UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHO

CENTRO DE CINCIAS BIOLGICAS E DA SADE

Raiane de Jesus Santos Mendes de Castro

Prof . Dr. Denise Fernandes Coutinho

AVALIAO BOTNICA, QUMICA E BIOLGICA DAS PLANTAS

AROMTICAS DA AMAZNIA ORIENTAL: Estudo botnico, qumico e avaliao de
citotoxicidade e atividade antibacteriana de Ilex retusa Klotzch.

So Lus
2012
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Nome do Bolsista

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Nome do Orientador (a)

AVALIAO BOTNICA, QUMICA E BIOLGICA DAS PLANTAS

AROMTICAS DA AMAZNIA ORIENTAL: Estudo botnico, qumico e avaliao de
citotoxicidade e atividade antibacteriana de Ilex retusa Klotzch.

Relatrio parcial apresentado ao Programa Institucional

de Bolsas de Iniciao Cientfica PIBIC, na
Universidade Federal do Maranho.

So Lus
2012
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RESUMO
Para a obteno de novos insumos da regio da Amaznia Oriental, essencial o
conhecimento tcnico-cientfico das espcies vegetais com potencial econmico. As plantas
aromticas e os seus leos essenciais constituem-se importantes matrias-primas para a
indstria brasileira. Considerando a diversidade da flora do estado do Maranho e a
importncia dos leos essenciais, este estudo foi proposto para contribuir com a
caracterizao farmacobotnica da espcie vegetal Ilex retusa Klotzch. Para tanto, coletou-se
o material na cidade de Mirador-MA e fez-se um aprofundado levantamento bibliogrfico,
anlise microscpica, seguido da extrao de seu leo essencial e de testes com o intuito de
conhecer possveis atividades farmacolgicas (antimicrobiana) e de toxicidade (bioensaio com
Artemia salina) do contedo aromtico.A partir desses resultados, ser possvel determinar o
potencial desse leo para produo de medicamentos, perfumes, produtos de higiene ou
cosmticos e indicar espcies vegetais de interesse aromtico e/ou farmacolgico para estudos
posteriores de cultivo, contribuindo para a sustentabilidade desse bioma.
Palavras-chave: Amaznia Oriental.leos essenciais.Toxicidade

SUMRIO

1 INTRODUO....................................................................................................... 4
2 OBJETIVOS............................................................................................................ 6
2.1 Objetivos Gerais..................................................................................................... 6
2.2 Objetivos Especficos............................................................................................. 6
3 METODOLOGIA................................................................................................... 7
4 PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS............................................................ 8
5 RESULTADOS...................................................................................................... 10
6 CONCLUSES..................................................................................................... 12
REFERNCIAS........................................................................................................ 13

1 INTRODUO
Atualmente, tem-se buscado desenvolver modelos de crescimento econmico e social que
tenham como sua base a conservao da biodiversidade. Esses modelos so especialmente
importantes em pases como o Brasil, detentores de grande parte das espcies existentes no
planeta (CONCEIO et al., 2009).
sabido que o Brasil esteve por muito tempo negligente quanto ao investimento em
suas potencialidades nativas, o que levou a um grande retardo na economia. Hoje, o pas
alcanou moderada representatividade junto comunidade cientfica. Ainda assim, h uma
grande desproporo de investimento cientfico dentro do prprio pas. Enquanto espcies
nativas das regies sul e sudeste so alvos dos mais variados estudos, a regio nordeste, por
exemplo, recebe nfimo aparato para desenvolvimento de pesquisas com sua vasta flora.
No Estado do Maranho est contida uma flora de transio, geograficamente
localizada no Meio-Norte, razo pela qual so encontradas tantas peculiaridades nas espcies
nativas. Dada a sua localizao, o estado possui caractersticas marcantes da regio
Amaznica, como a presena de espcies ricas em leos essenciais (RIOS, 2005).
Historicamente, os leos essenciais tm desempenhado papel importante nas mais
variadas atividades da humanidade. A utilizao de espcies produtoras de leos essenciais
envolve desde a indstria de perfumes e de alimentos at a medicina popular. (SONOWA;
KNIG, 2001).
Na busca por substncias ativas em plantas, um dos principais aspectos a serem
observados consiste nas informaes oriundas da medicina popular. A seleo de espcies
vegetais para pesquisa baseada na alegao de um dado efeito teraputico em humanos, pode
se constituir num valioso atalho para a descoberta de novos frmacos, j que seu uso
tradicional pode ser encarado como uma pr-triagem quanto utilidade na teraputica humana
(ELISABETSKY et al. , 2004)
A famlia Aquifoliaceae est presente no Maranho e constituda apenas pelo gnero
Ilex, que apresenta cerca de 400 espcies, distribudas preferencialmente em regies tropicais,
mas presentes tambm em regies temperadas. No Brasil so encontradas cerca de 50
espcies, quatro delas consideradas raras (CONCEIO et al., 2009).
A literatura descreve algumas caractersticas que so comuns famlia
Aquifoliaceae: possuem inflorescncia axilar, cimosa, ocasionalmente reduzida a uma nica
flor ou a um fascculo, flores pouco vistosas, unissexuadas ou menos frequentemente
bissexuadas, actinomorfas, diclamdeas ou raramente monoclamdeas; clice 4(-8)-mero,
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geralmente com spalas unidas apenas na base, preflorao imbricada; estames em nmero
igual ao das ptalas e alterniptalos, raramente numerosos, frequentemente epiptalos, anteras
rimosas; disco nectarfero ausente, ovrio spero 4-6-carpelar e 4-6-locular, placentao axial
ou pndula, lculos uniovulados, estilete nico ou estigma sssil. Fruto do tipo drupa.
(SOUZA; LORENZI, 2008)
Diversos estudos tem demonstrado que o gnero Ilex dotado de espcies com um bom
perfil teraputico e/ou protetor sobre o perfil metablico humano, contribuindo at mesmo
para o menor ganho de peso, reduo das concentraes sricas de glicose, dentre outros
(MELO, 2007). Espcies arbustivas de Ilex so cultivadas como ornamentais, como o caso
do azevinho (Ilex aquifolium), originrio da sia e Europa e do Ilex-chins (Ilex cornuta)
(SOUZA; LORENZI, 2008).
Entretanto, por se tratar de um produto natural, os estudos devem ser cuidadosamente
aperfeioados, visto que os efeitos adversos a curto e longo prazo podem ser irreversveis. Da
a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) preconizar uma srie de exigncias
quanto ao emprego de matrias-primas vegetais, de modo a elucidar os riscos de seu uso,
assim como a reprodutibilidade e constncia de sua qualidade (BRASIL, RDC/MS 48/04).

2 OBJETIVOS
2.1 Objetivo Geral
Realizar estudo botnico, qumico e avaliao de citotoxicidade e atividade
antibacteriana das partes areas de Ilex retusa klotzch.

2.2 Objetivos especficos

a) Descrever as caractersticas morfolgicas (macroscpicas) e anatmicas
(microscpicas) das folhas desta espcie, como forma de fornecer parmetros para sua
autenticidade;
b) Realizar a extrao do leo essencial das folhas e ramos finos da espcie vegetal;
c) Determinar a citotoxicidade do leo essencial atravs do bioensaio com Artemia
salina, visando avaliar a segurana deste quando de uma possvel utilizao
farmacolgica;
d) Determinar atividade antibacteriana do material extrado, contribuindo assim para a
descoberta de novas atividades teraputicas da planta estudada;
e) Contribuir com o estudo cientfico das plantas da flora maranhense e;
f) Ampliar o conhecimento da flora aromtica da Amaznia Oriental, bem como de
reas do Cerrado Maranhense, incentivando o uso sustentvel desses recursos por
indstrias farmacuticas ou de cosmticos.

3 METODOLOGIA
Inicialmente fora realizada a coleta e identificao botnica da espcie. A par do nome
cientfico, seguiu-se com o levantamento bibliogrfico. A etapa seguinte consistiu no estudo
farmacobotnico, que incluiu a anlise morfolgica e anatmica da espcie Ilex retusa
Klotzch.Tambm fora realizada a extrao do leo essencial por meio da hidrodestilao em
aparelho de Clevenger.

4. PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS
4.1 Coleta e Identificao Botnica
A coleta das folhas de Ilex retusa Klotzch foi realizada no municpio de Mirador-MA,
na rea de Proteo Ambiental (APA) do Parque Estadual Mirador, rea do Posto Avanado
do Mel, no dia 26 de janeiro de 2011, selecionando rgos que no apresentassem indcios de
ataques de herbvoros ou infeco por microorganismos e, em seguida, foram conduzidas para
o Laboratrio de Farmacognosia II (Departamento de Farmcia) da Universidade Federal do
Maranho, onde o estudo foi realizado. O material coletado foi identificado aps estudos
morfolgicos, depositado no Herbrio Joo Mura Pires do Museu Paraense Emlio Goeldi,
na cidade de Belm - PA, sob o registro MG200201.
4.2 Levantamento Bibliogrfico
Com a confirmao do nome cientfico da espcie em estudo, foi iniciado o
levantamento dos estudos j realizados com esta espcie em bases de dados especializadas nas
reas de botnica, biologia, qumica e medicina, como: medline, lilacs, web of science,
trpicos, dentre outras.
4.3 Estudo Farmacobotnico
4.3.1 Anlise Morfolgica
Para as descries morfolgicas, as folhas foram analisados in natura vista
desarmada e/ou com auxlio de estereomicroscpio, seguindo metodologia descrita por
Oliveira et al. (1998).
4.3.2 Anlise Anatmica
Para a anlise da organizao interna dos tecidos das folhas, foram realizadas seces
transversais, obtidas a mo livre. As seces foram clarificadas com hipoclorito de sdio
50%, lavadas com gua destilada e coradas com solues de azul de astra e fucsina bsica,
ambas a 0,5%. Depois foram montadas entre lmina e lamnula (KRAUS; ARDUIN, 1997).

Para a anlise frontal das epidermes das folhas, foram realizadas seces paradrmicas,
usando lmina de ao. Em seguida, as preparaes foram coradas com azul de astra e/ou
fucsina bsica e montadas .
As descries, ilustraes e fotomicrografias foram realizadas ao microscpio ptico,
acoplado com cmera fotogrfica digital.
4.4 Destilao do leo Essencial
A extrao do leo essencial das folhas de Ilex retusa Klotzch foi realizada com o
material fresco, pelo mtodo de hidrodestilao. Utilizou-se aparelho de Clevenger adaptado a
um balo de fundo redondo com capacidade de 6L. O material vegetal foi colocado no balo
junto com gua destilada na proporo de 1:10 e o processo de extrao foi realizado durante
um perodo de 4 horas, mantendo-se a soluo em ebulio. O leo foi retirado com o auxlio
de uma pipeta Pasteur e acondicionado em frasco de vidro fosco, hermeticamente fechado e
posteriormente armazenado em refrigerador.

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5 RESULTADOS
5.1 Estudo Farmacobotnico
5.1.1 Anlise Morfolgica
As folhas de Ilex retusa Klotzch so alternas, simples, possuem inervao do tipo
peninrvia, de consistncia membrancia, com superfcie glabra, lisa e concolor. A lmina
foliar simtrica, com contorno elptica e margem ondulada. O pice acuminado e a base
cuneiforme (Fig. 1).

Figura 1: Folha de I. retusa Klotzch.

5.1.2 Descrio Anatmica
Na face adaxial, no h estmatos e as clulas possuem paredes anticlinais arredondadas
(Fig. 2A). Na face abaxial as clulas possuem paredes anticlinais levemente onduladas e h a
presena de estmatos do tipo paractico (Fig. 2B). Em corte transversal, observa-se que o
mesofilo do tipo dorsiventral, caracterizado, portanto, pela presena de dois tipos de
parnquima (esponjoso e palidico). O parnquima encontra-se composto por duas camadas
de palidico e 6 a 7 camadas de esponjoso denso (Fig. 3A).
Claramente pode-se notar a presena de bolsas secretoras de leo essencial (Fig. 3A).
Alm destas ocorre tambm na espcie cristais prismticos e drusas de oxalato de clcio. A
nervura central biconvexa, apresentando feixe vascular central do tipo bicolateral em arco
aberto, envolto por bainha esclerenquimtica (Fig. 3B).

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Figura 2: Ilex retusa Klotzch. A - Face adaxial da epiderme em

vista frontal. B- Face abaxial da epiderme em vista
frontal.Es:estmatos
.

B
A
Figura 3: Ilex retusa Klotzch. A mesofilo da lmina foliar em vista transversal. B
nervura central da lmina foliar em vista transversal. Pe: parnquima esponjoso denso; Pp:
parnquima palidico; b: bolsa secretora de essncia; F: floema; X: xilema ; Be: bainha
esclerenquimtica.

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6. CONCLUSES
O estudo morfoanatmico da espcie Ilex retusa visou contribuir para os testes de
autenticidade que podero ser empregados no desenvolvimento de medicamentos
fitoterpicos. A anlise anatmica reafirmou a presena do metablito de interesse, quando da
visualizao das bolsas secretoras de essncia.
Quanto mais abrangentes forem os estudos referentes importncia da flora
maranhense, seja no aspecto econmico, cultural ou teraputico, menos obstculos sero
encontrados na conscientizao da importncia da sua conservao.

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REFERNCIAS
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