The importance of analytical chemistry is

not arguable.
Three things in life are certain: death, taxes,
and the need for analytical chemistry

Peter Kissinger.
Analytical Chemistry,73(3):55A, 2001.
Analise Instrumental I
Sistemas de Anlise em Fluxo
FIA
Anlise quantitativa
amostra
adio de
reagente
branco
amostra
solues de referncia
c
1
c
3
c
4
c
2
c
x
!

c
2
desenvolvimento
da reao ("t)
Anlise quantitativa
2Fe
3+
+ C
6
H
8
O
6
#2Fe
2+
+ C
6
H
6
O
6
+ 2H
+
Fe
2+
+ 3 phen # [Fe(phen)
3
]
2+ N
N
phen =
10 mg L
-1
branco

5 mg L
-1
Histrico
1957 ! Analisador de fluxo contnuo segmentado por ar

- Skeggs, L.T.; Automatic method for colorimetric analysis.
Amer.J.Clin. Pathol., 38 (1957) 311.

I was worried about the quality of the results. I put unknows
into every batch of analyses and found frequent, very bad errors.
There were just too many manual operations. I dreamed of a
machine that would do analyses without error.
One day, It suddenly occurred to me that analyses could be done in a
continously flowing stream rather than in batchwise or discreetly.

- Skeggs, L.T.; Pesistenceand prayer: From the artificial kidney to the
autoanalyzer. Clin. Chem., 46 (2000) 1425.

Anlise em fluxo contnuo (segmentado)
desborbulhador
ar
A
R
espectrofotmetro
descarte
" comercializao: Autoanalyzer (Technicon)

Anlise por Injeo em Fluxo - Princpio
C
D
A
D

insero de amostra

t
s
i
n
a
l

h
Det
R

Apparatus in which FIA begun, the
Technical University of Denmark, spring
1974. 1-peristaltic pump; 2-Air Gap
electrode 3-Potentiometer (Radiometer,
Copenhagen ). 4-Recorder (Radiometer
Copenhagen). Reagent bottl es wi th
ammonium chloride, water and sodium
hydroxide. Flowrate 14mL/min, injected
volume 1mL.
1
2
3
4
Single reagent
Two reagents, confluence point
sliding-bar injector
fixed bars
movable
bar
rubber strip

Tygon tube
sample loop
inner hole
Injetor proporcional - Instrumentao
Anlise por Injeo em Fluxo - Componentes

# # $ $
Outros detectores...
Anlise por Injeo em Fluxo (FIA) - Princpios
No necessrio atingir o equilbrio
mistura amostra e reagente ! altamente controlada
! reprodutiva
Definies

B. Kalberg: - FIA is a tool to perform chemistry
- Flow injection analysis is the art of controlling sample
dispersion in a narrow tube

M. Valcrcel : - An available tool for solving analytical problems
M.D.Luque de Castro

B.F. Reis: - Processo de automatizao de procedimentos analticos, no qual
a amostra introduzida em um fluido carregador que a transporta
em direo ao detector

J.Ruzicka: - A tool for serial assay
E.H.Hansen - A link between chemistry and instruments
- A means of enhancing detector performance
- An analytical technique based on microfluidic manipulation of
samples and regents


$ = 480 nm
Configurao em Linha nica
J. Ruzicka, E. H. Hansen, H. Mosbaek, F. J. Krug,
Anal. Chem., 49 (12), 1858, 1977.
Hg(SCN)
2
(aq) + 2Cl
-
% HgCl
2
(aq) + 2SCN
-

Fe
3+
+ 2SCN
-
% Fe(SCN)
2+
Sistema em
linha nica
interessante quando no
ocorre reao qumica
!
Pico duplo
%
injeo de volume
grande
Configurao em confluncia
C

I
A
B
W D
L
S L

Amostragem

R
x
B
W
D
A
C

R
Configurao em confluncia
I
L

C

A
B
W D
Insero
B
W
D
A
C

R

R
x
" &
$
q
1
q
2

q
1
+ q
2

Sistema em confluncia
Zonas coalescentes
C
1
I
A
x
B
W
D
R
L
S
C
2
L
A
L
R
Amostragem
A
x
B
W
D
R
C
1
C
2
Zonas coalescentes

C
1
I
x
A
B
W
D
R
L
A
L
R
C
2
Insero
A
x
B
W
D
R
C
1
C
2
Anlise em fluxo monossegmentado (MSFA)
A
C
L
S

L
1
L
2

ar
" insero da amostra entre bolhas de ar
minimizar disperso longitudinal
evitar intercontaminao entre amostras

Pasquini, C.; Oliveira, W.A.; Monosegmented system for continuous
flow analysis. Spectrophotometric determination of chromium(VI),
ammonia, and phosphorous. Anal. Chem., 57 (1985) 2575.
Anlises por Injeo em Fluxo
' condies de anlise altamente reprodutveis
' baixo consumo de reagentes e amostra
' elevada freqncia de amostragem
' minimizao do envolvimento do analista
' minimizao de contaminaes
' minimizao da produo de resduos
Evoluo dos sistemas FIA
' simplificao dos mdulos de anlises
' implementao de diversos procedimentos
' sem a necessidade de alterao da sua estrutura
fsica
Histrico
1990 !Anlise por injeo sequencial (SIA)
- J. Ruzicka; G.D. Marshall; Sequential injection: a new concept for
chemical sensors, process analysis and laboratory assays.
Anal. Chim.Acta, 237 (1990) 329-343.
&
"
&
&
"
dificuldade de misturas:
volume de alquotas supera um limite
menor sensibilidade
menor frequncia analtica
Evoluo dos sistemas FIA..


Dipositivos empregados para
introduo de amostras e reagentes
Insero de amostras
Seringa hipodrmica
Injetor proporcional
Vlvulas rotatrias
Vlvulas solenides
Comutao
Processo
solidrio
"
#
#
Versatilidade
!
!
Multicomutao
Processos
discretos
#
Injetores - FIA
" Seringa hipodrmica
( Preciso - amostragem
( Vazo - injeo
$ Impedncia hidrodinmica
A
B B
" Vlvula rotatria
"
"
C
A
R
Det
D
D
"
"
C
R
Det
D
D
Amostragem Insero
Det
L
B
D
D
A
C
R
Det
L
B
D
D
A
C
R
Vlvulas rotatrias - 6 vias
Amostragem
Insero
Det C
A
R
D
D
B
L
$
Det C
A
R
D
D
B
L
#
Injetor proporcional
Amostragem
Insero
Comutao Solidria
Comutao Discreta
B
1

B
2
C
1
A

C
2

D


- Reis, B.F.; Gin, M.F.; Zagatto, E.A.G., Lima, J.L.F.C., Lapa, R.A.;
Multicommutation in flow analysis. Part 1. Binary sampling: concepts,
instrumentation and spectrophotometric determination of iron in
plant digests. Anal. Chim. Acta, 293 (1994) 129.
V
D
1
V
2
V
3
V
1
V
2
V
3
C
A
R
Histrico
1994 ! Multicomutao Amostragem binria
Multicomutao
) Dispositivos discretos
- ex: vlvulas solenides
) Mdulos de anlise estrutura ativa
$ Versatilidade
# Consumo de reagentes
# Gerao de resduos
Melhor desempenho analtico
Consumo de reagentes - Determinao de cloreto
Hg(SCN)
2

0
1
2
m
g

/

d
e
t
e
r
m
i
n
a

o

Amostragem
binria
Adio por
confluncia
Procedimentos
em batelada

Anlise por
injeo
seqencial

Hg(SCN)
2
(aq) + 2Cl
-
% HgCl
2
(aq) + 2SCN
-

Fe
3+
+ 2SCN
-
% Fe(SCN)
2+
Consumo de reagentes Determinao de nitrato
0
10
20
m
g

/

d
e
t
e
r
m
i
n
a

o

sulfanilamida NED
0
1
2
m
g

/

d
e
t
e
r
m
i
n
a

o

Amostragem
binria
Adio por
confluncia
Procedimentos
em batelada

Anlise por
injeo
seqencial

NED = n-naftil-etilenodiamina
47,8 Batelada
0,90 Multicomutao
1,60 SIA
0,90 Zonas Coalescentes
2,10 Confluncia
2,40 Linha nica
Consumo de
(NH
4
)
6
Mo
7
O
24
.4H
2
O
(mg/med)
Sistemas de
anlise em fluxo
Consumo de reagente na determinao de fosfato
em diversos sistemas de anlises em fluxo

Sistemas de anlise por injeo em fluxo
* fceis de serem automatizados;
* fceis de controlar no espao e no tempo;
* no h evaporao dos lquidos (sistema fechado)
* so muito versteis:
! os fluxos podem ser misturados, parados,
reiniciados, revertidos, divididos e amostrados;
* possibilidade de anlise simultnea de vrios
analitos;
* * * * * * baixo custo
Aplicaes em
sistema FIA
Theory guides, experiment decides
I.M. Kolthoff
Gostaria de saber se possvel fazer
anlise de N-P-K em fertlizantes?

..Sim, so muitas
..
Eu preciso dos resultados rapidamente
Problema Analtico: ( determ. de N-P-K em fertilizantes
Mtodos Manuais:
+ Dificuldade de manuseio das solues
+ Tempo ! ! ! ! ! ! ,
necessidade do resultado analtico
preciso e exatido analtica
* Anlise por injeo em fluxo (FIA)

+Determinao sequencial de N-P-K
- explorao de separaes fsico-qumicas
- - emprego de mais de um detector

Soluo..
Problema Analtico
DETERMINAO SEQUENCIAL DE N-P-K EM
FERTILIZANTES: REMOO SERIAL DE
ANALITOS EM SISTEMAS FIA
Sequential analyte removal in flow analysis:
determination of nitrogen, phosphorus and
potassium in fertilizers
P.B.Martelli...,
Analytica Chimica Acta, 317 (1995) 239-245

REMOO SERIAL
. NH
4
+
D
1
&

A Membrana difuso gasosa (PTFE)
#
a
a a Eletrodo tubular de membrana polimrica sensvel ao on amnio
+
. K
D
2

&


Membrana dilise C EZEE-MOUNT
#
b
a
Fotmetro de chama
. PO
4
3-
D
3

&


Divisor de fluxos
#
c



Espectrofotometria de absoro molecular
* * M
#
outras determinaes
Difuso gasosa
Fluxo receptor
cido
Fluxo doador
alcalino

Teflon
NH
3
NH
3
NH
3
NH
3
NH
4
+
+ OH
-
NH
3
+ H
2
O

Analytical Chemistry, 60, 2 4, 1988
NH
3
+ H
3
O
+
NH
4
+
+ H
2
O
Sistema FIA para determinao de N-P-K
Anlise de rotina em amostras de fertilizantes
Comparao dos resultados
Caractersticas analticas
/Alta versatilidade
/ Diversos detectores
/ Alta seletividade
/ Resultados concordantes com os mtodos oficiais
/ 225 determinaes por hora (75 amostras)
/ Desvio padro relativo < 3,0 %

amnio fsforo potssio
A B A B A B
3,21(2,3) 3,40(2,7) 15,92(1,5) 16,31(2,5) 18,43(1,7) 17,97(1,6)
5,67(1,4) 5,72(2,4) 6,37(1,9) 6,12(3,5) 4,62(2,3) 4,83(1,8)
4,52(1,5) 4,65(2,4) 19,84(1,5) 19,75(2,2) 6,32(1,9) 6,47(1,7)
3,57(1,5) 3,46(2,7) 1,64(3,1) 1,83(3,8) 7,92(1,9) 7,89(1,8)
5,08(1,4) 4,90(2,4) 4,42(2,2) 4,47(3,0) 2,11(2,5) 2,25(2,1)
2,54(2,6) 2,65(3,4) 2,98(2,4) 2,85(3,5) 3,42(2,3) 3,42(1,8)
2,83(2,6) 2,85(3,4) 1,93(2,8) 1,91(3,5) 9,41(2,0) 9,38(1,7)
4,05(1,3) 4,05(2,5) 17,88(1,6) 18,03(2,5) 5,45(2,3) 4,97(1,8)
A - mtodo proposto B mtodo oficial (batch) ( ) r.s.d
amostra
%(m/m)
1
2
3
4
5
6
7
8

Amostras de interesse ambiental
baixas concentraes
Sistema FIA com pr-concentrao
Det C
A
R
D
D
B
$
Metais pesados
PO
4
3-
, NH
4
+
,
NO
3
-
, SO
4
2-

Resinas: aninica (Bio-Rad, AG1-X8)
catinica (Bio-Rad, AG 50W-X8)
on quelante (Bio-Rad, Chelex 100)
Sistema FIA para
diluio on-line
Amostras com altas
concentraes
50 L
L
2

50 L
L
2

50 L
L
2

Reamostragem
(Zone-Sampling)
W
W
S
W FAAS
C
1
L
1
L
2
B
2
B
1
C
2
A
C
R
1

Det
D
R
2

B
1

B
2

B
3

Automatic multicommutation flow system for wide range
spectrophotometric calcium determination.
Anal.Chim.Acta, 366 (1998) 45-53.
Sistema automtico - diluio
3,3-bis[N,N-bis(carboximetil)aminometil]-o-cresolftalena (CPC)

- reao pH 10,5 tampo:NH
3
/NH
4
+

- 8-hydroxiquinolina: mascarar Mg
2+
- trietanolamina: mascarar Fe
3+
e Al
3+
- amostras: guas, fertlizantes, plantas, rochas calcrias, anticidos

Caractersticas analticas
- Sistema FIA simples e verstil para diluio automtica
- 0,250 1000 mg/L Ca
2+
- Limite de deteco: 7 g/L Ca
2+
(99,7 % confidence level)
- Desvio padro relativo < 0,83 % ( n = 10)
- 60 determinaes por hora
- Consumo de reagentes: - 0,27 g CPC - 0,53 mg 8-hydroxiquinolina - 4,5 mg trietanolamina
Problema analtico:

discriminao cintica


multicomutao FIA

Procedimentos:
divisor de fluxos
variao do percurso analtico
determinao simultnea de Cu e Zn em plantas
Soluo:
mtodos cinticos diferenciais
C
A
D
C
Det
D
R
1
R
2
R
3

B
1
B
2

B
3

B
4

Multicommutation in flow analysis. Part 4. Computer-assisted
splitting for spectrophotometric determination of copper and
zinc in plants. Anal. Chim. Acta, 332 (1996) 173.
Discriminao cintica
D
4-aminoantipirina
C
6
H
5
O
N
N
CH
3
N
CH
3
O
OH

+
O
N
N
CH
3
H
2
N
CH
3
C
6
H
5
[Fe(CN)
6
3-
]
OH
-

Determinao de fenis totais
- Guias de ondas
- Fluoropolmero amorfo (Teflon AF-2400
R
)
- Empregados para construo de celas com caminho
ptico de at 500 cm

(aumento da sensibilidade aumento do
caminho ptico da cela de medida)
Determinao de fenis totais
C
A
V
1

V
2

R
1

R
2

D
80 cm
W
V
5

V
3

V
4

W
Determinao de fenis totais
0
0,2
0,4
0,6
0 2 6 4
t (min)
A
t (min)
100 g L
-1
1000 g L
-1
100 g L
-1
b = 1 cm

b = 100 cm

"
* Determinaes sequenciais
* Sistemas polivalentes
* Sistemas auto-otimizveis
* Sistemas automticos
* Titulaes por procura binria
* Diluies controladas
* 000 * 000 * 000 * 000
Multicomutao - aplicaes
C
A
V
1

V
2

R
1

R
2

D
80 cm
W
V
5

V
3

V
4

W
bombeamento
Det
B
D
C
A
R
Aspirao amostragem binria
Multicomutao
' Mono-canal
' Fcil de operar e controlar
' Alta versatilidade
1 Presso negativa
1 Baixa vazo
Modo: aspirao
Modo: bombeamento
' Vrios canais de bombeamento
' Presso positiva
' Vazo alta
1 Soluo re-circulando
1 Versatilidade limitada
Presso positiva
Controle e operao individual
Custo operacional baixo
Tamanho pequeno e altamente porttil
Especfico para cada soluo
Fcil de re-configurar o diagrama
Diagrama altamente verstil
Searching for a propelling device
Multicomutao
Caractersticas e objetivos:
Histrico
2002 ! Mini-bombas solenides
- Lapa, R.A.S.; Lima, J.L.F.C.; Reis, B.F.; Santos, J.L.M.; Zagatto, E.A.G.;
Multi-pumping in flow analysis: concepts, instrumentation,
potentialites. Anal.Chim.Acta, 466 (2002) 125.

D
P
1

P
2

P
3

S
C
R
1

P
4

P
5

X
Y
W
UV
B
determinao de nitrito
degradao do resduo
Fe
2+
H
2
O
2

Determinao de nitrito
Fe
2+
+ H
2
O
2
Fe
3+
+ OH + OH
-
Proposto FIA
Batelada
0
10
20
30
40
50
efluente
0
5
10
15
20
sulfanilamida
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
NED
m
g

/

d
e
t
e
r
m
i
n
a

o

m
L

/

d
e
t
e
r
m
i
n
a

o

Consumo de reagentes e volume de efluentes
D
P
1

P
2

P
3

S
C
R
1

P
4

P
5

X
Y
W
UV
B
determinao de nitrito
degradao do resduo
Fe
2+
H
2
O
2

Determinao de nitrito
87% de mineralizao
Medidas de carbono orgnico total (antes e aps a foto-degradao)