Un dia a la facultat de biològiques

Pràctiques:

Una visita al cromosoma:

sexe i mutació

Cromatina sexual

Cromosomes politènics
 INTRODUCCIÓ
L’ADN resideix al nucli associat a histones, cosa que li permet empaquetar-se
millor, i es troba també en forma de cromosomes que són visibles durant la
divisió cel·lular. Durant la fase de repòs els cromosomes es troben
desenrotllats en forma de cromatina. Aquesta està formada per ADN i
proteïnes.
La cromatina es pot trobar de dues formes:
Heterocromatina: és una forma inactiva condensada, localitzada sobretot a la
perifèria del nucli, que es tenyeix fortament amb les coloracions. Aquesta pot
ser de dos tipus diferents: la constitutiva, idèntica per a totes les cèl·lules de
l’organisme i que no té informació genètica, i la facultativa, diferent als
distints tipus cel·lulars i que conté informació sobre tots aquells gens que no
s’expressen.
Eucromatina: disseminada per la resta del nucli i no visible amb el microscopi.
Representa la forma activa de la cromatina, la qual es transcriu de l’ADN a
molècules d’ARNm.
Com molts sabeu, les femelles tenen el doble d’informació
genètica que els homes en el cromosoma X,ja que elles
disposen de dos còpies (XX) mentre que els homes (XY) només
en tenen un de cromosoma X. Així, a les dones  un cromosoma
X és inactivat a l’atzar per compensar la dosi gènica entre els
dos sexes.
Per tant, el corpuscle de Barr és la massa condensada de
cromatina sexual al nucli de les cèl·lules somàtiques de les
femelles, el qual representa el cromosoma X inactiu de la
replicació tardana.
 A l’esquerra podem observar un exemplar
mascle i a la dreta una femella. Les diferents
formes i seqüències de gens en cada parell de
cromosomes es coneix com l’al·lel. En
aquest cas, cada al·lel determinarà
un color diferent als gats, i, com
Corpuscle de Barr podem observar el gat de
l’esquerra només presenta un únic
color degut a que sols poden tenir
un pigment codificat pel gen X,
cosa que a les femelles no ocorre,
al tenir el doble d’informació, la
pigmentació serà doble.
El material necessari per
dur a terme la pràctica és
el següent: un microscopi
òptic, una lupa binocular,
paper de filtre, una bata,
guants, portaobjectes,
cobreobjectes, espàtula
de fusta per extraure una
mostra de mucosa de la
boca, aigua destil·lada,
solució de NaCl 0’6 % i
orceïna aceto-làctica per
tenyir de color roig les
mostres.
• Identificar la cromatina X o corpuscle
de Barr en cèl·lules de mucosa bucal.
• Procés de diferenciació sexual.
• Aprendre a utilitzar material corrent
de laboratori.
 Rentar la boca amb aigua per eliminar bacteris i saliva.
 Extraure amb l’espàtula de fusta cél·lules de mucosa raspant amb el
bastó la part interna de la galta.
 Posar sobre un portaobjectes una gota d’aigua destil·lada i dipositar
les cél·lules bucals tot desfent la mostra amb l’aigua.
 Posar una gota de colorant i deixar actuar de 10 a 20 minuts, acte
seguit, posar el cobreobjectes.
 Pressionar amb l’ajuda d’un paper la mostra per eliminar els excessos
de colorant.
 Observar la mostra amb els diferents augments, des del roig (40
augments) fins el blau (650 augments)
 Per poder veure la mostra als 1000 augments haurem de posar una
gota de NaCl 0’6 % per no ratllar l’objectiu.
 Corpuscle de Barr

Foto on s’observa (encara que amb

dificultat) el corpuscle de Barr en
les cèl·lules de la nostra companya
de classe Helena Calomarde.
Fotografia de cèl·lules salivals de
la meua boca.
 INTRODUCCIÓ

Les glàndul·les salivals i altres teixits blans dels dípters tenen

nuclis en interfase contínua. Durant el creixement i
desenvolupament de les larves la divisió cel·lular no ocorre en
certs teixits, però les cèl·lules, al seu torn, continuen el seu
creixement incrementant el seu tamany. Els cromosomes
pateixen unes duplicacions consecutives i repetitives que,
altrament, no produeix una separació als mateixos; parlem del
procés d’endomitosi. Llavors es forma un feix cromatínic on els
cromosomes incrementen el seu tamany i la seua amplària. A
continuació analitzarem aquest procés en cèl·lules de les
glàndul·les salivals de la drosophila, i podrem observar
cromosomes gegants, 100 vegades més grans que els de la resta
del cos, anomenats cromosomes politènics.
El cicle complet té una
duració d’uns 9 dies (214
hores). Durant els cinc
primers dies després de
la posta d’ous tenen lloc
els 3 estats larvaris, els
següents 3 o 4 dies
restants fins el dia 9 té
lloc la maduració de la
pupa, i finalment el nové
dia emergeix l’adult.
 Identificar els cromosomes politènics de les
larves de la mosca de la fruita (drosophila
melanogaster).
 Aprendre a disseccionar una larva de l’insecte i
conèixer la seua anatomia.
 Aprendre a utilitzar material corrent de
laboratori.
Hem utilitzat un
microscopi òptic, una
lupa binocular,
portaobjectes,
cobreobjectes, orceína
aceto-làctica per tenyir
de color la mostra,
pinces de dissecció per
poder extraure les
gándul·les de la larva,
NaCl 0,6% , paper de
filtre, guants i una bata.
• Prendre una o dues larves de drosophila i colocar-les al portaobjectes.
• Amb el comptagotes, posar 1 gota de NaCl 0,6% sobre la larva.
• A continuació, amb l’ajuda de la lupa binocular i les pinces de dissecció comencem
el procés “d’atac” a la larva.
• Prenem la larva per la part de darrere amb unes pinces i el cap amb unes pinces
de disseció.
• Extraiem les glàndul·les.
• Posem una gota de colorant (orceína) sobre la mostra i hi posem el
cobreobjectes.
• Deixem reposar la mostra uns 20 minuts i acte seguit eliminem l’excés de
colorant amb l’ajuda del paper de filtre i xafant la mostra amb força.
• Vegem la mostra amb els diferents augments.
 A La primera fotografia podem observar dues larves
vistes amb l’ajuda de l’ordinador i del microscopi.
La segona foto mostra les glàndul·les extretes d’una de les larves.
 Cromosomes
Politènics de les larves
D’Alejandro Ruiz

Fotografia on s’observa la meua larva

tenyida amb orceína
 La pràctica va ser tot un èxit, a tots ens van
agradar molt les noves experiències realitzades,
esperem tornar prompte.