Hemoparsitos transmitidos por garrapatas Kujman, Santiago*; Sepiurka, Leonardo**; Greco, Sebastin A.

*** Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA). Tandil. Argentina. Facultad de Ciencias Veterinarias. rea de Clnica Mdica y Quirrgica de Pequeos Animales * Estudiante-Residente: Crdoba 2152 piso 3 D, (7600) Mar del Plata. skujman@hotmail.com ** Tutor externo: Directorio 155, (1667) Tortuguitas. leonardo@sepiurka.com.ar *** Veterinario ecografista: Zapata 31 piso 5 F, (1426) Capital Federal. grecosvet@uol.com.ar Fecha de realizacin: Diciembre de 2004. Introduccin Babesiosis canina Etiologa. Es una enfermedad protozoaria que afecta a los eritrocitos, provocada por microorganismos intracelulares del gnero Babesia1,2,3,4,5. Las especies que afectan de forma natural a los caninos comprenden B. canis y B. gibsoni1,3,5,6. De ambas, B. canis es la ms importante a nivel mundial1,3. Es un microorganismo piriforme, con un tamao aproximado de 2,4 x 4-7m1,2,4,5,7, que aparece en forma aislada o en pares dentro del glbulo rojo1,3,4,5,7. Dentro del hospedador, los merozotos se fijan a la membrana del glbulo rojo mediante un complejo apical especializado8 y son englobados mediante endocitosis1; luego la membrana del endosoma se desintegra, y el merozoto se transforma en trofozoto8. El parsito permanece entonces en contacto directo con el citoplasma del eritrocito durante toda su evolucin1, en la cual dar lugar a merozotos adicionales mediante un proceso de merogonia8, es decir que la reproduccin de la babesia se realiza por fisin binaria repetida1,3,5,, Pudiendo llegar a presentarse hasta 16 merozotos dentro de la clula1,8. Luego de dividirse, la abandonan provocando su lisis y se dirigen hacia otra para infectarla8. Las garrapatas ingieren los merozotos junto con la sangre de los animales infectados1,5,8; una vez dentro, se produce la esquizogonia en las clulas epiteliales intestinales y da lugar a la formacin de macromerozotos, los que realizan sucesivos ciclos de esquizogonia en otros tejidos, incluyendo los oocitos8 y las clulas de las glndulas salivales del ectoparsito. Es en este ltimo sitio donde por medio de un ciclo de esquizogonia se generan los micromerozotos infecciosos1,8. El ciclo vuelve a iniciar cuando los esporozotos alcanzan la sangre de un animal a travs de la saliva de una garrapata infectada1. Epidemiologa. La garrapata marrn del perro, Rhipicephalus sanguineus, es el principal vector de este protozoario3,5,7,8. Si bien la va ms comn de transmisin es la mordedura de las garrapatas vectoras, tambin puede ocurrir a travs de la placenta1,3,7, y por medio de transfusiones sanguneas2,4,8. Patognesis. El periodo de incubacin luego de la mordedura de una garrapata infectada es de 10-21 das8. El husped manifiesta una respuesta inmunitaria importante; sin embargo, el organismo no parece ser capaz de eliminar completamente la infeccin, y es por ello que los pacientes que se recuperan, suelen quedar como portadores crnicos del parsito1,3. En cachorros menores de ocho meses es comn que la respuesta inmune sea deficiente, por lo cual la signologa es ms acentuada en estos pacientes1,3,6,7. Uno a dos das posinfeccin se establece una parasitemia que se prolonga por alrededor de 4 das3,4,8; durante los prximos 10 a 14 das no se hallan microorganismos en sangre perifrica, pero al trmino de este periodo se desencadena una segunda parasitemia ms intensa3,4,8, alcanzando al da 20 el nmero mximo de parsitos en sangre4,8. Los eritrocitos parasitados aumentan su fragilidad osmtica, provocando hemlisis y anemia asociada1,3,4. No se ha visto correlacin positiva entre gravedad de la anemia y grado de parasitemia. La estasis vascular tambin contribuye a la produccin de anemia aguda y a una gran variedad de signos asociados, ocurriendo la sedimentacin ms importante aparentemente a nivel de sistema nervioso central y msculos1. La hipoxia tisular se relaciona con el desarrollo de diversos signos ocasionados por la babesia1,3,4,5,8, y se sugiere que el dao tisular resultante induce la liberacin de mediadores inflamatorios que incrementan el dao sistmico1,8. Hallazgos Clnicos. El curso de la enfermedad puede ser hiperagudo, agudo, crnico o subclnico1,2,4. La presentacin aguda es la ms comn, teniendo como signos clnicos clsicos pirexia, letargo, anorexia, y anemia aguda, con palidez de mucosas1,3,4,5,8. Tambin suelen observarse vmitos, trombocitopenia, linfadenomegalia y esplenomegalia1,5, y ciertas veces se aprecia hematuria, ictericia y petequias1,3,4. Los animales con enfermedad aguda generalmente se recuperan frente a una teraputica adecuada1. La infeccin subclnica es comn en ciertas poblaciones caninas1. Es una potencial fuente de infeccin para cachorros susceptibles en centros de crianza1,8. La mayora de estos perros nunca presenta signos, y rara vez los presenta ante un episodio de estrs o luego de un tratamiento con glucocorticoides1. 1

Adems, hay gran variedad de signos atpicos1,4,5, que resulta difcil demostrar si se deben a babesiosis o son causa de otra enfermedad concurrente1. Los signos incluyen alteraciones digestivas, respiratorias, renales, musculoesquelticas y neurolgicas, entre otras1,4,5,8. Diagnstico. Las principales alteraciones hematolgicas son anemia y trombocitopenia1,2,3,4,5,8. En escasos pacientes se presenta leucocitosis, neutrofilia, neutropenia, linfocitosis o eosinofilia1,2. A veces se evidencia una autoaglutinacin de hemates en solucin salina1,8, y muchos de los perros infectados son positivos a la prueba de Coombs, lo cual dificulta la diferenciacin entre babesiosis y anemia hemoltica inmunomediada, cuando los hemoparsitos no se hallan en los frotis1,2,3,4,7,8. Algunos pacientes pueden mostrar elevaciones en el tiempo de tromboplastina parcial activada , tiempo de protrombina y tiempo de coagulacin activada2. La bioqumica srica es normal1,2, aunque algunos perros pueden presentar hiperglobulinemia o variaciones en los niveles de potasio o glucemia1. Al realizar el anlisis de orina, puede observarse bilirrubinuria1,2,3,4,7, hemoglobinuria1,3,4,7, proteinuria y cilindros granulosos1,7. La demostracin de los hemoparsitos dentro de los eritrocitos (Fig. 1) o una serologa positiva constituyen los mtodos especficos para llegar al diagnstico definitivo1,2,3,4,5,6,7,8. Frecuentemente, el grado de parasitemia es bajo, lo que obliga a realizar un cauteloso examen del preparado para lograr la localizacin de las babesias1. Los frotis pueden ser teidos con Wright, Giemsa o Diff Quik, entre otros4,5,7,8. Para obtener un mayor nmero de glbulos rojos infectados se puede recurrir a la extraccin de sangre de lechos capilares perifricos, como los mrgenes auriculares, las uas o el canto de las almohadillas plantares1,3,5,8. Es comn encontrar parasitados a los hemates prximos a la capa leucoctica1. Los portadores crnicos o asintomticos rara vez poseen eritrocitos con babesias en su interior, y en muchos casos se deben realizar pruebas serolgicas mediante inmunofluorescencia indirecta para identificar a estos individuos1,3,5,6,7,8. Este mtodo es el ms usado y seguro para detectar anticuerpos antibabesia; el hallazgo de ttulos mayores a 1:40 en una muestra aislada es suficiente para confirmar el diagnstico de infeccin por B. canis o B. gibsoni1,3,4,6,7. Un incremento de ttulos luego de 2 a 3 semanas indica una infeccin activa4,5. Es importante aclarar que pacientes jvenes que cursan los primeros das de la enfermedad pueden dar resultados falsos negativos1,2,4,6; lo mismo ocurre con cualquier animal inmunosuprimido4.

Figura 1. Tincin con Diff Quik . Fuente: Kujman, S; Sepiurka, L; Greco, S. 2004. Tesina de grado. Tratamiento. Se basa en la terapia de sostn y en la medicacin antiprotozoaria, indicados para disminuir la mortalidad y severidad de los signos clnicos3,4,5, ya que puede resultar imposible eliminar completamente al parsito4,5. El tratamiento de sostn posee importancia en cuadros graves, agudos y peragudos, teniendo como objetivos revertir el shock y corregir la anemia y acidosis metablica severas3,4. Cuando el hematocrito disminuye a 15%, est indicada la transfusin sangunea3,4,8. En caso de requerir hidratacin, se prefieren las 2

soluciones de cristaloides, sin embargo se debe tener la precaucin de examinar correctamente al paciente para no desencadenar o exacerbar un edema pulmonar preexistente. Por otra parte, la hemoconcentracin puede tratarse con cristaloides (120 ml/kg/24 horas) o con coloides (hetalmidn, 10-20 ml/kg)8. Una vez estabilizado el paciente, se debe proseguir con la quimioterapia antiprotozoaria3. Existen varias drogas en el mercado que combaten en diferente grado las infecciones causadas por Babesia (tabla 1). La mejora clnica de los pacientes suele evidenciarse transcurridas las 24 horas postratamiento1,8. Genrico (comercial) Dipropionato de imidocarb (Imizol) Aceturato de diminaceno (Berenil, Ganaseg) Isetionato de fenamidina (Lomadine, Phenamidine) Sulfato de quinuronio (Acaprin) Isetionato de pentamidina (Pentam 300) Azul tripano Doxiciclina (Vibramycin) Fosfato de primaquina (Primaquine) Clindamicina (Antirobe, Cleocin) Azitromicina (Zithromax) Dosis (mg/kg) Va Intervalo Duracin (das) B. canis 5-6.6 IM 14 das 14 +++ 7.5 IM Una vez 3.5 15 0.25 16.5 10 10 0.5 12.5-25 5-10 IM SC SC IM IV PO IM PO PO Una vez 24 hs. 48 hs. 24 hs. Una vez 12 hs. Una vez 12 hs. 12 hs. 2 2 2 7-10 7-10 7-10 +++ +++ ++ + + + ? ? ?

Atovacuona (Mepron) 13.3 PO 8 hs. 5-7 ? Tabla 1. Adaptado de Craig E. Greene. Enfermedades infecciosas en perros y gatos. 2 Edicin. Editorial McGraw-Hill Interamericana. El dipropionato de imidocarb combate activamente la infeccin por babesia y elimina la infectividad de las garrapatas que se alimentan de animales tratados hasta por cuatro semanas despus del tratamiento1. Esta droga tambin es eficaz contra Ehrlichia canis y Hepatozoon canis, por lo tanto es el frmaco de eleccin en infecciones combinadas1,3; suele ser eficaz una segunda dosis a los 14 das de la primera3,8. El metronidazol, a razn de 25 mg/kg cada 8 a 12 horas, o el clorhidrato de clindamicina en dosis de 12,5 mg/kg/12 horas administrados oralmente por 2 o 3 semanas pueden ser efectivos mientras se aguarda la llegada de drogas ms especficas4. Una vez eliminadas las babesias del organismo, ste no desarrolla inmunidad protectora, y los animales son susceptibles a la reinfeccin3,4; en las zonas endmicas de babesiosis, donde no es posible la erradicacin del microorganismo, el objetivo consiste slo en reducir su replicacin3. Hepatozoonosis canina Etiologa. Es una enfermedad causada por protozoarios del gnero Hepatozoon2,4,9,10. H. canis se descubri por primera vez en India en 1905 y desde entonces se ha difundido por muchos pases del mundo9; en EEUU el agente causal es H. americanum, que hasta 1997 se crea era una cepa muy patgena de H. canis9,10. En el estadio de gametocito es halla dentro de neutrfilos y monocitos, presentndose como inclusiones intracitoplasmticas ovales de color azul hielo, y alcanzando un tamao aproximado de 5 por 10 m7. Al alimentarse de la sangre de un animal con parasitemia, las garrapatas ingieren neutrfilos y monocitos infectados3,10. Luego, los microorganismos se replican y evolucionan hasta llegar a esporozotos en el hemocele3; la transmisin de Hepatozoon ocurre por ingestin de las garrapatas infectadas2,3,4,7,10. Dentro del animal los esporozotos penetran la pared intestinal y son transportados por sangre o linfa hasta los fagocitos mononucleares o clulas endoteliales, donde la esquizogonia da lugar al desarrollo de macroesquizontes3,4,10. Los macromerozotos liberados penetran en clulas de msculo esqueltico, miocardio, pulmones, bazo, linfoglndulas e hgado, donde se desarrollan nuevos ciclos de esquizogonia, que resultan en la formacin de microesquizontes2,3,4. En este estadio, los parsitos pueden persistir en las clulas como estructuras qusticas durante un tiempo variable sin inducir respuesta inflamatoria alguna. Sin embargo, cuando los micromerozotos se liberan ocurre una respuesta inflamatoria granulomatosa. Los neutrfilos y monocitos se infectan al fagocitar los micromerozotos o al ser penetrados directamente por ellos3. Una vez dentro, evolucionan a gametocitos y el ciclo vuelve a iniciarse cuando una garrapata ingiere los leucocitos infectados3,4,10.

Epidemiologa. Hepatozoon canis es transmitido principalmente por la garrapata marrn del perro, Rhipicephalus sanguineus4,7,9,10. Adems, en cachorros ha sido reportada la transmisin vertical10. Hallazgos clnicos. Los pacientes infectados con H. canis generalmente no sufren signos clnicos2,3,4,7,10; los perros que los desarrollaran son principalmente aquellos que padecen infecciones concurrentes, inmunosuprimidos, animales que sufren disfuncin neutroflica gentica o cachorros menores de cuatro meses de edad3,4. Diagnstico. Se basa en la observacin directa de extendidos sanguneos, donde neutrfilos y/o monocitos pueden verse parasitados con los gametocitos de Hepatozoon2,3,4,7 (Fig. 2). Los frotis pueden ser coloreados con Wright7 o Giemsa3,4,7 Diff Quik20, adoptando los gametocitos una coloracin azul blanco brillante3,7. En animales con infeccin crnica es difcil llegar al diagnstico2; las clulas afectadas pueden ser slo una o dos por cada 1000 leucocitos3,7, por lo tanto el examen del frotis debe realizarse en forma meticulosa para lograr hallarlas. La biopsia muscular tambin es a menudo til para establecer el diagnstico, con el fin de hallar quistes con microesquizontes en desarrollo2,3,4,10, de aproximadamente 250-500 mm de dimetro10. Los anticuerpos generados contra el parsito pueden ser detectados en el suero de perros clnicamente enfermos, sin embargo no hay evidencias certeras acerca de la inmunidad protectora que ellos ofrecen3.

Figura 2. Tincin con Diff Quik. Fuente: Kujman, S; Sepiurka, L; Greco, S. 2004. Tesina de grado. Tratamiento. Lamentablemente, no se ha tenido xito en la eliminacin completa del microorganismo con el uso de drogas antiprotozoarias y antimicrobianas3,4, y es por ello que las recadas suelen aparecer4. Los tratamientos aparentemente eficaces no han podido ser reproducidos por otros investigadores3. En relacin con ello, se ha comunicado el xito de la primaquina y tetraciclinas en la eliminacin de las parasitemias en raras ocasiones2. En la tabla 2 se mencionan algunas drogas que pueden utilizarse para combatir la enfermedad. Droga Aceturato de diminaceno Dipropionato de imidocarb Fosfato de primaquina Toltrazurilo Trimetoprim-Sulfadiacina* Pirimetamina* Clindamicina* * Terapia combinada Dosis (mg/kg) 3,5 5 0,5 5-10 15 0,25 10 Va IM SC SC SC/PO Intervalo (horas) 24 12 24 8 4 Duracin (das) 1 1 1 3-5

Tabla 2. Adaptado de Nelson, R.; Couto, C.G. 1998. Small animal internal medicine. 2 Edicin. Editorial Mosby. El dipropionato de imidocarb tambin puede ser administrado a 6 mg/kg SC cada 14 das, pero en combinacin con tetraciclina en dosis de 22 mg/kg/8 horas oralmente por 14 das4. Trombocitopenia cclica infecciosa Etiologa. Desde el ao 2001, el agente causal ha pasado a denominarse Anaplasma platys11,12, previamente conocido como Ehrlichia platys2,6,11,13,14,15,16,17,18. Pertenece al grupo de las rickettsias11,12 y se distingue de otras especies de Anaplasma por su capacidad de infectar plaquetas12. Se diagnostic por primera vez en Estados Unidos en 197811,12,14, pero desde entonces se ha descrito tambin en Venezuela, China, Taiwan, Japn, Australia, Israel, Espaa, Grecia, Alemania, Italia y Francia12. Se considera como un parsito estricto del perro12. Dentro del husped, el microorganismo llega a sangre como cuerpos elementales que se introducen en las plaquetas por endocitosis mediada por receptor o por fagocitosis19; la infeccin plaquetaria impedira la fusin de lisosomas a la membrana de la vacuola11. Comienzan a multiplicarse por fisin binaria11,19 transformndose en cuerpos iniciales19. Se trata de cuerpos redondos, ovales o en forma de habichuela, de 0,3 a 1,2 m, que se hallan dentro de mrulas en un nmero variable de uno a quince11,12. Las mrulas intraplaquetarias pueden ser nicas o mltiples11,15 y alcanzan un dimetro de 0,8 a 2,1 m, con lo que pueden llegar a ocupar gran parte de la plaqueta11. Cuando sta se lisa, la mrula libera nuevos cuerpos elementales que invaden otros trombocitos19. Se pueden hallar organismos con diferentes rasgos ultraestructurales en la misma plaqueta; esto indicara que se trata de distintas etapas de desarrollo de A. platys11. Epidemiologa. La transmisin de este hemoparsito en forma natural se realiza a travs de la mordedura de garrapatas infectadas6,11,12,15,17. La principal especie implicada es Rhipicephalus sanguineus, aunque tambin pueden actuar como vectores otros artrpodos. Experimentalmente, A. platys tambin ha sido transmitido mediante transfusiones de sangre obtenida durante el periodo parasitmico11,12. Hallazgos clnicos. Generalmente los animales no muestran signos clnicos11,12,13,15,18, aunque es probable que la infeccin crnica con este agente complique el diagnstico y tratamiento de otras enfermedades concurrentes6. Algunos investigadores, sin embargo, han reportado signos clnicos graves, similares a los asociados con infeccin por E. canis11. Despus de un periodo de incubacin de 8 a 15 das iniciaran los signos clnicos12,18, principalmente fiebre y trombocitopenia6,11,12,13. Suele observarse adenopata generalizada, leucopenia y anemia moderadas, hipergammaglobulinemia moderada, hipoalbuminemia e hipocalcemia12. Los episodios de trombocitopenia, que duran 3 o 4 das12, se suceden cada 7 a 21 das6,11,12,13. La trombocitopenia es mxima durante el primer episodio, con un nmero de plaquetas inferior o igual a 10.000/l; sin embargo, las hemorragias son raras, y los casos documentados de hemorragias fatales fueron consecuencia de heridas accidentales o quirrgicas12,15. Con el tiempo, la trombocitopenia cclica se transforma en trombocitopenia crnica de evolucin lenta, caracterizada por bajo nmero de plaquetas infectadas12,13. Las cepas griegas e israelitas parecen ser ms patgenas; provocan fiebre de hasta 41,5C, anorexia, abatimiento, palidez y petequias en mucosas, y lesiones hemorrgicas cutneas12,17. Luego de la infeccin con A. platys, la memoria inmunitaria puede alcanzar una duracin de al menos cuatro meses, despus de lo cual el organismo queda nuevamente susceptible a padecer la enfermedad12. Diagnstico. La observacin de mrulas de A. platys suele ser el resultado de un hallazgo de rutina durante el examen del frotis sanguneo11. Algunos autores17 han reportado un bajo porcentaje de plaquetas afectadas en las muestras de sangre, aunque otros11 mencionan hasta un 97% de trombocitos infectados. A. platys puede ser demostrada como mrulas intraplaquetarias11,13,14,18 de color azul (Fig. 3) en frotis coloreados con tincin de Giemsa12,13,18. Sin embargo, el examen microscpico suele dar resultados falsos negativos por dos razones: porque la trombocitopenia es cclica, y porque la proporcin de plaquetas afectadas disminuye con cada ciclo sucesivo12,13. Es por esto ltimo que este mtodo es til sobre todo en infecciones agudas12. A. platys se distingue serolgicamente de las especies de Ehrlichia6,12,17, de Anaplasma phagocytophilum y de Neorickettsia risticii12, por lo tanto ttulos de anticuerpos inmunofluorescentes de 1:100 o mayores confirman la positividad de un caso a A. platys6,12. Ciertos investigadores13 afirman que la seroconversin sucede 13 a 19 das luego de la inoculacin, mientras que otros12 documentan que los anticuerpos se elevan significativamente desde el primer episodio de trombocitopenia, alcanzando ttulos de 1:5120 o ms en 7 a 14 das.

Figura 3. Imgenes compatibles con mrulas de Anaplasma platys. Diff Quik. Fuente: Kujman, S; Sepiurka, L; Greco, S. 2004. Tesina de grado. Tratamiento. Como el aislamiento del microorganismo en cultivos celulares no puede ser practicado, el antibiograma es irrealizable12. Sin embargo, A. platys es sensible a la tetraciclina y doxiciclina, incluso en el caso de caninos asintomticos6,12,13,17,18. Otras drogas efectivas son la oxitetraciclina, la minociclina y el cloranfenicol12. El tratamiento debe ser continuado por cuatro semanas, aunque en infecciones crnicas el periodo puede prolongarse hasta las ocho semanas12,13. No existen vacunas contra la trombocitopenia cclica infecciosa, y la profilaxis se basa principalmente en la lucha contra los vectores. Los caninos utilizados como donantes de sangre deberan ser evaluados mediante inmunofluorescencia indirecta dos veces a intervalos de cuatro semanas, todos los aos12. Conclusiones En base a lo expuesto en esta presentacin, se debera sospechar de babesiosis clnica en todo canino, preferentemente cachorro, que se presente a consulta con anorexia, decaimiento, fiebre y/o palidez de las mucosas, rescatando durante la inspeccin clnica o anamnesis, que el animal tiene o tuvo garrapatas en algn momento. En cuanto a Hepatozoon canis y Anaplasma platys, si bien la bibliografa los describe principalmente como microorganismos poco patgenos, stos podran actuar como agentes secundarios complicantes durante el transcurso de una enfermedad primaria, por lo que no se les debe restar importancia a la hora de dictar un pronstico. Y si bien parecen carecer de gran patogenicidad, es necesario comprender que la aparicin de cepas ms patgenas en la regin se halla latente debido a la movilizacin de animales infectados provenientes de otras zonas, y a la potencial capacidad de mutacin de estas especies de hemoparsitos. Para prevenir la aparicin de estas enfermedades es necesaria la lucha contra el vector principal, la garrapata, sin la cual estas enfermedades no pueden transmitirse naturalmente. Es durante el periodo estival cuando stas incrementan significativamente su poblacin debido a las condiciones propicias que el ambiente les ofrece, y consecuentemente aumenta el nmero de garrapatas infectadas con hemoparsitos. Si bien es impracticable la erradicacin de la garrapata, es importante desarrollar en las reas endmicas, cada vez ms grandes debido al cambio climtico actual, programas de promocin sanitaria, orientados a informar a los propietarios de mascotas acerca de las enfermedades que pueden ser transmitidas por las garrapatas y su patogenicidad. Ser funcin del veterinario actuante la recomendacin de los productos ms eficaces a fin de eliminar a los ectoparsitos, instruyendo a los propietarios sobre la dosis, forma de administracin e intervalos 6

de tratamiento adecuados. Finalmente, tampoco debe dejarse de lado la probabilidad de transmisin mediante transfusiones sanguneas, y es por ello que, previamente a realizar las extracciones, debera evaluarse la sangre de los caninos donantes en busca de hemoparsitos. Referencias bibliogrficas 1. Greene, C.E. Enfermedades infecciosas en perros y gatos. 2 Edicin. Editorial McGraw-Hill Interamericana. Captulo 77: 520-528. 2. Tilley, L.P.; Smith, F.W.K. 1998. La consulta veterinaria en 5 minutos canina y felina. Editorial Intermdica. p. 377, 718. 3. Ettinger, S. 1992. Tratado de medicina interna veterinaria. 3 Edicin. Editorial Intermdica. Captulo 46: 307-309, 311-312. 4. Nelson, R.; Couto, C.G. 1998. Small animal internal medicine. 2 Edicin. Editorial Mosby. Captulo 104: 1318-1320, 1337. 5. Cleveland, C.W.; Peterson, D.S.; Latimer, K.S. An Overview of Canine Babesiosis. College of Veterinary Medicine, The University of Georgia, Athens. Disponible desde: URL: http://www.vet.uga.edu/vpp/clerk/Cleveland/ 6. Breitschwerdt, E.B. 1996. Diagnstico de laboratorio de las enfermedades caninas transmitidas por garrapatas. En: Teraputica Veterinaria de Pequeos Animales (Kirk, R.W.; Bonagura, J.D.). XI Edicin. Editorial Interamericana/McGrawHill. Seccin 4: 281-282). 7. Hoskins, J.D. 1999. Pediatra veterinaria. 2 Edicin. Editorial Intermdica. Captulo 15: 407-408, 411-412. 8. Lobetti, G.R. 1999. Babesiosis canina. Parte 1. Publicado en Selecciones Veterinarias. Vol. 7(3): 236-241. 9. Baneth, G.; Barta, J.R.; Shkap, V.; Martin, D.S.; Macintire, D.K.; Vincent-Johnson, N. 2000. Genetic and Antigenic Evidence Supports the Separation of Hepatozoon canis and Hepatozoon americanum at the Species Level. En: Journal of Clinical Microbiology. Vol. 38(3): 1298-1301. Disponible desde: URL: http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?artid=88612 10. Braund, K.G. Hepatozoon Myositis. 2003. En: Clinical Neurology in Small Animals - Localization, Diagnosis and Treatment, Braund K.G. Disponible desde: URL: http://www.ivis.org/special_books/Braund/braund20a/chapter_frm.asp?LA=1 11. Arraga-Alvarado, C.; Palmar, M.; Parra, O.; Salas, P. 2003. Ehrlichia platys (Anaplasma platys) in Dogs from Maracaibo, Venezuela: An Ultrastructural Study of Experimental and Natural Infections. En: Veterinary Pathology. Vol. 40: 149-156. Disponible desde: URL: http://www.vetpathology.org/cgi/content/full/40/2/149 12. Euzby, J.P. 2001. Anaplasma platys. En: Dictionnaire de Bactriologie Vtrinaire Socit de Bactriologie Systmatique et Vtrinaire. Disponible desde: URL: http://www.bacterio.cict.fr/bacdico/aa/platys.html 13. Trombocitopenia Cclica Infecciosa. 1993. Merck & Co., Inc. En: El Manual Merck de Veterinaria. Cuarta Edicin. Parte 1: 477. 14. Sainz, A.; Amusategui, I.; Rodrguez, F.; Tesouro, M.A. 2000. Las ehrlichiosis en el perro: presente y futuro. Disponible desde: URL: http://www.laboratoriosprovet.com.co/inftecnica/PARASITOLOGIA/ERLICHIOSIS%20EN%20PERRO.asp 15. Mathew, J.S.; Ewing, S.A. 2002. Ehrlichiosis. Oklahoma State University College of Veterinary Medicine. Disponible desde: URL: http://www.cvm.okstate.edu/instruction/mm_curr/Ehrlichiosis/Ehrlichiosis.htm 16. Acquired Thrombocytopenia. 2003; Merck & Co., Inc. in cooperation with Merial Ltd. Disponible desde: URL: http://www.merckvetmanual.com/mvm/index.jsp?cfile=htm/bc/10606.htm 17. Irwin, P.J. 2001. The first report of canine ehrlichiosis in Australia. En: Australian Veterinary Journal. Vol. 79(8): 52-53. Disponible desde: URL: http://www.ava.com.au/avj/0108/01080552.pdf 18. Kocan, A.A. 2003. Ticks and tick-transmitted diseases in Oklahoma. Center for Veterinary Health Sciences. Disponible desde: URL: http://www.cvm.okstate.edu/instruction/kocan/ticks/tickok.htm 19. Mandaluniz, N.; Garca-Prez, A.L.; Barral, M.; Juste, R.A. 1997. Desarrollo de un protocolo de PCR para la deteccin de Ehrlichia phagocytophila. Primer estudio de prevalencia en el vector. En: Informe Tcnico N 71 del Dpto. de Industria, Agricultura y Pesca. Gobierno Vasco. Disponible desde: URL: http://personal.redestb.es/rajuste/epha03.htm 20. Kujman, S; Sepiurka, L; Greco, S. 2004. Tesina de grado. Hemeroteca de la facultad de ciencias veterinarias de la UNCPBA.