un fruto dulce y jugoso Ma. Dolores Garca Suarez 1 y Hector Serrano 2 1 Laboratorio de Micropropagacion y Propagacion Vegetal. Departamento de Biologa. 2 Laboratorio de Biologa Molecular. Departamento de Ciencias de la Salud UAM-I. Recibido:15 de abril de 2005. Aceptado: 19 de mayo dfe 2005. Resumen La pi~ na es la planta mas conocida de las 2,700 espe- cies agrupadas en 56 generos de la familia Bromelia- ceae, es cultivada para alimento, su nombre cient- co es Ananas comosus (L.) Merr., no presenta se- milla es una especie auto-incompatiblle y se pro- paga vegetativamente por brotes laterales y el en- raizado de las hojas que se encuentran por arriba del fruto. Su fruto es dulce y jugoso considerado co- mo una infrutescencia esteril denominada baya, pue- de llegar a pesar 2kg. En el campo se pueden sem- brar hasta 75 000 individuos por hectarea y para in- ducir la oracion se ha utilizado la auxina acido naf- talenacetico (NAA). Existen alrededor de 17 varie- dades de cultivo de Ananas comosus y otras espe- cies como A. bracteus e hbridos que han sido utiliza- das para el cultivo. La importancia economica de la pi~ na ha impulsado la investigacion biotecnologica del cultivo de tejidos, donde se han logrado mejoramien- to de la produccion, tasa de crecimiento, produccion de protoplastos, embriones somaticos y plantas li- bres de patogenos. La pi~ na produce bromelana, en- zima proteoltica que es utilizada en la industria ali- menticia y farmace utica. Introduccion Se conocen alrededor de quince especies del gene- ro Ananas; A. comosus (L.) Merr. es la especie mas conocida como la pi~ na, no presenta semilla y se pro- paga por brotes laterales y el enraizado de las ho- jas que se encuentran arriba del fruto (Figura 1). Dentro de las principales especies que han sido em- pleadas para el tomejoramiento de la pi~ na tene- mos las siguientes tres especies A. ananassoides (Ba- ker) L. B. Smith originaria del Brasil, Paraguay y Ve- nezuela, se propaga con semilla y brotes laterales (Figura 2). Figura 1. Infrutescencia de Ananas comosus. A. lucidus, es reconocida como la especie silvestre, originaria de Venezuela, permite una recoleccion de los frutos mas facil debido a que sus hojas no poseen espinas (Figura 3). La pi~ na roja, A. bracteatus \Striatus" l (gura 4) y A. bracteatus tricolor son las mas utilizadas para obtener hbridos de la pi~ na. La pi~ na es la planta mas conocida de las 2,700 espe- cies agrupadas en 56 generos de la familia de las Bromeliaceae. Es el unico miembro de esta fami- lia que es cultivado para alimento humano. Otras especies que se cultivan son: Neoglaziovia vaire- gata para la obtencion de bra y como plantas de ornato Guzmania lingulata, Aechmea fasciata y Vreisia splendens. La familia Bromeliaceae crece en las regiones tro- picales y subtropicales del Continente Americano (Neotropical). El mayor n umero de especies provie- nen de Sudamerica, siendo Brasil uno de los mas ri- cos en esta ora (Smith y Downs 1979). 55 56 ContactoS 56, 55{61 (2005) Las bromelias se distribuyen desde Chile y Argen- tina hasta Norteamerica en el sureste de los Esta- dos Unidos pasando por Centroamerica y el Cari- be. Solo la especie Pitcairnia feliciana, se encuen- tra en el oeste del
Africa (Heywood, 1985). La alti- tud en las que crecen estas plantas vara desde el ni- vel del mar hasta 4 500 msnm. Pueden encontrar- se en una gran variedad de habitat, desde el de- sierto semiarido hasta el bosque mesolo de mon- ta~ na y la selva alta perennifolia (Benzing 1980). Figura 2. Ananas ananassoides Las plantas de la familia Bromeliaceae, presentan ho- jas arregladas en espiral, conocido com unmente co- mo 'roseta'. Las hojas pueden sobreponerse entre s de tal manera que forman una especie de tan- que donde se almacena el agua. Practicamente care- cen de races especializadas en la captacion de los nu- trimentos y es a traves de las hojas que captan los minerales para su crecimiento y desarrollo. De he- cho son consideradas como las plantas mejor adap- tadas para la captacion de nutrimentos y de hume- dad a traves de sus hojas. Figura 3. Ananas lucidus especie silvestre, sus hojas no tienen espinas. El sustrato sobre el cual pueden crecer los individuos de esta familia es muy variado, hay terrestres que crecen en el suelo, unas mas que crecen sobre otras plantas (eptas) e incluso aquellas que son capaces de crecer en las rocas (saxcolas). En los Andes se encuentra el genero Puya que pue- de llegar a medir hasta 3m de altura. Es una plan- ta terrestre con sistema radical completamente de- sarrollado (Heywood, 1985). La pi~ na es una planta perenne, monocotiledonea herbacea, se le llamo la fruta de los dioses, es una especie terrestre, nativa de Sudamerica posiblemen- te del Brasil, y domesticada en la parte central de este continente por su bra antes de que los euro- peos la conocieran en el Caribe. Cristobal Colon fue quien la llevo a Espa~ na desde la Isla Guadalupe en 1493. Dependiendo de la region en donde se encuen- tre, recibe nombre diferentes, siendo los mas comu- La pi~ na, Ananas comosus (L.) Merr. (Bromeliaceae). . . Ma. Dolores Garca Suarez y Hector Serrano. 57 nes el de nana, ananas, mayzali, arana, pi~ na tropi- cal y pi~ na de az ucar. Figura 4. Ananas bracteatus Striatus, la pi~ na roja. Actualmente, es cultivada en areas tropicales y ex- portada a nivel mundial, debido a su fruto jugo- so y dulce. Las pi~ nas son plantas terrestres que lle- gan a medir cerca de un metro de altura, con ta- llos cortos y peciolos expandidos, estas plantas se consideran como bromelias de tanque por el acomo- do de sus hojas, presentan races adventicias y tri- comas en sus hojas. El cultivo se ha esparcido ha- cia las zonas tropicales de la tierra, siendo los pro- ductores lderes: Australia, Bolivia, Brasil, Colom- bia, Costa Rica, Ecuador, China, Filipinas, Ghana, Hawai, India, Malasia, Nigeria, Per u, Tailandia, Ve- nezuela y Vietnam. Figura 5. La inorescencia de la pi~ na Ananas comosus. Propagacion en campo de Ananas comosus La planta es normalmente auto-incompatible y se propaga vegetativamente excepto cuando el objeti- vo es obtener nuevos cultivos (Figura 7, Tabla 1). Su fruto es jugoso y delicioso considerado desde el pun- to de vista botanico como una infrutescencia esteril, denominada fruto partenocarpico (un sincarpio que se desarrolla sin polinizacion previa) y es el principal producto de importancia de este cultivo, se le consi- dera como una baya que conjuntamente con el eje de la inorescencia y las bracteas, dan lugar a una infru- tescencia carnosa, en su supercie se observan las cu- biertas cuadradas y aplanadas de los frutos indivi- duales. (Salisbury y Ross, 1994). El fruto partenocarpico de la pi~ na, es de gran ta- ma~ no que puede llegar a pesar dos kilos; su casca- ra es gruesa y dura, con escamas marrones y presen- tan en uno de sus extremos un conjunto de hojas ver- des muy vistoso, su pulpa es amarillenta aromati- ca y bastante dulce con tintes acidos. En el campo la plantacion se hace con brotes prove- nientes de propagacion vegetativa de 20 cm de altu- ra, denominadas \ratones", que son capaces de fruc- ticar despues de 15 a 18 meses. Empricamente, se ha observado que los mejores bro- tes vegetativos se obtienen de \ratones" provenien- tes de individuos de dos oraciones posteriores al perodo de fructicacion, lo que lleva un tiempo cer- cano a cuatro a~ nos para producir frutos a partir de los brotes, proceso que puede considerarse lento (Py et al., 1984). Figura 6. Las ores tubulares en la inorescencia de la pi~ na. 58 ContactoS 56, 55{61 (2005) A nivel comercial, el arreglo espacial requiere una distancia de entre 120 y 150 cm entre los centros de cada planta y colocados en surcos de aproximada- mente 60 cm de profundidad. Con este arreglo, se ob- tiene apenas una distancia de 30 cm entre planta y planta permitiendo sembrar entre 55 000 y 75 000 in- dividuos por hectarea, dependiendo del tama~ no del fruto que se este tratando de producir. Este conoci- miento practico demuestra en cierta forma la com- petencia que existe entre los individuos por los re- cursos del suelo. Figura 7. Plantacion de Ananas comosus en la Isla de Maui, Hawai. Para inducir el inicio de la oracion en la pi~ na se lle- go a utilizar el acido naftalenacetico (NAA). Esta au- xina se aplica directamente en el campo y esta capa- cidad de inducir la oracion (Figuras 5 y 6) es muy particular en las Bromeliaceae. Actualmente se uti- lizan compuestos como el Ethefon (acido 2 cloroe- til fosfonico) para inducir mediante la produccion de etileno (otro regulador del crecimiento) la produc- cion propia de auxinas por la planta como acido in- dolacetico, AIA, lo cual hace mas uniforme la pro- duccion de pi~ na en el campo. Investigacion en el cultivo de tejidos de la pi~ na. La importancia economica de la pi~ na ha impulsa- do la investigacion biotecnologica en su aprovecha- miento. Se han desarrollado diversas estrategias pa- ra el mejoramiento tanto de la produccion como en el crecimiento. La aplicacion de metodos de mejora- miento vara desde la inoculacion bacteriana y el cul- tivo de protoplastos hasta la insercion de genes es- peccos. La inoculacion con lneas de bacterias nitri- cantes, como Azotobacter, aisladas demostraron in- crementar el crecimiento y la produccion de plan- tas creciendo bajo condiciones in vitro para la pi~ na variedad Cayena Lisa (Smooth Cayenne), en la fa- se de adaptacion. Los cultivos de micropropagacion producen plantas libres de patogenos pero tambien eliminan la forma- cion de endomicorrizas, las cuales contribuyen posi- tivamente en la nutricion mineral de las plantas co- mo un biofertilizante. El hongo Glomus sp. ha proba- do ser uno de los mas efectivos. Los hongos endomi- corrzicos, ademas del aporte de nutrimentos, act uan como agentes bioprotectores contra otros patogenos del suelo (Guillemin et al., 2002). El aislamiento de protoplastos, muestran que los hbridos somaticos tienen un potencial para obte- ner nuevos genotipos resistentes de pi~ na. Una de las estrategias biotecnologicas es obtener aislamiento de protoplastos a partir de explantes de hoja (Pinho- Guedes et al., 2002). Para la obtencion de embriogenesis somatica, se uti- lizo como fuente del explante las bases de las hojas de las variedades Cayena lisa y Roja Espa~ nola (Da- quinta et al., 2002). En la formacion de callos in vitro, se han obtenido ca- llos de crecimiento lento, y de color cremoso, simila- res a los callos embriogenicos (Figura 8.) Figura 8. Callo de pi~ na (Ananas comosus) in vitro. Al- gunas regiones del tejido han reiniciado la diferencia- cion para la formacion de organogenesis (tejido mas os- curo en la porcion central superior). Otra fuente de explante son los brotes laterales de pi~ na, los cuales fueron probados tambien para deter- minar la probable micropropagacion en cultivos de las variedades Primavera y Perola utilizando los re- guladores del crecimiento: citocinina, benzil adeni- na purina (BAP) (0.0, 1.0,2.0, 3.0, 4.0 y 5.0 mg l1 ) y auxina, acido indolacetico (AIA) (2.0 mg l-1) con sacarosa 4 % y medio solido Murashige y Skoog (1962), a n de inducir proliferacion, el enraizamien- to se logro sin la adicion de reguladores del creci- miento (Almaida et al., 2002). Sepea y Sagawa (1981), lograron obtener alrededor de 5 000 plantas a partir de un solo explante con medio lquido Murashige y Skoog (MS) adicionado La pi~ na, Ananas comosus (L.) Merr. (Bromeliaceae). . . Ma. Dolores Garca Suarez y Hector Serrano. 59 Tabla 1. Especies y variedades de Cultivo de la Pi~ na. Ananas comosus Ananas bracteatus Hbridos Perola Primavera Primavera x Perola Cayena Lisa (Smooth) Perolera Cayena x Perolera Cayenne (Hawaii) Sao Bento A20-3 Roja Espa~ nola(Red Spanish) Champaka x MD2 Roxo de Tefe D4-37 Guiana A25-34 Puerto Rico Samba Chanchamayo Roja Trujillana (Trujillo Red) Pernambuco Singapur Espa~ nola Reina Maritius Kew Gigante Pi~ na Blanca Cayena Lisa Serrana con agua de coco y transferidos a BAP para formar brotes axilares capaces de enraizar. Otra de las tecnicas utilizadas de la micropropaga- cion es la germinacion in vitro de semillas de la pi~ na. Para la variedad Roja Espa~ nola se ha realizado irra- diacion gama, a n de observar la variacion soma- clonal y mutagenesis. En las investigaciones de cultivo de tejidos de otras especies del genero Ananas, han sido utilizadas en la micropropagacion como Ananas sativus, donde las proporciones mas utilizados son 4:1 de auxina y ci- tocinina para romper la latencia y su inversion pa- ra inducir la proliferacion de brotes a partir del ca- llo (Mathews et al., 1976). Annanas erectifolius, una especie silvestre de pi~ na, puede formar embriones somaticos sometiendo a brotes a cinetina (KIN) y la auxina 2,4D en un medio lquido Sheik y Hildebrand, primero se forma un callo que requiere ser transferi- do a un medio semisolido MS con adenosina y pos- teriormente a un medio con citocinina BAP y nal- mente a un medio MS con auxina de naftalenaceti- co (NAA) (Krikorian 1994) La bromelana en la pi~ na. Los tallos de las pi~ nas contienen bromelaina, una en- zima proteoltica digestiva que es utilizada en la in- dustria alimenticia, como ablandador de carnes. La pi~ na fresca la contiene y es por ello que no se pue- de utilizar en repostera si no es hervida previamen- te. Es bien conocida la frustracion de los reposte- ros incipientes cuando incluyen dentro de sus ingre- dientes pi~ na fresca. La bromelana debe ser inac- tivada termicamente pues de otra forma, su ac- cion evita una adecuada conformacion de pasteles y gelatinas. Su uso con administracion oral es seguro y carece de efectos secundarios, la bromelana ha ido obteniendo aceptacion como una droga toterapeutica. La utilizacion de bromelana es muy diverso, se usa como antidermatoso, antitrombotico (para prevenir la formacion de coagulos en la sangre) y con activi- dad brinoltica, como anti-inamatorio y analgesi- co y tambien en la digestion e indigestion, para el dolor de espalda, angina de pecho, bronquitis, sinu- sitis, trauma quir urgicos, tromboebitis, pielonefri- tis, mejora el potencial de absorcion de antibioti- cos y la quimioterapia (Hale et al., 2002; Braun et al., 2005). Las propiedades anti-inamatorias y analgesicas han sido probadas y las evidencia clnicas indican una re- duccion en los sntomas de artritis osea y reumatoi- de. Los estudios clnicos en los cuales la bromelana ha sido utilizada como anti-inamatorio y analgesi- co, muestran que a dosis entre 200 mg y 400 mg al da, su eciencia es similar a medicamentos de pa- tente (Walter et al., 2002). La pi~ na contiene peroxidasa, fosfatasa acida e inhibi- dores de proteasas y calcio. Junto con estas, la bro- melana act ua como inmunomodulador, aumentando la inmunocitotoxicidad contra celulas tumorales, in- duce la produccion de distintas citocinas como la in- terleucina (IL)-1beta, IL-6 e IL-8 que causan necro- sis del tumor. En estudios con pacientes con tumo- res mamarios, el tratamiento con bromelana ha pro- bado su ecacia como antimetastasico, inhibidor de metastasis y la inhibicion del crecimiento de celu- las tumorales invasoras (Maurer, 2001). 60 ContactoS 56, 55{61 (2005) La bromelaina, requiere mas estudios, sobre todo en el manejo medico, para un uso adecuado. Los pa- cientes deben ser monitoreados adecuadamente, pa- so a paso, en su tratamiento medico. Conclusiones El cultivo de la pi~ na, aunque no muy extendido en nuestro pas, es importante. Contradictoriamente a lo que ocurre en otros cultivos, la disminucion en la diversidad biologica y capacidad evolutiva que lle- va la reproduccion asexual, permite que se pueda ha- cer una explotacion de este cultivo de un modo di- ferente a lo convencional, principalmente si se con- sidera que las Bromeliaceae son especies suculentas de lento crecimiento y los mecanismos de reproduc- cion vegetativa que presenta la pi~ na dan una exce- lente alternativa para su propagacion. Por otro la- do, el hecho de que se manejen clones de una plan- ta madre desde el punto de vista de la extraccion de metabolitos secundarios brinda la posibilidad de una extraccion de la bromelana mas reproducible debido a la homogeneidad que implica la disminu- cion en la recombinacion genica al no propagarse por semilla. La existencia de varias especies silvestres que s pro- ducen semilla, brindan una alternativa para el uso de tecnicas clasicas de tomejoramiento, permitiendo la combinacion y seleccion de caractersticas adapta- bles a condiciones y necesidades especcas. Por su parte, la aplicacion de las estrategias de la mi- cropropagacion a n de incrementar la tasa repro- ductiva con caractersticas fenotpicas y genotpicas, permite visualizar la posibilidad de una agroindus- tria cuya sustentabilidad es altamente posible. La proxima vez que adquiera una pi~ na, pien- se que es algo mas que una fruta dulce, rica y jugosa. Bibliografa 1. Benzing, D. H. 1980. The biology of the brome- liads. Eureka, CA: Mad River Press. 305 pp. 2. Braun, JM, Schneider, B, Beuth, HJ. 2005. The- rapeutic use, eceincy and safety of the por- teolytic pineapple enzyme Bromelain-POS in childre with acute sinusitis in Germany. In vi- vo 19:417-421. 3. Daquinta, M. A., Cisneros, A. Rodrguez, Y., Escalona, M. Perez M. 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