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Manual de prácticas
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PRACTICA No. 1
Determinación de Hemoglobina
Generalidades:
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Cuando la hemoglobina está unida al oxígeno, se denomina
oxihemoglobina o hemoglobina oxigenada, dando el aspecto rojo o
escarlata intenso característico de la sangre arterial. Cuando pierde el
oxígeno, se denomina hemoglobina reducida, y presenta el color rojo
oscuro o bordó de la sangre venosa (se manifiesta clínicamente por
cianosis).
Materiales utilizados:
Técnica
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-Tener limpio todo el material a usar.
Resultados:
Mediante la fórmula:
Valores de referencia
Neonatos, sangre de cordón: 13.6 - 19.6 g/dl
Niños de 1 año : 11.2 dl
Niños de 10 años : 12.9 g/dl
Hombres : 13.5 - 18.0 g/dl
Mujeres : 12.0 - 16.5 g/dl
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PRACTICA No. 2
Determinación de Hematocrito
Generalidades:
Las cifras normales de hematocrito en personas oscilan entre: Hombres: de 40.7 a 50.3 %
Mujeres: de 36.1 a 44.3 %
Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiológicos, como la edad y
la condición física del sujeto, como también del laboratorio donde se realiza el examen.
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Con los métodos manuales también se cuentan, junto con el volumen
de los hematíes, el de los leucocitos, el de las plaquetas y el del
plasma que queda atrapado entre los hematíes. Por ello, el valor de
HCT conseguido con métodos automáticos es mas exacto y suele ser
1 o 2 unidades mas bajo que el logrado con métodos manuales.
Materiales utilizados:
• Tubos capilares.
Si la muestra es sangre capilar, estos han de estar heparinizados
interiormente; mientras que si la muestra es sangre venosa y ha sido
adecuadamente anticoagulada, pueden no estar
heparinizados. Los heparinizados tienen una
franja roja en uno de sus extremos.
• Plastilina.
• Algodón o gasas.
Procedimiento:
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2°. Llenar cada tubo capilar con la sangre, hasta las 3/4 partes de su
longitud. El Llenado se efectúa por capilaridad y se realiza poniendo
en contacto uno de los extremos del tubo capilar con la gota de
sangre, o introduciéndolo en el tubo de sangre e inclinando este,
posteriormente, para facilitar el proceso.
3°. Limpiar el exterior de cada tubo con un trozo de algodón o con una
gasa.
4°. Sellar el extremo de cada tubo por el que ha entrado la sangre con
plastilina. Para ello, se hace penetrar el tubo en la plastilina, o incluso
se atraviesa esta con aquel.
Resultados:
Formula:
Valores de referencia
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Al nacer: 44 - 62 %
Niños de 1 año : 35 % +/- 5
Niños 10 años : 37% +/- 5
Hombres : 40 - 54 %
Mujeres : 36 - 47 %
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PRACTICA No. 3
Recuento Leucocitario
Generalidades:
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aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el
microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados
de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando
un microscopio invertido de contraste de fases.
Material
- Microscopio.
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inmediatamente continúa una dilatación (bulbo) que contiene una
perla que funciona como mezcladora, luego sigue el extremo más
largo de la pipeta (tallo) que está dividida en 10 partes, con 2 marcas:
1 (parte final del bulbo) y 0,5 (a la mitad del tallo). Se le acopla a su
extremo superior 1 tubo de goma y una bombilla para aspirar.
- Papel filtro.
Procedimiento
Lectura
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todos los leucocitos que se encuentren adheridos en la línea horizontal
superior y vertical exterior, o de lo contrario, todos los leucocitos,
adheridos a la línea horizontal inferior y vertical interior.
Valores de Referencia 7 9
Resultado
Nº de leucocitos x mm3 =
Reemplazando =
1/10 x 1/20 x 4
4/200
4/200
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tanto pueden observarse al realizar el recuento leucocitario y
confundirse con los leucocitos, de tal manera que se debe emplear la
Siguiente fórmula:
Cálculo:
Ejemplo:
50
x 16 = 5,3 x 109/l
100 + 50
50
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x 16 000 = 5300 / mm3
100 + 50
PRACTICA No. 4
Generalidades:
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manual o automáticamente. Lo último se realiza mediante un aparato
(spinner) que centrifuga rápidamente el porta con la sangre
depositada en su centro. Con este aparato se obtienen unos frotis que
presentan una distribución celular muy homogénea.
1.1. CABEZA.
1.2. CUERPO.
1.3. COLA.
1.4. BORDES.
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Materiales utiliza
Porta tubos
Aguja
Alcohol
Algodón
Compresor
2 Portaobjetos
Guantes
Pipeta Pasteur
Procedimiento:
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Si se pincha mal, sacar el compresor, la aguja y volver a intentarlo.
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Zona excesivamente gruesa: Se halla en la región inmediata
al punto departida de la extensión (cabeza). En ella se aprecia siempre
un aumento delinfocitos.
COLORACIONES USADAS
Una vez seco el frotis, se procede a la tinción hematológica con el
colorante de
Romanowsky, constituido por la mezcla de eosina y azul de metileno.
Dentro
de éstas tenemos:
1.0 Colorante de Giemsa.
1.2 Colorante de May-Grunwald.
1.3 Colorante de Wright.
1.4 Colorante de Leishman.
Resultados:
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• La tinción no es excesivamente rosada o azulada
• Tiene ausencia de precipitados
• Se diferencian bien las estructuras subcelulares en los leucocitos.
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PRACTICA No. 5
Recuento Diferencial
Generalidades:
Es una de las partes más importantes del cuadro hemático, se coloca una
gota de sangre anticoagulada en una lámina que debe ser
preferiblemente nueva o en su defecto láminas completamente
desengrasadas y con una lámina (Extensora) en un ángulo de 30 - 45
grados sobre la primera de forma tal que la sangre se extienda por
capilaridad a lo largo del ángulo agudo formado por dos láminas y se
deja secar.
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El extendido de sangre debe hacerse máximo una hora después de que
se tome la muestra.
Material:
-Colorante de Wright
-buffer
- aceite de inmersión
Procedimiento
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Procedimiento
Una vez obtenido el frotis sanguíneo, se le dejará secar entre 15 y
20minutos.
Luego se coloca la preparación en un soporte y se cubre con el colorante
de Wright, dejándolo por espacio de 5 minutos.
Posteriormente se añade solución amortiguada tamponada en partes
iguales hasta obtener un brillo metálico, dejando 6 minutos adicionales.
Finalmente se lava con agua corriente y se deja secar.
Se coloca en el microscopio y, con pequeño aumento, se revisa la calidad
de la coloración, la cantidad aproximada de glóbulos blancos y se escoge
el sitio para iniciar el recuento. Se coloca una gota de aceite de
inmersión y se enfoca a un aumento de 100x
La forma de los glóbulos rojos se examinará detenidamente observando
además del color (cantidad de hemoglobina), presencia de plaquetas, su
agrupación y distribución.
Valores de referencia:
Neutrofilos: 45 – 65 %
Monocitos: 10 – 15 %
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Eosinofilos: 0 – 1 %
Basofilos: 0 – 1 %
Linfocitos: 10 – 20 %
PRACTICA No. 6
Generalidades:
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La velocidad de sedimentación es un examen hematológico que no está
incluido en el desarrollo de un hemograma; sin embargo, es una prueba
muy importante por su gran sensibilidad, pues resulta normal en las
enfermedades funcionales, así como en los procesos inactivos o
estrictamente locales.
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Enfermedades agudas: la VSG cambia entre 6 y 24 hrs después de que
se eleva la temperatura y
existe leucocitosis, y así alcanza su máximo valor días después.
Convalecencia: el aumento de la sedimentación tiene a persistir
durante más tiempo que la
hipernatremia o la leucocitosis.
Apendicitis aguda no perforada (primera etapas):
· Incluso si es supurativa o gangrenosa, la velocidad de sedimentación
normal, pero si existe
absceso o peritonitis, la velocidad de sedimentación aumenta
rápidamente.
Trastornos musculosqueleticos.
· En artritis reumatoide, gonorreica y gotosa la velocidad de
sedimentación aumenta sobremanera.
· En osteoartritis, la velocidad de sedimentación aumenta ligeramente.
· En la neuritis, miositis y lumbalgia, la VSG se encuentra dentro de los
límites normales.
Problemas vasculares:
· Infarto al miocardio la VSG aumenta.
· En al agina de pecho, la VSG no aumenta.
Cáncer:
· En el mieloma múltiple, linfoma o cáncer metastático, la VSG es muy
elevada.
Sin embargo, existe poco correlación entre el grado de aumento de La
VSG y el pronostico en cualquier caso.
· Infecciones virales no complicadas y mononucleosis infecciosa.
· Insuficiencia renal activa con insuficiencia cardiaca.
· Alergia activa.
· Ulcera péptica.
Aviso clínico:
· La velocidad de sedimentación globular aumenta exageradamente en el
linfocarcinoma maligno
de colon y mama, mieloma y artritis reumatoide.
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5.1 MÉTODO DE WINTROBE
Materiales requeridos:
-pipeta pasteur
Procedimiento:
Resultados
Valores de referencia:
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Hombres menores de 50 años: 0 – 15 mm/hora
Material
-Tubos de Westergren.
-pipeta pasteu
Procedimiento
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Resultados
Valores de referencia
Hombres : 1 - 10 mm de altura/hora
Mujeres : 3 - 14 mm de altura/hora
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Bibliografía:
http://www.scribd.com/doc/6657469/HEMOGLOBINA1
http://es.wikipedia.org/wiki/Hematocrito
http://es.wikipedia.org/wiki/Hemoglobina
http://www.scribd.com/doc/9246458/hemogramafrotis07b
http://www.scribd.com/doc/14386436/camara-de-neubaber
http://www.scribd.com/doc/16034154/Frotis-Sanguineo
http://www.blogmedicina.com/2007/12/26/recuento-diferencial-de-
leucocitos-en-sangre/
http://www.scribd.com/doc/7374401/HEMATOLOGIA
http://es.wikipedia.org/wiki/Velocidad_de_sedimentaci%C3%B3n_globular
http://www.scribd.com/doc/8489784/Velocidad-de-Sedimentacion-
Globular
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