Citometria de Fluxo

Zilton Vasconcelos
Fiocruz
INCa
Lmina
LASER
Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation
Ou seja,
Amplificao da luz por emisso estimulada
de radiao
Propriedades do Laser:
feixe de ftons
monocromtico
coerente
colimado
Fluorescncia
FITC
PE
Tipos de marcaes
Anticorpos monoclonais;
Sondas fluorescentes;
Beads fluorescentes;
Tipos de marcaes
Anticorpos monoclonais;
Sondas fluorescentes;
Beads fluorescentes;
Anticorpos monoclonais
Superfcie
Intracelular
EPICS ALTRA FACSCalibur
MoFlow FACSAria
Citometria de Fluxo
Exemplos de Equipamentos e Fluorocromos associados
Cmara de fluxo (Flow Cell)
FSC e SSC
(SSC)
(FSC)
Cmara de fluxo (Flow Cell)
Fluorescncia
Tipos de grficos
Gates
FSC
S
S
C
CD3 - FITC
C
D
4

-
P
E
CD3 - FITC
C
D
4

-
P
E
FSC
S
S
C
Quantificao de CD4 e CD8
FSC
S
S
C
CD3 PerCP
C
D
4

F
I
T
C
CD3 PerCP
C
D
8

F
I
T
C
Quantificao de Clulas Tronco Hematopoticas (CD34)
CD45 CD34
S
S
C








CD45
C
D
3
4
FSC
S
S
C
Tubo CD34 Tubo Controle
S
S
C








CD45 CD34
S
S
C








CD45
C
D
3
4
FSC
S
S
C
S
S
C








Linfoma Folicular T-LGL
Diagnstico de Hemopatias Malignas
Citocinas Intracelulares
Tipos de marcaes
Anticorpos monoclonais;
Sondas fluorescentes;
Beads fluorescentes;
Proliferao celular
v
Teste de exploso oxidativa
DHR 123
Indivduo normal
Paciente DGC
Me carreadora
Tipos de marcaes
Anticorpos monoclonais;
Sondas fluorescentes;
Beads fluorescentes;
Dosagem multiparamtrica
Concentrao
Sorting
Flow Imaging
Citometria Spectral