INTERPRETAO um mtodo de fcil execuo, porm, no muito eficiente. Pode-se usar para pesquisa de ovos e cistos.

. Todavia, os resultados negativos no devem ser considerados. MTODO DE WILLlS-MOLLAY Tcnica: Tomar 2 a 5 9 de fezes e diluir em soluo hipersaturada de NaCI; homogeneizar e passar em tamis. Encher uma tampa de borrei ou tubo de ensaio de modo que a superfcie do lquido atinja a borda do recipiente em uso, mant-Io em posio vertical e colocar sobre ele, respectivamente, uma lmina ou lamnula desengordurada (Fig. 4.1). Deixar em repouso durante 15 minutos e examinar microscopicamente. Recomenda-se no deixar ultrapassar este tempo, porque os ovos ou oocistos aumentam de peso e perdem a aderncia lmina. Observ3o: Quando usar tampa de borrei, retirar bruscamente a lmina, inverter a sua posio, cobrir com lamnula. Para a pesquisa de ovos de Metastrongy/us sp (parasito pulmonar) em fezes de suno, recomenda-se usar soluo saturada qe sulfato de magnsio. Frmula da soluo hipersaturada de NaCI: ' 350g N~CI guadestilada 1.000ml INTERPRETAO Indicado para pesquisa de ovos de helmintos (principalmente cistos de protozorios. ovos leves) e

1IIIil ,\

Fig. 4.1 - Mtodo de Willis.

144

M~TODO DE SEDIMENTAO

HOFFMANN, PONS & JANER,1934

Tcnica: Tomar 5 a 10 g de fezes e diluir em 60 a 70 ml de soluo fisiolgica ou gua destilada; homogeneizar e passar em tamis. Colocar a suspenso em clice afunilado, completar para 300 ml. Aps 24 horas retirar o sedimento com pipetas ou canudos plsticos e examinar entre lmina e lamnula. Havendo resultado negativo toma-se parte desta diluio, coloca-se em um tubo de ensaio e centrifuga-se a 1.500 rpm durante 10 minutos. Despreza-se o sobrenadante e repete-se o exame do sedimento. If'JTERPRETAO Mtodo recomendado para pesquisa de ovos (principalmente cistos. MTODO DE FLUTUAO EM SULFATO DE ZINCO A 33% Tcnica: Tomar 2 g de fezes e dissolver em aproximadamente 20 ml de soluo fisiolgica ou gua, passar em tamis, colocar em tubo cnico e centrifugar a 1.'500 rpm durante 3 minutos. Desprezar o sobrenadante e colocar a mesma quantidade de soluo fisiolgica ou gua. Homogeneizar e centrifugar em rotao igual a anterior, repetir a operao mais uma vez. Desprezado o ltimo sobrenadante, colocar no tubo soluo de sulfato de zinco a 33% em quantidade suficiente superfcie Iquida ficar prxima (:t 1 cm) da borda do tubo. Centrifugar mesma velocidade e tempo usados anteriormente. Retirar a pelcula sobrenadante atravs da ala de platina, coloc-Ia em lmina, acrescentar lugol, cobrir com lamnula e examinar ao microscpio. INTERPRETAO Eficiente para pesquisa de ovos e cistos. M~TODO DE GRAHAM modo Tcnica: Tomar um pedao de fita adesiva transparente e tocar pressionando levemente na regio anal e perianal do animal, em seguida fixar a parte adesiva em uma lmina. Examinar ao microscpio. INTERPRETAO Mtodo recomendado laris. 145 para pesquisa de Oxyuris equi e Enterobius vermicuovos pesados) e

MTODO DE MAC-MASTER (GORDON & WHITLLOCK) um mtodo auxiliar no estudo da intensidade parasitria dos rebanhos. Tcnica: Pesar 2 g de fezes quando de ovinos e caprinos e 4 gramas quando o material for de bonivos, eqinos ou sunos. Diluir em 60 ml de soluo hipersaturada de NaCI, homogeneizar e passar em gaze.
Cmara de Mac-Master Consiste em duas lminas de polietileno separadas entre si de maneira a deixar um espao de 1,5 mm de profundidade com uma separao na rea central de modo a formar duas subreas. Na parte inferior da lmina observa-se em cada subrea um traado de 1 cm2 dividido em retngulos para facilitar a contagem (Fig. 4.2).

llilJ]

Ullill

Vista

superior.

~
B - Vista de perfil.

=~~::::-===~

Fig. 4.2 - Cmara de Mac-Master.

Clculo: O volume de lquido encontrado em cada subrea obtido pela frmula: volume = rea x profundidade. Assim, o clculo feito da seguinte forma: 1 cm2 x 0,15 cm = 0,15 cm3 = 0,15 ml. Sendo duas subreas fica: 0,15 ml x 2 = 0,30 ml de lquido na cmara. Clculo do fator: O total de ovos encontrados ser multiplicado por: 100 - quando uti Iizar 2 g de fezes e contar as duas subreas; 50 quando utilizar 4 9 de fezes e contar as subreas. Resultado: Os ovos encontrados devero ser identificados e contados separodamente (Strongyloidea, Strongy/oides, Neoascaris, P.arascarisetc.). O total de ovos contados

146

de cada tipo ser multiplicado pelo fator 100 ou 50 e o resultado expresso em ovos por grama (OPG). A presena de oocistos e ovos de cestdeos dever ser citada, todavia, no devem ser contados. M~TODODEBAERMANN Tcnica: Envolver em gaze aproximadamente 2 g de fezes, amarrar com cordo e com as pontas livres do barbante prender a gaze com fezes a um basto de vidro; colocar o conjunto sobre a borda de um clice afunilado e ench-Io com gua destilada de modo que a superfrcie desta toque na parte inferior da gaze contendo as fezes (Fig. 4.3). Esperar 12 horas, colher o sedimento e examinar ao microscpio. INTERPRETAO Usado para pesquisa de larvas de nemat6deos pulmonares (LI) e Strongyloides.

Fig. 4.3 - Mtodo de Baermann.

As larvas de Dictyocaulus fil2fi" <.JjJresentamextremidade anterior com protuberncia em forma de boto e extremidade posterior em forma romba e arredondada. Corpo cheio de granulaes e as clulas intestinais invisveis. Larvas de Dictyocaulus viviparus no possuem boto na extremidade anterior, a extremidade posterior termina em ponta e o corpo apresenta-se cheio de granu laes. 147

Larvas de Muellerius capillaris so pequenas com esfago longo, cauda curva e extremidade posterior com dois apndices. Larvas de Protostrongy!us rufescens so robustas com extremidade posterior pontiaguda, ondulante e sem apndices (Fig. 4.4).

Fig.4.4 1 - Dictyocaulus filaria 2 - Dictyocaulus viviparus

3 - Muellerius capilllaris 4 - Protostrongylus rufescens

MTODO DO TUBO CNICO DE CENTRFUGA (LPG) Tcnica: Pesar 2 g de fezes frescas e coloc-Ias em papel de filtro e envolvIas de modo a formar um saquinho; em seguida coloc-Io na parte superior de um tubo cnico de centrfuga de 10 cm de altura por 3,5 de dimetro. Acrescentar gua pelas paredes do tubo at a borda do mesmo, de modo a cobrir as fezes. Deixar em repouso por 12 horas. Colher 0,5 ml do sedimento, colocar sobre uma lmina e examinar ao microscpio. Contar o nmero de larvas encontrado neste material, dividir por 2 e expressar o resultado em larvas por grama de fezes (LPG).

Fig. 4.5-

Mtodo do tubo cnico (LPG).

148

COPROCULTURA Tcnica: Em um copo misturar 20 a 30 G de fezes com maravalha (de preferncia esterilizada), umedecer com gua, tampar com uma placa de Petri, de modo a permitir entrada de ar. Controlar a umidade do material, no deixando haver desidratao, colocando sempre uma pequena quantidade de gua. Ao fim de 7 dias tomar a mistura maravalha-fezes e realizar o exame de Baermann com este material (vide mtodo de Baermann descrito anteriormente). Identificar no mnimo 100 larvas e expressar o resultado em percentaaem (Fig. 4.6). c (
.,-, :..~",~.,:".==

Gnero Strongy/of(!es

Gnero Trichostrongy/us

c
6:

Gnero

Ostertagla

Gnero Haemonchus

c:
c
---------~

=
;;?~
~

Gnero Cooperia

Gnero Bunostomum

~i~.~

Gnero

Chabertia

,~

~
~
""":;:

Gnero Oesophagostomum

~
6dh1~

Gnero

Nematodirus

==='iI':;:",~~ -.::::,.

Strongy/us

vu/gam

!::_J--&fQ71"

Strongy/us edentatus

~J'.f.":Y!'~';~~

Strongy/us equmus

Fig. 4.6 - Larvas infectantes de nematdeos gastrintestinais.

149

INTERPRETAO Eficiente quando for necessria a generificao de helmintos de herbvoros. XENODIAGNSTICO (Freitas & Martin, 1948) As fezes devero ser colhidas diretamente no reto, quando necessrio o uso de conservador deve-se usar a refrigerao, porque foi demonstrado-que nas fezes conservadas a 50C as larvas resistem at 28 dias. Tcnica: Colocar as fezes em frascos de aproximadamente 7 em de altura por 6 de dimetro, sendo a quantidade de fezes necessria at alcanar a metade do frasco. Caso apresente consistncia endurecida deve-se colocar uma pequena quantidade de gua destilada. Depositar sobre as fezes 5 a 8 ovos de Musca domestica, em seguida fechar a boca do frasco com papel celofane o qual deve apresentar pequenas perfuraes para que ocorra ventilao. Colocar este material em esfufa a 37oC, por um perodo de aproximadamente 8 dias, quando devem aparecer as moscas, examin-Ias esmagadas entre lmina e lamnula, pesquisando a presena da larva do Habronema no seu interior. INTERPRETAO Em Medicina Veterinria usado para o diagnstico da habronemose gstrica dos eqdeos.

Quadro 4.1 Identificao de larvas infectantes de nematdeos gastrintestinais (L 3)

Comprimento total da larva

Espcie

Extremidade an tenor Esfago 1/3 do corpo afilada chanfrada com sornbreamento forma de dedo com 2 corpos refringentes quadrada

Af! Clulas intestinaIS

Caurfa ria bainha sem bainha curta curta mdia

mdia longa longa muito longa muito longa longa longa longa

Strongyloides Tnchostrongylus Ostertagia Haemonchus Cooperia Bunostomum Chabertla Oesophagostomum Nematodirus Strongylus vulgaris S. edentatus S. equinus

curto curto mdio mdio mdio curto longo longo longo

16 16 16
16 16 24-32 retangulares 16-24 triangulares 8 32 18-20 16

Cultura de 10 dias

150

Quadro

4.2

RELAO DOS PARASITOS GASTRINTESTINAIS CUJOS OVOS, LARV AS OU CISTOS SO OBSERVADOS NAS FEZES DOS ANIMAIS DOMSTICOS
BOVinOS, OVinOS e Caprlnos

~ ~
Strongyloides 50x221l Trichostrongylus 75x4D,.t *

~
,:.,.t'

"

:"
' 00

':",

"

'

'

' ,o~

"4Q
o
o

o,"

Cooperia

70x3"lll *

Haemonchus

95x50;l

<o

~
Nematodirus 150x801l Oesophagostomum 81 x45!l * Bunostomum *Pertencem procu Itu ra superfamlia 92x50jJ
*

Trichuris A generificao s poder

75x36JJ ser feita atravs da co'

Strongyloidea,

151

Quadro 4.2 - C:Jntinuao

Bovinos, Ovinos e Caprinos

Neoascaris

85 x 7011

Paramphistomum

Faciola

140 x 7011

Moniezia

.
benedeni expansa 30 x 1511

145 x 8611

67 x 5611

Dictyocaulus

..
"'~,.:: ::-.: ,,"~-:"-'ooo~'~'oo'
o, o o ,00 , '

585 x 25/1

Moniezia

67 x 5611

a \g
o ,

Ostertagia

95x5011

Eimeria

13 x 1211

152

Quadro 4.2 - Continuao Eqmos

';V': ;.' . .
.

""':""

Strongyloides

47 x 35}.!

Strongylus

100 x 70}.!

~
Trichostrongylus 81 x 40}.! Parascaris 1'00 x 9~}.!

.
.
'.0..' :\"~"y:"""

-. .--

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(.

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" ~':~ .,
'"
.

-.."'~'~':"

Oxyuris

100 x 40}.!

Dictyocaulus 0,5 mm

~~~

Habronema

45 x 12}.!

Anoplacephala

80 x 55}.!

153

Quadro 4.2 - Continuao Su(nos

.
Strongyloides 55x32/L Trichostrongylus 75 x 40/L

~
Hyostrongylus 76 x 36/L Trichuris 60 x 30/L Oesophagostomum 70 x 42/L Ascaris 63 x 45}.l

Metastrongylus

60 x 40/L

Macracanthorynchus

88 x 52}.l

Eimeria21

x 16}.l

Balantidium

60 x 40il

Isospora

22 x 19,4/L

154

Quadro Ces e Gatos

4.2 - Continuao

~
Strongyloides

_
~ 2801l .~,:,~
o

AncylostOma

';

o::

< o.

'o,.

o'.

o,'

Uncinaria

80 x 501l

Trichuris*

o' f o.

65 x 401l

80 x 301l

.
Toxocara canis 85 x 751l Toxocara

.
mystax ;.,~.'o, "' "; /~.~ o \~ o
:'0 o;~:.;ii!:

75 x 651l

Toxascaris

leonina

85 x 601l

Taenia sp. 35 x 201l

*T vulpls no co T campanula no gato.

155

Quadro 4.2 - Continuao

Ces e gatos

@~
Dipilidium 200 x 100/oL Eimeria 35 x 25/oL(o maior)

~~
Isospora rivolta 22 x 18/oL

@~
Isospora bigemina 10 x 8/oL

I
':':~';
.

~
.

~:~~

Giardia

11 x 8/oL

156

Quadro 4.2 -Continuao

Aves

~
Capillaris 50 x 2511 Ascanidia 82 x 5111

Heterlkis

72 x 4011

Amidostoml!m

75 x 5011

~
Himenolepis 55J.1 Eimeria14x

i
1311 ou42 x 2511 157

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1. AMARAL, V.; BI RGEL, E.H. & ARAJO, LM. Nota sobre nematdeos parasitos de bovinos do Estado de Mato Grosso. Brasil. O Biolgico. So Paulo, 39(4): 105-107,1973. 2. BAERMANN, G. Eine infache method zur auffindung von Ankylostomun (Nematoden) -Iarven in erdnoben. Meded geneesk lab. Wallevr, Batavia, 41-7,1917. 3. BENJAMIM, M.M. Outline of Veterinary Pathology. 2 ed. The lowa State University Preso lowa. USA, 1977, 186 p. 4. COLES, E.H. Veterinary Clinical Pathology, 2 ed. W. B. Saunders Company. Philadelphia, 1974, 615p. . 5. COSTA F ILHO, G.A. et aI;;. Ocorrncia de Giardia sp. em fezes de canis familiaris no Estado de Pernambuco. Atual. Veto 2 (7): 38, 1973. 6. COSTA, H. M. A. & FREITAS, M. G. Alguns parasitos de animais domsticos no Estado do Maranho e Piau. Arq. Esc. Veto UFMG. Belo Horizonte 14: 35-46,1962. 7. COSTA, J. O. et alii. Helmintos parasitos de Gallus gallus domesticas no litoral sul do Esprito Santo. Arq. Esc. de Veto UFMG. 27 (1) 45-6, 1975. 8. COSTA, J.S. Incidncia de Giardia sp. em fezes de animais domsticos. Rev. do Insto A Lutz, So Pau 10. 12: 46-48, 1952. 9. FERREIRA NETO, J.M.; VIANA, E.S. & MAGALHES, LM. Patologia Clnica Veterinria, 2 ed. BeloHorizonte, Rabelo e Brasil, 1978. 293p. 10. F REIT AS, M.(,J.& MARTINS, A.V. Estudo sobre a habronemose eqina. BoI. Bras. Med Veio 17:9-14,1948. FREITAS, M. G. & FERREIRA NETO, J.M. Resistncia de larvas do gnero "habronema", parasito de eqdeos, a vrias temperaturas. Arq. Esc. Sup. Veto UREMG. Belo Horizonte, 8: 143-9,1955. 1:2. FREITAS, M.G. 8.. COSTA, H.M.A. Lista de helmintos parasitos de animais domsticos do Brasil. Arq. Esc. Veto UFMG, Belo Horizonte, 22: 33-94, 1970. 18. GIORGI, J.R. Parasitologia Animal. Mxico. Interamericana. 1972,242 p. 14. GORDON, J.M. &WHITLLOCK, H.V.Anewtechniqueforcountingnematode eggs in sheep faeces. J. counc. Sei. Indo Res. Aust., 12: 50-2, 1939. 15. GRISI, L & NUERNBERG, S. Incidncia de nematdeos gastrointestinais em bovinos no Estado de Mato Grosso. Pesq. Agropec. Bras. Ser. Veto 6: 1459,1971. . 16. LABORATORIO VFfERINRIO CENTRAL Manual de Tcnica de Parasitologia Veterinria. Acri bia. Zaragoza. Espanha, 1971, 196 p. 17. MAREK, J. & MOCSY, J. Tratado de diagnstico clnico de Ias enfermidades internas de Ias animales domesticas. 31. ed. Labor, Barcelona, 1965, 675 p. 18. MEDWAY, W.; PRIER, J.E. & WILKINSON, J.S. Patologia Clnica Veterinria. UTEHA, Mxico, 1973, 532 p. 19. OLlVEI RA LIMA, A. et alii. Mtodos de laboratrio aplicados Clnica. Editora Guanabara Koogan. 5a. ed. ~io de Janeiro, 1977,669 p. 158 11.

20. OLIVEIRA, N. de C.;OLlVEIRA,N.L.H. & DAS VIRGENS, N.C. Helmintoses em bovinos na micro-regio hogomnea Pastoril de Itapetinga, Bahia. Arq. EMVUFBA. Salvador, 3 (1): 95-104,1978. 21. MARTINS, Jr. W. FREITAS, M.G. Lista de helmintos parasitos de animais domsticos da regio geo-econmica de Braslia e de outras regies de Gois. Arq. Esc. de Veto da UFMG, Belo Horizonte, 27(3): 309.324, 1975. 22. MELO, E.B.F. de et alii. Incidncia de Giardia sp. Kunstler, 1879 (Mastigophora - hexamitidae) em ces da rua da Cidade de So Paulo. Brasil. Rev. da Fac. de Med. Vet. e Zoot. Univ. So Paulo, 1: 301-4, 1974. 23. MELO, H.J.J. de & RIBEIRO, H.S. Helmintos parasitas dos animais domsticos do Estado do Mato Grosso. Arq. Esc. Vet. OFMG. 29(2): 161-4, 1977. 24. NEMESERI, L. & HOLLO, F. Diagnstico parasito lgico veterinrio, Acribia. Zaragoza. Espanha, 1961,303 p. 25. HOFFMANN, R.C. Diagnstico de parasitismo veterinrio. Sulina. Porto Alegre-RS. 1987. 156 p. 26. ROBERTS, F.H.S. & O'SULLlVAN, P.J. Methods for eggs counts and larval cultures for strongylus infesting the gastrointestinal tract of cattle. Aust. J. Agric. Res, 1: 99-102, 1950. 27. SANTIAGO, M.AM. et alii. Coccidiose ovina. Relato de um caso. An. VIII? Conto Anual da SOVERGS, 217-18,1965. 28. SANTIAGO, M.AM. & COSTA, U.C. As espcies de Eimeria parasitas de ovinos no Rio Grande do Sul. Rev. Med. Vet. So Paulo, 10: 221-5,1975. 29. SANTIAGO, M.A.M.;COSTA, N.C. da&SILVA, O. L. da. Investigao sobre a coccidiose ovina. Rev. do Centro de Cincias Rurais, 7(3): 297/301, 1977. 30. SANTIAGO, M.A.M.; COSTA, U.C. da; BENEVEGA, S.F. Diagnstico das helmintoses dos bovinos. Rev. do Centro de Cincias Rurais, 8(3): 19198, 1978. 31. SOGAYAR, M.I.L. & CORREA, F.M.A On intestinal protozoa of domestic animais. 11.Giardia in dogs in Botucatu, So Paulo, Brasil. A comparative study between the canine and human species. Cienc. Cult. 23 (supl.): 416-17,1971. 32. UENO, H. A' sim pie method for detection of the first-state larvae of D ictyocaulus viviparus in faeces cattle. II Comparison with other

methods and field application. Jap. VetoMed. Ass. 21, 255, 1968.

33. UENO, H. & GUTIERRES, V.C. Manual para diagnstico dashelmintoses de Ruminantes. Japan International Corporation Agency. Tokio-Japo. 1983, 176 p.

159