93 de materia fecal y se anaden unos 5 ml de sa1muera, homogeneizando con e1 abate1enguas. 2.

- Se va anadiendo mas sa1muera y se sigue agitando con el abatelenguas, hasta que se Ilene hasta el tope del fras co. 3.- Se coloca un cubreobjetos sobre la boca del recipiente, de tal manera que quede en contacto con la suspension y se deja reposar de 15 a 30 minutos. 4.- Se toma el cubre y se coloca en un portaobjetos. (Si se desea se le puede poner a la preparacion una gota de 1u gol). 5.y

Se observa con e1 microscopio

con objetivos de lOX

40X.

Precauciones.Se debe de tener cuidado, a1 colocar e1 cubreobjetos en 1a boca del recipiente, de que no queden burbu jas, porque esto dificulta mucho 1a observacion. El caracterinfectante de 1a materia fecal debera de tomarse en consideracion para tomar las medidas de seguridad correspondientes.

5.

He~odo de Faust. Examen CPS de concentracion por centrifugacion flotacion.

Antecedentes.Fue en 1938 cuando Faust y cols. describieron su metodo que hasta la fecha es uno de los mas utilizados. Es parecido al que describe Lane en 1924, solo que en e~ te, se uti1iza sol~cion saturada de cloruro de sodio; como este metodo es poco eficaz para quistes; se utiliza mas el de Faust que es muy eficaz para estas formas parasitarias. Uti1idad.- Race una buena concentracion de quistes, hue vos y larv~s; es 1a tecnica preferida por la generalidad de los laboratorios. Limitaciones.Es poco eficaz para huevos pesados como los de Taenia sp., Fasciola hepatica u ovulos de Ascaris lum-bricoides.

94 Material. a) Reactivos. Sulfato d zinc (puede utilizarse sulfato de zinc industrial, si se eliminan de la solucion las sales insolubles mediante filtrado previo 0 con unas gotas de acido sulfurico). - Agua de la llave. b) Soluciones. Solucion de sulfato de zinc con densidad 1.180 Sulfato de zinc Agua de la llave 350 g 1000 mi

Se disuelve el sulfato en el agua hasta disolucion total de sal; se Ie toma la densidad; si se pasa de 1.180, se Ie agrega agua y se homogeneiza, se Ie falta, se Ie agregan pequ~ nas cantidades de 1a sal.; hasta 10grar 1a densidad deseada. - Lugol parasito1ogico c) Vidrieria. Recipiente de vidrio 0 po1ietileno de 50 m1 aproximadamente Tubos de 13 x 100 mm Embudos de vidrio 0 po1ietileno de 7.5 em de diametro Portaobjetos de 75 x 25 mm Cubreobjetos de 22 x 22 mm (ver metoda directo)

d) Aparatos. Centrifuga con eamisas para tubos de 13 x 100 - Microscopio compuesto - Dens1metro graduado de 1.100 a 1.200oBaume e) Otros. - Gasa cortada en cuadros de IS em de lado - Gradilla - Aplicadores de madera

95 - Abatelenguas - Asa de alambre terminada en c1rculo de 2 a 3 mm de diametro, formando angulo recto con el res to del a1ambre y montada en un tapon de corcho 0 caucho Metodo. 1.- Se hace una suspension homogenea con 1 a 2 g de materia fecal y 10 ml de agua de 1a llave. 2.- Se pasa a traves de gasa colocada en el embudo y co lectando la suspension directamente en el tubo. 3.- Los tubos asi preparados, se centrifugan a 2,000 rpm durante un minuto. 4.- Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con agua, agitando con un aplicador. 5.- Se centrifuga nuevamente y se vuelve a decantar el sobrenadante. 6.- Se agregan 2 a 3 ml de solucion de sulfato de zinc a los tubos y se homogeneiza perfectamente, llenando los tubos hasta 0.5 a 1 cm por abajo de los bordes. 7.Se centrifuga a 2,000 rpm durante l' .

8.- Con el asa limpia 0 f1ameada, se recoge la muestra de la pelicula superficial que se encuentra en el menisco, durante 2 6 3 ocasiones sucesivas y se deposita en un portaobjetos. 9.- Se c010can 2 gotas de lugol parasitologico y se homogeneiza con el angulo de un cubreobjetos y se pone este sobre la preparacion. 10.- Se 11eva 1a preparacion a1 microscopio y se observa con objetivos de lOX y 40X. Forma de reportar.- Para reportar los hallazgos en las preparaciones, primero se escribe 1a fase 0 estadio y en segui da el nombre del parasito, con su nombre generico con mayuscu~ la y el especifico con minuscula, subrayando ambos; por ejem-

96 p10: quistes de Giardia 1amb1ia; huevos de Ascaris 1umbricoides, larvas de Strongyloides stercora1is. Precauciones.Se debe de verificar 1a densidad de 1a solucion de sulfa to de zinc periodicamente, 0 de preferencia prepararla cada tercer dia, segun e1 vo1umen de trabajo diario, pues faci1mente se pierde 1a densidad a1terandose los resultados. Despues de agregar 1a solucion de Faust, es necesario to mar inmediatamente 1a muestra para su 1ectura, pues si perman~ cen los tubos mucho tiempo, las formas parasitarias pueden degenerarse 0 sedimentarse. Dado el caracter infectante de 1a materia fecal, se deben de tomar las precauciones pertinentes.

TECNICAS DE SEDIMENTACION CUALITATIVAS 6. tletodo de Ritchie. Examen CPS de concentracion por sedimentacion con centri fugacion. Antecedentes.Ritchie, en 1948, describio su metodo, muy semejante a1 de Carles Barthelemy (1917); es una tecnica muy controvertida, pues se toma como tipo para hacer compara-ciones muy frecuentes con otros metodos; es quiza uno de los ~etodos que mas referencias tenga en 1a literatura cientifica. Uti1idad.- Se usa para huevos, quistes y larvas, no importa 1a densidad que tengan; hace muy buena concentracion de estas formas parasitarias, pues e1imina bastantes detritus or ganicos con e1 eter; e1 motive por e1 cua1 se uti1iza e1 for-mol es para mantener 1a integridad de las formas parasitarias que concentra, por sus caracteristicas de fijador. La genera1idad de los parasito10gos conocen este metodo como de formoleter. Limitaciones.- Debido, a que se usan varios reactivos y tubos conicos, resu1ta poco enconomico e1 metodo. Las prepar~ ciones quedan muy sucias porque con 1a sedimentacion, aparte de concentrarse formas parasitarias, se concentran otros materia1es. Material.