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TOXICOCINTICA (Casarett)
INTRODUO A toxicidade de um agente qumico depende da dose, ou seja, quanto maior a dose administrada, maior a toxicidade observada. Refinando o conceito de doseresposta, considerando nesse caso no a dose administrada, mas a concentrao do agente qumico que alcana o rgo alvo de sua toxicidade, essa concentrao depende de como o agente txico se comporta no organismo, ou seja, de como ocorrem sua absoro, distribuio, biotransformao e eliminao. Sendo assim, a concentrao de um agente qumico no rgo onde exerce sua ao txica depende da quantidade do toxicante com a qual o organismo entra em contato e da velocidade em que se processam sua absoro, distribuio, biotransformao e eliminao. Os processos de absoro, distribuio, biotransformao e eliminao so intimamente relacionados e influem, de modo importante, na toxicidade exercida por um agente qumico. Em geral, para produzirem efeitos txicos, os agentes qumicos precisam ser absorvidos, alcanando a circulao sistmica. As principais vias pelas quais os toxicantes penetram no organismo so o trato respiratrio, trato gastrintestinal e a pele. Alcanando a corrente sangnea, o agente txico est disponvel para se distribuir no stio alvo de sua ao, ou seja, no local onde produz seus efeitos txicos. Por exemplo, enquanto que, o mercrio e o chumbo produzem danos no sistema nervoso central (SNC), rins e sistema hematopotico, o tetracloreto de carbono produz danos no fgado e o benzeno no SNC e sistema hematopotico. Para produzir danos em um rgo, o toxicante deve alcanar esse rgo. Contudo, vrios fatores influem na susceptibilidade dos rgos ao toxicante, e nem sempre o rgo no qual o toxicante encontra-se em concentrao mais elevada aquele onde produz seus efeitos txicos. Os inseticidas organoclorados, por exemplo, atingem concentraes mais elevadas no tecido gorduroso, mas no produzem nenhum efeito txico nesse local. Um agente qumico tambm pode exercer seu efeito txico diretamente na corrente sangnea como o gs arsina, por exemplo, que produz hemlise. Os agentes txicos so retirados do sangue por meio de biotransformao, mecanismos de excreo (eliminao) e acmulo em vrios stios de armazenamento. Dentre os rgos envolvidos na eliminao, os rins so os mais importantes, pois respondem pela eliminao da maioria dos toxicantes presentes no organismo. Outros rgos, no entanto, adquirem importncia, no caso de certos compostos; por exemplo, os pulmes so importantes na eliminao do monxido de carbono e o fgado na excreo biliar do chumbo. Embora o fgado seja o rgo mais ativo na biotransformao de toxicantes, algumas enzimas em outros tecidos, como esterases no plasma e outras presentes nos rins, pulmes e trato gastrintestinal tambm podem promover a biotransformao de agentes txicos. Em geral, a biotransformao um pr-requisito para a eliminao de toxicantes.

2 ABSORO Conceito Considerando o organismo, a absoro do toxicante sua passagem do local de entrada para a circulao sistmica. O significado da palavra passagem nesse contexto a transposio de membranas biolgicas (membranas celulares e subcelulares). A absoro e eliminao do toxicante nada mais so do que a passagem atravs das membranas, sendo que a absoro conduz o composto do meio externo para o interior do organismo e a eliminao consiste na sua sada do interior do organismo para o meio externo, conforme o esquema apresentado a seguir:

Absoro --------------------- Exterior --------------------Eliminao Interior

Passagem de toxicantes atravs das membranas celulares A passagem de toxicantes atravs das membranas celulares depende de fatores relacionados com a substncia qumica e fatores relacionados com o organismo, especialmente aqueles associados com a membrana celular.

Fatores relacionados com a substncia: propriedades fsico-qumicas, principalmente: solubilidade, grau de ionizao e tamanho e forma da molcula. Solubilidade A membrana celular tem natureza lipdica. Por isso, para atravess-la, uma molcula deve inicialmente dissolver-se nela. A facilidade com que a dissoluo ocorre depende da lipossolubilidade da molcula, a qual determinada pela presena de grupos lipoflicos (hidrofbicos ou no polares), na molcula. Assim, por exemplo: - radicais alquila so lipoflicos e a lipossolubilidade aumenta com o comprimento da cadeia, como descrito a seguir: CH3- CH3-CH2- CH3-CH2-CH2- CH3-(CH2)n- substituies na molcula podem determinar o aumento do seu carter lipoflico, como por exemplo: a substituio de um tomo de oxignio por um tomo de enxofre; - a adio de halognios molcula tambm aumenta sua lipossolubilidade. A seguir so apresentados os valores dos coeficientes de partio em cloreto de butila/gua de compostos (molcula na forma no ionizada) do grupo dos barbitricos:

3 - fenobarbital = 0,40 - N-metil-fenobarbital = 18,00 - tio-fenobarbital = 14,10 A comparao dos valores, que expressam a lipossolubilidade desses compostos, pode ilustrar os fatos mencionados anteriormente. Por outro lado, quando a molcula contm elementos estruturais que permitem a formao de pontes de hidrognio com a gua, o carter lipoflico diminui, com o concomitante aumento das propriedades hidroflicas ou polares. A polaridade alta para molculas ionizadas e grupamentos funcionais, tais como: hidroxila (-OH), carboxila (-COOH), amina (-NH2) e outros. A relao entre o carter lipoflico e o carter hidroflico de uma molcula determina se esta poder transpor prontamente as membranas celulares, por simples difuso. Em geral, quanto maior a lipossolubilidade da molcula, mais fcil sua passagem atravs das membranas. Grau de ionizao Os toxicantes, em sua maioria, so cidos fracos ou bases fracas, tendo um ou mais grupamentos funcionais capazes de se ionizar. O grau em que a ionizao se processa depende do pKa (constante de dissociao) da substncia e do pH do meio onde est dissolvida. As membranas biolgicas so permeveis s formas no ionizadas das substncias qumicas, se estas forem suficientemente lipossolveis. A relao entre o processo de ionizao, pKa da substncia e pH do meio dada pelas equaes de Handerson-Hasselbach apresentadas a seguir: [no ionizada] - para cidos: pKa - pH = log --------------------[ionizada] [ionizada] - para bases: pKa - pH = log ---------------------[no ionizada]

Fatores relacionados com a membrana celular Estrutura bsica da membrana celular O agente txico deve transpor vrias barreiras antes de atingir concentrao suficiente para produzir leses caractersticas, no rgo alvo de sua ao. Tais barreiras so as membranas de diversas clulas, como as do epitlio estratificado da pele, as finas camadas de clulas dos pulmes ou do trato gastrintestinal, o endotlio capilar e as clulas do tecido ou rgo onde o toxicante exerce sua ao. As membranas plasmticas que envolvem todas essas clulas so notavelmente similares. A membrana celular tem uma estrutura delgada e elstica, formada quase que exclusivamente por lipdios e protenas, com espessura entre 7,5 e 10 nanmetros (nm). Sua estrutura bsica uma bicamada lipdica, ou seja, uma pelcula delgada de lipdios

4 com a espessura de duas molculas, contnua por sobre toda a superfcie celular. Dispersas nessa pelcula lipdica, existem molculas de protenas globulares. A bicamada lipdica formada quase que inteiramente por fosfolipdios e colesterol. Tanto as molculas de fosfolipdios como de colesterol, contm uma parte hidroflica e outra parte hidrofbica. O radical fosfato dos fosfolipdios hidroflico e os cidos graxos so hidrofbicos. O colesterol contm um radical hidroxila que hidrossolvel e um ncleo esteride que solvel em gordura. Como as partes hidrofbicas dessas molculas so repelidas pela gua, mas se atraem mutuamente, essas molculas possuem tendncia natural para se alinharem umas s outras, com suas fraes graxas ocupando a regio central da membrana e com suas regies hidroflicas voltadas para a superfcie, em contato com a gua que as banha. Os cidos graxos da membrana no tm uma estrutura cristalina rgida; na verdade, so quase fluidos nas temperaturas fisiolgicas. O carter fluido das membranas em maior parte determinado pela estrutura e abundncia de cidos graxos poliinssaturados. A bicamada lipdica da membrana representa importante barreira, impermevel s substncias hidrossolveis. Por outro lado, as substncias solveis em gordura podem atravessar facilmente essa regio da membrana. Na membrana celular so encontrados dois tipos de protenas: as protenas integrais, que atravessam toda a espessura da membrana e as protenas perifricas, que ficam presas superfcie da membrana sem atravess-la. Muitas protenas integrais formam canais (ou poros) estruturais, pelos quais substncias hidrossolveis, especialmente ons, podem se difundir entre os lquidos intracelular e extracelular. Algumas protenas integrais atuam como protenas carreadoras para o transporte de substncias na direo oposta natural de sua difuso, e outras so enzimas. As protenas perifricas so encontradas quase que exclusivamente na face interna da membrana e atuam principalmente como enzimas. Usualmente, ficam presas a uma protena integral.

Processos que atuam na passagem de toxicantes atravs da membrana celular Dependendo de suas propriedades fsico qumicas, os toxicantes atravessam as membranas celulares por diferentes processos, que podem ser de dois tipos: transporte passivo ou especializado Transporte passivo O transporte passivo depende do gradiente de concentrao ou eletroqumico. No h gasto de energia pela clula, ou seja, a clula no desempenha um papel ativo na transferncia. Nesse tipo de transporte se incluem: a simples difuso e filtrao. Simples difuso A maioria dos toxicantes atravessa as membranas celulares por simples difuso. Algumas molculas hidroflicas, suficientemente pequenas, possivelmente penetram atravs dos canais (ou poros aquosos), enquanto que molculas hidrofbicas se difundem atravs das pores lipdicas das membranas. Os toxicantes, em sua maioria, so molculas orgnicas grandes, com lipossolubilidade em grau varivel. A velocidade de transporte atravs das membranas

5 depende da lipossolubilidade, que freqentemente expressa como coeficiente de partio em hexano/gua ou clorofrmio/gua. Muitos agentes txicos, bases e cidos orgnicos fracos, ocorrem tanto na forma ionizada como no ionizada, em soluo. A forma ionizada de difcil penetrao na membrana, ao passo que a forma no ionizada pode ser suficientemente lipossolvel para se difundir atravs da poro lipdica. Desse modo, a difuso do composto atravs da membrana depende principalmente da lipossolubilidade da sua forma no ionizada. Usando as equaes de Handerson-Hasselbach apresentadas a seguir, possvel determinar a porcentagem ou frao do composto que est na forma no ionizada. [no ionizada] - para cidos: pKa-pH = log --------------------[ionizada] [ionizada] - para bases: pKa -pH = log --------------------[no ionizada]

Filtrao Quando a gua flui em grande quantidade atravs de uma membrana porosa, qualquer soluto, pequeno o bastante para passar atravs dos poros, flui com ela. A passagem atravs desses canais chamada filtrao, visto que o fluxo de gua em grande quantidade causado por fora hidrosttica ou osmtica. Uma das principais diferenas entre as diversas membranas celulares consiste no dimetro dos poros. Nos glomrulos renais e capilares os poros so relativamente grandes (aproximadamente 70 nm) e permitem a passagem de molculas menores do que a albumina (peso molecular de 60.000). Na maioria das clulas os poros so muito menores ( 4 nm) e permitem a passagem de substncias qumicas com peso molecular de no mximo 200. Transporte especializado Existem diversas situaes nas quais o movimento de substncias qumicas atravs da membrana no pode ser explicado por simples difuso ou filtrao. o caso, por exemplo, de compostos que so muito hidrossolveis para se dissolverem na membrana e tambm muito grandes para se difundirem atravs dos poros. Para explicar o movimento desses compostos atravs das membranas celulares foi postulada a existncia de sistemas especializados de transporte, que so: o transporte ativo, difuso facilitada, fagocitose e pinocitose. Os sistemas especializados so responsveis pelo transporte atravs das membranas de muitos nutrientes: acares, aminocidos e cidos nuclicos. Contudo, tambm podem ser utilizados por alguns xenobiticos. Transporte ativo As seguintes propriedades caracterizam o sistema de transporte ativo:

6 a substncia qumica move-se contra um gradiente de concentrao ou eletroqumico; com altas concentraes do substrato o sistema pode ser saturado, exibindo um mximo de transporte; o sistema apresenta uma certa seletividade, com respeito a estrutura qumica do composto a ser transportado; pode haver inibio competitiva entre as substncias a serem transportadas; o sistema requer gasto de energia da clula, na forma de ATP. As substncias qumicas que so ativamente transportadas provavelmente formam um complexo com um carreador macromolecular antes de transpor a membrana e alcanar o interior da clula. Depois de liberar a substncia, o carreador retorna superficie original, para repetir o ciclo de transporte Avanos significantes no entendimento dos sistemas de transporte ativo de xenobiticos tm ocorrido nos ltimos anos. Sabe-se, hoje, que existem diversas famlias de transportadores de xenobiticos. Difuso facilitada A difuso facilitada um sistema de transporte mediado por carreador, que exibe as mesmas propriedades do transporte ativo, com exceo dos seguintes fatos: a substncia qumica no se move contra um gradiente de concentrao ou eletroqumico e esse tipo de transporte no despende energia. A difuso facilitada parece s ter importncia no transporte de nutrientes. A glicose, por exemplo, transportada para os diferentes tecidos do organismo por esse sistema. Fagocitose e pinocitose So processos nos quais a membrana celular flui ao redor de substncias qumicas na forma particulada, englobando-as. Esse tipo de transferncia atravs das membranas celulares importante para a remoo de material particulado dos alvolos, por fagcitos e do sangue, pelo sistema reticuloendotelial do fgado e do bao.

Absoro no trato gastrintestinal O trato gastrintestinal uma das mais importantes vias de absoro de agentes txicos. Por essa via so absorvidos muitos toxicantes ambientais que entram na cadeia alimentar. Comumente, as tentativas de suicdio envolvem a ingesto de substncias qumicas, em excesso. Essa tambm a via responsvel, com maior freqncia, pelas intoxicaes entre crianas. A absoro de agentes qumicos pode se dar ao longo de todo o trato gastrintestinal, desde a boca at o reto. Por essa razo, alguns compostos so administrados por via sub-lingual e outros pela via retal. Entretanto, mais comum a absoro de toxicantes aps sua ingesto. Com respeito aos toxicantes que so bases ou cidos orgnicos fracos, estes tendem a ser absorvidos por simples difuso no local do trato gastrintestinal, onde esto presentes na forma mais solvel em lipdios (no ionizada). Como o suco gstrico

7 cido, e o contedo intestinal quase neutro, a lipossolubilidade do composto pode diferir, acentuadamente, nessas duas reas do trato gastrintestinal. Usando as equaes de Handerson-Hasselbach possvel determinar a porcentagem do toxicante que est na forma no ionizada (solvel em lipdios). No caso de um cido orgnico fraco, como por exemplo o cido benzico e conhecendo: [no ionizada] a equao: pKa - pH = log ---------------------, [ionizada] o pKa do cido benzico = 4, pH do estmago = 2 e pH do intestino = 6

possvel determinar a porcentagem do cido que est na forma no ionizada (lipossolvel): no estmago:

[no ionizada] pKa - pH = log ----------------[ionizada] [no ionizada] 4 - 2 = log ----------------[ionizada] [no ionizada] 2 = log ----------------[ionizada] [no ionizada] 102 = ----------------[ionizada] [no ionizada] 100 = ----------------[ionizada] no intestino:

[no ionizada] pKa - pH = log ----------------[ionizada]

8 [no ionizada] 4 - 6 = log ----------------[ionizada] [no ionizada] -2 = log ----------------[ionizada] [no ionizada] 10-2 = ----------------[ionizada] [no ionizada] 1/100 = ----------------[ionizada] Conforme demonstrado anteriormente, no estmago, um cido fraco est na forma no ionizada, sendo, portanto, absorvido em maior quantidade, nesse local do trato gastrintestinal. No caso de uma base orgnica fraca, como por exemplo a anilina e conhecendo: [ionizada] a equao: pKa - pH = log -----------------, [no ionizada] o pKa da anilina = 5, pH do estmago = 2 e pH do intestino = 6

possvel determinar a porcentagem da base que est na forma no ionizada (lipossolvel): no estmago: [ionizada] pKa - pH = log ----------------[no ionizada] [ionizada] 5 - 2 = log ----------------[no ionizada] [ionizada] 3 = log ----------------[no ionizada] [ionizada] 103 = ----------------[no ionizada]

[ionizada] 1000 = ----------------[no ionizada] no intestino

[ionizada] pKa - pH = log ----------------[no ionizada] [ionizada] 5 - 6 = log ----------------[no ionizada] [ionizada] -1 = log ----------------[no ionizada] [ionizada] 10-1 = ----------------[no ionizada] [ionizada] 1/10 = ----------------[no ionizada] Conforme demonstrado anteriormente, no intestino, uma base fraca est na forma no ionizada (lipossolvel), sendo, portanto, absorvida em maior quantidade, nesse local do trato gastrintestinal. O trato gastrintestinal dos mamferos tem sistemas especializados de transporte para a absoro de nutrientes e eletrlitos. Existe um sistema para a absoro de glicose e galactose, trs para a absoro de aminocidos, um para absoro de pirimidinas e sistemas para a absoro de clcio, ferro e sdio. Alguns toxicantes podem ser absorvidos atravs desses sistemas. Assim, por exemplo: o tlio absorvido pelo mesmo sistema que transporta o ferro e o chumbo parece ser absorvido pelo mesmo sistema que transporta o clcio. Partculas tambm podem ser absorvidas pelo epitlio gastrintestinal. Foi demonstrado que partculas de um corante azico, com tamanho varivel, tendo em mdia algumas centenas de nanmetros de dimetro, foram absorvidas no duodeno. A resistncia de substncias qumicas ao pH cido do estmago, s enzimas do estmago e intestino, e flora intestinal, se reveste de extrema importncia. O toxicante pode ser alterado por qualquer um desses fatores, para formar um novo composto com toxicidade diferente daquele que lhe deu origem. Por exemplo: toxinas de cobras so muito menos txicas quando ingeridas, do que quando administradas por via intravenosa, porque so destrudas por enzimas digestivas no trato gastrintestinal. A ingesto de gua com alta concentrao de nitrato produz metemoglobinemia, que

10 muito mais freqente em crianas do que em adultos. Isso acontece porque o pH do trato gastrintestinal no recm-nascido mais elevado, estando, por isso, associado com a presena de uma flora mais abundante de certas bactrias, especialmente Escherichia coli, que converte o nitrato em nitrito, sendo este o agente metemoglobinizante. Muitos fatores podem alterar a absoro gastrintestinal de toxicantes. Assim, por exemplo, o cido etilenodiaminotetractico (EDTA) aumenta a absoro de agentes qumicos. Parece que ao quelar o clcio, o EDTA causa aumento da permeabilidade da membrana celular. A alterao da motilidade gastrintestinal tambm pode afetar a absoro de toxicantes. A quantidade de uma substncia qumica que entra na circulao sistmica, aps sua administrao oral, depende de vrios fatores. Assim, antes que a substncia alcance a circulao sistmica, ela pode ser biotransformada pelas clulas do epitlio gastrintestinal, ou pode ser capturada pelo fgado e excretada na bile, com ou sem biotransformao prvia. Esse fenmeno de remoo das substncias qumicas aps a administrao oral, antes de atingirem a circulao sistmica, denominado de eliminao pr-sistmica ou efeito de primeira passagem.

Absoro pulmonar Respostas txicas s substncias qumicas podem resultar de sua absoro pelos pulmes. Assim, o monxido de carbono, que causa com muita freqncia intoxicaes fatais, absorvido ao nvel dos alvolos pulmonares. A silicose, uma das doenas ocupacionais mais importantes, se deve ao acmulo de silcio nos pulmes. A via pulmonar tambm tem sido usada na guerra qumica para a absoro de gases txicos, tais como: o cloro, fosgnio, levisita, gs mostarda, etc) e na execuo de criminosos em cmaras de gs, utilizando o cido ciandrico. Os toxicantes absorvidos pelos pulmes so usualmente: gases (monxido de carbono, dixido de nitrognio, etc), vapores de lquidos volteis e volatilizveis (benzeno, tetracloreto de carbono, etc), e aerossis, que so partculas slidas ou lquidas suspensas no ar atmosfrico. A regio alveolar, onde os toxicantes so absorvidos, uma rea grande (50 a 100 m2) dos pulmes, que age como superfcie combinadora entre o sangue e o ar alveolar. O sangue nos capilares est separado do ar nos alvolos por duas membranas muito delgadas, constitudas por uma nica camada de clulas. Desse modo, o equilbrio entre o sangue e o ar alveolar atingido com muita rapidez. Gases e vapores Os gases e vapores so governados pelos mesmos princpios. Por isso, o uso da palavra gs representar ambos. A absoro de gases inalados ocorre principalmente nos pulmes. Contudo, antes de alcanar os pulmes, o composto deve passar atravs das fossas nasais, cuja superfcie mucosa coberta por uma camada de fluido, onde molculas de gases hidrossolveis e altamente reativos podem ser retidas. A difuso atravs das membranas celulares no um fator limitante da velocidade de absoro de gases ao nvel pulmonar. Isto se deve, pelo menos em parte, ao fato de que a camada de clulas epiteliais nos alvolos muito fina e os capilares esto em ntimo contato com essas clulas, de tal modo que o composto ter que se difundir atravs de um espao muito estreito. A medida que o gs atinge os alvolos,

11 suas molculas se difundem do ar alveolar para o sangue onde se dissolvem e so distribudas para os tecidos. Aps algum tempo, instala-se um equilbrio dinmico entre as molculas do gs no sangue e no ar alveolar; quanto maior for a solubilidade do composto no sangue, mais tempo ser necessrio para se estabelecer o estado de equilbrio. No estado de equilbrio, a razo da concentrao do composto no sangue e na fase gasosa constante. Tal razo de solubilidade, denominada coeficiente de partio sangue/ar, uma constante nica para cada gs. Quando o equilbrio alcanado a velocidade de transferncia das molculas do gs do espao alveolar para o sangue se iguala a velocidade de remoo das molculas do sangue para o espao alveolar. Para substncias com baixa razo de solubilidade sangue/ar, como por exemplo o etileno, apenas uma pequena porcentagem do gs contido nos pulmes removida pelo sangue durante cada circulao, uma vez que o sangue logo saturado pelo composto. Conseqentemente, um aumento na velocidade respiratria ou volume minuto no altera a transferncia do gs para o sangue. Ao contrrio, a absoro favorecida por aumento da velocidade do fluxo sangneo. Gases com alto coeficiente de partio sangue/ar, como por exemplo o clorfrmio, so transferidos para o sangue quase que na sua totalidade durante cada ciclo respiratrio. Nesse caso, a velocidade de absoro pode ser acelerada pelo aumento da velocidade da respirao ou do volume minuto. O aumento da velocidade de fluxo no altera substancialmente a absoro. Aerossis Na exposio a aerossis, as caractersticas mais importantes, que afetam a absoro pulmonar, so o tamanho das partculas e a hidrossolubilidade do material em questo. A extenso de penetrao das partculas no trato respiratrio depende largamente do seu tamanho e da anatomia, ou seja, das dimenses e configuraes das vias areas, que dificultam o acesso de material particulado aos pulmes. Alm disso, o sistema respiratrio conta com mecanismos de eliminao deste material. Partculas com 5 m de dimetro ou maiores usualmente se depositam na regio nasofarngea. Aquelas retidas na poro anterior no ciliada do nariz permanecem nesse local, at que sejam eliminadas pelo espirro ou pela limpeza do nariz. A cobertura mucosa da superfcie nasal ciliada propele partculas insolveis atravs do movimento dos clios, sendo estas engolidas em minutos. As partculas podem se dissolver na mucosa, sendo transportadas para a faringe ou podem ser absorvidas atravs do epitlio nasal. Partculas de 2 a 5 m se depositam principalmente na regio traqueobronquiolar, de onde so removidas pelo movimento retrgrado da camada mucosa, nas pores ciliadas do trato respiratrio. O mecanismo de transporte nessa regio geralmente rpido e eficiente. Partculas com 1 m ou menores penetram nos alvolos pulmonares, onde podem ser absorvidas ou eliminadas pela via linftica, aps a fagocitose por macrfagos. Nesse local, a remoo de partculas no eficiente; algumas partculas podem permanecer nos alvolos indefinidamente.

12 Absoro cutnea A pele humana entra em contato com muitos agentes txicos. Felizmente, no muito permevel, ou seja, uma barreira lipdica relativamente eficiente, que separa o homem do seu ambiente. Todavia, alguns agentes qumicos podem ser absorvidos pela pele, em quantidades suficientes para produzir efeitos sistmicos. O sarin (gs de guerra asfixiante) prontamente absorvido pela pele intacta. O tetracloreto de carbono pode ser absorvido pela pele, em quantidade suficiente para produzir danos hepticos. Vrios inseticidas tem causado a morte de trabalhadores agrcolas, aps serem absorvidos pela pele intacta. Para ser absorvido pela pele, o toxicante deve passar atravs das clulas epidrmicas, ou pelas clulas das glndulas sudorparas e sebceas, ou penetrar atravs dos folculos pilosos. As glndulas sudorparas e os folculos pilosos esto espalhados, com densidade varivel, por toda a pele. Embora a passagem atravs dos folculos pilosos possibilite a entrada rpida de quantidades pequenas dos toxicantes, estes so absorvidos principalmente atravs da epiderme, que constitue a maior rea de superfcie da pele. A absoro percutnea requer a passagem dos toxicantes atravs de vrias camadas de clulas, antes de entrarem nos pequenos capilares sangneos e linfticos, na derme. A barreira que determina a velocidade de absoro cutnea dos compostos a epiderme, mais especificamente o extrato crneo, que a camada mais externa da pele, constituda de clulas queratinizadas, densamente compactadas, as quais perderam seus ncleos e so biologicamente inativas. A passagem atravs das camadas restantes muito mais rpida e, dessa maneira, pode se distinguir duas fases na absoro percutnea de xenobiticos. A primeira fase a de difuso atravs do extrato crneo. Em contraste com a complexidade do trato gastrintestinal, a pele uma barreira mais simples de penetrao pelas substncias qumicas, uma vez que a passagem atravs da camada de clulas mortas a etapa limitante da velocidade. bvio que todos os toxicantes que podem atravessar o extrato crneo, o fazem por difuso passiva. A segunda fase da absoro percutnea consiste na difuso do toxicante atravs das camadas mais internas da epiderme e da derme. Os toxicantes passam atravs dessa rea e entram na circulao sistmica, atravs de numerosos capilares sangneos e linfticos da derme. A velocidade de difuso dos toxicantes depende do fluxo sangneo, movimento do fluido intersticial, alm de outros fatores, inclusive interaes com constituintes da derme. Em geral, a quantidade na qual o toxicante absorvido pela pele depende da dose ou concentrao envolvida, do tempo de contato com a pele, do local e rea de superfcie implicados. Alm disso, a absoro de toxicantes varia dependendo das condies da pele. A integridade da pele pode ser alterada por aplicao de agentes qumicos que danificam especificamente a camada de superfcie, como por exemplo o cido frmico. lcoois metlico e etlico, hexano e acetona quando aplicados podem dissolver os lipdeos normais da pele, o que resulta em moderada alterao da permeabilidade. A absoro percutnea dos toxicantes largamente determinada por suas propriedades fsico-qumicas. Todavia, no est claro, at que ponto a lipossubilidade importante. O inseticida DDT consideravelmente mais solvel em lipdeos do que na gua e absorvido de forma menos eficiente pela pele do que no trato gastrintestinal, sendo, portanto, mais txico por via oral do que pela via drmica, para ratos. Ao

13 contrrio, o inseticida isolan completamente solvel na gua e melhor absorvido pela pele, sendo mais txico pela via drmica do que por via oral, para ratos. Entre os compostos lipossolveis prontamente absorvidos pela pele destacamse: o fenol e derivados fenlicos, hormnios (estrgeno, progesterona, testosterona e desoxicorticosterona), vitaminas D e K e bases orgnicas (estricnina e nicotina). Com respeito a polaridade, parece que a absoro percutnea mais eficiente para compostos apolares do que para compostos inicos, mas nem sempre. Sais de alguns alcalides penetram facilmente pela pele. Uma variedade de fatores tais como pH, grau de ionizao, peso molecular, lipossolubilidade e hidrossolubilidade influem na absoro de agentes qumicos pela pele.

DISTRIBUIO Alcanando a corrente sangunea, aps absoro ou por administrao intranvenosa, o toxicante est disponvel para sua distribuio no organismo. Desse modo, mais uma vez, o composto dever atravessar barreiras, ou seja, membranas celulares, para alcanar o stio alvo de sua ao txica no organismo. A distribuio do toxicante depende da sua habilidade de atravessar essas barreiras, da sua afinidade pelos vrios tecidos ou rgos que constituem o organismo e da vascularizao e fluxo sangneo nos diversos tecidos ou rgos. A distribuio ocorre por meio de foras que atuam no movimento das substncias qumicas atravs das membranas biolgicas. Assim, a simples difuso, filtrao e sistemas especializados de transporte, discutidos anteriormente, so os processos atravs dos quais os agentes txicos atravessam essas barreiras. De acordo com suas caractersticas fsico-qumicas, o toxicante pode apresentar maior ou menor afinidade por certo tecido ou rgo. Quanto a vascularizao, bvio o papel que representa; haver uma maior distribuio de toxicantes nos tecidos mais vascularizados. No entanto, isso no implica no acmulo de toxicantes nesses tecidos. O sangue oferece um maior contato do agente txico com os tecidos. Todavia, o acmulo do toxicante ser determinado por sua afinidade pelos tecidos e habilidade de transpor as barreiras biolgicas. Em geral, os agentes txicos se concentram ou se acumulam em um tecido especfico. Alguns toxicantes atingem concentraes mais elevadas nos stios alvos de suas aes. o caso, por exemplo, do monxido de carbono, que tem uma afinidade muito grande pela hemoglobina. Outros se concentram em um stio que no aquele no qual produzem seus efeitos txicos. O chumbo, por exemplo, armazenado no tecido sseo, mas os sintomas da intoxicao por esse composto se devem a sua ao nos tecidos moles. Nesse caso, o compartimento do organismo onde o toxicante se concentra pode ser visto como depsito de armazenamento, j que nele o toxicante se encontra toxicologicamente inativo. Desse modo, os depsitos de armazenamento podem ser considerados como mecanismos de proteo do organismo, uma vez que previnem o acmulo de altas concentraes de agentes qumicos nos stios alvos de suas aes txicas. No depsito de armazenamento, o toxicante est em constante equilbrio com o toxicante livre no plasma. Assim, ser liberado do local de armazenamento, medida que o composto livre seja biotransformado ou eliminado do organismo. Conseqentemente, a meia vida biolgica dos compostos que so armazenados no organismo pode ser muito longa.

14 Os principais stios de armazenamento de toxicantes no organismo so os seguintes: protenas do plasma, fgado e rins, tecido gorduroso e tecido sseo.

Protenas do plasma Diversas protenas do plasma podem se ligar s substncias qumicas exgenas, to bem como se ligam a alguns constituintes fisiolgicos normais. A albumina, por exemplo, tem a capacidade de se ligar a muitos compostos. A transferrina importante para o transporte do ferro no organismo e a ceruloplasmina importante para o transporte do cobre. A quantidade na qual os toxicantes se ligam s protenas do plasma varia consideravelmente. Assim, a antipirina no se liga proteinas, o secobarbital se liga numa proporo de 50% e a tiroxina se liga numa proporo de 99,9%. As protenas do plasma podem se ligar a compostos cidos como por exemplo a fenilbutazona, a compostos bsicos como a imipramina e neutros como a digitoxina. A maioria das substncias qumicas exgenas se liga albumina, que a protena encontrada em maior abundncia no plasma e serve como depsito e transporte para numerosos compostos endgenos e exgenos. As interaes protena-toxicante ocorrem principalmente como resultado de foras hidrofbicas reforadas por pontes de hidrognio e foras de Van der Waals. Devido ao seu alto peso molecular, as protenas e qualquer toxicante a elas ligado no podem atravessar as paredes dos capilares. Conseqentemente, a frao do toxicante ligada protena fica retida no espao vascular, no estando, por isso, disponvel para a distribuio no espao extravascular ou filtrao pelos rins. Todavia, a interao protena-toxicante um processo rapidamente reversvel. A medida que o toxicante livre no plasma se difunde atravs das paredes dos capilares, aquele que se encontra ligado se dissocia da protena, para manter o equilbrio entre o toxicante livre no plasma e o toxicante livre no espao extravascular. Do ponto de vista toxicolgico, a ligao de agentes qumicos com protenas do plasma de especial importncia, porque reaes txicas severas podem ocorrer se o composto for deslocado de sua ligao com a protena. Ligada protena a substncia no est disponvel para atingir o rgo alvo de sua ao txica. Foi demonstrado que um agente qumico pode deslocar outro, liberando-o de sua ligao com a protena, tornando-o disponvel para se distribuir no stio alvo de sua ao txica. Se, uma sulfonamida, que se liga fortemente s protenas, for administrada concomitantemente com um frmaco antidiabtico, a sulfonamida pode deslocar o farmco antidiabtico e induzir coma hipoglicmico. Substncias qumicas exgenas podem tambm competir e deslocar compostos fisiolgicos normais que se ligam s protenas. Foi observado que uma alta taxa de mortalidade resultava do uso da mistura penicilina-sulfonamida, no tratamento de crianas prematuras com infeces bacterianas. Estudos demonstraram que a sulfonamida capaz de deslocar quantidades considerveis de bilirrubina, de sua ligao com a albumina. Como a barreira hematoenceflica pouco desenvolvida em recm-nascidos, a bilirrubina pode se distribuir no crebro, produzindo danos cerebrais severos.

15 Fgado e rins O fgado e os rins apresentam alta capacidade de reter agentes txicos. No organismo, os toxicantes se concentram mais nesses orgos do que em qualquer outro. Provavelmente, isto se deve ao fato de que o fgado atua na biotransformao e os rins atuam na eliminao de agentes txicos. O mecanismo preciso pelo qual o fgado e os rins removem os toxicantes do sangue ainda no foi esclarecido. Possivelmente, nesses casos, esto envolvidos o transporte ativo ou a ligao com componentes do tecido. Assim,uma protena encontrada no citoplasma das clulas hepticas (ligandina) tem alta afinidade por corantes azicos (carcinognicos) e corticosterides. Uma outra protena, a metalotioneina, que se liga ao cdmio, tambm foi encontrada no fgado e rins. A ligao de agentes txicos com componentes celulares se d rapidamente, principalmente no fgado. Foi demonstrado que trinta minutos aps a administrao de chumbo, como dose nica, a concentrao desse composto encontrada no fgado foi aproximadamente cinqenta vezes maior do que no plasma. Tecido gorduroso A lipossolubilidade do toxicante determina o seu armazenamento no tecido adiposo. Substncias qumicas suficientemente lipossolveis se distribuem e se concentram no tecido gorduroso. Isso tem sido demonstrado para vrios agentes txicos, tais como: o clordane, DDT, bifenilas policloradas e bifenilas polibromadas. Parece que os toxicantes se acumulam no tecido adiposo por simples dissoluo fsica em gorduras neutras. As gorduras neutras constituem cerca de 50% do peso corpreo de um indivduo obeso e cerca de 20% do peso corpreo de um indivduo de porte atltico. Desse modo, um toxicante com alto coeficiente de partio lipdeo/gua pode ser armazenado em grande quantidade, no tecido adiposo. O armazenamento determinar a ocorrncia de uma concentrao menor do toxicante no stio alvo de sua ao, servindo como um mecanismo de proteo do organismo. Face ao exposto, supe-se que esses compostos exerem sua toxicidade de forma menos severa em indivduos obesos. Entretanto, deve ser considerada a possibilidade de um repentino aumento da concentrao do toxicante no sangue e no seu stio de ao, como resultado de rpida mobilizao de gorduras armazenadas, para obteno de energia. Vrios estudos tem mostrado que o jejum, por um curto perodo de tempo, de animais experimentais previamente expostos aos persistentes inseticidas organoclorados pode resultar na ocorrncia de sinais de intoxicao nesses animais. Tecido sseo O tecido sseo pode servir como um reservatrio para compostos, como o fluoreto, chumbo e estrncio. O tecido sseo o principal stio de armazenamento para alguns toxicantes. Assim, por exemplo, aproximadamente 90% do chumbo presente no organismo est no esqueleto. O acmulo e armazenamento de toxicantes no tecido sseo pode ou no ser nocivo. O chumbo no txico para os ossos, mas os efeitos crnicos que resultam do acmulo de fluoreto nos ossos (fluorose ssea) so bem conhecidos. Os toxicantes que se depositam no tecido sseo no so irreversivelmente seqestrados por esse tecido, podendo ser liberados, alcanando a circulao sistmica. Dessa forma, um aumento da atividade osteoltica, tal como aquele visto aps a

16 administrao de paratormnio, determina um aumento da concentrao dos toxicantes no plasma. Barreira hematoenceflica A barreira hematoenceflica no uma barreira absoluta para a entrada de toxicantes no crebro. Na verdade, ela menos permevel do que outras reas do organismo e, por isso, muitos toxicantes no entram no crebro, em quantidades apreciveis. Existem pelo menos quatro razes anatmicas e funcionais que explicam a reduzida capacidade de penetrao dos toxicantes, no sistema nervoso central. So elas: as clulas do endotlio capilar do SNC so firmemente compactadas, o que determina a ocorrncia de poucos poros entre as clulas, se que eles existem. os capilares do SNC so, em alto grau, circundados por clulas da glia, os astrcitos. no crebro, as clulas do endotlio capilar contm um carreador dependente de ATP, a protena resistente a multidrogas (mdr), que transporta alguns agentes qumicos de volta para o sangue. a concentrao de protenas no fluido intersticial do SNC muito mais baixa do que em qualquer outra parte do organismo. Esses fatores oferecem alguma proteo, reduzindo a distribuio de toxicantes e conseqentemente a toxicidade exercida por eles ao nvel do SNC. A eficincia da barreira hematoenceflica varia de uma rea para outra, no crebro. No foi esclarecido se isso ocorre devido a variao no suprimento sangneo ou diferenas de permeabilidade da barreira nas vrias reas ou a ambos os fatores. Em geral, a penetrao de toxicantes no crebro segue os mesmos princpios que regem a passagem destes atravs de outras clulas, no organismo. Dessa forma, apenas toxicantes na forma livre entram no crebro. A lipossolubilidade e o grau de ionizao determinam a velocidade de entrada do toxicante no crebro. Em geral, quanto maior a lipossolubilidade, maior a velocidade de penetrao e esta diminui de forma acentuada com a ionizao. A barreira hematoeceflica no est completamente desenvolvida logo aps o nascimento. Por isso, alguns agentes qumicos so mais txicos para os recm-nascidos do que para os adultos. A morfina, por exemplo, mais txica (de 3 a 10 vezes) para ratos recm-nascidos do que para adultos. Isto ocorre devido a maior permeabilidade do crebro de recm-nascidos para a morfina. O chumbo produz encefalopatia em ratos recm-nascidos, mas no a produz em adultos. Passagem atravs da placenta A expresso barreira placentria esteve durante muitos anos associada com a idia de que a placenta tinha como principal funo a proteo do feto contra a passagem de substncias nocivas da me para o feto. Hoje, sabe-se que a placenta tem outras funes, como: nutrir o feto, promover a troca de gases (oxignio e gs carbnico) entre o sangue materno e fetal,

17 dispor do material de excreo do feto e manter a gravidez atravs de complexa regulao hormonal. A maioria dos nutrientes necessrios para o desenvolvimento do feto so carreados por sistemas de transporte ativo, acoplados a energia. Por exemplo: vitaminas, aminocidos, acares essenciais e ons (clcio e ferro) so transportados da me para o feto contra um gradiente de concentrao. Ao contrrio, a maioria dos toxicantes atravessa a placenta por simples difuso. Anatomicamente, a barreira placentria consiste em vrias camadas de clulas situadas entre as circulaes materna e fetal. O nmero de camadas varia entre as diferentes espcies de animais e considerando a mesma espcie, a placenta se altera dependendo do tempo de gestao. Como a simples difuso parece ser o mecanismo pelo qual a maioria dos agentes txicos atravessa a placenta, os fatores j mencionados, especialmente a lipossolubilidade, determinam a transferncia desses compotos atravs da placenta. Quanto ao fato de a placenta ter um papel ativo na preveno da passagem de substncias nocivas da me para o feto, foi demonstrado, recentemente, que a placenta contm sistemas de transporte ativo que protegem o feto de alguns xenobiticos. Alm disso, ela promove a biotransformao de alguns toxicantes, evitando que atinjam o feto.