23/01/2014

Aulas Prticas (FIP 301):

Parte III Bactrias Fitopatognicas
Braz Tavares da Hora Jnior PosDoc CAPES/PNPD

FIP 301(Aulas Prticas) 1 - Virologia 2 - Nematologia 3 - Bacteriologia 3.1 Diag ose !e !oe "as causa!as #or $ito%act&rias 3.2 Detec"'o !e $ito%act&rias em $ol(as 3.3 Detec"'o !e $ito%act&rias em caules 3.2 )este !e (i#erse si%ili!a!e #ara com#ro*a"'o !a #atoge ici!a!e +a%ati a 3.3 ,-em#los !e !oe "as %acteria as causa!oras !e murc(as 3.. ,-em#los !e !oe "as %acteria as causa!oras !e ma c(as $oliares Pro*a

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2os#e!eiro suscet3*el

0o !i"1es am%ie tais

Doe "a
Pat/ge o

3.1 Diag ose !e !oe "as causa!as #or $ito%act&rias

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1 ,stu!os Pio eiros

Tho as !" Burrill Fire blight (Queima) da pereira em 1880 (Erwinia amylovora)

#r$in F" % ith Demonstrou a patogenicidade de fitobact rias

2 As#ectos ,*oluti*os 2.1 4ela"1es !e e#i$itismo5 #arasitismo ou sim%iose 2.2 2a%itat ,s#a"o i tercelular I terior !as c&lulas I terior !e *asos co !utores

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3 )a-o omia (0lassi$ica"'o5 ome clatura e i!e ti$ica"'o) 3.1 Bact&rias #atog6 icas em tr6s gru#os ta-o 7micos8 Prese "a ou aus6 cia !e #are!e celular 4ea"'o !a c&lula 9 colora"'o !i$ere cial !e :ram Bact&rias :ram- egati*as Proteo%acterias Bact&rias :ram #ositi*as e Acti o%act&rias $ilame tosas Bact&rias :ram-#ositi*as !es#ro*i!as !e #are!e celular

3.2 0aracteri;a"'o $e ot3#ica e ge ot3#ica <utros 3*eis ta-o 7micos8 su%es#&cie (s#.) #ato*ar (#*.) ra"a5 %i/ti#o5 etc.

. ,strutura e Fu "'o celular ..1 =or$ologia Basto etes

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..2 ,struturas e-ter as ao e *elo#e (#are!e celular) Flagelos

Atr3>uios (Xylella)5 =o otr3>uios (Xanthomonas)5 ?o$otr3>uios (Pseudomonas) e Peritr3>uios (Erwinia) Fim%rias 0#sulas (,P+ ,-o#olissacar3!eo ou glicoclise) A!es'o e #rote"'o

..2 ,struturas i ter as ao e *elo#e 0ito#lasma =aterial ge &tico e #lasm3!eos 4i%ossomos I clus1es ou gr@ ulos , !/s#oros

..3 , *elo#e celular Pare!e celular (Pe#ti!eoglica o) =em%ra a i ter a (=em%ra a #lasmtica) =em%ra a e-ter a

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A +o%re*i*6 cia 0omo #at/ge o 0omo resi!e te (,#3$itismo) 0omo sa#r/$itas

B Dissemi a"'o Cgua Age tes !i*ersos

D I $ec"'o A%erturas aturais (est7matos5 (i!at/!ios5 le ticelas5 estigmas) Ferime tos

E 0olo i;a"'o , ;imas5 (orm7 ios e to-i as

"

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$eattie and %indo&' 1(((

F +i tomatologia F.1 - A asarcas

Pseudomonas syringae pv. pisi

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F.2 =a c(as $oliares e os !emais /rg'os !a #arte a&rea (=a c(as5 #i tas ou >ueimas)

=a c(a aureola!a =a c(a cu ei$orme =a c(a ;o a!a =a c(a a gular =a c(as irregulares 0restame to ,strias
Xanthomonas campestris pv. mangiferaeindicae

Pseudomonas syringae pv. coriandricola

Xanthomonas campestris pv. transluscens

Xanthomonas campestris pv. malvacearum

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F.3 0a cro e morte !os #o teiros (Die%acG)

Clavibacter michiganensis

Xanthomonas axonopodis pv. citri

F.. =urc(as

Ralstonia solanacearum

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F.A Po!ri!'o =ole

Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum

F.B Proli$era"'o !e teci!os (:al(as e $ascia"'o)

Agrobacterium tumifaciens

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F.D +ar as

Streptomyces scabies

F.E +i tomas em i $ec"1es #or %act&rias $asti!iosas

Candidatus Linberobacter asiaticum

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Fitoplasma

10 Diag ose 10.1 <%ser*a"'o !os si ais (Pus %acteria o)

Ralstonia solanacearum

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Xanthomonas campestris pv. translucens

10.2 Detec"'o !e $ito%at&rias em $ol(as ()este !e e-su!a"'o em gota)

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10.3 Detec"'o !e $ito%at&rias em caule ()este !o co#o)

10.. Isolame to 10.A Pro#rie!a!es $isiol/gicas ()estes %io>u3micos) 10.B 0aracteri;a"'o !a #are!e celular 10.D )este !e (i#erse si%ili!a!e #ara com#ro*a"'o !e #atoge ici!a!e 10.E , saios !e #atoge ici!a!e (Postula!os !e HocG)

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4,F,4IN0IA+ BIB?I<:4CFI0A+ AG !"S GN #$%%&' P(an) Pa)*o(o+,. &)* Ed. A-s)erda-. E(sevier Acade-ic Press. A./ENAS AC0 1A/!A C #Eds.' #$%%2'. 13)odos e- /i)opa)o(o+ia.45. Ed. 6i7osa 1G. Edi)ora 8/6. 9!1AT! H0 A1" !1 .0 E:ENDE JA10 BE GA1!N /!.H" A0 CA1A G" .EA #Eds.' #$%44' 1anua( de /i)opa)o(o+ia. 6o(. 4. $5. Ed. S;o Pau(o SP. Ceres. T !G!AN" N0 <!NDHA1 1T0 <!NDHA1 AS #Eds.' #$%4%'. /i)opa)o(o+ia= Concei)os e e>erc?cios de (abora)@rio. $5. Ed. Por)o A(e+re. Edi)ora= Ar)-ed :A1B".!1 .0 JES8S JAN!" <C0 PE E! A0 ". #Eds.' #$%4$'. " ESSENC!A. DA /!T"PAT"."G!A B A+en)es Causais # 6o(u-e 4 e $'. 45. Ed. 6i7osa 1G. Edi)ora 8/6.

Aulas Prticas (FIP 301):

Parte III Bactrias Fitopatognicas
Braz Tavares da Hora Jnior PosDoc CAPES/PNPD

1!

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0o ti ua"'o8 Diag ose 10.1 - 10.3 <%ser*a"'o !e %act&rias o teci!o !a #la ta 10.. Isolame to !e %act&rias !o teci!o !e #la tas 10.A )estes %io>u3micos e estruturais 10.B , saios !e #atoge ici!a!e (Postula!os !e HocG) 10.D 4ea"'o !e (i#erse si%ili!a!e (24) #ara com#ro*a"'o !a #atoge ici!a!e

10.. Isolame to !e %act&rias !o teci!o !e #la tas <%te "'o !e cultura #ura Se(ecione o )ecido a ser a-os)radoC DesinDes)e a superD?cie dos @r+;os da p(an)a #E(coo( F%GC *ipoc(ori)o de s@dio #%0& H 4G'C E+ua des)i(ada'C E-beba o )ecido e- 4 -. de E+ua des)i(ada e- u- )ubo (i-po e )ri)ure co- u- bas);o de vidro e a+i)e (i+eira-en)eC Dei>e o debri ce(u(ar decan)ar e re)ire o sobrenadan)eC Cen)riDu+a7;o para precipi)ar as bac)3riasC epica+e- para -eio de cu()ura apropriado #13)odo de es)rias'

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=&to!o !e estrias A ,strias sim#les (A) ,strias com#ostas (B ,) B

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10.A )estes %io>u3micos e estruturais Algu s testes %io>u3micos e cromog6 icos #ara i!e ti$icar os #ri ci#ais g6 eros !e %act&rias $ito#atog6 icas (A!a#ta!o !e +c(aa! et al.5 2001)

)esteJ:6 eros GraAnaerobiose Co(Inia a-are(a ou (aranJa e- KDC Pi+-en)o D(uorescen)e e9in+ B Pi+-en)o diDus?ve( n;o D(uorescen)e e- 9in+ B 8rease ">idase Cresci-en)o a L%oC

& ' ' & & & & ( &

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)* )* & ' ' ' & &

/or-a7;o de end@sporos

( +esposta ,ari,el- )* ).o /eter ina/o

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Auto ati0a1.o: Bacterial I* e 2aracteri0a1.o

10.B , saios !e #atoge ici!a!e (Postula!os !e HocG) Preparo do in@cu(o de Di)obac)3rias= Suspen7;o e- so(u7;o sa(ina #NaC( a %02&G' ou )a-p;o DosDa)o #%0410 pH M F0%' Cu()ivo da Di)obac)3ria e- -eio s@(ido ou (?Nuido Ouan)iDica7;o e ca(ibra7;o da concen)ra7;o de in@cu(o D"&&% M %04 a %0$ #4%2 uDc/-.'

1(

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Acondiciona-en)o das p(an)as an)es e depois da inocu(a7;o 8-idade re(a)iva de 4%%G $L* an)es e depois da inocu(a7;o

13)odos de inocu(a7;o

4. A)o-iza7;o $. !nJe7;o P. !-ers;o de ra?zes L. !nocu(a7;o co- abrasivos &. Cor)es de )esoura Q. A(Dine)e en)o-o(@+ico F. Secciona-en)o de par)e a3reas 2. !nocu(a7;o por press;o R. Pa(i)os de -adeira 4%. !nocu(a7;o por *ida)@dios 44. !nDes)a7;o do so(o ou subs)ra)o

,-em#lo !e i ocula"'o #or i Ke"'o

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10.D )este !e (i#erse si%ili!a!e #ara com#ro*a"'o !e #atoge ici!a!e

+esistncia n.o hospe/eiro

+esistncia 3uantitati,a

ou

+esistncia 3ualitati,a

)anderplan*' 1("3

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A,r Pat4geno a,r

+ 5ospe/eiro

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+uscet3*el

Parcialme te 4esiste te

Garcia e) a(.0 $%%R

Acre

+ource8 ,m%ra#a Acre

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!-unidade desencadeada por padrSes #TPattern-triggered immunity- PT!' +esistncia n.o hospe/eiro

+munidade desencadeada pelo efetor (,effector-triggered immunity - ./+)

0at1geno

=orte 0elular Programa!a ou res#osta !e (i#erse si%ili!a!e

0230s .fetores +nibidores de protease 0rotease 4eceptores de reconhecimento de padr5o 0rote6nas de resist7ncia

8iang e /9ler' 2012

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=orte 0elular Programa!a ou res#osta !e (i#erse si%ili!a!e

:uri9ama e Fu*uda' 2002

Fol(a !e )a%aco mostra !o t3#ico si toma !e um teste !e res#osta !e (i#erse si%ili!a!e #ara #at/ge os %acteria os

Cgua

Bact&ria 2

Bact&ria 1

Bact&ria 3

2!

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4ea"1es es#era!as em $u "'o !o ti#o !e i tera"1es e tre %act&ria e #la ta Bactria Fitopatognica Fitopatognica %apr47ita Planta 5ospe/eira ).ohospe/eira 8ual3uer Associa1.o 2o pat6,el Inco pat6,el & %into as t6picos ' & & 5+ & ' &

Prtica !e 2oKe8 )este !e (i#erse si%ili!a!e !e Pseudomonas syringae #*. tomato em Coffea sp.

2"