Penetapan Angka Paling Mungkin

Metode : Angka Paling Mungkin

Dasar :
Pertumbuhan bakteri koliform yang ditandai dengan terbentuknya gas dalam tabung durham,
setelah contoh diinkubasi dalam pembenihan yang cocok pada suhu 35 37o C selama 24 48
jam dan selanjutnya dilihat pada table APM. Dalam perhitungan jumlah bakteri baik contoh
padat maupun cair dilakukan dengan membuat pengenceran 10
-1
sampai 10
-3
, lalu
diinokulasikan pada media TSB (Tryptic Soy Broth) yang kemudian diinkubasi pada
suhu 37
0
C selama 24 jam. Dari setiap pengenceran dihitung kekeruhan dan timbulnya
gas kemudian dilihat jumlah bakteri menggunakan tabel MPN/APM (3 tabung setiap
pengenceran).


Cara kerja :
a. Tabung reaksi dan sumbatnya disterilkan dengan alcohol 70%, lalu dipanaskan
sebentar dengan nyala api Bunsen.
b. Fisiologis sebanyak 9 ml, dimasukkan ke dalam tabung I, II, III, dan IV.
c. Dipipet contoh sebanyak 1 ml dan dimasukkan ke dalam tabung I, dihomogenkan,
dan diberi label pengenceran 10-1.

d. Dipipet contoh dari tabung I sebanyak 1 ml dan dimasukkan ke dalam tabung II,
dihomogenkan, dan diberi label pengenceran 10-2.
e. Dipipet contoh dari tabung II sebanyak 1 ml dan dimasukkan ke dalam tabung III,
dihomogenkan, dan diberi label pengenceran 10-3.
f. Tabung IV diberi label blanko.
g. Disiapkan 10 buah tabung reaksi bertutup plastic berisi 5 ml media Lactose Broth dan
tabung durham terbalik yang telah disterilkan. Diberi label pengenceran 10-1, 10-2, 10-3,
masing-masing simplo, duplo, triplo, dan sebuah tabung bertuliskan blanko.
h. Dipipet contoh dari masing-masing tabung pengenceran sebanyak 1 ml dan
dimasukkan kedalam 3 tabuah tabung berisi Tryptic Soy Broth yang telah disediakan
tadi, untuk perlakuan simplo, duplo, dan triplo. Untuk blanko cukup simplo saja. Lakukan
dari pengenceran terendah.
i. Semua tabung dimasukkan ke dalam piala gelas beralas Koran, ditutup koran, dan
diikat dengan tali kasur.
j. Diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam.