Controlo da transcrio em eucariotas:

Trs nveis de regulao

Interferncia com o complexo de iniciao da transcrio
Regulao da estrutura da cromatina
Modulao dos nveis e da actividade dos activadores e dos
repressores da transcrio
Promotor eucariota
Transcrio pela RNA polimerase II eucariota
TBP: TATA-binding protein
TAF: TBP-associated factor
TBP
TAF
TAF
RNA
polimerase
TBP
TFIIB
TFIIF
TFIIE
TFIIB: ponte com a RNA polimerase
TFIIH: actividade de helicase e de cinase
TAF
TFIIH
+1:RNA
Elementos
reguladores
TAF
RNA
polimerase
TBP
TFIIB
TFIIF
TFIIE
TAF
TFIIH
+1:RNA
Elementos
reguladores
Controlo da transcrio em eucariotas:
Interferncia com o complexo de iniciao da transcrio
TAF
RNA
polimerase
TBP
TFIIB
TFIIF
TFIIE
TAF
TFIIH
Factor de
transcrio
regulador
Estrutura modular dos factores de transcrio
Helix-turn-helix
Zinc fingers
Domnios ligadores de DNA
Helix-turn-helix
Zinc fingers
Leucine zipper Helix-loop-helix
Zinc fingers
Cys-S
Cys-S
N-His
N-His
Zn
2+
C
2
H
2
Zinc fingers
Regio consenso: Tyr/Phe-X-Cys-X
2-4
-Cys-X
3
-Phe/Tyr-X
5
-Leu-X
2
-His-X
2-4
-His
No motivo exclusivo de ligao ao DNA
Leucine zipper
Dimerizao por resduos de Leu no
terminal carboxlico
Hlices que interagem com o DNA tm
aminocidos bsicos, carregados
positivamente
Leucine zipper
Outros factores de transcrio tm
domnios semelhantes, com outros
aminocidos hidrofbicos que no a Leu
(protenas basic Zip)
Homo- ou heterodmeros
Exemplos: Jun, Fos
Electrophoretic mobility shift assay (EMSA)
Sonda de DNA marcada
Incubao com extracto
nuclear de clulas
Sonda livre
Complexo DNA-protena
Controlo da transcrio em eucariotas:
Regulao da estrutura da cromatina
Acetilao de histonas
N-terminal
HAT
Ac Ac
Ac
Ac Ac
ARTKQTARKSTGGKAPRKQALTKAA
NH
|
CO
|
CH
3
Lisina (K)
Lisina acetilada
+
HDAC
HAT: Histone Acetyltransferase
HDAC: Histone Deacetylase
HAT
HDAC
Histonas acetiladas
Cromatina activa
Histonas desacetiladas
Cromatina inactiva
Metilao de DNA
-CH
3
5-metil-citosina
Citosina
Metilao de C em sequncias CG

Ligao da protena MeCP2 ao DNA metilado

Rerutamento de Desacetilases de Histonas (HDACs)

Inibio da transcrio
Controlo da transcrio em eucariotas:
Modulao dos nveis e da actividade dos activadores e dos
repressores da transcrio repressores da transcrio