Pós-graduação em Ciência dos Alimentos - UFLA

Biotecnologia das Fermentações – Prof. Rosane / Prof. Carla

Aluno - Alex Uzêda de Magalhães
 Metodologia de superfície de resposta para a
otimização do meio de fermentação da alfa-
galactosidase em fermentaçao em meio sólido.

C.Q. Liu, Q.H. Chen, B. Tang, H. Ruan and G.Q. He

Department of Food Science and Nutrition, Zhejiang

University, Hangzhou 310029, China
 Introdução
• Alfa-galactose é usada para
hidrolisar a series de oligosacarideos
rafinose, responsável pela flatulência
no consumo de soja.
• Objetivo do estudo foi desenvolver
um meio de cultura para a produção
de alfa-galactosidase por cepas
mutantes de Aspergillus foetidus.
 Materiais e Métodos
• Aspergillus foetidus ZU-G1
– isolado,
– Identificado (Wei, 1979)
– Raios gama de 60Co para mutação (alta
produção de alfa-galactosidase
– Preservado em coleção
– Crescimento em meio PDA
 Materiais e Métodos
• Meio de fermentação tradicional
– Farelo de trigo (83,21%)
– Farinha de soja (16,64%)
– FeSO4.7H2O (0,05%)
– K2HPO4 (0,1%)
– Água destilada (60% de umidade).
 Materiais e Métodos
• Desenho experimental
– Primeiramente foi identificado o nutriente
preferencial (fonte de carbono, fonte de
nitrogênio e elementos essenciais).
– Fractional factorial design (FFD) foi o desenho
experimental primeiramente utilizado.
– Varia-se um fator, mantendo os outros
constantes.
 Materiais e Métodos
– Em um segundo momento, focou-se no
componente mais importante.
– Depois focou-se no subconjunto crítico
do meio
– Central composite experimental design
(CCD) foi adotado para otimizar os
componentes críticos e maximizar a
produção.
 Materiais e Métodos
• FFD
– 26-2 FFD levando a 16 (24 ao invés de 26 )
experimentos em duplicata
– 2 – número de níveis de cada fator
– 6 – número de fatores

– 2 – fração do fatorial completo

 Materiais e Métodos
• FDD (codificação pela equação)
– xi = (Xi – X0)/∆ X dd
– xi - Valor codificado de uma variável
independente
– Xi - Valor real da variável independente
– X0 - Valor real da variável independente
no ponto central
– ∆ X - Grau de variação dos valores
Materiais e Métodos
 Materiais e Métodos
• CCD (modelo proposto de cinco níveis)

– y – variável de resposta
– B0, bi, bii, bij são coeficientes variáveis de regressão
– xi e xj são variáveis dependentes

– Dados foram analisados pelo programa RSREG

Resultados

- +
Resultados

+
-
 Resultados

+ + +
Resultados
Resultados
Resultados
 Resultados
• O modelo encontrou a seguinte
proporção do meio para otimizar a
produção de alfa-galactosidase:
– 8,2137g de farelo de trigo, 1,7843g de
farinha de soja, 0,001g de MnSO4.H2O,
0,001g de CuSO4.5H2O em 10g de
matéria seca.
– Atividade de 2210,76 U/g após 96h
 Discussão
• A metodologia de superfície de
contato provou ser um ferramenta
valorosa na otimização de meios de
cultura.
Resultados