Você está na página 1de 37

1

Universitatea de Medicin i Farmacie Carol Davila Bucureti


Facultatea de Farmacie


DISCIPLINA: FARMACOGNOZIE, FITOCHIMIE, FITOTERAPIE

Analiza farmacognostic a unui fitopreparat
cu aciune antiulceroas

Ceai gastric


Zamfir Teodora
Gr.13, an III
Prof.coord.conf.univ. Dutu Ligia Elena







Bucureti 2014
2



Cuprins

Capitolul 1:Date generale privind produsele vegetale component ale amestecului
1.1 Calendula flos .......pag 3
1.2. Hyperici herba ..............pag 4
1.3. Symphyti radix. pag 6
Capitolul 2:Analiza farmacognostic a produselor vegetale
componente ale fitopreparatului ...................................................................................pag 8
2.1.Examen macroscopic.........pag 8
2.1.1 Calendula flos... pag 8
2.1.2 Hyperici herba.. pag 8
2.1.3 Symphyti radix.. pag 9
2.2 Examen microscopic.... pag 10
2.2.1 Calendula flos.. pag 10
2.2.2 Hyperici herba pag 11
2.2.3. Symphyti radix. pag 12
2.3. Analiza chimic calitativ a soluiei extractive apoase.. Pag 13
2.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor...... pag 23
2.5. Determinarea cantitativ a flavonelor. pag 26
Capitolul 3:Stabilirea formulei de fitopreparat.. pag 28
3.1 Raportul dintre produsele vegetale componente ale fitopreparatului.. pag 28
3.2 Analiza chimic calitativ a fitopreparatului... Pag 29
3.3 Determinarea cantitativ a flavonelor din fitopreparat pag 33
3.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor din fitopreparat pag 33
Capitolul 4:Corelaii ntre principiile active identificate
i potenialele efecte terapeutice induse .......................................................................pag 34
Capitolul 5:Concluzii......... pag 35

3



Capitolul 1
Date generale privind produsele vegetale component ale amestecului

1.1 Calendula flos
Reprezint inflorescena cu sau fr receptacul, uscat dup recoltare de la specia
Calendula officinalis L., glbenele(Asteraceae).Trebuie sa conin cel puin ;23% substane
solubile sau cel puin 0,4% flavonoide exprimate n hiperozid.
Compoziie chimic :
n produsul vegetal predomin saponozidele triterpenice pentaciclice (2-10%),
representative fiind calendulozidele (A-H) (Calendulozidele sunt mono- i bidesmozidele
acidului oleanolic)
Steroli
Derivai flavonici ( glucozidele izoramnetolului i cvercetolului)
Carotenoide ( licopina, i carotene, luteina, violaxantina, flavoxantina,
crizantemxantina);
Compui poliinici (acid calendulic);
Cumarine (umbeliferona, esculetol, scopoletol);
APFC-uri reprezentate de acid clorogenic;
Tanin;
Mucilagii;
0,2-0,3% ulei volatile cu derivai sesquiterpenici ( -cadinol, constituent majoritar)

Aciune:
Cicatrizant prin saponozide, carotenoide, flavone;
Antiinflamatoare;
Antiedematoas;
Antibacterian prin saponozide, flavone, tanin, ulei volatil;
Coleretic prin acid clorogenic, umbeliferon;
Acid calendulic
Fig.33 (1)
4

Imunostimulatoare;
Mucoprotectoare prin mucilagii;
Antispastic prin flavone i cumarine;
Capilaroprotectoare prin flavone;
Antioxidant prin flavone;(3)

ntrebuinri :
n tratamentul plgilor, arsurilor, gastritei colecistitei, cistitei, ulcerului gastro-duodenal
i varicose, tulburari menstruale, n special n dismenoree;
n dermatocosmetic.
Mod de administrare :
Infuzie obinut dintr-un gram de produs vegetal la 150 de ml ap;
Tinctur diluat n ap(2-4 ml tinctur la 250-500 ml ap);
Unguent (Pentru ungent se prevede un coninut n principia active corespunztoare la
2-5 g produs vegetal);(3)
1.2. Hyperici herba

Reprezint somitile florale uscate dup recoltare de la specia Hypericum perforatum L.,
suntoare, pojarni; conine cel puin 0,08% hipericine, exprimate n hipericin.

Compoziie chimic :

0,10-0,505 naftodiantrone, reprezentate de hipericina
i pseudohipericin, localizate in punctele negre de pe
petale;
0,1-0,3% ulei volatile bogat n hidrocarburi
monoterpenice ;
Hipericin
Fig.34(2)
5

4-5% flavone reprezentate de hiperozid, rutozid,
isocvercotrozid, biflavone;
Xantone (1,3,6,7 tetrahidroxixantona)
Proantociani;
6-15% tanin de tip catehic;
APFC-uri reprezentate de acid cafeic i clorogenic;
Carotenoide 2-4% hiperforin (derivat de
floroglucinol)(3)

Actiune :
Colagog coleretic - prin acid cafeic i
clorogenic;
Cicatrizant prin flavone, carotenoide, tanin;
Antipruriginoas prin ulei volatile;
Antidepresiv i fotosensibilizatoare prin hipericin i pseudohipericin;
Antibacterian prin hiperforin si ulei volatile;
Capilaroprotectoare, diuretic prin flavone, cateholi;
ntrebuinri:
Intern in tratamentul :
- Colitei;
- Colicistitei;
- Ulcerului gastro-duodenal;
- Stri depressive ( la vrsta a III-a)
Extern - n arsuri.
Mod de administrare:
Infuzie
- obinut din 2-4 g produs vegetal la 150 ml de ap;
Pseudoipericin
6

- se administreaz 1-2 cni de infuzie proaspt preparat/zi, de preferat dimineaa
i seara;
ulei de suntoare (obinut prin macerarea produsului vegetal ntr-un ulei vegetal)
extract standardizat in hipericin;

1.3. Symphyti radix
Reprezint rdcinile si rrizomii proaspei sau uscai dup recoltare de la specia
Symphytum officinale L., ttneas, iarba lui Tatin(Boraginaceae)
Compozitie chimic:
Produsul vegetal conine :
0,6-0,8% alantoin; Alantoin
Poliholozide;
4-6% tanin;
0,2-0,6 % alcalozi pirolizidinici;
Derivai triterpenici;
Aminoacizi; Asparagin
1-3% asparagin;
Aciune :
Cicatrizant prin alantoin i poliholozide;
Antiulceroas prin alantoin;
Antipruriginoas prin poliholozide;
Antiinflamatoare prin acizi polifenolici;
Astringent, antimicrobian prin tanin.
ntrebuinri:
n medicina tradiional produsul vegetal este frecvent utilizat n tratamentul ulcerului,
gastritelor, afeciuni respiratorii (bronit, tuse de diferite etiologii)
7

Extern se folosete sub form de cataplasme sau unguente; se ntrebuineaz in tratarea
plgilor infectate n curs de cicatrizare, arsurilor, ulcerului varicos, furunculozei;



Mod de administrare:
Infuzie obinut din 4-5 g produs vegetal la 250 de ml ap; timpul de infuzare este de
10-15 min; se administreaz 2-3 cani de infuzie pe zip e o durat limitat de
tratament;
Extern, se recomand ca preparatele s se aplice pe dermul integru;

Durata limitat de tratament este datorat alcaloizilor pirolizidinic care, la
administrarea ndelungat a produsului vegetal, induc hepatotoxicitate;
Doza zilnic de alcaloizi pirolizidinic nu trebuie s depeasc 100 de
micrograme;
Durata tratamenului nu trebuie s depeasc 4-6 sptmni.
Se presupune c administrarea timp de un an a unei cantitai de 1 microgram de
alcaloizi pirolizidinici pe zi ar putea avea efect cancerigen.(4)






8

Capitolul 2
Analiza farmacognostic a produselor vegetale componente ale
fitopreparatului
2.1.Examen macroscopic
Prin acest examen, se urmrete stabilirea caracterelor morfologice (observate cu ochiul
liber sau la lup) i a caracterelor organoleptice ale produselor vegetale. Examinarea presupune
stabilirea aspectului, dimensiunilor, culorii, mirosului si gustului (3).
2.1.1 Calendula flos
Aspectul produsului vegetal: produsul vegetal
prezint un aspect neomogen, sub form de concissum.
Florile au corola galben, galben-portocalie sau
galben roiatic.
Culoarea produsului vegetal: este predominant
galben datorit florilor de glbenele.
Mirosul produsului vegetal: este specific glbenelelor,
acestea prezentnd un miros balsamic puternic.
Gustul produsului vegetal: gust amrui- srat, uor mucilaginos

2.1.2 Hyperici herba
Aspectul produsului vegetal: produsul
vegetal prezint un aspect neomogen, sub form de
concissum.
Pe toat suprafaa frunzei se observ
punctuaii translucide corespunztoare pungilor
secretoare, care i confer un aspect perforat.
Florile sunt dispuse in dichazii;dichaziul terminal,
mpreun cu ramurile laterale terminate in dichazii
formez un corimb, sau mai rar o panicul.Caliciul
este format din 5 sepale lanceolate, ascuite,
Fig 11.Produs vegetal de tip
concissum Hyperici herba

Fig 10.Produs vegetal de tip
concissum Calendula flos
9

glabre, cu punctuaiuni translucide i rare punctuaiuni negre.Corola este format din 5 petale
galben-aurii , care prezint pe margini mici puncte brun-negricioase.
Culoarea produsului vegetal: este galben-verzuie, culoare datorat mrunirii prilor
aeriene ale suntoarei;
Mirosul produsului vegetal: miros caracteristic
Gustul produsului vegetal: aromat, amar, astringent.
2.1.3 Symphyti radix
Aspectul produsului vegetal: produsul vegetal prezint un
aspect neomogen, sub form de concissum.
Culoarea produsului vegetal: este gri-brun, culoare
datorat mrunirii rizomului si a rdcinii;
Mirosul produsului vegetal: produsul vegetal uscat nu
prezint miros characteristic;
Gustul produsului vegetal: amar.
Concluzie : n urma examenului macroscopic, a fost identificat fiecare produs vegetal
menionat de productor, un factor important reprezentndu-l forma de concissum sub care sunt
prezentate plantele medicinale mrunite.












Fig 12.Produs vegetal de tip
concissum Symphyti radix

10

2.2 Examen microscopic


Examenul micoscopic are ca scop stabilirea esuturilor i elementelor anatomice
caracteristice unui anumit tip de produs vegetal. Se poate realiza pe seciune, preparat superficial
(concissum) i pulbere (3). n cazul de fa examenul microscopic se realizeaz pe pulbere
clarificat cu cloralhidrat.
Dup pulverizarea unei mici cantiti din produsul brut, din pulbere se presar cu un ac
spatulat peste o lam de microscop peste care se aduce iniial cteva picturi de cloralhidrat
800g/l.
Preparatul rezultat se trece cu micri succesive prin flacra unui bec de gaz, prin micri
circulare, pn se percepe un miros slab caracteristic de reactiv i se observ degajarea unor
vapori albicioi rezultai prin descompunerea claralhidratului. Nu se insist cu nclzirea
deoarece claralhidratul poate cristaliza pe lama ceea ce mpiedic obinerea unui preparat
microscopic corespunztor. Apoi se oprete nclzirea, se mai adaug cteva picturi de
cloralhidrat dac este nevoie i floroglucin clorhidric pentru evidenierea elementelor
lemnoase, se pune lamela peste preparat, i apoi se examineaz la microscop
2.2.1 Calendula flos
Caractere microscopice :
n urma examenului microscopic am
regsit majoritatea elementelor specifice unui
preparat de tip flos:
Grauncioare de polen;
Peri glandulari specifici
fam.Asteraceae
Fragmente de endoteciu ;
Fragmente de epiderm cu aspect
variat;
Parenchim clorofilian ;
Vase de lemn de calibru mic;
Fig 1.Gruncior de polen observate
la Calendulae flos

11





2.2.2 Hyperici herba
n urma examenului microscopic am regsit majoritatea elementelor specifice unui
preparat de tip herba:

Elementele comune pentru produse
vegetale de tip folium : epiderma cu stomatele;-
fragmente de parenchim clorofilian;-fragmente de
tesut palisadic si lacunar; si elementele comune pentru
produse vegetale de tip flores.
Elemente comune de flores : fragmente
de endoteciu, grauncioare de polen, fragmente de
epiderma cu aspect variat, parenchim clorofilian
provenit de pe sepale, vase de lemn de calibru mic;












Fig 2. Fragment de endoteciu
observat la Calendulae flos

Fig 3. Peri glandulari specifici fam
Asteraceae
Fig 4.Pungi secretoare cu
hipericin observate la
Hyperici herba
Fig 6.Vase de lemn de calibru mic
observate la Hyperici herba
Fig 5. Anter observat la
Hyperici herba
12

2.2.3. Symphyti radix
n urma examenului microscopic am regsit
majoritatea elementelor specifice unui preparat de tip
radix:
Vase de lemn de calibru mare;
Suber;
Parenchim cortical;













Fig 7. Gruncioare de polen
observate la Hyperici herba

Fig 9. Suber observat la
Symphyti radix

Fig 8. Vase de lemn de calibru mare
observate la Symphyti radix

13

2.3. Analiza chimic calitativ a soluiei extractive apoase

Examenul chimic calitativ are ca scop stabilirea principalelor grupe de principii active, prin
reacii chimice specifice. Realizarea acestui obiectiv are la baz dou etape:
produsul vegtal este supus unor extracii succesive cu solveni de polariti diferite, de la
apolar spre polar (n general eter etilic, metanol, ap etc.)
n fiecare soluie extractiv se efectueaz reacii chimice specifice diferitelor clase de
principii active. Aceste reacii de identificare vor fi descrise n continuare.
n prima faz este necesar obinerea unei infuzii conform specificaiilor productorului:
se iau 2 linguri de produs vegetal peste care se adaug 250 ml ap fierbinte i se las la infuzat
timp de 15 minute, la temperatura camerei, apoi se strecoar (3).
Indentificarea compuilor reductori:
Reacia cu reactivul Fehling
Principiul reaciei: are la baza proprietatea ozelor de a reduce reactivul Fehling (hidroxid
amino-cupric) la oxid cupros.
Tehnica de lucru: peste soluia extractiv se aduce reactiv Fehling (obinut extempore din
Fehling I + Fehling II n cantiti egale). Amestecul se ncalzete la flacr mic.
Rezultate:
a) Calendula flos :
precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n Fig.
13 (3).

b) Hyperici herba :
precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n Fig.
14 (3).

c) Symphytum radix:
precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n Fig.
15 (3).



Fig 13.Reacia
cu FeCl
3
Fig 15.Reacia
cu FeCl
3
Fig 14.Reacia
cu FeCl
3
14

Observaii: n cazul n care reacia este pozitiv, dar se obine o cantitate mic de
precipitat, poate demonstra c infuzia nu conine compui reductori n cantitate foarte mare.
I dentificarea ozelor si poliholozidelor:
Reacia Molish
Principiul reaciei: sub aciunea acidului sulfuric concentrat, ozele i poliholozidele se
deshidrateaz, cu formarea furfuralului (pentoze) sau hidroximetil-furfuralului (hexoze); acetia,
prin cuplare cu timol, formeaz compui colorai n rou-purpuriu.
Tehnica de lucru: 3 5 ml soluie extractiv se concentreaz n capsul. Peste reziduu se
aduce 1 ml acid sulfuric concentrat i se menine n repaus cel puin 5 minute. Apoi se trateaz
cu 1-2 picturi timol 1%.
Rezultate: rezult un compus colorat n rou-violaceu sau rou-portocaliu pentru
Calendula flos i Symphytum radix
a) Calendula flos : se
observ apariia unui
precipitat rou-crmiziu
cum se poate observa n
Fig. 16 (3).

b) Hyperici herba :nu se
observ apariia unui
precipitat rou-crmiziu
cum se poate observa n
Fig. 17 (3).

c) Symphytum
radix: se observ
apariia unui
precipitat rou-
crmiziu cum se
poate observa n
Fig. 18 (3).





Fig.16 Reacia Molish

Fig.18 Reacia Molish

Fig.17 Reacia Molish

15

Observaii: n urma reacei s-a format un compus rou-portocaliu, reacia fiind pozitiv
pentru Calendula flos i Symphytum radix.
I dentificarea mucilagiilor:
Reacia de precipitare n alcool
Principiul reaciei: mucilagiile precipit n prezena alcoolului sau a acetonei.
Tehnica de lucru: ntr-o eprubet ce conine 10 mL metanol sau aceton se toarn n fir
subire, sub continu agitare 2- 3 mL soluie extractiv concentrat.
Rezultate:
a) Calendula flos : se
formeaz un precipitat
voluminos, dup cum
se observ n fig.20
b) Hyperici herba : se
formeaz un precipitat
voluminos, dup cum
se observ n fig.21
c) Symphytum radix: se
formeaz un precipitat
voluminos, dup cum
se observ n fig.22




Observaii : reacia este pozitiv pentru toate produsele vegetale.
I dentificarea ODP-urilor:
Reacia cu reactivul Arnow
Principiul reaciei: n prezena acidului azotos (format in situ n sistem din reacia
azotitului de sodiu cu acidul clorhidric), acidul cafeic formeaz nitrozoderivai. Acetia, n mediu
alcalin, tautomerizeaz la izonitrozoderivai, compui colorai n rou intens.
Tehnica de lucru: 1 mL soluie extractiv se trateaz
cu 1 mL acid clorhidric 0,5 N, 1 mL
reactiv Arnow i 1 mL hidroxid de sodiu 0,5 N. Apare o coloraie roie ca urmare a formrii
oximei acidului cafeic.
Fig. 39. Reacia Molish
formarea rezidului
Fig. 42. Reacia Molish formarea
compusului rou-portocaliu
Fig.20 Fig.22 Fig.21
16




Rezultate:
a) Calendula flos : se
formeaz coloraie
roie, dup cum se
observ n fig.20
b) Hyperici herba : se
formeaz coloraie
roie, dup cum se
observ n fig.20
c) Symphytum radix: se
formeaz coloraie
roie, dup cum se
observ n fig.20










Observaii: intensitatea coloraiei este dependent de cantitatea de ODP-uri din produs
vegetal (3). n aceast situaie reaciile sunt pozitive.
I dentificarea proantocianilor :
Reacia Bath-Smith
Principiul metodei: n mediu acid i la cald se transform n antociani.
Tehnica de lucru :la 1 ml soluie extractiv se adaug 1 ml soluie de acid clorhidric 3
mol/l. proba astfel obinut se menine 30 de minute pe baia de ap n fiebere.
Fig.23 Fig.24
Fig.25
17

clorur de cianidol
Rezultate : se obine o coloraie , mai intens n mediu de alcool n-butilic pentru
Hyperici herba.

I dentificarea flavonelor:
1. Formarea fenoxizilor
Principiul reaciei: flavonozidele i agliconii formeaz n mediu alcalinfenoxizi colorai
n galben.
Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv apoas se adaug 0,5 ml soluie de hidroxid
de sodiu 100 g/l.
Rezultate: se observ intensificarea coloraiei galbene pentru toate cele trei produse
vegetale (3).












I dentificarea antocianilor:

Reacia virajului de culoare:
Principiul reaciei: prin variaia pH-ului au loc modificri structurale nsoite de
modificarea culorii.
Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv apoas se adaug 1-2 picturi soluie de acid
clorhidric 1 mol/l i se observ intensificarea coloraiei roii.
Rezultate: schimbrile nu au fost vizibile ;
cvercetol
Conc.
Cl

18

I dentificarea taninurilor:
Reacia cu clorur feric (III)
Principiul reaciei: n prezena cationului Fe
+3
taninurile catehice formeaz precipitate
i/sau coloraie verde-negricioas, iar cele galice precipitate i/sau coloraie albastr-negricioas.
Tehnica de lucru: la 1 ml soluie extractiv se adaug 0,5 ml soluie de clorur de fer (III)
10 g/l
Rezultate: se obine un precipitat i/sau coloraie diferit n funcie de tipul de tanin.
a) Calendula flos : - se
obine o coloraie
verde -negricioas

b) Hyperici herba : - se
obine o coloraie
verde -negricioas


c) Symphytum radix:
- se obine o coloraie
verde -negricioas









Observaii: dac n soluia extractiv se gsesc att taninuri catehice ct i galice, aceast
reacie de culoare nu este concludent i se impune separarea acestora (3). Proba analizat
conine tanin catehic.

Fig.26
Fig.27
19

I dentificarea saponozidelor:
Proba de spumefiere
Principiul reaciei: o soluie apoas coninnd saponozide, prin agitare energic timp de
15 secunde, formeaz o coloan de spum persistent cel puin 15 minute.
Tehnica de lucru: 5 ml soluie extractiv apoas se agit timp de 15 secunde, apoi se las
n repaus.
Rezultate:


Observaii: proprietile spumefiante, detergente ale saponozidelorlor se explic prin
tensioactivitatea; poliholozidele se comport asemntor, dar spuma nu este persistent (3).




a) Calendula flos :
existena unei spume
persistente i
dupa 15 minute, denot
prezena saponozidelor
b) Hyperici herba :
existena unei spume
persistente i
dupa 15 minute, denot
prezena saponozidelor
c) Symphytum radix:
Nu se formeaz spuma
persistent reacia este
negativ => nu sunt
prezente saponozide







Fig. 28. Proba de
spumefiere

Fig. 29. Proba de
spumefiere

20

I dentificarea carotenoidelor:

Reacia cu reactivul Carr-Price
Principiul reaciei: la tratare cu triclorura de stibiu, carotenoidele formeaz compui
colorai n albastru, care trec n rou-purpuriu i apoi n rou-brun.
Tehnica de lucru: 1-2 mL soluie extractiv apoas se aduce la reziduu, ntr-o capsul de
porelan, pe baie de apa. Peste reziduu se adaug 1-2 picturi reactiv Carr-Price.
Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care
vireaz rapid n rou-purpuriu i apoi n rou-brun (4).
Observaii: n cazul acestui preparat reacia este negativ pentru toate cele trei produse
vegetale.

I dentificarea alcaloizilor:
Reacii generale de precipitare
Principiul reaciei: n prezena reactivului (R. Mayer, R. Bertrand), alcaloizii sruri
formeaz precipitate.
Tehnica de lucru: Peste 1 ml soluie apoas acid se adaug treptat reactivul de
precipitare (1-2 picturi) i se urmrete modificarea aspectului soluiei n raport cu o soluie
martor.
Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se formeaz un precipitat (4).
Observaii: n cazul reaciilor cu reactivii Mayer i Bertrand se formeaz precipitate albe
sau alb-glbui, solubile n exces de reactiv; n cazul n care proba are un coninut mic de
alcaloizi, se va observa doar o opalescen, nu un precipitat. Reacia relizat pe probele de
analizat este pozitiv pentru Symphyti radix.







21


Nr.
Crt.
Principiul activ
cutat
Reacia chimic
realizat
Produs vegetal Rezultat Observaii
1
Compui
reductori
Reacia cu reactiv
Fehling
Calendula flos Pozitiv (+)
Precipitat rou-
crmiziu
Hyperici herba
Pozitiv (+)
Precipitat rou-
crmiziu
Symphyti radix
Pozitiv (+)
Precipitat rou-
crmiziu
2 Oze Reacia Molish
Calendula flos Pozitiv (+)
Compus rou-
portocaliu
Hyperici herba
Negativ (-)
Compus rou-
portocaliu
Symphyti radix
Pozitiv (+)
Compus rou-
portocaliu
3 Mucilagii
Reacia de
precipitare n alcool
Calendula flos Pozitiv (+)
Precipitat voluminos
Hyperici herba
Pozitiv (+)
Symphyti radix
Pozitiv (+)
4 ODP-uri
Reacia cu reactivul
Arnow
Calendula flos Pozitiv (+)
Compus rou
Hyperici herba
Pozitiv (+)
Symphyti radix
Pozitiv (+)
5 Proantociani Reacia Bath-Smith
Calendula flos Negativ (-)
Hyperici herba Pozitiv (+)
Coloraie mai
intens dect a
martorului
Symphyti radix Negativ (-)
6

Flavone

Formarea
fenoxizilor

Calendula flos Pozitiv (+)
Intensificarea
coloraiei galbene

Hyperici herba
Pozitiv (+)
Symphyti radix
Pozitiv (+)
7 Antociani
Reacia de viraj de
culoare
Calendula flos Negativ (-)
Hyperici herba Negativ (-)

Symphyti radix Negativ (-)

Tabel I rezultate analiz chimic calitativ
pe produse vegetale
22

8 Taninuri Reacia cu FeCl
3
Calendula flos Pozitiv (+)
Coloraie
verde-negricioas

Hyperici herba
Pozitiv (+)
Symphyti radix
Pozitiv (+)
9 Alcaloizi
Reacii generale de
precipitare
Calendula flos Negativ (-)
Precipitat
alb/alb-galbui
Hyperici herba Negativ (-)
Symphyti radix Pozitiv (+)
10 Saponozide Proba de spumefiere
Calendula flos Pozitiv (+)
Strat de spum
persistent 15 min
(>1cm)
Hyperici herba Pozitiv (+)
Symphyti radix Negativ (-)
11

Carotenoide

Reacia cu reactiv
Carr-Price

Calendula flos Negativ (-)
Coloraie
albastr-verzuie
Hyperici herba Negativ (-)
Coloraie
albastr-verzuie
Symphyti radix Negativ (-)
Coloraie
verde-albastruie















23

2.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor

ODP-urile sunt esterii monocafeilchinici (acidul clorogenic i izomerii si),
dicafeilchinici (cinarina i izomerii si), esteri ai acidului cafeic cu acizii tartric i
2-hidroxi-dihidrocafeic sau derivai glicozidai ai acidului cafeic. n aceast clas sunt inclui de
asemenea esteri ai acizilor p-cumarinici, ferulic, sinapic (esteri ntre dou sau mai dou sau mai
multe molecule de astfel de acizi, identici sau diferii).
Determinarea cantitativ a ODP-urilor se realizeaz pe o soluie extractiv apoas,
conform productorului.
Tehnica de lucru:
- Prepararea probei de analizat: ntr-un balon cotat de 10 ml se introduc 2 ml soluie
extractiv, 1 ml soluie acid clorhidric 0,5 N, 1 ml reactiv Arnow, 1 ml soluie hidroxid
de sodiu 10%. Se campleteaz la volum cu ap.
- Prepararea probei-martor: ntr-o eprubet se introduce 2 ml soluie extractiv, 1 ml
soluie de acid clorhidric 0,5 N, 1 ml soluie hidroxid de sodiu 10%. Se campleteaz la
volum cu ap.
Se citete absorbana probei de analizat, fa de proba-martor, la lungimea de unda de 510
nm.
Coninutul n ODP-uri corespunztor la 100 ml soluie se calculeaz conform formulei:



Unde: c% = coninutul de ODP-uri al soluiei
E
p
= absorbia probei
E
et
= absorbia soluiei de acid cafeic, de concentraie C
et
din curba etalon (tabel III)
C
et
= concentraia soluiei de acid cafeic, rezultat din curba etalon (tabel III)
C
p
= (m
p.v.
-u%):50 *1/10;
u%= umiditatea produsului vegetal



24


Rezultate :
a) Calendula flos :
n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
E
p
= 0,352 de unde
rezult c se va alege
E
et
= 0,385, astfel se
determin i C
et
=
26,72

b) Hyperici herba :
n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
E
p
= 0,893 de unde
rezult c se va alege
E
et
= 0,963, astfel se
determin i C
et
=
55,80

c) Symphytum radix
n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
E
p
= 0,207, de unde
rezult c se va alege
E
et
= 0,193, astfel se
determin i C
et
=
13,36.

c% = 0,617 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100
ml

c% =1,388725 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100
ml

c% = 0,306 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100
ml


Concluzie : n soluia apoas extractiv se gseste o cantitate destul de mare de acizi
polifenolcarboxilici.












Fig. 30. Dozarea ODP-urilor
a- martor; b-prob de analizat
a. b.
25
































g acid cafeic/ mL Absorbanta
13,36 0,193
26,72 0,385
40,08 0,578
53,44 0,762
55,80 0,963
Tabelul II: variaia extincei n funcie
de concentrarea soluiei de acid cafeic
26


2.5. Determinarea cantitativ a flavonelor

Determinarea cantitativ a flavonelor se realizeaz pe o soluie extractiv apoas,
conform productorului.
Tehnica de lucru:
- Prepararea probei de analizat: ntr-un balon cotat de 10 ml se introduce 1 ml soluie
extractiv i 1 ml soluie clorur de aluminiu 25 g/l. Se completeaz la volum cu ap.
- Prepararea probei-martor : ntr-un balon cotat de 10 ml se introduce 1 ml soluie
extractiv. Se completeaz la volum cu ap.
Dup 30-45 minute se citete absorbana probei de analizat, fa de proba-martor, la
lungimea de und de 427nm.
Coninutul n flavone corespunztor la 100 ml soluie se calculeaz conform formulei:



Unde: c% = coninutul de flavone al soluiei
E
p
= absorbia probei
E
et
= absorbia soluiei de rutozid, de concentraie C
et
din curba etalon (tabel III)
C
et
= concentraia soluiei de rutozid, rezultat din curba etalon (tabel III)
C
p
= (m
p.v.
-u%):50 *2/10;
u%= umiditatea produsului vegetal


C
et
(g/ml) E
et
1,00 0,137
2,00 0,354
3,00 0,584
4,00 0,799

Tabelul III: Variaia extinciei n funcie
de concentraia soluiei de rutozid
27




Rezultate
a) Calendula flos :
n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
E
p
= 0,310, de unde
rezult c se va alege
E
et
= 0,354, astfel se
determin i C
et
= 2,0

b) Hyperici herba :
n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
E
p
= 0,508, de unde
rezult c se va alege
E
et
= 0,584, astefel se
determin i C
et
= 3,0.

c) Symphytum radix
n urma masurrii
absorbanei probei n
funcie de martor,
E
p
= 0,202, de unde
rezult c se va alege
E
et
= 0,137, astefel se
determin i C
et
= 1,0.

c% = 0,035018 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml
soluie

c% = 0,02213 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml
soluie

c% = 0,01579 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml
soluie

Concluzie : n soluia apoas extractiv se gseste o cantitate destul de mic de flavone.













Fig. 31. Spectrofotometrul cu care s-au
citit absorbanele dozrilor

28






Capitolul 3
Stabilirea formulei de fitopreparat
3.1 Raportul dintre produsele vegetale componente ale fitopreparatului

n urma rezultatelor obinute la determinrile cantitative ale flavonelor i ODP-urilor am stabilit
mpreun cu coordonatorul de proiect urmtorul raport dintre produsele vegetale studiate :





suntoare 5 pri;
glbenele 4 pri;
ttneas 1 parte;









Fig.32 Amestec produse vegetale
conform raportului stabilit
29


3.2 Analiza chimic calitativ a fitopreparatului

Indentificarea compuilor reductori:
Reacia cu reactivul Fehling Identificarea compuilor reductori se realizeaz conform
tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Rezultate: se observ apariia unui precipitat rou-crmiziu
Observaii: n cazul n care reacia este pozitiv, dar se obine o cantitate mic de
precipitat, poate demonstra c infuzia nu conine compui reductori n cantitate foarte mare.

I dentificarea ozelor si poliholozidelor:
- Identificarea ozelor si poliholozidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n
capitolul 2.3

Reacia Molish
Rezultate: rezult un compus colorat n rou-violaceu sau rou-portocaliu
Observaii: n urma reacei s-a format un compus rou-portocaliu, reacia fiind pozitiv.

I dentificarea mucilagiilor:
Identificarea mucilagiilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

Reacia de precipitare n alcool
Rezultate:
Observaii : reacia este slab pozitiv, dup cum se poate observa n Fig. 43.

I dentificarea ODP-urilor:
Identificarea ODP-urilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3



Fig. 39. Reacia Molish
formarea rezidului
Fig. 42. Reacia Molish formarea
30


Rezultate:
Observaii: intensitatea coloraiei este dependent de cantitatea de ODP-uri din produs vegetal
(3). n aceast situaie reaciile sunt pozitive.

I dentificarea proantocianilor :
Identificarea proantocianilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Rezultate : se obine o coloraie , mai intens n mediu de alcool n-butilic (3).
Observaii : n acest caz reacia este pozitiv.

I dentificarea flavonelor:
Formarea fenoxizilor
Identificarea flavonelor prin formarea fenoxizilor se realizeaz conform tehnicii de lucru
prezentate n capitolul 2.3
Rezultate: se observ intensificarea coloraiei galbene.

I dentificarea antocianilor:
Identificarea antocianilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

Reacia virajului de culoare:
Rezultate: nu se observ schimbri:

I dentificarea taninurilor:
Identificarea taninurilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

Reacia cu clorur feric (III)
Rezultate: se obine un precipitat de culoare verde-negricioas.
Observaii: dac n soluia extractiv se gsesc att taninuri catehice ct i galice, aceast
reacie de culoare nu este concludent i se impune separarea acestora (3).

31

I dentificarea saponozidelor:
Identificarea saponozidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Proba de spumefiere
Rezultate: existena unei spume persistente i dupa 15 minute, denot prezena
saponozidelor.
Observaii: proprietile spumefiante, detergente ale saponozidelorlor se explic prin
tensioactivitatea; poliholozidele se comport asemntor, dar spuma nu este persistent (3).

I dentificarea carotenoidelor:
Identificarea carotenoidelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3

Reacia cu reactivul Carr-Price
Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care
vireaz rapid n rou-purpuriu i apoi n rou-brun (4).
Observaii: n cazul acestui preparat reacia este negativ.

I dentificarea alcaloizilor:
Identificarea alcaloizilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n capitolul 2.3
Reacii generale de precipitare

Rezultate: n cazul unei reacii pozitive se formeaz un precipitat (4).
Observaii: n cazul reaciilor cu reactivii Mayer i Bertrand se formeaz precipitate albe
sau alb-glbui, solubile n exces de reactiv; n cazul n care proba are un coninut mic de
alcaloizi, se va observa doar o opalescen, nu un precipitat. Reacia relizat pe proba de analizat
este pozitiv.






32



Nr.
Crt.
Principiul activ
cutat
Reacia chimic
realizat
Rezultat Observaii
1 Compui reductori
Reacia cu reactiv
Fehling
Pozitiv (+)
Precipitat
rou-crmiziu
2 Oze Reacia Molish Pozitiv (+)
Compus
rou-portocaliu
3 Mucilagii
Reacia de precipitare
n alcool
Pozitiv (+) Precipitat voluminos
4 ODP-uri
Reacia cu reactivul
Arnow
Pozitiv (+) Compus rou
5 Proantociani Reacia Bath-Smith Pozitiv (+)
Coloraie mai intens
dect a martorului
6

Flavone

Formarea fenoxizilor

Pozitiv (+)
Intensificarea coloraiei
galbene

7 Antociani
Reacia de viraj de
culoare
Negativ (-)
8 Taninuri Reacia cu FeCl
3
Pozitiv (+)
Coloraie
verde-negricioas
(tanin catehic)
9 Saponozide Proba de spumefiere Pozitiv (+)
Strat de spum
persistent 15 min
(>1cm)
10

Carotenoide

Reacia cu reactiv
Carr-Price

Negativ (-) Coloraie albastr
11 Alcaloizi
Reacii generale de
precipitare
Pozitiv (+)
Precipitat
alb/alb-galbui


Tabel IV rezultate analiz chimic
calitativ pe produse vegetale
33

3.3 Determinarea cantitativ a flavonelor din fitopreparat

Determinarea cantitativ a flavonelor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n
capitolul 2.5
Se obin urmtoarele rezultate :
n urma masurrii absorbanei probei n funcie de martor, E
p
= 0,503, de unde rezult c
se va alege E
et
= 0,0,584, astfel se determin i C
et
= 3,0=> c% = 0,02583 g flavone,
exprimate n rutozid / 100 ml soluie






3.4 Determinarea cantitativ a APFC-urilor din fitopreparat

Determinarea cantitativ a APFC-urilor se realizeaz conform tehnicii de lucru prezentate n
capitolul 2.4
Se obin urmtoarele rezultate :
n urma masurrii absorbanei probei n funcie de martor, E
p
= 0,130, de unde rezult c
se va alege E
et
= 0,193, astfel se determin i C
et
= 13,36=> c% = 0,08998 g ODP-uri,
exprimate n acid cafeic / 100 ml






34


Capitolul 4
Corelaii ntre principiile active identificate i potenialele efecte terapeutice
induse

Fitopreparatul obinut prin amestecarea celor trei produse vegetale conine
urmtoarele principii active: compui reductori, oze, mucilagii, ODP-uri, proantociani,
flavone, antociani, taninuri, saponozide, alcaloizi.
Astfel, fitopreparatul poate avea urmtoarele aciuni:
Antibacterian prin saponozide, flavone, tanin
Coleretic prin Apfc-uri
Mucoprotectoare prin mucilagii;
Antispastic prin flavone
Capilaroprotectoare prin flavone;
Antioxidant prin flavone;
Cicatrizant prin flavone, carotenoide, tanin;
Antiinflamatoare prin acizi polifenolici;
Astringent, antimicrobian prin tanin.
innd cont i de raportul n care cele trei produse vegetale au fost combinate, putem afirma
faptul c este posibil ca unele efecte terapeutice s predomine.Suntoarea i florile de glbenele,
predominnd in fitopreparat, contribuie prin flavone, tanin la aciunea cicatrizant, prin mucilagii
la aciunea mucoprotectoare, prin saponozide la aciunea antibacterian,iar ttneasa prin
poliholozide i alantoin la aciunea antiulceroas





35




Capitolul 5
Concluzii

Fitopreparatul, obinut prin amestecarea a cinci pri de suntoare, patru pri de
glbenele si o parte de ttneas, poate fi folosit cu succes drept adjuvant n terapia afeciunilor
gastro-intestinale precum: ulcer gastric, gastrit cronic, esofagit de reflux.Dar, innd cont i de
principiile active identificate i de corelaia lor cu efectele terapeutice, recomand acest
fitopreparat drept adjuvant in tratamentul ulcerului gastric.



















36





Bibliografie


1. https://www.google.ro/search?q=ceai+de+galbenele+stef+mar&tbm=isch&emsg=NCSR
&noj=1&ei=_Fx1U5viB8aVO-
ThgJgB#facrc=_&imgdii=_&imgrc=J1a_ueV4YxAfhM%253A%3BpJ5fVEsO4WdQoM%3Bhtt
p%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fcs-
photos%252Fproducts%252Foriginal%252Fceai-galbenele-flori-
50gr_2308_1_1337346601.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.leacul.ro%252Fproduse-
naturale%252Fceai%252Fceai-vrac%252Fceai-galbenele-flori-50gr-stefmar-
1032.html%3B1000%3B1500
2. https://www.google.ro/search?noj=1&tbm=isch&sa=1&q=ceai+de+sunatoare+stefmar&o
q=ceai+de+sunatoare+stefmar&gs_l=img.3...35965.35965.0.36450.1.1.0.0.0.0.88.88.1.1.0....0...1
c.1.43.img..1.0.0.c4w7MQIqXQk#facrc=_&imgdii=_&imgrc=3ZNb9QXnJjOksM%253A%3BA
1J9woaXrmFXZM%3Bhttp%253A%252F%252Fnature.costu.ro%252Fimage%252Fcache%252
Fdata%252Fstefmar%252FUNIVERSALA-MEDIE-
500x500.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fnature.costu.ro%252Findex.php%253Froute%253Dp
roduct%252Fproduct%2526path%253D63%2526product_id%253D254%3B500%3B500
3. Grd C.E., Duu L.E., Popescu M.L., Tudor I., Iordache A.T., Costea T. Bazele
teoretice i practice ale analizei farmacognostice, vol. I, Ed. Curtea Veche,Bucureti, 2008, p.
4. Grd C.E., Duu L.E., Popescu M.L., Costea T., Iordache A.T., Tudor I. Bazele
teoretice i practice ale analizeifarmacognostice, vol. II, Ed. Curtea Veche, Bucureti, 2008, p.
37