi !an
rinse0 /,i$a perl#0.
Mas#$$an sa&pel $e a'#n( 'erisi A &l aR#a!es #n#$ pen(en.eran pera&a+
selan,#n%a !ien.er$an sa&pai in($a pen(en.eran /&isaln%a sa&pai 1=
-8
0
eren#.
Dari 6 pen(en.eran era$hir !iplain( /!iana&0 $e &e!ia NA /N#rien A(ar0 aa#
P:A /Plae :"#n A(ar0 se'an%a$ !#a $ali iap pen(en.eran /!#pl"0.
Plain( !apa se.ara )prea! Plae aa# P"#r Plae. Ji$a se.ara )prea! Plae+ !apa
!i(#na$an 'aan( L aa# (lass 'ea!s.
In$#'asi pa!a s#h# 6=
"
: sela&a 1-5 ; 57 ,a&.
)eelah #&'#h+ $"l"ni !ihi#n(

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
Le,-a( Ke(+a $
PENGHITUNGAN JUMLAH BAKTERI HIDUP 2TIDAK LANGSUNG3
DENGAN METODE 'OST PROBAB(E NU'BER 2MPN3
.Ala' an Bahan
Lan*)ah )e(+a :
)e!ia$an 6 a'#n( 'erisi LBD) /A &l iap a'#n(0 !an 4 a'#n( 'erisi LB)) /A &l
iap a'#n(0 len($ap !en(an a'#n( !#rha&. A#r $ese&'ilan a'#n( &en,a!i 6
seri /seperi !i (a&'ar0.
K"."$ '""l %an( 'erisi air sa&pel.
Pin!ah$an s#spensi air sa&ple se'an%a$ 1= &l $e &asin(-&asin( a'#n( seri
pera&a /6 a'#n( LBD)0+ se.ara asepis.
Pin!ah$an s#spensi air sa&pel se'an%a$ 1 &l $e &asin(-&asin( a'#n( seri $e!#a
/6 a'#n( LB))0+ se.ara asepis.
Pin!ah$an s#spensi air sa&pel se'an%a$ 1 &l $e &asin(-&asin( a'#n( seri $ei(a
/6 a'#n( LB))0+ se.ara asepis.
In$#'asi se&#a a'#n( pa!a s#h# 6?S : sela&a 78 ,a&.
Liha a'#n( (as p"sii2 /asa& !an (as F har#s a!a $e!#an%a0+ lal# hi#n( a'#n(
p"sii2 #n#$ iap seri. T#lis
$"&'inasi a'#n( p"sii2 iap seri
/&isal : 6 5 10. K"&'inasi an($a
erse'# lal# !i."."$$an !en(an
a'el MPN #n#$ seri 6 sehin((a
!iper"leh ,#&lah &i$r"'a
se'enarn%a.

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
Misal :
!i!apa$an $"&'inasi ,#&lah a'#n( p"sii2 : 651 &a$a ,#&lah 'a$eri coli"orm a!alah
15= sel31== &l.

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
Le,-a( )e(+a 8
PENGHITUNGAN JUMLAH BAKTERI SECARA KESELURUHAN
2CARA LANGSUNG3
Ala'
Mi$r"s$"p
Hae&".%"&eer
Pipe
Bahan
)#spensi ."n"h
Lan*)ah Ke(+a 2i*una)an )o'a) .ean*3 :
Bersih$an Per"22-Ha#ser :"#nin( :ha&'er aa# Hae&".%"&eer !en(an al$"h"l ?= @
lal# $erin($an !en(an iss#e.
Lea$$an ."<er (lass !i aas ala hi#n(.
Ta&'ah$an G 5= Tl s#spensi ."n"h /$ira-$ira 1 ees0 !en(an .ara &enees$an pa!a
pari $a.a pa!a ala hi#n(. )#spensi sel a$an &en%e'ar $arena !a%a $apilarias.
Biar$an se,ena$ sehin((a sel !ia& !i e&pa /i!a$ er$ena aliran air !ari e2e$
$apilarias0.
Lea$$an ala hi#n( pa!a &e,a 'en!a $e&#!ian .ari 2"$#sn%a pa!a per'esaran 7=;1=.
La$#$an perhi#n(an se.ara $asar apa$ah !iperl#$an pen(en.eran aa# i!a$
Ji$a !ala& sa# $"a$ se!an( er!apa sel-sel %an( 'an%a$ !an 'er#&p#$ &a$a
perhi#n(an a$an i!a$ a$#ra !an !iperl#$an pen(en.eran !en(an per'an!in(an 1:5
aa# 1:1=.
Hi#n( sa&pel+ palin( i!a$ se'an%a$ 5 $"a$ se!an( /le'ih 'an%a$ le'ih 'ai$0.
Hasil perhi#n(an !iraa-raa $e&#!ian hasil raaan !i&as#$$an r#&#s #n#$ $"a$
se!an(. Ji$a !ila$#$an pen(en.eran &a$a ,#&lah sel3&l !i$ali$an 2a$"r pen(en.eran.

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
Le,-a( E5alua.i
1. Jelas$an .ara penen#an ,#&lah 'a$eri hi!#p /i!a$ lan(s#n(0 'eri$# B
a. Plae ."#n
'. MPN
5. Jelas$an .ara perhi#n(an 'a$eri se.ara $esel#r#han /lan(s#n(0B

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
DA9TAR PUSTAKA
Ba!an POM >I. 5==8. Pen(#,ian Mi$r"'i"l"(i Pan(an. 3n"o PAM 4ol$ 7 no$ ; Maret ;99B.
E. Pra!hi$a. 5==8. Menentukan 1umlah !an ,kuran Mikroba. hp: 33e$&"n-
sa#r#s.'l"(sp".."&. !ia$ses an((al 5 He'r#ari 5=11
--------------. 5==8. Me!ia Pertumbuhan. hp: 33e$&"n-sa#r#s.'l"(sp".."&. !ia$ses an((al
5 He'r#ari 5=11
--------------. 5==8. 3solasi Mikroorganisme. hp: 33e$&"n-sa#r#s.'l"(sp".."&. !ia$ses
an((al 5 He'r#ari 5=11
--------------. 5==8. Sterilisasi. hp: 33e$&"n-sa#r#s.'l"(sp".."&. !ia$ses an((al 5
He'r#ari 5=11
--------------. 5==8. Mor"ologi Mikroba. hp: 33e$&"n-sa#r#s.'l"(sp".."&. !ia$ses
an((al 5 He'r#ari 5=11
--------------. 5==8. Akti4itas %n&imatis Mikroorganisme. hp:33e$&"n-
sa#r#s.'l"(sp".."&. !ia$ses an((al 5 He'r#ari 5=11
--------------. 5==8. Daya (erja Anti Mikroba !an Aligo!inamik. hp: 33e$&"n-
sa#r#s.'l"(sp".."&. !ia$ses an((al 5 He'r#ari 5=11
--------------. 1AA7. Pe#n,#$ Pra$i$#& Mi$r"'i"l"(i U&#&. La'"ra"ri#& Bi"e$n"l"(i.
Ha$#las Te$n"l"(i peranian. UGM. I"(%a$ara.
--------------. 5==8. Pe#n,#$ Pra$i$#& Mi$r"'i"l"(i Dasar. La'"ra"ri#& Mi$r"'i"l"(i.
Ha$#las Bi"l"(i. UN)UD. P#r1"$er".
--------------. 5=1=. Lap"ran Mi$r"'i"l"(i. hp33&%al#**.1"!press.."&. Dia$ses an((al 1=
He'r#ari 5=11
>ana )iri Ha!i"r"&". 1A85. Mi$r"'i"l"(i Dasar !ala& Pra$e$. La'"la"ri#& Mi$r"'i"l"(i.
Ha$#las Mae&ai$a !an Il&# Pen(eah#an Ala&. IPB. B"("r.
)eia1an+ 8. 5==5. Penghitungan 1umlah Mikroba Secara Langsung Menggunakan
Haemocytometer. h p :3 3 ' l" ( .#ni la.a. .i! 3 1 as e ia1an . Dia$ses an((al 5 He'r#ari 5=11
)an!ar Nasi"nal In!"nesia. 5==4. Air Minum !alam (emasan. )NI =1-6556-5==4.
Ba!an )an!arisasi Nasi"nal.

Analisis bahan hasil pertanian secara mikrobiologis
----------------. 5==8. Meto!e Pengujian Cemaran Mikroba !alam Daging, 'elur !an Susu,
serta Hasil Alahannya. )NI 5A8?: 5==8
)#&arsih+ )ri. 5==6. Diktat (uliah Mikrobiologi Dasar. Ha$#las Peranian UPN
UDeeranV. J"(,a$ara
Pel.*ar+ Mi.hael J+ Jr. !an E.:.). :han. 5==?. Dasar)Dasar Mikrobiologi. UI Press.
Ja$ara
Pra&"n"+ Hen!r". 5==?. Catatan (uliah Mikrobiologi Dasar$ 1 1 1 .#ns"e!.a . .i! .
Dia$ses an((al 5 He'r#ari 5=11
8i!iani+ Ni L#h P !an Ni P## >isiai. 5==7. Analisis K#aliai2 Ba$eri K"li2"r& pa!a
Dep" Air Min#& Isi Ulan( !i K"a )in(ara,a Bali. 1urnal %kologi (esehatan #ol$
< no$ 6$
8i'"1"+ Marlia )in((ih. 5===. Cara Pengawetan !an Penyimpanan Biakan @ungi.
Insai# Te$n"l"(i Ban!#n(.

Você também pode gostar